血涂片复检规则与应用-07
血细胞复检规则临床应用
国内23条的举例
如
第19条： 中性粒细胞>20×109/L 和首次检测 要求复片 如第21条: 单核细胞>1.5(成人)或>3×109/L (<12 岁) 复片 (? 中间群细胞,出现白血病细胞)
我们自己的报道:NC增高的标本涂片?
血细胞分析仪提示中性粒细胞增高标本阳性指标忽 视与对策 临床检验杂志
⑴ 报告方式 ： 幼红细胞数/100个WBC
晚幼红细胞
X-总有核细胞数 Y –有核红细胞数
若有核红 50/100WBC， WBC 20 X109/L 纠正后WBC？ 13.3 X109/L
纠正公式: 实际WBC= X
×
100 /（100+Y）
⑵幼红细胞增多标本投诉举例 例1 新生儿幼红细胞增多
例1：该婴儿出生1周，WBC增高到
女性，58岁，病人血常规因WBC增高
到16X109/L，血球仪提示淋巴细胞分 类达82%，临床找家属谈话--CLL
后经血片发现大量幼红细胞,纠正后淋
巴细胞分类只有40%。
实际为髓外无效造血的骨髓纤维化。
（3）其它红细胞的复习
①两种带角红细胞的区别
棘形红细胞↓见于肝病 、制片不当
盔形红细胞（裂红细胞）↓ 属红细胞碎片、有其2~3个角 。多见于DIC、转移癌、溶贫
国际通则：
说明不能过分依赖仪器结果
国际41条复检规则 ---具体分类举例
第1条：新生儿：
首次检测标本，涂片镜检
第2条~第8条.有关WBC，PLT及RBC
计
数
（如首次WBC <4X109/L或>30 X109/L ，涂片镜检， ）
第9条~第15条
临床应用血细胞分析仪样本性状筛查、显微镜涂片复检规则和问题、重复和复查及图像法设备的辅助复等复检要点
临床应用血细胞分析仪样本性状筛查、显微镜涂片复检规则和解决问题、重复和复查及图像法设备的辅助复等复检要点血细胞分析仪具有快速、准确和便捷等优势，血细胞分析仪各种新技术使用，使其检测性能越来越强大，检测参数也越来越多，特别是具有白细胞五分类技术的仪器的普及应用及全自动流水线化的血细胞分析系统的使用，使得实验室越来越依赖这样的设备来完成大量的血常规检验工作。
在应用各种血液细胞自动化分析设备时，复查和复检很重要。
重视样本性状的筛查进行血细胞分析复检时，首先应该关注标本的性状非常重要。
明显影响检测结果的问题包括：标本采集量是否符合要求，血液标本凝集或有凝块，乳糜血或脂血，冷凝集现象或冷球蛋白，溶血，高白细胞血症，高胆红素血症等。
1、标本采集量：如果使用真空采血管，采用真空采血模式，一般不会出血采集量差异太大的情况。
但遇到抽血困难，或许有采集量不足问题，此时应与临床沟通，确认检验结果是否受到影响，如果没有受到影响，采用让步检验模式发放报告，并备注说明采集量问题。
如果用注射器采集后注入采血管内，会发生采集量不准，过少或者过多。
过多时可能造成抗凝剂与血液比例不适，导致抗凝不充分，从而影响血小板及其他指标的检测结果，应做不合格标本处理。
2、凝血标本：通过肉眼观察可以发现标本已经凝血；摇动试管可以发现试管内有大小不同的凝块；打开试管帽可见管帽内存有凝块；用长竹签或施工搅动标本或吸取，用于发现肉眼没有发现的凝块或纤维蛋白凝丝。
此类标本可判定为不合格，应予拒收退回。
3、乳糜血或脂血：通过自然沉淀或离心沉淀，可发现乳糜血，乳糜血会导致光学法检测的HGB测定结果不正确，进而影响MCH，MCHC 计算结果，此时需采用离心置换血浆的模式排除干扰后再行测定HGB，或者采用光学法原理的仪器或功能测定HGB结果，并重新评估和计算MCH，MCHC。
高脂血症肉眼不可发现，可通过LIS系统查询生化检测结果，再查看WBC分类散点图，评估分类结果是否正确，必要时应采用显微镜分类法纠正白细胞分类结果。
血涂片的制备、染色、观察方法、复检
04
章节 PART
血涂片的复检
血涂片的复检
血涂片复检的意义，首先是复核该复检标本的血常规报告的准确性， 其次是在观察血细胞形态时，根据所观察到的外周血细胞形态，提供给临 床有效的信息，要做到保证血常规结果的准确、不漏检、不误诊、不误导。 切实的结合临床，关注已知的患者信息，查看患者的相关检查结果，了解
靠等待自然干燥章。节 PART
血涂片的染色
4、瑞氏染色是最经典，最常用的染色法，尤其对于细胞质成分，中 性颗粒等可获得很好的染色效果，但对细胞核的着色能力略差。姬姆萨染 液对细胞核着色较好，结构更清晰，但对细胞质成分的着色能力略差。采
用瑞-姬姆萨章复节合染PA液R可T使细胞质、颗粒、胞核等均获得满意的染色效果。
患者出现的体章征节、P症A状R（T 必要时要询问临床医生），在此基础上，了解临
床医生的诊断或治疗思路，然后在显微镜下有目的地进行查找，才能做到 有百密而无一疏。
红系统细胞形态
一、正常红细胞
章节 PART
红系统细胞形态
二、红细胞大小改变
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红系统细胞形态
三、红细胞血红蛋白含量改变
章节 PART
章节 PART
红系统细胞形态
3、卡波环
章节 PART
红系统细胞形态
4、有核红细胞
章节 PART
红系统细胞形态
5、网织红细胞：是指晚幼红细胞脱核后到完全成熟的红 细胞之间的过度细胞，分为4型。Ⅰ型：丝球形，Ⅱ型：网型， Ⅲ型：破网型，Ⅳ型：点粒型（图2-165、2-166、2-167）
红系统细胞形态
章节 PART
血涂片的制备
二、将推片接近血滴处，然后轻轻接触血滴并压在血滴上，使血滴呈”一”字型展开, 充满推片宽度(如果能做到边缘血量较少,中间血量稍多为最佳)(图1-2,图1-3).
血涂片复检规则及应用ppt课件
1
全血细胞分析检测
标本接收及拒收 标本前处理 血细胞分析仪检测操作 外周血涂片及染色 显微镜镜检
2
血细胞发育成熟过程
细
胞
内 容
巨核细胞系
细 胞
物
内
DNA/RNA
复
杂
度
、
细 胞 核 密
量 减 少
度
增
加
3
细胞形态学镜检是判断血细胞形态 病理变化的金标准
质量高的“镜检”包括观察炎症引起的白细胞毒性变 化；白血病细胞病理变化；贫血红细胞形态变化；血
14
ISLH推荐的41条复检规则（7）
24.怀疑性报警[不成熟粒细胞(IG)/杆状核中性粒细胞 （Band）报警提示除外]：首次成人结果出现阳性报 警；涂片镜检。
25.怀疑性报警：首次儿童结果出现阳性报警；涂片 镜检。
26.WBC结果不可信报警：阳性报警；①确认标本是 否符合要求并重测标本，②如出现同样报警提示，检 查仪器，③如需要，进行人工分类。
本后重新测定。 ③WBC、PLT：低于实验室确认的仪器线性范围；按SOP
文件进行。 ④WBC、RBC、Hb、PLT：无结果；①检查标本是否有凝
块，②重测标本，③如果维持不变，用替代方法计数。
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ISLH推荐的41条复检规则（2）
⑤ WBC：首次结果<4.0×109/L或>30.0×109/L；涂片镜检。 ⑥WBC：3天内Delta值超限，并<4.0×109/L或
39.原始细胞报警：WBC的Detal值超上限，有 以前确认的阳性报警结果；涂片镜检。
>30.0×109/L；涂片镜检。 ⑦PLT：首次结果<100×109/L或>1000×109/L；涂片镜检
血细胞自动分析和血涂片复检规则的应用分析
血细胞自动分析和血涂片复检规则的应用分析摘要】目的评价Sysmex XE-2100血细胞分析仪血涂片的复检规则。
方法采用日本希森美康公司生产的XE-2100五分类全自动血细胞分析仪，随机检测患者标本500份，同时涂片做显微镜检查，包括细胞形态观察和人工白细胞分类。
按照本科室制定的Sysmex XE-2100血细胞分析仪复检规则和涂片阳性标准进行评估，计算出真阳性、假阳性、真阴性、假阴性和涂片复检比率。
结果对500份标本检测结果进行统计学分析，真阳性率17.8%，假阳性率8.2%，真阴性率72.8%，假阴性率1.2%，复检率24.0%，验证试验结果显示，血液病细胞无漏检。
结论本科室制定的血涂片复检标准比较合理，能够保证报告的可靠性、时效性。
【关键词】血细胞分析仪复检规则应用评价Sysmex XE-2100血细胞分析仪能够快速对标本进行细胞计数和分类，并具报警提示功能，极大地提高工作效率。
但迄今为止，血细胞分析仪在形态学检查方面仍只能作为一种过筛手段，当遇到可疑情况，尤其是在病理条件下，需要人工显微镜复检，这已是不争的事实[1，2]。
为此，我科室根据国际血液学41条复检规则和国内协作组提出的Sysmex XE-2100血细胞分析仪复检规则[3]，并结合本院具体情况制定了血涂片复检标准。
下面就通过试验来进行验证该标准。
1 材料和方法1.1材料标本来源：500份血标本来自我院门诊和住院患者，所有标本于采血后30min～4h期间用XE-2100自动进样模式进行检测。
仪器与试剂：XE-2100全自动血细胞分析仪、原装配套试剂、校准品和质控品；Olympus双目显微镜，用于血涂片显微镜检查。
1.2方法本科室的复检标准：①WBC计数首次低于3.0×109/L或高于20.0×109/L。
②PLT计数首次低于100×109/L或高于1000×109/L。
③Hb首次低于70g/L或高于180g/L。
血涂片复检规则在XT—4000i血细胞自动分析仪的应用评价
血涂片复检规则在XT—4000i血细胞自动分析仪的应用评价目的评价血涂片的复检规则在Sysmex XT-4000i血细胞分析仪的应用效果。
方法采用日本希森美康公司生产的XT-4000i五分类全自动血细胞分析仪，随机检测患者标本950份，同时瑞姬染色涂片，最后显微镜检查，包括人工白细胞分类和各类血细胞形态观察。
按照本科室制定的Sysmex XT-4000i血细胞分析仪复检规则和涂片阳性标准进行评估，得出真阳性、假阳性、真阴性、假阴性和涂片复检比率。
结果对950份标本检测结果进行统计学分析，真阳性率15.6%，假阳性率7.8%，真阴性率75.9%，假阴性率1.5%，复检率23.5%，试验结果显示，血液病细胞无漏检。
结论本科室制定的血涂片复检规则较合理，能够保证血细胞分析结果准确可靠，可以满足临床的诊断和治疗。
标签：血细胞分析仪；血涂片；复检规则；应用评价Sysmex XT-4000i血细胞分析仪采用流体动态聚焦方法、流式细胞计数方法，分析数据显示在信息处理装置（IPU）上，可以快速对标本进行细胞计数和分类，对细胞异常及直方图异常有提示功能，极大地提高工作效率。
但由于血液细胞形态的多样性和复杂性，决定了仅靠仪器分析的方式无法保证检验结果的可靠性。
血细胞分析仪在形态学检查方面仍只能作为一种过筛手段，当遇到可疑情况，尤其是在病理条件下，需要人工显微镜复检，这已是不争的事实[1，2]。
为此，我科室参照国际血液学专家推荐的41条血细胞复检规则，结合我科室使用XT-4000i血细胞分析仪具体情况制定了血涂片复检标准。
下面就通过试验来验证该标准。
1 资料与方法1.1一般资料标本来源：950份血标本均来自我院就诊的门诊和住院患者，EDTA-2K真空抗凝管采集静脉血2ml，颠倒混匀5～8次，30min～6h内用XT-4000i自动进样模式进行检测。
1.2仪器与试剂XT-4000i全自动血细胞分析仪、原装配套试剂、校准品和质控品；Olympus双目显微镜，用于血涂片显微镜检查。
全自动血细胞分析血涂片复检规则应用分析
全自动血细胞分析血涂片复检规则应用分析目的：分析自动血细胞分析血涂片复检规则应用。
方法：采取2012年10月-2013年10月本院收集的680份血标本，采取自动血细胞进行分析，同时进行显微镜检查，观察细胞形态、人工白细胞分类等，遵循国际血细胞复检规则进行评估。
结果：采取仪器检测和血涂片镜检680份血标本，指标结果显示，其中真阳性率为15.00%、假阳性率为7.35%、真阴性率为76.92%、假阴性率为0.73%，病情诊断意义的重要参数无假阴性，涂片复检率为22.35%，血液病细胞准确率为100%，无漏检现象。
结论：采取合理的血细胞计数、白细胞分类的血涂片复检规则具有重要的意义，可确保检测报告的准确性，提高科室工作效率。
标签：自动血细胞分析；血涂片；复检规则随着电子技术在血细胞分析仪中的广泛应用，血细胞分析仪的检测水平不断提高。
采取自动血细胞分析仪可进行高效的标本细胞计数和分类，增强报警提示功能，减少工作人员的任务量，促进检测水平[1]。
目前，血细胞分析仪作为一种过筛形态学检查的手段，通过检测系统时所产生的光电信号，进行判断细胞种类，分类正常的形态细胞，特别是在病理条件下的细胞，需要进行人工显微镜复检。
为了分析自动血细胞分析血涂片复检规则应用，在2012年10月-2013年10月期间，本院对收集的血标本，进行分析自动血细胞分析血涂片复检规则应用，现报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料采取2012年10月-2013年10月本院收集的680份血标本，其中初诊标本458份，复诊标本222份。
所有血标本在采血后的0.6～4 h期间采取XE-2100自动进样模式进行检测，检查项目包括：全血细胞计数（CBC）、白细胞分类（DC）、有核红细胞（NRBc）、网织红细胞（RET），最后记录保存检测报告。
1.2 仪器及试剂仪器采取XE-2100全自动血细胞分析仪，试剂为原装配套试剂，同时准备好校准品和质控品，在血涂片显微镜检查中应用Olympus双目显微镜。
血液分析复检规则制定和应用
• 2. 根据本实验室的具体情况及Sysmex XE-2100的性能特 点，参考国际41条复检规则，制定了适合本实验室的17 条显微镜复检规则 。
• 3. 验证结果：真阳性率 10.6%
•
假阳性率 16.8%
•
真阴性率 69.6%
•
假阴性率 3%
•
复检率 27.4%
复检规则及复检方法（二）
• 1. HGB: ≥200g/L或≤60g/L，涂片镜检。 • 2. RBC:RBC直方图出现双峰或多峰，涂片镜检。 • 3. WBC: WBC≥30.0×109/L或≤2.5×109/L的初诊患者，
21
血液复检规则的建立与验证方法
血常规检测流程
正常 样本结果
异常
发出报告 样本信息审核
病人信息有误 抗凝问题 采集问题
重新送检
溶血
复检 结果异常
数目异常
重新复检
推片复核
镜下浏览（是否与仪 器提示一致）
白细胞分类异常
重点镜检
形态异常
红细胞形态异常
镜下浏览
血小板形态异常
镜下浏览
筛选标准制定原则
1. 根据该仪器对细胞形态的识别能力。决定筛选标准的宽严 程度;识别越差,标准越严。
2. 复检规则涉及的参数该仪器均能提供。 3. 复检范围应涵盖仪器的所有参数及形态学特征。 4. 在确保病理细胞不漏检、保证筛选质量的基础上尽量降低
复检率，使患者能在较短的时间内获得正确的检验报告。
5. 假阴性是制定复检规则的关键参数，具有诊断意义的重要 参数不能出现假阴性，其他参数的假阴性率应≤5%。
所有实验室都应该在国际实验血液学委员会制定 的标准基础上，建立自己实验室检查血液涂片的 规则。
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德阳市医院检验科
9
ISLH推荐的41条复检规则（2）
⑤ WBC：首次结果<4.0×109/L或>30.0×109/L；涂片镜检。 ⑥WBC：3天内Delta值超限，并<4.0×109/L或>30.0×109/L；涂片镜检。 ⑦PLT：首次结果<100×109/L或>1000×109/L；涂片镜检(计数)。 ⑧PLT：Delta值超限的任何结果；涂片镜检(计数)。
细 胞 内
量 减 少
3
DNA/RNA
细胞形态学镜检是判断血细胞形态病理变化的金标准
质量高的“镜检”包括观察炎症引起的白细胞毒性变化；白血病细胞病理变化；贫血红细胞 形态变化；血小板形态特点，以及血液内寄生虫检查。血细胞分析仪不可取代！
理想的血液检查：仪器计数细胞；镜检观察形态。 镜检费人费时，必须制定筛选标准。
正确，③涂片镜检是否有异常形态的红细胞。 30.PLT聚集报警：任何计数结果；①检查标本是否有凝块，②涂片镜检估计PLT数，③如
PLT仍聚集，按实验室SOP进行。 31.PLT报警：除PLT聚集外的PLT和MPV报警；涂片镜检。
24.01.2021
德阳市医院检验科
16
ISLH推荐的41条复检规则（9）
白细胞三分群的结果只适合在正常血象。
24.01.2021
德阳市医院检验科
6
应用五分类血细胞分析仪的复检规则
2005年，“国际血液学复检协作组”提出41条规则。15个实验室，使用CD-4000、LH-750、 XE-2100、ADVIA-120，对13298份样品检测并同时进行镜检。整理验证得出41条规则
24.01.2021
德阳市医院检验科
10
ISLH推荐的41条复检规则（3）
⑨Hb：首次结果<70g/L或>其年龄和性别参考范围上限20g/L；①涂片镜检，②确认标本是 否符合要求。
⑩MCV：24h内标本的首次结果<75fl或>105fl（成人）；涂片镜检。 ⑾MCV：24h以上的成人标本>105fl；①涂片镜检观察大红细胞相关变化，②如无大红细胞
如此高档仪器在常规检查中需涂片复查的样本仍有20-25%之多。
24.01.2021
德阳市医院检验科
7
ISLH复检专家组的41条复检规则
关于血细胞计数—15条规则 关于白细胞分类参数—7条规则 关于网织红细胞—1条规则 关于可疑报警—18条规则
24.01.2021
德阳市医院检验科
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ISLH推荐的41条复检规则（1）
24.01.2021
德阳市医院检验科
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ISLH推荐的41条复检规则（5）
⒃无DC结果或DC结果不全：无条件复检；人工分类和涂片镜检。 ⒄Neut＃：首次结果<1.0×109/L或>20.0×109/L；涂片镜检。 ⒅Lym＃：首次结果>5.0×109/L（成人）或>7.0×109/L（<12岁）；涂片镜检。 ⒆Mono＃：首次结果>1.5×109/L（成人）或>3.0×109/L（<12岁）；涂片镜检。
24.01.2021
德阳市医院检验科
4
镜检是细胞形态分析的最终手段 具有特异诊断意义的形态变化必须镜检
24.01.2021
分析仪白细胞分类结果可为镜检提供筛选手 段,提高镜检效率,保证医疗质量
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三分类血球计数仪的血常规 复检标准
中华医学会检验分会《三分群血细胞分析仪应用指南》：仪器结果只有同时出现WBC、 HGB、PLT及3个直方图均正常且仪器无报警才可向临床报告“分群”结果而不需要镜检。
报警提示，检查仪器，③如需要，进行人工分类。
24.01.2021
德阳市医院检验科
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ISLH推荐的41条复检规则（8）
27.RBC碎片：阳性报警；涂片镜检。 28.双形RBC：首次结果出现阳性报警；涂片镜检。 29.难溶性RBC：阳性报警；①检查WBC直方/散点图，②根据实验室SOP证实Ret计数是否
24.01.2021
德阳市医院检验科14ILH推荐的41条复检规则（7）
24.怀疑性报警[不成熟粒细胞(IG)/杆状核中性粒细胞（Band）报警提示除外]：首次成人结果 出现阳性报警；涂片镜检。
25.怀疑性报警：首次儿童结果出现阳性报警；涂片镜检。 26.WBC结果不可信报警：阳性报警；①确认标本是否符合要求并重测标本，②如出现同样
① 新生儿：首次检测标本；涂片镜检。 ②WBC、RBC、Hb、PLT、Reti：超出线性范围；稀释标本后重新测定。 ③WBC、PLT：低于实验室确认的仪器线性范围；按SOP文件进行。 ④WBC、RBC、Hb、PLT：无结果；①检查标本是否有凝块，②重测标本，③如果维持不
变，用替代方法计数。
24.01.2021
32.IG报警：首次结果出现阳性报警；涂片镜检。 33.IG报警：WBC的Detal值超上限，有以前确认的阳性报警结果；涂片镜检。 34.左移报警：阳性报警；按实验室SOP进行。 35.不典型和（或）变异Lym：首次结果出现阳性报警；涂片镜检。 36.不典型和（或）变异Lym：WBC的Detal值超上限，有以前确认的阳性报警结果；涂片镜
24.01.2021
德阳市医院检验科
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ISLH推荐的41条复检规则（6）
(20)Eos＃：首次结果>2.0×109/L；涂片镜检。 (21)Baso＃：首次结果>0.5×109/L；涂片镜检。 (22)NRBC＃：首次出现任何结果；涂片镜检。 (23)Ret＃：首次结果>0.10×109/L；涂片镜检。
相关变化，要求重送新鲜血标本，③如无新鲜血标本，报告中注明。
24.01.2021
德阳市医院检验科
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ISLH推荐的41条复检规则（4）
⑿MCV：24h内标本的Delta值超限的任何结果；：确认标本是否符合要求。 ⒀MCHC：≥参考范围上限20g/L；检查标本是否有脂血、溶血、RBC凝集及球形红细胞。 ⒁MCHC：<300g/L，同时，MCV正常或增高；寻找可能因静脉输液污染或其他标本原因 ⒂RDW：首次结果>22%；涂片镜检。
血涂片复检规则与应用-07
全血细胞分析检测
标本接收及拒收 标本前处理 血细胞分析仪检测操作 外周血涂片及染色 显微镜镜检
24.01.2021
德阳市医院检验科
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细 胞 内 容 物 复 杂 度 、 细 胞 核 密 度 增 加
24.01.2021
血细胞发育成熟过程 巨核细胞系
德阳市医院检验科