实验十二细菌常用生理生化反应实验结果观察.
生理性生化实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解细菌生理生化反应原理;2. 掌握细菌鉴定中常见的生理生化反应方法;3. 了解生理生化反应在鉴别细菌中的意义。
二、实验原理通过测定微生物校内某些酶类的有无、对某些糖的利用能力、代谢产物的类型等来研究微生物的多样性。
某些细菌产生色氨酸酶,能分解培养基蛋白胨中的色氨酸,产生吲哚,吲哚与对二甲基氨基苯甲醛发生反应,形成红色的玫瑰吲哚,为吲哚反应阳性。
微生物发酵葡萄糖成丙酮酸,2分子丙酮酸缩合脱羧成乙酰甲基甲醇。
乙酰甲基甲醇在碱性条件下与肌酸类物质反应,生成红色物质,为甲基红反应阳性。
三、实验方法1. 吲哚试验:将细菌接种于含有色氨酸的培养基中,加入吲哚试剂,观察颜色变化。
2. 甲基红试验:将细菌接种于含有葡萄糖的培养基中,加入甲基红试剂,观察颜色变化。
四、实验结果1. 吲哚试验:接种了大肠杆菌的试管在加入乙醚和吲哚试剂后,能在乙醚和液体培养基的交界面上产生红色环状物质,大肠杆菌的吲哚试验显阳性。
2. 甲基红试验:大肠杆菌甲基红试验阳性,即大肠杆菌在培养期仍维持酸性pH。
五、实验分析1. 吲哚试验失败原因分析:可能是因为乙醚加量太少,影响实验现象的观察;另一个可能的原因是大肠杆菌菌种有问题。
2. 甲基红试验结果分析:大肠杆菌在培养后仍能维持酸性,而产气杆菌则转化为非酸性末端产物。
六、实验结论1. 通过本实验,我们了解了细菌生理生化反应原理;2. 掌握了细菌鉴定中常见的生理生化反应方法;3. 认识到生理生化反应在鉴别细菌中的意义。
七、实验注意事项1. 实验过程中要严格按照操作规程进行,避免污染;2. 注意观察实验现象,记录实验数据;3. 分析实验结果,找出实验失败的原因。
第2篇一、实验目的1. 了解生理性生化实验的基本原理和方法。
2. 掌握常用的生理性生化指标及其检测方法。
3. 通过实验,学会使用生理性生化检测仪器,提高实验技能。
二、实验原理生理性生化实验是研究生物体内各种生化反应及其代谢过程的重要手段。
常见的细菌生化反应操作和结果判断

一.糖发酵试验1.原理由于各种细菌所含酶类的不同,故对糖(醇)的分解能力不同,其代谢产物也不一样。
有的细菌能分解某些糖而产酸和产气,有些细菌能分解某些糖只能产酸,还有一些细菌因缺乏某些糖分分解酶则不能分解某些糖类。
细菌对糖的不同分解能力可用来鉴别细菌。
2.方法将大肠埃希菌和伤寒沙门菌分别接种葡萄糖、乳糖发酵管,35℃培养18~24小时观察结果。
3.结果观察结果时,首先确定细菌是否生长,细菌生长则培养基呈混浊状态,再确定细菌对糖的分解情况。
(1)不分解糖:培养基颜色与接种前相比无变化,记录时以“-”表示。
(2)分解糖只产酸不产气:培养基中所含的指示剂(溴甲酚紫)由紫色变为黄色,液体培养基的倒置管中未发现气泡。
若为半固体培养基,则培养基内未见气泡或琼脂断裂,记录是以“+”表示。
(3)分解糖既产酸又产气:除培养基中的指示剂颜色改变外,在液体培养基的倒置小管中出现气泡,若为半固体培养基,则培养基内可见气泡或琼脂断裂,记录时以“⊕”表示。
本试验大肠埃希菌分解葡萄糖和乳糖产酸又产气“⊕”,伤寒沙门菌分解葡萄糖只产酸不产气“+”,不分解乳糖“-”。
二.甲基红试验(MR试验)1.原理某些细菌发酵葡萄糖形成丙酮酸,丙酮酸可进一步分解为甲酸、乙酸等酸性物质,使培养基的PH下降至4.4以下,此时加入甲基红指示剂后培养基呈现红色反应(阳性)。
有些细菌分解葡萄糖产生酸进一步转化为醇、醛、酮等非酸物质,使培养基的PH在5.4以上,加入甲基红指示剂呈黄色(阴性)。
2.方法将大肠埃希菌和产气肠杆菌分别接种于葡萄糖蛋白胨水中,经35℃培养24小时,观察结果。
3.结果在培养物中加入甲基红指示剂2~3滴,立即观察,呈现红色为阳性,黄色为阴性。
本实验大肠埃希菌为阳性,产气肠杆菌为阴性。
三.V-P试验1.原理有些细菌在发酵葡萄糖产生丙酮酸后,使丙酮酸脱羧,形成中性的乙酰甲基甲醇,后者在碱性环境中被空气中的氧气氧化为二乙酰。
二乙酰与蛋白胨中精氨酸所含的胍基反应,生成红色反应物。
实验十二细菌常用生理生化反应实验结果观察

实验十二细菌常用生理生化反应实验结果观察一结果观察1.葡萄糖发酵实验直接观察试管,试管变黄者为葡萄糖发酵阳性菌,不变者为阴性菌.左边是恶臭假单胞菌,它有气泡并变黄;右边是大肠杆菌,2v.p.反应和甲基红试验:将培养的液体培养基分成两个干净的小试管,在一个试管中滴入2-3滴甲基红试剂。
溶液变红为甲基红阳性菌,与甲基红阴性菌相同,将V.P.试剂添加到另一个试管中,并在37℃下保持15分钟。
变红的是阳性细菌,保持不变的是阴性细菌vp,图为右边为大肠杆菌,溶液变红,为阳性菌。
3吲哚实验在培养好的液体培养基中加入1厘米高的乙醚,振荡,静置分层,加入2-4滴吲哚试剂,在掖面交界出现红色者为吲哚反应阳性菌,不变者为阴性菌.左边是大肠杆菌,带有红色阳性细菌;右边是铜绿气单胞菌,颜色和阴色相同性菌。
4硝酸盐还原实验在点滴板上滴入革里斯试剂a液和b液,如过溶液变红说明有亚硝酸盐,为硝酸盐还原阳性菌,如果不变色需要再倒出部分培养基在另外的小孔中再滴如耳苯胺试剂,如果变蓝,说明此菌为阴性菌;如果不变色,说明此菌为硝酸盐还原强阳性菌.右下角的假单胞菌为阴性菌,加入科里奥利试剂A和B后不变色,加入二苯胺试剂后变蓝;左上角的大肠杆菌是红色的。
5柠檬酸盐实验那些对柠檬酸细菌呈阳性的人,以及那些使用斜面的人,都会变成阴性左边产生蓝色,产气杆菌阳性;右边为大肠杆菌,阴性。
6明胶水解向培养好的明胶培养基中加入酸性氯化汞或三氯乙酸溶液,并铺满平板,菌落周围出现透明圈的菌为明胶水解阳性菌,没有透明圈的菌为阴性菌.左边是大肠杆菌,呈透明圆形,呈阳性;右边是枯草芽孢杆菌,一种阴性细菌。
7淀粉水解实验将碘溶液加入培养的淀粉培养皿中,盖上培养皿。
菌落周围有透明圈的细菌是淀粉水解的阳性细菌,没有透明圈的细菌是阴性细菌左边枯草杆菌,出现透明圈,阳性;右边大肠杆菌,无透明圈,阴形。
8硫化氢生产实验直接观察培养好的培养基,出现黑色沉淀者为阳性菌,不变者为阴性菌.左边是一根变形的杆状物,有黑色沉淀和阳性细菌;右边是大肠杆菌,阴性细菌。
细菌鉴定中常用的生理生化反应

细菌鉴定中常用的生理生化反应细菌鉴定中常用的生理生化反应1、实验原理(1)细菌生化试验各种细菌所具有的酶系统不尽相同,对营养基质的分解能力也不一样,因而代谢产物或多或少地各有区别,可供鉴别细菌之用。
用生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物,从而鉴别细菌的种属,称之为细菌的生化反应。
(2)糖(醇)类发酵试验不同的细菌含有能发酵不同糖(醇)的酶,因此发酵糖(醇)的能力不同。
其代谢产物也不同。
例如,有些产生酸和气体,有些产生酸但不产生气体。
酸的生成可通过指示剂来确定。
在制备培养基2(黄色)-6.8(紫色)]时预先加入甲酚紫[PHS],当发酵产生酸时,培养基可从紫色变为黄色。
气体的产生可以通过发酵管中倒置的杜氏管中是否存在气泡来证明。
(3)甲基红(methylred)试验(该试验简称mr试验)许多细菌,如大肠杆菌,分解葡萄糖生成丙酮酸,然后分解生成甲酸、乙酸、乳酸等,将培养基的pH值降低到4.2以下。
此时,如果添加甲基红,指示器将显示红色。
因为甲基红指示剂的变色范围为pH4(红色)-ph6 2(黄色)。
如果某些细菌,如产气菌,分解葡萄糖生成丙酮酸,但迅速解吸丙酮酸并将其转化为酒精,培养基的pH值仍高于6.2。
因此,此时添加甲基红指示剂以显示黄色。
(4)大分子代谢的实验。
靛蓝基质(口服吸收)试验某些细菌,如大肠杆菌,能分解蛋白质中的色氨酸,产生靛基质(叫睬),靛基质与对二甲基氨基苯甲醛结合,形成玫瑰色靛基质(红色化合物)。
硫化氢试验某些细菌能分解含硫的氨基酸(肌氨酸、半肌氨酸等),产生硫化氢,硫化氢与培养基中的铅盐或铁盐,形成黑色沉淀硫化铅或硫化铁。
为硫化氢试验阳性,可借以鉴别细菌。
明胶液化实验某些细菌具有胶原酶,使明胶被分解,失去凝固能力,呈现液体状态,是为阳性。
淀粉水解试验(在紫外诱变中做,本实验不做)细菌不能直接利用大分子淀粉。
它们必须依靠产生的胞外酶(淀粉酶)将淀粉水解成小分子糊精或进一步水解成葡萄糖(或麦芽糖),然后被细菌吸收和利用。
细菌的生理生化反应实验报告

细菌的生理生化反应实验报告【实验目的】了解细菌生理生化反应原理,掌握细菌鉴定中常见的生理生化反应方法。
了解生理生化反应在鉴别细菌中的意义。
【实验原理】通过测定微生物校内某些酶类的有无、对某些第五的利用能力、代谢产物的类型等来研究微生物带血的多样性。
某些细菌产生色氨酸酶,能分解培养基蛋白胨中的色氨酸,产生吲哚,吲哚与对二甲基氨基苯甲醛发生反应,形成红色的玫瑰吲哚,为吲哚反应阳性。
微生物发酵葡萄糖成丙酮酸,2分子丙酮酸缩合脱羧成乙酰甲基甲醇。
乙酰甲基甲醇在碱性条件下与肌酸类物质反应,生成红色化合物为.反应阳性。
有些细菌发酵糖类产生有机酸较多,使发酵液的pH下降到以下,当加入甲基红试剂后,时发酵液变红色,为甲基红反应阳性。
某种微生物能以某种糖类为碳源,产酸产气,则判断为发酵这种糖。
【实验材料和用具】1.菌种:大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌、枯草芽孢杆菌。
2.培养基:葡萄糖蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基(葡萄糖、乳糖或蔗糖)、V-P试剂、甲基红试剂、吲哚试剂3.仪器:酒精灯、接种环、超净工作台、恒温培养箱、高压灭菌锅、试管、移液枪、滴管、杜氏小管。
【实验方法】(一)V-P反应1.试管标记取5只装有葡萄糖蛋白胨水培养基的试管,分别标记大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌、枯草芽孢杆菌和空白对照。
2.接种培养以无菌操作分别接种少量菌苔至上述相应试管的培养基中。
空白对照不接种。
置37度恒温培养箱中培养24-48h。
3.观察记录去除以上培养物,分别取出2ml培养液加入另外5支相应编号的空试管中,加入与培养液等量的V-P试剂,充分震荡2min。
放置37度恒温培养箱中培养30min观察记录结果。
(二)甲基红实验于V-P实验留下的培养液中,分别加入2-3滴甲基红指示剂,立即观察培养液的颜色变化(三)吲哚实验1.试管标记取5只装有蛋白胨水培养基的试管,分别标记大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌、枯草芽孢杆菌和空白对照。
细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告

细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告一、引言在微生物学中,鉴定细菌的方法有很多种,其中生理生化反应实验是最常用的一种方法之一。
生理生化反应实验可以通过观察细菌对不同物质的代谢情况来确定其种类和特性。
本报告将介绍细菌鉴定中常用的生理生化反应实验。
二、目的本报告旨在介绍常用的生理生化反应实验,包括试剂、操作步骤、结果解释等内容,以帮助读者更好地了解和掌握这些实验。
三、材料与方法1. 大肠杆菌(Escherichia coli)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)培养基;2. 硝酸盐还原试剂;3. 糖类试剂:葡萄糖、果糖、半乳糖;4. 氨基酸试剂:天冬氨酸、赖氨酸;5. 酶试剂:淀粉酶、蛋白酶;6. 无水硫酸铜溶液。
四、实验步骤及结果解释1. 硝酸盐还原试验步骤:(1)取一支细菌液体培养物,加入硝酸盐还原试剂;(2)观察液体颜色变化。
结果解释:若液体变为红色,则表示细菌能够还原硝酸盐为亚硝酸盐,是亚硝化菌。
若无颜色变化,则表示细菌不能还原硝酸盐。
2. 糖类代谢试验步骤:(1)取三个试管,分别加入葡萄糖、果糖、半乳糖;(2)加入相同量的细菌液体培养物;(3)观察试管内气泡产生情况。
结果解释:若在葡萄糖试管内产生了气泡,则表示该细菌能够利用葡萄糖进行发酵代谢;若在果糖或半乳糖试管内产生了气泡,则表示该细菌能够利用果糖或半乳糖进行发酵代谢。
3. 氨基酸代谢试验步骤:(1)取两个试管,分别加入天冬氨酸和赖氨酸;(2)加入相同量的细菌液体培养物;(3)观察试管内气泡产生情况。
结果解释:若在天冬氨酸试管内产生了气泡,则表示该细菌能够利用天冬氨酸进行代谢;若在赖氨酸试管内产生了气泡,则表示该细菌能够利用赖氨酸进行代谢。
4. 酶代谢试验步骤:(1)取两个试管,分别加入淀粉和蛋白质;(2)加入相同量的细菌液体培养物;(3)观察试管内颜色变化情况。
结果解释:若在淀粉试管内出现了透明带,则表示该细菌能够分泌淀粉酶;若在蛋白质试管内出现了变色,则表示该细菌能够分泌蛋白酶。
细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告

细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告细菌鉴定是微生物学中的一个重要分支,它是通过对细菌的形态、生理生化反应、生长特性等方面进行分析,来确定细菌种类的过程。
在细菌鉴定中,生理生化反应实验是一种常用的方法,它可以通过观察细菌在不同条件下的生长情况,来确定细菌的种类。
本文将介绍几种常用的生理生化反应实验。
1. 氧气需求实验氧气需求实验是一种常用的生理生化反应实验,它可以用来确定细菌的氧气需求量。
在这个实验中,我们需要将细菌接种到含有不同氧气浓度的培养基中,然后观察细菌的生长情况。
如果细菌只能在氧气充足的条件下生长,那么它就是一种需氧菌;如果细菌只能在氧气缺乏的条件下生长,那么它就是一种厌氧菌;如果细菌既能在氧气充足的条件下生长,也能在氧气缺乏的条件下生长,那么它就是一种兼性厌氧菌。
2. 糖类发酵实验糖类发酵实验是一种常用的生理生化反应实验,它可以用来确定细菌对不同糖类的发酵能力。
在这个实验中,我们需要将细菌接种到含有不同糖类的培养基中,然后观察培养基的酸碱度变化。
如果培养基的酸碱度发生了变化,那么说明细菌对这种糖类进行了发酵。
通过这个实验,我们可以确定细菌对哪些糖类具有发酵能力,从而进一步确定细菌的种类。
3. 氧化还原实验氧化还原实验是一种常用的生理生化反应实验,它可以用来确定细菌的氧化还原能力。
在这个实验中,我们需要将细菌接种到含有不同氧化还原剂的培养基中,然后观察培养基的颜色变化。
如果培养基的颜色发生了变化,那么说明细菌对这种氧化还原剂具有反应能力。
通过这个实验,我们可以确定细菌的氧化还原能力,从而进一步确定细菌的种类。
4. 酶活性实验酶活性实验是一种常用的生理生化反应实验,它可以用来确定细菌的酶活性。
在这个实验中,我们需要将细菌接种到含有不同底物的培养基中,然后观察底物的变化情况。
如果底物发生了变化,那么说明细菌对这种底物具有酶活性。
通过这个实验,我们可以确定细菌的酶活性,从而进一步确定细菌的种类。
细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告再解读

细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告再解读知识专栏:细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告再解读封面图片:一位实验室技术人员在显微镜下观察细菌培养物导语:在细菌学研究领域,生理生化反应实验是常用的方法之一,它可以帮助我们了解细菌的特性、代谢途径以及与环境的相互作用。
本文将对细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告进行具体解读,帮助读者更深入地了解细菌的鉴定过程及意义。
一、实验背景和目的在细菌鉴定中,我们经常需要对待测的细菌进行分类和鉴定。
而生理生化反应实验是一种非常重要的手段,能够通过观察细菌对不同化学试剂的反应,以及产物的生成情况等特征,来判断细菌的性质。
本实验的目的即是通过几项常用的生理生化反应实验,进一步探究待测细菌的特性和代谢途径。
二、实验方法1. 大肠杆菌的蛋白酶试验(编号:1)在本实验中,我们采用的是凝固酶试纸。
观察到试剂的颜色发生变化,即从黄色转变为品红色,说明大肠杆菌在此试验中结果为阳性。
进一步解读:凝固酶是一种能够水解胶原蛋白的酶,大肠杆菌能够产生这种酶,因此在这一试验中呈阳性反应。
这可以帮助我们进一步确认待测菌株是大肠杆菌,从而对其进行鉴定分类工作。
2. 肺炎克雷伯氏菌的氧化/发酵试验(编号:2)我们使用菲斯氏培养基进行此实验,观察培养基颜色变化。
如果培养基由绿色变为黄色,表示菌株对葡萄糖的进行氧化反应,即为氧化阳性;如果培养基继续保持绿色,表示菌株对葡萄糖进行发酵,即为发酵阳性。
进一步解读:肺炎克雷伯氏菌对葡萄糖的氧化/发酵反应具有很重要的意义。
通过此实验,我们可以判断菌株的能量代谢途径是氧化还是发酵,并且可以辅助鉴定菌株的种类。
3. 金黄色葡萄球菌的氧化/发酵试验(编号:3)氧化/发酵试验在金黄色葡萄球菌的鉴定中也扮演着重要的角色。
在此实验中,当培养基由紫色变为黄色时,表示菌株对葡萄糖的进行氧化反应,即为氧化阳性;若培养基继续保持紫色,表示菌株对葡萄糖进行发酵,即为发酵阳性。
进一步解读:金黄色葡萄球菌的氧化/发酵反应结果也能帮助我们确定菌株的代谢途径,并对其分类鉴定提供重要依据。
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实验十二细菌常用生理生化反应实验结果观察
一结果观察
1葡萄糖发酵实验
直接观察试管, 试管变黄者为葡萄糖发酵阳性菌,不变者为阴性菌.
左边为恶臭假单胞菌,有气泡并变为黄色;右边为大肠杆菌,
2V. P. 反应和甲基红试验:
将培养好的液体培养基分装于两个干净的小试管中,在一管中滴入2-3滴甲基红试剂, 溶液变红的为甲基红阳性菌,不变的为甲基红阴性菌. 在另一管中加入V. P. 试剂,在37℃保温15分钟, 变红者为阳性菌,不变者为阴性菌.
VP,图为右边为大肠杆菌,溶液变红,为阳性菌。
3吲哚实验
在培养好的液体培养基中加入1厘米高的乙醚,振荡,静置分层,加入2-4滴吲哚试剂,在掖面交界出现红色者为吲哚反应阳性菌,不变者为阴性菌.
左边为大肠杆菌,出现红色阳性菌;右边为产气杆菌,颜色不变,阴
性菌。
4硝酸盐还原实验
在点滴板上滴入革里斯试剂A液和B液,如过溶液变红说明有亚硝酸盐,为硝酸盐还原阳性菌,如果不变色需要再倒出部分培养基在另外的小孔中再滴如耳苯胺试剂,如果变蓝,说明此菌为阴性菌;如果不变色,说明此菌为硝酸盐还原强阳性菌.
右下方恶臭假单胞菌,加入革里斯试剂A、B后不变色,再加入二苯
胺试剂后变蓝,为阴性菌;左上方大肠杆菌为红色。
5柠檬酸盐实验
直接观察斜面,斜面变兰色者为柠檬酸盐利用阳性菌,不变者为阴性菌.
左边产生蓝色,产气杆菌阳性;右边为大肠杆菌,阴性。
6明胶水解
向培养好的明胶培养基中加入酸性氯化汞或三氯乙酸溶液,并铺满平板,菌落周围出现透明圈的菌为明胶水解阳性菌,没有透明圈的菌为阴性菌.
左边为大肠杆菌,出现透明圈,阳性;右边为枯草杆菌,阴性菌。
7 淀粉水解实验
向培养好的淀粉培养基平板上加入碘液,并铺满平板,菌落周围出现透明圈的菌为淀粉水解阳性菌,没有透明圈的菌为阴性菌.
左边枯草杆菌,出现透明圈,阳性;右边大肠杆菌,无透明圈,阴形。
8 硫化氢产生实验
直接观察培养好的培养基,出现黑色沉淀者为阳性菌,不变者为阴性菌.
左边为变形杆,菌出现黑色沉淀,阳性菌;右边为大肠杆菌,阴性菌。
二思考题
1你的实验结果与实验预期是否相同?如果不同试分析原因.
答:与试验预期部分相符。
不相符的结果多处于大肠杆菌接种处,可能原因—大肠杆菌不足。
2你认为在做生理生化反应实验中应注意什么问题?
答:1)要严格按照培养基配方配制培养基。
2)观察结果时要注意滴加药量及反应时间。