HPLC法测定食品中人工合成色素的不确定度分析
3
3
= 8881718
日落黄 u ( y3 ) = 1% ×b ×100 = 1% ×120473 ×100
3
3
= 6955511
柠檬黄 u ( y) = =
u2 ( y1 ) + u2 ( y2 ) + u2 ( y3 ) 22872172 + 69226172 + 88817182 = 11490911
柠檬黄 u ( y2 ) = b ×u ( x) ×100 = 153837 ×0145% ×100
= 6922617
日落黄 u ( y2 ) = b ×u ( x) ×100 = 120473 ×0145% ×100
= 5421219
⑤计算出 u ( y3 )进样器的标准不确定度
柠檬黄 u ( y3 ) = 1% ×b ×100 = 1% ×153873 ×100
1
∑ (Xi - X) 2
= 11278915 × 1 = 147914 581215
u ( b)日落黄 = S ( y)日落黄 ×
1
∑ (Xi - X) 2
= 8928119 × 1 = 117111 581215
中国卫生检验杂志 2006年 8月 第 16卷 第 8期 Chinese Journal of Health Laboratory Technology, Aug 2006; Vol 16 No 8
第五次稀释 u ( c5 ) = 01432 + 010882 + 010772 = 0145% c5
④计算出 u ( y2 )标准液的不确定度引起的峰面积标准不 确定度
由上面的计算结果 u (C5 ) = 0145% ,以标准系列中最大浓 C5
度 10010 mg /L 计算出以峰面积为单位的标准不确定度 :
k=
3 ,则
′ u 211 (V10)
=
0102 = 0112%。 3 ×10
b、10 m l单标线移液管充满液体至刻度的估读重复性 ±
0101 m l为经验数据 ,按均匀分布属 B 类 ,取 k = 3, ′ u 212 (V10) = 0101 = 01058%。
10 × 3 c、由移液 管 校 准 温 度 与 使 用 温 度 差 别 引 起 的 不 确 定 度
u′2 (V50) = 010582 + 010122 + 010492 = 01077%。
③根据公式 u (Cs) = Cs
CS 为标准使用液浓度 ,则 :
u (C0 )
2
+
u (V0 )
2
+
u (VS )
2
,
C0
V0
VS
第一次稀释 u ( c1 ) = 01332 + 01142 + 010772 = 0137% c1
式中 :
u ( c) —食品中的人工合成色素含量测定的合成不确定度
u ( y) —吸光度值 y的标准不确定度
u ( y1 ) —回归直线的标准偏差 u ( y2 ) —由标准溶液的标准不确定度引起的吸光度标准 不确定度
u ( y3 ) —由进样器引起的标准不确定度 u ( a) —截距 a的标准不确定度
[关键词 ] 不确定度 ;高效液相色谱法 ;人工合成色素 [中图分类号 ] O65717 + 2 [文献标识码 ] C [文章编号 ] 1004 - 8685 (2006) 08 - 1019 - 03
食品饮料中人工合成色素是重要的监测指标 。我国卫生 标准中对食品中人工合成色素的允许量有明确的规定 ,给出 食品中人工合成色素的不确定度是为了满足客户要求以及便 于测量者和 管 理 科 室 对 测 量 结 果 的 可 信 度 和 准 确 性 进 行 评 定 。不确定度是对测量结果可能误差的度量 ,也是定量说明 测量结果质量好坏的一个参数 。一个完整的测量结果 ,除了 应给出被测量的最佳估计值之外 ,还应同时给出测量结果的 不确定度 。本文依据国家质量技术监督局发布的《测量不确 定度评定与表示 》( JJF1059 - 1999 ) ,用高效液相色谱法对食 品中柠檬黄 、日落黄不确定度进行分析 ,在实际工作中有较高 的实用价值 。
= 11278915 ×
3
1332013 ×5 ×581215
=
4408518
日落黄 u ( a) = S ( y)日落黄
∑X2i m ·n·∑ (Xi - X) 2
= 8928119 ×
3
1332013 ×5 ×581215
=
3489714
21113 斜率 b的标准不确定度 u ( b)
u ( b)柠檬黄 = S ( y)柠檬黄 ×
取 10100 m l定容至 50100 m l,配成 10010 mg /L 的混标 ,再逐
步移取 25100 m l定容至 50100 m l,配成标准系列浓度点 (mg /
L ) : 10010、50100、25100、12150、6125。
①由标准储备液引起的不确定度 [ u′(C0) ] 本测 量 所 用 标 准 柠 檬 黄 500 mg/L ±1%、日 落 黄
2525992415 13
=
1393914
2111112 计算由标准溶液的标准不确定度引起的吸光度标准
不确定度 u ( y2 ) 本测量标准系列浓度 ,由各单标配成最高浓 度的混合标准溶液 ,再逐步稀释成标准系列的每一浓度点 ,具
体配制过程如下 :柠檬黄 (500 mg/L ) 、日落黄 (500 mg/L )各移
1 材料与方法
111 仪器与试剂
SP8810高 效 液 相 色 谱 仪 , C18 柱 。柠 檬 黄 [ GBW ( E ) 100001a ]、日落黄 [ GBW ( E) 100003a ] ,由国家标准物质研究中
心提供 。
112 测量方法
依据 GB / T5009135 - 2003规定方法 ,称取样品 1010 g,经
u ( b) —斜率 b的标准不确定度
u ( G) —样品质量 G的标准不确定度
y—对应于 Xi 的回归方程的计算值 yi 的平均值
2 结果分析 211 计算标准不确定度 21111 计算 u ( y) 2111111 标准系列浓度 - 峰面积拟合直线求得 u ( y1 ) [即回 归直线的标准偏差 S ( y) ]
25100 3801116 3797515 3790306 3796312 3795153 b = 153837
50100 7612668 7618514 7615042 7615408 7641079 Y = 153837X - 50772
日落黄
10010 15350790 15339892 15345241 15345308 15332930 6125 745772 738127 740699 741533 734314
第二次稀释 u ( c2 ) = 01372 + 010882 + 010772 = 0139% c2
第三次稀释 u ( c3 ) = 01392 + 010882 + 010772 = 0141% c3
第四次稀释 u ( c4 ) = 01412 + 010882 + 010772 = 0143% c4
′ u 213 (V10) : 20℃时水的体积膨胀系数为 211 ×10 - 4 / ℃,玻璃的 膨胀系数为 115 ×10 - 5 / ℃。在实验中 ,实验水温 Tt = 25℃,在 95% 置信概率下的正态分布取 k = 2,则 ′ u 213 (V10) = (σ水 - σ玻 )
×( Tt - T20 ) ×1 /2 = 01049%。
r = 01999995
12150 1490959 1494879 1491819 1492552 1487268 a = - 18641
25100 2993211 2995026 2994008 2994082 2993178 b = 120473
50100 5984354 5977407 5980810 5980857 6004996 Y = 120473X - 18641
表 1 被测组分标准系列的峰面积测定结果及拟合方程
被测 浓度 组分 (mg/L)
峰面积 yij
1
2
3
y ij
yi
拟合方程
柠檬黄 6125 930402 925310 941185 932299 910209 r = 01999995
12150 1897555 1827912 1862734 1862734 1872190 a = - 50772
日落黄 u ( y) = u2 ( y1 ) + u2 ( y2 ) + u2 ( y3 ) = 13939142 + 54212192 + 69555112 = 8928119
21112 截距 a的标准不确定度 u ( a)
柠檬黄 u ( a) = S ( a) = S ( y)柠檬黄
∑X2i m ·n·∑ (Xi - ) 2
G—样品质量 , g
11312 根据数学模型求方差和传播系数
[作者简介 ] 王艳春 (1964 - ) ,女 ,主管技师 ,主要从事理化检验 工作 。
1131211 方差
u (c) = c2 (y) u2 (y) + c2 (a) u2 (a) + c2 (b) u2 (b) + c2 (V) u2 (V) + c2 (G) u2 (G) ( 2)
提取后定容至 10100 m l,上机与标准曲线在相同的仪器条件
下进行测定 ,在一定浓度范围内 ( 6125 ～10010 mg /L )被测组
实习六食品中人工合成色素的测定
实习六食品中人工合成色素的测定第一篇：实习六食品中人工合成色素的测定实习六食品中人工合成色素的测定（一）原理聚酰胺是一种高分子化合物，又称“尼龙6”，在酸性条件下可与水容性酸性染料牢固结合；在碱性条件下则可解吸色素，用纸层析法或薄层层析法进行分离鉴别后，再与标准比较予以定性、定量。
（二）试剂1．聚酰胺粉（尼龙6）200目 2．正丁醇 3．无水乙醇 4． 1%氨溶液5．乙醇-氨液（9：1）6． 20%柠檬酸7．0.1%色素标准贮备液(1mg/ml):精确称取商品色素胭脂红、苋菜红0.1克容于蒸馏水，稀释至100毫升。
8．展开剂（临用现配）正丁醇：无水乙醇：1%氨水（6：2：3）（三）仪器 9．沙氏漏斗-G3 10．抽滤瓶：500ml 11．100 ml，500 ml 12．血红蛋白吸管 13．展开缸14．玻璃水泵15．带塞刻度比色管：10 ml 16．恒温水浴17．量筒：25 ml，50 ml 18．天平19．吹风机20．吸管：1 ml 21．白瓷蒸发皿 22．中速层吸滤纸 23．温度计24．PH试纸 25．玻璃棒 26．滴管(四)操作方法1.样品处理（汽水类样品）：将样品用两个杯子反复倾倒100次除去CO2，精确吸取样品50 ml放入100 ml烧杯中，加热到70℃，备用。
2．吸附去杂质：称取聚酰氨粉1g，加少量水调成糊状后倒入前处理的70℃的样品中，充分搅拌使样液色素全部被吸附，将样液全部移入沙氏-G3漏斗抽滤，用300ml 70℃ PH=4的蒸馏水分多次洗涤沉淀物，至洗液与原蒸馏水PH相同为止（洗涤过程必须充分搅拌，使所用的洗涤液与聚酰氨粉充分接触）。
3.解吸: 用乙醇氨溶液15mlf分三次洗涤色素，解吸过程时时搅拌直至滤出液无色为止并收集全部解吸液。
4．浓缩: 将色素解吸液置于蒸发皿中在80℃水浴上浓缩至0.5-1ml，转入10ml刻度试管中，用少量50%乙醇洗涤蒸发皿，洗液并入并入刻度试管中。
HPLC同步测定多种合成色素含量检测结果的不确定度评定
度分量 ，计算合成标 准不确 定度及 扩展 不确 定度 。结果 ：Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ 同步 测 定 多种 色素含 量 的扩展 不确 定度 范 围在 ３ ． ９ ７ ％～ ７ ． １ ３ ％ （ ｋ＝ ２ ） ；天平称量和提取 回收率对合成 色素的测量结果不确定度影响最大。结论 ：本研 究建立 了简 便 易行的 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ同步测定肉制品中色素含量检 测结果的不确定度评 定方法。 关键词 ：高效液相 色谱 ；同步测定 ；合成 色素；不确定度
时 ， 目前 的检 测 方 法通 常 是 对其 中 可能 滥 用 的色 素 逐 一
限公司；Ｔ Ｇ Ｌ － １ ６ Ｍ 高速冷冻离心机 ，长沙湘仪 离心机仪 器有限公 司；Ｂ Ｆ 一 ￥ ２ ５ ０ ０无油真空泵 ，北京八方试剂科技
有限公 司；Ｓ ｙ ｍ ｍ ｅ ｔ ｒ ｙ — Ｃ ｌ ８ 色谱柱 （ ５ ｍ， ４ ． ６× ２ ５ ０ ｍ ｉ ｌ １ ） ，
测定多种色素的含量分析其不确定度进行 ，对建立 的 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ多种色素测定方法 的不确定 度进行评 价 ，评 价 了 影响其测定结果的不确定度来 源 ，确保检测过程和结果
的可 靠 同时测定 肉制品中 酸ｌ 生 橙Ⅱ 等 １ １ 种 合成色素 的方法研 究》 Ｉ ８ ］ 。取 食品样 品 可食部捣碎并混合均匀后 ，准确称取 ２ ． ０ ０ ｇ置于 ５ ０ ｍ Ｌ 离心管 ，加入 ２ ． ０ ｇ 海砂混匀 ，加入 １ ０ ｍ Ｌ石油醚脱脂 （ 样 品不 含脂 肪 则无 需 脱脂 ） ，振摇 并 超 声 １ ０ ｍ ｉ ｎ后 （ 注意放气 ） ，离心 １ ０ ｎ ｌ ｉ ｒ ｌ（ ４ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍ ｉ ｎ ） ，弃 去醚 层 ， 必要时重复上述过程以保证脱去样 品脂肪 完全。８ ０ ℃水 浴挥去多余石油醚后 ，加入 ２ ０ ｍ Ｌ乙醇氨水水溶液 ，振
HPLC测定小米中非法添加姜黄素及不确定度分析
HPLC测定小米中非法添加姜黄素及不确定度分析李卓;张亚锋;李荣;董曼曼;贾寒冰【摘要】采用高效液相色谱法(HPLC)对小米中非法染色姜黄素进行定性定量测定,并对其不确定度进行分析.以乙腈-4%冰乙酸(45+55)为流动相,流速1.0 mL/min,经C18柱分析,检测波长425 nm.采用外标法定量,姜黄素在0.585μg/mL~4.88μg/mL范围内线性关系良好,相关系数r2=0.9999,平均回收率92%,检出限为0.08 mg/kg,整个试验的合成不确定度为1.937%,扩展不确定度为X=(7.15±0.29)mg/kg;k=2.本方法操作简单,重复性好,检出限低,可用于小米中姜黄素非法染色的测定.%High performance liquid chromatography(HPLC) was used to qualitatively and quantitatively deter-mine curcumin in millet and its uncertainty was analyzed. Acetonitrile-4%acetic acid (45+55) solution was used as the mobile phase, and 1.0 mL/min as the flow rate, and C18 as the analysis column. Good linear rela-tionship was obtained in the concentration range of 0.585μg/mL-4.88μg/mL of curumin, with correlation coef-ficient of 0.9999. Under the optimized conditions, the average recoveries were 92%. The limit of detection(S/N=3) of curcumin was 0.08 mg/kg. The combined uncertaincy was 1.937%and the expanded uncertainty was X=(7.15±0.29)mg/kg;k=2. The method was sample, reproducible, low detection limit, and can be used to de-termine the illegal staining of curcumin in millet.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2017(038)024【总页数】5页(P169-173)【关键词】高效液相色谱法(HPLC);姜黄素;小米;不确定度【作者】李卓;张亚锋;李荣;董曼曼;贾寒冰【作者单位】西安市食品药品检验所,陕西西安710054;西安市食品药品检验所,陕西西安710054;西安市食品药品检验所,陕西西安710054;西安市食品药品检验所,陕西西安710054;西安市食品药品检验所,陕西西安710054【正文语种】中文姜黄素是从姜科姜黄属植物姜黄、莪术等根茎中提取的一种有效成分，是一种二酮、二羟基，带有共轭苯环和双键结构的天然黄色素[1]。
液相色谱法测定食品中合成着色剂
液相色谱法测定食品中合成着色剂作者：***来源：《食品安全导刊·下》2024年第05期摘要：目的：建立一种液相色谱法测定食品中合成着色剂的方法。
方法：用乙醇氨水溶液提取食品中的合成着色剂，经固相萃取柱净化后，用液相色谱仪（配二極管阵列检测器）测定，外标法定量。
结果：11种合成着色剂在0.2～10.0 μg·mL-1线性关系良好，线性相关系数为0.999 4～1.000 0，加标回收率为94.2%～109.6%，相对标准偏差在0.55%～5.52%。
柠檬黄、喹啉黄、日落黄、胭脂红、新红和赤藓红的检出限均为0.5 mg·kg-1，定量限均为1.5 mg·kg-1；苋菜红、诱惑红、亮蓝、酸性红和靛蓝的检出限均为0.3 mg·kg-1，定量限均为1.0 mg·kg-1。
结论：该方法的重复性好、灵敏度高、实用性强，可以同时测定食品中多种合成着色剂的含量。
关键词：合成着色剂；液相色谱法；固相萃取Determination of Synthetic Colorants in Food by Liquid ChromatographyZHU Xiaolei（Guangdong Dongguan Quality Supervision & Testing Center， Dongguan 523000， China）Abstract： Objective： To establish a method for the determination of synthetic colorants in food by liquid chromatography. Method： The synthetic colorants in food were extracted with ethanol ammonia solution， purified by solid phase extraction column， determined by liquid chromatography （ with diode array detector ）， and quantified by external standard method. Result： The linear range of 11 synthetic colorants was 0.2～10.0 μg·mL-1， the linear correlation coefficient was 0.999 4～1.000 0， the recovery rate was 94.2%～109.6%， and the relative standard deviation was 0.55%～5.52%. The detection limits of tartrazine， quinoline yellow， sunset yellow， carmine， new red and erythrosine were 0.5 mg·kg-1， and the limits of quantification were 1.5 mg·kg-1. The limits of detection of amaranth， allura red， brilliant blue， acid red and indigo were 0.3 mg·kg-1， and the limits of quantitation were1.0 mg·kg-1. Conclusion： The method has good repeatability， high sensitivity and strong practicability， and can simultaneously determine the content of various synthetic colorants in food.Keywords： synthetic colorants; liquid chromatography; solid-phase extraction着色剂在食品加工过程中可以改善食品的口感和外观，但过量使用会对人们的健康造成不良影响。
高效液相法测定食品中合成着色剂的确认报告
高效液相法测定食品中合成着色剂的确认报告1.方法依据本报告依据为： GB/T 5009.35-2003，中华人民共和国国家标准食品中合成着色剂的测定。
本法适用于食品中合成着色剂的测定。
2.方法原理食品中人工合成着色剂用聚酰胺吸附法或液-液分配法提取，制成水溶液，注入高效液相色谱仪，经反相色谱分离，根据保留时间定性和与峰面积比较进行定量。
3.仪器和试剂3.1仪器器材3.1.1 高效液相色谱仪，带紫外检测器，254nm波长。
3.2试剂3.2.1 正己烷。
3.2.2 盐酸。
3.2.3 乙酸。
3.2.4 甲醇：经0.5μm滤膜过滤。
3.2.5 聚酰胺粉（尼龙6）：过200目筛。
3.2.6 乙酸铵溶液（0.02mol/L）：称取 1.54g乙酸铵，加水至1000mL，溶解，经0.45μm滤膜过滤。
3.2.7 氨水：量取氨水2mL，加水至100mL，混匀。
3.2.8 氨水-乙酸铵溶液（0.02mol/L）：量取氨水0.5mL，加乙酸铵溶液（0.02mol/L）至1000mL，混匀。
3.2.9 甲醇-甲酸(6+4)溶液：量取甲醇60mL，甲酸40mL，混匀。
3.2.10 柠檬酸溶液：称取20g柠檬酸(C6H8O7·H20),加水至100mL，溶解混匀。
3.2.11 无水乙醇-氨水-水(7+2+1)溶液：量取无水乙醇70mL，氨水20mL，水10mL，混匀。
3.2.12 三正辛胺正丁醇溶液(5%)：量取三正辛胺5mL，加正丁醇至100mL，混匀。
3.2.13 饱和硫酸钠溶液。
3.2.14 硫酸钠溶液(2g/L)。
3.2.15 pH6的水:水加柠檬酸溶液调pH值到6。
3.2.16 合成着色剂标准溶液：准确称取按其纯度折算为100%质量的柠檬黄、日落黄、苋菜红、胭脂红、亮蓝各0.100 g置100mL容量瓶中，加pH6水至刻度，配成水溶液（1.00mg/mL）。
3.2.17 合成着色剂标准使用液：临用时上述溶液（或将 3.2.16）加水稀释20倍，经0.45μm滤膜过滤，配成每毫升相当于50.0μg的合成着色剂。
HPLC法测定保健食品包衣片中合成色素的研究
H PLC法测定保健食品包衣片中合成色素的研究张连龙，周华生，叶科航，成恒嵩（无锡健特药业有限公司，江苏无锡214091）摘要：本文研究了高效液相色谱法测定某保健食品包衣片中人工合成色素柠檬黄、靛蓝和诱惑红的含量。
聚酰胺纯化样品，柱：Lichrospher C18,流动相：甲醇-乙酸铵溶液（pH4.0，0.02mol/L），梯度洗脱：甲醇20~35%，3%/min；35~98%，9%/min；98%持续6min，流速：1ml/min，检测器：单波长，UV254nm；多波长，分段设置最佳波长，柠檬黄428nm，靛蓝610nm，诱惑红500nm，均取得较好结果。
线性范围：0-100g/ml；回收率：91.3~103.1%；标准差：2.11~5.63%；最低检测量：2ng~11ng，其中尤以多波长测定最佳。
关键词：高效液相色谱；保健食品；合成色素；测定中图分类号：TS207.3；文献标识码：B；文章篇号：1673-9078(2007)01-0096-04Determination of Synthetic Colors in Coating Tablet of a Health Food byHPLCZHANG Lian-long,ZHOU Hua-sheng,YE Ke-hang,CHENG Heng-song（Wuxi Giant Pharmaceutical CO.,L Td,Wuxi4091,China）Abstract:High performance liquid chromatography(HPLC)was used to determinate the content of artificial synthetic colorsin coating tablet of a healthful food,including tartrazine,indigo carmine and allure red.After purified by polyamide,the samples were assayed by HPLC on a Lichrospher C18column using a Dual Absorbance Detector.The mobile phase was a mixture of methanol and ammonium acetate(pH4.0, 0.02mol/l),with a liner gradient of:methanol from20%to35%in5min,continuing to increase methanol content in the mobile phase from35 %to98%in7min,and then maintaining for6min in98%.The flow rate was1ml/min and solo-wavelength was set at UV254nm.The optimal multi-wavelength for Tartrazine,Indigo Carmine and Allure red were428nm,610nm and500nm,respectively.Results also showed that the linearity range,recovery range,relative standard deviation and the detection limit were0-100g/ml,91.3~103.1%,2.11~5.63%,and2ng ~11ng,respectively.Key words:HPLC;Healthful foods;Synthetic colors;Determination.一些保健食品的剂型为包衣片剂。
食品中的合成色素检测技术
食品中的合成色素检测技术随着社会的进步和人们生活水平的提高，人们对食品安全和品质的要求也越来越高。
在食品加工过程中，合成色素广泛应用于食品中，以增强其色彩和吸引消费者。
然而，不合格的合成色素可能对人体健康造成潜在风险。
因此，食品中的合成色素检测技术变得尤为重要。
食品中合成色素的检测技术种类繁多，包括物理、化学以及光谱学等多种方法。
以下将介绍其中几种常用的技术。
1. 高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是目前最常见和最常用的食品中合成色素检测技术之一。
该方法通过采用液相色谱柱将样品中的目标化合物分离，再通过色谱柱内置的检测器对目标化合物进行定性和定量分析。
HPLC方法具有准确、敏感、高效、可靠等优点，适用于各类食品中合成色素的检测。
2. 气相色谱法（GC）气相色谱法是另一种常用的食品中合成色素检测技术。
该方法通过将样品中的目标化合物通过气态吸附至色谱柱中，再通过色谱柱内的检测器对目标化合物进行分析。
气相色谱法具有分析速度快、分离效果好、灵敏度高等特点，适用于一些对分辨率要求较高的食品中合成色素的检测。
3. 质谱法（MS）质谱法是一种高级的分析技术，也可以应用于食品中合成色素的检测。
该方法通过将目标化合物通过离子化装置转化为气态或液态离子，并通过质谱仪对离子进行干涉和分析。
质谱法具有极高的灵敏度和准确度，能够对食品中微量级别的合成色素进行检测和定量。
4. 聚焦超声波技术（FUS）聚焦超声波技术是近年来新兴的食品中合成色素检测技术。
该方法通过利用超声波的高频振动特性，使样品中的色素颗粒高速振动并发生损伤，进而释放出特定带电的颗粒和组分。
通过电场的引导和检测系统，可以对释放的物质进行分析和检测。
聚焦超声波技术具有无损害、高效、快速等优势，尤其适用于对食品样品进行非破坏性检测。
除了上述几种常用的检测技术外，还有一些新兴的技术也在不断被探索和应用于食品中合成色素的检测。
例如，近红外光谱、核磁共振成像等技术都在食品科学领域取得了一些突破性进展。
HPLC测定食品中人工合成色素
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０ ． Ｏ ０ ０ ． ０ ０ ０ ． ０ ０ ０ ． Ｏ ０
０ ． １
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０ ． １ ４ ５ ２
０ ． １ ０ ２ ２
２ ０ １ ３ 年第０ ４ 期 （ 总第３ ０ １ 期）
吉 林 农 业
Ｊ Ｉ ＬＩ Ｎ ＡＧＲＩ ＣＵＬＴＵＲＥ
ＮＯ ． ０ ４． ２ ０１ ３
（ Ｃ ｕ ｍｕ ｌ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ｔ ｙ Ｎ Ｏ． ３ ０ １ ）
Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ 测 定食 品中人工合成色素
顾 晓 莉
（ 南京特殊教 育职 业技术 学院实验 中心， 江苏 南京 ２ １ ０ ０ ３ ８ ）
摘 要 ： 目的 ：建 立 食 品 中人 工 合 成 色素 测 定的 高 效液 相 色谱 法 。方 法 ： 采 用Ｃ １ ８ 色谱柱 ，以 乙腈 和 乙酸铵 为流 动 相 ，梯度 洗 脱 ， 流 速 为１ ． ０ ｍ ｌ ／ｍ ｉ ｎ ，检 测波 长为２ ５ ４ ｎ ｍ 和３ ０ ０ ｎ ｍ ，柱 温２ ５ ℃ ，在此 色谱 条件 下进 行检 测 。 结果 ：该 方 法各 组 分检 出限 为０ ． Ｏ ７ ～０ ． １ ５ ｍ ｇ ／ ｋ ｇ ， 线性 范 围 为１ ． ０ ～５ ０ ． Ｏ ｍ ｇ ／ Ｌ ，加标 回 收率 为９ ５ ． ６ ％ ～１ ０ ２ ． ２ ％ 。结论 ：该 方 法操作 简便 ， 准确 ，快 速 ，提 高 了样品检 出灵敏 度 ， 能够 同时检 测６ 种合 成 色素 的含 量 。 关键 词 ：食 品； 高效液 相 色谱法 ；合成 色素 中图 分类 号 ：０ ６ ５ ７ ． ７ ＋ ２ 文献 标识码 ：Ａ 文章编 号 ：１ ６ ７ ４ － ０ ４ ３ ２（ ２ ０ １ ３ ）－ ０ ４ — ０ ０ ７ ８ 一 ｌ
食品中人工合成着色剂的测定
食品中人工合成着色剂的测定摘要：在日常试验用HPLC测定食品品中人工合成着色剂的国家标准GB/T5009.35- 2003时，我们发现该方法测定高蛋白质油脂等固态样品的前处理方法以及梯度洗脱程序存在一定的不足，因此，对该方法的前处理以及梯度洗脱程序加以改进，使得样品前处理简便快捷，六种色素回收率均在90%以上，而且延长了色谱柱的寿命。
关键词：人工合成着色剂 HPLC 食品前处理Through daily test with HPLC determination food products in the artificial synthesis colors agent of national standard GB/T5009.35-2003， we found law determination high protein oil，solid samples of processing method and gradient wash program exists must of insufficient， therefore， on the method of processing and gradient wash program be improved， makes samples processing easy shortcut， six kind of pigment recovery are in 90% above， and extended the spectrum column of life人工合成着色剂作为一种添加剂广泛用于食品中，GB2760-2011对其使用有明确的限量标准，但在市场上却时有发现这些人工合成着色剂被滥用，如染色馒头，所以对它的检测监管是相当重要的，测定这些人工合成着色剂方法有高效液相色谱法、薄层色谱法等[1] ，但无论哪一种方法都涉及样品前处理。
国标法第一法是用HPLC测定合成着色剂，将食品中人工合成着色剂用聚酰胺吸附法制成水溶液，注入高效液相色谱仪，经反相色谱分离，根据保留时间定性和峰面积比较进行定量[1] 。
液相色谱法测定食品中合成着色剂苋菜红、胭脂红结果的不确定度评定
胭 脂 红 的 浓 度 ，mg /L；V － 样 品 定 容 体
积，mL；m－样品的称样量，g。
1.3.2 相对标准不确定度
u = u + u + u 2 rel(x)
2 rel(C)
2 rel(V )
2 rel(m)
（2）
2 不确定度分量的主要来源
由测定过程及数学模型可知，食品
中人工合成色素苋菜红，胭脂红测量结果
10- 4/℃ ，玻 璃 的 膨 胀 系 数 为 1.5 ×
确定度；②由标准曲线求浓度C时产生的 10- 5/℃ 。 在 实 验 中 ，实 验 水 温 T=
不确定度；③称量样品引入的不确定度； 25 ℃，在 95%置信概率下的正态分布
④样品定容体积引入的不确定度。 3 不确定度分量的评定 3.1 由标准曲线得出试样中胭脂红、 苋菜红浓度 C 的不确定度
关关键键词词：：高高效效液液相相色色谱谱法法；；人人工工合合成成色色素素；不；不确确定定度度；评；评定定
人工合成着色剂是以煤焦油为原 料制成，因成本低且色泽鲜艳，被人们 广泛使用。许多人工合成着色剂除本 身或其代谢产物具有毒性外，在生产过 程中还可能混进其他有害物质。因此 食品中合成着色剂是食品安全的重点 监测指标。测量不确定度是评定检测 结果的可靠性和准确性的重要依据。 本文依据《测量不确定度评定与表示》 （JJF 1059.1—2012）用高效液相色谱 法对食品中胭脂红 、苋菜红不确定度 进行分析评定 ，确定了分析结果的报 告值[1] 。 1 材料与方法 1.1 仪器与试剂
差 为 ± 0.020
mL，
u = ′ 1.1(v5)
0.02 3
=
1.15 × 10-2 。 重 复 性 读 数 误 差 为 ±