植物核蛋白提取(蛋白组实验,质谱适用)
植物总蛋白提取
一提取植物总蛋白（以植物花粉为例）：1.三氯乙酸法（TCA）/丙酮(acetone)提取花粉总蛋白质花粉在liquid nitrogen中研磨成粉末，用含10%TCA和1%DTT的acetone沉淀蛋白质，-20度2个小时(必要时过夜)，4度25000g离心20min后去上清，用含1%DTT的acetone溶液悬浮沉淀，-20度1个小时,再次离心去上清，将真空干燥的沉淀在等电聚焦缓冲液中(8M urea，20mmDTT,4%CHAPS,2%ampholyte,PH:3-10) 20度震荡1小时，20度25000g离心20min，收集上清，沉淀再次用IEF缓冲液离心收集上清，可为后续试验做准备。
2．苯酚（phenol）提取法花粉在liquid nitrogen中研磨成粉末，添加1ml的phenol（tris 8.8 缓冲液）继续研磨5min,加提取缓冲液（0.1mol/L 8.8 Tr i s –HCl，5mmEDTA,20mmDTT,30%sucrose）。
将样本转移至离心管中，4度震荡30min，25000g离心10min，将上层的phenol层转移进另一个试管，将下边的水相层加1ml的phenol（tris 8.8 缓冲液）及提取缓冲液，震荡，离心，将再次收集到的phenol与前边收集的混合，加5倍体积的0.1 M ammonium acetate in 100%methanol，在-20度震荡沉淀蛋白质，必要时过夜，4度 25000g离心10min，将沉淀用0.1 M ammonium acetate in 100%methanol及80% acetone各洗两次, 含10mmDTT的80% acetone再洗一次，在每一步中蛋白沉淀都要完全重悬— -20度震荡30min，4度 25000g离心20min，洗剂完成后，沉淀真空干燥，IEF buffer提取蛋白质，如方法1。
3．直接IEF buffer提取蛋白质直接IEF buffer提取蛋白质，花粉在liquid nitrogen中研磨成粉末，然后加入IEF buffer(8M尿素，20mmDTT,4%CHAPS，5mmEDTA，5mmTris base,2%ampholyte,PH:3-10).如方法1。
植物细胞核蛋白质组学研究进展
植物细胞核蛋白质组学研究进展摘要细胞核储藏有植物体的主要遗传信息。
植物细胞核蛋白质组的动态变化直接影响植物基因表达调控，进而调节植物生长发育与环境应答过程。
细胞核蛋白质组学研究为解析植物发育与逆境应答的分子机制提供了重要信息。
综述了近年来植物细胞核蛋白质组学研究的进展，以促进其进一步研究。
关键词植物；细胞核；蛋白质组学中图分类号 q942.6 文献标识码 a 文章编号 1007-5739（2013）05-0225-02在高等植物中，除韧皮部成熟的筛管等极少数细胞外，其他细胞都具有细胞核。
细胞核是遗传信息的储存场所，承担着基因复制、转录和转录产物加工等功能，也是细胞遗传与代谢活动的调控中心。
研究细胞核的蛋白质组成与动态变化，对于深入解析植物发育与逆境应答过程中的基因表达调控的分子机制具有重要意义。
近年来，不断发展的高通量蛋白质组学技术平台为全面解析植物细胞核蛋白质表达谱与动态特征提供了良好的技术平台。
人们已经将双向电泳、色谱技术与生物质谱技术相结合，初步研究了水稻（oryza sativa）、维柯萨（xerophyta viscosa）、洋葱（allium cepa）、拟南芥（arabidopsis thaliana）、鹰嘴豆（cicer arietinum）和大豆（glycine max）等植物细胞核的蛋白质组特征。
本文综述了近年来植物细胞核蛋白质组学研究进展。
1 植物细胞核与核蛋白质的制备目前的植物细胞核蛋白质组学研究，主要是从植物幼苗或悬浮培养细胞中提取细胞核。
从幼苗中提取细胞核，首先在低温条件下将幼苗研磨成粉末，进而通过以percoll为介质的密度梯度离心富集细胞核[1]。
从悬浮培养细胞中提取细胞核，利用匀浆机破碎或细胞壁水解酶除去细胞壁，然后通过改变细胞内外渗透压破碎原生质体，并利用密度梯度离心富集细胞核[1]。
获得细胞核以后，通常利用dapi染色后的显微观察，或通过测定细胞核制备液中叶绿素含量等方法来评价细胞核的纯度。
植物提取蛋白质的方法
植物提取蛋白质的方法植物提取蛋白质是一项关键的实验技术，它可以用于分离纯化和研究各种不同的植物蛋白质。
在这篇文章中，我将介绍一些常见的植物提取蛋白质的方法。
一、机械法提取蛋白质机械法提取蛋白质是最常见的提取方法之一。
机械方法能够充分破碎植物细胞壁，释放细胞液中的蛋白质。
这一方法相对简单，并且适用于大多数植物材料。
首先，将植物样品切碎，例如使用搅拌器或切割机。
然后，将样品置于高速搅拌器中，加入一定量的提取缓冲液。
提取缓冲液的选择会因不同植物而异，常见的包括Tris-HCl缓冲液、PBS缓冲液等。
随后，搅拌样品，使其充分混合，一般搅拌时间为30分钟到1小时。
搅拌完成后，使用离心机将混合液离心，离心时间和速度会因样品的不同而有所变化。
离心完成后，上清液中富含蛋白质，可以用于进一步的分离纯化。
二、化学法提取蛋白质化学法提取蛋白质是一种革命性的方法，它可以应用于很多不同类型的植物材料。
化学法提取蛋白质通常使用表面活性剂来破坏细胞膜，从而释放蛋白质。
一个常用的化学法是使用Tween-20。
首先，将植物样品切碎，然后将样品与一定量的提取缓冲液一起加入离心管中。
提取缓冲液中含有Tween-20等表面活性剂，作用是破坏细胞膜结构。
然后，使用离心机将混合液离心，离心时间和速度的选择会因样品的不同而有所不同。
离心完成后，上清液中富含蛋白质，可以用于进一步的分离纯化。
化学法提取蛋白质相比机械法来说，可以更彻底地破坏细胞膜，更有效地释放蛋白质。
但是，使用化学方法也要注意表面活性剂的种类和浓度，过高的浓度可能会使得蛋白质变性。
三、酶解法提取蛋白质酶解法提取蛋白质是一种选择性高、过程温和的方法。
它利用酶的特异性作用，选择性地降解植物组织中的细胞壁，从而释放蛋白质。
酶解法的步骤较为简单。
首先，将植物样品切碎，然后加入适量的酶解缓冲液和适当浓度的酶。
酶解缓冲液的选择会因不同酶而异，常见的包括PBS缓冲液和Tris-HCl缓冲液等。
植物蛋白质提取方法总汇
1、根据样品重量(1g样品加进3.5ml提取液，可根据材料不同适当加进)，预备提取液放在冰上。
2、把样品放在研钵中用液氮研磨，研磨后加进提取液中在冰上静置(3-4小时)。
3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清液，样品制备完成。
蛋白质提取液：300ml1、1Mtris-HCl(PH8)45ml2、甘油(Glycerol)75ml3、聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinylpolypyrrordone)6g这种方法针对SDS-PAGE，垂直板电泳！氯醋酸—丙酮沉淀法1、在液氮中研磨叶片2、加进样品体积3倍的提取液在-20℃的条件下过夜，然后离心(4℃8000rpm以上1小时)弃上清。
3、加进等体积的冰浴丙酮(含0.07%的β-巯基乙醇)，摇匀后离心(4℃8000rpm以上1小时)，然后真空干燥沉淀，备用。
4、上样前加进裂解液，室温放置30分钟，使蛋白充分溶于裂解液中，然后离心(15℃8000rpm以上1小时或更长时间以没有沉淀为标准)，可临时保存在4℃待用。
5、用Brandford法定量蛋白，然后可分装放进-80℃备用。
药品：提取液：含10%TCA和0.07%的β-巯基乙醇的丙酮。
裂解液：2.7g 尿素0.2gCHAPS溶于3ml灭菌的往离子水中(终体积为5ml)，使用前再加进1M 的DTT65ul/ml。
这种方法针对双向电泳，杂质少，离子浓度小的特点！当然单向电泳也同样适用，只是电泳的条带会减少！目的：WESTERNBLOT检测凋亡相关蛋白的表达应用TRIPURE提取蛋白质步骤：含蛋白质上清液中加进异丙醇：(1.5ml每1mlTRIPURE用量) 倒转混匀，置室温10min离心：12000g，10min，4度，弃上清加进0.3M盐酸胍/95％乙醇：(2ml每1mlTRIPURE用量)振荡，置室温20min离心：7500g，5min，4度，弃上清重复0.3M盐酸胍/95％乙醇步2次沉淀中加进100％乙醇2ml充分振荡混匀，置室温20min离心：7500g，5min，4度，弃上清吹干沉淀1％SDS溶解沉淀离心：10000g，10min，4度取上清-20度保存(或可直接用于WESTERNBLOT)存在的题目：加进1％SDS后沉淀不溶解，还是很大的一块，4度离心后又多了白色沉定，SDS结晶？测浓度，含量才1mg/ml左右。
植物蛋白提取
植物蛋白提取概述植物蛋白提取是一种将植物中的蛋白质分离和提纯的过程。
植物蛋白具有许多重要的生理功能和营养价值，因此植物蛋白提取技术在食品、药品、化妆品等领域得到广泛应用。
本文将介绍植物蛋白提取的原理、方法和应用。
原理植物蛋白提取的原理是基于蛋白质的溶解性差异。
植物细胞壁中的蛋白质一般以自由态和结合态存在，其中自由态蛋白质溶解性较好，而结合态蛋白质溶解性较差。
利用不同提取剂可以改变蛋白质的溶解性，从而实现蛋白质的分离和提纯。
方法材料准备•植物样品：可以选择各类植物，如大豆、绿豆、花生等。
•提取剂：提取剂的选择与植物样品有关，常用的提取剂包括生理盐水、磷酸盐缓冲液、甲醇、乙醇等。
•辅助试剂：可以根据需要选择添加一些辅助试剂，如酶解酶、蛋白酶抑制剂等。
提取步骤1.样品准备：将植物样品收集并洗净，去除杂质和残存的表面蛋白质。
2.研磨样品：将植物样品切碎或研磨，以增加溶解的效果。
3.提取液配置：根据实验需要选择合适的提取液，可以根据实验室的经验或相关文献进行选择和调配。
4.溶解与搅拌：将研磨的植物样品与提取液混合，在适当的温度和pH条件下进行溶解和搅拌一段时间，促使蛋白质溶解。
5.澄清和分离：通过离心、过滤等方法将植物样品中的残渣和杂质分离出去，得到含有蛋白质的澄清液。
6.浓缩和纯化：通过浓缩和纯化技术，将澄清液中的蛋白质进行富集和纯化，得到纯净的植物蛋白。
应用植物蛋白提取技术广泛应用于食品、药品、化妆品等领域。
以下是一些常见的应用： 1. 食品加工：植物蛋白是一种重要的食品成分，可以用于调制各种食品，如豆腐、豆浆、植物肉等。
2. 药品制造：植物蛋白可以作为药物的原料，用于制备各种药品，如生物药物、保健品等。
3. 化妆品生产：植物蛋白可以用于制造各类面膜、护肤品、洗发水等化妆品，具有良好的保湿和滋养效果。
4. 农业应用：植物蛋白可以用作植物肥料、植物抗病等农业应用，促进植物生长和抗逆能力。
结论植物蛋白提取是一项重要的技术，可以将植物中的蛋白质分离和提纯，为食品、药品、化妆品等领域的生产和研发提供了重要的原料和支持。
植物提取蛋白实验报告
一、实验目的1. 了解植物蛋白质提取的基本原理和方法。
2. 掌握三氯乙酸-丙酮法提取植物全蛋白的操作步骤。
3. 学习蛋白质含量测定的方法。
二、实验原理植物蛋白质是植物细胞内的重要组成部分，具有多种生物学功能。
本实验采用三氯乙酸-丙酮法提取植物全蛋白，该方法能够有效地使蛋白质变性并沉淀，同时阻止多酚氧化酶和其他氧化酶类失活，防止蛋白质互相结合形成难溶的复合体。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：新鲜植物叶片（如菠菜、甘蓝等）。
2. 试剂：三氯乙酸、巯基乙醇、丙酮、R2D2 蛋白质溶解缓冲液、UKS 蛋白质溶解缓冲液、IPG 胶条水化液。
3. 仪器：研钵和研槌、离心机、液氮、冰箱、电子天平。
四、实验步骤1. 植物材料处理- 将新鲜植物叶片洗净，用液氮快速冷冻，然后研磨成细小的粉末。
- 将约200 μl 粉末转移到 2 ml 的离心管中。
2. 蛋白质沉淀与变性- 加入 1.8 ml 预冷的三氯乙酸-2ME-丙酮溶液，混合后置于 -20℃ 冰箱中沉淀 1 小时。
- 三氯乙酸和丙酮可以使蛋白质变性并沉淀，同时阻止多酚氧化酶和其他氧化酶类失活。
3. 离心分离- 将混合液在4℃、48000 rpm 下离心 1 小时，弃去上清液。
- 加入等体积的冰浴丙酮（含 0.07% 的巯基乙醇），摇匀后再次离心 1 小时。
- 弃去上清液，将沉淀用真空干燥箱干燥，备用。
4. 蛋白质溶解- 将干燥的沉淀加入适量的 R2D2 蛋白质溶解缓冲液，室温下放置 30 分钟，使蛋白充分溶于缓冲液中。
- 再次离心 1 小时，弃去上清液。
5. 蛋白质含量测定- 采用 Brandford 法测定蛋白质含量。
五、实验结果与分析1. 通过三氯乙酸-丙酮法提取植物全蛋白，实验成功得到了较高纯度的蛋白质。
2. 蛋白质含量测定结果显示，提取的蛋白质含量符合预期。
六、实验讨论1. 三氯乙酸-丙酮法是一种高效、简便的植物全蛋白提取方法，适用于多种植物组织。
2. 在实验过程中，需要注意以下几点：- 严格控制实验条件，如温度、pH 值等。
植物蛋白提取实验的意义
植物蛋白提取实验的意义
植物蛋白提取实验的意义
植物蛋白提取实验是一种使用植物组织的方法，用于从植物细胞中提取植物蛋白质。
它是植物蛋白质组学方法的重要组成部分，可以用于提取多种植物的蛋白质。
蛋白质提取实验不仅可以识别植物蛋白质的种类，而且还可以分析植物蛋白质的性质。
这在了解植物蛋白质生理活性和其他生物学功能方面具有重要意义。
植物蛋白提取实验具有多种功能。
例如，它可以用于发现新的植物蛋白质，以及研究其在植物体内的功能。
它还可以用于研究植物蛋白质的结构、生物化学属性和功能。
另外，它还可以用于测定植物蛋白质的表达水平，从而了解植物代谢的情况。
植物蛋白提取实验还可以用于开发新型植物蛋白质分离技术，以及研究植物的发育过程和环境因子的影响。
总之，植物蛋白提取实验具有重要的研究价值，可以为植物蛋白质的结构、功能和表达水平提供有益的信息，有助于研究和发展植物细胞和植物基因组学。
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植物质膜蛋白提取方法(2D电泳用)
蛋白用于二维电泳。如需要用于报告基因检测、SDS-PAGE 电泳检测、Western blotting、凝胶阻滞实
验、免疫共沉淀、酶活分析等下游实验的试剂盒，请联系贝博，选用其它产品号的产品。
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剂C稀释后，进行下游实验。
注：
① 建议用 BCA 法或 Lowry 法进行蛋白定量。
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2、 如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
储存条件： 蛋白酶抑制剂-20℃保存； 其它组分 2-8℃保存。
有效期： 一年。
注意事项： ● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管 底，避免开盖时试剂损失。 ● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。 ● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清 洗并彻底清除残留清洁剂。 ● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
植物质膜蛋白提取试剂盒（2D 电泳用）源自产品组成：产品组成
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邮箱：bestbio@ 电话：021-33921235
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
产品说明书
使用安全： 使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如 果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。
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植物核蛋白提取试剂盒
（蛋白质组学实验适用）
货号：BB-319906
V1.7.0
试剂盒储存条件： 2-8℃保存。
开盖后组份按要求条件保存。
试剂盒组成：
产品组成
BB-319906-1
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组份编号
规格
50 assays
100 assays
试剂 A：植物核蛋白提取液 A
100ml
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本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
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本试剂盒采用非酶法提取，提取过程简单方便，速度快，可在 1 小时内完成，而且绝少 交叉污染，但是蛋白回收率相比酶法较低。酶法提取制备的蛋白，回收率稍有提高，蛋白纯 度高，保持天然活性，但是耗时较长。如果需要更加快捷的提取试剂盒，可以选择非酶法的 提取试剂盒，对提取速度没有要求的话，可以选择酶法提取试剂盒（相关产品 BB-319910）。 请根据实际需要选择试剂盒。
产品号 BB-3101 BB-3102 BB-3104 BB-3411 BB-3501 BB-3121 BB-3122 BB-3123 BB-3125 BB-3126 BB-3105 BB-3702 BB-3181 BB-3183 BB-3187
产品 磷酸化蛋白富集试剂盒 膜蛋白提取试剂盒 活性蛋白提取试剂盒 BCA 蛋白定量试剂盒 植物核蛋白提取试剂盒 细菌膜蛋白提取试剂盒 植物总蛋白提取试剂盒 植物膜蛋白提取试剂盒 蛋白酶抑制剂混合物 真菌蛋白提取试剂盒 磷酸酶抑制剂混合物 SDS-PAGE 上样 Buffer 细菌蛋白提取盒（2D 电泳用） 酵母蛋白提取盒（2D 电泳用） 线粒体蛋白提取盒（2D 电泳用）
试剂盒以外自备仪器和试剂耗材： 仪器 离心机 振荡器 Dounce匀浆器 涡旋混匀器 移液器 冰箱 冰盒
耗材 离心管 吸头
试剂 PBS
（pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：约 含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）
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产品 总蛋白提取试剂盒 核蛋白提取试剂盒 膜/胞浆/核蛋白分步提取试剂盒 Bradford 蛋白定量试剂盒 ECL 化学发光检测试剂盒 细胞蛋白提取试剂盒 组织蛋白提取试剂盒 细菌蛋白提取试剂盒 酵母蛋白提取试剂盒 昆虫蛋白提取试剂盒 磷酸化蛋白提取试剂盒 SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒 总蛋白提取试剂盒（2D 电泳用） 植物蛋白提取盒（2D 电泳用） 细菌膜蛋白提取盒（2D 电泳用）
3. 将匀浆用 100um 细胞筛过滤。
【注】： 没有细胞筛时可以不过滤，将匀浆液静置 1 分钟，待大的没有破碎的组织块自然沉降，吸 取上清。 部分黏液较多的植物样本可能难以吸取，可以将 1ml 吸头的口剪掉一点再吸。
4. 将滤液在 1000g 条件下离心 10 分钟，弃上清，收集沉淀。 5. 在沉淀中加入 200-300ul 提取液 B，充分混匀。 6. 置振荡器振荡 30 分钟。
本试剂盒的蛋白提取组份中不含有不可透析除去的去垢剂组份，不含 SDS、Triton X-100、chaps 等可能影响质谱实验的组份，最后得到的蛋白质样品经过透析或者脱盐处理 后将不含有去垢剂、高浓度盐等影响，基本可以满足下游任意的蛋白质组学相关实验研究。
本产品的蛋白酶抑制剂混合物中不含 AEBSF，可以避免由于 AEBSF 导致的质谱峰漂移， 因此使用本产品提取的蛋白样品可以用于质谱(Mass Spectrometry, MS)检测和分析，蛋白 质组学(proteomics)等相关研究。
产品简介： 贝博 TM BBproExtraTM 植物核蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种植物细胞和各
种实体植物组织，如叶片、根、种子等植物组织中提取核蛋白。提取过程简单方便，可在 1 小时内完成。制备的核蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。
本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解植物核组份。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合 物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。
避免开盖时试剂损失。 3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。 4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。 5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并
彻底清除残留清洁剂。 6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
1. 提取液制备： 将试剂 B1 和试剂 B2 混合，配成蛋白提取液 B，充分混匀备用。 每 500ul 提取液 B 中加入 2ul 蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
【注】： 蛋白提取液 B 置 4℃保存，长期不用的可以分装后-20℃保存。 根据需要处理的样品数量准备蛋白提取液，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取 液。 加过蛋白酶抑制剂的提取液一周内未使用完，再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制剂。
200ml
319906A
试剂 B1：植物核蛋白提取液 B1
22.5 ml
45 ml
319906B1
试剂 B2：植物核蛋白提取液 B2
2.5 ml
5 ml
319906B2
试剂 C：蛋白酶抑制剂混合物
100ul
200ul
319906C
使用说明书
1
1
各组份储存条件：
蛋白提取液 A、B1：2-8℃保存；
提取液 B2、蛋白酶抑制剂：-20℃保存。
【注】： 建议用 BCA 法进行蛋白定量。相关产品：BB-3401。 蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。
10. 将蛋白样品透析处理或者脱盐柱脱盐处理后用于下游实验。
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邮箱：bestbio@ 电话：021-33921235
【注】： 用振荡器/摇床的较低转速，保持液体有轻微晃动即可。 没有低温振荡条件可以不振荡，在 2-8℃静置，稍微延长处理时间，中间每隔几分钟用移 液器吹打混匀。
7. 在 4℃，12000g 条件下离心 5 分钟。 8. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。 9. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或用于下游实验。
质量控制： 贝博 TM 对每批产品进行严格测试以确保产品质量一致。
技术支持： 产品技术问题可发邮件至 bestbio@ 咨询。 如果您有任何关于产品性能或者新应用和技术的建议，欢迎您随时联系我们。
知识产权： 贝博 TM BBproExtraTM 系列试剂盒及其使用方法包含专有技术。
注意事项： 1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。 2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，
产品号 BB-3108 BB-3103 BB-3106 BB-3401 BB-3154 BB-3151 BB-3124 BB-3152 BB-3301 BB-3127 BB-3311 BB-3703 BB-3182 BB-3185 BB-3191
提取液 A 长期不用请置-20℃保存。
【注】：
蛋白提取液 B2、蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以 2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。 避免反复冻融。
有效期： 一年。
※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制： 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新： 贝博 TM 会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应 的版本更新。使用产品时，请参照试剂盒中随产品附带的印刷版说明书，不能 参照网上下载的说明书，可能是不同的版本。 需要最新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。 本试剂盒中不含有 EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。 本试剂盒提取的蛋白也可用于 Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转 录活性分析、Gel shift 凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。
2. 取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的 200-500mg 植物组织样本用手术剪刀尽可能剪 碎，加入 1ml 提取液 A 后用匀浆机充分匀浆或者用 Dounce 匀浆器充分匀浆。
【注】： 匀浆尽可能充分。至无明显可见固体。 培养细胞直接收集细胞后用 Dounce 匀浆器匀浆即可，匀浆后加提取液 A 混匀后直接进 行以下步骤离心。 处理叶片等组织样本如果没有匀浆机，也可先加少量提取液 A 后用 Dounce 匀浆器充分匀 浆后再加提取液 A 混匀。
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
【注】： 经透析或脱盐离心柱处理的蛋白样品不含有去垢剂盒高浓度盐。
产品说明书
常见问题分析： 蛋白浓度低？ 植物核蛋白丰度比较低，在条件允许的情况下，尽可能增加样本量。 处理部分样本时可能没有裂解完全，导致蛋白浓度低。只要适当增加试剂 A 的匀 浆次数，并适当延长试剂 A 和 B 的处理时间即可。最好在持续振荡的条件下处理， 没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。 用什么方法定量蛋白？ 建议用 BCA 法，或者 Bradford 法。 提取时出现胶状沉淀？ 蛋白提取液处理产物中有时会出现少量透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为 含有基因组 DNA 等的复合物。不检测和基因组 DNA 结合特别紧密的特定蛋白的 情况下，可以直接离心取上清进行后续实验即可；如果需要检测和基因组结合特别 紧密的蛋白，则可以通过超声处理，300w/10 秒间隔 10 秒，超声 3 分钟，随后离 心取上清用于后续实验。检测一些常见的转录因子，例如 NF-kappaB、p53 等时， 不必进行超声处理。 提取的蛋白具有活性吗？ 本试剂盒不含有离子型去垢剂组份，不破坏蛋白的结构，没有对蛋白质之间原有的 相互作用的破坏，蛋白均保持其天然构象和活性。