水解南珠液能促进人微血管内皮细胞的增殖和迁移
2024北京高三二模生物汇编：稳态与调节(非选择题)
2024北京高三二模生物汇编稳态与调节（非选择题）一、非选择题1．（2024北京西城高三二模）科研人员对生长素（IAA）参与莲藕不定根（Ar）形成的调控机制进行了一系列研究。
(1)研究发现，10μmol·L-1的IAA能显著促进莲藕Ar的形成，而150μmol·L-1的IAA则起到抑制作用，这体现了IAA的作用具有的特点。
后续研究中IAA处理组均选用10μmol·L⁻¹作为处理浓度。
(2)植物下胚轴分生组织的细胞经发育成根原基（Rp），继续发育并突破表皮形成Ar，研究者通过显微结构观察莲藕Ar的发育过程，结果如图1。
结果表明，IAA通过从而促进了Ar的生长。
(3)IAA氧化酶（IAAO）能氧化分解IAA。
研究者进一步检测了实验组和对照组IAAO活性和内源IAA含量，结果如图2。
据图2推测，施加IAA后促进Ar生长的原因是。
(4)在生长素介导的信号转导机制中，ARF和AUX起到重要作用（图3）。
研究者进一步检测了ARF基因的相对表达量（图4）。
结合图3和图4阐释施加IAA促进莲藕Ar形成的分子机制。
2．（2024北京东城高三二模）哺乳动物幼崽的母亲依恋行为是生命历程中的第一种社会行为，近期我国科学家揭示了该行为的调控机制。
(1)神经调节的基本方式是。
母亲气味作为刺激，使幼崽的相关感受器产生兴奋，兴奋沿着传入神经向传导，经过综合处理最终使幼崽表现出母亲依恋行为。
(2)基因T表达产物是神经递质5-羟色胺（5-HT）合成必需的酶。
为探究5-HT对幼鼠母亲依恋行为的影响，取一对基因T缺失突变杂合小鼠（+/-）进行杂交，利用杂交子代幼鼠进行如下实验。
①如图1．在测试盒子的两侧分别放置来自幼鼠母亲的巢穴物品（A）和未使用过的巢穴物品（B），幼鼠放置在中间空白处，统计幼鼠在两侧的停留时间，结果如图2所示。
实验结果说明。
①为进一步证实上述结论，研究人员对①操作进行了改进：将未使用过的巢穴物品替换为其他雌鼠的巢穴物品，其余处理均相同。
211155019_珍珠水解液对肝窦内皮细胞活力及肝窦毛细血管化的干预作用
基于患者路径的耐多药结核病诊疗结局及其影响因素的分析 １８５ 基金项目：国家自然科学基金（８１９６０７６１、８２０６０８２５、８１９６０７５１）、广西自然科学基金（２０２０ＧＸＮＳＦＡＡ２９７１１９）、中医学广西一流学科（桂教科研〔２０２２〕１号）、广西名中医林江传承工作室（桂中医药科教发〔２０２１〕６号）、广西一流学科建设项目（２０１８ＸＫ０２０）、广西研究生教育创新计划项目（ＹＣＳＺ２０２２００２）和依托广西高发传染病中西医结合转化医学重点实验室项目；第一、二位作者对本文贡献一致·论 著·珍珠水解液对肝窦内皮细胞活力及肝窦毛细血管化的干预作用彭 岳１，杨 妙２，林 江３，赵铁建１，刘 鹏４，刘茜玉２，郭伟倩２１广西中医药大学基础医学院病理生理教研室，南宁５３００００２广西中医药大学研究生学院，南宁５３００００广西中医药大学基础医学院 ３方剂学教研室 ４生物化学教研室，南宁５３００００通信作者：林 江 电话：０７７１ ４７３３７９４，电子邮件：１７１３５５２５４５＠ｑｑ ｃｏｍ摘要：目的 探讨珍珠水解液对肝纤维化时肝窦毛细血管化病变的干预作用及机制。
方法 合浦珍珠水解液与肝窦内皮细胞（ＨＳＥＣ）和肝星状细胞（ＨＳＣ ＬＸ２）共同孵育，采用ＭＴＴ比色法测定ＨＳＥＣ和ＨＳＣ ＬＸ２的细胞增殖抑制率，流式细胞术测定ＨＳＣ ＬＸ２的细胞周期及细胞凋亡情况，透射电镜观察ＨＳＥＣ的窗孔及基底膜等微结构的变化情况。
结果 瘦素激活后，ＨＳＣ ＬＸ２细胞活性显著增高（Ｐ＝０ ０４１），ＨＳＥＣ则出现细胞活性显著降低（Ｐ＝０ ００４）、窗孔数量减少、窗孔直径下降、连续基底膜形成等肝窦毛细血管化现象。
瘦素干预后给予低、中、高不同浓度珍珠水解液治疗，各浓度组均可使缩小及消失了的ＨＳＥＣ窗孔发生增多和扩大（低浓度组：Ｐ＝０ ０２０；中浓度组：Ｐ＝０ ０２８；高浓度组：Ｐ＝０ ０３２），使ＨＳＥＣ外成片的基膜变得稀薄甚至消失（低浓度组：Ｐ＝０ ０２０；中浓度组：Ｐ＝０ ０２８；高浓度组：Ｐ＝０ ０３２）；使活化的ＨＳＣ ＬＸ２活力下降（低浓度组：Ｐ＝０ ０１８；中浓度组：Ｐ＝０ ０１３；高浓度组：Ｐ＝０ ００９），并诱导其发生细胞凋亡（低浓度组：Ｐ＝０ ０１２；中浓度组：Ｐ＝０ ００６；高浓度组：Ｐ＝０ ００５）。
水解南珠片质量标准研究
（ ｏ ．５ 总３ ７） ９．
流至 瓶 底 ， 自成 一 液 层 ， 锌 粒 数 ４ ． 甘氨酸储 备液 精 密称取 加 ．１ ２ ３ 总氮 含量测 定［ ］ 粒。 用氮气球将凯氏烧瓶与冷凝管 甘 氨 酸对照 品０９ ｇ ．０ｍ ，置 于２ ５ｍｌ 取水 解 南 珠 片 粉末 １ｇ （ 相 连 接 ；另 取 ２ 约 ％硼 酸 溶 液 ５ ｌ置 量瓶中 ， Ｏｒ ， ｎ 加入７ ％甲醇 ， ０ 摇匀 ， 并稀 当于含氮量２ ～ ０ｍ ）精密称定 ， ５ ０ｍｔ 形 瓶 中 ，加 甲基 红 一 甲 ５ ３ ｇ ， ０ 锥 溴 释 至刻度 ， 即得 。
水解 南 珠 片质 量 标 准研 究
黎 林 林 明 雷震鸣 蒋 林 广西中医药大学制药厂 ５ ０２ 南宁市东葛路６ 号 ３０３ ０ 江 广西中医药大学 ５０ ０ ３０１ 渭 北海市 宝珠林海洋科技有 限公 司 ５６０ ３０ ０
摘 要 目的： 对水解南珠片进行质量标准研 究。方法 ： 采用以正丁醇一 乙酸一 ４１ ） 冰 水（： １ 为展开剂的薄层 ： 色谱法对水解 南珠 片进行定性鉴别； 采用凯氏定氮法对水解南珠 片中的总氮含量进行测定； 采用高效液相色谱 法对水解南珠片中的甘氨酸进行含量测定， ｅｕｉ Ａ 以Ｖ ｎ ｓ Ａ 氨基柱（５ ｒ ４ ｌ， ｌ ２０ｍｎ ．ｒｌ５ ） ｘ ６ ｆａ 为色谱柱 ， ｌ 乙腈一 甲醇一 水 （： １－ ． ｏ Ｌ ４ ：）ｏ ５ｍ ｌ 乙酸钠水溶液（ 乙酸调节ｐ 值为６ ００ ５ 为流动相， ４ ０ ／ 冰 Ｈ ． ：． ） ５ ￣０ 梯度洗脱； 检测波长为２３ａ 流速为 ０ ｍ， １ ｌ ｉ。结果： ．ｍ／ ｎ ０ ｍ 薄层色谱鉴别专属性强； 甘氨酸在０ ２ ８０ ０ ６ 范围内， ． ８－ ． １ ｇ ０ －２ 其峰面积与进样量呈 良好的线性关 系（ ＝９ ９ ）平均回收率为９ ． ｒ０ ９８ ， ＝． ９ ％。结论： ７ 所建立的方法准确、 简便快捷、 专属性强， 可用于该制剂的质量控制。 关键词 水解南珠片； 薄层色谱法； 高效液相色谱法； 质量标准 中图分类号 ： ２４１ Ｒ ８． 文献标识码 ： Ａ 文章编号：０ ３ ０ １（０ ２０ —０ ９ ０ １０ — ７９ ２ １ ）５ ０ ５— ３
几种vegf原理
几种VEGF原理血管内皮生长因子（VEGF）是一种在血管生成和血管通透性中起关键作用的信号蛋白。
VEGF家族包括多种成员，如VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D以及胎盘生长因子（PlGF）等。
这些因子通过与特定的受体结合，激活细胞内信号转导通路，从而发挥生物学效应。
本文将深入探讨几种主要的VEGF原理，以期为读者提供全面而深入的理解。
一、VEGF的生物学功能VEGF在生物学中扮演了至关重要的角色，特别是在血管生成、血管通透性以及血管内皮细胞增殖和迁移等方面。
血管生成是一个复杂的生理过程，涉及多种细胞类型和分子信号。
VEGF作为血管生成的主要调节因子，通过刺激内皮细胞的增殖和迁移，促进新血管的形成。
此外，VEGF还能增加血管通透性，使血浆蛋白和液体渗出血管，为肿瘤等组织的生长提供营养。
二、VEGF的信号转导机制VEGF通过与细胞膜上的受体结合，激活细胞内信号转导通路，从而发挥生物学效应。
目前已知的VEGF受体主要包括VEGFR-1（Flt-1）、VEGFR-2（KDR/Flk-1）和VEGFR-3（Flt-4）等。
这些受体都是酪氨酸激酶受体，具有相似的结构特征。
当VEGF与受体结合后，受体发生二聚化并激活其内在的酪氨酸激酶活性，进而触发下游信号转导通路的激活。
在VEGF信号转导通路中，一些关键的信号分子被激活，如磷脂酶Cγ（PLCγ）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）等。
这些信号分子的激活进一步调控了内皮细胞的增殖、迁移、存活以及血管通透性等生物学过程。
三、几种主要的VEGF原理1. VEGF-A与血管生成VEGF-A是VEGF家族中研究最为深入的成员之一。
它在血管生成中起主导作用，通过与VEGFR-2结合，激活下游信号转导通路，促进内皮细胞的增殖、迁移和存活。
此外，VEGF-A还能增加血管通透性，为肿瘤等组织的生长提供营养。
研究表明，VEGF-A 在多种疾病中发挥重要作用，如肿瘤、糖尿病视网膜病变以及类风湿性关节炎等。
炮制对天南星化学成分及药理作用的影响研究概况
(总)广西中医药2018年8月第41卷第4期[7]周俊兵.海洋药物妇科应用的文献整理[J ].南京中医药大学学报,2002,3(2):87.[8]王长云,邵长伦,傅秀梅,等.中国海洋药物资源及其药用研究调查[J ].中国海洋大学学报:自然科学版,2009,39(4):669-675.[9]王淑民,管华诗.海洋药物的研究进展[J ].中国海洋药物,2006,25(6):56-61.[10]关美君,丁源.我国海洋药物主要成分研究概况(Ⅰ)[J ].中国海洋药物,1999(1):32-37.[11]范建高,钟岚,曾民德,等.金牡蛎对大鼠高脂血症脂肪肝的防治作用[J ].中国海洋药物,1999(2):9-11.[12]刘爽,肖云峰,李文妍.石决明药理作用研究[J ].北方药学,2011,8(11):21.[13]岑妍慧,林湧,林江,等.水解南珠液能促进人微血管内皮细胞的增殖和迁移[J ].中国组织工程研究,2018,22(16):2564-2569.[14]童晓云,周敏,余茂强,等.石决牡蛎汤通过p38MAPK 通路改善自发性高血压大鼠血管重构的机制研究[J ].广州中医药大学学报,2016,33(6):846-851.[15]彭倩倩,洪寅,廖广辉.6种介类中药对高血压肝阳上亢大鼠“平肝潜阳”作用的实验研究[J ].中国中医急症,2014,23(6):1016-1018.[16]刘红军.心悸宁浸膏粉溶液对豚鼠单个心室肌细胞动作电位的影响[D ].郑州:河南中医学院,2007.[17]陈孝银,汪学军,叶开河.天麻钩藤饮对SHR 血清Ca 2+浓度及血管平滑肌细胞钙通道的影响[J ].中国病理生理杂志,2008,24(1):68-72.[18]杨文清,任玉录,郭克锋,等.安宫牛黄丸对急性脑出血大鼠脑组织中一氧化氮合酶及单胺类神经递质的影响[J ].中国中医急症,2009,18(1):83.[19]于俏,吴焕林,邹涛.石决牡蛎汤治疗难治性高血压临床观察[J ].新中医,2016,48(3):15-17.[20]叶思文.桂枝加龙骨牡蛎汤治疗老年单纯收缩期高血压合并睡眠障碍临床观察[J ].新中医,2012,44(12):28-29.[21]彭建.黄芪珍珠母汤对病毒性心肌炎的临床疗效及血清心肌酶谱指标的影响[J ].四川中医,2017,35(7):76-79.(2018-05-10收稿/编辑刘强)炮制对天南星化学成分及药理作用的影响研究概况林坤河，韦建华，邓超澄，吴余燕(广西中医药大学,广西南宁530001)关键词天南星;炮制;化学成分;药理作用;综述中图分类号：R282文献标识码：A文章编号：1003-0719(2018)04-0073-03基金项目：广西中医药大学2017年杨世林教授团队人才培养建设项目(编号:YSL17017)通信作者：邓超澄(1964-),女,汉族,硕士,副教授,研究生导师,研究方向:中药活性成分的研究与开发;E-mail :1736858405@天南星(砸澡蚤扎燥皂葬Arisaematis )为天南星科天南星属天南星、异叶天南星或东北天南星的干燥块茎[1],始载于《神农本草经》,具有散结消痰、镇惊祛风功效,主要用于治疗顽痰咳嗽、风痰眩晕、中风痰壅、口眼歪斜等症[2],其活性成分主要为凝集素、皂苷、氨基酸、生物碱等[3]。
【推荐下载】关于竹根七中具有血管生成抑制作用有效成分的筛选
关于竹根七中具有血管生成抑制作用有效成分的筛选 2012-12-27 【编者按】：医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的论说性文章。
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关于竹根七中具有血管生成抑制作用有效成分的筛选 作者：蒙麦侠杨智锋贺浪冲 【摘要】：目的研究竹根七中对人脐静脉内皮细胞株(ECV304)生长有抑制作用的有效成分。
方法用溶剂提取法将竹根七分为不同药用部位,以抗血管内皮细胞生长因子(VEGF)抗体为对照,用人脐静脉内皮细胞膜色谱模型筛选,并对筛选结果用MTT实验进行分析,以初步确定其中的有效成分。
结果竹根七的分离成分(ZGQ-C)在其浓度分别为0.625、1.25、2.50、5.00、10.0 g/mL时,对ECV304的增殖抑制率分别为40.51%、51.11%、63.54%、74.32%、81.26%,半数抑制率在1.00～1.25 g/mL范围内;同时在显微镜下观察到细胞的形态有明显的改变。
结论ZGQ-C是对ECV304有一定抑制作用的有效成分;人脐静脉内皮细胞膜色谱模型的筛选结果与MTT实验结果之间有较好的相关性。
【关键词】竹根七细胞膜色谱ECV304 抑制血管生成 Abstract：Objective To discover the effective component of Rhizoma Tupistrae chinensis with inhibiting angiogenesis. Methods Several parts of Rhizoma Tupistrae chinensis were obtained by using different extraction solvents. They were screened by the model of ECV304 cell membrane chromatography with anti-VEGF antibody as a control drug. The inhibition of effective component (ZGQ-C) on ECV304 proliferation in vitro was examined by MTT assay. Results The inhibition rate (40.51%, 51.11%, 63.54%, 74.32%, 81.26%) was correlated with the ZGQ-C concentration. The ECV304 cell had significantly changed in morphology. Conclusion The ZGQ-C is an effective component for inhibiting angiogenesis. The screening results on the model have a good correlation with that of MTT assay. Key words：Rhizoma Tupistrae chinensis;cell membrane chromatography;ECV304;inhibiting angiogenesis 竹根七(Rhizoma Tupistrae chinensis)为百合科植物开口箭的根茎,表面黄棕色,有皱纹,断面淡黄白色,细颗粒状,气微,味苦涩。
2020年江苏省《肿瘤内科学》每日一练(第403篇)
2020年江苏省《肿瘤内科学》每日一练考试须知：1、考试时间：180分钟。
2、请首先按要求在试卷的指定位置填写您的姓名、准考证号和所在单位的名称。
3、请仔细阅读各种题目的回答要求，在规定的位置填写您的答案。
4、不要在试卷上乱写乱画，不要在标封区填写无关的内容。
5、答案与解析在最后。
姓名:___________考号:___________一、A1(共30题)1.下列是决定肿瘤生长率的主要因素的是( )。
A.细胞的群集程度B.生长比例C.细胞周期的长短D.免疫因素E.细胞丢失率2.曲妥珠单抗(赫赛汀)是通过干扰信号转导通路治疗肿瘤的,曲妥珠单抗作用于( )。
A.血管内皮生长因子受体的胞内端B.表皮生长因子受体的胞外端E.表皮生长因子受体的胞内和胞外端3.来源于上皮细胞的恶性肿瘤的是( )。
A.骨肉瘤B.基底细胞癌D.恶性胶质瘤E.血管肉瘤4.下列属于中、高度恶性非霍奇金淋巴瘤的标准化疗方案的是( )。
A.MOPP方案B.DA方案C.COP方案D.CHOP方案E.m- BACOB方案5.中枢神经系统白血病CNSL的防治错误的是( )。
A.小剂量化疗B.大剂量氨甲蝶呤 HDMTXC.鞘内注射MTX或和AraCD.头颅照射E.大剂量阿糖胞苷HD-AraC6.胃癌最常见的部位是( )。
A.胃大弯B.贲门C.胃小弯D.胃前壁E.胃后壁7.乳癌腋窝淋巴结分组解剖标志是( )。
A.肋间外肌B.胸大肌C.肋间内肌E.背阔肌8.WT-1基因突变可引发( )。
A.神经纤维瘤病B.肾母细胞痼C.视网膜母细胞瘤D.家族性乳腺癌E.结肠腺瘤性息肉病9.下列属于脑膜白血病发病机制的是( )A.多种化疗药物不能通过血-脑脊液屏障B.白血病细胞对化疗药物出现耐药C.化疗间歇过长,白血病细胞大量繁殖D.患者个体差异E.化疗剂量不足导致白血病细胞不能被彻底杀灭10.以下选项,不属于上腔静脉阻塞综合征治疗的是( )。
A.卧床休息B.吸氧C.急诊放疗D.不限制液体入量及途径E.上腔静脉支架植入11.我国原发性肝癌的最主要原因为( )。
高考生物书本同步巩固提高1_03
开躲市安祥阳光实验学校课后巩固提高1.下图中能反映DNA溶解度与NaCl溶液浓度之间关系的是( )解析:DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl的浓度的变化而改变的｡当NaCl的物质的量为0.14 mol/L时,DNA的溶解度最低｡答案:C2.人们用鸡的红细胞提取DNA,用人的红细胞提取血红蛋白的原因是( )A.鸡的红细胞无血红蛋白,人的红细胞有血红蛋白B.鸡的红细胞有线粒体,人的红细胞无线粒体C.鸡的红细胞有细胞核,人的红细胞无细胞核D.鸡的红细胞有氧呼吸,人的细胞无氧呼吸解析:鸡(鸟类)的红细胞具有完整的细胞核,含有核DNA,便于进行DNA的提取,人的红细胞无细胞核,结构简单,血红蛋白含量丰富便于提取血红蛋白｡答案:C3.下列关于凝胶色谱法的原理及操作不正确的是( )A.是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法B.在洗脱过程中,大分子不能进入凝胶内部而最先流出,而小分子可以进入凝胶内部而流速缓慢,最后流出C.凝胶内部有很微细的多孔网状结构,其孔隙大小与被分离的物质分子的大小无相应关系D.一般情况下,凝胶对要分离的物质没有吸附作用,因此所有要分离的物质都应该被洗脱出来解析:本题考查凝胶色谱法分离蛋白质的原理｡凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法,凝胶是由多糖类化合物构成的,其内部有很微细的多孔网状结构,小分子蛋白质可以进入凝胶内部,路程较长,移动速度慢,而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部,路程较短,移动速度快,因此在洗脱中分离｡选用不同种凝胶,其立体网状结构不同,孔隙大小不同,因此可分离的分子大小也不同,故应相关｡凝胶一般对分离的物质无吸附作用,所有要分离的物质都应该被洗脱出来,这是凝胶色谱法与一般层析法的不同｡答案:C4.PCR利用了DNA热变性的原理,PCR仪实际上也是一种能自动调控温度的仪器,对PCR过程中“温度的控制”的下列说法错误的是( )A.酶促反应需要高的温度,是为了确保模板是单链B.延伸的温度必须大于复性温度,而小于变性温度C.DNA聚合酶不能热变性,要用耐高温的聚合酶D.DNA解旋酶不能热变性,为了确保模板是单链解析:PCR是一种体外DNA扩增技术｡DNA双链的解开不需要解旋酶,靠高温使其变性,双链螺旋结构解体,双链分开,在复性前,在耐高温的DNA聚合酶的作用下根据碱基互补配对原则合成新的DNA,因此延伸的温度大于复性温度而小于变性温度｡答案:D5.在血红蛋白的整个提取过程中,不断用磷酸缓冲液处理的目的是(多选)( )A.防止血红蛋白被氧气氧化B.血红蛋白是一种碱性物质,需要酸中和C.防止色谱柱内产生气泡,影响洗脱效果D.让血红蛋白处在稳定的pH范围内,维持其结构和功能解析:在血红蛋白的提取过程中,不断用磷酸缓冲液处理的目的是防止色谱柱内产生气泡,影响洗脱效果,同时为了让血红蛋白保持在体内所处的环境,以维持其结构和功能｡答案:CD6.在“DNA粗提取与鉴定”的实验中,将提取获得的含DNA的粘稠物(含较多的杂质)分别处理如下:①放入2mol·L-1的NaCl溶液中,搅拌后过滤,得到滤液D和粘稠物d②放入0.14mol·L-1的NaCl溶液中,搅拌后过滤,得到滤液E和粘稠物e③放入冷却的95%的酒精溶液中,搅拌后过滤,得到滤液F和粘稠物f以上获得的滤液和粘稠物中,因含DNA较少而可以丢弃的是( )A.d,E,FB.D,e,fC.d,e,FD.D,E,f解析:本题考查的是“DNA粗提取与鉴定”的实验原理｡根据实验原理可知当NaCl溶液浓度为2mol/L时,DNA在NaCl溶液中的溶解度最高,所以①中因含DNA较少而可以丢弃的是粘稠物d;当NaCl溶液浓度为0.14mol/L时,DNA在NaCl 溶液中的溶解度最低,所以②中因含DNA较少而可以丢弃的是滤液E;由于DNA 不溶于95%的酒精溶液,所以③中因含DNA较少而可以丢弃的是滤液F｡答案:A7.下列叙述中错误的是( )A.改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出B.在沸水浴中,DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色C.用电泳法可分离带电性质､分子大小和形状不同的蛋白质D.用透析法可去除蛋白质样品中的小分子物质解析:DNA在NaCl溶液中的溶解度是随着NaCl溶液浓度的变化而变化｡在0.14 mol/LNaCl溶液中DNA的溶解度最小,低于或高于0.14 mol/L,DNA的溶解度会增大｡在DNA粗提取实验中就是先把核物质溶解在2 mol/LNaCl溶液中,然后逐渐加水,稀释至0.14 mol/L时,使DNA析出｡答案:A8.现代生物学已向两个方面发展,宏观研究的水平为生态系统水平,微观研究的水平为分子水平,对于分子的研究,其物质的提取和分离显得尤为重要｡下面是物质提取和分离的相关问题,请回答:(一)DNA分子的提取和分离(1)在提取菜花细胞中的DNA时,采用的研磨法,为什么不能像用鸡血那样,用蒸馏水使其破裂?____________________________｡(2)在提取实验过程中用到两种浓度的NaCl溶液,说明其作用:①2 mol/LNaCl溶液:____________________________;②0.14 mol/LNaCl溶液:____________________________｡(3)在整个操作过程中,每100 mL血液中加入3 g柠檬酸钠的作用是:____________________________｡(4)鉴定DNA所用的试剂:____________________________｡(二)血红蛋白的提取和分离(1)在血红蛋白的提取和分离过程中:粗分离､纯化和纯度鉴定时,都会用到缓冲溶液,其作用是_______________________________｡(2)在洗脱过程中,对洗脱液的流速要求稳定的目的是:____________________________｡(三)不同的化学物质,其理化特性不同,提取方法也有所差异,如胡萝卜素不溶于水,易溶于________,因此可以用________方法进行提取｡解析:(一)(1)DNA分子提取中理想的材料为富含DNA的细胞,动物中鸡血红细胞具有细胞核,放入蒸馏水中会使细胞涨破释放出DNA,而植物细胞含有细胞壁不能因吸水而涨破｡(2)实验过程中两次用到NaCl溶液,初次为2 mol/L的NaCl溶液,用于溶解DNA,而0.14 mol/L的NaCl溶液会使DNA析出｡(3)为了防止凝血现象的发生应加入柠檬酸钠｡(4)鉴定DNA所用的试剂为二苯胺试剂｡(二)(1)为保持蛋白质的生理活性,防止变性从而用缓冲液保持pH的恒定｡(2)洗脱液的流速变化过快,使操作压变化过大,从而使洗脱物质的下降速率变化过大,导致分离纯化不充分｡(三)胡萝卜素的化学性质比较稳定,不溶于水,易溶于有机溶剂｡因此可以用有机溶剂作萃取剂,以萃取的方法来提取｡答案:(一)(1)植物细胞具有细胞壁,不会吸水涨破,只有通过研磨,才能释放出DNA(2)①溶解DNA分子,过滤并除去不溶于NaCl溶液的杂质②使DNA分子析出,过滤并除去溶于NaCl溶液中的杂质(3)防止出现凝血 (4)二苯胺试剂(二)(1)维持血红蛋白环境中的pH的稳定(2)维持操作压的稳定(三)有机溶剂有机溶剂萃取9.我们通常选用猪､牛､羊等动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白｡请回答下列有关问题:(1)实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液｡①其中加入柠檬酸钠的目的是________________｡②此过程即是样品处理,它应包括红细胞洗涤､________________､分离血红蛋白溶液｡③洗涤红细胞的目的是________________｡(2)收集的血红蛋白溶液在透析袋中透析,这就是样品的粗分离｡①透析的目的是____________________________｡②透析的原理是____________________________｡(3)通过凝胶色谱法将样品进一步纯化(如图),在操作中加样的正确顺序是________,最后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电脉进行纯度鉴定｡其中通过凝胶色谱法将样品纯化的目的是________________________｡解析:本题考查提取和分离血红蛋白的相关知识｡透析袋是本实验收集样品的关键,是一种半透膜｡实验的操作顺序应根据SDS—聚丙烯酰胺凝胶电脉的需要进行｡答案:(1)①防止血液凝固②血红蛋白的释放③去除杂蛋白(2)①去除相对分子质量较小的杂质②透析袋能使小分子自由进出,而大分子则保留在袋内(3)④①②③去除相对分子质量较大的杂质10.下图表示在生物体外获取DNA(或目的基因)的两种方式｡图一表示经PCR技术扩增获取DNA的过程｡PCR是多聚酶链式反应的缩写｡PCR方法模仿体内DNA的复制过程,首先使DNA变性(加热至94℃),两条链解开为单链;然后冷却(至55℃)使引物(DNA复制时所需的约20个核苷酸的短链)与单链相应的碱基互补序列结合;再在热稳定DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶)作用下进行延伸(加热至72℃),即以4种脱氧核苷酸为原料,在引物的引导下合成与模板互补的DNA新链｡如果2条DNA单链各补上一条新链组成2个DNA分子｡如此反复循环,DNA以指数形式扩增｡上述过程可以在PCR扩增仪中自动完成｡图二表示反转录形成DNA的过程｡即以mRNA为模板,反转录成互补的单链DNA,然后在酶的作用下合成双链DNA｡请据图分析回答:(1)图一中的DNA聚合酶的化学本质是________,它与人体内的DNA聚合酶相比具有________特性｡(2)图一A中的DNA解旋过程在人体内可由________催化完成｡C过程复制方式的特点是________｡(3)图二E中的碱基互补配对方式与图一C中的不同之处是________________________｡假设图一中的一个模板DNA分子中有800个碱基对,基中含有腺嘌呤600个,若通过PCR技术共消耗周围环境中游离的胞嘧啶脱氧核苷酸6200个,则该模板DNA在PCR扩增仪中已经复制了________次｡解析:(1)DNA聚合酶是一种蛋白质,在PCR技术中所用的DNA聚合酶最大的特点是耐高温,即高温下不变性,可反复使用｡(2)PCR技术用高温变性解旋,在人体中是常温解旋酶作用解旋｡C过程是PCR技术中的中温延伸阶段,其复制的方式仍是半保留复制｡(3)RNA中含有U不含T｡一个DNA分子中A+C占碱基总数的一半,故C的数目为800-600=200｡假设复制n次,相当于新增加了(2n-1)个DNA 分子,故200×(2n-1)=6200,解得:n=5｡答案:(1)蛋白质热稳定(或耐高温) (2)解旋酶半保留复制 (3)E中是U—A,C中是T-A 511.柠檬油是植物芳香油中的一种,它是一种广谱性的杀虫剂,可杀死蚊子､苍蝇､蟑螂和臭虫等传染疾病的害虫,以及危害粮食､蔬菜的常见害虫,包括幼虫､蛹等,是一种绿色杀虫剂｡(1)柠檬油的挥发性________,易溶于________,比重比较________｡(2)提取柠檬油常用的原料是柠檬花与柠檬果皮,嫩的花朵在蒸馏过程中,精油易被水蒸气分子破坏,所以可采用________法｡柠檬果皮中精油的提取适宜采用________法,此种方法是通过________将液相从固液两相混合物中分离出来,必经步骤为:①A是________,目的是____________________________｡②B是________,目的是____________________________｡③C过程为________,目的是_________________________｡④实验过程中浸泡橘皮后,需用清水洗涤,其目的是________｡(3)采用柠檬油作为杀虫剂,可以解决其他杀虫剂给人类带来的隐患,其突出的优点是________________､________________｡(4)从生产绿色食品的要求出发,写出防治害虫的三种方法:________________､________________､________________｡解析:(1)(2)水中蒸馏可能发生原料的焦糊问题,而且可能使某些有效成分高温水解,凡存在上述问题的应考虑萃取法或压榨法｡用压榨法从柠檬果皮中提取柠檬油时,应用石灰水充分处理,以提高出油率,防止压榨时滑脱等｡为了使油与水易分离,还应加入小苏打和硫酸钠｡(3)柠檬油作为一种天然的杀虫剂有其优点:对人､畜无毒,对植物无毒,不污染环境｡(4)防治害虫的方法可结合其他生物学知识来解答,其方法较多,如利用生物天敌防治,利用性外激素干扰其交尾或诱捕,运用生物工程如基因工程或诱变育种培育抗虫作物品种等｡答案:(1)强有机溶剂轻(2)萃取压榨机械压力①石灰水破坏细胞结构,分解果胶,防止压榨时果皮滑脱,提高出油率②0.25%的小苏打和5%的硫酸钠使精油易与水分离③过滤除去固体物和残渣④除去石灰水(3)对人､其他动物､植物均无毒性减少对环境的污染(4)利用天敌进行生物防治害虫运用生物工程培育抗虫作物品种利用激素影响昆虫的发育12.PCR技术有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行研究的问题,而被广泛应用,此过程需要一种Taq DNA聚合酶｡请回答有关问题:(1)体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA,而PCR技术中应用__________________｡(2)TaqDNA聚合酶是从水生耐热细菌Taq中分离的｡①为什么Taq细菌能从热泉中被筛选出来呢?____________________________②TaqDNA聚合酶的功能是____________________________｡③TaqDNA聚合酶的化学本质为蛋白质,可用________法和________法进行分离｡(3)从土壤中分离分解尿素的细菌时,应采取的措施是_______________,原因是__________________________________｡(4)相对于细菌分离,而DNA分子的分离和提取操作要复杂的多｡①在DNA提取中两次用到蒸馏水,其目的分别是:______________________､________________________｡②实验中能否以哺乳动物成熟的红细胞为实验材料?为什么?____________________________｡(5)与体内DNA复制相比较,PCR反应要在________中才能进行,并且要严格控制________条件｡(6)PCR中加入的引物有________种,加入引物的作用是________________｡解析:(1)PCR技术中用高温使DNA分子中的氢键打开,从而解旋｡(2)①利用细菌特有的特性而与其他细菌区分开来,Taq细菌具有耐高温的特性,放在高温环境下,其他绝大多数细菌死亡,而Taq细菌得以保留｡②在DNA分子复制中,TaqDNA聚合酶将两个脱氧核苷酸的脱氧核糖和另一脱氧核苷酸的磷酸连结形成磷酸二酯键｡③蛋白质的分离可以根据其分子大小和带电的性质和多少使之分离,即凝胶色谱法和电泳法｡(3)在分离分解尿素的细菌时,应在培养基上加入尿素这一种氮源而使不能利用尿素的细菌不能生存｡(4)①在使用蒸馏水时,第一次使血细胞破裂,第二次使NaCl溶液浓度降低至0.14 mol/L｡(5)PCR反应是在一定的缓冲溶液中进行的,并需严格控制好温度条件｡(6)PCR中与体内DNA 复制过程中的原料是完全相同的,并加入小段单链DNA或RNA作为引物,引导DNA复制,可以使游离的脱氧核苷酸与之结合形成磷酸二酯键,成为DNA复制的起点｡答案:(1)高温使DNA分子热变性(2)①热泉70℃~80℃的高温条件淘汰了绝大多数微生物②催化脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键③凝胶色谱电泳(3)将细菌在培养基中培养,其中惟一的氮源是尿素只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长和繁殖(4)①使血细胞破裂,释放出DNA分子稀释NaCl溶液,使DNA分子析出②不能,哺乳动物成熟的红细胞中无核DNA分子(5)一定的缓冲溶液温度(6)2 作为DNA复制的起点。
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《中国组织工程研究》 Chinese Journal of Tissue Engineering Research文章编号:2095-4344(2018)16-02564-06 2564www.CRTER .org·研究原著·岑妍慧，女，1980年生，广西壮族自治区合浦县人，汉族，2012年广西医科大学毕业，博士，副教授，主要从事海洋药物开发的相关研究。
并列第一作者：林湧，男，1971年生，广西壮族自治区北海市人，汉族，1993年广西大学毕业，高级工程师，主要从事珍珠等海洋生物的研发。
通讯作者：林江，博士研究生，教授，广西中医药大学，广西壮族自治区南宁市 530001通讯作者：贾微，硕士，副教授，广西中医药大学，广西壮族自治区南宁市 530001中图分类号:R318 文献标识码:B稿件接受：2018-03-01Cen Yan-hui, M.D., Associate professor, Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning 530001, Guangxi Zhuang Autonomous Region, China; the First Affiliated Hospital of Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning 530023, Guangxi Zhuang Autonomous Region, ChinaLin Yong, Senior engineer, Beihai Baozhulin Marine Technology Co., Ltd., Beihai 536000, Guangxi Zhuang Autonomous Region, ChinaCen Yan-hui and Lin Y ong contributed equally to this work.Corresponding author: Lin Jiang, Doctoral candidate, Professor, Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning 530001, Guangxi Zhuang Autonomous Region, ChinaCorresponding author: Jia Wei, Master, Associate professor, Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning 530001, Guangxi Zhuang Autonomous Region, China水解南珠液能促进人微血管内皮细胞的增殖和迁移岑妍慧1，2，林 湧3，林 江1，贾 微1，赵 静1 (1广西中医药大学，广西壮族自治区南宁市 530001；2广西中医药大学第一附属医院，广西壮族自治区南宁市 530023；3北海市宝珠林海洋科技有限公司，广西壮族自治区北海市 536000) DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.0215 ORCID: 0000-0002-0003-4708(林江)文章快速阅读：文题释义：南珠：即合浦珍珠，其作为传统名贵中药材，入药始见于《雷公炮炙论》，此后历代本草均有记载，其性味甘、咸、寒，归心、肝经，功效为解毒生肌、安神定惊、明目消翳等。
血管内皮细胞功能障碍：指血管内皮细胞对非适应性功能状态所作的有限调整，通常是内皮功能特征的改变或功能的部分缺失。
摘要背景：珍珠有镇静安神的药效，临床可应用于高血压病，但水解珍珠液对高血压病的防治作用及相关机制研究目前报道尚少。
目的：观察水解南珠液对人微血管内皮细胞生物学行为和分泌功能的影响。
方法：人微血管内皮细胞培养，传代。
实验分为水解南珠液高、中、低剂量组：分别加入含质量浓度为120，60，30 mg/L 水解南珠液的培养基200 μL ；对照组：只加 200 μL 的培养基。
CCK8法检测人微血管内皮细胞增殖情况，流式细胞术检测细胞的周期分布，TUNEL 法了解细胞的凋亡情况，Transwell 法检测细胞迁移情况，硝酸还原酶法检测细胞的NO 分泌量及化学荧光法检测细胞活性氧的分泌情况。
结果与结论：①与对照组相比，低、中、高剂量水解南珠液对人微血管内皮细胞均有促增殖作用，且浓度越高，对细胞的促增殖能力越强(P < 0.05)，因此确定120 mg/L 水解南珠液为最佳作用浓度；②与对照组相比，水解南珠液组细胞S 期和G 2期百分比增加，而G 1期的细胞比例则减少(P < 0.05)，提示水解南珠液可以促进血管内皮细胞的周期进展；③各组均未发现有细胞核被染成绿色的凋亡细胞；④水解南珠液组的迁移细胞数比对照组显著增加(P < 0.05)；⑤水解南珠液组细胞NO 分泌量明显高于对照组(P < 0.05)，活性氧量显著低于对照组(P < 0.05)；⑥结果表明，水解南珠液能促进体外培养的人微血管内皮细胞的增殖和迁移，并具有促进其分泌NO 及抑制其活性氧分泌的功能，在保护内皮细胞功能方面可能有积极的作用。
关键词：合浦珍珠；南珠；水解；人微血管内皮细胞；增殖；迁移；TUNEL 法；Transwell 法；生物学行为 主题词：高血压；内皮细胞；细胞运动；组织工程 基金资助：国家级海洋经济创新发展示范城市(北海市)产业链协调创新项目(Bhsfs002)；广西自然科学基金重点项目(2015GXNSFDA227002)：合浦珍珠“解毒生肌”药效机制及物质基础研究；广西科技基地和人才专项(桂科AD17195080)；“北部湾海洋医药研究与开发”广西特聘专家岗位；中国博士后科学基金(2017M623297XB)；广西中医药大学岐黄工程高层次人才团队培育项目(2018001)Hydrolysis of Nanzhu fluid promotes proliferation and migration of human microvascular endothelial cellsCen Yan-hui 1, 2, Lin Yong 3, Lin Jiang 1, Jia Wei 1, Zhao Jing 1 (1Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning 530001, Guangxi Zhuang Autonomous Region, China; 2the First Affiliated Hospital of Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning 530023, Guangxi Zhuang Autonomous Region, China; 3Beihai Baozhulin Marine Technology Co., Ltd., Beihai 536000, Guangxi Zhuang Autonomous Region, China)Cen YH, Lin Y, Lin J, Jia W, Zhao J. Hydrolysis of Nanzhu fluid promotes proliferation and migration of human microvascular endothelial cells.Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu. 2018;22(16):2564-2569. DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.0215P .O. Box 10002, Shenyang 110180 2565AbstractBACKGROUND: Pearl has the tranquilizing effect, and it can be applied in the treatment of hypertension. However, there is little report on the prevention and cure effect and mechanism of hydrolyzed pearl liquid on hypertension.OBJECTIVE: To observe the effect of hydrolysis of Hepu pearl (hydrolyzed Nanzhu fluid) on the biological behavior and secretion of human microvascular endothelial cells.METHODS: Human microvascular endothelial cells were cultured and passaged. There were four groups, and the microvascular endothelial cells were incubated in the 200 μL culture medium containing nothing (control group), and 120, 60 and 30 mg/L hydrolysis of Nanzhu fluid. The cell proliferation and migration was detected by cell conuting kit-8 assay and Transwell assay respectively; the cell cycle distribution was tested by flow cytometry; the cell apoptosis was assayed by TUNEL method; the secretion of nitric oxide and reactive oxygen species was tested by nitrale reduetase and chemical fluorescence method, respectively.RESULTS AND CONCLUSION: Compared with the control group, hydrolysis of Nanzhu fluid significantly promoted the proliferation of microvascular endothelial cells in a manner-dependent manner (P < 0.05), suggesting the optimal concentration was 120 mg/L. Compared with the control group, the percentage of cells in S and G2 phase was significantly increased, and the percentage of cells in the G1 phase was significantly reduced in the hydrolysis of Nanzhu fluid group (P < 0.05), indicating hydrolysis of Nanzhu fluid could promote cell cycleprogression. Apoptotic cells with green-stained nucleus were invisible in both groups. The number of cell migration in the hydrolysis of Nanzhu fluid group was significantly more than that in the control group (P < 0.05). Compared with the control group, there was a significant increase in the nitric oxide secretion, and a significant decrease in the production of reactive oxygen species in the hydrolysis of Nanzhu fluid group (P < 0.05). To conclude, hydrolysis of Nanzhu fluid can promote the proliferation and migration of human microvascular endothelial cells in vitro , and has the function of promoting the secretion of nitric oxide and inhibiting reactive oxygen species secretion, implying its positive role in the protection of endothelial cell function.Subject headings: Hypertension; Endothelial Cells; Cell Movement; Tissue EngineeringFunding: the National Industrial Chain Coordination Innovation Project of Marine Economy Innovation and Development Model City (Beihai City), No. Bhsfs002; the Key Project of Natural Science Foundation of Guangxi Zhuang Autonomous Region, No. 2015GXNSFDA227002; the Science and Technology Base and Talent Specialization of Guangxi Zhuang Autonomous Region, No. AD17195080; Guangxi Specialist Posts of “Beibu Gulf Marine Medicine Research and Dev elopment”; the National Postdoctoral Science Foundation of China, No.2017M623297XB; Qihuang Engineering High-Level Talent Team Cultivation Project of Guangxi University of Chinese Medicine, No. 20180010 引言 Introduction高血压病是最常见的心血管疾病，同时又是心脑血管疾病的主要危险因素[1]。