亚甲蓝病毒灭活新鲜冰冻血浆制备冷沉淀的有效成分分析
亚甲蓝光化学病毒灭活血浆的质量控制与主要质量指标观察
全过程质量控制及产 品质量监测 ， 确保 了病毒灭括产 品临床输 血
安 全 质 量 。现 将 方 法 报 告 如 下 。 １ 资 料 与 方 法
查
Ｃ Ｄ —Ａ方 保 存 液 全 血 ６ｈ内 分 离 的 单 袋 滤 白 Ｐ
新鲜血浆外观检查 ， 应标签 完整 （ 血袋 上预先贴 有两条 相同
中外 医 学 研 究
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２１ ０ ０年 ６ 月 第 ８卷
第１ ２期
Ｃ Ｉ Ｅ ＥＡ Ｄ Ｆ Ｒ Ｉ Ｎ ＭＥ ＩＡ Ｅ Ｅ Ｒ Ｈ Ｈ Ｎ Ｓ Ｎ Ｏ Ｅ Ｇ Ｄ Ｃ ＬＲ Ｓ Ａ Ｃ
亚 甲蓝 光 化 学病 毒 灭 活 血 浆 的质 量控 制 与 主 要 质 量 指 标 观 察
种类 的局 限性 、 新病毒不断发现等 ， 窗 口期病毒 、 检测病毒 及 使 未
新病 毒 传 染 病 难 以检 出 ， 此 输 血 仍 有 引起 传 染 病 的 危 险 。 亚 甲 因 蓝 是 一 种 光 敏 剂 ， 以 与 病 毒 的 核 酸 以 及 病 毒 的 脂 质 包 膜 相 结 可
如下图 １
睫甲蓝 添加 元 件 止 流爽
１３ ５ 血 浆 袋 与 病 毒 灭 活 输 血 过 滤 器 无 菌 连 接 在 百 级 净 化 条 ． ． 件 按 无 菌 操 作 规 程 或 使 用 无 菌 接 驳 机 ， 保 管 腔 之 间 接 驳 过 程 确
无菌。 １３ ６ 献 血 码 标 签 转 贴 ．． 献 血 码 标 签 正 确 转 贴 是 至 关 重要 的 一
回收 率 均 大 于 ８ ％ ， ０ 结论
经 过 全 过 程 质 量 控 制 及 产 品质 量检 测 ， 鲜 血 浆 经病 毒 灭 活后 主 要 凝 血 因子 及 血 浆 蛋 白浓 度 含 量 虽均 有 新
影响冷沉淀质量的关键因素分析
影响冷沉淀质量的关键因素分析冷沉淀（cryoprecipitate）是新鲜冰冻血浆（FFP）在低温（约0~4℃）解冻后沉淀的白色絮状物，是FFP的部分凝血因子浓集制品，其中主要成分有：Ⅷ因子、纤维蛋白原以及血管性血友病因子，纤维结合蛋白、ⅩⅢ因子等。
冷沉淀因其制作工艺简单、价格低廉，临床应用广泛。
适用于先天性或获得性纤维蛋白原缺乏症及Ⅷ因子缺乏症患者，血管性血友病（vWD）、儿童及成年人轻型甲型血友病患者，DIC及大出血患者的替代治疗等。
因冷沉淀中的Ⅷ因子为不稳定凝血因子，受多种因素影响，所以每袋冷沉淀Ⅷ因子含量各不相同，通过查阅相关资料及跟踪验证，对影响冷沉淀质量的关键因素分析，现报告如下：1 冷沉淀的制备方法冷沉淀制品是以新鲜冰冻血浆为原料，近年来因多联采血袋的广泛应用，冷沉淀的制作工艺更加简单，安全性更强，各地中心血站均能生产。
目前国内冷沉淀的制备常用两种方法[1]：1.1 离心法取出待制备冷沉淀的新鲜冰冻血浆（FFP），置室温中约5分钟，待双联袋导管（连接管）变软后，将血浆置入2～6℃水浴箱中融化。
当血浆基本融化时，取出血浆，在2±2℃的环境下重离心，使冷沉淀凝血因子下沉于塑料袋底部。
将上清分入空袋内，血袋底部的沉淀内大约含有20～30ml血浆，即为冷沉淀凝血因子。
1.2 虹吸法取出待制备冷沉淀的新鲜冰冻血浆（FFP），置室温中约5分钟，待双联袋导管（连接管）变软后，将新鲜冰冻血浆袋置于2～6℃水浴箱中，另一空袋悬于水浴箱外且位置低于血浆袋，两袋形成一定的高度落差。
新鲜冰冻血浆融化时，上清血浆随时被虹吸入空袋中，冷沉淀遗留在新鲜冰冻血浆袋中。
在融化过程中控制水浴温度在2～6℃。
待新鲜冰冻血浆融化至约40～50ml时，即为冷沉淀凝血因子。
以上两种方法制备好的冷沉淀需迅速放入速冻机中冷冻，于-20℃以下冰箱中保存，保存期不超过一年，输注前于37℃水浴融化，并于4小时内输注。
2 冷沉淀的质量标准根据《全血及成分血质量要求》GB18469-2001规定，冷沉淀外观：肉眼观察30℃~37℃融化的冷沉淀凝血因子无纤维蛋白析出、无黄疸、无气泡、无重度乳糜。
病毒灭活血浆与普通冰冻血浆临床应用价值对比探讨
病毒灭活血浆与普通冰冻血浆临床应用价值对比探讨陈浩峰;叶伙梅【摘要】目的对比分析病毒灭活血浆与普通冰冻血浆临床应用价值,对指导临床合理使用血浆提供依据.方法收集某三甲医院2014年1月-2017年8月期间输注血浆的患者200例,分为普通冰冻血浆组与病毒灭活血浆组,观察患者治疗前后的PT 值和APTT值以及观察治疗前后PT、APTT、Fg、TT的变化值和血浆的使用量是否存在显著差异.结果普通冰冻血浆组输血后的PT值和APTT值比较输血前存在显著差异(P<0.05),病毒灭活血浆组输血后的PT值比较输血前存在显著差异(P<0.05).普通冰冻血浆组与病毒灭活血浆组比较血浆使用量、PT降低值、APTT 降低值、TT降低值、Fg升高值比较均没有统计学差异(P>0.05).结论病毒灭活血浆改善患者凝血功能方面的作用与普通冰冻血浆没有明显区别,但病毒灭活血浆在改善内源性凝血系统或者共同凝血途径凝血因子缺乏的凝血障碍可能没有明显效果.病毒灭活血浆可以在大部分情况下取代普通冰冻血浆应用于临床.【期刊名称】《实验与检验医学》【年(卷),期】2018(036)004【总页数】2页(P632-633)【关键词】病毒灭活血浆;普通冰冻血浆;临床应用【作者】陈浩峰;叶伙梅【作者单位】云浮市人民医院,广东云浮 527300;云浮市人民医院,广东云浮527300【正文语种】中文【中图分类】R446.11;R457.1+4目前，临床使用血浆的量越来越大，血浆种类日渐丰富，正确使用血浆对指导临床合理用血有重要意义。
某三甲医院的日常血浆供应以普通冰冻血浆与病毒灭活血浆为主，新鲜冰冻血浆供应较少，故对比探讨病毒灭活血浆与普通冰冻血浆的临床应用价值。
1 方法1．1 一般资料收集某三甲医院 2014年 1月－2017年8月期间输注血浆的患者200例。
所有患者都以补充凝血因子，改善凝血功能为目的，输血治疗前后凝血功能检测指标完整。
病毒灭活FFP提取冷沉淀凝血因子中主要成分含量分析
基金项 目：广州市番 禺区科技项 目（Ｎｏ．２０１２一Ｚ一０３—５３） ① 广州市番禺 区中心血站 广东 广州 ５１１４００
学会神经病学分会学术 年会 论文汇编．２００６：４５—４７． ［４】张天照，宋 晓征，任鸿萍 ．神经 内科住 院患者 医院感染危 险因素分析 ［ＪＪ
Ｃｈｉｎｅｓｅ ａｎｄ Ｆｏｒｅｉｇｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｍｈ Ｖｏ１．１１，ＮＯ．２３ Ａｕｇ。２０１ ３
四川 医 学 ，２０１２，４（１５）：１１０—１１１． （收稿 日期 ：２０１３—０４—０２） （编辑 ：韩珊珊 ）
型大容餐 低温血液成分离心机 （３８００ ｄｍｉｎ，１０ ｍ 分 离出血浆 （２００ｍＹ袋 ），每袋再平均分 为 １００ ｍｌ两袋 ，分别作为对照组液体血浆和试 验组液 体血
浆。对照组 （ＦＦＰ组 ）立 即置于低温血浆 速冻机中速冻保存备用 ；实验组 （病 毒灭活 ＦＦＰ组 ）用亚 甲蓝 ，光 化学法 进行病 毒灭 活后 ，再 速冻保存备 用。
ＫＪｘ一Ⅲ型血浆恒温解冻箱 ，苏州医用仪器 厂生产 ；ＤＫＢ一２型电 Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义 。见表 １。
热恒 温水浴箱 ，上海精宏 医疗仪 器厂生产 ；ＨＤＭＥ一１Ａ型病毒灭 活仪 ，上海输 血技术 有 限公司 生产 ；ＳＴＡＲＴ一４型血凝 仪 ，日本 倍肯 公司生产 ；测 定凝 血因子Ⅷ （ＦⅧ ）、纤维蛋 白原 （Ｆ曲试剂盒 ， 法国 Ｓｔａｇｏ公 司生产 ；一次性使用病毒灭活耗材 ，上海输血技术
１ 资料 与 方法 １．１ 一般资料
ＩＭＡＧＯ一５００型低 温血 浆速冻机 ，卢森堡 Ｄｏｍｅｔｉｃ公 司生产 ；
Ⅷ （ＦⅧ ）、纤 维蛋 白原 （Ｆ曲的含 量。 １．４ 统计学处理
所得数据采用 ＳＰＳＳ １３．０统计学软件进行处理 ，计量资料 以
MB-P对病毒灭活血浆有效成分的影响
ｔ ｃ ｕ ｔｔｅ ｔ Ｐ ａ ｍａ ＪＡＮＧ ｅ ． ｎ ｒ ｌ ｌ ｏ ｔｔ ｎ ｏ Ｓ ｕ ｄ ， Ｆ ｓ ａ ２ ３ ０ Ｃ ｉ ａ ａ ｏ ｉ ｎ ｄ ｌｓ ｐ ｓ ｕ Ｉ Ｙ ｎ Ｃｅ ｔ ｂ ｏ ｄｓａｉ ￣ ｈ ｎ ｅ ａ ｏ ｏ ｈ ｎ５ ８ ０ ， ｈ ｎ
【 ｂｔ 】 Ｏ ｊ ｔ ｅＴ ａ ｚ ｔ ｆ ｔｆ ｅ ｙ ｎ ｌ （ Ｂ ｐｏ ｃｅ ｉ ｌ ｅ ｏ ｒ Ａ Ｂ￣ｔ ｒ ｂ ｃｖ ｏ ｎｌ ｅｈ ｅｅ ｔ ｌ ｅ ｕ Ｍ ） ｈｔ ｈｍｃ ｔ ｄ ｏ ｅｉ ａ ｙ ｅ ｆｃｏｍ ｈ ｅ ｂ ｅ ｏ ａｍ ｈ ｆ
国际医药卫生导报 ２ １ 年 第 １ 卷 第 ２ 期 ００ ６ ３
Ｉ Ｈ Ｎ，Ｄ ｃｍ ｅ ２ １ ，Ｖ １ ６ Ｎ ．３ Ｍ Ｇ ｅｅ ｂｒ ００ ０ １ ｏ ． ２
（１） ６ — ７ ： ６ ６．
菌性 外耳道炎 ３ 例Ⅲ ． ６ 临床耳 鼻咽喉头 颈外科杂
志 ，２ ０ ，２ １ ） ６ ． ０ ９ ３（ ６ ：７ ０
ｍ ／ｌ ｇｍ 减少 ，两者 比较差异均有显 著性 （ 尸＜ ０ ５） ． ，总蛋 白含量比较差异无显著性 （ ０ 尸＞００ ．５ ｏ 结论 在制备冷沉淀时 ，可考虑先将新 鲜冰冻血浆制备冷沉淀后再将血浆进行病毒灭活 。灭 活 后血浆对于临床需要 补充 血浆蛋 白的患者影响不大 ；对于需要输注 Ｖ Ｉ因子 、纤维蛋白原 的患 Ｉ Ｉ
冷沉淀的制备及应用范围
冷沉淀的制备及应用范围冷沉淀是新鲜冰冻血浆在1~6C条件下不溶解的白色沉淀物，它是POOI博士在1964-1965年期间发现的，被加热37C时呈溶解的液态，主要含有第忸因子、纤维蛋白原、血管性血友病因子（VWF）第X皿、以及纤连蛋白等成分。
现就冷沉淀的制备、临床应用及效果给大家介绍一下。
1 冷沉淀的制备与质量1.1 冷沉淀的制备选取健康无偿献血者, 各项检查指标合格,采集400 mL全血后6~8 h内经分离新鲜液体血浆于-50 C冻成型后的新鲜冰冻血浆放置-30 C保存。
制备冷沉淀时，将-30 C保存血浆放置于1~6C环境下溶解、分离出冷不溶物，放置-30 C冻存或直接应用于临床。
1.1.1 离心法（PooI）1.1.1.1 原料血浆的融化1.1.1.1.1 4 C冷藏箱法：将原料血浆从-30 C冰箱内取出，置于1~6C冷藏箱内缓慢融化。
1.1.1.1.2 水浴融化法：将原料血浆从-30 冰箱取出，值室温5 分钟，待双联袋间的塑料管变软后，放入15C水浴箱内，启动摇摆装置，约30分钟后温度调至4C,当原料血浆袋全部融化时（约60~90 分钟），然后把水温调至0~2C。
1.1.1.2融化后的原料浆于0~4C以离心力2000g离心10分钟，使冷沉淀下沉于塑料袋底部，快速去除上清液，剩20~30 mL左右即为冷沉淀。
1.1.2连续融化虹吸法（Mason）,将原料浆袋置于1~6C水浴装置中，另一空袋悬于水浴箱外且位置低于血浆袋，两袋之间形成一定的落差，血浆溶化后随时被虹吸至空袋内，当融化至剩下40~50ml时，闭合导管，阻断虹吸，将冰冻血浆袋和冷沉淀热和断离。
1.2 冷沉淀的质量冷沉淀质量受温度、时间以及其他各种因素影响。
从采血到制备过程中室温制备原料浆会使第忸因子含量偏低；说明温度对冷沉淀质量有影响。
经研究使用亚甲蓝光照法（MB）进行病毒灭活的冷沉淀与原血浆比较，忸因子和血管性血友病因子（Vwf）活性分别别下降30呀口11%纤维蛋白原浓度下降40%血液4C保存18 h 其忸因子含量与6C保存6~8 h相比下降23%冷沉淀制备时间对凝血因子含量有影响,FFP 一旦融化，忸因子活性随时间延长而明显降低,12 h 衰减41.17%,24 h 衰减42.82%,改良水浴融化虹吸法制备冷沉淀F忸含量明显高于Pool。
新鲜冰冻血浆VS冰冻血浆VS病毒灭活冰冻血浆
新鲜冰冻血浆VS冰冻血浆VS病毒灭活冰冻血浆在临床输血过程中，患者可能对血浆类型有所疑虑。
例如，有的患者看到旁边的病床输的是去病毒冰冻血浆，而自己输的是普通冰冻血浆，可能会感到不解。
特别是那些之前接受过新鲜冰冻血浆的患者，现在输的是普通冰冻血浆，可能会质疑：“难道血液不是越新鲜越好吗？”他们可能还注意到，心里因素导致患者认为输完普通冰冻血浆后的效果似乎没有之前输新鲜冰冻血浆时显著。
在当前各种病毒严重的背景下，患者还可能担心血浆中的病毒问题，因此更倾向于选择去病毒血浆。
有些时候临床医生也会区分不出这些血浆种类，为了解答这些疑虑，我们可以简要解析这几种血浆的区别。
根据血浆的来源和制备方法，我们可以将其分为新鲜冰冻血浆,病毒灭活新鲜冰冻血浆，冰冻血浆，去冷沉淀冰冻血浆，病毒灭活冰冻血浆。
怎么没有普通冰冻血浆呢？其实冰冻血浆就是普通冰冻血浆，只是习惯于叫法不一致。
制备流程新鲜冰冻血浆(fresh frozen plasma,FFP)是指采集后储存于冷藏环境中的全血在6~8小时内(根据保养液不同，ACD为6小时，CPD或CDPA-1为8小时)但不超过18小时内将血浆分离出并速冻成固态的成分血。
FFP保留了血浆的各种有效成分，含有全部凝血因子(包括不稳定的第V因子和第Ⅷ因子)、抗凝血酶和 ADAMTS13(一种血管性血友病因子裂解酶)。
FFP含各种凝血因子约0.7~1IU/ml,纤维蛋白原1~2mg/ml血浆蛋白≥50g/L。
简单概括是指在献血者献血后的6-8小时内，将血浆分离并迅速储存于-20℃以下的冷冻环境中的血液制剂，自血液采集之日起保存期为1年。
冰冻血浆(frozen plasma，FP)的来源主要有:①FFP 保存1 年后转化为FP,缺乏V、Ⅷ因子;②全血采集18小时后至全血有效期内分离的血浆，可能缺乏 V、Ⅷ因子。
FP 在≤-18℃条件下储存,自原采集日起储存4年。
简单概括有两种来源，一种是在献血者献血后在有效期内离心分离出的血浆并迅速冰冻呈固态的成分血液，另一种是新鲜冰冻血浆一年保存期满后的血浆。
新鲜冰冻血浆与普通冰冻血浆制备冷沉淀的质量分析
新鲜冰冻血浆与普通冰冻血浆制备冷沉淀的质量分析目的通过对新鲜冰冻血浆、普通冰冻血浆制备冷沉淀Ⅷ因子质量测定，来确定普通冰冻血浆是否合适做冷沉淀原料浆。
方法随机抽取2009～2010年新鲜冰冻血浆、普通冰冻血浆各10份，制备冷沉淀后，利用凝血法，检测其中Ⅷ因子含量并计算FⅧ合格率。
结果新鲜冰冻血浆FⅧ含量为（0.94±0.13）IU/mL，普通冰冻血浆FⅧ含量为（0.42±0.16）IU/mL，两组差异有统计学意义。
结论冷沉淀制备需要用新鲜冰冻血浆。
标签：新鲜冰冻血浆；普通冰冻血浆；冷沉淀；FⅧ冷沉淀是用新鲜冰冻血浆（FFP）制备的成分血，主要用于血友病A，也可用于因大失血、肝功能障碍等凝血因子减少而导致的出血性疾病的辅助治疗[1]，目前本站制备冷沉淀用数字控制水浴式血浆融化箱制备。
笔者分别用新鲜冰冻血浆和普通冰冻血浆制备冷沉淀的情况，报道如下：1 材料与方法1.1 仪器与试剂正常参比血浆（凝血因子Ⅷ含量：1.04 IU/mL）、APTT试剂（凝血因子Ⅷ含量：1.04 IU/mL）、缺凝血因子Ⅷ、稀释液（凝血因子Ⅷ含量：1.04 IU/mL）、0.02 mol/L CaCl2溶液购自中国医学科学院中国协和医科大学输血研究所四川协和生物技术有限责任公司；仪器：全自动血液凝固分析装置清洗液购自德国Dade Behring Marburg公司；数字控制水浴式血浆融化箱CT-4T.6型，热合机SE-250型，全自动凝血仪CA-501型。
1.2 取样新鲜冰冻血浆，10袋，2010年本站体检合格的献血者，用四联袋静脉抽全血400 mL（200 mL）6 h内分离出血浆200 mL±10%，立即放入-50℃以下血浆速冻机速冻后，移至-30℃冰柜中备用。
普通冰冻血浆10袋，2009～2010年本站体检合格的献血者，用四联袋静脉抽全血400 mL（200mL）超过8 h分离出血浆200 mL±10%，放入-50℃以下血浆速冻冰箱速冻后，移至-30℃冰柜中备用。
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2012年12月第50卷第36期·检验与临床·CHINA MODERN DOCTOR 中国现代医生冷沉淀因富含凝血因子Ⅷ(F Ⅷ)、纤维蛋白原(Fbg)、瑞斯托霉素因子（vWF ）、纤维蛋白稳定因子（F ⅩⅢ）、纤维结合蛋白（Fn ）等有效成分，被广泛用于出血性疾病的治疗。
但因冷沉淀易造成输血传染性疾病的发生，在所有血液制品中，输注冷沉淀传染病毒的风险高于血浆及红细胞和血小板[1]。
因此，冷沉淀的输注安全与输注有效性缺一不可，采取有效措施两者兼顾尤为重要。
本课题通过比较同源新鲜冰冻血浆在灭活前后制备冷沉淀的质量评价分析血浆灭活后制备冷沉淀的可行性，现报道如下。
1材料与方法1.1设备与试剂日本CA530血凝仪；试剂包括乏F Ⅷ批号：546545、APTT 批号：547118、CaCl2批号：549448；正常参比血浆批号：503222A ；Fbg 批号：40938、FN 批号:201205；F ⅩⅢ批号：201205；vWF 批号：201205；威高WG-LRH-I 型低温融化箱；日立大容量离心机；亚特斯全自动酶免仪；上海医用病毒灭活柜及配套病毒灭活袋。
1.2方法1.2.1原料血浆的制备采用Q-400血袋采集CPDA-1抗凝血液400mL ，尽快分离新鲜血浆。
随机抽取新鲜血浆20袋，每袋均分为100mL ×2，分别作为新鲜冰冻血浆组（甲组）和病毒灭活新鲜冰冻血浆组（乙组）。
甲组快速置于-50℃速冻机中速冻，-30℃冰柜保存备用；乙组用MB/光化学法进行病毒灭活后，采用与甲组相同的方式速冻并保存备用。
所有操作在采血后6h 内完成。
1.2.2冷沉淀的制备将上述两组冰冻后血浆在完全相同的条件下制备甲、乙两组冷沉淀，快速置于-50℃速冻机中速冻，-30℃冰柜保存备用。
1.2.3留样与检测将上述两组冷沉淀取出，37℃融化并称重，混匀后留样5mL ，分别检测F Ⅷ、Fbg 、vWF 、F ⅩⅢ、Fn 的含量。
1.3统计学处理应用SPSS11.5统计软件对数据进行统计处理，采用t 检验对两样本均数进行比较，P <0.05具有统计学意义。
亚甲蓝病毒灭活新鲜冰冻血浆制备冷沉淀的有效成分分析宋雪梅1孙庶丽2王明静31.山东省威海市中心血站，山东威海264200；2.山东省威海市中心血站质量管理科，山东威海264200；3.山东省威海市中心血站业务科，山东威海264200[摘要]目的探讨亚甲蓝灭活后新鲜冰冻血浆制备冷沉淀的可行性。
方法通过比较同源新鲜冰冻血浆在灭活前后制备的冷沉淀的质量得出结论。
结果亚甲蓝灭活后新鲜冰冻血浆制备的冷沉淀，F Ⅷ、Fbg 含量均有所降低，其中F Ⅷ留存率为（62.5±8.8）%，Fbg 留存率（62.0±11.7）%，而vWF 、F ⅩⅢ、Fn 与同源未灭活新鲜冰冻血浆制备的冷沉淀比较，差异无统计学意义。
结论用亚甲蓝灭活后新鲜冰冻血浆制备的冷沉淀，两种主要成分F Ⅷ和Fbg 含量均有损失，如果从降低输注冷沉淀传染病毒风险的角度考虑，则应对病毒灭活冷沉淀降低标准，加大临床输血量。
[关键词]亚甲蓝；病毒灭活；冷沉淀；可行性[中图分类号]R457[文献标识码]B[文章编号]1673-9701（2012）36-0101-02Analysis of the active component in cryoprecipitate made from fresh frozen plasma methylene blue treated and removedSONG Xuemei 1SUN Shuli 2WANG Mingjing 31.Weihai Blood Center ，Weihai 264200,China;2.Quality Control Department of Weihai Blood Center ，Weihai 264200,China;3.Integrated Services Office of Weihai Blood Center ，Weihai 264200,China[Abstract]Objective To analyze the feasibility of preparing cryoprecipitate prepared from fresh frozen plasma methylene blue treated and removed.Methods Conclusion was made by comparing a variety of the effective component in cryoprecip -itate before and after methylene blue treated and removed.Results The content of F Ⅷ、Fbg decreased in cryoprecipitate prepared from fresh frozen plasma methylene blue treated and removed,while F Ⅷretention ’s RT was (62.5±8.8)%,Fbg re tention ’s RT was (62.0±11.7)%,however comparison of vWF 、F ⅩⅢand Fn retention had no statistical significance.Con -clusion The content of F Ⅷ、Fbg decreased in cryoprecipitate prepared from fresh frozen plasma methylene blue treated and removed.With the aim of reducing the risk of transmission of the virus,we should lower the standard requirements and in -crease the clinical transfusion volume.[Key words]Methylene blue;Virus inactivation;Cryoprecipitate;Feasibility[基金项目]山东省威海市科技发展计划项目（2011-2-92）101·检验与临床·2012年12月第50卷第36期中国现代医生CHINA MODERN DOCTOR2结果病毒灭活新鲜冰冻血浆制备的冷沉淀，F Ⅷ、Fbg 含量均有所降低，差异有统计学意义（P ＜0.05），其中F Ⅷ留存率为（62.5±8.8）%，Fbg 留存率（62.0±11.7）%，而vWF 、F ⅩⅢ、Fn 与同源新鲜冰冻血浆制备的冷沉淀比较，差异无统计学意义（P ＞0.05）。
见表1。
表1两种方法制备冷沉淀有效成分的比较（x ±s ，n ＝20）注：非灭活组与灭活组冷沉淀有效成分F Ⅷ、Fbg 含量的比较：t 值分别为13.0、11.8，P <0.05；F ⅩⅢ、Fn 、vWF 含量的比较：t 值分别为1.88、1.61、1.59，P >0.053讨论目前，国内采供血机构普遍采用亚甲蓝对血浆进行病毒灭活，已取得了良好的效果，灭活后血浆既保证了输血的安全性，有效性又在可控范围当中，但对血浆衍生产品冷沉淀的病毒灭活仍处于探索阶段。
从本课题可以看出，新鲜冰冻血浆经亚甲蓝灭活后制备的冷沉淀，血浆F Ⅷ和Fbg 含量均有所降低，分析其原因，F Ⅷ属不稳定凝血因子，由于病毒灭活过程在2～10℃环境进行，灭活时间为30min ，延迟了血浆速冻的时间，导致其活性降低；Fbg 属稳定的凝血因子，时间延迟对其影响较F Ⅷ小，但用输血过滤器吸附过滤亚甲蓝过程中，会吸附一部分，导致其含量降低[3]。
因此，用病毒灭活新鲜冰冻血浆制备冷沉淀，会影响冷沉淀输注的有效性。
2012年7月1日实施的《全血及成分血质量要求（GB18469-2012）》对病毒灭活新鲜冰冻血浆制定了相关标准，采用亚甲蓝病毒方法灭活的新鲜冰冻血浆要求F Ⅷ≥0.5IU/mL ，较未灭活的新鲜冰冻血浆减少了0.2IU/mL ，降低了约30%，与文献报道大致相同[4]，对病毒灭活新鲜冰冻血浆制备冷沉淀则未做出相关规定。
本次试验结论显示，病毒灭活新鲜冰冻血浆制备冷沉淀，F Ⅷ和Fbg 下降幅度均值为38%，20袋灭活冷沉淀中有5袋未达到现有未灭活冷沉淀凝血因子标准（来源于200mL 全血：≥40IU ）[5]，灭活后纤维蛋白原则有18袋未达到标准（来源于200mL 全血：≥75mg ）。
综上所述，从降低输血传播病毒风险的角度，应该对冷沉淀进行病毒灭活，但从产品质量方面考虑，使用病毒灭活新鲜冰冻血浆制备冷沉淀，则需要制定新的质量标准，降低F Ⅷ、Fbg 含量。
同时为最大限度提高凝血因子留存率，血站应对冷沉淀的制备环节严格控制，如选用CPDA 配方抗凝剂，缩短采血、制备、保存时间，加强冷链管理均有利于提高冷沉淀产品质量。
医院应根据病人需要掌握冷沉淀融化的温度、时间，融化后最短时间输注，均可减少凝血因子损失，还可根据病人情况适当加大用量以保证疗效。
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