茶叶中茶多酚氨基酸的测定
茶叶茶多酚类物质的测定
实验12 茶叶茶多酚类物质的测定茶多酚是茶叶中的重要品质组成，含量多少与品种、栽培条件、加工方法有关，必须掌握其测定方法。
酒石酸铁比色法，方法简便、快速，重现性好，容易掌握，已列为国家标准方法。
在一定的pH 条件下，酒石酸铁与茶多酚类物质形成蓝紫色或红紫色的络合物，在波长540nm 处比色，在适当的浓度范围内，茶多酚的量与呈色的深浅成正比，可用分光光度法定量。
本实验学习用酒石酸比色法测定茶多酚类物质的方法。
一、试材及用具1．试材 茶叶磨碎试样2．仪器 分光光度计、实验室常规玻璃仪器（三角瓶、漏斗、容量瓶、移液管、量筒等）3．试剂（1）酒石酸铁溶液：称取硫酸亚铁(FeSO 4·7H 2O)1g 与酒石酸钾钠（KNaC 4H 4O 6·4H 2O ）5g ，加水溶解稀释至1L 。
该溶液可稳定10 d 。
（2）pH7.5的磷酸缓冲液 先配制以下两种溶液：a ．1/15mol/L 的磷酸氢二钠溶液 称取11.876g 的Na 2HPO 4·2H 2O ，加水溶解，稀释至1L (若用无结晶水的需称取9.47g ，若用含12个结晶水的需称取23.872g ，其余操作相同)。
b ．1/15mol/L 磷酸二氢钾溶液 称取经110℃烘箱烘2h 后的KH 2PO 4 9.078g ，加水定容至1L 。
取a 液85mL 和b 液15mL 混合后，即为pH7.5的缓冲液。
二、方法步骤1．配制标准溶液称取茶多酚纯品0.2500g ，加水溶解定容至250mL ，混匀，即为每毫升含1mg 茶多酚的标准溶液。
2．绘制标准曲线分别称取标准溶液0.0mL 、0.5mL 、1.0mL 、1.5mL 、2.0mL 于一组25mL 棕色容量瓶中，各加水至5mL ，再加酒石酸铁溶液5mL ，加缓冲液至刻度，混匀后用10mm 比色皿，以试剂空白作参比，于波长540nm 处测定吸光度，绘制出标准曲线。
3．茶汤制备准确称取磨碎试样3g ，加450mL 沸水，在沸水浴中浸提45min ，每隔10min 摇瓶一次，过滤。
茶叶营养检测实验报告
一、实验目的1. 了解茶叶的营养成分及其含量。
2. 掌握茶叶中主要营养成分的检测方法。
3. 分析不同茶叶品种的营养差异。
二、实验原理茶叶中含有丰富的营养成分，如茶多酚、氨基酸、维生素、矿物质等。
本实验采用化学分析法和仪器分析法对茶叶中的主要营养成分进行检测。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 不同品种的茶叶（绿茶、红茶、乌龙茶等）- 无水乙醇、乙醚、盐酸等化学试剂- 标准溶液（茶多酚、氨基酸、维生素、矿物质等）2. 实验仪器：- 分析天平- 高速离心机- 紫外可见分光光度计- 水浴锅- 烧杯、试管、漏斗等玻璃仪器四、实验方法1. 茶多酚的检测：- 采用Folin-Ciocalteu法测定茶多酚含量。
- 称取一定量的茶叶样品，用无水乙醇提取茶多酚，过滤后测定吸光度。
2. 氨基酸的检测：- 采用氨基酸自动分析仪测定氨基酸含量。
- 称取一定量的茶叶样品，用乙醚提取氨基酸，过滤后测定氨基酸含量。
3. 维生素的检测：- 采用高效液相色谱法测定维生素含量。
- 称取一定量的茶叶样品，用无水乙醇提取维生素，过滤后测定吸光度。
4. 矿物质的检测：- 采用原子吸收光谱法测定矿物质含量。
- 称取一定量的茶叶样品，用盐酸溶解后测定吸光度。
五、实验步骤1. 茶多酚的检测：- 称取一定量的茶叶样品，用无水乙醇提取茶多酚。
- 将提取液过滤，测定吸光度。
- 根据标准曲线计算茶多酚含量。
2. 氨基酸的检测：- 称取一定量的茶叶样品，用乙醚提取氨基酸。
- 将提取液过滤，测定氨基酸含量。
- 根据标准曲线计算氨基酸含量。
3. 维生素的检测：- 称取一定量的茶叶样品，用无水乙醇提取维生素。
- 将提取液过滤，测定吸光度。
- 根据标准曲线计算维生素含量。
4. 矿物质的检测：- 称取一定量的茶叶样品，用盐酸溶解。
- 将溶液过滤，测定吸光度。
- 根据标准曲线计算矿物质含量。
六、实验结果与分析1. 茶多酚含量：绿茶茶多酚含量最高，其次是乌龙茶，红茶含量最低。
茶叶中茶多酚的检测方法
茶叶中茶多酚的检测方法，我们必须对茶多酚有一个比较详细的了解茶多酚因为其独特的分子结构，有很强的氧化性以及螯合性，所以能很好的清除人体内的自由基，起到抗氧化、抗衰老的效果；同样也因为其分子结构中的酚羟基，所以茶多酚有很好的螯合性能，能够与蛋白质，金属离子相结合。
据了解，茶多酚能与20多种离子产生络合，与其中10多种产生沉淀，再者，络合产物很多会产生明显的色泽变化。
所以茶多酚的检测方法有很多：1，蛋白质沉淀法：利用与蛋白质的络合沉淀特征检测茶多酚的含量；2，金属例子螯合法：就像GB/T8313-2002茶叶和GB/T21733-2008茶饮料中的检测方法一样，利用多酚羟基与铁离子的螯合变成蓝紫色的特性，在540nm出进行检测；3，氧化法：高锰酸钾与茶多酚的氧化滴定，但是这种方法误差较大，所以目前已经用的很少了；再就是GB/T8313-2008的福林酚法，利用福林酚能将茶多酚氧化然后自己被还原呈蓝色的特征。
目前使用的比较多的就是GB/T8313-2002的酒石酸亚铁法与GB/T8313-2008中的福林酚试剂法！酒石酸亚铁法作为茶多酚检测的经典方法在国内被应用了几十年，采用3.913的经验系数进行茶多酚的检测，但是在“食品添加剂茶多酚”的检测标准中则是以没食子酸作标准曲线，系数2.78。
同样的茶多酚检测，为什么会有不同的系数呢，很多人或许会疑惑？！但实际上3.913的的系数是以茶叶的乙酸乙酯分离物作为标定物质作标准曲线的，因为乙酸乙酯分离物中不仅仅包括了多酚类物质，还包括了一些其他内涵成分，所以检测结果会偏大，目前主要用于饮料行业中，而2.78的系数则主要用在植物提取物茶多酚领域，其主要区别在于采用的标定物不一致！当然酒石酸亚铁法也有自身的缺点：茶多酚是一种复合物，并非单一组分，其中包括了儿茶素，黄酮类，花青素等等，不同的组分与铁离子络合颜色并非完全一致，所以对于一般成分比较复杂的植物多酚并不适用！再来谈谈福林酚法：福林酚法主要利用福林酚的强氧化性，与多酚反应变蓝，在765nm处进行检测，当然了，福林酚还用于蛋白质的检测中，正是因为这点，所以福林酚并不能有效区分茶多酚，一些还原性氨基酸，植物中非多酚类酚性物质，抗坏血酸等等，这也是它的局限性。
茶叶中茶多酚含量的测定
本标准适用于茶叶中茶多酚含量的测定。
在茶叶水浸出物中与亚铁离子产生络合反应的酚性化合物,均称茶多酚。
1 原理茶叶中多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物。
用分光光度法测定其含量。
2 仪器和用具实验室常规仪器及下列各项:2.1 分析天平:感量0.0001g。
2.2 分光光度仪。
3 试剂和溶液所用试剂应为分析纯(AR),水为蒸馏水。
3.1 酒石酸亚铁溶液:称取1g (准确至0.0001g) 硫酸亚铁(GB 664-77)和5g (准确至0.0001g)酒石酸钾钠(GB 1288-81),用水溶解并定容至1L(溶液应避光,低温保存,有效期一个月)。
3.2 pH7.5磷酸盐缓冲液:3.2.1 1/15M磷酸氢钠: 称取23.377g磷酸氢二钠(GB 1263-77),加水溶解后定容至1L。
3.2.2 1/15M磷酸二氢钾: 称取9.078g磷酸二氢钾(GB 1274-77),加水溶解后定容至1L。
取上述1/15M的磷酸氢二钾溶液85ml和1/15m的磷酸二氢钾溶液15ml混合均匀。
4 操作方法4.1 取样按GB 8302-87《茶取样》的规定取样。
4.2 试样的制备按GB 8303-87《茶磨碎试样的制备及其干物质含量测定》的规定,制备试样。
4.3 测定步骤4.3.1 试液的制备按GB 8305-87《茶水浸出物测定》中3.4.1的规定,制备试液。
4.3.2 测定准确吸取上述(4.3.1)试液1mL,注入25mL的容量瓶中,加水4mL和酒石酸亚铁溶液(3.1)5mL,充分混合,再加pH7.5的缓冲液(3.2)至刻度,用10mm比色杯,在波长540nm处,以试剂空白溶液作参比,测定吸光度(A)。
5 结果计算5.1 计算方法和公式茶叶中茶多酚的含量,以干态质量百分率表示,按下式计算:A×1.957×2 L1茶多酚(％)＝──────×─────×100100 L2×M×m式中: L1——试液的总量,mL;L2——测定时的用液量,mL;M——试样的质量,g;m——试样干物质含量百分率,％；A——试样的吸光度;1.957——用10mm比色杯,当吸光度等于0.50时,每毫升茶汤中含茶多酚相当于1.957mg。
茶叶茶多酚含量的测定
茶叶茶多酚含量的测定茶叶茶多酚含量的测定方法（以农贸一班2组数据为例）一、以没食子酸含量做标准曲线进行计算：上图中的横坐标为每25ml没食子酸标准液中没食子酸的含量，纵坐标为吸光度值。
样品待测液含量对应关系：25ml待测液中茶多酚含量=10ml1/10=0.2g茶叶中茶多酚总含量的1/100。
由对应关系进行公式推导：茶叶样品中茶多酚含量（%）=浸提液中茶多酚的含量/（样品质量*干物质含量）浸提液中茶多酚的含量=1ml中茶多酚含量*10ml=10ml稀释液中茶多酚的含量*10*10ml=25ml待测液中茶多酚的含量*10*10ml茶多酚含量（%）=A*V*d/(L*m*m1*(10^6)),稀释因子d应该为10。
同时由于：A=K*X+b,所以此公式应该调整为：茶多酚含量（%）=[(A-b)*V*d/(L*m*m1*(10^6))]*100A----待测液平均吸光度b----标准曲线公式中的常量，本实验为-0.0134V----浸提液体积本实验为10mld----稀释因子，在以没食子酸含量为横坐标的计算方法中，d=10L----标准曲线斜率m----样品质量，本实验为0.2m1----样品干物质含量，本实验为80%详细过程如下：A1=0.885 A2=0.822 A3=0.784平均光度值A=（A1+A2+A3）/3=0.830将A值带入公式:茶多酚含量（%）= [( A-b)*V*d/(L*m*m1*(10^6))]*100,可以求得茶叶样品中茶多酚的含量=13.5%二、以没食子酸浓度作标准曲线上图中的横坐标为没食子酸标准溶液的浓度，纵坐标吸光度A此时的计算公式推导过程为：茶叶样品中茶多酚含量（%）=0.2g茶叶中茶多酚含量/（0.2*干物质含量）0.2g茶叶中茶多酚的含量为=浸提液浓度*10浸提液浓度=10ml稀释液浓度*10010ml稀释液浓度=25ml待测液浓度*25ml/10ml25ml待测液浓度可以由标准曲线公式：A=L*X+b测得。
茶叶中茶多酚的检测
茶叶中茶多酚的检测一、原理：茶叶磨碎样中的茶多酚用70%的甲醇在70℃的水浴中提取，福林酚试剂氧化茶多酚中-OH基团并显蓝色，最大吸光度波长λ为765nm，用没食子酸做矫正标准定量茶多酚。
二、仪器分析天平：感量0.001g；水浴：70℃±1℃；离心机：转速3500r/min分光光度计三、试剂本标准所用水均为重蒸馏水，除特殊规定外，所用试剂为分析纯。
1、甲醇2、碳酸钠3、甲醇水溶液（体积比）：7+34、福林酚试剂：试剂甲（①4%碳酸钠溶液；②0.2NNAOH溶液；③1%硫酸铜溶液；④2%酒石酸钾钠；（1)将试剂①和②等体积混合；（2)将试剂③和④等体积混合；（3）将（1）和（2）混合溶液按50:1比例混合。
）试剂乙（取10ml1%的乙液于100ml的容量瓶，加水定容）。
（4）将试剂甲和试剂乙按1:1的比例现配成福林酚。
5、将（4）中的福林酚20ml转移到200ml容量瓶中，用水定容并摇匀。
6、7.5%碳酸钠（质量浓度）：称取37.50g±0.01g碳酸钠，加适量水溶解，转移至500ml容量瓶中，定容至刻度，摇匀。
7、没食子酸标准储备溶液（1000μg/ml)：称取0.110g±0.001g没食子酸（GA，相对分子质量188.14），于100ml容量瓶中溶解并定容至刻度，摇匀（现配）。
8、没食子酸工作液：用转移管分别移取1.0，2.0，3.0，4.0,5.0ml的没食子酸标准储备液溶液于100ml容量瓶中，分别用水定容至刻度，摇匀，浓度分别为10,20,30,40,50μg/ml。
四、操作方法1、供试液的制备母液的制备：称取0.2g（精确到0.0001g，本次实验0.2331g）均匀磨碎的式样于10ml的离心管中，加入在70℃中预热过的70%的甲醇溶液ml，用玻璃棒充分均匀湿润，立即移入70℃水浴中。
浸提10min（隔5min搅拌一次），浸提后冷却至室温，转入离心机在3500r/min转速下离心10min，将上清液转移至10ml容量瓶。
茶叶中主要成分含量的测定
茶叶中主要成分含量的测定茶叶是世界上最受欢迎的饮品之一，不仅因为其独特的风味和香气，还因为茶叶中含有许多有益健康的化学成分。
因此，准确测定茶叶中主要成分的含量对于评估茶叶的质量以及研究茶叶的药理学效应至关重要。
本文将介绍茶叶中主要成分的测定方法，包括咖啡因、茶多酚和氨基酸的测定。
一、咖啡因的测定咖啡因是茶叶中最重要的生物碱成分之一，具有兴奋神经系统和增强注意力的作用。
为了准确测定茶叶中咖啡因的含量，可以使用高效液相色谱法（HPLC）。
首先，将茶叶样品经过粉碎和提取处理，得到茶叶提取液。
然后，将提取液进行离心，以得到无固体颗粒的液体样品。
最后，将样品注入HPLC仪器，使用适当的色谱柱和溶剂体系进行分离和定量分析。
二、茶多酚的测定茶多酚是茶叶中最丰富的化学成分之一，包括儿茶素、黄酮类化合物和花青素等。
这些茶多酚具有抗氧化、抗炎和抗菌等多种生物活性。
为了测定茶多酚的含量，一种常用的方法是使用分光光度法。
该方法利用茶多酚与特定试剂（如菲罗啉）发生反应产生显色化合物，利用化合物的吸光度来定量茶多酚的含量。
此外，也可以使用高效液相色谱法（HPLC）或质谱法（MS）来准确测定茶多酚的各个组分。
三、氨基酸的测定氨基酸是茶叶中的重要营养成分，具有增强免疫力和促进新陈代谢的作用。
为了测定茶叶中氨基酸的含量，可以使用高效液相色谱法（HPLC）。
首先，将茶叶样品经过酸水解处理，将氨基酸转化为对应的酸性化合物。
然后，将样品进行离心和过滤处理，以得到无固体颗粒的液体样品。
最后，将样品注入HPLC仪器，使用适当的色谱柱和溶剂体系进行分离和定量分析。
结论准确测定茶叶中主要成分的含量对于评估茶叶的品质和研究茶叶的功效非常重要。
咖啡因、茶多酚和氨基酸是茶叶中的主要成分，其含量可以通过使用高效液相色谱法（HPLC）和其他适当的分析方法进行测定。
这些方法可以提供准确、可靠的结果，帮助人们更好地了解茶叶的化学组成和营养价值，促进茶叶产业的发展与创新。
茶叶中主要成分含量的测定课件 (一)
1
概述
铁道车辆二系悬挂弹性元件的刚度特性是决定车辆 运行品质的重要因素之一，在客车与高速列车上体现得
尤为明显。 二系悬挂系统发展之初， 大都采用钢弹簧作为 二系悬挂系统的组成部分， 在随后的发展过程中， 采用了 减振器等方式， 以期改善车辆运行过程中的平稳 摇动台、 性与稳定性，但决定平稳性的静扰度在钢弹簧结构上却
采用第二种方法，选用三维 8 节点缩减积分实体单元 C3D8R 来模拟橡胶囊的橡胶部分，三维 8 节点实体单元 C3D8 来模拟钢板部分。 橡胶堆上端面上的节点与下摆盖 板节点耦合。
图 3 流体单元 F3D4
图 4 腔体参考节点
3.5 模型的建立 模 应用有限元软件 ABAQUS 对空气弹簧进行模拟， 型采用三维轴对称结构，其中上下盖板采用刚体单元 R3D3、 R3D4； 橡胶囊部分采用壳单元 S4R， 其内部帘线层 加压空气采用静水流体单元 F3D3、 采用 rebar 单元模拟； F3D4； 橡胶堆部分采用实体单元 C3D8、 C3D8R。 模型建立
陈鼎 等·基于有限元的空气弹簧刚度分析 · 2010 年第 6 期
2.2 橡胶的非线性应力分析 述为：
橡胶材料属于各向同性的超弹性材料，其应力可表
t =
非线性橡胶的有限元分析法
∂W ∂E
（8 ）
式中： tij—Kirchhoff 应力张量； Eij—Green 应变张量； W—
与其他材料相比， 橡胶材料具有大位移、 大变形的特
Abstract： Air spring is the main damping components of the modern rail transit vehicles， which can effectively improve the rail
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2）茶多酚还具有抑制痢疾、伤寒、霍乱、金黄色 葡萄球菌等有害菌的作用。
3）具有较强的抗放射性作用，以及在抗衰老，抑 制瘤细胞，预防心脑血管疾病等方面都显示出很 好的效应。
是一种有开发前景的天然抗氧化剂。
❖ ❖测定方法：
（2）测定：吸取样品溶液1mL于25mL容量瓶中，加蒸馏水4mL， 加酒石酸亚铁溶液5mL，摇匀，再加入PH7.5磷酸缓冲液稀释至 刻度。以蒸馏水代替样品溶液加入同样的试剂作空白。
(3)选择540nm波长和1cm的比色杯测定吸光度❖ 计算：源自A 3.913 T 100%
1000 V m
式中：ω—茶多酚的含量，%
A—样品溶液的吸光度值 T—样品溶液的总体积，mL V—测定用样品溶液的量，mL m—样品质量，g 7.826—用0.5cm比色杯，当吸光度为1.0时，试液中茶多酚的浓度为7.826mg/mL
3.913—用1cm比色杯，当吸光度为1.0时，试液中茶多酚的浓度为 3.913mg/mL
❖ 说明及注意事项：
❖ 样品测定
❖ 准确吸取试液1ml于25ml容量瓶中，加入0.5ml PH8.0缓冲 溶液和0.5ml茚三酮溶液，在沸水浴中加热15min，冷却后 定容至25ml。放置10min后，于570nm处，以空白试剂做 参比溶液，测吸光度。
计算
C V1 X 1000 V 2 100%
m X—茶叶中咖啡碱的质量分数。% c—咖啡碱的浓度，mg V1—样品溶液的总体积，mL V2—测定用样品溶液的量，mL m—样品质量，g
（3）含有碳酸气的样液，如农夫汽茶，量取充分混匀的样液 100mL于250mL的烧杯中，称取其总量，于电炉上加热至沸，在 微沸状态下加热10min，以将二氧化碳排除，放冷，用水补足原 来的质量，摇匀，备用。
紫外-可见分光光度计的基本结构
❖ 紫外-可见分光光度计的基本结构是由五个部分组成：即 光源、单色器、吸收池（样品室）、检测器和信号指示系 统。
❖ （2）氨基酸标准曲线的绘制
❖ 分别准确吸取0.0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL 100mg/L氨基酸标准溶液于25mL容量瓶中，各加 蒸馏水4mL，茚三酮溶液0.5ml和PH8.0缓冲溶液 2ml，在沸水浴中加热15min，冷却后加水定容至 25ml。放置10min，于570nm处，以空白试剂做 参比溶液，测吸光度。 以氨基酸浓度为横坐标， 吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
茶叶中游离氨基酸总量的测定
❖ 茶叶水浸出物中具有α-氨基的有机酸且呈游离状态存在者， 均称为茶叶游离氨基酸。
❖ 原理： ❖ 氨基酸在PH 8.0时与茚三酮共热，产生紫色络合物，在
570nm处测定其含量。
实验步骤
❖ （l）样品溶液的制备方法：准确称取茶叶磨碎样品3g于 500mL烧杯中，加入沸水350mL，在沸水浴中浸提45min， 每隔10min摇动1次，趁热抽滤，残渣用少量热蒸馏水洗涤 2-3次，滤液倒入500mL容量瓶中，冷却至室温，用蒸馏水 定容至刻度，摇匀，备用。
1、磷酸盐缓冲液在常温下容易生长霉菌，放冰箱中保存或临用 时现配。
2、样品溶液制备中的注意事项：
（1）较透明的样液，如果味茶饮料，将样液充分摇匀后，直接 取样测定。
（2）较浑浊的样液，如果汁茶饮料、奶茶饮料等，称取充分混 匀的样液25mL于50mL容量瓶中，加95%的乙醇15mL充分混匀， 放置15min，用水定容至刻度，过滤。
茶叶中茶多酚的测定
茶多酚
茶叶中多酚类物质占茶嫩梢干重的20％～35％，由约30 种以上的酚类物质所组成，通称茶多酚。
茶多酚的性质： 能溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯，微溶于油脂。 对热、酸较稳定，2%的溶液加热至120 ℃并保持30min， 无明显变化。在碱性条件下易氧化变质。
茶多酚的功效：
高锰酸钾直接滴定法 酒石酸铁比色法
酒石酸铁比色法原理：
酒石酸亚铁能与茶多酚生成蓝紫色络合物，络合物溶 液颜色的深浅与茶多酚的含量成正比。因此可以用比色 方法测定。
❖ 仪器：分光光度计 水浴锅，锥形瓶，容量瓶（100mL,25ml)
❖ 试剂： （1）酒石酸亚铁溶液：称取 FeSO4·7H2O 1.000g，含 4个结晶水的
酒石酸钾钠5.000g，加蒸馏水溶解后，用蒸馏水稀释至1000mL （2）PH7.5的磷酸缓冲液
茶多酚检验 步骤：
（l）样品溶液的制备方法：准确称取茶叶磨碎样品3g于500mL烧 杯中，加入沸水350mL，在沸水浴中浸提45min，每隔10min摇动 1次，趁热抽滤，残渣用少量热蒸馏水洗涤2-3次，滤液倒入 500mL容量瓶中，冷却至室温，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，备 用。