全血蛋白提取方法
全血基因组DNA提取试剂盒使用说明
全血基因组DNA提取试剂盒使用说明一、试剂盒组成及存储条件：1.试剂盒包括蛋白酶K、缓冲液、洗涤缓冲液、脱水溶液等。
2.试剂盒应存放在4℃以下避光干燥处，避免冻结。
二、实验前准备：1.准备所需的实验耗材和设备，如离心管、恒温振荡器、离心机等。
2.取出全血样品，可以是新鲜全血或已离心制备的全血细胞。
三、DNA提取步骤：1.取出全血样品，用洗涤液洗涤细胞沉淀并离心收集，去除红细胞。
2.加入蛋白酶K将细胞裂解，释放DNA。
3.加入缓冲液和脱水溶液，沉淀DNA并洗涤。
4.最终稀释DNA并保存在适当的条件下。
四、实验注意事项：1.操作过程中需注意无菌操作，避免污染。
2.加入蛋白酶K的量应准确控制，不要过多或过少。
3.混合溶液时需轻轻摇匀，避免气泡的产生。
4.稀释保存DNA时，需使用无核酸酶的载体溶液，如TE缓冲液。
五、质控及结果分析：1.可以通过琼脂糖凝胶电泳或比色法检测提取的DNA质量。
2.检测DNA浓度和纯度，确保提取的DNA适用于后续实验。
3.可以保存提取好的DNA样品，以备后续实验使用。
六、应用领域：1.该试剂盒适用于从全血样品中提取DNA，可用于基因分析、疾病诊断、遗传研究等领域。
2.可以用于个体基因检测、种群遗传学研究、药物反应性研究等。
总结：全血基因组DNA提取试剂盒是用于从全血样品中提取DNA的重要工具，操作简便、提取效率高。
在实验中需注意操作规范，保证提取的DNA质量和纯度。
该试剂盒广泛应用于科研领域，为基因研究和临床诊断提供了有力支持。
希望上述使用说明能够帮助用户正确、高效地使用全血基因组DNA提取试剂盒。
SOP013全血超敏C-反应蛋白(bCRP)
全血超敏C-反应蛋白(bCRP)检测SOP文件一、检验目的：能鉴别出细菌和病毒感染，量的动态变化能反映病症的活动性。
二、原理：用散射光比浊法，可溶性抗原与特异性的抗体反应形成不溶性复合物，当光线通过反应悬液时发生散射并由特定蛋白分析仪检测到。
散射光值的多少与测试样品中的特定蛋白浓度成一定比例。
通过刷卡将磁卡中的标准曲线存储入仪器中，仪器会自动计算出样品中特定蛋白浓度。
三、标本的采集：采用新鲜手指血，或者EDTA或肝素抗凝血进行测定，抗凝血在2-8度储存最长不超过72小时，冷冻在-20度或更低温度则可贮存更长时间。
测试当天使用样品处理液处理样品和检测。
四、试剂超敏全血C反应蛋白检测试剂盒(由深圳市国赛生物有限公司提供)。
五、仪器设备：Nephstar特定蛋白分析仪六、操作步骤1.开机，刷bCRP磁卡更新，核对试剂批号等信息2.取2ul全血标本加入预分装处理缓冲液的测量杯中，轻轻摇匀，并将测量杯放进仪器的测量孔3.屏幕显示“请加入试剂”4.取60ul抗血清加入测量杯中并同时按下反应启动键5.仪器自动进行检测七、注意事项：1.标本测试在全血模式下进行，质控测试在血清模式下进行。
2.确保仪器屏幕显示批号与试剂批号一致，批号不一致时请及时刷卡更新。
3.试剂从冰箱取出，需平衡至室温才可以进行测量。
4.加入抗血清后务必尽快按下“反应启动”键。
5.每天开机后稳定运行半个小时。
溶血时请充分摇匀至透明清亮方可以进行测试。
八、质量控制在检测每批样品时，最好同时做质控。
用试剂盒中所提供的质控血清，测试当天按1/41比例，使用样品处理液处理质控血清，同全血的检测方法进行检测。
检测结果在所标示的范围内都是有效的。
九、计算方法：十、生物参考区间〈5mg/L.十一、技术指标：测量范围：1mg/L-350mg/L精确性：2.36-3.02%十二、超出可报告范围的处理：十三、危急值：十四、干扰因素：（1）本试验不能用草酸盐、肝素或EDTA盐等作抗凝剂。
血清中蛋白提取方法
血清中蛋白提取方法一、前言血清蛋白是由肝脏合成的，主要分为白蛋白、球蛋白和纤维蛋白原等。
血清中的蛋白质含量较高，具有重要的生物学功能，因此对于从血清中提取蛋白质进行研究具有重要意义。
本文将介绍一种简单易行的血清中蛋白提取方法。
二、试验材料1. 血清样品：新鲜采集的小鼠全血经离心分离得到的血清样品；2. 洗涤缓冲液：50 mM Tris-HCl (pH 7.4)；3. 裂解缓冲液：50 mM Tris-HCl (pH 7.4)、150 mM NaCl、1%NP-40、0.5% sodium deoxycholate、0.1% SDS；4. 蛋白酶抑制剂：PMSF（Phenylmethylsulfonyl fluoride）；5. 离心管和离心机。
三、实验步骤1. 血清样品制备：（1）将采集到的小鼠全血放入无菌离心管中，在3000 rpm下离心15分钟，将上清液收集至新的无菌离心管中；（2）将上清液再次在12000 rpm下离心15分钟，将上清液收集至新的无菌离心管中。
2. 蛋白提取：（1）将收集到的血清样品加入洗涤缓冲液中，用旋转摇床摇晃30分钟；（2）将混合物在12000 rpm下离心20分钟，收集上清液；（3）将上清液加入裂解缓冲液中，在室温下震荡30分钟；（4）再次在12000 rpm下离心20分钟，收集上清液。
3. 蛋白质定量：使用BCA法或Lowry法测定蛋白质浓度。
四、注意事项1. 所有试验步骤均需在无菌条件下进行。
2. 在制备血清样品时应注意不要破坏红细胞，以免对后续实验产生干扰。
3. 在裂解缓冲液中加入PMSF可以有效地保护蛋白质不被降解。
4. 在实验过程中应注意安全，避免接触到有害物质和高速旋转设备。
五、总结本文介绍了一种简单易行的血清中蛋白提取方法，该方法操作简单、成本低廉、提取效果较好，适用于血清中蛋白质的提取和分析。
在实验过程中应注意无菌操作和安全防护，以保证实验顺利进行。
血清免疫球蛋白的提取分离、纯化及鉴定-1
血清免疫球蛋白的提取分离、纯化及鉴定-1血液及组织样品的制备分析组织中某种物质的含量、探索物质代谢的过程和规律，经常使用动物的肝、肾、脑、粘膜和肌肉等组织，也选用全血、血浆、血清或者无蛋白血滤液等血液样品，有时也采用尿液、胃液等完成各种生化实验。
掌握以上各种实验样品的正确处理和制备方法是保证生化实验顺利进行的关键。
一、血液样品(一）采血测定用的血液，多由静脉采集。
一般在饲喂前空腹采取，因此时血液中化学成分含量比较稳定，采血时所用的针头、注射器，盛血容器要清洁干净；接血时应让血液沿着容器壁慢慢注入，以防溶血和产生泡沫。
(二）血清、全血及血浆的制备1.血清的制备血清是全血不加抗凝剂自然凝固后析出的淡黄清亮液体。
制备方法是：将刚采集的血液直接注入试管或离心管中。
将试管放成斜面，让其自然凝固，一般经3h 血块自然收缩而析出血清；也可将血样放入37 ℃恒温箱内，促使血块收缩，能较快约析出血清。
为了缩短时间，也可用离心机分离（未凝或凝固的均可离心），分离出的血青，用吸管吸出置于另一试管中，若不清亮或带有血细胞，应重离心，加盖冷藏备用。
2.全血及血浆的制备取清洁干燥的试管或其它容器，收集动物的新鲜血液，立即与适量的抗凝剂充分混合，所得到的抗凝血为全血。
每毫升血液中加入抗凝剂的种类可以根据实验的需要进行选择，但是用量不宜过大，否则将影响实验的结果。
将已抗凝的全二于 2，000r / min 离心10min ，沉降血细胞，取上层清液即为血浆。
血浆比血清分离得快而且量多：两者的差别，主要是血浆比血清多含一种纤维蛋白原，其它成分基本相同。
3.抗凝剂凡能够抑制血液凝固反应进行的化合物称为抗凝剂。
抗凝剂种类甚多，实验室常用的有如下几种，可根据情况选择使用。
（1）草酸钾（钠）优点是溶解度大，可迅速与血中钙离子结合，形成不溶性草酸钙，使血液不凝固。
每毫升血液用1-2mg 即可。
配制方法：配制10％草酸钾水溶液二吸取此液0.1ml 放入一试管中，慢慢转动试管，泛草酸钾尽量铺散在试管壁上，置80 ℃ 烘箱烤干（若超过150 ℃ 则分解），管壁即呈一薄层三色粉末，加塞备用。
全血提取总DNA实验步骤
全血提取总DNA实验步骤1. 取4 ml全血离心弃血清（已处理），将血球转移至15 ml离心管中，加入Buffer FG1至9 ml（血球过多可12 ml），上下颠倒混匀5次，2,500×g离心15分钟，缓慢弃上清。
2. 把离心管倒置于干净的吸水纸上，放置2分钟。
注意：在极少情况下沉淀可能会松弛，所以要缓慢倒掉上清。
将离心管倒置在吸水纸上，可以减少管壁上清的回流。
3. 按照附表配制缓冲液FG2与Proteinase K的混合液（比例100:1）。
注意：此混合液最好现用现配，并在配好后1h之内用完。
4. 加入1.5 ml Buffer FG2/Proteinase K混合液，立即混匀至溶液无团块。
注意：1）如果有多个样品同时操作，加入Buffer FG2/Proteinase K混合液后立即涡旋震荡，不要等所有样品都加完后再震荡。
2）通常涡旋震荡3-4次，每次5秒可以使沉淀充分悬浮，如果涡旋震荡后发现沉淀中含胶状物质可以再加入300 μlBufferFG2/Proteinase K混合液，再次涡旋混匀。
5. 65℃水浴锅中孵育5分钟，其间颠倒混匀数次。
注意：如果样品颜色从红色变成橄榄绿说明蛋白消化完全。
水浴时间不能过长，防止DNA降解。
6. 加入1.5 ml异丙醇，上下颠倒彻底混匀直至看到DNA，用玻璃吸管吸出沉淀置于1.5 ml 的EP管中。
注意：与异丙醇完全混合对于沉淀DNA非常重要。
如果样品中白细胞含量少，可能看不到DNA，则至少上下颠倒离心管20次确保沉淀完全。
7. 加入1.5 ml 70%乙醇，涡旋震荡5秒，2,500×g离心5分钟，弃上清。
注意：如果沉淀贴壁不牢，可以适当延长离心时间或增大离心力。
8. 把离心管倒置于干净的吸水纸上5分钟，确保沉淀在管中，空气干燥DNA沉淀直至所有的液体挥发干净（至少5分钟）。
注意：1）在极少情况下沉淀可能会松弛，所以要缓慢倒掉上清。
实验一、血液标本提取DNA(蛋白酶K-酚抽提法)
实验一、血液标本提取DNA（蛋白酶K-酚抽提法）一、实验原理离心分离到外周血的白细胞层；用细胞裂解液溶解细胞膜、核膜，使组蛋白与DNA分离，再用酚、三氯甲烷/异戊醇抽提去除蛋白质，最后经乙醇沉淀即可得到基因组DNA片段。
二、实验步骤：1、血液标本处理 1.0ml抗凝全血(ACD、EDTA抗凝均可)2000rpm离心10min（1.5mlEP管）。
轻轻去上清液（血浆），吸出淡黄色悬浮液（白细胞层）置于另一2.0mlEP管中。
（约50μl）2、细胞裂解加入10倍体积组织细胞裂解液，37℃1h，3、加入蛋白酶K消化加入蛋白酶K至终浓度100μg/ml（约4μl），充分混匀，37℃震荡12-24h或37℃1h后，56℃水浴3h。
保温过程中不时摇动，混匀反应液。
液体逐渐变粘稠，表明已有DNA释放出来，操作应轻柔。
4、酚抽提：将上述溶液冷却至室温，加等体积的Tris饱和酚（pH8.0）溶液，温和缓慢颠倒离心管10min，混匀两相成乳液。
12000rpm 5分钟，两相分层。
用宽口径移液管小心吸出上层粘稠的水相，移至一新的2.0mlEP管中。
（小心一点，不要吸入蛋白层。
如交界处有白色沉淀，需重新抽提有机相，用酚重新抽提两次，合并水相）5、三氯甲烷/异戊醇抽提上清液加等体积三氯甲烷：异戊醇（24：1），倒转混匀10分钟，12000rpm5分钟，取上层水相0.5ml入另一新的2.0mlEP管；6、DNA沉淀上清液中加0.2倍体积3.0mol/L 醋酸钠，再加2倍体积的4℃冰箱冷却后的无水乙醇，轻柔振摇，充分混匀；应可看到白色絮状物（DNA）。
12000rpm 5分钟，弃上清液；7、纯化：加1ml 70%乙醇洗涤，12000rpm 离心5分钟，去上清夜，重复1次；（此过程不得振荡摇动）8、溶解：弃上清液后，自然干燥（挥发痕量乙醇）后，用30μl pH8.0TE完全溶解，保存在-20℃备用。
三、注意事项1、加样准确，操作轻柔；微量加样器绝对不能超过最大量程；2、加酚试剂时，不要接触到皮肤上，有腐蚀性；如不小心弄到，立即用清水冲洗；3、取上清液时，不可吸到下层溶液；4、加TE液后轻摇10min溶解DNA或-4˚C保存待用。
全血DNA提取步骤
全血DNA提取步骤提取全血DNA是常见的分子生物学实验步骤之一，可以用于基因测序、PCR等一系列实验。
下面将详细介绍全血DNA提取的步骤，供参考：1.样本准备首先，需要准备采集血液的材料，如采血管、细胞裂解缓冲液、蛋白溶解缓冲液、蛋白酶K等。
此外，还需要一些实验所需的试剂和器材，如离心管、离心机、恒温器等。
确保仪器和试剂的清洁和消毒。
2.血液采集使用专业的血液采集器具，从被试者的静脉中采集血液样本。
建议使用EDTA抗凝管收集血液，以防止血液凝固。
3.预处理将采集的全血样本通过轻轻倾斜管子，使其混合均匀。
根据实验需要，可选择不同的预处理方式。
如果需要分离血浆或血细胞，可将全血离心，离心速度通常为1000-2000g，离心时间为15-20分钟。
4.细胞裂解将离心后的血细胞沉淀取出，加入适量的细胞裂解缓冲液。
裂解缓冲液的成分通常包括盐溶液、蛋白酶K、非离子型洗涤剂等。
裂解缓冲液的选择可根据实验的目的和所需的DNA纯度来确定。
将裂解缓冲液和血细胞沉淀充分混合，可使用移液器轻轻上下翻动。
5.DNA沉淀将混合好的血细胞裂解液加入离心管中。
在室温下离心10-15分钟，以除去细胞残渣和细胞膜的碎片。
离心完成后，将上清液转移到新的离心管中。
6.蛋白溶解将血细胞裂解液中的蛋白质通过加入蛋白溶解缓冲液沉淀下来。
蛋白溶解缓冲液通常包含盐溶液和蛋白酶K。
将蛋白溶解缓冲液加入上一步的上清液中，轻轻混合，并在室温下静置一段时间。
然后再次进行离心，使蛋白质沉淀到离心管的底部。
7.除去上清液将离心管取出，将上清液倒出，只保留蛋白质沉淀在离心管底部的沉淀。
8.水洗将离心管中的蛋白质沉淀用去离子水洗涤一次，以去除余留的盐溶液和杂质。
将去离子水加入离心管中，轻轻混合后离心，然后将上清液倒出。
9.DNA溶解将沉淀的蛋白质用适量的DNA溶解缓冲液重新溶解。
DNA溶解缓冲液通常包含盐溶液和螯合剂，以便稳定DNA的结构。
将DNA溶解缓冲液加入离心管中，轻轻混合使蛋白质沉淀溶解。
全血基因组DNA提取步骤
全血基因组DNA提取步骤1、冷冻全血室温化开。
（如时间紧可37℃化开，反复冻融有利于细胞破裂释放核酸）。
2、取1mL全血，加400μl灭菌蒸馏水，轻缓颠倒混匀5min。
（破碎红细胞）3、10000rpm，10min，可见底部沉淀，倒掉液体。
4、加1mL水，弹起沉淀，颠倒混匀5min。
（破碎红细胞）5、10000rpm，10min，倒掉液体。
（视情况而定，可再洗一次）6、依次加入500μl STE，25μl 10%SDS，10μl 10μg/mL 蛋白酶K。
弹起，颠倒混匀。
7、50℃水浴过夜，可加摇床。
（蛋白酶K的最适温度为55℃，资料上为3h，考虑到过夜时间较长，故降低温度）8、从水浴锅中取出，待降至室温。
9、加500μl Tris饱和酚，颠倒混匀10min。
10、12000rpm，10min。
从离心机取出时注意不要摇动离心管。
仔细将上清移入另一离心管，注意不要吸到中间蛋白层。
11、上清液中加500μl Tris饱和酚，颠倒混匀10min。
12000rpm，10min，取上清。
12、上清液中加500μl 酚/氯仿/异戊醇（25:24:1），颠倒混匀10min。
12000rpm，10min，取上清。
13、上清液中加500μl 氯仿/异戊醇（24:1），颠倒混匀10min。
12000rpm，10min，取上清。
14、加1mL冰冻无水乙醇，轻轻颠倒，可见白色絮状沉淀，用枪头挑入另一离心管。
若只见白色浑浊液体（无絮状沉淀），可加20μl 醋酸铵，轻轻颠倒混匀，液体可变清亮。
8000rpm，5min。
倒去液体。
15、加1mL 70%冰冻乙醇洗涤沉淀，8000rpm，5min。
倒去液体。
16、将离心管倒扣在滤纸上，晾干（需1h以上）。
17、加100μl TE，弹起，置4℃过夜溶解。
次日0.8%琼脂糖凝胶电泳检测。
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2. 取 300ul 全血样品，加入 300ul 冷的蛋白提取液，充分混匀后，在 4℃条件下振 荡 20 分钟。
3. 在 4℃，14000g 条件下离心 10 分钟。 4. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到全血总蛋白。 5. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
产品号 BB-3101 BB-3102 BB-3104 BB-3501 BB-3121 BB-3122 BB-3123 BB-3125 BB-31品 磷酸化蛋白富集试剂盒 膜蛋白提取试剂盒 活性蛋白提取试剂盒 植物核蛋白提取试剂盒 细菌膜蛋白提取试剂盒 植物总蛋白提取试剂盒 植物膜蛋白提取试剂盒 蛋白酶抑制剂混合物 真菌蛋白提取试剂盒 磷酸酶抑制剂混合物 细菌蛋白提取盒（2D 电泳用） 酵母蛋白提取盒（2D 电泳用） 线粒体蛋白提取盒（2D 电泳用）
产品号 BB-3108 BB-3103 BB-3106 BB-3154 BB-3151 BB-3124 BB-3152 BB-3301 BB-3127 BB-3311 BB-3182 BB-3185 BB-3191
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全血总蛋白提取试剂盒
产品组成：
产品组成 规格
蛋白提取液 蛋白酶抑制剂混合物
使用说明书
BB-3140-1 50T 15ml 100ul 1
BB-3140-2 100T 30ml 200ul 1
产品简介： 贝博全血总蛋白提取试剂盒适用于从各种抗凝或非抗凝全血样本中提取总蛋白。
使用方法：
1. 提取液制备：每 300ul 蛋白提取液中加入 2ul 蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置 冰上备用。