石刁柏中总氨基酸的含量测定
总氨基酸含量的测定方法
总氨基酸含量的测定方法测定总氨基酸含量，听上去是不是有点高大上？其实啊，这个过程就像做一道简单的家常菜，虽然听起来复杂，做起来却很有趣。
氨基酸是蛋白质的基本构件，想想看，咱们身体里那一堆营养物质，都是要靠它们搭建起来的。
很多时候，我们吃的食物，里头的氨基酸含量就能告诉我们，这东西到底能不能补充能量，能不能让我们更强壮。
咱们就来聊聊，怎么测定这些小家伙的含量。
准备工作很重要。
你得有样本，可能是牛肉、豆腐或者鸡蛋，反正都是能吃的东西。
咱们就需要一些试剂。
这些试剂呢，像是厨房里的调料，少了可不行。
常见的有氢氧化钠、盐酸，还有一些专门用来显色的试剂，像那种喝了会变色的饮料，嘿嘿，效果可是杠杠的。
要是没这些东西，那就像做菜没盐，味道就不对了。
然后，就是要进行提取。
简单来说，就是把氨基酸从食物里“榨”出来。
这个步骤得小心翼翼，像煮汤时要控制火候，太大了会糊，太小了则不够味。
把样品放进溶液里，加热搅拌，让氨基酸慢慢溶解。
就像在调和一杯鸡尾酒，直到所有的成分都融合在一起。
提取出来的液体就是你的“氨基酸汤”，记得把它过滤掉杂质，留好清汤。
咱们得进入显色阶段。
这个环节可神奇了，氨基酸遇到试剂，颜色会变得好看得很。
不同的氨基酸有不同的显色反应，就像不同的花朵在阳光下各自盛开。
我们可以用分光光度计来测量这些颜色的深浅，深色就代表氨基酸含量高，浅色那就是少得可怜。
这个过程就像在给食物上色，看着渐渐变得绚丽，心里也是美滋滋的。
不过，数据出来后可别急着欢呼。
我们需要做一些计算，把颜色的强度换算成氨基酸的浓度。
这就像在餐馆里结账，得把每样菜的价格加在一起，才能知道最终要花多少银子。
根据标准曲线，把测得的值代入，最终就能得到你食物里的氨基酸总含量。
简简单单，经过一番“烹饪”，就能得到一份“营养报告”。
记得记录结果，像在做日记一样。
无论你测得的结果是高还是低，都代表着不同的营养价值。
要是高，那可得好好利用，加入日常饮食；要是低，也别气馁，可以考虑多吃些高蛋白的食物，像是肉类、鱼类、豆类，保证你身体里的氨基酸不缺。
氨基酸含量测定
氨基酸含量测定一、前言氨基酸是构成蛋白质必不可少的基本单位，对于食品、药物等行业来说，氨基酸含量的测定是一项重要的质量控制工作。
氨基酸含量测定可以用于判断蛋白质的含量、质量以及不同品种之间的比较等方面。
因此，本文旨在介绍氨基酸含量测定的原理、方法及其在实际应用中的应用。
二、原理氨基酸含量测定的原理是利用氨基酸的吸光度和该氨基酸与特定试剂的反应，通过测定吸收光度计的吸光度来计算氨基酸的含量。
一般常见的试剂为二氧化硫，根据氧化剂配合体法，氨基酸与二氧化硫反应生成配位物，该配位物具有明显的吸收峰，通过测定这个吸收峰的强度来计算氨基酸的含量。
三、方法1.试剂和仪器试剂：1) 二氧化硫（SO2）2) 酸性亚硫酸钠（NaHSO3）3) 酸性氯化亚铜（CuCl2）溶液4) 氢氧化钠（NaOH）仪器：1) UV-Visible分光光度计2) 恒温取样器3) 小型离心机2.操作步骤样品的制备：1) 将样品细碎并过筛，取适量的样品称入瓶中；2) 加入1ml 6M HCl和氧化氢，使样品完全溶解；3) 将样品续滴2M NaOH至pH7~7.5。
标准溶液制备：将前列腺酸溶液定为含有氨基酸100μg/ml的标准溶液，并用氢氧化钠调至pH7~7.5。
反应溶液的制备：1) 取1ml标准溶液，加入2ml0.1M NaHSO3溶液，均匀混合；2) 加入0.05ml 0.3% w/v CuCl2溶液，混合，并加入2ml3M NaOH；3) 用恒温取样器将反应溶液恒温于37℃。
反应光谱测定：1) 以反应溶液A0的吸光度为零点，在325nm波长处记录各个样品的吸光度；2) 在温度控制下，对反应溶液建立光谱，以每分钟一个波长的扫描模式记录吸光度；3) 在反应6~8分钟时，将反应液离心，将清液移出，并过滤。
数据处理：得到的吸光度值（A）除以样品的光程，得到透过率（T），以此计算出氨基酸的含量。
四、应用氨基酸含量测定对于食品、药物等行业的质量控制非常重要。
芦笋的营养价值
芦笋的营养价值芦笋我们也叫做是龙须菜或者叫做是石刁柏，芦笋不但可以食用而且还含有丰富的营养，芦笋里面含有丰富的维生素和我们人体需要的膳食纤维，经常吃芦笋可以起到很好的养生功效和保健的作用，芦笋有提高人体免疫力和促进代谢等功效，下文我们给大家详细介绍一下芦笋的营养价值。
芦笋是世界十大名菜之一，又名石刁柏、龙须菜（区别于海发菜——深海蔬菜，亦有别名龙须菜）。
在国际市场上享有“蔬菜之王”的美称，芦笋富含多种氨基酸、蛋白质和维生素，其含量均高于一般水果和菜蔬，特别是芦笋中的天冬酰胺和微量元素硒、钼、铬、锰等，具有调节机体代谢，提高身体免疫力的功效，在对高血压、心脏病、白血病、血癌、水肿、膀胱炎等的预防和治疗中，具有很强的抑制作用和药理效应。
一、是低糖、低脂肪、高纤维素和高维生素。
芦笋嫩茎含水93.2%，蛋白质1.7%~3.0%，脂肪的含量很低，仅0.2%，粗纤维1.0%。
维生素含量很高，维生素C平均含量为41.4毫克/100克，比蒜薹高5倍;维生素B1为80~92.5毫克/100克;维生素A是胡萝卜的1.5倍，达到29400国际单位。
二、是蛋白质的氨基酸组成。
氨基酸含量高而且比例适当。
绿芦笋的氨基酸总量比其他蔬菜的平均值高27%。
据北大生物系分析，人体所需的8种氨基酸含量都很高，其中精氨酸与赖氨酸之比为1.06，营养学家认为二者比例接近1的食物对降低血脂有作用。
特别是在所有的氨基酸中，天门冬氨酸含量高达1.826%，占氨基酸总含量的13.23%，这对治疗心血管病及泌尿系统疾病有很大作用。
三、是芦笋含有多种人体必需的大量元素和微量元素。
大量元素如钙、磷、钾、铁的含量都很高;微量元素如锌、铜、锰、硒、铬等成分，全而且比例适当，这些元素对癌症及心脏病的防治有重要作用，营养学家和素食界人士均认为它是健康食品和全面的抗癌食品。
在上面的文章里面我们介绍了什么是芦笋，我们知道芦笋不但可以食用而且还有很好的食疗功效，经常吃芦笋可以起到防癌抗癌和促进代谢等功效，上文为我们详细介绍了芦笋的营养价值，相信大家都了解了吧。
分光光度法测定芦笋中总黄酮的含量
分光光度法测定芦笋中总黄酮的含量 宋元清 王艳平 毛远菁 (鸡西市人民医院,鸡西 158100) (枣庄市市中区人民医院,枣庄 277100) (日照市汽车运输总公司医院,日照 276800) 摘要 黄酮类化合物与铝盐形成配合物,该配合物在紫外可见光区有吸收,选择510n m为测定波长,芦丁作为对照品,用分光光度法测定芦笋中的总黄酮,平均回收率为97.23%,测定结果的相对标准偏差为2.13%(n=5)。
关键词 分光光度法 总黄酮 芦笋 芦笋,又名石刁柏,为百合科植物石刁柏的干燥地下嫩茎。
芦笋有温肺祛痰、活血化瘀作用,用于痰瘀互结、乳腺结块、肿胀疼痛及乳腺小叶增生等疾病的治疗。
芦笋的化学成分主要有黄酮类化合物、游离氨基酸、多种甾体皂苷、维生素、微量元素及其它活性物质[1]。
其中的黄酮类化合物主要包括槲皮素、香橼素、山柰素和芦丁等,具有消炎、镇痛等多种药理作用。
黄酮类化合物的测定现多用高效液相色谱法[2,3],该法专属性强,准确度高,但样品处理复杂,仪器昂贵,实验成本较高。
芦笋现主要用作食品及保健品,分光光度法能较快速地测定其中的黄酮类成分,且实验成本较低,易于在食品行业中推广。
1 实验部分1.1 主要仪器与试剂 紫外可见分光光度计:UV757CRT型,上海分析仪器总厂; 电子精密天平:F A2004型,上海精密科学仪器有限公司天平仪器厂; 芦丁对照品:中国药品生物制品检定所; 芦丁对照品溶液:0.28mg/mL。
精密称取用五氧化二磷干燥至恒重的芦丁对照品7.00mg,用30%乙醇溶解并定容至25mL; 芦笋样品:市售; 芦笋样品溶液:取芦笋样品,研细,精密称取约0.3g,用80%乙醇回流提取2次(每次用30mL),过滤,滤液合并后蒸干,用30%乙醇溶解并定容至10mL; 实验所用试剂均为分析纯;实验用水为二次蒸馏水。
1.2 实验方法 (1)标准工作曲线的绘制 精密量取芦丁对照品溶液0.0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL于10mL容量瓶中,各加入30%乙醇至1.0mL,加入0.5mL0.05g/mL Na NO2溶液,放置6m in后再加入0.3mL0.1g/mL A l(NO3)3溶液,摇匀,放置6m in后加入3mL0.04g/mL Na OH溶液,用水定容至标线,摇匀,放置15m in,在510nm处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,芦丁对照品溶液的浓度为横坐标,绘制标准工作曲线。
氨基酸测定方法
氨基酸测定方法一、引言氨基酸是构成蛋白质的基本组成单位，对于生命体的生长和发育起着重要的作用。
因此，准确测定氨基酸的含量和组成对于研究蛋白质结构和功能具有重要意义。
本文将介绍一些常用的氨基酸测定方法，包括色谱法、光谱法和化学法等。
二、色谱法测定氨基酸2.1 气相色谱法气相色谱法是测定氨基酸含量和组成的常用方法之一。
该方法通过将氨基酸样品转化为易挥发的衍生物，然后使用气相色谱仪进行分析。
气相色谱法具有分离效果好、灵敏度高和操作简便等优点。
2.1.1 衍生化反应在气相色谱法中，常用的氨基酸衍生化反应包括酯化、酰化和取代反应等。
这些反应能够将氨基酸转化为易挥发的衍生物，便于后续的气相色谱分析。
2.1.2 气相色谱仪气相色谱仪是进行气相色谱分析的关键设备。
它由进样系统、色谱柱和检测器等部分组成。
进样系统用于将样品引入色谱柱，色谱柱用于分离氨基酸衍生物，检测器用于检测分离后的化合物。
2.2 液相色谱法液相色谱法也是测定氨基酸含量和组成的常用方法之一。
该方法通过将氨基酸样品溶解在溶剂中，然后使用液相色谱仪进行分析。
液相色谱法具有分离效果好、灵敏度高和选择性强等优点。
2.2.1 色谱柱选择在液相色谱法中，选择合适的色谱柱对于分离氨基酸非常重要。
常用的色谱柱包括离子交换柱、反相柱和手性柱等。
不同的色谱柱具有不同的分离机理和选择性，可以根据需要选择合适的色谱柱。
2.2.2 梯度洗脱条件在液相色谱法中，通过调整洗脱溶剂的组成和流速等参数，可以实现对氨基酸的有效分离。
梯度洗脱条件可以根据氨基酸的亲水性和极性等特性进行优化。
三、光谱法测定氨基酸3.1 紫外-可见光谱法紫外-可见光谱法是测定氨基酸含量和组成的常用方法之一。
该方法通过测量氨基酸在紫外-可见光波段的吸收特性，来推断其含量和组成。
紫外-可见光谱法具有操作简便、灵敏度高和选择性强等优点。
3.1.1 吸收峰特征不同氨基酸在紫外-可见光谱中具有不同的吸收峰特征。
通过测量氨基酸的吸收峰强度和位置，可以推断其含量和组成。
石菖蒲中总氨基酸的含量测定
石菖蒲中总氨基酸的含量测定
董玉;石任兵;陈朝军
【期刊名称】《时珍国医国药》
【年(卷),期】2008(19)10
【摘要】目的建立了内蒙古石菖蒲中总氨基酸的含量测定方法。
方法采用分光光度法。
结果标准曲线方程A=0.0011C-0.0199(r=0.9993),平均回收率为
97.10%,RSD为0.95%(n=6)。
该法测得石菖蒲中总氨基酸的含量为0.62%,与氨基酸自动分析仪所测得的石菖蒲中总氨基酸的含量一致。
结论该方法灵敏、简便、快速、准确可靠。
【总页数】2页(P2500-2501)
【关键词】石菖蒲;总氨基酸;分光光度法
【作者】董玉;石任兵;陈朝军
【作者单位】内蒙古医学院.药学院,内蒙古呼和浩特010059;北京中医药大学中药学院,北京100102
【正文语种】中文
【中图分类】O657.32
【相关文献】
1.石菖蒲中总苯丙素含量测定 [J], 董玉;石任兵;陈朝军;关海滨
2.超高效液相色谱串联三重四极杆质谱法测定梅花鹿茸中总游离氨基酸与游离氨基酸含量 [J], 臧彬如;周改莲;单国顺;贾天柱;孟莉
3.虫草花总黄酮,总氨基酸含量测定及其抗氧化活性研究 [J], 罗丹;姜敏;李柯翱;田树革
4.数字化实验在高中化学教学中的应用
——以酱油中总酸及氨基酸态氮含量测定为例 [J], 张原旗;卢凤琴;王冠淇;孙艳涛5.酒糟总氨基酸、总多酚、多糖含量测定及抗氧化活性研究 [J], 许世浩;刘宏炳;何晨露;黎玲玲;燕雪花
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植物组织内氨基酸组分和含量的测定
植物组织内氨基酸组分和含量的测定
植物组织内氨基酸组分和含量的测定方法主要有以下几种：
1. 纸层析法：首先将样品裂解提取，然后取一小部分样品在纸层析板上进行分离，根据氨基酸的pKa值和亲疏水性特征，通过比色法测定各氨基酸的含量。
2. 比色法：可利用具有特异性反应的氨基酸检测试剂在一定条件下，与氨基酸发生瞬时化学反应生成显色化合物，然后通过光度计测定各氨基酸的含量。
3. 气相色谱法：首先将样品裂解提取并酸水解成甲酯化产物，然后通过气相色谱仪进行分离和检测。
以上三种方法根据实验需要选择其中的一种或多种进行使用。
通过这些方法可以测定植物组织中各种氨基酸的组成及其含量，为了获得较准确的结果，需要在实验操作中严格按照相关要求执行。
氨基酸分析仪法测定氨基酸含量
• 评价作物的营养品质，指导作物育种和栽培
• 检测农作物中的氨基酸代谢产物，研究作物生长和抗逆性
检测农业生产中的肥料和饲料
• 测定肥料和饲料中的氨基酸含量，评估肥料和饲料的营养价值
• 检测肥料和饲料中的氨基酸代谢产物，评估肥料和饲料的使用效果
谢谢观看
THANK YOU FOR WATCHING
• 通过输液泵和色谱柱实现氨基酸的分离
• 使用检测器检测氨基酸的荧光或紫外吸收信号
⌛️
数据处理
• 使用计算机和软件处理实验数据
• 计算氨基酸的含量和相对含量
• 生成实验报告，总结实验结果
03
氨基酸分析仪法的实验操作
样品前处理及氨基酸提取
样品前处理
氨基酸提取
• 研磨样品，使其均匀分散
• 使用醋酸钠或醋酸铵溶液沉淀氨基酸
氨基酸分析仪法在食品检测中的应用
测定食品中的氨基酸含量
检测食品中的食品添加剂
• 评价食品的营养价值，指导食品配方和加工
• 测定食品添加剂中的氨基酸含量，评估食品添加剂的安
• 检测食品中的氨基酸代谢产物，评估食品的新鲜度和品
全性
质
• 检测食品添加剂中的氨基酸代谢产物，评估食品添加剂
的使用效果
氨基酸分析仪法在生物医药领域的应用
谢产物，评估食品的新鲜
度和品质
农业领域
• 测定农作物中的氨基酸
生物医药领域
含量，评价作物的营养品
质
• 检测农作物中的氨基酸
代谢产物，研究作物生长
和抗逆性
• 测定生物体液中的氨基
酸含量，评价生理功能和
疾病状态
• 检测生物组织中的氨基
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２ １ ，２ ３ ：３ ０ ０ ２ （ ） １５—１６ ３
ＡｃａＡｇｌｕ ｕａ ｉｎ ｘ ｔ ｒ ｈ ｒｅＪａ ｇ ｉ ’ ｃ
石 刁 柏 中 总 氨 基 酸 的含 量 测 定
郭 玲 ‘
（ 陕西师范大学 生命科学学院 ， 陕西 西安 ７０ ６ ） １０ ２
摘
要： 目的 ： 立 石 刁柏 中 总氨 基 酸 含量 的测 定 方 法 。 方法 ： ３ 茚三 酮及 ｐ ． 建 以 ％ Ｈ６０醋酸 钠 一醋 酸缓 冲液 为 显 色剂 ， 沸 置
ａ ｉ ｂ ｆ ｒ ｏｕｉ ｐ ． ）ａ ｄ３ ｎ ｈ ｄｉ ｗ ｒ ｕｅ ｓｄ ｖ ｌ ｅ ， ｈ ａ ｐｅ ｅ ｌ ｅ ｔ ｂ ｉｎ ｗ ｔｒ ｂ ｔｉｇａ ｄ ｃ ｕｆ ｌｔ ｎ（ Ｈ ６ ０ ｎ ％ ｉ ｙ ｒ ｅｅ ｓｄ ａ ｅｅ ｐ ｒ ｔｅｓｍ ｌｓ ｒ ｐａ ｄｉ ｏ ｏ ｉ ｄ ｅｓ ｏ ｎ ｎ ｏ ｗ ｅ ｃ ｎ ｌ ｇ— ａ ， ａ ｎ ｎ ｅ ｈ
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石 刁柏 （ ｓ ｒ ｕ ｏｗｎｌ ． 为百 合 科 天 门冬 属 Ａ ａａ ｓｆ ｉ ｉ Ｌ ） ｐ ｇ ｆ ａ ｓ 多 年生 宿根 草 本 植 物 ， 雄 异 株 ， 名 芦 笋 、 须 菜 等 。 雌 又 龙 石 刁柏 以根 人药 ， 清热 利 湿 ， 具 活血 散 结 之 功 效 ， 于 治 用 疗肝 炎 、 病 、 脂血 症 、 腺增 生 等。另 据报 道 对 淋 银屑 高 乳 巴肉瘤 、 癌 、 腺癌 、 肤 癌 等肿 瘤 有 一 定 疗效 。石 膀胱 乳 皮 刁柏 中含有 多种化 学 成 分 ， 要 有 甾 体皂 苷 、 酮 、 基 主 黄 氨
用 ７ ％ 乙醇补 足 减 失 质 量 ， 滤 ， 续 滤 液 ５ ｍ ０ 过 取 Ｌ置 ２ ５ ｍ Ｌ量 瓶 中 ， ５ ％ 异 丙 醇加 至刻 度 ， 匀 ， 为 样 品 溶 用 ０ 摇 作
酸、 糖类、 维生素、 微量元素等 ， 中氨基酸含量高、 其 种 类全 ， 具有极高的营养价值及药用价值 ， 目前市场上有多 种以其为原料制成的保健食品、 饮料 、 药品等。石刁柏 中 氨基酸的含量在一定程度上可以反映出石刁柏药材 的质 量 ， 前关于此方面报道极少。文献 ［ ］ 目 ２ 仅对其 中一种
ＧＵＯ ｉ ｇ Ｌｎ
（ ｌ ｇ ｆ ｉ ｃｅ ｃｓ ｈ ａ ｘ ｒ ｌＵｎｖ ｒｉ ，Ｘｉ ａ ０ ２，Ｃ ｉａ Ｃｏｌ ｅｏ ｆ Ｓ ｉｎ ｅ ，Ｓ ａｎ ｉＮｏｍａ ｅ Ｌｅ ｉｅｓｔ ｙ ’ ｎ７ ０ ６ １ ｈｎ ）
Ａ ｂ ｔａ ：Ｉ ｒ ｅ ｏ ｓ ｔｕ ｏ ｅ ｅｈ ｄ ｆ ｒｔｅ ａ ｓ ｙ ｏ ｈ ｏｔｌａ ｎ ｃｄ ｏ ｔｎｔｉ ｓ ａ ａ ｕｓ ｏ ｉ ｓ ｒ ｃｔ ｎ ｏ ｄ ｒｔ ｅ ｐ ａ ｎ ｖ ｌｍ ｔ ｏ ｏ ｈ ｓａ ｆｔｅ ｔ ａ ｍｉ ｏ ａ ｉｓ ｃ ｎｅ ｎ ａ ｐ ｒｇ ，ｓ ｄｕｍ ｃ ｔｔ ａ ｅｉ ａ ｅａｅ— ｃ ｔ ｃ
０ ．１ ２８Ｘ 一０． ０５３ ｔ ｅ ｏ ｒ ｌｔ ｎ ｏ ｆ ｃｅ ｔ ｓ ０． ９， ｈ ｃ ｒｅａｉ ｃ ｅｆ ｉｎ ｗａ ｏ ｉ ９９９ ３， ｈ ｉ ｅ ｒ ａ ｇ ｗ ｓ１ ９ — １ ２ ６Ｉ ／ｍＬ ，ｈ ｃ ｖ ｒ ｔ Ｗａ ｔｅｌ ａ ｒｎ ｅ ａ ．１ ６ ｎ ２ １． ９ ｘ ｇ ｔ ｅ ｅ ｏ ｅｙｒ ｅ ｓ ｒ ａ ９ ． ２ ａ ｄ Ｒ Ｄ ｗａ ｑ ａ ｔ ． ％ ． Ｓ ｈ ｓｍｅ ｈ ｄ ｃ ｎ ｂ ｓ ｄ ｉ ｈ ｕ ｌ ｙ ｃ ｎｒ ｌｏ ｓ ａａ ｕ ． ９ ７ ％ ｎ Ｓ ｓｅ ｕ ｏ １ ３ ｌ ｏｔｉ ｔ ｏ ａ ｅ ｕ ｅ ｎ ｔｅ ｑ ａｉ ｏ ｔ ｆａ ｐ ｇ ｓ ｔ ｏ ｒ
吸 光度 。结 果 ： 性 方 程 为 Ｙ＝ ．２Ｘ 一 ．５９ ｒ ０ ９９ 。线 性 范 围 为 １ １９ ０ｍｎ 于 ６ ｎ 处 线 ０ １８ ００３ ，＝ ．９３ ． ２６～ｌ．９ １２６
ｍ 。 回收 率 为 ９ ．２ ， Ｓ Ｌ ９ ７ ％ Ｒ Ｄ＝１３ 。结 论 ： 方 法 可 用 于 石 刁柏 的 质 量控 制 。 ．％ 该 关 键 词 ： 色法 ； 刁柏 ； 比 石 门冬氨 酸
２ 方 法与 结 果
２ １ 样品处理方法 ． 取石刁柏药材粉碎成粗粉， 精密称
取 ０ １ｇ 置 具 塞 锥 形 瓶 中 ， 密 加 体 积 分 数 （ 同 ） ． ， 精 下 为 ７ ％ 的乙醇 ５ Ｌ 称 定 质 量 ， 声 处 理 １ ｉ ， 冷 ， ０ ０ｍ ， 超 ５ｍｎ 放
．
中 图分 类号 ：６ ７ ３ 文献 标 识 码 ： 文 章 编 号 ： ０ ８８ （ｏｏ ｏ ０３ ０ ０ ５ ．２ Ａ １ １— ５ １ ２ ｌ ）３— １５— ２ ０
Ｄｅ ｅ ｍｉ ａ ｉ ｎ ｏ ｔ ｔ ｒ ｎ ｔｏ ｆＴｏ ａｌＡｍｉ ｏ Ａｃｄ ｎｔ ｎ ｎ ｐ ｒ ｇ ｓ ｂ ｒ ｍａ ｏ ｔ ｙ ｎ ｉ ｓ Ｃｏ ｅ ｔｉ Ａｓ ａ ａ ｕ ｙ Ｃｈ ｏ ｔ ｍｅ ｒ
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