分子生物学名词解释

合集下载

分子生物学名词解释最全

分子生物学名词解释最全

第一章名词解释1.基因(gene)是贮存遗传信息的核酸(DNA或RNA)片段,包括编码RNA和蛋白质的结构基因以及转录调控序列两部分。

2. 结构基因(structural gene)指基因中编码RNA和蛋白质的核苷酸序列。

它们在原核生物中连续排列,在真核生物中则间断排列。

3. 断裂基因(split gene 真核生物的结构基因中,编码区与非编码区间隔排列。

4. 外显子(exon)指在真核生物的断裂基因及其成熟RNA中都存在的核酸序列。

5. 内含子(intron)指在真核生物的断裂基因及其初级转录产物中出现,但在成熟RNA 中被剪接除去的核酸序列。

6. 多顺反子RNA(polycistronic/multicistronic RNA)一个RNA分子上包含几个结构基因的转录产物。

原核生物的绝大多数基因和真核生物的个别基因可转录生成多顺反子RNA。

7. 单顺反子RNA(monocistronic RNA)一个RNA分子上只包含一个结构基因的转录产物。

真核生物的绝大多数基因和原核生物的个别基因可转录生成单顺反子RNA。

8. 核不均一RNA(heterogeneous nuclear RNA, hnRNA)是真核生物细胞核内的转录初始产物,含有外显子和内含子转录的序列,分子量大小不均一,经一系列转录后加工变为成熟mRNA。

9. 开放阅读框(open reading frame, ORF)mRNA分子上从起始密码子到终止密码子之间的核苷酸(碱基)序列,编码一个特定的多肽链。

10. 密码子(codon)mRNA分子的开放读框内从5' 到3' 方向每3个相邻的核苷酸(碱基)为一组,编码多肽链中的20种氨基酸残基,或者代表翻译起始以及翻译终止信息。

11. 反密码子(anticodon)指tRNA分子反密码环中间3个相邻的核苷酸(碱基),它们与mRNA上的三联体密码子互补配对,确保蛋白质合成时氨基酸按照密码子对号入座。

分子生物学—名词解释

分子生物学—名词解释

顺反子:即结构基因,是一段核苷酸序列,能编码一条完整的多肽链。

断裂基因(split gene):在真核生物基因组中,基因是不连续的,在基因的编码区域内部含有大量的不编码序列,从而打断了对应于蛋白质的氨基酸序列。

这种不连续的基因又称断裂基因或割裂基因。

内含子(intron):真核生物基因中,不为蛋白质编码的、在mRNA加工过程中消失的DNA 序列,称内含子。

外显子(exon):真核生物基因中,在mRNA上出现并代表蛋白质的DNA序列,叫外显子. 衰减子(attenuator):指原核生物的操纵子中明显衰减乃至停止转录作用的一段核苷酸序列,位于操纵子上游。

SD序列:原核生物中含有的一段位于起始AUG序列上游10nt左右的富有嘌呤碱基的区域启动子(promoter):DNA链上能指示RNA转录起始的DNA序列称启动子。

RNA剪接(RNA splicing):从DNA模板链转录出的最初转录产物中除去内含子,并将外显子连接起来形成一个连续的RNA分子的过程。

RNA编辑(Edit):在mRNA水平上改变遗传信息的过程。

具体说来,指基因转录产生的mRNA分子中,由于核苷酸的缺失,插入或置换,基因转录物的序列不与基因编码序列互补,使翻译生成的蛋白质的氨基酸组成,不同于基因序列中的编码信息现象。

反密码子(anticodon):位于tRNA反密码环中部、可与mRNA中的三联体密码子形成碱基配对的三个相邻碱基.在蛋白质的合成中,起解读密码、将特异的氨基酸引入合成位点的作用.miRNA:在真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码RNA,其大小长约20~25个核苷酸。

结构域(domain):蛋白质三级结构被分割成一个或数个球状或纤维状折叠较为紧密的区域,各行其功能,该区域称为结构域。

蛋白家族(protein family):具有序列相似性基因表达的产物。

转录因子(TF):专为构建起始复合物的基本转录因子,以及在转录过程中调节RNApol 活性的转录调控因子,这两类蛋白因子的统称可读框(ORF):是指从起始密码子起到终止密码子为止的一段连续的密码子区域;或在DNA序列测定中由计算机系统辨认出的可能编码区域,始于ATG,止于TGA、TAA或TAG的连续密码子区域。

分子生物学名词解释

分子生物学名词解释

2. 基因(gene)是一段携带功能产物(多肽,蛋白质,tRNA和rRNA和某些小分子RNA信息的DNA片段,是控制某种性状的的遗传单位。

3. 密码子偏爱 ( codon bias ):指在不同物种的基因中经常为某种氨基酸编码的只是其中的一个密码子。

4. 基因的剪接位点 ( splice sites ): 一般有特定的序列特征,计算机程序利用这种序列特征可预测将近50%的外显子及20%的完整基因。

值佯谬( C value paradox ):生物体的进化程度与基因组大小之间不完全成比例的现象。

N 值佯谬( N value paradox ):基因组中基因数目与生物进化程度或复杂程度的不对称性6. 基因组(genome :是指一个细胞或生物体的一套完整的单倍体遗传物质.()7. 基因家族(genefamily): 指核苷酸序列或编码产物的结构具有一定同源性的一些基因。

(04)8. 基因超家族( gene superfamily ):结构上具有一定的相似性,但功能不一定相似,且进化上的亲缘关系较远。

如免疫球蛋白基因超家族、丝氨酸蛋白酶基因超家族等( 05)9. 基因组学(genomics):发展和应用基因作图、DNA测序、基因定位等新技术以及计算机程序,分析生命体(包括人类)全部基因组结构及功能10. 微卫星DNA(microsatellite DNA:或称简短串连重复,由2~6个核苷酸的重复顺序组成,如(CA)n、(GA)n、(TA)n,n 为15~30具有多态性,卫星长度常小于1OObp,大量分布每条染色体11. 小卫星DNA(minisatellite DNA): 由6~12个核酸的重复顺序组成,位于染色体端粒及其附近,长度数十~数千bp12. 大卫星DNA(macrosatellite DNA ):即经典的卫星DNA由数十个核苷酸的重复单位构成,主要存在于异染色区和着丝粒。

13. 蛋白质组(proteome) 是指细胞或组织表达的全部蛋白质14. 蛋白质组学(proteomics): 是从整体上采取高通量/ 大规模手段研究所有蛋白组成及其活动规律.15. 单核苷酸多态性( single nucleotide polymorphism, SNP ) : 指发生在基因组序列中单个碱基的改变引起的DNA序列的变化16. 限制性片段长度多态性( restriction fragment length polymorphism ,RFLP:DNA位点的多态性导致限制性内切酶切割位点的差异,即RFLP是第一代DNA遗传学标记()17. 顺式作用元件(cis-acting element) :真核生物中能够被基因调控蛋白特异性识别和结合,并对自身基因转录起始有调节作用的DNA序列18. 核心启动子(Core promoter):常由TATA盒、位于TATA盒上游的的上游启动子元件、以转录点为中心的起始子和下游启动子元件, 4 个元件组合而成。

分子生物学名词解释

分子生物学名词解释

中心法则:生物体遗传信息流动途径。

现包括反转录和RNA复制等内容。

复制:是指遗传物质的传代,以母链DNA为模板合成子链DNA的过程。

转录:以DNA的一条链的一定区段为模板,按照碱基配对原则,合成一条与DNA链互补的RNA链的过程。

翻译:以mRNA为模板,氨酰-tRNA为原料直接供体,在多种蛋白质因子和酶的参与下,在核糖体上将mRNA分子上的核苷酸顺序表达为有特定氨基酸顺序的蛋白质的过程。

翻译的基本要素:tRNA、核糖体和mRNA顺式作用元件:指调控真核生物结构基因转录的DNA序列,包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和反应元件等。

它们通过与反式作用因子相互作用来发挥转录调控作用。

反式作用因子:指真核基因的转录调节蛋白,包含DNA结合结构域和转录激活结构域。

它们与顺式作用元件、RNA聚合酶相互作用,以及转录因子之间相互协同或者拮抗,反式调控另一基因的转录。

操纵子:原核生物绝大多数基因按照功能相关性成簇串联排列,与启动子、操纵基因等调控元件共同组成一个转录单位,实现协调表达。

(原核生物中控制蛋白质合成的功能单位,包括结构基因和调控部分。

)乳糖操纵子:控制β半乳糖苷酶诱导合成的操纵子。

包括调控元件P(启动子)和O(操纵基因),以及结构基因lacZ、lacY和lacA。

在没有诱导物时,调节基因lacI编码阻遏蛋白,与操纵基因O结合后抑制结构基因转录;乳糖的存在可与阻遏蛋白结合诱导结构基因转录,以代谢乳糖。

色氨酸操纵子:控制色氨酸合成的元件之一。

大肠杆菌的色氨酸操纵子有启动子和操纵基因控制一个多顺反子mRNA的转录,控制编码色氨酸生物合成需要的各种酶,另外,还有前导区和衰减区。

当培养基中有足够的色氨酸时,操纵子关闭,,缺乏色氨酸时,操纵子开启。

诱导与阻遏:若调节蛋白和操纵基因结合后,抑制其所调控的基因转录,称阻碍物,反之诱导。

(与调节蛋白结合的效应小分子,辅诱导物)基因表达:指将来自基因的遗传信息合成功能性基因产物的过程。

(完整版)分子生物学名词解释

(完整版)分子生物学名词解释

Central dogma (中心法则):DNA 的遗传信息经RNA 一旦进入蛋白质就不能再输出了。

Reductionism (还原论):把问题分解为各个部分,然后再按逻辑顺序进行安排的研究方法.Genome (基因组):单倍体细胞的全部基因。

transcriptome(转录组):一个细胞、组织或有机体在特定条件下的一组完整基因。

roteome (蛋白质组):在大规模水平上研究蛋白质特征,获得蛋白质水平上的关于疾病的发生、细胞代谢等过程的整体而全面的认识。

Metabolome (代谢组):对生物体内所有代谢物进行定量分析并寻找代谢物与生病理变化的相关关系的研究方法。

Gene (基因):具有遗传效应的DNA 片段。

Epigenetics (表观遗传学现象):DNA 结构上完全相同的基因,由于处于不同染色体状态下具有不同的表达方式,进而表现出不同的表型。

Cistron (顺反子):即结构基因,决定一条多肽链合成的功能单位。

Muton(突变子):顺反子中又若干个突变单位,最小的突变单位被称为突变子。

recon(交换子):意同突变子.Z DNA(Z型DNA) :DNA 的一种二级结构,由两条核苷酸链反相平行左手螺旋形成。

Denaturation (变性):物质的自然或非自然改变.Renaturation (复性):变形的生物大分子恢复成具有生物活性的天然构想的现象。

egative superhelix (负超螺旋):B-DNA 分子被施加左旋外力,使双螺旋体局部趋向松弛,DNA分子会出现向右旋转的力的超螺旋结构。

C value paradox (C值矛盾):生物overlapping gene(重叠基因):不同的基因公用一段相同的DNA序列。

体的大C值与小c值不相等且相差非常大.interrupted gene (断裂基因):由若干编码区和非编码区连续镶嵌而成的基因。

splitting gene(间隔基因):意思与断裂基因相同。

分子生物学-名词解释

分子生物学-名词解释

名词解释:核酸结构,性质与功能分子生物学:是从分子水平研究生命现象、生命的本质、生命活动及其规律的科学。

医学分子生物学:是从分子水平研究人体在正常和疾病状态下生命活动及其规律的一门科学。

它主要研究人体生物大分子和大分子体系的结构、功能、相互作用及其同疾病发生、发展的关系。

基因:是核酸分子中贮存遗传信息的遗传单位,是指DNA特定区段,是RNA和蛋白质相关遗传信息的基本存在形式。

大部分生物中构成基因的核酸是DNA, 少数生物(如RNA病毒)是RNA。

核酸的一级结构:核酸中核苷酸的排列顺序。

组成DNA分子的脱氧核糖核苷酸(dAMP, dGMP, dTMP, dCMP)的排列顺序。

组成RNA分子的核糖核苷酸(AMP, GMP, UMP, CMP)的排列顺序。

由于核苷酸间的差异主要是碱基不同,所以也称为碱基序列。

DNA的一级结构:四种脱氧核糖核苷酸(dAMP, dGMP, dTMP, dCMP)或四种碱基的排列顺序。

DNA三级结构:DNA分子在形成双螺旋结构的基础上,进一步折叠成超螺旋结构(supercoil) (原核细胞),或在蛋白质的参与下,进行精密的包装(真核细胞),所形成的空间结构。

超螺旋结构(superhelix 或supercoil):DNA双螺旋链再盘绕即形成超螺旋结构。

正超螺旋(positive supercoil)盘绕方向与DNA双螺旋方同相同;负超螺旋(negative supercoil)盘绕方向与DNA双螺旋方向相反。

结构基因:在基因片段中,贮存着一个特定的转录RNA分子的DNA序列,这段序列决定该RNA分子的一级结构,就称为结构基因。

外显子(exon):结构基因中在成熟RNA分子中保留的相对应的序列内含子(intron):是指RNA分子剪接时删除部分相对应的结构基因序列基因转录调控序列:与转录相关的、结构基因以外的序列启动子(promoter):是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列,位于结构基因转录起始点的上游,偶见位于转录起始点的下游。

分子生物学名词解释

分子生物学名词解释

分子生物学名词解释分子生物学名词解释1. 基因(顺反子)(gene(cistron)):指能产生一条肽链的DNA 片段。

包括编码区和其上下游区域(引导区和尾部),以及在编码片段间(外显子)的割裂序列(内含子)。

2. DNA聚合酶(DNA polymerase):合成子代DNA链(在DNA模板的指导下)的酶。

任何独特的酶可在修复或复制(或两者都有)中发挥作用。

3. RNA聚合酶(RNA polymerase):使用DNA作为模板合成RNA的酶(正式应为DNA依赖性RNA聚合酶)。

4. 反转录酶(reverse transcriptase):以单链RNA为模板合成双链DNA的酶。

5. A deoxyribonuclease(DNAase)is an enzyme that attacks bonds in DNA. It may cut onlyone strand or both strand.DNA酶:攻击DNA之间化学键的酶。

(第二句自译:它可能仅仅切断单链或双链。

)6. RNA酶(ribonucleases(RNAase)):底物为RNA的酶,它可对双链或单链RNA特异性作用,它可为核酸内切酶或核酸外切酶。

7. 核酸外切酶(exonuclease):每次可从核酸链一头切割一个核苷酸的酶,可能特异性切割DNA或者RNA的5‘或者3’端。

8. 核酸内切酶(endonuclease):切割核酸链内的化学键。

可特异性地切割RNA或者单链或双链DNA。

9. A hotspot is a site in the genome at which the frequencyof mutation (or recombination)is very much increased, usually by at least an order of magnitude relative to neighboring sites.热点:突变或重组频率显著增加的位点。

分子生物学名词解释

分子生物学名词解释

名词解说1.基因( gene):2.构造基因( structural gene):3.断裂基因( split gene ):4.外显子( exon) :5.内含子( intron ) :6. 多顺反子RNA (polycistronic/multicistronic RNA):7.单顺反子 RNA (monocistronic RNA ) :8.核不均一 RNA (heterogeneous nuclear RNA, hnRNA ) :9.开放阅读框( open reading frame, ORF ):10.密码子( codon) :11.反密码子( anticodon ):12.顺式作用元件( cis-acting element ) :13.启动子( promoter ) :14.加强子( enhancer) :15.核酶( ribozyme )16.核内小分子 RNA ( small nuclear RNA, snRNA )17.信号辨别颗粒( signal recognition particle, SRP )18.上游启动子元件( upstream promoter element )19.同义突变( same sense mutation)20.错义突变( missense mutation)21.无义突变( nonsense mutation)22.移码突变( frame-shifting mutation )23.变换( transition )24.颠换( transversion)(三)简答题1.顺式作用元件怎样发挥转录调控作用?2.比较原核细胞和真核细胞 mRNA 的异同。

3.说明 tRNA 分子的构造特色及其与功能的关系。

4.怎样认识和利用核酶?5.若某一基因的外显子发生一处颠换,对该基因表达产物的构造和功能有什么影响?6.举例说明基因突变怎样致使疾病。

(四)阐述题1.真核生物基因中的非编码序列有何意义?2.比较一般的真核生物基因与其转录初级产物、转录成熟产物的异同之处。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

名词解释(在“分子生物学试题及答案”中找答案)1.cDNA与cccDNA:cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA;cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。

2.标准折叠单位:蛋白质二级结构单元α-螺旋与β-折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块,此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。

几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型,乃至他们的组合型来予以描述,因此又将其称为标准折叠单位。

3.CAP:环腺苷酸(cAMP)受体蛋白CRP(cAMP receptor protein ),cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP(cAMP activated protein )4.回文序列:DNA片段上的一段所具有的反向互补序列,常是限制性酶切位点。

5.micRNA:互补干扰RNA或称反义RNA,与mRNA序列互补,可抑制mRNA的翻译。

6.核酶:具有催化活性的RNA,在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。

7.模体:蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域8.信号肽:在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段,引导蛋白质的跨膜。

9.弱化子:在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。

10.魔斑:当细菌生长过程中,遇到氨基酸全面缺乏时,细菌将会产生一个应急反应,停止全部基因的表达。

产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸(pppGpp)。

PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子,而是影响一大批,所以称他们是超级调控子或称为魔斑。

11.上游启动子元件:是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列,-10区的TATA、-35区的TGACA及增强子,弱化子等。

12.DNA探针:是带有标记的一段已知序列DNA,用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。

13.SD序列:是核糖体与mRNA结合序列,对翻译起到调控作用。

14.单克隆抗体:只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。

15.考斯质粒:是经过人工构建的一种外源DNA载体,保留噬菌体两端的COS区,与质粒连接构成。

16.蓝-白斑筛选:含LacZ基因(编码β半乳糖苷酶)该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)产生蓝色,从而使菌株变蓝。

当外源DNA插入后,LacZ基因不能表达,菌株呈白色,以此来筛选重组细菌。

称之为蓝-白斑筛选。

17.顺式作用元件:在DNA中一段特殊的碱基序列,对基因的表达起到调控作用的基因元件。

18.Klenow酶:DNA聚合酶I大片段,只是从DNA聚合酶I全酶中去除了5’3’外切酶活性19.锚定PCR:用于扩增已知一端序列的目的DNA。

在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴,然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。

20.融合蛋白:真核蛋白的基因与外源基因连接,同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。

二、填空1.DNA的物理图谱是DNA分子的()片段的排列顺序。

2.RNA酶的剪切分为()、()两种类型。

3.原核生物中有三种起始因子分别是()、()和()。

4.蛋白质的跨膜需要()的引导,蛋白伴侣的作用是()。

5.启动子中的元件通常可以分为两种:()和()。

6.分子生物学的研究内容主要包含()、()、()三部分。

7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是()、()这两个实验中主要的论点证据是:()。

8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点:()、()。

9.蛋白质多亚基形式的优点是()、()、()。

10.蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括()、()、()。

11.半乳糖对细菌有双重作用;一方面();另一方面()。

所以需要一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成;同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。

有G时转录从()开始,无G时转录从()开始。

12.DNA重组技术也称为()或()。

最终目的是()。

典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤:①提取供体生物的目的基因(或称外源基因),酶接连接到另一DNA分子上(克隆载体),形成一个新的重组DNA分子。

②将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存,这个过程称为转化。

③对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。

④对含有重组DNA的细胞进行大量培养,检测外援基因是否表达。

13、质粒的复制类型有两种:受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为(),不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为()。

14.PCR的反应体系要具有以下条件:a、b、c、d、15.PCR的基本反应过程包括:()、()、()三个阶段。

16、转基因动物的基本过程通常包括:①将克隆的外源基因导入到一个受精卵或胚胎干细胞的细胞核中;②接种后的受精卵或胚胎干细胞移植到雌性的子宫;③完成胚胎发育,生长为后代并带有外源基因;④利用这些能产生外源蛋白的动物作为种畜,培育新的纯合系。

17.杂交瘤细胞系的产生是由()细胞与()细胞杂交产生的,由于()可以利用次黄嘌呤,()提供细胞分裂功能,所以能在HA T培养基中生长。

18.随着研究的深入第一代抗体称为()、第二代()、第三代()。

19.目前对昆虫病毒的基因工程改造主要集中于杆状病毒,表现在引入();();()。

20.哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别是()、()和()。

21.RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是:()。

其中TFII-D的功能是()。

22.与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用,转录因子与DNA结合的功能域常见有以下几种()、()、()。

23.限制性内切酶的切割方式有三种类型分别是()、(在对称轴3' 侧切割产生3' 粘端(在对称轴处切割产生平段)。

24.质粒DNA具有三种不同的构型分别是:()、()、()。

在电泳中最前面的是()。

25.外源基因表达系统,主要有()、()、()和()。

26.转基因动物常用的方法有:()、()、()。

三、简答1.分别说出5种以上RNA的功能?转运RNA tRNA 转运氨基酸核蛋白体RNA rRNA 核蛋白体组成成信使RNA mRNA 蛋白质合成模板不均一核RNA hnRNA 成熟mRNA的前体小核RNA snRNA 参与hnRNA的剪接小胞浆RNA scRNA/7SL-RNA 蛋白质内质网定位合成的信号识别体的组成成分反义RNA anRNA/micRNA 对基因的表达起调节作用核酶Ribozyme RNA 有酶活性的RNA2.原核生物与真核生物启动子的主要差别?原核生物TTGACA --- TATAA T------起始位点-35 -10真核生物增强子---GC ---CAAT----TATAA—5mGpp—起始位点-110 -70 -253.对天然质粒的人工构建主要表现在哪些方面?天然质粒往往存在着缺陷,因而不适合用作基因工程的载体,必须对之进行改造构建:a、加入合适的选择标记基因,如两个以上,易于用作选择,通常是抗生素基因。

b、增加或减少合适的酶切位点,便于重组。

c、缩短长度,切去不必要的片段,提高导入效率,增加装载量。

d、改变复制子,变严紧为松弛,变少拷贝为多拷贝。

e、根据基因工程的特殊要求加装特殊的基因元件4.举例说明差示筛选组织特异cDNA的方法?制备两种细胞群体,目的基因在其中一种细胞中表达或高表达,在另一种细胞中不表达或低表达,然后通过杂交对比找到目的基因。

例如:在肿瘤发生和发展过程中,肿瘤细胞会呈现与正常细胞表达水平不同的mRNA,因此,可以通过差示杂交筛选出与肿瘤相关的基因。

也可利用诱导的方法,筛选出诱导表达的基因。

5.杂交瘤细胞系的产生与筛选?脾B细胞+骨髓瘤细胞,加聚乙二醇(PEG)促进细胞融合,HA T培养基中培养(内含次黄嘌呤、氨基蝶呤、T)生长出来的脾B-骨髓瘤融合细胞继续扩大培养。

细胞融合物中包含:脾-脾融合细胞:不能生长,脾细胞不能体外培养。

骨-骨融合细胞:不能利用次黄嘌呤,但可通过第二途径利用叶酸还原酶合成嘌呤。

氨基蝶呤对叶酸还原酶有抑制作用,因此不能生长。

骨-脾融合细胞:在HA T中能生长,脾细胞可以利用次黄嘌呤,骨细胞提供细胞分裂功能。

6、利用双脱氧末端终止法(Sanger法)测定DNA一级结构的原理与方法?原理是采用核苷酸链终止剂—2,,3,-双脱氧核苷酸终止DNA的延长。

由于它缺少形成3/5/磷酸二脂键所需要的3-OH,一旦参入到DNA链中,此DNA链就不能进一步延长。

根据碱基配对原则,每当DNA聚合酶需要dNMP参入到正常延长的DNA链中时,就有两种可能性,一是参入ddNTP,结果导致脱氧核苷酸链延长的终止;二是参入dNTP,使DNA链仍可继续延长,直至参入下一个ddNTP。

根据这一方法,就可得到一组以ddNTP结尾的长短不一的DNA片段。

方法是分成四组分别为ddAMP、ddGMP、ddCMP、ddTMP反应后,聚丙烯酰胺凝胶电泳按泳带可读出DNA序列。

7、激活蛋白(CAP)对转录的正调控作用?环腺苷酸(cAMP)受体蛋白CRP(cAMP receptor protein),cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP(cAMPactivated protein )。

当大肠杆菌生长在缺乏葡萄糖的培养基中时,CAP合成量增加,CAP具有激活乳糖(Lac)等启动子的功能。

一些依赖于CRP的启动子缺乏一般启动子所具有的典型的-35区序列特征(TTGACA)。

因此RNA聚合酶难以与其结合。

CAP的存在(功能):能显著提高酶与启动子结合常数。

主要表现以下二方面:①CAP通过改变启动子的构象以及与酶的相互作用帮助酶分子正确定向,以便与-10区结合,起到取代-35区功能的作用。

②CAP还能抑制RNA聚合酶与DNA中其它位点的结合,从而提高与其特定启动子结合的概率。

8、典型的DNA重组实验通常包括哪些步骤?a、提取供体生物的目的基因(或称外源基因),酶接连接到另一DNA分子上(克隆载体),形成一个新的重组DNA分子。

b、将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存,这个过程称为转化。

c、对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。

d、对含有重组DNA的细胞进行大量培养,检测外援基因是否表达。

9、基因文库的构建对重组子的筛选举出3种方法并简述过程。

抗生素抗性筛选、抗性的插入失活、兰-白斑筛选或PCR筛选、差式筛选、DNA探针多数克隆载体均带有抗生素抗性基因(抗氨苄青霉素、四环素)。

相关文档
最新文档