黄芪多糖的提取和含量测定研究
黄芪多糖的提取与应用研究
病毒 、 马立 克 氏病 毒 、 流感 病 毒 等 多种 禽 畜传 染 禽
性病毒 都有很 强 的抑 制作用 Ｉ。 ｌ ２３抗 肿瘤 作 用 黄芪 多 糖 能够 明显 延 长 移植 有 黑 ． 色素瘤 Ｂ ６细胞小 鼠的生存 期 ， 晚期 肿瘤 有一 定 １ 对 的治 疗效 果【。黄芪 多糖 对 Ｓ ８ ｌ ２ １ １０小 鼠肿 瘤 细胞 凋
［］ 刘瑞生 ， ２ 张述斌 ， 必慧等 ．黄芪多糖的提取和含量测定研究 王
［ｌ 国外 畜牧 学 ，０ ９２ （） ３ ７ ． Ｊ ｌ ｜ ２ ０ ，９１７ — ４ ：
［］ 刘永录 ， ３ 于瑞 ， 国祖等．ｐ 张 Ｈ值对碱法提取 黄芪多糖 收率的影 响及黄芪多糖体外抑菌作用研究 ［ ＿ 河南农业科学 ，０ ０５ Ｊ １ ２ １，：
［２ 黄宏思 ， １］ 黄卫彤 ， 覃志坚等 ．Ｃ ３ Ｋ和黄芪多糖 联合治疗荷 ＤＡ
瘤 动 物 的 实 验 研 究 明 ． 右 江 民 族 医 学 院 学 报 ，０ ２２ （） ２０ ，４３：
３ ２ ３ ４ ３ － ３ ．
［３ 陈光 ， １】 臧文 臣， 刘显清等．黄芪多糖对动物肿瘤细胞凋亡影响
提 取法进 行 了优 化 ， 考察 了加水 量 、 取 时间 、 取 提 提
次 数对 黄芪 多糖 提取 工 艺 的影 响 ， 出最 优条 件 为 得
加 ６倍量 的水 ， 取 １ 提 ． 时， ５小 提取 ３次 。在该 条件
张萍 等［ 合 对 比了微 波辅 助提 取法 与传统 水 ６ １ 综
提法 的提取 率 和 时 间等 ，其 提 取 率分 别 为 ９ ． ％ ３０ ２ 和 ８ ． ％， 时分 别 为 ３ ９３ ４ 耗 ０分 钟 和 １ ０分 钟 。再 考 ２
ｐ０ｙ ａ ｈａ ｉ ｅ ． ｌｓ（ ｃ ｒｄ ｓ
黄芪多糖的提取及含量测定方法简述
黄芪多糖的提取及含量测定方法简述发表时间：2011-11-02T10:39:28.263Z 来源：《中外健康文摘》2011年第22期供稿作者：惠秋沙[导读] 黄芪是一种传统中药材，含有多种有效成分，其中黄芪多糖是黄芪补气的主要活性成分之一惠秋沙（山东中医药大学药学院山东济南 250014）【中图分类号】R446.1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）22-0220-02【摘要】黄芪是一种传统中药材，含有多种有效成分，其中黄芪多糖是黄芪补气的主要活性成分之一，现就其提取方法和含量测定做一简单的分析。
【关键词】黄芪多糖提取含量测定The Extracting and the Content Determination Method of Astragalus polysaccharidesHui Qiu-sha (Pharmaceutical College, Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan, China 250014)【Abstract】Astragalus is a kind of traditional Chinese herbal medicine. It contain a variety of effective ingredients, inside, astragalus polysaccharides are one of the main compositions tonifying qi astragalus. Currently, we make a simple analysis on the extracting and the content determination method of astragalus polysaccharides.【Key words】 Astragalus polysaccharides extraction content determination黄芪为豆科草本植物蒙古黄芪、膜荚黄芪的根，是一种传统的中药材，具有补气固表、利水退肿、托毒排脓、生肌等功效。
黄芪多糖的微波提取及含量测定
黄芪多糖的微波提取及含量测定王莉, 刘志勇, 鲁建江, 顾承志, 陈宏伟(石河子大学药学院,新疆石河子832002)摘要 目的:从黄芪中提取多糖,并测定其含量。
方法:运用微波技术用水提醇沉法提取黄芪多糖,用酚———硫酸比色法测定多糖含量。
结果:测得黄芪中多糖含量6.55%,平均回收率为99.05%,RSD= 1.02%(n=3)。
结论:首次运用微波技术从黄芪中提取出多糖,反应速度加快,实验结果令人满意。
关键词 微波技术 黄芪 多糖 提取 含量测定 黄芪(Astragalus lepsensis Bge)为豆科紫云英属植物,具补气固表、脱疮生肌和强心利尿等作用,可用于治疗体虚自汗、久泻等病症[1],黄芪还具有增强免疫系统、抗氧化、延缓衰老、改善心功能状态、抗病毒、抗癌等功效[2]。
微波技术的应用,近年来得到很大发展。
微波具有穿透力强、选择性高、加热效率高等特点。
微波辐射(MWI)可以大大加快反应速度(最高达1240倍),反应时间以分、秒计[3]。
微波技术应用于植物细胞破壁,有效地提高了收率[4],亦取得了令人可喜的进展。
本实验运用微波技术对黄芪用石油醚、乙醚除去脂溶性杂质,用80%乙醇提取除去所含单糖、低聚糖及甙类等干扰性成分后,再运用微波技术用水提醇沉法制得黄芪粗多糖,并采用酚-硫酸比色法对其多糖含量进行测定[5],取得了令人满意的结果。
1 仪器、试剂及样品 UV-2401PC紫外分光光度计(日本岛津); MC L-3型连续微波反应器(四川大学无线电系); (+)葡萄糖(AR)105℃干燥恒重;苯酚(AR);硫酸(AR)。
黄芪:7月份采集于四川阿坝州,经生药学教研室成玉怀副教授鉴定为豆科紫云英属植物,自然干燥,粉碎待用。
2 标准曲线的绘制2.1 标准葡萄糖溶液的配制 精确称取干燥恒重的葡萄糖25.2mg,加适量水溶解,转移至250ml容量瓶中,加水至刻度,摇匀,配成浓度为100.8μg/ml标准葡萄糖溶液备用。
黄芪中黄芪多糖的提取分离及应用研究进展
李红民等［７］用水、氧化钙水溶液和碳酸钠水溶液分别对黄 芪进行提取率比较，结果 ＣａＯ提取收率最高（１１．７％），与水提 取法 相 比 提 取 率 是 水 提 取 法 收 率 （３．６％）的 ３．２５倍，是 Ｎａ２ＣＯ３ 水溶液提取回收率（５．７％）的 ２．０５倍。
８
韩凤兰等 ［８］通过用大 量 实 验 对 黄 芪 中 黄 芪 多 糖 的 几 个 常 用提取方法进行了比较，通过试验发现用常规的水提取多黄芪 多糖提取率为 ５．４６％，而用氧化钙水溶液提取黄芪多糖提取率 为 ６．６８％，而 利 用 碳 酸 钠 水 溶 液 提 取 黄 芪 多 糖 提 取 率 达 到 １０．０６％，最后超细 粉 碎 技 术 提 取 黄 芪 多 糖 提 取 率 也 能 达 到 ６．２８％。
国内外通过大量的试验表明，黄芪中黄芪多糖药用价值较 大，不仅能增强人体免疫力，还能对人体的血糖、血压、心脏、防 衰老、抗氧化等有一定的作用 。 ［１０］ 其在临床上常用于提高抵 抗力、抗癌、消除炎症。而兽医临床目前多用于畜禽产品免疫 力的提高主要对鸡传染性法氏囊病，效果明显。而在兽医临床 试验中，意外发现黄芪多糖对动物增产有一定作用，因而发现 黄芪多糖作为饲料添加剂的另一面，使其在畜牧业生产中使用 越来越广泛。 ３．１ 提高畜禽的生产性能
黄芪多糖的含量测定
黄芪多糖的含量测定1．标准溶液的制备取经105℃干燥至恒重的葡萄糖100毫克，置100毫升容量瓶中加水溶解，并稀释至刻度，摇匀。
精密量取十毫升，置100毫升容量瓶中，加水至刻度，摇匀，配成0.1毫克/毫升的葡萄糖标准溶液。
2.标准曲线的绘制准确吸取葡萄糖标准溶液0.1-0.6毫升共6份，分别置25毫升容量瓶中，加蒸馏水补充至2.5毫升，再加入5%苯酚溶液1.0毫升，摇匀，迅速加浓硫酸5.0毫升，摇匀，放置5.0M/N 置80℃水浴中加热15分钟，取出，迅速冷却至室温。
另以2.0毫升蒸馏水同上平衡操作作为空白对照，在490纳米波长处测定吸光度，并求出回归方程。
3.黄芪多糖含量测定取提取并经105℃干燥至恒重的黄芪多糖50毫克，置于50毫升容量瓶中，加蒸馏水溶解至刻度，摇匀，准确吸取10毫升，置100毫升容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，配成0.1毫克/毫升的黄芪多糖溶液。
吸取上述溶液0.5毫升，置25.0毫升容量瓶中，加蒸馏水补充至2毫升，依法测定吸光度值，并代入回归方程计算，求得黄芪多糖的相对含量。
4.黄芪多糖的含量测定结果表1葡萄糖标准溶液测定结果－——————————————————————————————————————序V取样/ML 葡糖糖浓度C/mg.ml﹣1 吸光度A号—————————————————————————————————————— 1 0.1 0.01 0.0802 0.2 0.02 0.1153 0.3 0.03 0.1754 0.4 0.04 0.2255 0.5 0.05 0.2706 0.6 0.06 0.305 ——————————————————————————————————————经计算的标准回归方程为：C=0.21216A—6.37×10-3，R=0.997057表2黄芪多糖粗提物相对含量——————————————————————————————————————批次提取方法吸光度A 浓度相对含量C /mg.ml-1 ——————————————————————————————————————021108 水提取法0.185 0.0326 65.2% 030516 水提取法0.188 0.033 67.8% 040309 Ca0溶液法0.230 0.0425 85.0% 040305 Ca0溶液法0.215 0.0393 78.6% 040323 Ca0溶液法0.225 0.0414 82.8%从表2可见，水提取法APS含量为65.2%-67.8%，平均为66.5%；Ca0溶液法APS含量为78.6%-85.0%，平均为82.1%；Ca0溶液提取法比水提取法平均提高APS含量15.6个百分点，差异显著（P<0.05）。
实验四黄芪多糖的提取
实验黄芪多糖提取
黄芪为豆科植物的干燥根，主要药理成分是黄芪多糖和黄芪甙。
黄芪多糖在医学和兽医临床上研究应用较为广泛，可作为免疫促进剂或调节剂，同时具有抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、抗应激、抗氧化等作用。
能提高未成年禽兽的抗病力，对幼、仔猪、幼畜经常添加可减少疾病，是促进增重，提高生活率，增加整齐度。
一、材料与方法
（一）材料与试剂
黄芪根、氧化钙、95%乙醇均为分析纯。
天平，水浴锅，粉碎机等。
（二）方法
黄芪多糖的提取:
CaO溶液提取法采用pH 9～10的CaO溶液煮沸提取，浓缩时调至pH6.5左右。
1.称取黄芪根1千克，去掉杂质和泥土，粉碎成粉末。
2.黄芪根粉末中加6-7倍的CaO溶液，煮沸1小时，用8层纱布过滤。
3.合并滤液，调pH至6.5左右。
4.将浓缩液中加入2倍量95%乙醇沉淀。
5.倾去上清液，沉淀物中再加入95%的乙醇至浓度为80%，静置，倾出上清，滤渣即为黄芪多糖。
二、结果与分析
1.黄芪多糖的物理性状
提取的黄芪多糖为灰白色粉末，易溶解于水，溶液呈乳白色，无杂质。
三、小结
黄芪多糖作为黄芪纤维质的组成部分，纤维在水中的溶胀作用和溶解性差，因此水提取法收率低。
在碱性溶液中的溶胀作用和溶解性显著增加，纤维之间的酯键易断裂而发生剥皮反应，使更多的多糖得以游离而被提取出来，从而提高多糖收率，因此黄芪多糖尽量避免在酸性条件下提取。
黄芪汤中多糖的提取以及含量测定研究
黄芪汤中多糖的提取以及含量测定研究黄芪汤作为一种常用中药方剂，有着提升免疫力、调节免疫系统和具有抗疲劳、抗氧化等功效。
其中黄芪作为其主要成分，被认为是黄芪汤中最重要和最具有活性的成分。
然而，黄芪中的多糖在其药效中也起着很重要的作用。
因此，本文将探讨黄芪汤中多糖的提取方法以及含量测定研究。
一、黄芪中多糖的提取方法多糖是由许多简单糖分子（单糖）通过糖苷键连接而成的高聚物，不溶于有机溶剂。
因此，提取黄芪中多糖的方法需使用水或醇等极性溶剂。
常用的提取方法有：1.水提法将黄芪粉末加入水中，用热水或蒸汽加热，较高温度下多糖易被水溶解。
但受限于多糖在水溶性上的差异，因此不同来源或不同处理方法的黄芪所得多糖的品质和产率也会有差异。
即使是同样来源和处理方法的化学成分分别也会对多糖的产量和品质有影响。
2.醇提法常用的醇有乙醇、丙酮等。
多糖在醇中溶解度更高，且较容易水解开，因此产量和品质都会高于水提法。
但醇对物质的溶解能力比较大，可能会带走较多的杂质。
同时，操作过程会有火源，需要注意安全。
以上两种方法常被连用来提高多糖的提取产量和品质。
二、黄芪中多糖的含量测定方法黄芪中多糖含量的测定有很多种方法。
如： 1.硫酸蒽醌法该法以硫酸为催化剂，蒽醌为变色剂。
多糖与蒽醌反应，生成颜色，颜色深浅与多糖含量成正比。
该法操作简单、灵敏度高，但易因蒽醌的选择性不够和污染物的存在而出现误差。
2.酚硫酸法该法以硫酸为催化剂，酚用来变色。
采用热酸解、酚硫酸混合试剂共同水解产生浓烈的酸性体系，在加入糖溶液，糖经过反应后能够与酚产生复杂络合物，出现特征性吸收峰。
该法通用性强，且对糖类物质反应稳定、选择性好。
3.紫外分光光度法该法原理相对简单，但需要有被检测物质有固定的吸收峰，故仅能测定部分多糖的含量。
该法可测定部分醛基含量，依法的测定要求光谱仪有一定的波长选择能力。
综上，提取黄芪中多糖的方法主要包括水提法和醇提法。
其中醇提法多糖的产量和品质较高。
黄芪多糖提取及含量测定
黄芪多糖提取及含量测定黄芪多糖是中药黄芪中的一种重要活性成分，具有多种药理作用，如增强免疫力、抗肿瘤、抗炎、抗氧化等。
因此，对黄芪多糖的提取及含量测定具有重要意义。
一、黄芪多糖的提取1.材料与方法（1）材料：黄芪药材、蒸馏水、乙醇、乙醚、丙酮、葡萄糖等。
（2）方法：将黄芪药材破碎成粉末，加入适量蒸馏水加热煮沸，保温一段时间，过滤并收集滤液。
滤渣再用适量蒸馏水煮沸，重复以上操作，合并滤液。
将滤液浓缩至一定体积，加入乙醇使浓度达到70%-80%，静置过夜，过滤得到沉淀物。
将沉淀物用适量乙醚、丙酮洗涤，晾干后得到粗多糖。
2.结果与讨论通过上述方法提取的黄芪多糖为淡黄色粉末，具有一定的甜味。
提取率受到多种因素的影响，如药材质量、破碎程度、煮沸时间、乙醇浓度等。
通过对不同批次黄芪药材的提取实验，可以发现不同批次黄芪药材的多糖含量存在一定差异。
因此，在提取过程中需要注意控制实验条件，以提高提取率和多糖纯度。
二、黄芪多糖的含量测定1.材料与方法（1）材料：黄芪多糖样品、葡萄糖对照品、苯酚-硫酸试剂、蒸馏水等。
（2）方法：将葡萄糖对照品配制成不同浓度的标准品溶液，分别加入苯酚-硫酸试剂显色后，在特定波长下测定吸光度值。
以吸光度值与浓度绘制标准曲线，得到回归方程。
取黄芪多糖样品适量，用蒸馏水溶解后加入苯酚-硫酸试剂显色，测定吸光度值。
根据回归方程计算样品中葡萄糖的含量，从而得到黄芪多糖的含量。
2.结果与讨论通过上述方法测定的黄芪多糖含量为一定范围内的数值。
不同批次黄芪药材的多糖含量存在一定差异，可能与药材质量、提取条件等因素有关。
同时，该方法也受到实验条件的影响，如苯酚-硫酸试剂的浓度和加入量、显色时间等。
因此，在测定过程中需要注意控制实验条件，以提高测定准确性和可重复性。
三、结论通过对黄芪多糖的提取及含量测定，可以发现不同批次黄芪药材的多糖含量存在一定差异。
在提取过程中需要注意控制实验条件，以提高提取率和多糖纯度。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
黄芪多糖的提取和含量测定研究
黄芪为豆科植物，是蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，主要药理成分是黄芪多糖(APS)和黄芪甙。
APS在医学和兽医临床上研究应用较为广泛，可作为免疫促进剂或调节剂，同时具有抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、抗应激、抗氧化等作用(张立洲，1996;郭小清等，2004)。
目前APS的提取主要采用水提取和 CaO提取两种工艺，水提取分离工艺不成熟，效率较差，提取成本较高，严重影响了APS的研究开发利用。
李红民等(2000)报道，用pH9~10的CaO水溶液提取APS，得率显著提高，成本下降。
我们用水提取法和CaO溶液提取法进行APS的提取并测定含量，以便从中筛选出较好的提取方法，为生产实践提供参考。
1材料与方法
1.1材料与试剂
黄芪根:购自平凉市某中药材门市部。
葡萄糖、苯酚、浓硫酸、95%乙醇、丙酮，均为分析纯。
21分光光度计，TN
型托盘式扭力天平，容量瓶，水浴锅，干燥器，粉碎机等。
1.2方法
1.2.1黄芪多糖的提取。
水提取法用蒸馏水煮沸提取，CaO溶液提取法用
pH9~10的CaO溶液煮沸提取，浓缩时调至pH6.5,以后两法步骤相同。
?称取黄芪根1kg，去掉杂质和泥土，粉碎成粉末。
?黄芪根粉末中加以6~7倍的蒸馏水(或CaO溶液)，煮沸1.5h，用4层纱布过滤，滤渣用同样方法煮沸3次。
?合并滤液，调pH至6.5左右，加热浓缩至一定量。
?将浓缩液以2 000r/min离心
10min，上清液中加3倍量95%乙醇沉淀。
?倾去上清液，沉淀物中再加入95%的乙醇至浓度为 80%，静置，倾出上清。
?滤渣用丙酮洗涤2次，过滤。
将滤渣放入干燥器中，-20?冷冻真空干燥，即得到APS。
1.2.2黄芪多糖的含量测定:?葡萄糖标准溶液的制备。
取经105?干燥至恒重的葡萄糖 100mg，置100mL容量瓶中加水溶解，并稀释至刻度，摇匀。
精密量取10mL，置10mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀，配成0.1mg/mL的葡萄糖标准溶液。
?标准曲线的绘制。
准确吸取葡萄糖标准溶液 0.1~0.6mL共6份,分别置25mL 容量瓶中，加蒸馏水补充至2mL，再加入5%苯酚溶液1.0mL，摇匀，迅速滴加浓硫酸5.0mL，摇匀，放置5.0mL，置80? 水浴中加热15min，取出，迅速冷却至室温。
另以
2.0mL蒸馏水同上平行操作作为空白对照，在 490nm波长处测定吸光度，并求出回归方程:C= 0.21216A-6.37×10-3，r=0.997057。
其中C:葡萄糖浓度，A:吸光度。
?黄芪多糖含量测定。
取提取并经105?干燥至恒重的APS 50mg，置于50mL 容量瓶中，加蒸馏水溶解至刻度，摇匀，准确吸取10mL，置100mL容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，配成0.1mg/mL的APS溶液。
吸取上述溶液0.5mL，置25.0mL容量瓶中，加蒸馏水补充至2mL，依法测定吸光度值，并代入回归方程计算，求得APS的相对含量。
2结果与分析
2.1黄芪多糖的物理性状
提取的APS为灰白色粉末，易溶解于水，溶液呈乳白色，无杂质。
2.2黄芪多糖的收率
从表1可见，水提取法APS收率为3.6%~4.0%，平均为3.8%;CaO溶液提取法APS收率为5.9% ~7.75%，平均为7.05%;CaO溶液提取法比水提取法APS收率提高85.5%。
，差异极显著(P,0.01)。
2.3黄芪多糖含量测定结果
从表2可见，水提取法APS含量为65.2%~ 67.8%，平均为66.5%;CaO溶液法APS含量为 78.6%~85.0%，平均为82.1%;CaO溶液提取法比水提取法平均提高15.6%，差异显著(P,0.05)。
表1不同提取方法黄芪多糖收率
批次原生药重量提取方法多糖重量收率
021108 1kg水提取法36g 3.60% 030516 1kg水提取法40g 4.0%
040309 1kg CaO溶液法59g 5.90% 040315 2kg CaO溶液法150g 7.50% 040323 2kg CaO溶液法155g 7.75% 表2黄芪多糖粗提物相对含量批次提取方法吸光度A浓
度C
(mg.mL-1)相
对含量
021108水提取法0.185 0.0326 65.2% 030516水提取法0.188 0.033 67.8% 040309 CaO溶液法0.230 0.0425 85.0% 040305 CaO溶液法0.215 0.0393 78.6% 040323 CaO溶液法0.225 0.0414 82.8%。