实验二蛋白质含量的测定凯氏定氮法
实验二_蛋白质含量的测定-凯氏定氮法1
实验二_蛋白质含量的测定-凯氏定氮法1一、实验原理蛋白质是生物体内重要的营养成分，因此测定样品中蛋白质含量是生物学领域中的一项基础性工作。
凯氏定氮法是测定蛋白质含量的一种常用方法。
由于蛋白质中氮元素的含量较高，因此凯氏定氮法以氮元素计算蛋白质含量，具有简便、准确、重现性好等特点，广泛应用于蛋白质含量的测定中。
该法的基本原理是：将待测样品中蛋白质水解后，将产生的氨基酸再通过氧化还原反应以生成气态氨，利用碱性铜离子氧化氨生成蓝色化合物，蓝色化合物的浓度与样品中氮的含量成正比，从而计算出样品中蛋白质的含量。
二、实验仪器和试剂1. 仪器：水浴器、移液器、分析天平。
2. 试剂：包括0.1mol/L NaOH、1% CuSO4、1% KNaC4H4O6、1% Na2SO4、 Na2CO3和测定氯离子的盐酸铵铁Ⅲ溶液等。
三、实验步骤1. 准备样品：首先将待测样品去除水分，将10mg的样品放入烘箱中加热到60℃，持续4h使其干燥。
取出后冷却，称取约10mg-20mg样品，转移到干净、干燥的燃烧器中。
2. 水解：加入3ml的6mol/L HCl，进行加热水解。
将燃烧器放到水浴器中，加入适量的水，然后用酒精灯或燃气灯加热至沸腾。
持续水解1h，注意不要使燃烧器干燥，需要时加入适量的水。
3. 去除氨：过滤水解液，将滤液倒入容量瓶中，并加入足量的NaOH溶液，使pH值达到9-10。
再加入10ml的Na2SO4溶液，混匀。
然后将瓶口拔开，将瓶口放在水浴器中并加入适量的NaOH溶液，使瓶内的氨气完全挥发，待液面稳定后用盖子盖好。
4. 确定还原态铜离子的数量：取一定量的0.1mol/L NaOH溶液，加入CuSO4和KNaC4H4O6，混匀后加入约1g的Na2CO3，加水定容，制成标准CuSO4溶液。
5. 滴定：取出约5ml水解液，放入锥形瓶中加清水至刻度线，加入50μl的盐酸铵铁Ⅲ溶液，混匀。
用标准CuSO4溶液滴定至液体颜色由黄变蓝。
蛋白质的测定方法—凯氏定氮法
蛋白质的测定方法—凯氏定氮法一、原理食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解，产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。
碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后用盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质含量。
二、试剂1、硫酸铜硫酸钾浓硫酸氢氧化钠2、硼酸溶液（20g/L）：称取20g硼酸，加水溶解并稀释至1000ml。
3、氢氧化钠溶液（400g/L）：称取400gNaOH加水溶解后，放冷，并稀释至1000ml。
4、盐酸标准溶液（0.05mol/L）5、甲基红乙醇溶液（1g/L）：称取0.1g甲基红，溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100ml。
6、溴甲酚绿乙醇溶液（1g/L）：称取0.1g溴甲酚绿，溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100ml。
7、甲基红—溴甲酚绿混合指示剂：临用时以1:5混合。
三、测定1、试样处理（消化）：准确称取水解胶原蛋白0.5g,准确至0.0001g，硫酸铜0.2g，硫酸钾6g于干燥洁净的凯氏定氮管中，至消化炉上，加浓硫酸20ml，盖帽。
开启消化炉（温度设定为400℃），仪器大约20分钟达到设定温度，开始计时，样品消化需2-3h，至液体呈蓝绿色并澄清透明后。
断电，放冷。
2、蒸馏与吸收：将消化好的试样转移至100ml容量瓶中，加水（边加边缓慢振摇容量瓶，由于样品放热，操作时戴手套以免烫伤）稀释至100ml容量瓶中，摇匀，备用。
同时做空白试验。
向接收瓶中加入硼酸（20g/L）50ml及10D甲基红—溴甲酚绿混合指示剂。
打开凯氏定氮仪电源开关，打开冷却水，设置加碱（40%的NaOH 溶液）时间为7秒，蒸馏时间为6分钟，取定容后溶液10ml到消化管中，放置到相应位置。
关闭安全门，开机预热3分钟后按启动键开始加碱、蒸馏。
当吸收液呈中性时，停止吸收。
用0.05mol/L盐酸标准液滴定接收液，颜色由绿色变为灰红色即为滴定终点，记录消耗盐酸体积。
3、计算C*(V1-V0)*0.014X=----------------------*F*100M*10/100其中水解胶原蛋白换算系数F为5.791、注意事项1、开机预热3分钟，第一个样品测试用蒸馏水代替样品，加碱时间设置为0，使仪器预热。
凯氏定氮法测蛋白质含量
凯⽒定氮法测蛋⽩质含量凯⽒定氮法测蛋⽩质含量原理蛋⽩质是含氮的有机化合物。
⾷品与硫酸和催化剂⼀同加热消化，使蛋⽩质分解，分解的氨与硫酸结合⽣成硫酸铵。
然后碱化蒸馏使氨游离，⽤硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋⽩质含量。
1. 有机物中的胺根在强热和CuSO4，浓H2SO4作⽤下，硝化⽣成（NH4）SO42反应式为：2NH2+H2S04+2H＝(NH4)2S04（其中CuSO4做催化剂）2. 在凯⽒定氮器中与碱作⽤，通过蒸馏释放出NH3，收集于H3BO3溶液中反应式为:(NH4)2SO4+2NaOH＝2NH3+2H2O+Na2SO42NH3+4H3BO3＝(NH4)2B4O7+5H2O3. ⽤已知浓度的H2SO4（或HCI）标准溶液滴定，根据HCI消耗的量计算出氮的含量，然后乘以相应的换算因⼦，既得蛋⽩质的含量反应式为：(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O＝(NH4)2SO4+4H3BO3(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O＝2NH4Cl+4H3BO3试剂所有试剂均⽤不含氨的蒸馏⽔配制。
硫酸铜。
硫酸钾。
硫酸。
2%硼酸溶液。
混合指⽰液：1份0.1%甲基红⼄醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿⼄醇溶液临⽤时混合。
也可⽤2份0.1%甲基红⼄醇溶液与1份0.1%次甲基蓝⼄醇溶液临⽤时混合。
40%氢氧化钠溶液。
0.025mol/L硫酸标准溶液或0.05mol/L盐酸标准溶液。
仪器定氮蒸馏装置：如图所⽰。
凯⽒定氮法仪器1.安全管2.导管3.汽⽔分离管4.样品⼊⼝5.塞⼦6.冷凝管7.吸收瓶8.隔热液套9.反应管10.蒸汽发⽣瓶操作⽅法1、样品处理：精密称取0.2-2.0g固体样品或2-5g半固体样品或吸取10-20ml液体样品（约相当氮30-40mg），移⼊⼲燥的100ml或500ml定氮瓶中，加⼊0.2g硫酸铜，6g硫酸钾及20毫升硫酸，稍摇匀后于瓶⼝放⼀⼩漏⽃，将瓶以45度⾓斜⽀于有⼩孔的⽯棉⽹上，⼩⽕加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停⽌后，加强⽕⼒，并保持瓶内液体微沸，⾄液体呈蓝绿⾊澄清透明后，再继续加热0.5⼩时。
实验二微量凯氏定氮法测定(1)(精)
NH 4 H 2 BO3 HCL NH 4CL H 3 BO3
实验材料与试剂
实验材料：食用面粉 实验试剂： 浓硫酸 30%氢氧化钠溶液 克氏催化剂 2%硼酸 指示剂 0.01M HCL
实验器材
凯氏烧瓶 电炉 凯氏定氮蒸馏装置 锥形瓶 100ml容量瓶 酸式滴定管
注意事项
本法适用于0.05-3.0mg氮，样品中含氮量 过高时，则应减少取样量或将样液稀释。 勿使样品粘于烧瓶颈部。放置液体样品时， 需将吸管插至烧瓶底部再放样：如固体样 品，可将样品卷在纸内，平插入烧瓶底部， 然后再将烧瓶直起，纸卷内的样品即完全 放在烧瓶底部。
蒸馏完毕，先将蒸馏出口离开液面，继续蒸馏
操作步骤
消化： 准确称取1克食用面粉，用称量纸卷好小心送入至50毫升 的凯氏烧瓶底部，切勿沾于瓶口或瓶颈上。向另一烧瓶加 入1ml水作空白对照。 在每个烧瓶内加入硫酸钾—硫酸铜混合物（克氏催化剂） 少许，浓硫酸10ml，小瓷片两粒，摇匀。将烧瓶约60度 角固定在铁架上，每个瓶口放一小漏斗，在通风厨内的电 炉上消化。 在消化开始时，应控制火力，不要使液体冲到瓶颈。待瓶 内水汽蒸完，硫酸开始分解并放出SO2白烟后，适当加强 火力，继续消化，直至消化液呈透明绿色为止。消化完毕， 待烧瓶内容物冷却后，加蒸馏水10ml（注意慢加，边加 边摇）。冷却后将瓶内容物转入100ml的容量瓶中，并用 蒸馏水洗烧瓶数次，溶液一并倒入容量瓶，最后定容至刻 度摇匀，做上记号备用。
B、蒸馏：用酒精灯加热（应用挡风板将灯 围拢，维持火力恒定，沸腾不可高于Y管口 以免A室溶液从Y管倒吸，待第一滴蒸馏液 从冷凝柱F顶端滴下时起，继续蒸3-5分钟， 然后将锥形瓶放低，使导管离开液面再蒸2 分钟，最后用蒸馏水洗导管外壁，蒸馏完 毕，取下锥形瓶，随即将蒸馏器洗净。） C、样品及空白蒸馏：用吸量管分别吸取 2ml样品和2ml空白按上述操作步骤进行蒸 馏。
凯氏定氮法测定蛋白质含量
凯氏定氮法测定蛋白质含量简介凯氏定氮法（Kjeldahl method）是一种常用的测定蛋白质含量的方法，它通过将样品中的有机氮转化为氨，然后将氨转化为氨基氮，再由氨基氮计算得出蛋白质的含量。
这个方法的优点是稳定可靠，适用于各种类型的样品。
实验原理凯氏定氮法的实验原理如下：1.样品预处理：将待测样品进行预处理，去除样品中的非氮有机物。
这样可以确保凯氏定氮方法只测定到蛋白质中的氮。
2.消化反应：将预处理后的样品与硫酸相结合，加热至沸腾。
在这个过程中，有机氮将被转化为氨。
3.碱化反应：将消化后的样品中的硫酸中和，加入过量的氢氧化钠溶液，使样品呈碱性。
4.蒸馏捕收：将碱化后的样品进行蒸馏，捕集捕集样品中的氨。
5.滴定：将捕集到的氨溶液与酸反应，使用盐酸或硫酸等强酸进行滴定，直至中和反应结束，测定出反应过程中消耗的酸的体积。
6.计算：根据滴定所消耗的酸的体积，计算出样品中的氨的量，再根据氨和蛋白质含氮的摩尔比例，计算出样品中蛋白质的含量。
实验步骤以下是凯氏定氮法测定蛋白质含量的实验步骤：1.准备样品：根据实验需要，准备待测样品。
样品的选择应根据实验目的和样品的特性进行。
2.样品预处理：将样品经过细碎、研磨等处理，去除样品中的非氮有机物。
3.消化反应：将预处理后的样品与浓硫酸相结合，加热至沸腾。
消化时间一般为2小时。
4.碱化反应：将消化后的样品中的硫酸中和，加入过量的氢氧化钠溶液，使样品呈碱性。
5.蒸馏捕收：将碱化后的样品进行蒸馏，捕集捕集样品中的氨。
6.滴定：将捕集到的氨溶液与酸反应，使用盐酸或硫酸等强酸进行滴定，直至中和反应结束。
7.计算：根据滴定所消耗的酸的体积，计算出样品中的氨的量，再根据氨和蛋白质含氮的摩尔比例，计算出样品中蛋白质的含量。
实验注意事项1.在进行样品消化时，必须控制好加热温度，避免样品的溢出和烧焦。
2.在进行滴定时，应注意控制滴液的速度，避免过量的酸滴入。
3.实验过程中需注意个人安全，避免触及强酸和强碱。
蛋白质含量的测定微量凯氏定氮法
实验准确性保证
1
确保使用的试剂和器具清洁无污染，避免误差。
2
在实验过程中，要严格控制反应温度和时间，确 保反应完全。
3
为保证准确性，建议进行多次重复实验，取平均 值。
实验失败的可能原因及解决方法
原因1
样品消化不完全。解决方法：检查样品是否符合要求，调整消化 条件（如温度、时间、试剂用量等）以确保消化完全。
原因2
蒸馏过程中出现故障。解决方法：检查蒸馏装置是否正常，确保冷 凝水畅通，及时排除故障。
原因3
滴定操作不当。解决方法：加强滴定操作训练，确保操作规范，减 小误差。
06
结论
微量凯氏定氮法的优缺点
优点
微量凯氏定氮法是一种准确、可靠的蛋白质含量测定方法，具有较高的精密度和准确度。该方法操作 简便，试剂用量少，适用于对样品量要求较小的实验。此外，微量凯氏定氮法还可以测定其他氮含量 较高的物质，如氨基酸、肽等。
价值
微量凯氏定氮法的应用价值主要体现在以下几个方面： 首先，在食品工业中，该方法可用于检测食品中蛋白质 的含量，确保产品的质量和安全；其次，在药品行业中 ，微量凯氏定氮法可用于检测药品中蛋白质的含量，保 证药品的质量和有效性；此外，在生物制品领域，该方 法可用于检测蛋白质药物的含量和纯度，为生物制品的 质量控制提供有力支持。因此，微量凯氏定氮法的应用 具有广泛的实际意义和价值。
结果的表示和误差分析
结果表示
测定结果以百分数表示，保留小数点后一位。
误差分析
误差来源可能包括试剂不纯、称样误差、滴定误差等，为减小误差，应选择高纯度试剂，提高称样精度，加强滴 定操作训练。
05
实验注意事项
蛋白质测定-凯氏定氮法
反应室中溶液的颜色
硼酸吸收液的颜色
[注意] ①加NaOH一定要过量，此时溶液生成深蓝色或黑色沉淀
②为防止样液中氨气逸出。一是要水封，二要夹紧废液蝴蝶
夹后再通蒸汽，三要注意接头处有无松漏现象
③ 冷凝管下端先插入硼酸吸收液液面以下才能蒸馏。 吸收液温度不应超过40℃，避免氨气逸出，若超过时 可置于冷水浴中使用。
提高溶液沸点，从而加快有机物分解
浓硫酸 氧化作用：有机物质氧化分解为H2O和CO2
样品预处理
样品充分混匀
固体试样 0.2~2g 半固体试样 2~5g 液体试样 10~25g
直接消化
样品称量、消化
1.000g奶粉 0.2g硫酸铜 6g硫酸钾 20mL浓硫酸 玻璃珠
轻摇
小火加热炭化 至泡沫完全停止
大火加热 保持瓶中液体微沸
若要测定样品的蛋白氮,则需要向样品中加入三氯乙酸溶 液,使其最终浓度为5%,然后测定未加入三氯乙酸的样品
及加入三氯乙酸溶液后样品中的含氮量,进一步计算出蛋 白质含量:
蛋白氮=总氮-非蛋白氮
准确称取某乳粉样品0.800克，经凯氏法消化定容至100ml， 移 取 5ml 消 化 液 进 行 蒸 馏 ， 用 20ml 硼 酸 吸 收 ， 再 用 0.05000mol/lHCl滴定，结果消耗5.00ml，试计算该乳粉的 蛋白质含量？
实验
奶粉中蛋白质的测定 ——凯氏定氮法
【基础知识】
蛋白质概述
蛋白质是食品营养价值的重要指标，含N是蛋白质区 别其他有机化合物的主要标志。大多数蛋白质含氮量
接近，一般来说，pro的平均含氮量为16%，即一份 氮相当于6.25份蛋白质，此数值称为蛋白质系数。
注意：
不同种类食品的蛋白质系数有所不同，如玉米、荞麦、 青豆、鸡蛋等为6.25，花生为5.46，大米为5.95，大 豆及其制品为5.71，小麦粉为5.70、全小麦、大麦、 燕麦、裸麦和小米是5.83；硬果类为5.30；牛乳及其 制品为6.38。
凯氏定氮法测定蛋白质含量
凯氏定氮法测定蛋白质含量【凯氏定氮法测定蛋白质含量】引言：蛋白质是生物体中非常重要的一类有机物质，它在细胞结构、代谢调节、酶催化等方面都起到至关重要的作用。
因此，准确测定蛋白质的含量对于研究生物体的生理功能和代谢过程十分重要。
凯氏定氮法是一种常用的测定蛋白质含量的方法，它利用蛋白质中的氮元素与含氮化合物反应，通过测定反应生成物中的氨基氮含量来确定蛋白质的含量。
本文将一步一步地介绍凯氏定氮法测定蛋白质含量的原理、实验步骤以及注意事项。
一、原理：凯氏定氮法的原理基于蛋白质是含有较高比例的氮元素的化合物。
测定蛋白质的含量可以通过测定样品中氨基氮的含量来实现，其中氨基氮与蛋白质的含量呈线性关系。
凯氏定氮法的核心步骤是将蛋白质样品与含有氧化剂的酸溶液一起加热，使蛋白质中的氮元素被氧化转化为氨基氮，然后用氨盐指示剂反应形成带有颜色的化合物，最后通过比色分析来测定蛋白质中氮元素的含量。
二、实验步骤：1. 实验前准备：根据实验需求准备蛋白质样品、凯氏试剂、氨盐指示剂等。
2. 样品制备：将蛋白质样品称取适量，加入酸性溶液中溶解，使其完全溶解。
注意保持溶液的酸性，并避免样品中的氨基酸被过度氧化。
3. 氮元素的氧化：将样品溶液与凯氏试剂混合，在适当的温度下加热，使样品中的氮元素被氧化转化为氨基氮。
反应时间根据样品的性质而定，一般为1-2小时。
4. 反应结束：冷却样品溶液，使其达到室温。
反应结束后，样品中的蛋白质会被转化为氨基氮。
5. 比色分析：将反应溶液与氨盐指示剂进行反应，形成带有颜色的化合物。
然后使用分光光度计测定化合物的吸光值。
通过与标准曲线进行比较，可以确定样品中氨基氮的含量，进而计算出蛋白质的含量。
三、注意事项：1. 样品的选择：样品的选择取决于实验的目的，可以是纯蛋白质样品，也可以是含有蛋白质的复杂混合物。
样品的含量和浓度应该适当，以保证实验结果的准确性。
2. 温度和时间的控制：样品与凯氏试剂的加热温度一般为75-105摄氏度，反应时间根据样品的性质而定。
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5、计算
c为标准盐酸溶液摩尔浓度(0.0098M)；
V1为滴定样品消化液用去的盐酸溶液平均mL数； V2为滴定空白液用去的盐酸溶液mL数；
w为样品重量(1g)。
14为氮的相对量子质量。
消化液总量500ml, 蒸馏时消化液用量3ml
样品蛋白质含量(％)=总氮量×6.25
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注意事项
• 冷凝水的开、关 • 自由夹：中间 • 酒精灯：加到2/3，防止燃烧中途不够 • 蒸汽发生器中：水到瓶颈凹陷处 • 火焰
实验二 蛋白质含量的测定―凯氏定氮法
一 目的： • 学习凯氏定氮法测定蛋白质含量的实验原理 • 掌握蒸馏、滴定操作技术
三聚氰胺 C3N6H6
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“蛋白精”
二、原理：蛋白质含N量约为16％，测出含氮量推知蛋白含量
。
消化：有机物与浓硫酸供热，使有机氮全部转化为无机氮-
--硫酸铵。添加硫酸铜和硫酸钾的混合物，前者为催化剂 ，后者提高硫酸沸点。
•
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蒸馏吸收
• 准备: – 取50 mL锥形瓶3个，各加入5 mL 硼酸溶液和1滴指示剂，溶液呈淡紫色，表面皿 覆盖备用。 – 关闭冷凝水，打开自由夹，使蒸汽发生器与大气相通。将锥形瓶放在冷凝器下， 冷凝器下端浸没在液体内。
• 加样:
– 移液管取3 mL消化液（空白液和样品消化液分别做），加入反应室，用小量筒
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mg，消化液5 mL。3及4号瓶中各加相 加样时应直接送人瓶底，不 同量的催化剂和消化液-----对照，以测 要沾在瓶口和瓶颈上。
定试剂中可能含有的微量含氮物质。
消化开始时应控制火力，不使液体
冲到瓶颈。待瓶内水汽蒸完，硫酸开
始分解并放出SO2白烟后，适当加强火 力消化，直至消化液呈透明淡绿色。
• 定容：冷却后，加蒸馏水(慢加，随加 随摇)。将瓶中液体倾入50 mL或100 mL容量瓶，并以蒸馏水洗烧瓶数次， 洗液并入容量瓶，定容。
滴定：标准HCl滴定，直至恢复溶液中原来的氢离子浓度
为止，根据所用标准酸的摩尔数(相当于待测物中氨的摩 尔数)，计算出样品中的总氮量。
NH42B02O02/1+1/1H4Cl → HBO2+NH4Cl
滴定
• 取凯氏烧瓶 标号。各加几颗玻璃珠; • 1及2号瓶中各加样品0.1g，催化剂200
2、消化
– 小心照看，防止反应液喷出 – 防止烧到橡胶管
• 冷凝管末端不用时防在干净的烧杯中，防止NaOH污 染
• 空白：蒸10分钟未变色，再蒸3分钟 • 铁架台：夹子口朝上
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思考题
• 1、何谓消化？如何判断消化终点？ 2、在实验中加入粉末硫酸钾―硫酸铜混合物的作用是什么？ 3、固体样品为什么要烘干？ 4、蒸馏时冷凝管下端为什么要浸没在液体中？ 5、如何证明蒸馏器洗涤干净？ 6、本实验应如何避免误差？
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4、滴定
• 全部蒸馏完毕后，用标准盐酸溶液滴定各锥形瓶中收集的氨量， 硼酸指示剂溶液由绿变淡紫色为滴定终点。
• 注意：使用前检查酸式滴定管漏不漏？止滴定过头！
•
及时记录读数
• 要求：空白液1次，样品消化液2次
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• 总氮量 (％) =
加NaOH溶液5mL，关闭自由夹，少量水封口。 • 蒸馏:
– 关闭自由夹，打开冷凝水。 – 点燃酒精灯，蒸馏开始，锥形瓶中溶液由淡紫色变绿时(约2-3分钟)开始计时，蒸
馏3分钟，移开锥形瓶，使冷凝器下端离开液面约1cm，继续蒸馏1分钟，取下锥 形瓶，表面皿覆盖。 – 蒸馏完毕后，应立即清洗反应室，方法如前所述。 重复3次。最后将自由夹同时 打开，将蒸汽发生器内的全部废水换掉，继续下一次蒸馏。
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3、蒸馏吸收： 改进型凯氏定氮仪
• 特点：将蒸汽发生器、蒸 馏器和冷凝器组成一个整 体，体积小，安装容易， 操作简便。 1)水蒸汽发生器和反应室 2)冷凝器和通气室 3)排水柱
• 关键：搞清水管系统
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蒸馏器的洗涤
• １.接通冷凝水，向蒸汽发生器中加入 一定量的水(以排水口高度为宜)，酒 精灯加热烧开。
CH2NH2COOH+3H2SO4
2CO2+3SO2十4H2O十NH3
2NH3+H2SO4
(NH4)2SO4
蒸馏吸收：浓碱使消化液中的硫酸铵分解，游离出氨，
借水蒸汽将产生的氨蒸馏到硼酸溶液中，硼酸吸氨后使溶
液中的氢离子浓度降低，指示剂变色
消化 蒸馏、吸收
(NH4)2SO4 + 2NaOH → Na2SO4 + 2H2O + 2NH3↑ NH3 + HBO2→ NH4BO2 （H3BO3 → HBO2 + H2O）
• ２.水的自动喷出： – 将蒸馏水从加样室加入反应室 – 将酒精灯移开片刻，反应室内水 自动喷出到蒸汽发生器 – 打开蒸汽发生器出水口，放水。 – 如此反复清洗3-5次。
• ３.清洗后在冷凝管下端放一锥形瓶盛 有5 mL，2％硼酸溶液和1～2滴指示 剂的混合液。如不变色则表明蒸馏装 置内部已洗涤干净。