蛋白组分抽提试剂盒说明书
适用于质谱分析的酵母蛋白提取
酵母 酵母
BB-319716 BB-319817
酵母总蛋白提取试剂盒 （离心柱，2-D电泳用） 酵母总蛋白提取试剂盒 （无去污剂）
酵母 酵母
BB-319908
酵母蛋白提取试剂盒 （蛋白组、质谱适用）
酵母
下游应用 WB,IP,co-IP,ELISA,EMSA, purification,kinase assays,activity assays,reporter assays,amine reactive labeling,etc. WB,IP,co-IP,ELISA,EMSA, purification,kinase assays,activity assays,reporter assays,amine reactive labeling,etc. WB,IP,co-IP,ELISA,EMSA, purification,kinase assays,activity assays,reporter assays,amine reactive labeling,etc. 磷酸化蛋白质谱,2-D,IEF, WB,IP,ELISA,EMSA,purification,kinase assays,activity assays, reporter assays,amine reactive labeling,etc. 2-D,IEF, WB,purification,etc. WB,IP,ELISA,EMSA,purification,kinase assays,activity assays, reporter assays,amine reactive labeling,etc. 2-D,IEF, WB,purification,etc. 蛋白质谱,2-D,IEF, WB,IP,ELISA,EMSA,purification,kinase assays,activity assays, reporter assays,amine reactive labeling,etc. 蛋白质谱,2-D,IEF, Pull-down, co-IP, WB,IP,ELISA,EMSA,purification,kinase
BCA蛋白定量试剂盒使用说明书
产品使用说明书BCA 蛋白定量试剂盒试剂盒简介以下货号试剂盒可参照此说明书操作：建议同时参考本说明书英文原文（说明书编号TB380）。
BCA Protein Assay Kit ：500 / 2500 rxn 货号71285-3BCA 蛋白定量方法是基于双缩脲反应，即在碱性溶液中蛋白将Cu 2+ 还原成Cu 1+，而根据检测到的单价Cu 离子的浓度可以检测体系中对应蛋白的量。
Bicinchoninic acid 是一种显色剂，可以螯合被还原的铜离子，产生一种在562nm 有强吸收的紫色复合物。
Novagen 的BCA 试剂盒可以用于测定浓度在20-2,000µg/ml 范围内的蛋白的浓度，根据样品量分为标准型和微型两种形式进行测定。
试剂盒提供的组分足够用于500次标准型反应（50µl 蛋白样品加上1ml 反应试剂）或2,500次微型测定（25µl 蛋白样品加上200µl 反应试剂，可以在96孔板中进行高通量定量）。
试剂盒中提供的BSA （牛血清白蛋白，2mg/ml ）为用户制作标准浓度曲线提供了便利。
Novagen 的BCA 试剂盒准确度高，兼容性好，能与各种化学试剂和表面活性剂兼容，可以方便地配合默克Novagen 的BugBuster ®，PopCulture ®，CytoBuster™，Reportasol™和Insect PopCulture 抽提蛋白的细胞裂解试剂一起使用。
有些化学成分，例如螯合剂，强酸、强碱、还原剂等，可能会干扰BCA 法采用的还原及螯合定量过程，详细情况请看说明书后附列表。
试剂盒提供的组分500ml BCA 反应液（0.1M NaOH 缓冲的bicinchoninic acid ，碳酸钠，酒石酸钠，碳酸氢钠，pH11.25） 15ml 4% 硫酸铜3×1ml BSA 标准品（2mg/ml ）储存室温存放。
胞浆蛋白—核蛋白抽提试剂盒说明书
胞浆蛋白—核蛋白抽提试剂盒产品编号产品名称包装SINP001 胞浆－核蛋白抽提试剂盒50×产品简介：细胞核和细胞浆目前成为研究细胞组分的两个热点，获得高浓度的细胞核蛋白和细胞浆蛋白成为得到好的研究结果的重要实验过程。
本试剂盒主要原理是在低渗透压条件下，使细胞充分膨胀，然后破坏细胞膜，释放出细胞浆蛋白，离心得到细胞核沉淀。
最后通过高盐的细胞核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。
本试剂盒是本公司非放射性EMSA试剂盒（cat; SIDET001, SIDET003, SIDET004,）实验成功的重要部分，经BCA测定24cm2贴壁细胞(或50ml规格培养瓶养的悬浮细胞)抽提物，核蛋白浓度约为 2.5ug/ul或更高。
抽提得到的蛋白可以用于Western，EMSA，footprinting，报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。
本试剂盒可足够您进行50次抽提操作！包装清单：试剂包装总量5X Buffer A 1瓶35ml/瓶2X Buffer B1支 1.5ml/支Solution I（溶液I）1支 1.75ml/支Solution II（溶液II）1支 1.75ml/支Solution III（溶液III）1支 1.5ml/支PMSF Solution 1支0.85ml/支User Manual (说明书)1份1份/Kit保存温度： 4℃保存。
Ⅰ.准备抽提试剂：按照下列方法制备胞浆－核蛋白抽提液：1.制备3ml胞浆蛋白裂解液I ：试剂体积5X Buffer A0.6mlSolution I（溶液I）30ulSolution II（溶液II）30ulPMSF Solution 15uldd-H2O 2.325ml总体积 3.0ml注：PMSF Solution须在抽提试剂加入到样品中前2-3分钟内加入。
2.制备1.02ml胞浆蛋白裂解液II：试剂体积Solution III（溶液III）20ul胞浆蛋白裂解液I 1.0ml总体积 1.02ml3.制备1ml核裂解液：试剂体积2X Buffer B25ulSolution I（溶液I）0.5ulSolution II（溶液II）0.5ulPMSF Solution0.25uldd-H2O23.75ul总体积 50ul注：PMSF Solution须在抽提试剂加入到样品中前2-3分钟内加入。
动植物总蛋白微量提取试剂盒说明书
动植物总蛋白微量提取试剂盒说明书产品编号：BTN90707规格：50T产品及特点：本产品用于快速提取动植物总蛋白，用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析以及蛋白活性测定等。
本产品的其主要特点是：1.提取过程十分简便，匀浆离心即可，整个过程只需要十几分钟。
2.采用独特的温和裂解成分，蛋白保持天然活性。
3.适用于各种动植物组织材料，包括新鲜或冰冻的材料。
4.得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D电泳、Western印迹分析以及蛋白活性测定等下游实验。
5.一次可以处理100mg左右的样品，足够进行几十次SDS-PAGE mini胶电泳检测。
规格及成分：成分规格溶液A50ml5×SDS-PAGE上样液1ml说明书1份保存条件：常温运输，4℃保存，5×SDS-PAGE上样液短期4℃保存，长期可放-20℃保存，有效期一年。
使用方法：使用前，最好请在溶液A中加入自备的1M DTT溶液50μL。
一：匀浆法注意：对致密的实体组织（如肌肉），最好用Polytron式匀浆机匀浆处理。
1.称取动物或植物组织样品100mg，剪刀剪成黄豆大小，转移到10-15mL的塑料离心管中。
2.加入1ml溶液A，在冰上用Polytron式匀浆机匀浆，直到没有肉眼可见的组织块。
为了避免产热，可以分多次匀浆，其间放冰上让匀浆液冷却。
3.将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
4.4℃12,000g离心10分钟，组织残渣碎片将形成沉淀。
5.将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。
如果要测定蛋白浓度，请使用BCA方法，不要使用Bradford方法（如果要使用，也需要把样品稀释10倍后再测定，否则溶液A中的成分会影响浓度侧定）。
如果要进行SDS-PAGE电泳，可取部分到离心管中，加入5×SDS-PAGE上样缓冲液（终浓度为1×），在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。
英文特生物技术（北京）有限公司-植物质膜蛋白提取试剂盒说明书
Minute TM 植物质膜蛋白提取试剂盒目录号：SM-005-P描述：植物膜蛋白占植物细胞总蛋白的很小一部分，但是在植物生理学中起着非常重要的作用。
传统的植物膜组分分离纯化方法是蔗糖密度梯度离心法和双液相法。
这些方法虽然比较有效，但是需要超高速离心和大量的起始原材料，操作过十分繁琐和费时。
为了克服植物膜组分提取中的缺点，我们特别开发了此款植物膜组分提取试剂盒。
植物组织首先通过缓冲液A中致敏，匀浆，然后通过一个特殊的离心管柱，在此过程中匀浆的组织通过柱子特有的Z字形通路后细胞膜被切割成大小相等的碎片，后续无需超高速离心，通过差速离心法和密度梯度离心法将天然的质膜组分从未破裂的细胞，细胞核，细胞浆和细胞器的混合物中分离出来。
在每次实验中仅需使用相同量的起始材料，离心力和离心时间，即可高度富集膜组分，并保证一致性良好。
整个操作过程大约1小时可以完成。
应用：试剂盒用于快速从植物组织中分离天然膜组分，可应用于SDS-PAGE，immunoblottings，ELISA，IP，膜蛋白质结构分析，2-D，酶活性测定及其他应用。
试剂盒组份（50次）：1. 25ml Buffer A2. 10ml Buffer B3. 50个离心管柱4. 50个收集管5. 2根塑料研磨棒6. 组织分离粉储存：Buffer A和Buffer B 需在-20℃储存所需附加材料1XPBS涡旋震荡仪台式离心机重要产品信息1.仔细阅读整个操作说明。
将缓冲液A和缓冲液B完全解冻后摇匀，放置于冰上。
将离心管柱和接收管套管放置于冰上预冷。
2.离心机请调整成RCF/Xg模式，按照离心力设置离心机，所有离心步骤都需要在4℃室温下或者低温离心机中进行。
3.研究蛋白磷酸化，磷酸酶抑制剂应在使用前加入缓冲液A中。
蛋白酶抑制剂可以选择添加或不添加，如添加在使用前加入缓冲液A中（请按照蛋白酶或磷酸酶抑制剂母液比例，例如母液是100x，添加时按照1：100添加，1ml缓冲液A添加10ul抑制剂）。
人红细胞膜蛋白提纯分离试剂盒 说明书
人红细胞膜蛋白提纯分离试剂盒说明书好，先从“人红细胞膜蛋白提纯分离试剂盒”的说明书开始，咱们这篇内容得做得自然些，像是聊聊天一样。
首先，咱们要明白这试剂盒是干啥的。
其实很简单，说白了就是帮助咱们从血液中把那些红细胞膜上的蛋白提取出来，干啥用呢？很多实验都需要这些蛋白，比如做一些生物学研究、探究蛋白质和细胞相互作用的机制之类的。
能不能做出来，就得看你使用这款试剂盒的技巧了。
记得第一次使用这个试剂盒的时候，我特别紧张。
因为就像我去做菜一样，明明看过无数次做法，实际操作的时候总觉得心里没底。
你看，说明书上写得都挺清楚的：“将血液样本与试剂混合，轻轻摇晃均匀，离心……”一看这些步骤，心想：“这不就是做饭嘛，似乎也没什么特别的。
”结果，刚开始操作的时候，我的手有点不听使唤，试剂倒不小心洒了出来，弄得台面上都是，还得重新整理一下。
后来才发现，原来这种东西真的得细心，毕竟血液中的每一个小细胞，都是关键。
接着进入重点——提取红细胞膜蛋白。
关键步骤是离心，离心是整个过程的核心，成功与否就在这一步。
每次我都站在离心机旁边，眼睁睁看着试管里的液体被快速旋转，心里都想着：“能不能分得更清楚点？”有时候试剂盒给的离心条件如果设置得不太对，结果就很容易分不清各层，试管里的东西都混在一起了，那就得重新来过，浪费时间又心累。
不过，做几次下来，你会发现其实这些都不是事儿。
就像我现在再做，操作得已经越来越顺手了，试剂盒里的配方和步骤其实挺合理的，你只要按照它的要求走，基本上问题不大。
其实就是需要点耐心，再加上一点点细心。
因为不小心错过了哪个环节，提取出来的蛋白质量会差很多，实验的结果就不准确了，这就是“细节决定成败”的意思了。
说实话，每次看到离心后沉淀物清晰地分层，蛋白提取得一干二净的时候，心里那种成就感真是没法形容，简直是“哇塞，居然做出来了！”你会觉得所有的麻烦和小失误都不算什么，反倒成了回忆的一部分。
好了，讲了这些步骤，也别忘了这款试剂盒的优点。
人(Human)组蛋白H3赖氨酸4(H3K4me3)ELISA试剂盒说明书
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）组蛋白H3赖氨酸4(H3K4me3)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被组蛋白H3赖氨酸4(H3K4me3)抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的组蛋白H3赖氨酸4(H3K4me3)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、12.5、25、50、100、200ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
凯基核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒
凯基核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒Cat Number：For Research Use OnlyStore at -20℃for one yearExpire date：一、试剂盒说明本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取核蛋白和/或胞浆蛋白，提取制备过程简便。
制备的核蛋白和胞浆蛋白能保持天然活性，并且纯度较高。
提取的蛋白可用于进一步的转录因子活性分析、凝胶阻滞实验(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、酶活性测定等后续蛋白质研究。
二、试剂盒组份组份KGP150 （50 test）KGP1100 （100储存温度test）Buffer A 25 mL 25 mL ×24℃Buffer B 1.5 mL 3．0 mL 4℃Buffer C 12.5 mL 25 mL 4℃DTT 50μL100μL-20℃蛋白酶抑制剂250μL500μL-20℃PMSF（100mM）400μL800μL-20℃三、操作步骤Ⅰ 实体组织蛋白的提取1、组织样本，将组织剪切成小块，加入适量的冰冷PBS均浆后，静置5 min ，弃沉淀，小心吸取上清转移至另一离心管中；2、上清4℃离心500×g，3 min，弃上清，估计细胞压积PCV（离心后的紧实细胞体积）；3、每20μL细胞压积中，加入200μL预冷的Buffer A【使用前每mL BufferA加入1μL DTT，5μL 100mM PMSF，5μL蛋白酶抑制剂】，最大转速涡旋剧烈振荡15s，放置冰上10～15min；4、加入11μL冷Buffer B，最大转速涡旋剧烈振荡5s，放置冰上1min；5、再次最大转速涡旋剧烈振荡5s后，4℃离心，16000×g,5min；6、尽快将上清转入另一预冷的洁净微量离心管，置于冰上，即得胞浆蛋白；7、在离心沉淀物（细胞核）中加入100μL预冷的Buffer C (使用前每mLBuffer C加入1μL DTT，5μL 100mM PMSF，5μL蛋白酶抑制剂)，最大转速涡旋剧烈振荡15s，放置冰上40min，每间隔10 min涡旋剧烈振荡15 seconds；8、4℃离心，16000×g,,10min，尽快将上清转入一预冷的洁净微量离心管，即得核蛋白；9、上述提取的胞浆蛋白和核蛋白进行蛋白定量（Braford法或BCA法），分装并保存于-80℃，避免反复冻融。
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Overview
Fast and reproducible extraction of subcellular proteomes from mammalian cells
ProteoExtract® Subcellular Proteome Extraction Kit (S-PEK) is designed for fast and
reproducible extraction of subcellular proteomes from adherent and suspension-grown
mammalian cells. The S-PEK takes advantage of the different solubilities of certain subce
compartments in the four selected reagents. In the case of adherent cells, the procedure is
performed directly in the tissue culture dish without the need for cell removal. Cells or the
parts of the cells remain attached to the plate during sequential extraction of subcellular
compartments, until the appropriate extraction reagent is used. Thus, the early destruction
the cellular structure by enzymatic or mechanical detachment of cells from the tissue cultu
plate and any mixing of different subcellular compartments is prevented. For
suspension-grown cells, extraction starts with gentle sedimentation and washing of the cel
The stepwise extraction delivers four distinct protein fractions from one sample:
∙Cytosolic fraction (F1)
∙Membrane/organelle protein fraction (F2)
∙Nucleic protein fraction (F3)
∙Cytoskeletal fraction (F4)
Proteins are obtained in the native state making the S-PEK suitable for many downstream
applications such as 1D and 2D gel electrophoresis, immunoblotting, enzyme activity assa
and protein microarrays.
Sample size: 3-5x106or 25-50 mg tissue.
Catalogue
Number
539790
Brand
Family
Calbiochem®
Synonyms S-PEK Kit
Features and benefits ∙Stepwise extraction resulting in four distinct subcellular proteomes from one sample ∙Highly reproducible
∙No ultracentrifugation steps
∙Fast—needs just 2 hours with 45 minutes hands-on time
∙Produces proteins suitable for functional studies
Application
Data
A:Adherent SAOS cells were extracted according to the Detailed Protocol
Subcellular Extraction of Proteins From Adherent Cells as outlined above. Im
i-iv show the morphology of the cells before and after each extraction s
(200-fold enlarged). The SAOS cells remained attached throughout the extrac
procedure. B:An aliquot of each fraction from A were subjected to SDS-
analysis (F1-F4 = fractions 1-4). The data demonstrate clear differences in
protein banding patterns among the 4 fractions. C:Aliquots of each frac
from A were separated by SDS-PAGE and transferred to PVD membrane for blot
with the indicated antibodies. For c-Fos, the fractions were subjected t
immunoprecipitation, prior to Western blotting, to enrich for any c-Fos pre
in each fraction. The data demonstrate that each marker protein is specific
enriched within the appropriate fraction.
A431 cel ls were stimulated with 0.2 µg/ml TNF-αfor the indicated times. At end of each induction period the cells were extracted as outlined in the Deta Protocol for Subcellular Extraction of Proteins from Adherent Cells. The prot from an aliquot of each fraction were separated by SDS-PAGE and transferre PVD membrane for Western blot analysis using an antibody specific for NF-The data indicate that there is measurable translocation of NF-κ B from cytoplasm to the nucleas as early as 5 min after TNF-α stimulation.
*Tested on rat liver and bovine liver tissue.。