酵母蛋白快速提取试剂盒使用说明
适用于质谱分析的酵母蛋白提取
酵母 酵母
BB-319716 BB-319817
酵母总蛋白提取试剂盒 （离心柱，2-D电泳用） 酵母总蛋白提取试剂盒 （无去污剂）
酵母 酵母
BB-319908
酵母蛋白提取试剂盒 （蛋白组、质谱适用）
酵母
下游应用 WB,IP,co-IP,ELISA,EMSA, purification,kinase assays,activity assays,reporter assays,amine reactive labeling,etc. WB,IP,co-IP,ELISA,EMSA, purification,kinase assays,activity assays,reporter assays,amine reactive labeling,etc. WB,IP,co-IP,ELISA,EMSA, purification,kinase assays,activity assays,reporter assays,amine reactive labeling,etc. 磷酸化蛋白质谱,2-D,IEF, WB,IP,ELISA,EMSA,purification,kinase assays,activity assays, reporter assays,amine reactive labeling,etc. 2-D,IEF, WB,purification,etc. WB,IP,ELISA,EMSA,purification,kinase assays,activity assays, reporter assays,amine reactive labeling,etc. 2-D,IEF, WB,purification,etc. 蛋白质谱,2-D,IEF, WB,IP,ELISA,EMSA,purification,kinase assays,activity assays, reporter assays,amine reactive labeling,etc. 蛋白质谱,2-D,IEF, Pull-down, co-IP, WB,IP,ELISA,EMSA,purification,kinase
酵母蛋白提取方法
（双向电泳用）
产品组成：
产品组成 规格
试剂 A：酵母蛋白提取液（2D） 试剂 B：蛋白酶抑制剂混合物
使用说明书
BB-3185-1 50T 25ml 100ul 1
BB-3185-2 100T 50ml 200ul 1
组份编号
31850A 31850B
储存条件： 蛋白酶抑制剂-20℃保存； 蛋白提取液室温保存。
有效期： 一年。
产品简介： 贝博酵母蛋白提取试剂盒适用于从各种酵母样本中高效而温和地抽提可溶性总蛋白。提
取过程简单方便，避免了重复性差的研磨法，超声波法或压榨法对酵母细胞的破坏，避免激 烈的机械处理造成的氧化和热度升高对目的蛋白的破坏作用。可在 1 小时内完成。该试剂盒 含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。
BB-3411 BB-3121 BB-3122 BB-3123 BB-3125 BB-3105
BCA 蛋白定量试剂盒 细菌膜蛋白提取试剂盒 植物总蛋白提取试剂盒 植物膜蛋白提取试剂盒 蛋白酶抑制剂混合物 磷酸酶抑制剂混合物
BB-3401 BB-3151 BB-3124 BB-3152 BB-3301 BB-3311
2. 取 50ml 酵母培养物，在 4℃，2500g 条件下离心 5-10 分钟，小心吸取培养基， 尽可能吸干，收集酵母沉淀。
3. 用纯水洗涤酵母两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。 4. 每 100ul 体积酵母沉淀物中加入 500ul 酵母蛋白提取液，混匀后，在室温或 37℃
条件下于摇床振荡 30-60 分钟。 5. 在 14000g 条件下离心 5 分钟。 6. 将上清吸入另一干净离心管，即可得到酵母蛋白样品。 7. 将上述蛋白提取物分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
酵母转化试剂盒使用说明书第二版
酵母转化试剂盒使用说明书（第二版）储存条件：Carrier DNA-20℃保存，其它组分可室温保存，有效期1年。
产品内容：Components SK2400-200PEG Solution50mlLiAc Solution50mlCarrier DNA2×1ml说明书1份酵母感受态细胞的制备：1.活化菌种。
-80℃保存的菌种在固体YPDA培养基（YPDA加20g Agar/L）上划线，在30℃培养2-4天。
2.挑取酵母单菌落在固体YPDA培养基上划3-5mm的短线，在30℃培养2-4天。
待酵母单菌落长至2mm长时，接种。
3.首先把酵母细胞接种到3ml液体YPDA培养基中，30℃过夜培养。
4.第二天转接到含有30ml液体YPDA培养基的三角瓶中继续培养，待OD600到0.4-0.5范围内。
收集细胞，1000g，离心5min,去上清。
5.沉淀用30-50ml的无菌的去离子水悬浮。
1000g，离心5min，去上清。
6.沉淀用合适体积的1/10浓度的LiAc悬浮（30ml的酵母菌最多用不超过1mL的1/10浓度的LiAc悬浮，通常100μl的酵母细胞用于转化一个质粒，即一个反应）。
1/10浓度的LiAc稀释方法：100μl LiAc Solution+900μl无菌水。
7.把酵母细胞的悬浮液分装到1.5ml的离心管中，每管分装100μl，用于转化一个质粒即一个反应。
1000g，离心5min，去上清。
制备好的感受态细胞备用。
酵母转化：1.配制预混液，每转化一个质粒即一个反应需要360μl的预混液。
PEG Solution240μlLiAc Solution36μlCarrier DNA10μl质粒（大约200ng/μl）5μl（根据质粒的浓度加入相应的体积）总体积360μl（不足体积用ddH2O补充）2.吸取360μl的预混液加入到感受态细胞中，用枪头反复吹吸沉淀，使离心管底的酵母细胞彻底地悬浮在含有PEG的预混液中。
酵母蛋白的提取方法
回收玻璃珠，并尽可能取上清到另一预冷的玻璃管中。
7 40ul的抽提buffer，同上涡流。
8离心后分离上清（回收玻璃珠）。
9液氮快速冷冻，-70℃储存。
10 提取的蛋白量通常约10-20mg/ml, 2-5ul用于实验。
请注意甄别内容中的联系方式诱导购买等信息谨防诈骗
酵母蛋白的提取方法
1 准备SD/-Leu或是YPD 培养基20ml，酵母过夜培养，30℃，230rpm。
2 测OD600 约1.0。
3 100ml过夜培养物，1000g，离心，5min，4℃。
4 弃上清，重悬于80ul抽提buffer：
0.1M Tris-Cl（PH7.5），0.2M NaCl，0.01Mβ-ME，20％甘油，5mM EDTA，1mM PMSF。(100×)：PMSF 0.1742g 溶于10ml 异戊醇（主要抑制丝氨酸蛋白激酶）， RT保存。
提取酵母蛋白实验报告
一、实验目的1. 学习酵母蛋白的提取方法。
2. 掌握蛋白质的检测方法。
3. 了解酵母蛋白的生理活性。
二、实验原理酵母蛋白是一种重要的微生物蛋白，具有丰富的氨基酸组成和生理活性。
本实验采用酸法提取酵母蛋白，通过检测蛋白质含量和生理活性，验证提取方法的可行性。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：新鲜酵母菌（酿酒酵母）。
2. 试剂：盐酸、硫酸铵、NaOH、BCA蛋白定量试剂盒、生理盐水、生理盐酸盐缓冲液等。
四、实验步骤1. 酵母蛋白提取（1）将新鲜酵母菌接种于YPD培养基中，30℃培养24h。
（2）收集培养液，用无菌生理盐水洗涤酵母细胞3次。
（3）将洗涤后的酵母细胞用无菌生理盐水悬浮，加入适量盐酸（pH 4.5）。
（4）在冰浴条件下，用高速匀浆机将酵母细胞匀浆。
（5）将匀浆液离心（8000r/min，10min），取上清液即为酵母蛋白提取液。
2. 蛋白质含量检测（1）取适量酵母蛋白提取液，按照BCA蛋白定量试剂盒说明书进行操作。
（2）根据标准曲线计算蛋白质含量。
3. 生理活性检测（1）取适量酵母蛋白提取液，按照生理活性检测方法进行操作。
（2）根据检测结果，分析酵母蛋白的生理活性。
五、实验结果与分析1. 蛋白质含量检测结果通过BCA蛋白定量试剂盒检测，酵母蛋白提取液中的蛋白质含量为2.0mg/mL。
2. 生理活性检测结果通过生理活性检测，酵母蛋白提取液具有一定的生理活性。
六、实验结论本实验采用酸法提取酵母蛋白，通过检测蛋白质含量和生理活性，验证了提取方法的可行性。
酵母蛋白提取液具有较高的蛋白质含量和一定的生理活性，为后续研究提供了实验基础。
酵母蛋白提取方法
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产品号 BB-3101 BB-3102 BB-3411 BB-3501 BB-3121 BB-3122 BB-3123 BB-3125 BB-3105 BB-3702
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3. 用冷 PBS 洗涤酵母两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。 4. 每 100ul 体积酵母沉淀物中加入 500ul 冷的酵母蛋白提取液，混匀后，在室温
-37℃条件下于摇床振荡 30-60 分钟。 5. 在 4℃，14000g 条件下离心 15 分钟。 6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到酵母总蛋白。 7. 将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。
酵母蛋白提取试剂盒
产品组成：
产品组成 规格
试剂 A：酵母蛋白提取液 试剂 B：蛋白酶抑制剂混合物
使用说明书
BB-3125-1 50T 25ml
100ul 1
BB-3125-2 100T 50ml 250ul 1
组份编号
31250A 31250B
产品简介： 贝博酵母蛋白提取试剂盒可在 1 小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，
产品 磷酸化蛋白富集试剂盒 膜蛋白提取试剂盒 BCA 蛋白定量试剂盒 蛋白 Marker 细菌膜蛋白提取试剂盒 植物总蛋白提取试剂盒 植物膜蛋白提取试剂盒 蛋白酶抑制剂混合物 磷酸酶抑制剂混合物 SD-3103 BB-3401 BB-3721 BB-3151 BB-3124 BB-3152 BB-3301 BB-3311 BB-3703
酵母阳性克隆快速检测试剂盒
酵母阳性克隆快速鉴定试剂盒使用说明书产品编号：SK2420保存条件：-20℃储存，有效期1年。
包装内容：产品内容SK2420-200T 酵母质粒快速提取缓冲液（SK2420-1）5×1mL2×PCR MasterMix（FSL2610）5×1mL说明书1份产品简介：使用本试剂盒能够快速提取的酵母质粒，大幅减少酵母阳性克隆的鉴定时间。
仅适用于通过PCR扩增的方法鉴定酵母阳性克隆或获得的PCR产物用于测序分析。
如想获得纯度高酵母质粒请选用酵母质粒提取试剂盒（SK2410）。
使用方法:一、酵母质粒提取1.吸取20μL的酵母质粒快速提取缓冲液放入1.5mL的离心管中。
2.用无菌枪头挑取长度1~2mm的酵母菌悬浮在装有缓冲液的离心管中。
3.在95°C的水浴锅或者金属浴中煮5min-10min。
4.冰上放置2min，常温条件下12,000rpm，离心5min，吸取上清移至新的离心管。
得到的质粒可用于PCR分析。
二、PCR扩增目的条带。
建议每10μL PCR反应体系加入1μL提取的酵母质粒，40个PCR循环数。
PCR反应体系:试剂20μl反应体系终浓度2×PCR MasterMix10μl1×Primer F,10µM0.5μl0.25μMPrimer R,10µM0.5μl0.25μMTemplate DNA2μl<1μg/reaction dd H2O up to20μl-PCR反应条件：2×Taq MasterMix反应温度反应条件循环94℃6min194℃30secTM℃30sec40 72℃1kb/min72℃7min14℃+∞1注意事项：1.建议提取酵母质粒前先把酵母克隆在平板上划1cm左右的短线，生长2-3天后，挑取1~2mm的酵母菌用做质粒提取。
2.可根据酵母菌的多少适当增加或减少酵母质粒提取缓冲液的使用量。
酵母基因组DNA提取试剂盒操作方法及步骤说明书
试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次100次200次酵母裂解液室温15 ml 30 ml 60 ml蛋白沉淀液室温 5 ml 10 ml 20 mlDNA溶解液室温 5 ml 5 ml 10 ml本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项:1.环境温度低时酵母裂解液中某些去污剂成份会析出出现浑浊或者沉淀，可在37℃水浴加热几分钟，轻轻旋摇，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。
2.蛋白沉淀液可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，如果不能完全溶解，也不影响使用效果，直接取用上层溶液即可。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍：本试剂盒用于快速的从酵母中提取基因组DNA。
在针对酵母细胞特点配制的酵母裂解液作用下，酵母细胞被裂解释放出基因组DNA，然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白，最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。
产品特点：1.不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂。
2.快速，简捷，整个过程可在1个小时内完成。
3.结果稳定，产量高（比离心柱型的产量高一倍以上），OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达50Kb-150kb，可直接用于PCR，Southern-blot和各种酶切反应以及文库构建。
操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）1.吸取1.5ml 酵母培养物到一个1.5ml离心管；12,000rpm离心2分钟，尽可能弃上清，必要时候可以用枪吸去。
2.高速涡旋振荡，打散重悬酵母细胞团。
3.加入300μl酵母裂解液，涡旋振荡混匀，或者用1毫升的枪头反复吹打混匀。
酵母细胞的重悬分散对下一步裂解非常重要，必须充分分散重悬。
4.将裂解物放置在70℃水浴15-30分钟。
如果产量低，可以适当提高水浴温度和延长水浴时间，中间可以涡旋振荡混匀几次帮助裂解。
5.冰上至少5分钟使回复到室温。
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酵⺟母蛋⽩白质快速微量提取试剂盒
Yeast Protein Miniprep Kit
常温运输、4℃保存（溶液B成分二需-20℃保存），有效一年。
自备酵母培养基
产品及特点 本产品用于快速提取微量酵母蛋白用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析。
本产品结合玻璃珠破壁和化学法破壁两种方法，适合于各种形态的
各种酵母材料。
本产品的其主要特点是：
1.破壁效率高，能达到80-90%。
2.可以处理各种酵母样品。
3.操作简单，得到的裂解液可以直接用于SDS-PAGE和Western印迹分
析。
规格及成分成份 50次包装
溶液A 100 mL
溶液B成分一 50 mL
溶液B成分二 1.5 g
玻璃珠，400μL 5 g
使用方法准备工作：将溶液B成分二（干粉）全部加到50mL溶液B成分一中，充分摇晃使之全部溶解，成为溶液B，然后分装成小分（体积根据每次实验的样
品数决定）并放-20℃长期保存。
1、 将酵母细胞接种到5mL YPD 培养基中，30℃摇晃（250rpm/分钟）过
夜培养使其OD600达到0.5～2.0。
2、 把酵母细胞培养物转到装有2mL 预冷溶液A 的10-15 mL 离心管中，
混匀。
3、 4℃ 5000g 离心5分钟沉淀酵母细胞，吸出上清液。
4、 用30μL 溶液B 悬浮酵母细胞，并快速转移到1.5mL 塑料离心管中。
5、 100℃下保温3分钟，使蛋白酶失活，样品存放于-20℃。
6、 加入0.1g 的玻璃珠。
7、 在旋涡振荡器上剧烈振荡混合2-10分钟。
8、 加入70 μl 溶液B，稍加振荡，置100℃保温1分钟。
9、 取5-20μl 抽提液上样直接进行SDS-PAGE 凝胶电泳。
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BCA 蛋白检测试剂盒
蛋白marker
ECL 发光检测液。