鲍鱼酶解提取物的营养成分及对免疫低下小鼠的免疫调节作用
功能性食品生产主要技术方法
功能性食品生产的主要技术方法功能食品的发展为消费者提供一条选择健康食品的最佳途径。
功能食品当中发挥功能作用的物质称为生物活性物质, 具有延缓衰老、提高机体免疫力、抗肿瘤、抗辐射等功能, 大多生物活性物质具有热敏性, 在生物活性物质的提取分离中保留其生物活性和稳定性至关重要。
功能食品的生产技术主要包括，生物工程技术（包括发酵工程，酶工程，基因工程，细胞工程等），分离纯化技术，超微粉碎技术，冷冻干燥技术，微胶囊技术，冷杀菌技术。
目前对于功能食品的研究集中于：1.活性多糖及其加工技术，活性多糖包括膳食纤维，真菌活性多糖，植物活性多糖。
2.活性多肽及其加工技术，酪蛋白磷酸肽（酶解-沉淀法，酶解-离子交换法），谷胱甘肽（萃取法，发酵法），降血压肽功能性油脂及其加工技术3.多不饱和脂肪酸，磷脂活性微量元素及其加工技术。
4.自由基清除剂及其加工技术（超氧化物歧化酶，沉淀法制备，离子交换层析法）5.活性菌类及其加工技术6.功能性甜味料及其加工技术。
1.一般分离技术1.1初步分离纯化从固液分离出来后的提取液需初步分离纯化, 进一步除去杂质。
常用的初步分离纯化技术主要有萃取分离、沉淀分离、吸附澄清、分子蒸馏技术、膜过滤法、树脂分离方法等。
1.1.1 萃取分离萃取分离萃取分离法既是一个重要的提取方法, 又是一个从混合物中初步分离纯化的一个重要的常用分离方法。
这是因为溶剂萃取具有传质速度快、操作时间短、便于连续操作、容易实现自动化控制、分离纯化效率高等优点。
萃取分离法: 一是水一有机溶剂萃取, 即用一种有机溶剂将目标产物自水溶液中提取出来, 达到浓缩和纯化的目的; 二是两水相萃取, 这是近期出现的、引人注目的、极有前途的新型分离纯化技术。
当两种性质不同、互不相溶的水溶性高聚物混合, 并达到一定的浓度时, 就会产生两相, 两种高聚物分别溶于互不相溶的两相中。
常用的两水相萃取体系为聚乙二醇( P E G ) 一葡聚糖( eD x t ar n ) 系统1.1.2 沉淀分离纯化沉淀分离纯化利用加人试剂或改变条件使功能活性成分( 或杂质) 生成不溶性颗粒而沉降的沉淀法是最常用和最简单的分离纯化方法, 由于其浓缩作用常大于纯化作用, 因此通常作为初步分离的一种方法。
碧云天生物技术 Beyotime Biotechnology BeyoFusion
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology订货热线: 400-1683301或800-8283301订货e-mail:******************技术咨询: *****************网址: 碧云天网站 微信公众号BeyoFusion™ DNA Polymerase产品编号产品名称包装D7220 BeyoFusion™ DNA Polymerase 200U产品简介：碧云天生产的BeyoFusion™ DNA Polymerase，是一种以嗜热古细菌DNA聚合酶(hyperthermophilic archaeon Pyrococcus-like DNA polymerase)为基础通过突变等改造而获得的超高性能DNA聚合酶，它具有扩增速度快、保真度极高、扩增片段可以轻松达到12kb等优点。
BeyoFusion™ DNA Polymerase扩增速度极快，扩增小于6kb的DNA片段时，延伸1kb只需要15秒(参考表1)。
普通的DNA聚合酶延伸1kb通常需要1-2分钟。
BeyoFusion™ DNA polymerase由于其超快的扩增速度，可以显著缩短PCR扩增所需的时间。
BeyoFusion™ DNA Polymerase是一种高保真DNA聚合酶。
BeyoFusion™ DNA Polymerase不仅可以非常高效地催化5'至3'方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合反应，它同时还具有3'至5'的外切酶活性(proofreading activity)，它的错误发生概率比Taq酶要低52倍，比pfu酶要约低6倍(参考表1)。
表1. BeyoFusion™ DNA polymerase的主要性能与Taq酶及同类产品的比较。
Product Name Concentration Manufacture Velocity Target Size Fidelity Product end Taq 5U/μl Various 1min/kb <3kb 2.3×10-5/nt/cycle3'overhangs Pfu 5U/μl Various 2min/kb <5kb 2.6×10-6/nt/cycle Blunt Platinum Taq 5U/μl Thermo 30s/kb 15kb 3.8×10-6/nt/cycle 3'overhangs Phusion HF 2U/μl Thermo 15-30s/kb 20kb 4.4×10-7/nt/cycle BluntLongAmp Taq 2.5U/μl NEB 50s/kb 30kb 1.2×10-5/nt/cycle 3'overhangs Phusion HF 2U/μl NEB 15-30s/kb 20kb 4.6×10-7/nt/cycle BluntPfuUltra HF 2.5U/μl Agilent 1-2min/kb 17kb 1.3×10-6/nt/cycle BluntPfuUltra II FH - Agilent 15-30s/kb 19kb 1.2×10-6/nt/cycle BluntKOD Dash 2.5U/μl TOYOBO 30s/kb 18kb 5.8×10-6/nt/cycle 3'overhangsKOD FX 1U/μl TOYOBO 30s-1min/kb 40kb 2.1×10-6/nt/cycle BluntBeyoFusion™ 2.5U/μl Beyotime 15-60sec/kb >12kb 4.4×10-7/nt/cycle Blunt BeyoFusion™ Plus 2.5U/μl Beyotime 15-60sec/kb >12kb 2.2×10-6/nt/cycle 3' overhangs BeyoFusion™ DNA Polymerase的扩增长度长，可以达到12kb。
绪论原生动物门
➢常见旳底栖纤毛虫类
旋唇目
缘毛目
游仆虫 Euplotes sp.
聚缩虫 Epistylis sp.
3、吸管虫纲 (Suctoria) 壳吸管虫
三、 经济意义与危害
• 可提供鱼虾旳开口饵料；
• 对水体有一定旳净化能力； • 在地质、古生物和油气资源开发中有主要意义； • 是细胞学、遗传学和分子生物学研究旳极好材料； • 有些种类是人类和养殖动物旳病原体，有些可引起海洋“赤
海星
鲍
欣赏品/工艺品
珍珠
➢危害角度 海洋污损生物(marine fouling organism)：指生长在船底和海中设施 表面旳动植物和微生物，这些生物对所附着旳海洋设施造成损害。
•附着生物 •钻孔生物
1.短石蛏 生活在石灰石中 2.锉石蛏 生活在珊瑚中 3.金石蛏 生活在珊瑚礁中
第一章 原生动物门 Protozoa
有性 (受精和接合)； 世代交替；
二、 分纲和主要底栖代表动物 2 个亚门5个纲
1（6）体表无纤毛----------------------质走亚门 2（3）无运动细胞器-------------------------孢子虫纲 3（2）有运动细胞器 4（5）运动细胞器为鞭毛-------------------鞭毛虫纲 5（4）运动细胞器为伪足-------------------肉足虫纲 6（1）体表具纤毛----------------------纤毛亚门 7（8）纤毛终身存在-------------------------纤毛虫纲 8（7）纤毛仅出目前幼体阶段-------------吸管虫纲
1. 肉足虫纲(Sarcodina)
•特征：以伪足为运动胞器，具有运动、摄食和排泄等功能；
蜜汁炖鲍鱼
蜜汁炖鲍鱼鲍鱼的味道是相当鲜美的，也是因为这样才会让鲍鱼的制作方法并不是那么困难的，都是要保留住鲍鱼本身的鲜香味，最常见的就是蜜汁炖鲍鱼，这道菜吃起来的话就是非常可口的，但是蜜汁的调配上面就会显得非常的关键，而且最好是先将鲍鱼的本身切出几道口子，这样的话就会更加的入味一些。
1、鲍鱼洗净，用刀划出几道口；银杏氽烫后去皮，与松子一起干炒，出锅备用。
2、红辣椒洗净切丝，铺在平底锅上，放上小鲍鱼，倒入高汤、调好的佐料酱，大火煮开后改小火慢炖。
3、待汤汁收浓时，放入银杏、松子，继续炖煮5分钟，淋在鲍鱼上即可。
1.鲍鱼含有丰富的蛋白质，还有较多的钙、铁、碘和维生素A 等营养元素；2.鲍鱼营养价值极高，富含丰富的球蛋白；鲍鱼的肉中还含有一种被称为“鲍素”的成分，能够破坏癌细胞必需的代谢物质；3.鲍鱼能养阴、平肝、固肾，可调整肾上腺分泌，具有双向性调节血压的作用；4.鲍鱼有调经、润燥利肠之效，可治月经不调、大便秘结等疾患；5.鲍鱼具有滋阴补养功效，并是一种补而不燥的海产，吃后没有牙痛、流鼻血等副作用，多吃也无妨。
营养价值鲍鱼是中国传统的名贵食材，其肉质细嫩、鲜味浓郁，位列八大“海珍”之一，素称“海味之冠”，是极为珍贵的海产品，在国际市场上历来享有盛名。
不仅如此，鲍鱼营养丰富，具有极高的药用价值。
《本草纲目》中记载，鲍鱼性平，味甘，咸，可明目补虚、清热滋阴、养血益胃、补肝肾，故有“明目鱼”之称。
《药典》中记载，鲍壳又称石决明，是著名的中药材，可平肝潜阳、除热明目，对头痛眩晕、目赤翳障、视物昏花、青盲雀目等症具治疗功效。
《黄帝内经》中记载，以鲍鱼汁治血枯。
Olaechea等研究发现，鲍鱼中蛋白质含量丰富，其中30%~50%为胶原蛋白，远远高于其他鱼贝类。
李太武、陈炜等先后测定、研究了皱纹盘鲍体内营养成分，均发现鲍鱼中含有丰富的蛋白质、氨基酸和对调节机体酸碱平衡、维持神经肌肉的兴奋方面具有重要作用的如钙（Ca）、铁（Fe）、锌（Zn）、硒（Se）、镁（Mg）等矿物质元素。
燕窝研究进展
纤维细胞（NHDFs）评估抗衰老作用，结果证明燕窝 和运动平衡的能力，并且对神经毒素 6- 羟基多巴胺 能明显减少中波紫外线诱导的基质金属蛋白酶 -1 的表 （6-OHDA）处理小鼠的神经具有保护作用。许立拔 [23]
达，促进了 I 型胶原蛋白的合成，从而保护皮肤损伤 起到抗皮肤衰老的作用。姚海燕 [12] 通过喂食果蝇燕窝 观测果蝇的产卵数、重量差、摄食量和抗热应激能力
作用机制可能和减少自由基产生、增加过氧化氢酶水 平有关。陈昕露 [13] 和范群艳 [14] 对果蝇进行生存实验， 计算果蝇半数死亡时间、平均寿命、最高寿命和延寿率，
用有关。 1.5 抗氧化
ZHANG 等 [24] 将 食 用 燕 窝 依 次 通 过 胃 蛋 白 酶、
并绘制生存曲线，结果表明，燕窝炖煮物具有一定的 延缓果蝇衰老作用。HU 等 [15] 的果蝇热应激实验表明，
110 / 现代食品 XIANDAISHIPIN
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果表明燕窝不仅具有抗氧化能力，且抗氧化能力还与 食用燕窝浓度存在量效关系。 1.6 改善记忆力
陈昕露 [13] 通过 Morris 水迷宫实验研究燕窝炖煮 物和唾液酸标准品组对 SD 幼鼠学习记忆能力的作 用，结果表明燕窝炖煮物能够显著缩短幼鼠寻找平台 潜伏期时间，可极显著改善幼鼠学习记忆能力。XIE 等 [26] 通过在怀孕或哺乳期给雌性小鼠口服燕窝酸， 使用 Morris 水迷宫测试评估其后代的空间学习表现， 结果表明在怀孕和哺乳期间母体施用 EBN 可以提高 后代的空间学习能力。CAREENA 等 [27] 通过脂多糖 构建 Wistar 大鼠模型，采用 Morris 水迷宫实验评价燕 窝对 Wistar 大鼠学习能力的改善。结果表明燕窝提取 物抑制了大鼠体内的炎症细胞因子（IL-1β、IL-6 和 TNF-α）和氧化标记物的上升，保护神经细胞，改善 大鼠学习记忆的能力。HOU 等 [28] 对去除卵巢雌性大 鼠单独喂食燕窝和雌激素治疗后进行 Morris 水迷宫测 试，并评估大鼠体内血清雌激素水平、毒性标志物（丙 氨酸转氨酶、碱性磷酸酶、尿素和肌酐）和海马体中 Sirtuin-1 的表达。结果表明，燕窝和雌激素均能增强 大鼠的空间学习记忆能力，增加血清雌激素和海马体 中 Sirtuin-1 表达，此外燕窝对肝脏的毒性比雌性激素 小。范群艳等 [29] 通过水迷宫实验证明燕窝唾液酸对幼 鼠的学习记忆能力有一定的改善作用。 1.7 其他
鲍鱼的功效与作用及禁忌_鲍鱼的营养价值
鲍鱼的功效与作用及禁忌_鲍鱼的营养价值鲍鱼味咸性温，含有丰富的蛋白质以及无机盐、微量元素等，可以有效改善视力疲劳，对身体有很好的滋补作用，具有滋阴清热、养肝明目、平衡血压、镇静化痰、润燥利肠和滋补养颜的功效，对头目眩晕、白内障、吐血、失眠等症有辅助治疗的作用，还能外治溃疡。
还有较多的钙、铁、碘和维生素A等营养元素，有调经、润燥利肠之效，可治月经不调、大便秘结等疾患。
真可谓是上等的养生珍品啊!痛风患者及尿酸高者不宜吃鲍肉，只宜少量喝汤;感冒发烧或阴虚喉痛的人忌食;素有顽癣痼疾之人忌食。
鲍鱼营养丰富，每 100g干品中含蛋白质 64g，脂肪 2g，糖类 3g，同时还富含多种生理活性物质如EPA、DHA、牛磺酸、超氧化物歧化酶等，对维持机体酸碱平衡、神经肌肉兴奋方面具有重要作用的金属元素Ca2+、Mg2+等的含量也较丰富。
研究发现，鲍鱼肌肉酶解物可以显著提高小鼠机体运动耐力、应激能力和免疫功能，同时对学习和记忆有明显增强作用。
鲍鱼肌肉的水提取上清液有很明显的抗凝血作用，对增强家兔纤维蛋白溶解活性有非常显著的作用，这为鲍鱼活血作用提供了佐证。
还有人体所需的钙、磷、铁等矿物质和多种维生素。
冬季鲍鱼中胶原蛋白占总蛋白含量高达30%～50%，远高于一般鱼贝类。
研究发现表明，胶原蛋白含有多种生物活性肽，具有很好的生理功能，如抗氧化、将血压、预防关节炎、保护胃粘膜和抗溃疡、促进皮肤胶原代谢等。
此外，肌肉高含量的胶原蛋白对鲍鱼的质地也有较大影响。
据报道，夏季鲍鱼质地之所以比冬季柔软，是因为夏季鲍鱼中胶原蛋白含量比较低的缘故。
对鲍鱼的热处理可以发现，鲍鱼的硬度随着胶原蛋白的流失而逐渐下降，两者呈线性关系r=0.82。
1、鲍鱼要在冷水中浸泡48小时，将干鲍鱼四周刷洗干净，彻底去沙，否则会影响到鲍鱼的口感与品质，然后先蒸后炖。
2、“鲜鲍鱼”的烹制十分讲究火候的把握，火候不够则味腥，过火则肉质变韧发硬;所以，鲍鱼非常注重调味的得法，浓淡的适宜，否则鲍鱼本身的鲜味是出不来的。
鲍鱼的营养价值 保护机体免疫系统
鲍鱼的营养价值保护机体免疫系统
1.鲍鱼含有丰富的蛋白质，还有较多的钙、铁、碘和维生素A等营养元素。
2.鲍鱼营养价值极高，富含丰富的球蛋白。
3.鲍鱼肉中能提取一种被称作鲍灵素的生物活性物质，有保护机体免疫系统的作用。
鲍鱼的选购
鲍鱼干，以质地干燥，呈卵圆形的元宝锭状，边上有花带一环，中间凸出，体形完整，无杂质，味淡者为上品。
市场上出售的鲍鱼于有紫鲍，明鲍、灰鲍三种干制品，其中紫鲍个体大，呈紫色，有光亮，质量好;明鲍个体大，色泽发黄，质量较好;灰鲍个体小，色泽灰黑，质量次。
其实就是虾青素的含量，虾青素含量高则呈紫色，虾青素含量低则呈黄色，虾青素被氧化了则呈灰色。
虾青素含量和其营养价值正相关，活性的虾青素含量越高，营养价值就越高。
从色泽观察，鲍鱼呈米黄色或浅棕色，质地新鲜有光泽;从外形观察，鲍鱼呈椭圆形，鲍身完整，个头均匀，干度足，表面有薄薄的盐粉，若在灯影下鲍鱼中部呈红色更佳;从肉质观察，鲍鱼肉厚，鼓壮饱满，新鲜。
而劣质鲍鱼的特征，从颜色观察，其颜色灰暗、褐紫，无光泽，有枯干灰白残肉，鲍体表面附着一层灰白色物质，甚至出现黑绿霉斑;
从外形观察，体形不完整，边缘凹凸不齐，个体大小不均和近似“马蹄形”;从肉质观察，肉质瘦薄，外干内湿，不陷亦不鼓胀。
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可控酶解从海洋鱼蛋白中制备生物活性肽的研究
可控酶解从海洋鱼蛋白中制备生物活性肽的研究一、本文概述本研究工作聚焦于海洋资源的深度开发利用，特别是针对海洋鱼类蛋白这一丰富且未充分利用的生物资源，采用先进的可控酶解技术来制备具有生物活性的肽类物质。
论文首先阐述了海洋鱼蛋白作为生物活性肽潜在来源的重要性，以及酶解技术在蛋白质改性和功能成分释放方面的优势。
通过对沙丁鱼蛋白进行系统研究，我们探索了酶种类选择、酶解条件（包括pH值、温度、水解时间、酶底物比等）的优化，并结合超滤和离子交换层析等分离纯化手段，旨在高效地从鱼蛋白中获得具有特定生物活性的小分子肽。
研究的核心目标是探究如何通过精准调控酶解过程，实现对生物活性肽产量和结构的控制，进而鉴定其结构特征和生物活性。
实验不仅涵盖了活性肽的制备流程优化，还包括对其抗疲劳活性的深入研究，以验证所得到的生物活性肽在改善机体机能方面可能的应用价值。
最终，本研究期望为海洋鱼蛋白资源的高值化利用提供理论依据和技术支撑，推动生物活性肽在医药、食品、化妆品等领域的发展与应用。
二、海洋鱼蛋白原料及预处理方法海洋鱼蛋白作为生物活性肽的理想来源，因其丰富的氨基酸组成和潜在的生物活性而备受关注。
本研究选取了新鲜且富含高质量蛋白质的海洋鱼类，如沙丁鱼、鲐鲅鱼等，确保原料的新鲜度和无污染状态是保证最终产品品质的关键。
在预处理阶段，首先对捕捞或收购的鱼类进行了严格筛选，剔除了病害、死亡以及不新鲜的个体。
原料鱼经清洗去除内脏和杂质后，采用低温冷冻技术迅速锁住蛋白质结构和营养成分，防止腐败变质。
随后进行解冻，并对鱼肉进行机械破碎，通过物理方式去除脂肪和其他非蛋白成分，这一过程通常包括离心分离、压榨脱脂等步骤，力求将鱼蛋白的脱脂残留量控制在较低水平，以利于后续酶解反应的高效进行。
接着，对脱脂后的鱼肉进行温和热处理，以破坏肌肉组织结构并灭活可能影响酶解效果的天然酶类。
将处理过的鱼肉进一步研磨成细粉，以增大鱼蛋白与酶接触的表面积，提高酶解效率。
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鲍鱼酶解提取物的营养成分及对免疫低下小鼠的免疫调节作用
彭汶铎1 陈启亮2 赵金华3 (11 中山大学药学院 ,广东 广州 510275 ;21 汕尾市金海宝有限公司 ,
广东 汕尾 516600 ;31 海王药业有限公司用鲍鱼资源 ,研究了鲍鱼酶解提取物 ( Enzymolytic extracts of abalone , EEA) 的营养 成分及对免疫功能的影响 。EEA 游离氨基酸总量为 8153 gΠL ,第一限制氨基酸为 Leu ,其氨基酸价 为 81 ,牛磺酸含量为 7180 gΠL ,磷脂总量为 153 mgΠL ,富含维生素和 Se 、Zn 等矿物质 。EEA 可依剂量 改善氢化可的松型免疫低下小鼠的体重 、胸腺和脾重 ,增加肝脏 DNA 和 RNA 含量以及外周血 T 细 胞比例 ,提高胸腺和脾脏淋巴细胞增殖能力 。EEA 对胸腺的作用大于脾脏 。结果表明 , EEA 含有 丰富的营养成分 ,对免疫低下有明显的改善作用 ,对细胞免疫的作用大于体液免疫 ,其机制可能是 促进免疫细胞 DNA 的合成 。 关键词 :鲍鱼 ;组织提取物 ;营养 ;免疫抑制
鲍鱼为传统高档滋补食品 ,早在《名医别录》里 已有记载 。随着鲍鱼人工养殖技术的应用 ,广东省 汕尾市形成了全国最大的鲍鱼养殖基地 ,年产鲍鱼 900 t (占全国同期产量的 40 %以上) ,并呈持续上升 趋势 ,但有关鲍鱼的加工 、营养成分和生理活性的研 究甚少报道 ,有文献指出 ,鲍鱼水溶性多糖能明显抑 制裸鼠移植人鼻咽癌的生长 、诱导肿瘤细胞凋亡和 坏死[1] ,对艾氏腹水型小鼠和肝癌腹水型小鼠有延 长寿命的作用 、对 S180 实体瘤小鼠有明显的抑瘤作 用[2] 。肿瘤细胞的生长 、死亡与机体免疫功能有直 接的关系 。本实验研究鲍鱼酶法提取物的营养组成 以及对免疫功能的影响 ,为鲍鱼的深加工与综合利 用提供参考依据 。
准入门槛 ;指导酱油生产企业应用和建立 HACCP 体 系 ,走规范化的可持续健康发展的道路 ,为人民群众 提供卫生 、安全的调味食品 。
参考文献
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[2 ] 内贸局 、卫生部 ,国家技术监督局 ,等.《关于加强调味 品生产销售管理的通知》(内贸局联发消费字〔2000〕第 17 号) [ Z] .
lymphocyte , and enhanced lymphocyte proliferations of thymus and spleen , in a dose2dependent manner. EEAπs actions on thymus were more effective than those on spleen. The results indicated that EEA was rich in nutrients and possessed significant immunomodulatory effects , especially on cellular immunity , which was probably related to its promoting activity on DNA synthesis of immunocytes. Key word : Abalone ; Tissue Extract ; Nutrition ; Immunosuppression
为检验本提取方法的稳定性和重复性 ,先后制 备了 10 批 EEA ,结果氨基氮 (甲醛滴定法) 和总磷脂 的含量分别为 4158 ±0121 ( 4127 ～ 4184) mgΠml 和 151 ±13 (139～168) μgΠml ,最高与最低含量相差不 超过 21 % ,这在生物反应中属于正常 ,说明本提取 具有较好的重复性和稳定性 。 113 EEA 成分测定 常规方法测定 EEA 主要成 分 ,并折算为在鲍鱼肉质部分中的含量 。总磷脂 :钼
基金项目 : 广东省自然科学基金 (940631) 作者简介 : 彭汶铎 男 副教授
This work was supported by the Science and Technology Plan of the of Guangdong Province , China . (940631)
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中国食品卫生杂志 CHINESE JOURNAL OF FOOD HYGIENE
2005 年第 17 卷第 6 期
© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved.
Nutrients of enzymolytic extract of abalone and immunomodulating effect on immunosuppressed mice PENG Wen2duo , CHEN Qi2liang , ZHAO Jin2hua
(School of Drug Sciences , Sun Yat2Sen University , Guangdong Guangzhou 510275 , China)
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状及监管对策研究 [J ] . 中国食品卫生杂 志 ,2006 ,18 (1) :待发表. [5 ] 卫生部.《消毒技术规范》(第一分册 实验技术规范)
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2 结果 211 EEA 的游离氨基酸组成 EEA 游离氨基酸总 量为 8153 gΠL ,其中 Ala 、Asp 、Glu 、Gly、Pro 、Ser 等 6 种 呈味氨基酸占 4418 % (表 1) 。从营养价值来看 ,以 1973 年 FAOΠWHO 推荐的氨基酸模式 (常规水平) 为 基准 ,计算 EEA 的氨基酸价 (图 1) ,第一限制氨基酸 为 Leu ,其氨基酸价为 81 ,第二限制氨基酸为 Trp (氨 基酸价为 87) 。与几种海洋贝类比较 , EEA 氨基酸 价高于扇贝 ( 氨基酸价为 71 , 第一限制氨基酸为 Val) 和 牡 蛎 ( 氨 基 酸 价 为 77 , 第 一 限 制 氨 基 酸 为 Val) ,与文蛤 ( 氨基酸价为 81 , 第一限制氨基酸为 Val) 、赤贝 (氨基酸价为 81 ,第一限制氨基酸为 Val) 和马氏珍珠贝 (氨基酸价为 82 ,第一限制氨基酸为 含硫氨基酸) [7] 持 平 , 低 于 翡 翠 贻 贝 ( 氨 基 酸 价 为 93 ,第一限制氨基酸为含硫氨基酸) [8] 。再以 1985 年 FAOΠWHOΠUNU 推荐的氨基酸模式 (学龄前水平) 为基准计算 EEA 的氨基酸价 (图 1) ,第一限制氨基
蓝比色法 ; 氨基酸 : 用日立 835250 高速氨基酸自动 分析仪直接测定游离氨基酸 ;矿物质 :等离子体发射 光谱法 ;维生素 :高效液相色谱法 。 114 免疫低下模型小鼠的制备与实验分组 小鼠 80 只 ,按体重分为正常组 (16 只) 和免疫低下模型组 (64 只) ,正常组腹腔注射生理盐水 ,免疫低下模型 组腹腔注射 Hy (20 mgΠkg BW) ,隔天 1 次 ,共 5 次 。 在注射 Hy 期间 , 动物逐渐出现体重减轻 、活动减 少 、反应迟钝 、蜷缩弓背 、毛松等免疫低下的体征[3] , 正常组小鼠无明显变化 。末次注射后记录小鼠体 重 ,将免疫低下鼠按体重均分 4 组 (每组 16 只) ,分 别为 EEA 0 、4 、8 和 16 mlΠkg BW 组 。各组小鼠每天 定时 灌 胃 1 次 给 予 EEA ( 其 中 正 常 组 和 EEA 0 mlΠkg BW组小鼠给予等容量水) ,连续 14 d ,第 15 天 测定有关指标 。 115 免疫功能指标的测定 测定指标包括 : (1) 小 鼠体重 ,计算给予 EEA 14 d 后的体重变化 ; (2) 胸腺 和脾脏重量 ; (3) 外周血淋巴细胞中 T 淋巴细胞的比 例[4] ; (4) 紫外吸收法[5] 测定肝脏 DNA 和 RNA 含量 ; (5) 比色法[6] 测定胸腺和脾脏淋巴细胞增殖能力 ,结 果以吸光度 ( A) 表示 。 116 统计 实验数据经 t 检验 。
1 材料与方法 111 材料 鲜活鲍鱼 (杂色鲍 , Haliotis diversicolor Reeve) 广东省汕尾市双湖鲍鱼养殖工业基地提供 ; 木瓜蛋白酶酶活力 600 000～700 000 UΠg ,广州农业 科技研究所酶制剂厂 ; 氢化可的松 ( Hydrocortisone , Hy) 批号 981013 ,上海信谊药厂 ; RPMI 1640 培养基 美国 Gibco 公司 ;新生小牛血清 ,中国科学院血液研 究所 。
Abstract : This study was intended to investigate the nutrients in the enzymolytic extract of abalone ( EEA) and their effect on immune function. It was determined that the EEA contained free amino acids 8153 gΠL (first limiting amino acid leucine , amino acid score 81) , taurine 7180 gΠL , phosphate 153 mgΠL , and was rich in vitamins and mineral elements such as Se , Zn. In mice with hydrocortisone2induced immunosuppression , EEA improved the weight of body , thymus , and spleen , increased liver DNA and RNA and peripheral blood T