肠胃舒胶囊等6种中成药微生物汇总

三．菌种
枯草杆菌63501、金黄色葡萄球菌26003、 大肠杆菌44102、白色念珠菌98001、黑曲 霉98003、沙门氏菌50094。
四．方法
中国药典2000版与2005版微生物限度检查 法方法验证的比较实验。
五．方法验证：
（一）．菌液制备
1．取经37℃培养18-24小时，金黄色葡萄球菌、大肠杆 菌、枯草杆菌肉汤培养物1ml+9ml盐水10倍稀释至10-5 ~10-7为50~100个/ml，做活菌计数备用。 2．取经25 ℃培养18~24小时的白色念珠菌霉菌液体培 养物1ml+9 ml盐水10倍稀释至10-5 ~10-7为50~100个/ml， 做活菌计数备用。 3．取经25 ℃培养1周的黑曲霉斜面培养物，加3~5ml盐 水洗下霉菌孢子，吸取出菌液，用标准比浊管比浊，与 浊度相当后，取1 ml +9 ml盐水=10-1，逐管10倍稀释为 10- 4约50~100个/ ml，做活菌计数备用。
100.0
66.6
100.0
81.2
⊕
⊕
肠胃舒胶囊
100.0
21.7
46.6
100.0
100.0
⊕
⊕
骨络通酒
100.0
6.8
61.1
Hale Waihona Puke 100.091.6
⊕
⊕
消渴丸
93.4
1.1
66.6
100.0
87.5
⊕
⊕
表1结果可见
1.采用常规方法检验６个品种，人工污染5株代 表菌株，其中化瘤胶囊、肾宁丸，２个品种供试 品的回收率均高于70%，经方法学验证，无抗菌 活性，可采用常规方法检验。 2．有3个品种对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌有 不同程度的抗菌活性，肠胃舒胶囊、骨络通酒、 消渴丸3个品种供试品回收率为1~66.6%，有明 显的抗菌活性。此外防癌胶囊对大肠杆菌的回收 率为 35.4%低于70%，有抗菌作用，不可采用 常规方法，可采用适宜方法进行检验
4) 稀释剂对照组
四．结果见表1.2.3.
人工染菌回收率% 大 肠 埃 希 菌 控制菌 药物名称 大肠菌群 金黄色葡萄球 菌 枯草杆菌 白色念珠菌 黑曲霉 1g 0.1g
化瘤胶囊
96.0
100.0
100.0
100.0
100.0
⊕
⊕
肾宁丸
100.0
100.0
75.6
100.0
95.5
⊕
⊕
防癌胶囊
35.4
表2结果证明
采用培养基稀释法，人工污染金黄色葡萄 球菌、枯草杆菌可消除抗菌作用。 回收率达到70%以上的骨络通酒、消渴丸 可采用培养基稀释法（0.5ml/皿）检验。 其中肠胃舒胶囊对金黄色葡萄球菌回收率 低于70%，防癌胶囊对大肠埃希菌回收率 低于70%，故应降低稀释度（0.1、0.2ml/ 皿），进行检验。
五、结论
通过方法学验证实验证明，上述6个品种 中，肾宁丸、化瘤胶囊可采用常规方法检 验；骨络通酒、消渴丸采用稀释法 （0.5ml/皿）；防癌胶囊（0.2ml/皿）检 验；肠胃舒胶囊应采用薄膜过滤法检验， 对5株阳性代表菌株回收率均为70%以上。
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3．采用培养基稀释法
测定上述含抑菌成份的中成药微生物限度验 证试验，结果见表2.3。
人工染菌回收率%
药品名称
大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 枯草杆菌
骨络通酒
*
75.8
100.0
消渴丸
*
79.0
76.0
肠胃舒胶囊
*
21.2
防癌胶囊
65.9
*
86.4
其回收率显示，骨络通酒、消渴丸稀释 0.5ml/皿对金黄色葡萄球菌和枯草杆菌回 收率均超过70%，可用此法测定。防癌胶 囊对枯草杆菌回收率超过70%，而对大肠 杆菌回收率低于70%，稀释至0.2ml/皿对 大肠杆菌回收率超过70%，可采用稀释法 0.2ml/皿测定。胃肠舒胶囊对枯草杆菌采 用稀释法0.2ml/皿，仍不可除去其抗菌成 分，应采用薄膜过滤法进行测定。
1) 试验组
分别取不同品种的1：10供试液1 ml、 50~100个/ ml 试验菌株，同时加入平皿中， 立即倾注琼脂培养基，待凝固后，置规定 温度培养24~72小时观察结果。薄膜过滤 法以最后一次的冲洗液加入试验菌。
2) 活菌组
测定每一菌株加的试验菌数
3) 供试液对照
测定供试品本底菌数
（二）．供试液制备
称取各品种样品10 g，加0.1%胨水氯化钠 稀释液100 ml浓度均为1：10供试液，分 别人工污染上述5种试验菌株。
（三）．培养基稀释法
采用加0.5 ml、0.2 ml、0.1 ml /皿供试液， 再加15~20 ml琼脂培养基，待凝固后，置 规定温度培养24~48小时观察结果，细菌 计数，测定回收率。
（四）．离心集菌薄膜过滤法
分别取不同品种的1：10供试液10 ml，移 至灭菌的离心管中，以500转/分5分种后， 取上清液1 ml，加入薄膜过滤器中，采用 0.1%蛋白胨氯化钠冲洗液300ml/膜，再加 规定菌株冲洗后，取膜贴于琼脂平板，置 规定温度培养24~72小时观察结果
（五）．回收率测定：
培养基稀释法和薄膜过滤法回收 率结果 表3
表3结果证明
采用培养基稀释法0.2 ml /皿，人工污染 大肠埃希菌，防癌胶囊回收率达到70%以 上；人工污染金黄色葡萄球菌，肠胃舒胶 囊回收率达到70%以上，而对枯草杆菌回 收率62.0%，仍不可消除抗菌作用，采用 薄膜过滤法进行测定，回收率为100 %。
肠胃舒胶囊等6种中成药微生物限 度检查法验证实验总结
一．目的
香港仁奇诊所：受你诊所的委托，我所抗 生素室对肠胃舒胶囊等6种中成药微生物 限度检测，并对其进行方法学验证，归纳 总结如下：
二．样品
骨络通酒011362北京北卫药业有限公司、 化瘤胶囊302107北京北卫药业有限公司、 肾宁丸21006北京北卫药业有限公司、消 渴丸0201060北京北卫药业有限公司、肠 胃舒胶囊030610北京北卫药业有限公司、 防癌胶囊100210北京北卫药业有限公司．