三种不同方法对纤维蛋白原检测结果影响
不同检测系统测定纤维蛋白原结果的可比性分析
血 凝 分 析 仪 测 定 Ｆｂ标 准 曲 线 。 随 机 选 择 已 在 Ａ Ｉ ８０ ｉ Ｃ ０ ０血 一
凝 分 析仪 上 检 测 的 患 者 血 浆 样 本 ， Ｓ ｓ ｘ Ｃ 一 ０血 凝 分 析 在 ｙ ｍｅ Ａ ５
１材 料 ．
１仪 器与试 剂 ： 国 Ｉ 公 司 Ａ Ｉ８０ ） 美 Ｉ Ｃ ０ ０血 凝 一
目前 ， 多数 中 型 以 上 医 院 临 床 实 验 室 拥 有 两 台 或 多 台 血 大
凝分 析 系 统 ， 于 检 测 纤 维 蛋 白原 （ ｉｒ ｏ ｏ ， ｉ ） 用 ｆ ｉ ｇ ｎ Ｆ ｂ 。不 同 型 ｂ ｎ
新 鲜 混 合 血 浆 在 ＡＣ ． ０ ｏ血 凝 分 析 仪 原 装 检 测 系 统 测 定 值 Ｉ８０ － 为 定 标 血 浆 ， 此 血 浆 建 立 Ｓ ｓ ｘＣ ０血 凝 分 析 仪 测 定 以 ｙｍｅ Ａ ５ Ｆｂ 准 曲线 。 随机 选 择 已 在 ＡＣ －００血 凝 分 析 仪 上 检 测 的 ｉ标 Ｌ８ ０ 患者 血 浆 样 本 ， Ｓ ｓ ｅ Ａ ５ 在 ｙ ｒ ｘＣ 一０血 凝 分 析 仪 上 测 定 Ｆｂ 比较 ａ ｉ，
和 Ｓ ｓ ｘＣ 一０血 凝 分 析 仪 所 测 Ｆｂ的结 果 进 行 对 比分 析 ， ｙｍｅ Ａ ５ ｉ
报道如下 。 资 料 与 方 法
ＡＣ －０ ０血 凝 分 析 仪 测 定 Ｆｂ标 准 ｅ Ａ ５
配 套 定 标 血 浆 的 值 ， 此 定 值 血 浆 测 定 值 建 立 Ｓ ｓ ｘＣ －０ 以 ｙ ｍｅ Ａ ５
两 台 仪 器 检 测 结 果 。３ 方 法 三 ： 方法 二测 定 的 定值 血 浆 建 立 ） 以
号 的 血凝 分 析 仪 使 用 不 同 的 试 剂 、 标 血 浆 和 质 控 血 浆 ， 自 定 各
两种抗凝血纤维蛋白原检测结果分析
两种抗凝血纤维蛋白原检测结果分析发表时间：2013-06-06T11:07:45.547Z 来源：《医药前沿》2013年第12期供稿作者：袁英1 杨鹏1 李鹤2 刘杨1 吕波1 郑丹1 [导读] 随着自动化血凝分析仪的广泛使用，检验前质量控制对检测结果的影响越来越重要。
袁英1 杨鹏1 李鹤2 刘杨1 吕波1 郑丹1 张静1 张志忠1（1解放军第210医院403临床部辽宁大连 116021；2解放军第406医院辽宁大连 116041）【摘要】目的观察两种抗凝剂对纤维蛋白原检测结果的影响。
方法同一份标本用109mmol／L的枸橼酸钠和做血常规的EDTA-K2抗凝，观察纤维蛋白原检测结果的差异。
结果两种抗凝剂对纤维蛋白原的测定无显著性差异。
结论做血常规用的EDTA-K2抗凝血可替代枸橼酸钠抗凝血做血浆纤维蛋白原检测。
【关键词】抗凝剂纤维蛋白原【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）12-0233-01 纤维蛋白原（fibrinogen，FIB）在凝血过程中经凝血酶的作用，转变为纤维蛋白，形成纤维网，将血液中的有形成分包罗起来形成血块或血栓。
纤维蛋白原具有桥联力的作用，因此在出血性疾病、血栓性疾病及溶栓治疗时都要测定血浆中的纤维蛋白原含量[1]。
随着自动化血凝分析仪的广泛使用，检验前质量控制对检测结果的影响越来越重要，抗凝剂的选择是血凝结果准确度的重要影响因素。
本文现就乙二胺四乙酸二钾(EDTA- K2)和枸橼酸钠两种抗凝剂对30例健康体检人群进行血浆纤维蛋白原(FIB)的检测对比，并将实验结果报告如下： 1 材料和方法1.1 标本：随机选取2013年1月～2013年3月在我院进行健康体检人员30例，男女各半，年龄不限，均排除心、肝、肾及其他疾病。
清晨空腹采血，每人同时采两管血，一管血使用一次性真空采血管109 mmol／L枸橼酸钠(1：9)抗凝，另一管血使用一次性真空采血管乙二胺四乙酸二钾(EDTA- K2)抗凝。
不同校正方法对纤维蛋白原测定结果的临床可接受性分析
表 １ 自建 系 统与 比对 系 统 测 定 结 果的 回归 分 析
立 标 准 曲 线后 进 行 样 本 测 定 。 自 建 系 统 分 别 按 以下 ３种 方 法 校 准 并 建 立 标 准 曲 线后 进 行 样 本 测 定 。方 法 Ｉ： Ｂ 以 Ｅ公 司定 标 血 浆 说 明 书 上 的标 示 值 作 为 校 正 值 （ ． ８ｇ Ｌ）采 用 ３ ５ ／ ， Ｂ Ｅ公 司 Ｆｂ试 剂 检 测 并 建 立 标 准 曲线 。方 法 Ⅱ ： 新 鲜 样 ｉ 将 本 混 合 血 浆 在 Ａ Ｌ ８０ Ｃ 一０ ０上 用 配 套 Ｆｂ 剂 的 测 定 值 作 为 ｉ试 校 正 值 （ ． ５ｇ Ｉ ， 用 Ｂ ３ １ ／ ）采 Ｅ公 司 Ｆｂ试 剂 检 测 并 建 立 标 准 ｉ 曲线 。方 法 Ⅲ： Ｂ 将 Ｅ公 司 定 标 血 浆 在 ＡＣ 一００上 用 配 套 Ｌ８ ０ Ｆｂ试 剂 的测 定 值 作 为校 正 值 （ ．６ｇ Ｌ ， 用 Ｂ ｉ ３ ５ ／ ） 采 Ｅ公 司 Ｆｂ ｉ 试剂检测并建立标准曲线。 系 统 校 准 后 ， 将 各 校 正 血 浆 分 别 重 复测 定 ３次 ， Ｆｂ 再 其 ｉ 均 值 均 在 校 正 值 的 ± １ 以 内为 校 正 合 格 ＿ 。 Ｏ １ ］ １４ 样 本 测 定 和 临 床 接 受 标 准 ． 采 用 Ｃａ ｓ 法 ， 过 自建 系 统 与 比对 系统 同 时 测 定 患 ｌ ｓ 通 ｕ
维普资讯
髓饵Ⅱ学 杂 ，０７ １（ ）７ ，４ 志 ２０ ，７４ ：２ ７
纤维蛋白原在不同检测系统的结果比较
2020633202033临床研究尿管上段结石44例，单侧肾结石62例、双侧肾结石8例、肾铸型结石5例。
排除标准：①术前检查尿路感染明显或术中发现尿液混浊考虑感染者；②复杂结石需二期碎石者；③肾脏重度积水肾皮质菲薄者。
两组资料有可比性（P>0.05）。
1.2方法综合患者情况选用全麻，先在截石位下，患侧输尿管置入6-7Fr输尿管导管，制造人工肾积水，再转为俯卧位。
经B超引导、定位，于肩胛线、腋后线之间进行穿刺，进入目标肾盏，置入J形导丝，沿导丝方向使用筋膜扩张器从8Fr开始，递增扩张至16或18Fr肾镜鞘，经鞘内置入肾镜，达到目标段，击碎结石并冲出，顺行置入双J管，不放置肾造瘘管，留置导尿结束手术。
对照组除放置双J管，再置入固定肾造瘘管，退镜，结束手术。
1.3指标观察术后密切监测患者生命体征，比较两组病例手术时间（从置镜到皮肤缝合的时间）、住院时间、住院费用、出血情况（术后3d时血红蛋白下降程度、严重血尿持续时间）及输血情况。
1.4统计学方法应用SPSS16.0软件进行统计学处理，计数数据（n、%）用χ2检验，计量数据（x±s）用t检验，P<0.05为差异显著，P>0.05为无显著差异。
2结果两组患者手术时间、术后血红蛋白下降值、严重血尿持续时间、术后输血率、住院时间、住院费用比较差异皆有统计意义（P<0.05），表1、表2。
3讨论经皮肾镜取石术是治疗肾及输尿管上段结石的有效方法，但对于不具备肾动脉血管造影介入栓塞技术的基层医院，对该术式却望而却步，难以开展该项手术。
传统经皮肾钬激光碎石术需留置双J管和肾造瘘管，目前认为留置肾造瘘管的目的是：压迫肾脏穿刺通道、强化止血；引流，减少尿液外渗、减小感染几率[2]。
但同时也会因此诱发伤口疼痛、延长住院时间、增加治疗费用等。
因此，有研究提出术后不留置肾造瘘管，即“部分无管化”，本文通过回顾性分析159例部分无管化治疗患者临床资料，分析其优点：①规避了术后肾造瘘管造成的牵拉感，有利于患者尽早下床活动；②术后显著减轻患者疼痛感，保证术后恢复；③手术微创化，切口小、瘢痕小；④术后避免拔除肾造瘘管，减小出血风险[3]；⑤缩短住院时间、节省治疗费用。
不同处理方法及储存条件对血清白蛋白测定结果的影响
义 。但 在室温保存 ２ 、 ４ｈ ４℃保存 ３ 、 ０℃ 保存 ９ 的检 测结果 偏 高 ， ６ｈ 一２ ６ｈ后 与即 刻检 测值 比较 差异 有统 计学 意义 。
结论 ： 临床检验 中要 注意合理保存血清标本 。 关键词 血清分离 ； 时间 ； 度 ； 温 血清 白蛋 白
血 清 白蛋 白的测 定是 临床 生化 检验 中常规检 测项
第 ３期
钟少惠 ， 两种 血浆纤维蛋 白原测 定稀释液的 比对分析 等．
３ ３
法 间绝 对 差值 的 限值 是 ４ｚ， 没有 超 出 此范 围的 点 ； 方
差异 无统 计 学意 义 （ ＝ ．０ ） Ｐ ０ ５２ 。两 种 Ｆｂ缓 冲 液测 ｉ
定结 果见 表 １ 。
表 １ 两 种 Ｆｂ缓 冲 液 测 定 结 果 （ ±ｓ） ｉ
均低廉 ， 助 于节 约实 验 室 运 行 成 本 ， 低 医 疗 费用 ， 有 降
有 很 大 的社 会效 益 。 参考 文献
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社 ，０ ４：３ ２０ ９ ．
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原结果 之 间 的偏 差 很小 ， 在误 差允 许 范 围内 ， 因而用 自
ｒ：０９ １ （ｒ ０９ ２ ）大 于 Ｅ ９一Ａ文 件 的 要求 ， ．９ １ ＝ ．８３ ， Ｐ 可 以认 为 在 取 值 范 围 内 ， 实 验 项 目数 据 满 足 要 本
求 。数 据 显示 方法 间有 良好 的相 关 性 ， 验 方 法 的精 实
凝血因子方法学
凝血因子方法学
凝血因子检测的方法主要有以下几种：
1. 凝血酶凝固法（Clauss法）：这种方法是利用凝血酶作用于待测血浆中
的纤维蛋白原，使其转变为纤维蛋白，血浆凝固。
血浆中纤维蛋白原的含量与凝固时间成负相关，检测结果与参比血浆制成的标准曲线对比可得出纤维蛋白原的含量。
2. 比浊法（PT衍生法）：当PT测定完成时，纤维蛋白原转变为纤维蛋白，其形成的浊度与FIB的含量成正比，因此无需另加任何试剂，即可由产生的浊度，用终点法或速率法算出FIB含量。
3. 免疫学方法：利用抗FIB多克隆抗体与FIB特异性结合反应进行测定。
方法有免疫浊度、单向免疫扩散和ELISA等。
4. 血浆因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ的促凝活性测定：一期法是将待测血浆分别与乏FⅧ、FⅨ、FⅪ和FⅫ基质血浆混合，进行APTT测定。
以上信息仅供参考，如有需要，建议咨询专业医生。
纤维蛋白原(fibrirlogerl,Fg)含量测定
纤维蛋白原(fibrirlogerl，Fg)含量测定摘要】直接测定血浆中纤维蛋白原含量，可反映纤维蛋白原增高或减低的实际状态。
血浆纤维蛋白原 (Fg)是参与血液凝固的一种血浆蛋白质 ,称为凝血因子 ,在止血与血栓方面的临床诊疗具有重要意义。
【关键词】纤维蛋白原测定方法1 测定方法分类Fg的测定方法众多，大体上分五大类：①基于加入凝血酶后形成纤维蛋白的方法，即功能测定法或可凝固蛋白法；②物理测定法如热沉淀法；③化学测定法如双缩脲法；④免疫学测定法；⑤纤维蛋白原含量直接推算法等。
(1)功能测定法：即凝血酶法，系在被检血浆中加入凝血酶，血浆即凝固，其所需的时间长短与纤维蛋白原含量成负相关如 Clauss法。
所形成的纤维蛋白又可再分为测重法，酚试剂比色法和紫外光度法、测氮法、浊度法和凝血酶凝固时间法等。
被检血浆的纤维蛋白原实际含量可从国际标准品参比血浆测定的校正曲线中获得。
这类方法中的冯-克劳斯法(Clauss法)方法简便、准确，适用于日常测定，是纤维蛋白原测定的推荐方法，并被WHO推荐为纤维蛋白原常规测定的参考方法；改良Jacobsson法结果准确可靠，被WHO推荐为纤维蛋白原测定的定值方法。
(2)物理、化学测定法：这类方法又可分为盐析法(包括加亚硫酸钠、硫酸铵或氯化钠盐析后，沉淀用蛋白质显色剂显色或用比浊法测定)、热变性沉淀法、双缩脲比色法和电泳法等几种。
这类方法多数比较简单、快速，特别适用于急诊检验。
缺点是特异性不强，所测的不是可凝固的纤维蛋白原，可能包括部分的降解产物和(或)其他蛋白，有的方法精密度较差。
(3)免疫学方法：是将纤维蛋白原作为抗原免疫动物，制成多克隆或单克隆抗体。
然后用免疫胶乳、反向血凝、免疫比浊、单向免疫扩散、火箭电泳以及ELISA等方法测定。
优点是大部分方法比较简便，但缺点是所测的不仅是可凝固的纤维蛋白原，可能包括了它的降解产物(因为它们有共同抗原)，也可能包括了异常纤维蛋白原(dyfibrinogens，由于基因突变所产生的一类无功能的纤维蛋白原)。
酶联免疫吸附试验检测人血浆中纤维蛋白原含量
酶联免疫吸附试验检测人血浆中纤维蛋白原含量【摘要】目的探讨酶联免疫吸附试验在检测人血浆中纤维蛋白原含量中的应用价值。
方法采用竞争抑制ELISA法测定人血浆中纤维蛋白原含量，并探索凝血酶、第二抗体最佳稀释倍数及适宜反应时间。
在最适宜条件下测定人血浆中纤维蛋白原含量。
结果第二抗体稀释1000倍为适宜的稀释倍数，10 IU/ml为最适宜凝血酶作用浓度，室温1.5 h为较理想的作用条件。
FPA标准品稀释至60 ng/ml，20 ng/ml，5 ng/ml，回收率分别为107.2%、98%、110%。
结论用建立起来的竞争抑制性ELISA法测定人血浆蛋白原中，纤维蛋白肽A的含量，回收率高，操作简单方便，值得推广应用。
【关键词】酶联免疫吸附试验；血浆；纤维蛋白原；检测纤维蛋白原(fibrinogen，FIB)为肝脏合成的一种重要的血浆糖蛋白，是由健康人血浆分离，经提纯冻干制成。
可提高血中纤维蛋白原浓度，促进血液凝固进而止血，缺乏、消耗过多或纤维蛋白酶亢进易导致凝血障碍。
临床多用于妊娠中毒、死胎、产后出血、胎盘早期剥离、大手术、严重大出血等所引起的纤维蛋白原缺乏导致的凝血障碍。
血浆中纤维蛋白原检测方法按原理可分为热/盐沉淀法，可凝固蛋白法和免疫法［1］。
纤维蛋白原释放纤维蛋白肽A(FPA)的能力可反映纤维蛋白原分子结构、生物学功能完整性。
本研究采用竞争抑制ELISA法测定FPA浓度，为检测纤维蛋白原生物学活性唯一方法。
1 资料与方法1.1 一般资料(1)0.05 mol/L PH9.6碳酸盐缓冲液包被液(2)0.01 mol/L PH7.4PBS-Tween 20稀释液(3)洗涤液，同稀释液(4)10%BSA封闭液(5)TMB工作液(6)FPA(SIGMA)(7)羊抗人FPA抗体(8)辣根过氧化物酶标记的驴抗羊抗体(9)Superblock溶液。
1.2 方法1.2.1 原理其原理是标本与凝血酶作用释放出FPA抗原，加入过量的FPA 抗体(一抗)，FPA与部分抗体结合。
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研究三种不同方法对纤维蛋白原检测结果的影响【摘要】目的对三种不同方法对纤维蛋白原检测结果的影响进行研究，找出一种最合适、最准确、最省时的方法。
方法选取60例患者作为临床实验对象，并作为实验组，另选30例健康体检者作为对照组。
对两个组的成员进行空腹静脉采血，获得乏血小板血浆。
分别用双缩脲法、凝固法以及免疫浊度法对三种不同纤维蛋白原浓度的标准品进行测定，每种方法重复测定20次。
对测定结果进行分析比较。
结果三种方法均可用于对纤维蛋白原进行检测，双缩脲法的检测结果高于凝固法与免疫浊度法；凝固法优于双缩脲法与免疫浊度法，能直接反映出纤维蛋白原的凝血功能。
结论对于纤维蛋白原的检测，凝固法是最合适、最准确、最省时的方法。
【关键词】双缩脲法；凝固法；免疫浊度法；纤维蛋白原
文章编号：1004-7484（2013）-02-0991-02
纤维蛋白原是一种由肝脏合成的具有凝血功能的蛋白质，简单的说，它是一种与凝血有关的蛋白质，是一种凝血因子。
纤维蛋白原的变化水平不仅关乎到凝血障碍，它与心血管病、糖尿病、恶性肿瘤以及血栓病均有密切的关系，对其进行有效的检测，将有助于临床疗效。
对于纤维蛋白原的检测方法，通常有双缩脲法、凝固法以及免疫浊度法三种。
本组实验中，分别利用这三种方法对纤维蛋白原进行了测定，并对测定结果进行了比较，从而选择一种最合适、最准确、最省时的检测方法。
1 资料与方法
1.1 临床资料选取60例患者作为临床实验对象，其中男性患者32人，女性患者28人，年龄在20岁至78岁之间，平均年龄（38.92±1
2.09）岁。
所举60例患者中，肝病患者18例，心脏瓣膜置换术后口服华法令1周以上患者13例，弥散性血管内凝血患者10例，心肌梗死患者10例，妊娠高血压综合征患者9例。
另选取来我院检查的30名健康体检者作为对照组。
1.2 检测方法首先必须对两个组的成员进行采血，我们所采用的工具为一次性自动定量采血器，采血器中的采血针和采血管为原采血器所有，采血管内含有109mmol/l的枸橼酸钠抗凝剂0.2ml，定量采血的剂量为1.8ml。
最好选择在清晨对所有人员进行空腹静脉采血，采集后轻轻摇动使其混合均匀。
之后进行3000r·min-1
离心，离心时间控制在10min[1]，获得乏血小板血浆。
然后采用各种方法对纤维蛋白原进行检测。
对于双缩脲法，我们参照《全国临床检验操作规程》；对于凝固法，我们选用（美国太平洋凝血试剂公司）bovinethrombin研制生产的纤维蛋白原试剂盒；对于免疫浊度法，我们选用（上海复星长征医学科学有限公司）研制生产的纤维蛋白原试剂盒。
在实验过程中，我们所用的仪器有：722型分光光度计（上海第三仪器厂）、7180生化全自动分析仪（日立）以及sysmex全自动血凝仪（日本希森美康）。
实验所用标准品为2.79、3.77、5.46（g/l）标准品（美国太平洋公司）。
分别用双缩脲法、
凝固法以及免疫浊度法对三种不同纤维蛋白原浓度的标准品进行
测定，每种方法重复测定20次。
[2]
1.3 数据处理本组实验所有数据均采用spss16.0统计软件包进行分析和统计，组间检验用t表示，p<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
三种方法均可用于对纤维蛋白原进行检测，双缩脲法的检测结果高于凝固法与免疫浊度法，见表1。
对于60例实验组患者，我们根据双缩脲法的测定结果将各种方法间的比较分三组进行，即高值组、正常范围组以及低值组三组。
fg在4.0g/l之上为高值组，fg 介于2.0g/l与4.0g/l之间为正常范围组，fg低于2.0g/l为低值组；并对30例对照组成员血浆进行检测；对测定结果进行比较。
凝固法优于双缩脲法与免疫浊度法，能直接反映出纤维蛋白原的凝血功能，见表2。
对于具体数据，我们参照表格如下。
3 讨论
纤维蛋白原的理化与生物特性决定了它有多种检测方式，本组选择了其中的三种双缩脲法、凝固法以及免疫浊度法，通过对各种方法的利用从而确定一种最合适、最准确、最省时的检测方法。
双缩脲法是相对传统的一种方法[3]，蛋白质分子中的甲酰胺基与碱性铜溶液作用后会形成一种紫色复合物，通过这种紫色物对蛋白质进行分析。
虽然这种方法出现的时间比较长，但人们对它的利用率并不高，因它的操作步骤比较繁琐，实验所花费的时间相当多，且
在实验的过程中干扰因素较多，往往导致最终的结果偏高。
免疫浊度法主要是利用纤维蛋白原多克隆抗体与纤维蛋白原作用，但此种方法的特异性较差，会导致结果偏高。
对于凝固法的应用，已得到了国内国际社会的认可，它是一种功能测定法[4]，能直接反映纤维蛋白原的凝血功能。
本组实验也显示此种方法的可利用性。
参考文献
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