液相色谱流动相的选择经验
简述高效液相色谱法中流动相的要求
简述高效液相色谱法中流动相的要求高效液相色谱法（HPLC）是一种广泛应用于分离、定量和分析化合物的分析技术。
其中流动相是HPLC中至关重要的组成部分，它对于保证分离效果和分析准确性起着重要的作用。
在使用HPLC进行分析时，流动相的要求有以下几个方面：1.纯度高：流动相的纯度是保证实验准确性的重要因素。
纯度高的流动相可以减少背景噪音和干扰，提高信号峰的清晰度和分辨率。
纯度要求也有助于减少一些物质的附着和积聚，保护HPLC设备的寿命。
2.溶解性好：流动相要有足够的溶解性，以溶解待分离样品中的化合物。
能够完全溶解的样品可以均匀地分布在流动相中，利于成分的迁移和分离。
如果溶解性不好，可能会导致分离效果不佳、峰形不对称和信号峰低。
3.无气泡：气泡在流动相中会造成流动相的剧烈波动，影响分离效果和信号峰的清晰度。
在流动相中可以通过采取适当措施来去除气泡，包括使用真空除泡器、在流动相中添加脱气剂或在流动相上施加超声波。
4.恒定性好：在HPLC分析过程中，流动相的流动速率和成分应该是恒定不变的，以确保分离的稳定性和重复性。
流速的变化可能会导致信号峰的宽度不一致和峰形变形，从而降低分离效果。
5.选择性好：流动相的选择性是指其与待分离样品之间的相互作用程度。
流动相选择性的好坏会直接影响分离效果和峰形。
根据样品的性质和需求，可以选择不同的流动相，如有机溶剂、水或缓冲盐溶液等。
6.可适应性广：流动相可以根据待分离样品的性质和需求进行选择和调整。
不同的样品可能需要不同的流动相组合和浓度梯度，以达到最佳的分离效果。
综上所述，高效液相色谱法中流动相的要求包括：纯度高、溶解性好、无气泡、恒定性好、选择性好和可适应性广。
这些要求的满足将有助于提高分析结果的准确性和可靠性，同时也可以保护HPLC设备的寿命。
液相色谱流动相的选择依据及使用注意事项
液相色谱（Liquid Chromatography, LC）是一种常用的分离和分析方法，它使用液体作为流动相，在不同组分之间进行分配和分离。
在液相色谱分析中，流动相是至关重要的，它直接影响分离效果、分析速度和结果准确度。
合理选择液相色谱流动相并注意使用时的一些问题是非常重要的。
一、液相色谱流动相的选择依据1. 样品的性质液相色谱中流动相的选择应考虑样品的性质，包括溶解性、稳定性、挥发性等。
对于极性样品，常使用极性溶剂作为流动相；对于不容易溶解的非极性样品，可以选择非极性溶剂作为流动相。
2. 柱子的选择不同的柱子需要选择不同的流动相，以保证分离效果。
对于反相色谱柱，一般使用的是乙腈或甲醇和水的混合物作为流动相；对于正相色谱柱，则需要选用不同的极性溶剂作为流动相。
3. 分离效果流动相的选择应考虑到所需的分离效果。
对于需要高分离效果的分析，流动相的组成和流速需要进行精细调控；对于一些不需要高分离效果的分析，可以适当简化流动相的组成，提高分析效率。
4. 色谱柱的保护对于某些对色谱柱有损害的物质，可以考虑在流动相中添加一些保护剂，以延长柱子的使用寿命。
二、使用注意事项1. 流动相的配制在使用液相色谱分析时，需要注意流动相的配制。
流动相的配制应准确、稳定，避免在实验中因流动相的质量问题导致结果失真。
2. 流速的控制流速的控制对于分析结果的准确性和重现性有着重要影响。
在选择流速时，需要根据分离效果的要求以及柱子的性能来进行合理的设定。
3. 流动相的贮存流动相在储存和使用过程中需要注意避免受到污染和氧化。
定期更换和清洗流动相的储存容器，保持流动相的纯净度和稳定性。
4. 流动相的回收在实验结束后，应注意对流动相进行回收和处理，避免对环境造成污染。
总结回顾：液相色谱分析中流动相的选择和使用是至关重要的。
合理选择流动相，可以提高分析的准确性和重现性；注意使用时的一些问题，可以延长柱子的使用寿命并保护环境。
需要根据样品的性质、柱子的选择以及分离效果来综合考虑流动相的配制和使用。
高效液相色谱流动相
高效液相色谱流动相高效液相色谱的流动相(Mobile Phase)液相色谱流动相通常是各种低沸点溶剂和水溶液。
与气相色谱相比较，液相色谱流动相不仅可选择范围比较大，而且它是影响分离的一个非常重要的可调节因素。
在实际工作中，流动相的选择和优化是确定色谱分析的主要工作。
一、流动相溶剂的选择高效液相色谱中所选用的流动相溶剂必须能保证该色谱系统的分离过程可重复进行:溶剂的纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求;溶剂应当不干扰检测器的工作;在制备分离中, 溶剂应当易于除去, 不干扰对分离组分的回收。
从实用角度考虑，溶剂应当价格低廉，容易购得，使用安全，纯度要高。
对液相色谱溶剂的要求: 1)溶剂要有一定的化学稳定性, 不与固定相和样品组分起反应。
2)溶剂应与检测器匹配，不影响检测器正常工作。
3)溶剂对样品要有足够的溶解能力，以提高检测灵敏度。
4) 溶剂的粘度要小，保证合适的柱压降。
5) 溶剂的沸点低，有利于制备色谱的样品回收。
液相色谱流动相溶剂的选择步骤选择具有合适物理性质的溶剂，如沸点、粘度、紫外截止波长等选择合适洗脱强度的溶剂:简单样品，2 ? k'? 5;复杂样品，0.5 ? k'? 20 改变溶剂的选择性，使被分离组分具有较高的α值二、表征溶剂特性的重要参数 1)溶剂沸点、分子量、相对密度、介电常数、偶极距、折射指数、紫外吸收截止波长、与液相色谱分离密切相关的最重要的溶剂特性参数是溶剂强度参数?? ，溶解度参数?? ，极性参数P'和粘度η。
2) 溶剂洗脱强度溶剂洗脱强度指流动相中溶剂的洗脱能力。
在吸附色谱中, "溶剂洗脱强度"与溶剂极性成正比;而在反相色谱中，溶剂极性越大, 洗脱能力越小。
在液相色谱常用混合溶剂作流动相。
混合溶剂的P'具有加和性: P'ab= ??aP'a，?? bP'b , ??为某一溶剂的体积分数。
关于高效液相色谱仪流动相的选择如何呢
关于高效液相色谱仪流动相的选择如何呢高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）是一种常用的分离和分析技术，广泛应用于生命科学、化学、医药、环境等多个领域。
其中，流动相的选择对于色谱分离性能和分析结果的准确性有着重要的影响。
一、流动相的组成流动相是指用于在高效液相色谱仪中运载样品溶液，推动样品通过固定相柱的溶剂体系。
一般情况下，流动相由溶剂和缓冲剂组成。
溶剂用于将样品带入色谱柱，而缓冲剂则用于调整流动相的pH值。
在选择流动相的溶剂时，主要要考虑以下因素：1.溶剂极性：色谱柱的固定相特性和待分析的样品特性决定了所需的溶剂极性。
一般来说，溶剂可以选择非极性溶剂、极性溶剂或者两者的混合物，以适应不同的分析要求。
2.溶剂选择：常用的溶剂包括甲醇、乙醇、丙酮、乙腈等有机溶剂，以及水。
甲醇和乙腈是最常用的有机溶剂，由于它们的极性较低，因此溶解性广泛。
水是最常用的极性溶剂，可以提供更好的分离效果。
3.透过性：一些样品需要在其中一种溶剂中分离，因此选择适当的溶剂对于分析结果的准确性至关重要。
在选择缓冲剂时，需要考虑以下因素：1.pH值的调整：一些分析需要在特定的pH值下进行，需选择合适的缓冲剂，以维持所需的pH值。
2.缓冲能力：缓冲剂应具有良好的缓冲能力，以维持流动相的pH值的稳定性，避免pH值对分离效果的干扰。
3.溶解度：缓冲剂应具有较高的溶解度，以便在高浓度下使用，从而提供稳定的pH值。
二、常用的流动相系统1.等相流动相系统（Isocratic elution）：等相流动相系统是指流动相组成在整个分析过程中保持不变。
这种系统适用于分离度较差的样品，具有简单、稳定、易操作的特点。
2. 梯度流动相系统（Gradient elution）：梯度流动相系统是指在分析过程中，通过改变流动相组成来实现样品的分离。
这种系统适用于需要分离程度较高的样品，提供了更好的分离效果。
简述液相色谱中流动相的选择
简述液相色谱中流动相的选择
液相色谱 (Liquid Chromatography, LC) 中的流动相，也叫做溶
剂或移动相，是指样品在色谱柱中流动的溶液。
液相色谱的分离效果受到流动相的选择和配比的影响，因此流动相的选择是液相色谱分离技术中十分重要的一环。
液相色谱中常用的流动相包括有机溶剂、水、酸、盐酸/氢氧
化钠、醋酸/乙酸盐以及缓冲液等。
不同类型的溶剂或混合溶
剂可以用来分离不同性质的化合物：
1. 极性化合物的分离一般采用水和一些极性有机溶剂（如甲醇、乙醇、乙腈等）的混合物作为流动相。
2. 非极性化合物的分离则需要使用非极性有机溶剂（如正己烷、甲苯、乙酸乙酯等）或者混合有机溶剂（如乙醚和正己烷的混合物）作为流动相。
3. 酸类化合物和有机酸类化合物的分离用含有少量酸的水溶液（如醋酸溶液等）作为流动相。
4. 离子性化合物的分离则需要使用缓冲液作为流动相。
如果需要可逆电渗析检测器，则流动相需要含有离子对。
需要注意的是，在选择流动相时，不仅要考虑其相容性、带电性、缓冲效应等因素，还要考虑其挥发性、毒性和成本等因素。
因此，流动相的选择应该根据需要的分离效果、性质、成本和实验条件等综合因素进行考虑和选择。
流动相的选择技巧
流动相的选择技巧
一、关于流动相的选择
1.1合适的流动相类型
(1)气体：气体液体混合体可用于多组份溶剂及中等温度、中等压力的重金属的测定。
(2)液体：液体可以用于溶解有机物、金属离子和微量的有机物，以及溶质有特殊极性的物质，液体还可以溶解重金属、有机污染物等物质。
(3)溶液：液相色谱常用溶液来作为流动相，其中常用的溶剂有水和甲醇等，也可以使用乙醚、氯仿等极性溶剂，也可以使用正己烷、乙腈等非极性溶剂。
(4)固体杂质：固体杂质是液相色谱的主要流动相，固体杂质可以形成可溶性的悬液，可以促进待测试样品的分离和层析。
(5)介质：介质可以用于空气、水、酸和碱以及金属溶液中的分析。
(6)表面活性剂：表面活性剂可以用于增强溶剂效果，并可以用于高精度的分析。
1.2合理的流动相组合
流动相的组合非常重要，在多组份溶剂中，各组分的浓度是否合理及其组合是否正确是影响液相色谱试验结果的关键。
有些溶剂可以共存，但其相容性可能不高。
液相色谱流动相的选择
液相色谱流动相的选择选择原则1 选择色谱醇的溶剂作为流动相不要随意加满溶剂瓶。
作为分析流动相，应避免不必要的浪费，防止污染环境，危害身体健康。
应该根据样哦数量，计算需要使用的溶剂体积，添加适量流动相到试剂瓶中作为流动相。
因为有些有机溶剂长期放置易变质，比如四氢呋喃在光照下就容易变质，甲醇或乙醇长期放置会生成酯类，乙腈水溶液会分解为醋酸与氨，在分析时导致基线抬高，对一些分析，特别是质谱分析造成影响。
2 配置某些酸或碱性流动相时要考虑色谱柱的使用pH范围有些酸并不适宜作为流动相，如盐酸、长期使用可能损坏泵及相关的钢制管线。
注意选择合适的截止波长的溶剂作为流动相。
紫外分析时，样品的检测波长至少应大于所用溶剂的截止波长20nm上。
3 配置的盐溶液一定用滤膜过滤常规液相用0.45µm滤膜过滤，高效液相色谱使用0.2µm滤膜过滤。
水或缓冲盐溶液好置于棕色瓶中，以防长菌，阻塞溶剂过滤器，降低泵的操作性能。
质谱分析不能使用不挥发性盐作为流动相。
使用挥发性盐作为流动相时，在保证分析的条件下，流动相中的盐尽量保持低浓度。
流动相的要求利用高效液相色谱法测定物质的含量时，流动相的选择至关重要。
对于流动相的要求一般有以下几点：1.作为流动相的溶剂，黏度要小。
2.与固定相不发生化学反应，不互溶。
3.对待测样品有适当的溶解度。
4.应与检测器匹配。
当然了，流动相的选择主要还是看具体的实验，但可以根据溶剂极性来选择。
常见溶剂极性大小为：水＞甲酰胺＞乙腈＞甲醇＞乙醇＞丙醇＞丙酮＞二氧六环＞四氢呋喃＞甲乙醇＞正丁醇＞乙酸乙酯＞乙醚＞异丙醇＞二氯甲烷＞氯仿＞溴乙烷＞苯＞氯丙烷＞甲苯＞四氯化碳＞二硫化碳＞环己烷＞己烷＞庚烷流动相的纯度对最后的测定结果有很大的影响，所以在检测中中一定要按照实验要求选择合适纯度的试剂进行配制。
液相色谱流动相梯度设置
液相色谱流动相梯度设置液相色谱（Liquid Chromatography，简称LC）是分离和分析化合物的一种重要技术手段。
在液相色谱中，流动相梯度的设置对色谱分离的效果有着至关重要的影响。
本文将围绕液相色谱流动相梯度的设置展开讨论，从梯度方案的选择、梯度的优化和常见问题的解决等方面进行详细的阐述。
1.梯度方案的选择在液相色谱中，流动相的梯度可以分为线性梯度、等温梯度和非线性梯度等多种类型。
而选择合适的梯度方案是进行液相色谱分离的第一步。
在实际操作中，我们需要考虑到待分离物质的极性、样品的溶解度、色谱柱的选择等因素。
在这些因素的基础上，我们可以根据实验要求和样品特性来选择合适的梯度方案。
线性梯度是最为简单的一种梯度方案，它的斜率保持不变。
对于一些极性物质，线性梯度可以提供较好的分离效果。
而对于一些非极性物质，线性梯度可能会导致分离效果不佳。
在这种情况下，我们可以选择非线性梯度或者等温梯度来进行分离。
非线性梯度的斜率是不断改变的，可以根据分离的需要进行调整，因此适用于一些复杂的分离实验。
等温梯度则是将流动相的组成保持不变，通过改变色谱柱的温度来达到分离的目的。
这种方法对于极性物质和温度敏感的物质有着较好的适用性。
2.梯度的优化梯度方案选择好之后，还需要对梯度进行优化，以提高分离的效果和分析的准确性。
对梯度进行优化的关键在于找到合适的梯度时间和梯度斜率。
在优化梯度时，我们需要考虑以下几个方面：（1）梯度时间的选择：梯度时间的选择是液相色谱分离中至关重要的一环。
梯度时间过短会导致分离不完全，而梯度时间过长则会增加分析时间，影响实验效率。
因此，我们需要通过实验和数据分析来确定最佳的梯度时间。
（2）梯度斜率的调整：梯度斜率的选择直接影响着分离的速度和分辨率。
在进行梯度斜率的调整时，我们需要综合考虑样品的性质、色谱柱的特性以及流动相的选择。
通过不断地调整梯度斜率，找到最佳的分离条件。
（3）流动相组成的调节：在液相色谱分离中，流动相的组成对分离效果有着重要的影响。
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一．关于液相色谱仪紫外检测器中分析波长的选择一般来说应该遵循以下原则：
1、你的分析目的，也就是你的目标组分是什么，是主要组分还是杂质组分。
2、确定目标组分之后，一般选择目标组分的特征波长。
按照朗伯-比尔定律来说只有在特征波长处的吸光度才可以和浓度成正比关系。
3、确定了特征吸收波长之后，根据灵敏度的不同来选择是选择最灵敏度线还是选择次灵敏度线。
有时有的组分灵敏度过高，会造成标准曲线的弯曲，所以要选择次灵敏度线。
4、确定了吸收波长之后，根据样品的实际情况来选择定量方法。
二．最好是246nm，甲醇，乙腈等吸收都在190左右了，210距离太近，仪器平衡时间常是当然的了，如果选用210，环境一定要稳定才行啊。
不知道你是怎样定量，其他物质在246处是否都出峰呢？
三．最大吸收波长处的干扰过大，选择肩峰位置的吸收波长是可行的，很多文献就是这么处理的。
四．不知道你使用的流动相有哪些成分,经常使用的甲醇乙腈和水在此波长下是没有紫外吸收的,我经常使用210nm这个波长测定物质含量.在低波长基线不大稳,干扰比较大的情况我也遇到过,在低波长下好多物质都有吸收,经常出现很多未知峰.有的检测器氘灯使用一段时间后,在低波长下检测也会出现上述情况,换到高波长基线就好许多.我觉得你应该再去系统的尝试一下.
五．要求最佳吸收波长做，但不一定是最大吸收波长，最适合的才是最好的六．DAD收集200-400（700）nm全部数据，分别进空白和标准样品，三维谱图可以清晰地帮助你选择吸收波长。
原则是：干扰物吸收尽量小，目标物尽量吸收尽量大！
推荐 326nm 276nm 同时采集不就可以啦，分别能得到分辨率高的色谱图！只要标准样品和试样在同样的采集参数下测试，对于结果的测定没有什么影响！。