HIV初筛阳性标本处理及确认
2-HIV抗体初筛及初筛阳性标本处理制度
HIV抗体初筛及初筛阳性标本处理制度
一、概述
初筛用的HIV抗体检测试剂必须是HIV－1/2混合型，常用的初筛检测方法有固相酶联免疫吸附试验（ELISA）、明胶颗粒凝集法（PA）、快速检测法等；由于受试剂组份、标本情况、实验室环境、仪器设备、实验室操作等的影响，出现阳性反应，所以需要一种特异性较高的试剂对初筛阳性的结果予以确定。
确认试验方法包括免疫印迹试验（WB）、条带免疫试验（LIATEK HIVⅢ）、放射免疫沉淀试验（RIPA）及免疫荧光试验（IFA）。
国内常用的是WB。
对于所有经WB确认的标本必须重新采集标本用明胶颗粒凝集法或快速法进行最后复检。
二、检测流程图
1、HIV抗体筛查检测流程
2、HIV抗体确认流程。
HIV初筛实验室样品采集和处理程序
1 范围本文件规定了用于人免疫缺陷病毒（HIV）检测的全血、血清、血浆、细胞样品的采集和处理方法，适用于HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、耐药检测,CD4+和CD8+T淋巴细胞测定和HIV分离培养。
2 样品种类及相应的用途●全血、血清、血浆样品可用于HIV抗体检测。
●抗凝全血可用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定。
●血浆可用于HIV-1病毒载量、基因型及耐药检测。
●全血、血浆样品可用于HIV核酸的定性检测。
●全血可用于HIV-1分离培养。
3 操作步骤3.1 采样前准备根据检测项目的具体要求，确定采集样品的种类、处理、保存及运输的时限和方法，按照临床采血技术规范的要求操作，遵守生物安全要求。
要检查所需物品是否已备齐，是否在有效期内，有无破损，是否足量，特别应检查受检者信息与样品容器表面的标记是否一致，并注明样品采集时间。
选择合适的室内（外）采血空间，受检者坐（卧）于合适的位置，准备采血用具、皮肤消毒用品、采血管及试管架、硬质废弃物容器等。
●采血前，先对装有样品的离心管或滤纸进行标记，标记的内容至少应包括：患者姓名、送检科室、床号3.2 样本采集和处理●抗凝全血：消毒局部皮肤，用加有抗凝剂（EDTA钠盐或钾盐、枸橼酸钠、肝素钠）的真空采血管抽取适量静脉血，或用一次性注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管中，轻轻颠倒混匀6～8次，备用。
●末梢全血：消毒局部皮肤（成人和1岁以上儿童可选择耳垂、中指、无名指。
1岁以下儿童采用足跟部）。
用采血针刺破皮肤，用无菌纱布擦掉第一滴血。
收集滴出的血液，备用。
●血浆：将采集的抗凝全血1500～3000r/min离心15min，上层即为血浆，吸出置于合适的容器中，备用。
●血清：根据需要，用一次性注射器（或真空采血管）抽取5～10ml静脉血，室温下自然放●置1～2h，待血液凝固、血块收缩后再用1500～3000r/min离心15min，吸出血清，置于合适的容器中，备用。
HIV-抗体初筛实验室疫情报告制度
实用文档
HIV 抗体初筛实验室疫情报告制度
初筛检测中发现 HIV 抗体阳性反应的标本，应尽快（城区一般要求在 48 小时内，农村要求在 96小时内）将血样连同原始资料（包括厂家批号、试剂种类、有效期，如 ELISA 实验应附上阴性、阳性对照值，Cutoff 值及样品 OD 值）和送检化验单送卫生行政部门指定的初筛中心实验室，再转送确认实验室，或直接送 HIV 抗体确认实验室。
送检化验单必须由初筛实验室一名直接实验操作人员和一名中级技术职称以上的负责人员签名。
初筛实验室不得向受检者宣布初检阳性反应结果；做好标本收集与检测登记工作，每月 5 日按统一表格向卫生行政部门指定的 HIV 抗体初筛中心实验报告检测情况，如无 HIV 抗体初筛中心实验室，则直接向省级 HIV 抗体确认中心报告。
艾滋病筛查网络实验室HIV抗体初筛阳性标本分析
１２份复核 阳性标本 Ｓ Ｃ １ ／ Ｏ值 大于 ６的确证 阳性 率 为 ９ ． ％ ， 于 ２的 都 阴性 ， 核 阳性 标本 的 ｓ １３ 小 复 ／
Ｃ Ｏ值与确证结果的关系见表 ３ 。
表 ３ 复核 阳性标本 Ｓ Ｃ ／ Ｏ值与确证结果 的关系
按照操 作 说 明书 进 行。确 证 实验 采 用 免 疫 印迹
作 者 简 介 ： 秀 珍 （９５ ） 女 ， 管 技 师 。 徐 １７ 一 ， 主
２ ４ 不 同人群 确证 结果 ．
筛 查 阳性人 群 中孕产期 检查 的确证 阳性率较 低 ，
假 阳性 较多 ， 不同人群 的确证 阳性 情况 见表 ４ 。
２１ ０２年第 ２ 第 １ ４卷 Ｏ期
２ １ Ｖｏ． ４ Ｎ ． ０ ０ ２， １２ ｏ １
的结果 。标本 来 源 变得 复 杂 ， 现 有 的 Ｈ Ｖ抗 体 对 Ｉ
践 培训 ， 技术 水平不 断 提 高 ， 以及 各 检测 试 剂 质 量 的 不断 提高 ， 得 我们 这 几 年 的确 证 阳性 率 呈 上 升趋 使 势 。但 是作 为初筛 中心实 验室 ， 我们 的复核 阳性 率仍 较高 ， 今后在 选择复 核试剂 时尽 量选择 高敏感性 和 高 特 异性 的试剂 ， 避免假 阳性 Ｊ 。 两 种 复 核 试 剂 均 阳 性 的 标 本 确 证 阳 性 率 近 ９ ．％ ； ３７ 而一 阴一 阳的确 证 阳性 率 为 ０ ０ ， 是 还 ．％ 但
２。 ）
表 ２ 两种试剂复核结果与确证结果 比较
检测标 本来源 于辖 区 内所 有 初筛 实 验 室送 检 的
阳性 标本 ， 括术 前检 查 、 病 门诊 、 产期 、 前 检 包 性 孕 婚
查 、 Ｉ 自愿 咨询检测、 ＨＶ 其他羁押人员 、 临床可疑病 人、 阳性感染 者 的配偶及子女 、 专题调 查等人 群 。
HIV实验室SOP文档
韩城市中医院HIV初筛实验室SOP文件一、样本接收登记、处理程序1.样本的接收1.本院的样品接收2.来自本院门诊和病房的标本由门诊和病房的护士采集，先由检验科标本验收者收取。
规定时间内，由HIV筛查实验室进行登记接收。
3.检查样品的状况，记录有无溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况。
对于不合格标本（如溶血、乳糜血等），及时通知护士重新采集。
4.院外的样本接收5.含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的、穿戴防护衣的工作人员打开，用后的包裹应进行消毒。
6.核对标本与送检单，检查样品管有无破损和溢漏。
如有发现溢漏应立即将尚存留的样品移出、对样品管和盛器消毒，同时还要报告有关领导和专家。
7.检查样品的状况，记录有无严重溶血，微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况，如果污染过重或者认为样品不能被接受，则应将样品安全废弃，并要将样品情况通知送样人。
8.打开标本容器时要小心，以防内容物泼溅。
样品处理时若内容物有可能溅出，则应在生物安全柜中戴手套进行。
同时应戴口罩，防护镜，以防皮肤或黏膜污染。
9.因特殊临床治疗导致自发荧光的样品不能用于荧光方法测试。
10.接收样品是应填写HIV筛查试验室标本接收登记。
2.样本的登记记录HIV筛查试验室样本登记表，实验室收到标本后应及时进行有关参数登记，包括受检者的姓名、性别、人群类别、试管编号、检验结果（初筛）、送检日期、报告日期和3.样本的处理标本在室温下自然放置1-2小时，待血液凝固、血块收缩后再用3000r/min离心15min，吸出血清备用。
3.样本的保存用于抗体检测的血清或血浆样品，应存放于-20℃以下，短期（1周内）进行检测的样品可存放于2-8℃。
5.样品的运送实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送全血。
1.应采用WHO提出的三级包装系统1.1第一层容器：装样品，要求防渗漏。
样品应置于带盖的试管内，试管试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者的姓名、种类和采集时间。
hiv初筛阳性标本处理及确认[宝典]
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一、
目的
如何处理HIV初筛阳性标本及确认
十九、责任
HIV初筛实验室工作人员及使用者严格遵守
二十、程序
１、对HIV抗体初筛试验，呈阴性反应的样品可出具“HIV抗体阴性”报告；对初筛呈阳性反应的样品用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的筛查试剂重复检测。
如两种试剂复测均呈阴性反应，则报告“HIV抗体筛查报告”阴性；如均呈阳性反应，或一阴一阳，则应按照《全国HIV 检测管理规范》的要求送艾滋病确认实验室进行确证试验。
对初筛试验呈阳性反应者不能出阳性报告，可出具“HIV抗体待复查”报告。
2、初筛试验呈阳性反应样品，需送上级实验室进行复测或确认，需要填写“HIV抗体复测送检单”，经实验室负责人和1名专业检验人员审核签字。
送疾病控制中心艾滋病筛查中心实验室。
3、若艾滋病中心实验室仍未能确认之标本，应在备注中注明“3个月后复检”，同时进行以下处理：每3个月随访复检一次，连续2次，共6个月。
如果检测时暴露时间已超过3个月，则在3个月后随访一次，将前后2份样本同时送检，对仍呈不确定或阴性反应则报告“HIV抗体阴性”。
如果在随访期间出现带型进展，符合HIV抗体阳性判定标准则报告“HIV 抗体阳性”。
如果确证中心实验室难以确证之样本，则送国家艾滋病参比实验室确证。
3、初筛试验呈阳性反应样品，进一步送检、本室冰冻保存后不在需要的样品的处置应符合《实验室生物安全通用要求》和《消毒技术规范》。
4、从HIV实验室出来的所有废弃物，包括不再需要的样品、培养物和其它物品，均应视为感染性废弃物，应置于专用的密封防漏容器中，安全运至消毒室，并在高压消毒后再进行处理或废弃。
HIV初筛实验室样品采集和处理程序
●全血、血清、血浆样品可用于HIV抗体检测。
●抗凝全血可用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定。
●血浆可用于HIV-1病毒载量、基因型及耐药检测。
●全血、血浆样品可用于HIV核酸的定性检测。
●全血可用于HIV-1分离培养。
3 操作步骤
3.1 采样前准备
根据检测项目的具体要求，确定采集样品的种类、处理、保存及运输的时限和方法，按照临床采血技术规范的要求操作，遵守生物安全要求。
本文件规定了用于人免疫缺陷病毒hiv检测的全血血清血浆细胞样品的采集和处理方法适用于hiv抗体检测抗原检测核酸检测耐药检测cd4和cd8t淋巴细胞测定和hiv分离培养
HIV初筛实验室样品采集和处理程序
1 范围
本文件规定了用于人免疫缺陷病毒（HIV）检测的全血、血清、血浆、细胞样品的采集和处理方法，适用于HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、耐药检测,CD4+和CD8+T淋巴细胞测定和HIV分离培养。
适的容器中，备用。
●根据检测要求选用适当的抗凝剂，如CD4+和CD8+T淋巴细胞测定可选用EDTA钠盐或钾盐、
枸橼酸钠、肝素钠，HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选用EDTA钠盐或钾盐或枸橼酸钠。
●采血完成后的穿刺针头必须丢弃于尖锐危险品容器里，妥善处理，防止发生职业暴露。
●样品采集后处理、保存、运输的时限和条件，因不同的检测项目而异，应参见不同检测项
●样品接收必须在具有处理感染性材料能力的实验室内，由经过培训的、穿戴好工作服、戴
好乳胶手套的工作人员接收。
●核对样品与送检单，检查样品管有无破损和溢漏。如发现溢漏应立即将尚存留的样品移出，
对样品管和盛器消毒，同时报告实验室负责人和上一级实验室技术人员。
HIV病毒核酸检测标本采集、送检、处理流程
HIV病毒核酸检测标本采集、送检、处理流程1. 标本采集1.1 采集过程- 标本采集应由经过相应培训的医务人员进行。
- 采集前应充分向受检者解释采集过程，并获得其知情同意。
- 采集时应采取严格的无菌操作，以避免污染。
- 一般采集静脉全血样本，采集量不少于5ml。
1.2 标本处理- 采集后的标本应尽快送至实验室，避免暴露时间过长。
- 采用专用的血液收集管，确保标本完整无漏。
- 标本送至实验室前，应妥善保存并严禁摇晃。
2. 送检流程2.1 标签标识- 标本送检前，应在采集管上粘贴完整、清晰的条码标签，以确保标本追踪可靠性。
2.2 填写送检单- 标本送检时，应填写完整的送检单，包括受检者个人信息、采集时间、送检目的等相关信息。
2.3 送检方式- 送检可选择邮寄或快递方式，确保标本能够安全送达实验室。
- 快递包装需符合相关规定，避免标本在运输过程中受损。
3. 处理流程3.1 标本分离- 实验室接收标本后，应立即进行核酸分离，以保证分析的准确性。
3.2 核酸提取- 将分离的标本进行核酸提取，提取后的核酸可用于后续的检测操作。
3.3 核酸检测- 采用合适的核酸检测方法，如聚合酶链式反应（PCR）等，对提取的核酸进行检测。
3.4 结果解读- 核酸检测结果应由经验丰富的专业人员进行解读，并做出相应的结果报告。
4. 结论本文档简要介绍了HIV病毒核酸检测标本采集、送检、处理流程。
标本采集要求医务人员进行，并在采集前向受检者解释采集过程。
送检时需填写完整的送检单，并确保标本的追踪可靠性。
实验室应迅速进行标本分离、核酸提取和核酸检测，并由专业人员进行结果解读。
以上流程的规范实施可提高HIV病毒核酸检测的准确性和可靠性。
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一、目的
如何处理HIV初筛阳性标本及确认
二、责任
HIV初筛实验室工作人员及使用者严格遵守
三、程序
１、对HIV抗体初筛试验，呈阴性反应的样品可出具“HIV抗体阴性”报告；对初筛呈阳性反应的样品用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的筛查试剂重复检测。
如两种试剂复测均呈阴性反应，则报告“HIV抗体筛查报告”阴性；如均呈阳性反应，或一阴一阳，则应按照《全国HIV 检测管理规范》的要求送艾滋病确认实验室进行确证试验。
对初筛试验呈阳性反应者不能出阳性报告，可出具“HIV抗体待复查”报告。
2、初筛试验呈阳性反应样品，需送上级实验室进行复测或确认，需要填写“HIV抗体复测送检单”，经实验室负责人和1名专业检验人员审核签字。
送疾病控制中心艾滋病筛查中心实验室。
3、若艾滋病中心实验室仍未能确认之标本，应在备注中注明“3个月后复检”，同时进行以下处理：每3个月随访复检一次，连续2次，共6个月。
如果检测时暴露时间已超过3个月，则在3个月后随访一次，将前后2份样本同时送检，对仍呈不确定或阴性反应则报告“HIV抗体阴性”。
如果在随访期间出现带型进展，符合HIV抗体阳性判定标准则报告“HIV 抗体阳性”。
如果确证中心实验室难以确证之样本，则送国家艾滋病参比实验室确证。
3、初筛试验呈阳性反应样品，进一步送检、本室冰冻保存后不在需要的样品的处置应符合《实验室生物安全通用要求》和《消毒技术规范》。
4、从HIV实验室出来的所有废弃物，包括不再需要的样品、培养物和其它物品，均应视为感染性废弃物，应置于专用的密封防漏容器中，安全运至消毒室，并在高压消毒后再进行处理或废弃。
5、所有废弃物应按照HIV污染物品处理。
由专人按本实验室制定的程序和方法进行清洁和消毒，做好登记。