天然功能性竹叶提取物_竹叶黄酮
竹叶黄酮的分离提取
竹叶黄酮的分离提取、检测与成分分析姓名：周胤潇班级:微生物121学号：201201220414摘要：竹叶黄酮(Bamboo- leaf-flavonoid, BLF)是我们于上世纪90年代末创制的一种新型植物黄酮制剂,具有优良的抗自由基、抗氧化、抗疲劳、耐缺氧、抗病毒、抗菌、抗炎、降脂、扩冠和免疫增强活性等（1-2）。
竹叶总黄酮以其巨大的资源优势和良好的药理活性将成为一种非常有前途的天然药物,具有广阔的开发前景.本实验主要对竹叶中黄酮类物质的含量用紫外分光法进行测定以及高效液相色谱法对竹叶提取物的成分分析。
关键词：竹叶黄酮类物质紫外分光法高效液相色谱法前言竹子为禾本科Poaceae竹亚科Bambusoideae多年生常绿植物，在我国分布很广，资源十分丰富。
竹子在建筑、水利、农业等领域都有广泛的应用，然而，竹子加工利用后，竹叶却总是被弃置，造成了极大浪费。
近年来的研究发现竹叶中含有多种活性物质，其主要活性物质是黄酮类物质,含量平均在2%,竹叶提取物中的有效成分主要是以荭草苷、异荭草苷、牡荆苷和异牡荆苷为代表的碳苷黄酮和以对香豆酸、绿原酸、咖啡酸和阿魏酸为代表的植物酚酸为主，竹叶黄酮中的功能因子主要是黄酮糖苷和香豆素内酯,黄酮类物质是一类天然植物成分，具有显著的生理及药理活性，黄酮类成分有明显的抗溃疡、解痉、抗菌、抗炎、降血脂、镇痛和雌性激素等生物活性和生理活性作用⑶。
实验目的：（1）掌握样品的前处理的方法（2）掌握竹叶黄酮的提取、分离与纯化（3）用硝酸铝-亚硝酸钠比色法测定竹叶子中总黄酮（4）采用超高效液相色谱（UPLC）定量分析竹叶中荭草苷、异荭草苷、牡荆苷、异牡荆苷、对香豆酸、绿原酸、咖啡酸、阿魏酸8 个特征性成分的量。
1 实验材料和仪器1.1实验材料：竹叶（摘自浙江农林大学校园内）标准样品：甲醇（分析纯）、乙醇（分析纯）、亚硝酸钠、硝酸铝、石油醚（分析纯）、氢氧化钠、芦丁标准品（购自中国药品生物制品检定所，纯度均大于98%）、去离子水。
来自大自然的恩赐 天然功能性竹叶提取物——竹叶黄酮
行业等） 结成优势互补、利益共享的战略合作伙伴关系 ，
进行产业链的优化配置 ，实现互动双赢 的大好局面 。
以 竹 子 拉 动 经 济
据吴宇民先生介绍 “ 竹叶黄酮的提取与产品开发” 项 目，也是从以解决三农问题及资源再利用等问题为出
总 胆 固醇浓 度 、 升高 高密度 脂蛋 白（ Ｄ ）０ Ｈ Ｌ￣ 降低低 密度 蛋 发点， 是以我国极其丰富的废弃竹叶资源为出发点 ， 应用 白（Ｄ ） Ｌ Ｌ浓度的作用 。 竹叶提取物可用于化妆品的生产 。 最 新的科 技手段 ， 提取 黄酮生 物活性 成分 ， 发食 品 、 开 饮
韩国推出的可用作化妆品添加剂的竹类提取物 ， 其主要 成分 为黄酮和三萜类物质 。竹叶黄酮类 化合物还可提
品、保健品和药品等，实现竹子的 “ 整株利用” 这为竹 ，
产业开拓了一个新的经济增长点。 目前竹叶黄酮已完成前 高肉制品的安全性 ， 有助于改进 肉制品的色 泽 、 质构和 期开发 ， 并具有自主知识产权。“ 从竹叶中提取黄酮类化 保水性 ， 提高商品性能 。此外 ， 还有较强的抑菌作用和 合物浸膏或粉剂的生产方法” “ 和 一种添加竹叶黄酮提取
维普资讯
Ａ ｆ ｒ ｍ ａ ｕ ｅ Ｇｉｔｆｏ Ｎ ｔ ｒ
… 一
Ｂ ｏ Ｌｅ ｆ ｔ ｘ ｎ ｈ ｎ ａ ｏ ｈｏ ａ ｔ ｉ ｍｂ ａ Ａｎ Ｎ ａｕｒ ｌ ｕｎ ｔｏ ａ ｔａ ｔｏ ｍ ｂ ｏＬｅ ｖ ｓ ｔ ａ Ｆ ｃｉ ｎ ｌ Ｅｘ ｒ ｃ ｆ Ｂａ ｏ ａ ｅ
竹叶黄酮的提取方法
竹叶黄酮的提取方法竹叶黄酮是一种有效的天然植物黄酮类化合物，具有多种生物活性，如抗氧化、抗炎、抗肿瘤等作用。
提取竹叶黄酮的方法可以分为传统方法和现代方法两类。
以下将详细介绍这两类方法的步骤和特点。
1. 传统方法：传统方法是指使用溶剂提取技术，其步骤如下：(1) 制备竹叶样品：首先收集所需的竹叶样品，并进行初步处理，如去除杂质、洗净等。
(2) 粉碎竹叶：将处理后的竹叶样品研磨成粉末状，增加其表面积，有利于后续的提取过程。
(3) 溶剂提取：将竹叶粉末与适量的有机溶剂（如乙醇、甲醇、乙醚等）充分混合，常温静置数小时或使用超声波提取仪进行提取。
(4) 过滤和蒸发：将提取液过滤，去除悬浮物和杂质，然后使用旋转蒸发仪蒸发溶剂，得到黄酮提取物。
(5) 结晶和纯化：根据黄酮的溶解度，选择适当的溶剂进行结晶和纯化，以获得纯度较高的竹叶黄酮。
传统方法的优点是简单易行且操作成本较低，但存在提取效果受到诸多因素影响、操作时间长、产物纯度较低等缺点。
2. 现代方法：现代方法是指使用高效分离、提纯和检测技术，如超临界流体萃取、疏水性液相色谱、超滤等，其步骤如下：(1) 制备竹叶样品：同传统方法。
(2) 超临界流体萃取：将竹叶样品与超临界流体（如二氧化碳）接触，对黄酮进行萃取。
超临界流体的选择和操作参数的调节对提取效果有重要影响。
(3) 疏水性液相色谱：使用疏水性材料作为填料，选择合适的流动相，对黄酮进行快速分离和纯化。
(4) 检测和分析：使用高效液相色谱、气相色谱、质谱等技术对黄酮进行定量和质量鉴定。
现代方法的优点是提取效率高、操作时间短、所得产物纯度较高，但设备成本较高且技术要求较高。
无论是传统方法还是现代方法，都可以根据实际需求进行改进和优化，以提高提取竹叶黄酮的效果。
例如，可以通过改变提取溶剂的种类和浓度、调节提取时间和温度、优化色谱条件等方式来改善提取效果。
此外，合理选择竹叶的收获季节和地域也会对黄酮的含量和品质产生影响。
竹叶黄酮用途
竹叶黄酮用途竹叶黄酮是一种自然产生的植物化合物，主要存在于一些竹属植物中，如毛竹、青龙竹、翡翠竹等。
它是一种多酚类化合物，具有极强的抗氧化、抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种生物活性。
竹叶黄酮的主要用途之一是抗氧化。
它具有很强的自由基清除能力，可以有效抑制细胞的氧化损伤。
自由基是导致许多疾病发生的主要原因之一，如心血管疾病、癌症、糖尿病等。
竹叶黄酮的抗氧化作用可以减少自由基对细胞的伤害，保护细胞的完整性，有助于预防和治疗相关疾病。
此外，竹叶黄酮还具有抗炎作用。
炎症是许多疾病的共同特征，如关节炎、肠炎、哮喘等。
竹叶黄酮可以抑制炎症反应的发生和发展，减少炎症损伤。
它能够抑制炎症相关的酶活性，减少炎症介质的释放，从而缓解炎症症状，促进组织的修复和康复。
此外，竹叶黄酮还具有抗菌作用。
它对多种细菌、真菌和病毒均具有较强的抑制作用，能够抑制它们的生长和繁殖。
竹叶黄酮可以破坏细菌细胞壁，使其死亡；抑制病毒的复制，并阻断它们进一步感染细胞；破坏真菌的菌丝和孢子，从而减少真菌感染。
因此，竹叶黄酮被广泛应用于食品工业、医药领域和农业领域中。
竹叶黄酮还被发现具有抗肿瘤作用。
它能够抑制肿瘤细胞的增殖和生长，诱导肿瘤细胞的凋亡。
竹叶黄酮可以阻断肿瘤细胞的血管生成，从而抑制肿瘤的生长和扩散。
它还可以增强免疫系统的功能，提高机体对肿瘤的抵抗力。
因此，竹叶黄酮在肿瘤治疗中具有潜在的应用前景。
此外，竹叶黄酮还具有降血糖、降血脂、促进骨骼健康、改善睡眠质量等作用。
现代研究表明，竹叶黄酮可以提高胰岛素的敏感性，促进葡萄糖的利用，从而降低血糖水平。
它还可以降低胆固醇和三酸甘油脂的含量，预防心血管疾病的发生。
此外，竹叶黄酮中的活性物质对骨细胞有直接刺激作用，可以促进骨骼的新陈代谢和增生。
此外，竹叶黄酮还具有镇静安眠的效果，能够改善睡眠质量。
综上所述，竹叶黄酮具有多种重要的生物活性，具有广泛的应用前景。
它不仅可以用于食品工业、医药领域和农业领域，还可以作为保健品和药物的原料，用于疾病的预防和治疗。
竹叶黄酮的提取方法
竹叶黄酮的提取方法竹叶黄酮是从竹叶中提取的一种主要黄酮类化合物，具有多种药理活性和保健功效。
竹叶黄酮的提取方法一般可分为溶剂提取法、超声波辅助提取法和微波辅助提取法等。
下面将对这些提取方法进行详细的介绍。
1. 溶剂提取法：溶剂提取法是最常用的竹叶黄酮提取方法之一。
首先将竹叶破碎成粉末，并根据需要进行干燥处理。
然后将竹叶粉末与适量的有机溶剂（如乙醇、甲醇、乙酸乙酯等）进行浸泡，使竹叶中的黄酮化合物溶解在有机溶剂中。
接下来使用搅拌器辅助搅拌，提高溶剂中黄酮的溶解度。
最后，使用离心机对溶液进行离心分离，将溶液中的杂质去除，从而得到竹叶黄酮的溶液。
2. 超声波辅助提取法：超声波辅助提取法利用超声波的机械效应和热效应来提高竹叶黄酮的提取效率。
首先将竹叶破碎成细小颗粒，并加入适量的溶剂。
然后通过超声波设备对竹叶和溶剂进行处理，超声波波动将加速溶剂中黄酮的释放和扩散。
超声波的热效应可以加速溶剂的挥发，使黄酮更易于溶解在溶剂中。
最后，利用离心机对溶液进行分离，得到竹叶黄酮的提取液。
3. 微波辅助提取法：微波辅助提取法利用微波的加热效应和非热效应来加速竹叶黄酮的溶解和扩散。
首先将竹叶破碎成细小颗粒，并加入适量的溶剂。
然后将竹叶和溶剂放入微波辅助提取仪器中，通过微波的辐射加热，使溶剂中的黄酮化合物溶解。
此外，微波还可以通过破坏细胞壁和改变黄酮的分子结构，加快竹叶黄酮的释放和扩散。
最后，使用离心机对提取液进行分离，得到竹叶黄酮的溶液。
总结来说，竹叶黄酮的提取方法有溶剂提取法、超声波辅助提取法和微波辅助提取法等。
不同的提取方法在提取效率和工艺复杂度等方面存在差异，具体选择方法需根据实际情况进行抉择。
同时，为了保证提取得到的竹叶黄酮的质量和纯度，还需进行后续的分离、纯化和检测工作。
竹叶黄酮功效与作用
竹叶黄酮功效与作用竹叶黄酮（bamboo leaf extract）是一种天然的植物提取物，被广泛应用于食品、保健品和药物中。
竹叶黄酮含有丰富的黄酮类化合物，具有多种功效与作用。
1. 抗氧化作用竹叶黄酮具有较强的抗氧化作用，可以清除体内自由基，减少氧化损伤对细胞的伤害。
研究表明，竹叶黄酮可以提高SOD （超氧化物歧化酶）的活性，增强抗氧化能力，抑制过氧化脂质的产生，保护细胞免受氧化损伤。
此外，竹叶黄酮还能够抑制一些有害酶的活性，减少其对细胞的损害。
2. 抗炎作用竹叶黄酮具有明显的抗炎作用，可以抑制炎症反应的发生和发展。
研究表明，竹叶黄酮可以抑制多种炎症介质的生成，如肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和白细胞介素-6（IL-6）等。
竹叶黄酮还可以抑制一些炎症相关的信号通路的活化，如核因子-κB（NF-κB）和线粒体反应性氧种（ROS）等。
通过抑制炎症反应的发生，竹叶黄酮可以缓解炎症引起的疾病症状，如风湿性关节炎、肾炎等。
3. 降血脂作用竹叶黄酮具有降低血脂的作用，可以调节血脂代谢，降低血液中的胆固醇和三酰甘油水平。
研究发现，竹叶黄酮可以通过抑制脂肪合成酶的活性，减少胆固醇的合成；并通过抑制胆固醇转运蛋白的活性，增加胆固醇的排泄，从而降低血液中的胆固醇水平。
此外，竹叶黄酮还可以增加脂肪的氧化分解，降低体内脂肪的积累。
4. 保护心血管作用竹叶黄酮具有保护心血管的作用，可以降低心血管疾病的发生风险。
竹叶黄酮可以降低血压，改善血管弹性，减少动脉硬化的发生。
研究显示，竹叶黄酮可以增加一氧化氮（NO）的生成，促进血管扩张，降低血管阻力；同时抑制血小板凝集和血栓形成，降低心脑血管事件的发生。
此外，竹叶黄酮还可以减少心肌细胞的损伤，增加心肌细胞的抗缺血和抗氧化能力。
5. 抗肿瘤作用竹叶黄酮具有一定的抗肿瘤作用，可以抑制肿瘤细胞的增殖和转移。
研究表明，竹叶黄酮可以通过调控一些与肿瘤相关的信号通路的活性，如Wnt、PI3K/AKT和MAPK等，抑制肿瘤细胞的增殖和转移。
竹叶黄酮的应用及市场概况
竹叶黄酮的应用及市场概况一、竹子概述竹子是禾本科( Gram ineae ) 竹亚科(Bambusoideae)多年生常绿植物，有着复杂的次生代谢。
世界竹类植物约有70－80 属1 300多种，其中我国约有39属500余种。
我国江南竹资源丰富，竹林面积约为720万公顷，主要分布在广东、广西、福建、浙江、湖南、江西、四川、江苏、贵州和云南等省份。
竹叶在我国有悠久的利用历史，是一味传统的清热解毒药。
近年来对竹子的研究发现，竹叶中含有大量对人体有益的活性物质，包括黄酮酚酸类、生物活性多糖、氨基酸肽类、蒽醌类、萜类内酯等，其中酚酸类化合物、蒽醌类化合物、萜类内酯和生物碱等都有着较强的抑菌杀菌作用。
竹叶中主要有效成份的含量为：总黄酮含量1. 18% ～ 2. 02%，总酚含量2. 21%～2. 86%，总糖含量14. 35%～24. 61%，水溶性糖含量7. 86%～11. 45%， 多糖6. 49%～14. 55%，蛋白质含量10. 24%～16. 68%，含氮量2. 13%～2. 65%。
淡竹叶2002年被卫生部列入“既是食品又是药品的物品名单”。
二、竹叶黄酮概述又名竹叶抗氧化剂，英文名称antioxidant of bamboo leaves， 简称AOB，是从竹叶中提取出来的具有生理活性的生物黄酮，它是一种高效的生物抗氧化剂。
AOB为黄色粉末或晶体，总黄酮糖苷含量在≥24％，总香豆素类内酯≥12％，包括黄酮类、内酯类和酚酸类化合物，是一组复杂的、而又具有相互协同增效作用的混合物。
其中，黄酮类化合物主要是碳苷黄酮，四种代表化合物为：荭草苷、异荭草苷、牡荆苷和异牡荆苷，内酯类化合物主要是羟基香豆素及其糖苷，酚酸类化合物主要是肉桂酸的衍生物，包括绿原酸、咖啡酸和阿魏酸等。
竹叶抗氧化物是一种具有本土资源特色和自主知识产权的、安全高效经济的天然食品抗氧化剂，于2003年底通过国家评审，2004年4月被批准列入《中华人民共和国食品添加剂使用卫生标准》(GB2760—1996)，允许的使用范围是：食用油脂、肉制品、水产品和膨化食品，最大使用量0.5g／kg。
多功能活性物质—竹叶黄酮的国内外研究及应用
（ １贵 州大 学化 学与４ ｋ ５ ＿ ￣学院 ，贵 州 贵阳 ５ ５ ０ ０ ２ ５ ；２贵 州 工程 应 用技 术 学院 ， 贵州 毕 节 ５ ５ １ ７ ０ ０；３贵 州天剑 司法鉴 定 中心 ，贵 州 贵 阳 ５ ５ ０ ０ ０ ２ ）
关键词 ：竹叶黄酮 ； 生理功能；国内外研究；产业应用现状
中 图分 类 号 ：Ｔ Ｑ ４１ ０ ． ８
文献标 志码 ：Ａ
文 章编 号 ：１ ０ ０ １ — ９ ６ ７ ７ （ ２ ０ １ ５ ） ０ ５ — ０ ０ １ ２ — ０ ４
Ｍ ｕｌ ｔ ｉ ｆ ｕｎ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎａ ｌ Ａｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｓ ｕｂ ｓ ｔ ａ ｎ ｃ ｅ ｓ －Ｄｏ ｍｅ ｓ ｔ ｉ ｃ ａ ｎ ｄ Ｆｏ ｒ ｅ ｉ ｇ ｎ Ｒｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ ａ ｎｄ
摘 要 ：竹叶含有丰富的黄酮类化合物，竹叶黄酮是一种具有多重生理功效的新型天然活性物质 ，具有高开发应用价值。
科学界对竹 叶黄 酮作 了大量研究 ，本文 综述 了国内外研究现状 ，介 绍 了其 生理功效 和作用机制 的研究进 展。 同时 ，对 我国 的产业 化情况及在 医药保健 品 、食 品、 日化用 品等行业 的应用现状作 了介绍 。
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ：Ｂ ａ ｍｂ ｏ ｏ ｌ ｅ ａ ｖ ｅ ｓ ｃ ｏ ｎ ｔ ａ ｉ ｎ ａ Ｊ ｏ ｔ ０ ｆ ｌ ｆ ａ ｖ ｏ ｎ ｏ ｉ ｄ ｓ ． Ｂ ａ ｍｂ ｏ ｏ ｌ ｅ ａ ｖ ｅ ｓ ｌ ｆ ａ ｖ ｏ ｎ ｏ ｉ ｄ ｓ ｉ ｓ ａ ｎ ｅ ｗ ｔ ｙ ｐ ｅ ｏ ｆ ｎ ａ ｔ ｕ ｒ ｌ ａ ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ
Ｉ ｎｄ ｕｓ ｔ ｒ ｉ ａ ｌ Ａｐ ｐｌ ｉ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｂａ ｍ ｂｏ ｏ Ｌｅ ａ ｖ ｅ ｓ Ｆｌ ａ ｖ ｏ ｎｉ ｄ ｓ
天然功能提取物——竹叶黄酮及其应用
天然功能提取物——竹叶黄酮及其应用金绍黑发布时间：2010-12-24 14:54 来源：中国科技信息网作者：高梦佳点击:1132次字号：T|T技术简介：黄酮类化合物（以下简称“类黄酮”）是一大类天然产物，广泛存在于植物界，是许多中草药的有效成分。
近年来，自由基生命科学的进展，使具有强抗氧化和清除自由基作用的类黄酮受到空前的重视。
20世纪90年代以来，人们开始关注竹叶中类黄酮的存在及其生物学活性。
1998年，在借鉴国内外植物黄酮提取方面的各种专利技术的基础上，结合竹叶中类黄酮存在的特点，研究开发了经济、适用、独特的竹叶黄酮提取工艺，实现了竹叶黄酮产业化。
至此，淡竹叶提取物（浓缩液及粉剂）正式面市。
一、竹叶黄酮保健功效更显著独特类黄酮对人体健康有诸多好处：抗炎症、抗过敏、抑制细胞、抑制寄生虫、抑制病毒、防治肝病、防治血管疾病、防治血管栓塞、防治心脑血管疾病、抗肿瘤、抗化学毒物等。
最新研究发现，淡竹叶提取物含有大量的黄酮类化合物和生物活性多糖及其他有效成分，如酚酸类化合物、蒽醌类化合物、萜类内酯、特种氨基酸和活性肽、锰、锌、硒等微量元素。
淡竹叶提取物中所含的功能因子主要是黄酮碳苷和香豆素类内酯，其有效成分的含量和生物活性均与银杏叶提取物具有可比性。
同时，竹叶黄酮不含有害成分和抗营养因子，无副作用并且口感良好。
与普通黄酮相比，竹叶黄酮具有结构稳定，不易被降解；能深入病灶部位，直接发挥功效；亲水性强，有利于开发食品、保健食品和药物等突出优点。
各种功能试验证明，竹叶黄酮能清除多种类型的活性氧自由基，抑制脂质过氧化，保护心脑血管。
其阻断亚硝化反应和清除N-亚硝胺的能力可与维生素C相媲美；抗衰老、抗应激和抗疲劳的作用与纯蜂花粉相当；降血甘油三酯和升高高密度脂蛋白的作用显著优于银杏叶提取物；抗菌、消炎和抗病毒的作用与茶多酚相似；镇咳祛痰、清热解毒的功效胜竹沥一筹。
竹叶黄酮还具有良好的免疫调节作用，能显著增强人体对不良环境和疾病的抵抗力。
竹叶黄酮在制药中的应用[发明专利]
[19]中华人民共和国国家知识产权局[12]发明专利申请公开说明书[11]公开号CN 1517096A [43]公开日2004年8月4日[21]申请号03101167.5[22]申请日2003.01.15[21]申请号03101167.5[71]申请人杭州华东医药集团生物工程研究所有限公司地址310011浙江省杭州市拱墅区莫干山路866号[72]发明人潘福生 王新华 胡凯 蒋芳萍 [51]Int.CI 7A61K 31/7048A61K 31/352A61K 35/78A61P 9/10A61P 7/02权利要求书 1 页 说明书 7 页[54]发明名称竹叶黄酮在制药中的应用[57]摘要本发明涉及竹叶黄酮在制药领域中的新用途。
竹叶黄酮具有扩张冠脉流量，改善心肌缺血，降低血小板聚集，对抗心肌梗塞，改善脑缺血等功能，竹叶黄酮可用于制备治疗这些适应症的药物。
03101167.5权 利 要 求 书第1/1页1.竹叶黄酮在制备增加冠脉流量的药物中的应用。
2.竹叶黄酮在制备改善心肌缺血的药物中的应用。
3.竹叶黄酮在制备降低血小板聚集的药物中的应用。
4.竹叶黄酮在制备治疗心肌梗塞的药物中的应用5.竹叶黄酮在制备治疗脑缺血的药物中的应用。
03101167.5说 明 书第1/7页竹叶黄酮在制药中的应用技术领域本发明涉及竹叶黄酮的用途，具体地说是涉及在制药领域中的用途。
背景技术竹叶黄酮是由竹叶经提取后得到的提取产物。
所指的竹叶，是指禾本科禾亚科植物淡竹的叶，竹叶以刚竹属竹子的竹叶为佳，如毛金竹、桂竹、毛竹、哺鸡竹、早园竹、高节竹、紫竹、斑竹等。
竹子是多年生常绿植物，竹叶一年四季可采，但以秋冬季(9～12月)采收最佳，竹子是一种大众化的药食两用植物，我国竹叶资源非常丰富。
中国专利98104564(2001年5月23日授权)公开了一种《从竹叶中提取黄酮类化合物浸膏或粉剂的生产方法》，在此申请中公开了从竹叶中提取竹叶黄酮的生产方法，并公开了竹叶黄酮具有优良的抗自由基、抗氧化、抗衰老活性。
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天然功能性竹叶提取物———竹叶黄酮张 英(浙江大学农业工程和食品科学学院食品科学和营养系,杭州310029)摘要:竹叶提取物(Extract of Bamboo Leaves,Ebl)是我国新开发的一种植物类黄酮制剂,具有优良的抗自由基、抗氧化、抗衰老、抗菌、抗病毒及保护心脑血管、防治老年退行性疾病等生物学功效。
Ebl以其丰富的原料来源、明确的功能因子、良好的食用安全性、高效稳定的制剂品质和清新甜香的竹子风味,近年来在天然功能性食品添加剂和医药保健品领域崭露头角。
关键词:天然,功能性,竹叶提取物Natural Functional Extract of Bamboo Leave s———Bamboo Leaf AnthoxanthinZhang Ying(Agriculture Engineering and F ood Science C ollegeof Zhejiang University,Hangzhou310029)Abstract:Extract of Bamboo Leaves(Ebl)is a new developing vegetable flav one preparation.It has many fine functions,such as anti-free radical,oxidation resistance,anti-senescence,anti-bacteria,anti-virus,and protecting vasular system,etc.In recent years,Ebl cut a striking figure in the field of natural functional food additive,medicine and healthy food.K ey w ords:Natural,Function,Extract of bamboo leaves一、竹叶药食两用的悠久历史竹叶在我国具有悠久的药用和食用历史,是中医一味著名的清热解毒药。
《本草求真》曰∶“竹叶据书载,凉心缓脾、清痰止渴,为治上焦风邪烦热、咳逆喘促、呕岁吐血、一切中风惊痫等症,无非因其轻能解上、辛能散郁、甘能缓脾、凉能入心、寒能疗热故耳”。
《本经逢原》载∶“竹叶兼行肌表,故能疗疮杀虫”。
《药品化义》载“竹叶清香透心,微苦凉热,气味俱清。
《经曰》治温以清,专清心气,味淡利窍,使心经热血分解。
主治暑热消渴,胸中热痰,伤寒虚烦,咳逆喘促,皆用为良剂也。
又取清气入肺,是以清气分之热,非竹叶不能……”。
另据《中药大辞典》记载,淡竹叶功用主治∶清热除烦,生津利尿;治热病烦渴,小儿惊痫,咳逆吐血,面赤,小便短赤,口糜舌疮等。
竹叶及其嫩茎是大熊猫的专一食料,箬竹叶常被用来包裹食物,如我国的粽子和日本的寿司等。
在我国少数民族地区还有饮用竹筒茶和竹叶茶的习惯。
20世纪80年代以来,有研究报道从竹叶中提取食品防腐剂、杀菌剂[1]和叶绿素等;90年代以来,人们开始关注竹叶中黄酮类化合物的存在及其生物学活性[2-6]。
1998年,我们在借鉴国内外植物黄酮提取方面的各种专利技术的基础上,结合竹叶中黄酮类化合物存在的特点,创造了经济、适用、独特的提取工艺,获得了国家发明专利[7],并率先在浙江实现了产业化,至此,Ebl正式面世。
同年, (淡)竹叶被卫生部正式批准列入了“药食两用的天然植物名单”。
1999年竹叶黄酮获国家级新产品证书,其衍生产品———竹康宁胶囊获卫生部保健食45品批文[卫食健字(1999)第0564号],竹叶啤酒[8]和竹叶饮料等也纷纷上市。
二、Ebl的有效成分近年来的研究表明,竹叶中含有大量的黄酮、酚酸、蒽醌类化合物[6]、生物活性多糖[9]、香豆素类内酯[10]、特种氨基酸[11]、芳香成分[12]和锰、锌、硒等微量元素。
1.碳苷黄酮Ebl的功能因子主要是黄酮糖苷,并以C-糖苷为主。
四种主要的竹叶碳苷黄酮分别是荭草苷(Orientin)、异荭草苷(H om oorientin)、牡荆苷(Vitex2 in)和异牡荆苷(Is oviextin),其结构特征如下:Name R1R2R3Orientin G lu H OHH om oorientin H G lu OHVitexin G lu H HIs oviextin H G lu H 2.酸性杂多糖Ebl中存在一定量的竹叶多糖。
从毛竹叶中提取的多糖(BP)是一种中等分子量的酸性杂多糖,主要由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖六种糖基组成。
动物试验的结果表明,BP能显著提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力,对移植性S180肿瘤的抑制率达50%以上[9]。
3.特种氨基酸在竹叶及其提取物中检出了相当含量的δ-羟基赖氨酸(δ-OH-Lys),主要以游离单体和小肽的形式存在。
从桂竹和金毛竹叶样分别测得其含量占干叶氨基酸总量的1.33%和1.40%,约相当于其中Lys含量的1/4。
醇～水提取的过程有富集δ-OH-Lys的作用,其在提取物中的含量远远高于Lys。
进一步的研究发现赖氨酸在δ位羟化以后,其生物抗氧化活性远远高于赖氨酸[13]。
这一特殊的非蛋白氨基酸以相当含量存在于竹叶中,可能有着特殊的生物学意义[11]。
4.挥发性成分竹叶的芳香成分主要是中等链长的含氧化合物。
以阔叶箬竹、毛金竹和四季竹为代表,用“同时蒸馏-萃取法”和“大孔树脂顶空吸附法”联合收集芳香成分,用毛细管气相色谱/质谱/计算机联用技术,对竹叶的精油和头香进行剖析[12]。
共检出144种挥发性化合物,其中22种为三种竹叶所共有。
芳香成分以醛、醇、呋喃、酮类为主,C5～C8中等链长的含氧化合物占主导地位,是竹叶清香的物质基础,其中C6化合物起了关键作用,重要的C6成分有(E)-2-己烯醛、(Z)-3-己烯醇、2-乙基-呋喃、己醛和己烯等。
从总体上看,竹叶的主要香味成分不是萜烯属的,它的香气具有典型的绿叶特征,接近于瓜、果、茶的香型。
三、Ebl的生物学功能1.抗活性氧自由基Ebl具有优良的抗自由基能力和确凿的类S OD活性。
对来自6个属17种竹子秋叶的提取物的调查,用化学发光法测得其醇提物对O・-2的半抑制浓度(IC50)平均为4.93±2.36μg/ml,相当于0.124U/ml S OD的活力;对・OH的IC50平均为1.48±0.91mg/ml,相当于0.235mg/ml阿魏酸纯品的作用[6]。
用化学发光法进一步测定了用不同方法从桂竹(Phyllostachy bambus oides Sieb.Et Zucc.)叶中提取的总黄酮清除O・-2和・OH的有效范围,竹叶总黄酮在0.1～10μg/ml浓度范围内清O・-2活力呈显著的浓度依赖关系,其IC50在0.8μg/ml左右;清・OH的有效浓度范围在0.01μg～1mg/ml之间,IC50在450mg/ml左右[14]。
表明Ebl有很强的清除活性氧自由基的能力,尤其对O・-2的效价更高,且刚竹属的品种普遍性能优良。
为了多方面印证Ebl的类S OD活性(即清除O・-2的能力),进一步运用化学发光法、分光光度法和电子自旋共振法(ESR)等多种手段和不同的O55・-2产生体系进行测试,均获得了很好的结果[15,16]。
ESR是目前能直接检测自由基的唯一方法,ESR测定结果与化学发光法具有显著的相关性,充分肯定了竹叶中的活性成分具有很强的类S OD活性,且总黄酮试样的活力比粗提物高约30倍[15]。
此外,ESR研究的结果还显示竹叶总黄酮试样(总黄酮糖苷含量为22%)具有与单体黄酮(木犀草素-7-O-葡萄糖苷)相同的清O・2-能力。
进一步的研究表明,竹叶黄酮各单体之间存在相当强的协同作用[17]。
将从桂竹叶中分离纯化的7种黄酮糖苷单体以1.11×10-5m ol/L的浓度等体积混合,测得混合物清除O・-2的速率常数(k3)为3.94×106(m ol/L)-1sec-1,相比其各自k3的平均值1.57(±0.95)×106(m ol/L)-1sec-1,清除速率提高了1倍多。
我们与加拿大UBC大学(University of British C olumbia)的合作研究还表明,金毛竹(Phyllostachys nigra Var.Henonis)叶提取物显示了良好的清除DPPH(1,1-diphenyl-2-picylhydrzyl)自由基的活性,并呈显著的浓度依赖关系[18]。
2.抗脂质过氧化体外模拟体系的试验表明,金毛竹叶提取物显著抑制了由AAPH[2,2’-Azobis(2-amidino-propane)dihydrochloride]诱导的脂质体的过氧化,防止了Cu++中介的人类血清低密度脂蛋白胆固醇(LD L-c)的氧化,并拮抗了由AAPH中介的过氧自由基对DNA的解旋作用[18]。
在阿华田中强化1%的Ebl,显著提高了制品的抗自由基和抗氧化能力,并保护了其中VA和VE的活性[19]。
在啤酒中强化一定量的Ebl后,双乙酰回升受到显著抑制,储存稳定性大大增强[20]。
在香肠中添加0.01%的Ebl后,可大幅度降低硝酸盐的用量,并改善香肠的色泽和风味,增强抗氧化能力。
对Ebl进行控制性酸水解,使其部分黄酮糖苷转化成苷元,亲油性有了显著改善[21]。
T BA快速测定法表明,在菜籽油体系中,水解苷元显示了与BHT可比的抗氧化活性,其有效浓度在0.2‰左右;改良烘箱法试验表明,水解苷元抑制猪油过氧化的能力与槲皮素和茶多酚相似;采用Vc-Cu2+-H2O2-酵母多糖体系产生・OH,用化学发光法测定的结果显示,水解苷元的清・OH 活性接近槲皮素[22]。
表明竹叶黄酮苷元具有作为天然油脂抗氧化剂的开发潜力。
3.抗衰老、抗应激和抗疲劳用昆明种小鼠作为实验对象,进行抗衰老、耐缺氧和抗疲劳作用的试验。
结果表明[23],高剂量组的Ebl(相当于1g干叶/kg体重/d)能显著增强小鼠对非特异性刺激的抵抗能力(常压耐缺氧试验,p<0.01)和抗疲劳能力(游泳试验,p<0.01)对正常小鼠的学习能力有一定的促进作用(电迷路法,p<0.01);对老年小鼠体内的S OD和G SH-Px 活性有显著的诱导作用;并且明显抑制了老年小鼠血浆LPO的生成,降低了肝脏脂褐素的含量。
用15月龄的雌性NIH小鼠作为试验对象,分高、中、低三个剂量组,进行连续三个月的Ebl灌胃试验,同时设空白对照组和银杏提取物的阳性对照组,并在测试时用8周龄的雌性小鼠作为少龄对照组,测定血液LPO、S OD和G SH-Px的含量,数据详见表1。