凯基核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒
核蛋白提取试剂盒说明书
核蛋白提取试剂盒说明书货号：R0050规格：50T/100T 产品内容：保存：核/浆蛋白抽提试剂2-8℃保存，PMSF 于-20℃保存。
产品简介：本试剂盒提供了一种简单、方便的从培养细胞或新鲜组织中抽提核蛋白的方法。
整个过程只需约60分钟就可以将核蛋白和浆蛋白从细胞中分离出来。
得到的蛋白可以用于Western blot 等实验。
本试剂盒通过浆蛋白抽提试剂使细胞膨胀破裂，释放出胞浆蛋白，再通过离心得到细胞核。
然后通过核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。
本试剂盒可以抽提50/100个样品（每个样品约2×106个Hela 细胞或40mg 组织）。
操作方法（仅供参考）：*裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
一、对于体外培养细胞：1．根据用量取适当的浆蛋白抽提试剂和核蛋白抽提试剂加入PMSF ，使PMSF 的最终浓度为1mM 。
PMSF 需现用现加，若目标蛋白含有丰富的半胱氨酸，可以在两种蛋白抽提液中加入DTT 至终浓度0.5mM 。
2．对于贴壁细胞，去除培养液，用PBS 洗一遍，用细胞刮刀收集细胞，或用EDTA 消化后吹打下细胞（最好不用胰酶硝化，以免胰酶消化目的蛋白）。
500g 离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清留下沉淀备用。
3．对于悬浮细胞：用PBS 洗一遍，500g 离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清，留下细胞沉淀备用。
4．每20μL 细胞沉淀加入200μL 浆蛋白抽提试剂（2×106个细胞沉淀的体积约20μL 或40mg ）。
5．用移液器吹打或高速涡旋15秒（可适当延长），必须使细胞沉淀完全分散开成单细胞悬液。
细胞沉淀分散不完全会导致蛋白产量降低。
6．冰浴10分钟。
7．最高转速剧烈涡旋10秒，4℃12000～16000g 离心10分钟。
8．上清即为抽提得到的细胞浆蛋白，立即吸取上清至预冷的样品管中备用，进行后续的PAGE 、Western 等实验，但蛋白浓度较低，可根据需要进行相应浓缩。
碧云天 P0028细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒
使用本试剂盒抽提到的细胞核蛋白与细胞浆蛋白均可直接用碧云天生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒(P0009/P0010/P0010S/ P0011/P0012/P0012S)测定蛋白浓度。但不适合用Bradford法测定蛋白浓度。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
4. Yuan Q, Li PD, Li BH, Yang XZ, Xu SB, Liu XH, Zhou FX, Zhang WJ. Differential IL-4/Stat6 activities correlate with differential expression of regulatory genes SOCS-1, SHP-1, and PP2A in colon cancer cells. J Cancer Res Clin Oncol. 2008 Jun 7.
6. Chen G, Shen X, Yao J, Chen F, Lin X, Qiao Y, You T, Lin F, Fang X, Zou X, Lin L. Ablation of NF-kappaB expression by small interference RNA prevents the dysfunction of human umbilical vein endothelial cells induced by high glucose. Endocrine. 2009 Feb;35(1):63-74. Epub 2008 Nov 8.
3. 对于悬浮细胞：用PBS洗一遍，离心收集细胞，尽最大努力吸尽上清，留下细胞沉淀备用。 4. 每20微升细胞沉淀加入200微升添加了PMSF的细胞浆蛋白抽提试剂A。(对于二百万Hela细胞，其细胞沉淀的体积大约为
凯基TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒
凯基TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒凯基TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒(通用)（BIOTIN标记POD法,适用于细胞、组织样本）使用说明书一、TUNEL制品说明凯基TUNEL细胞凋亡检测试剂盒是用来检测细胞在凋亡过程中细胞核DNA 的断裂情况，其原理是生物素（biotin）标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT Enzyme）的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂的DNA的3‘－OH末端，并可与连接了的辣根过氧化酶的链霉亲和素（Streptavidin-HRP）特异结合，在辣根过氧化酶底物二氨基联苯胺（DAB）的存在下，产生很强的颜色反应（呈深棕色），特异准确地定位正在凋亡的细胞，因而在普通显微镜下即可观察和计数凋亡细胞；由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3'-OH形成，很少能够被染色。
本试剂盒适用于组织样本（石蜡包埋、冰冻和超薄切片）和细胞样本（细胞涂片）的凋亡原位检测。
本试剂盒特点●操作简便：使用Ready-to-Use型试剂，并配有Proteinase K 和DAB。
●高灵敏度：可以单一检出初期的凋亡细胞。
●高特异性：能特异性染色凋亡细胞。
●快速操作：整体操作约需3小时。
●用途广泛：可应用于组织切片、细胞样本等。
●方便观察：使用光学显微镜观察实验结果。
●高正确性：有阳性对照片的制备方法，可以确认试剂盒的有效性使用注意事项1．使用前请认真阅读本说明书，提前准备好相关试剂。
2．因本试剂盒中组分均为微量，使用前请离心集液。
3．为避免试验误差、降低试剂的损耗，建议使用精密度高的进口微量移液枪及枪头。
4． TdT 酶反应液最好在使用前根椐样本数量集中配制，再分别滴加于各样本片上，避免每个样本单独配制而产生的试剂损耗。
5. 为防止样本脱落，请使用硅烷（Silane）处理的载玻片或采用多聚赖氨酸铺片。
6. 固定好的样本可以在-20℃的70%乙醇中放置30分钟或至过夜，以改善细胞的渗透性。
胞浆蛋白—核蛋白抽提试剂盒说明书
胞浆蛋白—核蛋白抽提试剂盒产品编号产品名称包装SINP001 胞浆－核蛋白抽提试剂盒50×产品简介：细胞核和细胞浆目前成为研究细胞组分的两个热点，获得高浓度的细胞核蛋白和细胞浆蛋白成为得到好的研究结果的重要实验过程。
本试剂盒主要原理是在低渗透压条件下，使细胞充分膨胀，然后破坏细胞膜，释放出细胞浆蛋白，离心得到细胞核沉淀。
最后通过高盐的细胞核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。
本试剂盒是本公司非放射性EMSA试剂盒（cat; SIDET001, SIDET003, SIDET004,）实验成功的重要部分，经BCA测定24cm2贴壁细胞(或50ml规格培养瓶养的悬浮细胞)抽提物，核蛋白浓度约为 2.5ug/ul或更高。
抽提得到的蛋白可以用于Western，EMSA，footprinting，报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。
本试剂盒可足够您进行50次抽提操作！包装清单：试剂包装总量5X Buffer A 1瓶35ml/瓶2X Buffer B1支 1.5ml/支Solution I（溶液I）1支 1.75ml/支Solution II（溶液II）1支 1.75ml/支Solution III（溶液III）1支 1.5ml/支PMSF Solution 1支0.85ml/支User Manual (说明书)1份1份/Kit保存温度： 4℃保存。
Ⅰ.准备抽提试剂：按照下列方法制备胞浆－核蛋白抽提液：1.制备3ml胞浆蛋白裂解液I ：试剂体积5X Buffer A0.6mlSolution I（溶液I）30ulSolution II（溶液II）30ulPMSF Solution 15uldd-H2O 2.325ml总体积 3.0ml注：PMSF Solution须在抽提试剂加入到样品中前2-3分钟内加入。
2.制备1.02ml胞浆蛋白裂解液II：试剂体积Solution III（溶液III）20ul胞浆蛋白裂解液I 1.0ml总体积 1.02ml3.制备1ml核裂解液：试剂体积2X Buffer B25ulSolution I（溶液I）0.5ulSolution II（溶液II）0.5ulPMSF Solution0.25uldd-H2O23.75ul总体积 50ul注：PMSF Solution须在抽提试剂加入到样品中前2-3分钟内加入。
细胞周期即时检测试剂盒
凯基细胞DNA含量（细胞周期）即时检测试剂盒(Cell Cycle Detection Kit)Cat number：KGA For Research Use OnlyStore at4℃for one yearExpire date：一、试剂盒说明细胞周期（cell cycle）是指连续分裂细胞从一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂结束所经历的整个过程，分为间期（interphase）和有丝分裂期(M phase)，细胞间期又常划分为休眠期（G0）,DNA合成前期（G1），DNA合成期（S），DNA合成后期（G2），整个周期可表示为G1→S→G2→M。
DNA周期检测可用来反应细胞周期的各个期的状况，即细胞增殖状况。
利用细胞内DNA能够和荧光染料（如碘化丙啶--PI）结合的特性，细胞各个时期其DNA含量不同从而结合的荧光染料不同，流式细胞仪检测的荧光强度也不一样。
细胞发生凋亡时，由于胞浆和染色质浓缩、核裂解，产生凋亡小体，使细胞的光散射性质发生变化。
在细胞凋亡的早期，细胞对前向角光散射的能力显著降低，对900角光散射的能力增加或没有变化。
在细胞凋亡的晚期，前向角和900角光散射的信号均降低。
因此可通过流式细胞仪测定细胞光散射的变化观察凋亡细胞。
用 PI对细胞进行染色，凋亡细胞由于总DNA量降低，于正常G0/G1细胞群前出现一DNA低染细胞群，即G1峰前出现亚二倍体峰（sub-G1），细胞凋亡群。
本剂盒利用各个组份的作用可溶解细胞膜的脂类物质，去除细胞碎片和核蛋白，消化细胞内RNA，稳定核染色质，得到较纯的细胞核。
不需传统固定，半小时即可上机检测。
本试剂盒可应用于培养细胞（悬浮、贴壁）的DNA含量（细胞周期）检测。
二、试剂盒组份组份KGA513（20 assays）KGA514（50 assays）储存条件Solution Buffer 25.0mL 50.0 mL 4℃Solution A 5.0mL 12.5 mL 4℃Solution B 4.0mL 10.0mL 4℃Solution C 4.0mL 10.0mL 4℃避光三、试剂盒以外自备仪器和试剂流式细胞仪、低速离心机、微量移液器、1.5m L Microtube、70％乙醇、PBS四、使用注意事项1．微量试剂取用前请离心集液。
蛋白提取试剂盒选择指南
蛋白提取试剂盒选择指南蛋白提取试剂盒选择指南样本动物细菌植物真菌酵母昆虫应用I II I II I II I II I II I II蛋白部位应用I：WB、1D电泳、活性检测、纯化；应用II：等点聚焦、2D电泳、质谱总蛋白3101 3181 3123/8 3182 3124 3183 3127 3189 3125 3185 3126 3193膜蛋白3103/16 3188 3151 3187 3152 3184 3156 3190 3157 3192 3153核蛋白3102 3154 3159 3168胞浆蛋白3113 3180磷酸化蛋白3105/8 G+菌3129 核/质3169 藻类-总3131 核/质31681 液体-总3133糖蛋白3107 G-菌3130 叶绿体3179 藻类-膜3170 土壤-总3132膜/胞浆/核分步提取3104 细菌外膜31512 叶绿体膜3175 血浆3137膜/胞浆3111 线粒体3172 血清3138核/胞浆3112 线粒体膜3173线粒体3176/7线粒体膜3158核膜3174石蜡包埋3164甲醛固定3165冻存样品31211 脑组织31227骨组织总蛋白3161 脂肪组织31226蛋白提取试剂盒选择指南相关产品：蛋白提取BB-3101 BestBio贝博生物总蛋白提取试剂盒BB-3102 BestBio贝博生物核蛋白提取试剂盒BB-3103 BestBio贝博生物膜蛋白提取试剂盒BB-3104 BestBio贝博生物膜/胞浆/核蛋白分步提取试剂盒BB-31042 BestBio贝博生物细胞膜/胞浆/核膜蛋白分步提取试剂盒BB-3105 BestBio贝博生物磷酸化蛋白提取试剂盒BB-31051 BestBio贝博生物植物磷酸化蛋白提取试剂盒BB-3106 BestBio贝博生物活性蛋白提取试剂盒BB-3108 BestBio贝博生物磷酸化蛋白富集试剂盒BB-31081 BestBio贝博生物植物磷酸化蛋白富集试剂盒BB-3109 BestBio贝博生物糖蛋白富集试剂盒BB-3111 BestBio贝博生物膜蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒BB-3112 BestBio贝博生物核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒BB-3113 BestBio贝博生物胞浆蛋白提取试剂盒BB-3114 BestBio贝博生物细胞跨膜蛋白提取试剂盒BB-3115 BestBio贝博生物细胞核蛋白提取试剂盒BB-31152 BestBio贝博生物组织核蛋白提取试剂盒BB-3116 BestBio贝博生物细胞膜蛋白提取试剂盒BB-31161 BestBio贝博生物细胞质膜蛋白提取试剂盒BB-3117 BestBio贝博生物组蛋白提取试剂盒BB-31171 BestBio贝博生物植物组蛋白提取试剂盒BB-31172 BestBio贝博生物昆虫组蛋白提取试剂盒BB-31173 BestBio贝博生物酵母组蛋白提取试剂盒BB-3118 BestBio贝博生物胞浆蛋白/核蛋白/组蛋白提取试剂盒BB-3121 BestBio贝博生物细胞蛋白提取试剂盒BB-31211 BestBio贝博生物冻存细胞蛋白提取试剂盒BB-3122 BestBio贝博生物组织蛋白提取试剂盒BB-31226 BestBio贝博生物脂肪组织蛋白提取试剂盒BB-31227 BestBio贝博生物脑组织蛋白提取试剂盒BB-3123 BestBio贝博生物细菌蛋白提取试剂盒BB-3124 BestBio贝博生物植物蛋白提取试剂盒BB-31241 BestBio贝博生物植物根茎蛋白提取试剂盒BB-3125 BestBio贝博生物酵母蛋白提取试剂盒BB-3126 BestBio贝博生物昆虫蛋白提取试剂盒BB-31262 BestBio贝博生物昆虫胞浆蛋白提取试剂盒BB-3127 BestBio贝博生物真菌蛋白提取试剂盒BB-31272 BestBio贝博生物真菌蛋白提取试剂盒BB-3128 BestBio贝博生物大肠杆菌蛋白提取试剂盒BB-3129 BestBio贝博生物革兰氏阳性菌蛋白提取试剂盒BB-3130 BestBio贝博生物革兰氏阴性菌蛋白提取试剂盒BB-3131 BestBio贝博生物藻类蛋白提取试剂盒BB-3132 BestBio贝博生物土壤蛋白提取试剂盒BB-3133 BestBio贝博生物液体样本蛋白提取试剂盒BB-31332 BestBio贝博生物乳清蛋白提取试剂盒BB-3134 BestBio贝博生物白细胞蛋白提取试剂盒BB-3135 BestBio贝博生物血液单核细胞蛋白提取试剂盒蛋白提取试剂盒选择指南BB-3136 BestBio贝博生物丝状真菌蛋白提取试剂盒BB-3137 BestBio贝博生物血浆蛋白提取试剂盒BB-3138 BestBio贝博生物血清蛋白提取试剂盒BB-3139 BestBio贝博生物血细胞蛋白提取试剂盒BB-3140 BestBio贝博生物全血蛋白提取试剂盒BB-31401 BestBio贝博生物血小板蛋白提取试剂盒BB-31452 BestBio贝博生物溶酶体蛋白提取试剂盒BB-31453 BestBio贝博生物高尔基体蛋白提取试剂盒BB-31454 BestBio贝博生物内质网蛋白提取试剂盒BB-3141 BestBio贝博生物厚壁微生物蛋白提取试剂盒BB-3151 BestBio贝博生物细菌膜蛋白提取试剂盒BB-31511 BestBio贝博生物细菌跨膜蛋白提取试剂盒BB-31512 BestBio贝博生物细菌外膜蛋白提取试剂盒BB-31515 BestBio贝博生物支原体膜蛋白提取试剂盒BB-3152 BestBio贝博生物植物膜蛋白提取试剂盒BB-31521 BestBio贝博生物植物跨膜蛋白提取试剂盒BB-3153 BestBio贝博生物昆虫膜蛋白提取试剂盒BB-31531 BestBio贝博生物昆虫跨膜蛋白提取试剂盒BB-3154 BestBio贝博生物植物核蛋白提取试剂盒BB-3155 BestBio贝博生物植物质膜蛋白提取试剂盒BB-3156 BestBio贝博生物真菌膜蛋白提取试剂盒BB-3157 BestBio贝博生物酵母膜蛋白提取试剂盒BB-31572 BestBio贝博生物酵母膜蛋白/细胞质蛋白提取试剂盒BB-3158 BestBio贝博生物线粒体膜蛋白提取试剂盒BB-3159 BestBio贝博生物真菌核蛋白提取试剂盒BB-3160 BestBio贝博生物大肠杆菌膜蛋白提取试剂盒BB-3161 BestBio贝博生物骨组织蛋白提取试剂盒BB-3162 BestBio贝博生物高脂肪样本蛋白提取试剂盒BB-3163 BestBio贝博生物神经元蛋白提取试剂盒BB-3164 BestBio贝博生物石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒BB-3165 BestBio贝博生物甲醛固定组织蛋白提取试剂盒BB-31651 BestBio贝博生物固定细胞蛋白提取试剂盒BB-3166 BestBio贝博生物冻存样本核蛋白提取试剂盒BB-3167 BestBio贝博生物植物核蛋白/细胞器蛋白提取试剂盒BB-3168 BestBio贝博生物酵母核蛋白提取试剂盒BB-31681 BestBio贝博生物酵母核蛋白/胞质蛋白提取试剂盒BB-3169 BestBio贝博生物植物核蛋白/胞质蛋白提取试剂盒BB-3170 BestBio贝博生物藻类膜蛋白提取试剂盒BB-3171 BestBio贝博生物线粒体蛋白提取试剂盒BB-31711 BestBio贝博生物组织线粒体蛋白提取试剂盒BB-3172 BestBio贝博生物植物线粒体蛋白提取试剂盒BB-31721 BestBio贝博生物丝状真菌线粒体蛋白提取试剂盒BB-3173 BestBio贝博生物植物线粒体膜蛋白提取试剂盒BB-3174 BestBio贝博生物细胞核膜蛋白提取试剂盒BB-3175 BestBio贝博生物植物叶绿体膜蛋白提取试剂盒BB-3176 BestBio贝博生物线粒体/胞浆蛋白提取试剂盒BB-3177 BestBio贝博生物组织线粒体/胞浆蛋白提取试剂盒BB-3178 BestBio贝博生物线粒体膜/胞浆蛋白提取试剂盒BB-3179 BestBio贝博生物叶绿体蛋白提取试剂盒BB-31791 BestBio贝博生物植物膜蛋白/叶绿体蛋白提取试剂盒BB-3180 BestBio贝博生物植物胞质蛋白提取试剂盒BB-3181 BestBio贝博生物总蛋白提取试剂盒（2D电泳用）蛋白提取试剂盒选择指南BB-31812 BestBio贝博生物胞浆蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-31813 BestBio贝博生物植物总蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3182 BestBio贝博生物细菌总蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3183 BestBio贝博生物植物总蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-31836 BestBio贝博生物叶绿体蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3184 BestBio贝博生物植物质膜蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-31841 BestBio贝博生物植物膜蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3185 BestBio贝博生物酵母蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3186 BestBio贝博生物藻类蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3187 BestBio贝博生物细菌膜蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3188 BestBio贝博生物膜蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3189 BestBio贝博生物真菌蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3190 BestBio贝博生物真菌膜蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3191 BestBio贝博生物线粒体蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3192 BestBio贝博生物酵母膜蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3193 BestBio贝博生物昆虫总蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-3194 BestBio贝博生物丝状真菌蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-31951 BestBio贝博生物血浆蛋白提取试剂盒（2D电泳用）BB-31961 BestBio贝博生物细胞蛋白快速提取试剂盒（离心柱法）BB-31962 BestBio贝博生物组织蛋白快速提取试剂盒（离心柱法）BB-31963 BestBio贝博生物植物蛋白快速提取试剂盒（离心柱法）BB-31964 BestBio贝博生物细菌蛋白快速提取试剂盒（离心柱法）BB-31965 BestBio贝博生物昆虫蛋白快速提取试剂盒（离心柱法）BB-31966 BestBio贝博生物酵母蛋白快速提取试剂盒（离心柱法）BB-31967 BestBio贝博生物血液蛋白快速提取试剂盒（离心柱法）BB-31968 BestBio贝博生物真菌蛋白快速提取试剂盒（离心柱法）BB-31981 BestBio贝博生物细胞蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）BB-31982 BestBio贝博生物组织蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）BB-31983 BestBio贝博生物植物蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）BB-31984 BestBio贝博生物细菌蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）BB-31985 BestBio贝博生物昆虫蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）BB-31986 BestBio贝博生物酵母蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）BB-31987 BestBio贝博生物血液蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）BB-31988 BestBio贝博生物真菌蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）。
蛋白提取制备相关产品_百替生物
蛋白提取制备相关产品蛋白抽提试剂盒-I (实体组织和细胞蛋白抽提, 100 extractions)S1250 100 次提取 700 元概述：实体组织如大脑富含磷脂、神经纤维或血管壁含大量结缔组织、而脂肪则有大量油脂，常规方法难以有效从这些组织提取蛋白。
蛋白抽提试剂盒-I用于从各种实体软组织或细胞快速提取总蛋白。
用裂解-结合缓冲液匀浆裂解实体组织，或用裂解结合缓冲液振荡重悬培养细胞，然后加入抽提试剂去除非蛋白成分，离心分离即可得到总蛋白；简便高效，30-60分钟内完成提取。
试剂盒可进行100次提取，可在1.5ml离心管微量提取也可大规模制备。
每次可提取1～100 mg实体组织或1 x 107细胞。
一次从10-100mg实体组织提取的总蛋白的量通常足以进行数十次Western Blot或免疫沉淀。
适用：(1) 各种实体软组织。
如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等。
(2) 各种原代和传代细胞。
组成：(1) 裂解-结合缓冲液100 ml；(2) 抽提试剂100 ml。
每毫升裂解缓冲液和抽提试剂可提取100 mg组织或1 x 107细胞。
储存：室温2年。
蛋白抽提试剂盒-II (液体样品蛋白抽提和回收，100 extraction)S1255 100 次提取 480 元200 次提取 780 元概述：蛋白抽提试剂盒-II 用于液体样品中蛋白浓缩、提取、或脱盐、脱去垢剂、脱还原剂等。
适用于各种液体样品(10 µl～1000 ml)，如蛋白溶液、胞浆胞核蛋白提取液、细胞或微生物培养基上清液、血液、尿液、脑脊液等各种体液。
蛋白回收率95%，远高于经典的丙酮或三氯醋酸沉淀法，且可有效去除样品中的脂质，不影响后续SDS-PAGE和Western Blot实验。
可用1.5ml离心管微量提取也可大规模制备，15分钟完成提取，简便高效。
该试剂盒也适于从细胞悬液提取总蛋白。
Thermo-Scientific-NE-PER核蛋白-胞浆蛋白抽提试剂盒
Thermo-Scientific-NE-PER核蛋白-胞浆蛋白抽提试剂盒描述Thermo Scientific NE-PER核蛋白-胞浆蛋白抽提试剂盒提供了高效的细胞裂解和抽提方法，可在两个小时之内完成胞浆蛋白与核蛋白的分离操作。
NE-PER核蛋白-胞浆蛋白抽提试剂盒的特性：• 快速—在两个小时之内获得胞核与胞浆内的可溶性蛋白组分• 可靠—NE-PER试剂盒已经被950篇以上的发表文献引用• 通用–适用于培养细胞或组织（仅适用于新鲜样本）的核蛋白抽提• 可扩展—两种规格试剂盒，满足从细胞和组织中抽提样本的应用需求• 方便—操作简单，无需超速梯度离心• 兼容性好—获得样本适合于多种下游应用，包括免疫印迹、凝胶迁移分析、蛋白分析、报告基因分析以及酶活性分析NE-PER试剂盒为用户提供了高效的核蛋白抽提方法，用户只需拥有台式微量离心机、离心管和移液器，进行简单的分步式细胞裂解及核蛋白与胞浆蛋白离心分离即可。
NE-PER试剂盒能够高效地将胞浆蛋白与核蛋白溶解和分离为不同组分，交叉污染以及基因组DNA/mRNA 的干扰均降到了最低。
一旦经过脱盐或稀释，分离后的蛋白即可用于免疫分析和蛋白相互作用实验，如迁移率分析(EMSA)、免疫共沉淀(Co-IP)和拉下实验。
分离胞核和制备核蛋白抽提物的方法很多，但大多数制备核蛋白抽提物的制备方法都很耗时，并需要机械匀浆、冻融循环、反复离心或透析，而这些都可能影响核蛋白的完整性。
NE-PER 核蛋白-胞浆蛋白抽提试剂盒使用了基于试剂的分离方案，能够分步裂解细胞并从胞浆中分离出完整的细胞核，然后再从基因组DNA与mRNA中抽提核蛋白。
这一温和的过程可在两小时之内完成，且使用培养细胞时仅需标准的桌台式离心机即可。
此外，用户还可以从细胞培养物或组织样本中分离得到具有活性的核蛋白与胞浆蛋白。
本试剂盒能够从两百万个细胞中提出200至500µg胞浆蛋白和100至200µg的核蛋白（浓度为1mg/mL）。
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凯基核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒
Cat Number：For Research Use Only
Store at -20℃for one year
Expire date：
一、试剂盒说明
本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取核蛋白和/或胞浆蛋白，提
取制备过程简便。
制备的核蛋白和胞浆蛋白能保持天然活性，并且纯度较高。
提
取的蛋白可用于进一步的转录因子活性分析、凝胶阻滞实验(gel shift assay)、
免疫共沉淀、Western Blotting、酶活性测定等后续蛋白质研究。
二、试剂盒组份
组份KGP150 （50 test）KGP1100 （100
储存温度
test）
Buffer A 25 mL 25 mL ×24℃
Buffer B 1.5 mL 3．0 mL 4℃
Buffer C 12.5 mL 25 mL 4℃
DTT 50μL100μL-20℃蛋白酶抑制剂250μL500μL-20℃
PMSF（100mM）400μL800μL-20℃三、操作步骤
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1、组织样本，将组织剪切成小块，加入适量的冰冷PBS均浆后，静置5 min ，
弃沉淀，小心吸取上清转移至另一离心管中；
2、上清4℃离心500×g，3 min，弃上清，估计细胞压积PCV（离心后的
紧实细胞体积）；
3、每20μL细胞压积中，加入200μL预冷的Buffer A【使用前每mL Buffer
A加入1μL DTT，5μL 100mM PMSF，5μL蛋白酶抑制剂】，最大转速涡
旋剧烈振荡15s，放置冰上10～15min；
4、加入11μL冷Buffer B，最大转速涡旋剧烈振荡5s，放置冰上1min；
5、再次最大转速涡旋剧烈振荡5s后，4℃离心，16000×g,5min；
6、尽快将上清转入另一预冷的洁净微量离心管，置于冰上，即得胞浆蛋白；
7、在离心沉淀物（细胞核）中加入100μL预冷的Buffer C (使用前每mL
Buffer C加入1μL DTT，5μL 100mM PMSF，5μL蛋白酶抑制剂)，最大
转速涡旋剧烈振荡15s，放置冰上40min，每间隔10 min涡旋剧烈振荡
15 seconds；
8、4℃离心，16000×g,,10min，尽快将上清转入一预冷的洁净微量离心管，
即得核蛋白；
9、上述提取的胞浆蛋白和核蛋白进行蛋白定量（Braford法或BCA法），
分装并保存于-80℃，避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1、取培养细胞5×106～1×107个/mL，4℃离心，500×g,3 min收集细胞，
弃去培养液，用预冷的PBS洗涤两遍；
2、用移液枪尽可能取去上清，勿留残液，估计细胞压积PCV（离心后的紧
实细胞体积）；
3、每20μL细胞压积中，加入200μL预冷的Buffer A【使用前每mL Buffer
A加入1μL DTT，5μL 100mM PMSF，5μL蛋白酶抑制剂】，最大转速涡旋剧烈振荡15s，放置冰上10～15min；
4、加入11μL冷Buffer B，最大转速涡旋剧烈振荡5s，放置冰上1min；
5、再次最大转速涡旋剧烈振荡5s后，4℃离心，16000×g,5min；
6、尽快将上清转入另一预冷的洁净微量离心管，置于冰上，即得胞浆蛋白；
7、在离心沉淀物（细胞核）中加入100μL预冷的Buffer C (使用前每mL
Buffer C加入1μL DTT，5μL 100mM PMSF，5μL蛋白酶抑制剂)，最大转速涡旋剧烈振荡15s，放置冰上40min，每间隔10 min涡旋剧烈振荡
15 seconds；
8、4℃离心，16000×g,,10min，尽快将上清转入一预冷的洁净微量离心管，
即得核蛋白；
9、上述提取的胞浆蛋白和核蛋白进行蛋白定量（Braford法或BCA法），
分装并保存于-80℃，避免反复冻融。
四、注意事项
1、所有的试剂及器具均需预冷后使用；
2、细胞的数量不应少于0.5×107个/mL；，
3、以上各缓冲液的使用量是以20μL细胞压积为例，如细胞压积不同，
4、
大量的提取蛋白或后续试验结果不理想，则需要将提取的蛋白样品进
行透析脱盐，建议使用凯基透析Buffer (Cat: KGB—P001)透析后进
行后续分析。