基因工程与基因体外表达练习题及其答案
高中生物《基因工程》练习题(含答案解析)
高中生物《基因工程》练习题(含答案解析)XXX《基因工程》练题题号得分一一、单选题（本大题共20小题，共20.0分）1.如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为（）二总分A.解旋酶、限制酶、DNA连接酶C.限制酶、DNA连接酶、解旋酶B.限制酶、解旋酶、DNA连接酶D.DNA连接酶、限制酶、解旋酶2.下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（）A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C.选用细菌为重组质粒受体细胞是因为质粒易进入细菌细胞且繁殖快D.只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达3.如图为基因表达载体的模式图。
以下有关基因工程的说法错误的是（）A.基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建B.任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别C.图中启动子和终止子分歧与起始暗码子和终止暗码子D.抗生素抗性基因的作用是作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导入了载体4.一些细菌能借助限制性核酸内切酶抵御外来入侵者，而其自身的基因组DNA经预先修饰能躲避限定酶的降解。
以下在动物体内发生的过程当中，与上述细菌行为相似的是（）A.巨噬细胞内溶酶体杀灭病原体B.T细胞受抗原刺激分泌淋巴因子C.组织液中抗体与抗原的特异性结合D.疫苗诱导机体发生对病原体的免疫5.某目的基因两侧的DNA序列所含的限制性核酸内切酶位点如图所示，最好应选用下列哪种质粒作为载体（）XXX.C.D.6.下图是研究人员使用供体生物DNA中无限增殖调控基因制备单克隆抗体的思路流程。
以下相关叙述精确的是（）A.酶a、酶b作用位点分别为氢键和磷酸二酯键B.Ⅰ是经免疫的记忆细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞C.筛选出既能无限增殖又能产生专一抗体的Ⅱ必须通过分子检测D.上述制备单克隆抗体的方法涉及转基因技术和动物细胞核移植技术7.下列关于基因工程技术的说法，正确的是（）A.切割质粒的限制酶均只能特异性地识别3-6个核苷酸序列B.PCR反应中两种引物的碱基间应互补以保证与模板链的正常结合C.载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因D.目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制8.在其他条件具备的情况下，在试管中进入物质X和物质Z，可得到相应产物Y．下列叙述正确的是（）A.若X是DNA，Y是RNA，则Z是逆转录酶B.若X是DNA，Y是mRNA，则Z是脱氧核苷酸C.若X是RNA，Y是DNA，则Z是限制性内切酶D.若X是mRNA，Y是核糖体上合成的大分子，则Z是氨基酸9.下图透露表现的是三种黏性末端，以下说法精确的是A.甲、乙、丙黏性末端是由两种限制酶作用产生的B.若甲中的G处发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点C.乙中的酶切位点在A与G之间D.目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等几类原核生物10.如图是利用基因工程技术生产可使用疫苗的部分过程，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。
基因工程试题及答案
《基因工程》一、选择题（每小题1.5分，共15分）1．基因工程的创始人是( )。
A A. KornbergB W. GilbertC P. BergD S. Cohen2．关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有( )不太恰当。
A 由作用于同一DNA序列的两种酶构成B 这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶C 这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰D 不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统3．在DNA的3’-5’链上，基因的起始密码子是( )A ATG（或GTG）B AGTC TAGD TGA4．II限制性内切核酸酶可以特异性地识别( )。
A 双链DNA的特定碱基对B 双链DNA的特定碱基序列C 特定的三联密码D 以上都正确5．末端转移酶是合成酶类，具有( )活性。
A 3’5’DNA聚合酶B 5’3’DNA聚合酶C 5’3’DNA内切酶D 5’3’DNA外切酶6．下面关于松弛型质粒(relaxed plasmid)性质的描述中，( )是不正确的。
A 质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，因而有较多的拷贝数。
B 可以在氯霉素作用下进行扩增。
C 通常带有抗药性标记。
D 同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。
7．关于cDNA的最正确的说法是( )。
A 同mRNA互补的单链DNAB 同mRNA互补的双链DNAC 以mRNA为模板合成的双链DNAD 以上都正确8．关于T4 DNA Ligase，下列说法中哪一项不正确? ( )A 是最常用的DNA连接酶。
B 不但能连接粘性末端，还能连接齐平末端。
C 不但能连接粘性末端。
D 最适温度37 ℃。
9．下列关于建立cDNA文库的叙述中，( )是错误的?A 从特定组织或细胞中提取DNA或RNAB 用反转录酶合成mRNA的对应单链DNAC 以新合成的单链DNA为模板合成双链DNAD 新合成的双链DNA克隆到载体上，并导入受体细胞10．用下列方法进行重组体的筛选，只有( )说明外源基因进行了表达。
基因工程试题及答案解析
基因工程试题及答案解析一、选择题1. 基因工程中常用的限制酶是：A. 蛋白酶B. DNA聚合酶C. 核糖核酸酶D. 限制性核酸内切酶答案：D2. 基因工程中，用于将目的基因导入植物细胞的方法是：A. 电穿孔法B. 显微注射法C. 农杆菌转化法D. 脂质体介导法答案：C3. 下列哪项不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的获取B. 基因表达载体的构建C. 目的基因的扩增D. 目的基因的检测与鉴定答案：C二、填空题1. 基因工程中，常用的运载体有____、____和____。
答案：质粒、噬菌体、动植物病毒2. 基因工程中，常用的筛选标记基因有____、____和____。
答案：抗性基因、荧光蛋白基因、酶基因三、简答题1. 简述基因工程的应用领域。
答案：基因工程的应用领域包括农业、医学、工业、环境保护等。
在农业中，基因工程可以用于培育抗病、抗虫、抗旱等性状的作物；在医学领域，基因工程可以用于生产重组蛋白药物、基因治疗等；在工业上，基因工程可以用于生产酶、疫苗等；在环境保护方面，基因工程可以用于生物修复、污染物降解等。
2. 基因工程中，如何确保目的基因在宿主细胞中正确表达？答案：确保目的基因在宿主细胞中正确表达需要考虑以下几个方面：首先，目的基因需要有合适的启动子和终止子，以确保其在宿主细胞中得到正确转录和终止；其次，需要考虑目的基因的密码子偏好性，以确保其在宿主细胞中能被高效翻译；再次，需要考虑目的基因的稳定性，避免其在宿主细胞中被降解；最后，还需要考虑目的基因产物的后翻译修饰和定位。
四、论述题1. 论述基因工程在医学领域的应用及其可能带来的伦理问题。
答案：基因工程在医学领域的应用主要包括生产重组蛋白药物、基因治疗、疾病诊断和基因疫苗等。
重组蛋白药物可以用于治疗糖尿病、侏儒症等疾病；基因治疗可以用于治疗遗传性疾病；疾病诊断可以通过基因检测来实现；基因疫苗可以用于预防某些遗传性疾病。
然而，基因工程的应用也带来了伦理问题，如基因隐私权、基因歧视、基因治疗的安全性和有效性等。
《基因工程》习题及参考答案
《基因工程》习题及参考答案一、习题：1. What are biotechnology and genetic engineering?2. What is a gene?3. What are genetically engineered medicines?4. What do genome research and human genetics deal with?5. What potentials are held out by genetic diagnosis?6. What options are given by gene therapy?7. What is an embryo - and what is a fetus?8 What is a genetic fingerprint?9 What does the term "therapeutic cloning" mean?10 What are stem cells?11 What is a transgenic organism?12 What does xenotransplantation mean?13 How will genetic engineering be used in agriculture?14 How are genetically modified organisms assessed?15 What does the German Embryo Protection Act regulate?16. What is a genome?17. Is there a risk of bioterrorism?18. How does genetic engineering affect the environment?19. Are genetically engineered crops good for farmers?20.What is the difference between restriction digestion and restriction mapping?21.Can you combine two different restriction enzymes in the same reaction tubes todigest the DNA molecules?22.Why should we need to generate restriction mapping data?23.How many restriction enzymes available now on the market?24.Why do you consider mutagenesis in vitro as one of the most critical techniquesfor us to understand in genetic engineering class?25.How do we choose the methods for DNA modification?26.How do we choose a gene expression system?27.How can we express eukaryotic gene in E.coli?28.What should we consider before we start the recombinant protein expressionexperiment?29.What is the advantage of yeast expression system?30.What is the advantage of insect expression system?31.Why there are so many different types of vectors available for cloning?32.What is the difference between cloning vector and expression vector?33.What is a genetic fingerprint?34. 基因具体分成多少种类？35. 什么叫印记基因？36．什么叫遗传漂变？37．人类基因组图谱和初步分析结果是在哪一年公布的？38．人类基因组共有多少基因?39. 克隆羊成功的技术关键是什么？40. 有人计划将两个不同物种的动植物体细胞进行融合，然后将融合体的核移植到其中一种生物的未受精卵细胞中，进行体细胞克隆。
高中基因工程试题及答案
高中基因工程试题及答案一、选择题1. 基因工程是指：A. 基因的自然选择B. 基因的人工选择C. 基因的人工重组D. 基因的自然重组答案：C2. 基因工程中常用的载体是：A. 质粒B. 病毒C. 染色体D. 线粒体答案：A3. 基因枪法属于哪种基因转移技术？A. 化学法B. 物理法C. 生物法D. 机械法答案：B4. 以下哪个不是基因工程的步骤？A. 目的基因的获取B. 目的基因的克隆C. 目的基因的表达D. 目的基因的自然选择答案：D5. 基因工程在医学领域的应用不包括：A. 基因治疗B. 基因检测C. 基因编辑D. 基因克隆答案：D二、填空题6. 基因工程的核心技术是________。
答案：重组DNA技术7. 基因工程中常用的受体细胞有________和________。
答案：大肠杆菌、酵母菌8. 基因工程在农业上的应用包括________和________。
答案：转基因作物、基因改良9. 基因工程在环境保护中的应用包括________和________。
答案：生物修复、污染物降解10. 基因工程在工业生产中的应用包括________和________。
答案：生物催化剂、生物制药三、简答题11. 简述基因工程的基本原理。
答案：基因工程的基本原理是利用分子生物学技术，将目的基因从一种生物体中提取出来，然后通过重组DNA技术将其插入到另一种生物体的基因组中，使其在新的宿主细胞中表达，从而获得具有特定性状的生物体或生产特定的生物产品。
12. 基因工程在医学领域有哪些应用？答案：基因工程在医学领域的应用包括基因治疗，通过将正常基因导入患者体内以治疗遗传性疾病；基因检测，用于疾病诊断和风险评估；基因编辑，通过修改基因序列来治疗疾病；以及生产生物药物，如胰岛素、干扰素等。
四、论述题13. 论述基因工程的伦理问题及其解决途径。
答案：基因工程的伦理问题主要包括对人类基因组的修改可能带来的未知风险、基因歧视、生物多样性的减少等。
高中生物基因工程练习题(含解析)
高中生物基因工程练习题学校:___________姓名：___________班级：___________一、单选题1．蛋白质工程中目前已成功的是( )A．对胰岛素进行改造，使其成为速效型药品B．蛋白质工程应用于微电子方面C．室温下可保存半年的干扰素D．耐储存的番茄2．下列有关限制性酶的描述，错误的是（）A．限制酶主要从原核生物中提取B．限制酶具有热稳定性C．限制酶和DNA连接酶作用的化学键相同D．一种限制酶一般只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列3．蛋白质工程的最终目的是（）A．分析蛋白质的三维结构B．研究蛋白质的氨基酸组成C．获取编码蛋白质的基因序列信息D．改造现有蛋白质或制造新的蛋白质，满足人类的需求4．下列基因工程的基本操作程序中，属于基因工程核心步骤的是（）A．基因表达载体的构建B．目的基因的检测与鉴定C．将目的基因导入受体细胞D．目的基因的筛选与获取5．葡萄糖异构酶在工业上应用广泛，科学家将其第 138 位甘氨酸替换为脯氨酸后，其最适温度提高了 10℃左右。
相关叙述正确的是（）A．蛋白质功能是由氨基酸的种类和数量决定B．改造蛋白质结构可通过改造基因结构实现C．蛋白质工程不可以定向改变蛋白质的结构D．酶最适温度提高是因为脯氨酸比甘氨酸更耐热6．基因和表达载体相连时既可以正向连接也可以反向连接。
下图甲、乙分别表示某质粒、含目的基因和酶切位点的DNA片段，构建基因表达载体时应用酶B和酶C进行切割，不应用酶A切割运载体和DNA片段，其原因不包括（）A．防止目的基因和运载体发生反向连接B．保证构建的重组质粒中含有标记基因C．防止目的基因或运载体重新自身环化D．保证构建的重组质粒中含有启动子7．关于基因工程和下图所示黏性末端的叙述，正确的是（）A．①与③是由相同的限制酶切割产生的B．DNA连接酶可催化①与③的连接C．经酶切形成④需要脱去2分子水D．基因工程中常用的工具酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶和运载体8．DNA琼脂糖凝胶电泳的分子筛效应是指作为支持介质的琼脂糖，具有网络结构，使大分子物质在通过时受到较大阻力，借此分离不同大小的DNA片段。
基因工程测试题(附解析)
基因工程测试题（附解析）一、基础题点练1．(2019·徐州模拟)已知限制性内切酶Xma Ⅰ和Sma Ⅰ的识别序列分别为C CCGGG 和CCC GGG。
有关这两种酶及应用的叙述，错误的是()A．这两种酶作用的底物都是双链DNAB．DNA 中出现这两种酶识别序列的几率不同C．Xma Ⅰ切割DNA 形成的黏性末端是—GGCCD．使用这两种酶时需注意控制反应温度、时间等解析：选B 限制酶作用的底物是双链DNA 分子；这两种限制酶作用的核苷酸序列相同，所以这两种识别序列在DNA 中出现的的几率相同；根据碱基互补配对原则，CCCGGG 的互补链是GGGCCC，并根据Xma Ⅰ的切割位点可知，切割后的黏性末端是—CCGG；温度能影响酶的活性，所以使用酶时需要注意控制反应温度和时间等。
2．如图表示的是三种黏性末端，下列说法正确的是( ) ↓↓A．图中所示黏性末端是由同种限制酶切割形成B．若图甲中的G 碱基处发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点C．图中所示黏性末端是限制酶断开氢键形成D．目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等几类原核生物GAATTC 解析：选B 产生甲黏性末端的限制酶的识别序列为CTTAAG =====，产生乙黏性末端的限制酶CAATTG CTTAAG 的识别序列为GTTAAC =====，产生丙黏性末端的限制酶的识别序列为GAATTC =====，可见甲、乙、丙黏性末端是由3种限制酶作用产生的；限制酶具有专一性，能够识别双链DNA 分子的某种特定核苷酸序列，如果甲中的G 发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点；图中所示黏性末端是限制酶断开磷酸二酯键形成的；质粒是环状DNA 分子，噬菌体和动植物病毒都没有细胞结构，它们都不属于原核生物。
3．下列关于蛋白质工程的叙述，错误的是()A．蛋白质工程的基础是基因工程B．蛋白质工程遵循的原理包括中心法则C．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构D．蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子解析：选C 蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成对现有蛋白质进行改造，或合成新的蛋白质，故蛋白质工程的基础是基因工程；蛋白质工程遵循的原理包括中心法则；蛋白质工程是通过改造基因来实现对蛋白质分子的改造的；蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子。
大学基因工程题库及答案
大学基因工程题库及答案基因工程是一种利用分子生物学技术对生物体的基因进行操作和改造的科学。
以下是一些大学基因工程的题目和答案示例：1. 题目：简述基因工程的基本步骤。
答案：基因工程的基本步骤包括：(1) 目的基因的获取；(2) 载体的选择与构建；(3) 目的基因与载体的连接；(4) 转化受体细胞；(5) 筛选含有重组DNA的细胞；(6) 目的基因的表达与检测。
2. 题目：什么是基因克隆？请说明其在基因工程中的重要性。
答案：基因克隆是指将特定的DNA片段插入到载体中，然后在宿主细胞内进行复制和表达的过程。
基因克隆在基因工程中的重要性体现在：(1) 允许科学家研究和分析特定基因的功能；(2) 可用于生产药物和疫苗等生物制品；(3) 有助于理解基因表达的调控机制。
3. 题目：PCR技术在基因工程中的应用是什么？答案：聚合酶链式反应（PCR）技术在基因工程中的应用主要包括：(1) 快速扩增目的基因，为基因克隆和表达提供足够的DNA模板；(2) 用于基因突变的检测和分析；(3) 制备单链DNA模板，用于DNA测序；(4) 用于基因表达分析，如定量PCR。
4. 题目：转基因生物的安全性问题主要包括哪些方面？答案：转基因生物的安全性问题主要包括：(1) 环境安全性，即转基因生物可能对生态系统产生的影响；(2) 食品安全性，即转基因食品对人体健康的潜在影响；(3) 生物安全性，即转基因生物可能对非目标生物产生的影响。
5. 题目：基因编辑技术CRISPR-Cas9的原理是什么？答案：CRISPR-Cas9基因编辑技术的原理是利用一种来自细菌的RNA导向的核酸酶系统。
该系统由两部分组成：(1) 一段小RNA （sgRNA），它能够特异性地识别目标DNA序列；(2) Cas9蛋白，一种核酸酶，能够在sgRNA的引导下精确地切割目标DNA。
通过这种机制，科学家可以在特定的基因位点进行切割，实现基因的敲除、插入或替换。
6. 题目：基因治疗的基本原理是什么？答案：基因治疗的基本原理是将正常或修正后的基因导入到患者的细胞中，以补偿或修复缺陷基因的功能。
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十三章：基因工程与基因体外表达练习题及其答案一、填空题1．基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。
2．基因工程的两个基本特点是：(1)____________，(2)___________。
3．基因克隆中三个基本要点是：___________；_________和__________。
4．通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的___________。
5．限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的，第一个大写字母取自_______，第二、三两个字母取自_________，第四个字母则用___________表示。
6．部分酶切可采取的措施有：(1)____________(2)___________ (3)___________等。
7．第一个分离的限制性内切核酸酶是___________；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_____________。
8．限制性内切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的来源不同，但识别的序列都是_________，它们属于_____________。
9．DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_____________切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性：(1)____________；(2)________________的活性。
10．为了防止DNA的自身环化，可用_____________去双链DNA__________________。
11．EGTA是____________离子螯合剂。
12．测序酶是修饰了的T7 DNA聚合酶，它只有_____________酶的活性，而没有_______酶的活性。
13．切口移位(nick translation)法标记DNA的基本原理在于利用_________的_______和______的作用。
14．欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式，通常可采用_________或_______________。
15．反转录酶除了催化DNA的合成外，还具有____________的作用，可以将DNA- RNA杂种双链中的___________水解掉。
16．基因工程中有3种主要类型的载体：_______________、_____________、______________。
17．就克隆一个基因(DNA片段)来说，最简单的质粒载体也必需包括三个部分：_______________、_____________、______________。
另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。
18．一个带有质粒的细菌在有EB的培养液中培养一段时间后，一部分细胞中已测不出质粒，这种现象叫。
19．pBR322是一种改造型的质粒，它的复制子来源于，它的四环素抗性基因来自于，它的氨苄青霉素抗性基因来自于。
20．Y AC的最大容载能力是，BAC载体的最大容载能力是。
21．pSCl01是一种复制的质粒。
22．pUCl8质粒是目前使用较为广泛的载体。
pUC系列的载体是通过和两种质粒改造而来。
它的复制子来自，Amp 抗性基因则是来自。
23．噬菌体之所以被选为基因工程载体，主要有两方面的原因：一是；二是。
24．野生型的M13不适合用作基因工程载体，主要原因是和。
25．黏粒(cosmid)是质粒—噬菌体杂合载体，它的复制子来自、COS位点序列来自，最大的克隆片段达到kb。
26．野生型的 噬菌体DNA不宜作为基因工程载体，原因是：(1)(2) (3) 。
27．噬菌粒是由质粒和噬菌体DNA共同构成的，其中来自质粒的主要结构是，而来自噬菌体的主要结构是。
28． 噬菌体载体由于受到包装的限制，插入外源DNA片段后，总的长度应在噬菌体基因组的的范围内。
29．在分离DNA时要使用金属离子螯合剂，如EDTA和柠檬酸钠等，其目的是。
30．用乙醇沉淀DNA时，通常要在DNA溶液中加人单价的阳离子，如NaCl和NaAc，其目的是。
31．引物在基因工程中至少有4个方面的用途：(1) (2)(3) (4) 。
32．Clark发现用Taq DNA聚合酶得到的PCR反应产物不是平末端，而是有一个突出碱基末端的双链DNA分子。
根据这一发现设计了克隆PCR产物的。
33．在cDNA的合成中要用到S1核酸酶，其作用是切除在。
34．乙醇沉淀DNA的原理是。
35．假定克隆一个编码某种蛋白质的基因，必须考虑其表达的三个基本条件：(1)________________________________ (2)_____________________________(3)_________________________________。
36．受体细胞的感受态是___________________________________。
37．DNA重组连接的方法大致分为四种：(1)_____________(2)_______________(3)___________________________(4)___________________________。
38．将含有外源基因组一个酶切片段的质粒称之为含有一个___________，各种此类质粒的集合体称之为构建了一个_________________。
39．将含有一个mRNA的DNA拷贝的克隆称作一个____________，源于同一批RNA制备物的克隆群则构建了一个_________________。
40．只要知道基因组中某一特定区域的部分核苷酸组成，用___________可以将这段DNA 进行百万倍的扩增。
41．人工感受态的大肠杆菌细胞在温度为___________时吸附DNA, ___________时摄人DNA。
42．目前，在重组体的筛选中，已经发展了许多构思巧妙、具有极高准确性的筛选方法。
大致可以分为：(1)_______________(2)_______________(3)___________________(4)____________________________等。
43．PCR扩增筛选重组体是比较简便的筛选方法，它适合于___________________________。
44．核酸杂交探针可分为两大类：DNA探针和RNA探针。
其中DNA探针又分为__________ 探针和__________________探针。
45．如果用限制性内切核酸酶切割双链DNA产生5’突出的黏性末端，则可以用__________进行3’末端标记。
如果用限制性内切核酸酶切割DNA产生的是3’突出的黏性末端，可以用__________________进行3’末端标记。
46．单链DNA探针的标记可以采用下列方法：(1)____________________________________(2)__________________________(3)_____________________________________。
47．根据Northern杂交的结果可以说明：__________________________________________。
48．差示杂交(differential hybridization)技术需要_________________________________。
49．RNA分子经凝胶电泳后按大小不同分开，然后被转移到一张硝酸纤维素膜(尼龙膜) 上，同一放射DNA探针杂交的技术称_______________________。
50．在________________技术中，DNA限制性片段经凝胶电泳分离后，被转移到硝酸纤维素膜(或尼龙膜)上，然后与放射性的DNA探针杂交。
51．可用T4 DNA聚合酶进行平末端的DNA标记，因为这种酶具有____________和_______的活性。
52．根据外源片段提供的遗传表型筛选重组体，必需考虑三种因素：(1)_______________(2)________________________(3)______________________。
53．Northern印迹和Southern印迹有两点根本的区别：(1)_______________________________________________________________________(2)_______________________________________________________________________。
54．放射免疫筛选的原理基于以下三点：(1)__________________________________(2)___________________________ (3)__________________________________。
答案1．702．(1)分子水平上的操作；(2)细胞水平上的表达3．克隆基因的类型；受体的选择；载体的选择4．限制性酶切图谱5．属名的第一个字母；种名的前两个字母；株名6．(1)减少酶量；(2)缩短反应时间；(3)增大反应体积7．EcoK；EcoRl8．GGCC；异源同工酶9．枯草杆菌蛋白酶；(1)5'-3'合成酶的活性；(2)3'-5'外切核酸酶10．碱性磷酸酶；5’端的磷酸基团11．Ca2+12．5'-3'合成；3'-5'外切13．DNA聚合酶I：5'一3'外切核酸酶；5'一3'合成酶14．S1核酸酶切割；DNA聚合酶补平15．核酸水解酶H；RNA16．质粒DNA；病毒DNA；质粒和病毒DNA杂合体17．复制区：含有复制起点；选择标记：主要是抗性基因；克隆位点：便于外源DNA的插入18．质粒消除(或治愈)19，pMBl；pSCl01；pSF2124(R质粒)20．1000kb；300kb21. 严紧22．pBR322和M13；pMBl；转座子23．它在细菌中能够大量繁殖，这样有利于外源DNA的扩增；对某些噬菌体(如λ噬菌)的遗传结构和功能研究得比较清楚，其大肠杆菌宿主系统的遗传也研究得比较详尽24．没有合适的限制性内切核酸酶识别位点；选择标记25．质粒；λ噬菌体；4526．(1)分子量大，(2)酶的多切点，(3)无选择标记27．复制区；IG区28．75％～105％29．螯合Mg2+离子，抑制核酸酶的活性30．中和DNA分子的负电荷，增加DNA分子间的凝聚力31．(1)合成探针；(2)合成cDNA；(3)用于PCR反应；(4)进行序列分析32．T—载体33．第二链合成时形成的发夹环•34．乙醇使DNA分子脱水35．(1)保持正确的可读框(2)能够使其转录的启动子(3)具有翻译的起始和终止信号36．接受外源DNA的生理状态37．(1)黏性末端连接；(2)平末端连接；(3)同聚物接尾连接；(4)接头连接法38．基因组DNA克隆；基因组DNA文库39．cDNA克隆；cDNA文库40．聚合酶链式反应(PCR)41．0︒C；42︒C42．(1)遗传学方法；(2)物理筛选法；(3)核酸杂交法；(4)表达产物分析法43．插入外源片段的种类较多，大小又极为相似的重组体的筛选44．基因组DNA；cDNA45．Klenow酶填补的方法；T4DNA聚合酶46．(1)用M13噬菌体载体合成单链DNA探针；(2)从mRNA反转录合成单链cDNA探针；(3)用不对称PCR合成单链DNA探针47．外源基因是否进行了转录48．两种不同的细胞群体能够表达不同的基因，即在一个群体中能够表达一些基因，而在另一个细胞群体中不能表达这些基因49．Northern印迹50．Southern印迹51．5’→3’合成酶；3’ →5’外切核酸酶52．(1)克隆的是完整的基因；(2)使用的是表达载体；(3)不含内含子53．(1)印迹的对象不同：Northern是RNA，Southern是DNA；(2)电泳条件不同，前者是变性条件，后者是非变性条件54．(1)抗体能够被吸附到固体支持物上；(2)同一个抗原可以同几种抗体结合；(3)抗体能够被标记二、选择题(单选或多选)1．因研究重组DNA技术而获得诺贝尔奖的科学家是( )(a)A．Kornberg (b)W．Gilbert (c)P．Berg (d)B．McClintock2．第一个作为重组DNA载体的质粒是( )(a)pBR322 (b)ColEl (c)pSCl01 (d)pUCl83．关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有( )不太恰当。