全蛋白提取试剂盒(中)
高脂肪样本蛋白提取方法
使用方法：
细胞蛋白提取： 1. 提取液制备：每 500ul 冷的蛋白提取液中加入 2ul 蛋白酶抑制剂混合物混匀后 置冰上备用。 2. 取 5-10×106 个细胞①，在 4℃，1000rpm 条件下离心 5-10 分钟，小心吸取培养 基，尽可能吸干，收集细胞。 3. 用冷 PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。 4. 每 5×106 个细胞中加入 500ul 冷的蛋白提取液，混匀后，在 4℃条件下振荡 15-20 分钟。 5. 在 4℃，14000rpm 条件下离心 15 分钟。 6. 将含有脂肪的上清吸入蛋白离心管中，套上液体收集管，在 4℃，12000rpm 条 件下离心 5 分钟。 7. 将液体收集管中的液体吸入另一预冷的干净离心管，即可得到蛋白样品。 8. 将蛋白离心管中的脂肪杂质用吸头或合适工具刮出，即可用于处理上步未处理
完的样品或其他待处理样品。 9. 将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。
组织蛋白提取： 1. 提取液制备：每 500ul 冷的总蛋白提取液中加入 2ul 蛋白酶抑制剂混合物，混 匀后置冰上备用。 2. 取 100mg 组织样本剪碎，加入蛋白提取液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼 可见固体①。 3. 将组织匀浆吸入一预冷的干净离心管中，在 4℃，10000rpm 条件下离心 5 分钟。 4. 将含有脂肪的上清吸入蛋白离心管中，套上液体收集管，在 4℃，12000rpm 条 件下离心 5 分钟。 5. 将液体收集管中的液体吸入另一预冷的干净离心管，即可得到蛋白样品。 6. 将蛋白离心管中的脂肪杂质用吸头或合适工具刮出，即可用于处理上步未处理 完的样品或其他待处理样品。 7. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
全血蛋白提取方法(离心柱法)
产品组成：
产品组成 规格
试剂 A：蛋白提取液 试剂 B：蛋白酶抑制剂混合物 试剂 C：蛋白稳定剂 组份 D：蛋白离心柱
BB-31967-1 50T 15ml
100ul 100ul 50 套
BB-31967-2 100T 30ml 200ul 200ul 100 套
组份编号
31967A 31967B 31967C 31967D
产品号 BB-3101 BB-3102 BB-3104 BB-3411 BB-3501 BB-3121 BB-3122 BB-3123 BB-3125 BB-3126 BB-3105 BB-3181 BB-3183 BB-3187
产品 磷酸化蛋白富集试剂盒 膜蛋白提取试剂盒 活性蛋白提取试剂盒 BCA 蛋白定量试剂盒 植物核蛋白提取试剂盒 细菌膜蛋白提取试剂盒 植物总蛋白提取试剂盒 植物膜蛋白提取试剂盒 蛋白酶抑制剂混合物 真菌蛋白提取试剂盒 磷酸酶抑制剂混合物 细菌蛋白提取盒（2D 电泳用） 酵母蛋白提取盒（2D 电泳用） 线粒体蛋白提取盒（2D 电泳用）
产品简介： 贝博全血总蛋白提取试剂盒适用于从各种抗凝或非抗凝全血样本中提取总蛋白。提取
过程简单方便，可在 1 小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对 蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。
使用方法： 1. 提取液制备：每 300ul 蛋白提取液中加入 2ul 蛋白酶抑制剂混合物和 2ul 蛋白 稳定剂，混匀后置冰上备用。 2. 取 300ul 全血样品，加入 300ul 冷的蛋白提取液，充分混匀后，在 4℃条件下振 荡 10 分钟。 3. 将裂解液吸入离心柱内柱，套上套管，在 4℃，10000-14000g 条件下离心 3-5 分钟。 4. 收集套管内液体即得到即可得到全血总蛋白。 5. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
康为世纪 高纯度质粒中提试剂盒
PurePlasmid Midi Kit高纯度质粒中提试剂盒Version 04282010‐2.1I 组分说明Catalog no. CW0502CW0502ANumber of preps. 50 6Buffer P1 30 ml 5 mlBuffer P2 30 ml 5 mlBuffer N3 40 ml 5 mlBuffer PB 30 ml 5 mlBuffer PW(concentrate) 15 ml 2 mlBuffer EB 15 ml 1 mlRNase A(10mg/ml ) 600 μl 100μlSpin Column CL 50 6Collection Tube(2ml) 50 6Protocol 1 1II 保存条件该试剂盒室温干燥条件下（15-25℃）可保存一年，更长的保存时间可置于2-8℃。
若溶液产生沉淀，应在使用前置于37℃下溶解沉淀。
单独包装的RNaseA可室温(15-25℃)保存，更长时间保存置于2-8℃，加入RNaseA后的Buffer P1置于2-8℃保存，可以稳定保存半年。
III 产品简介本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞，通过新型离心吸附柱在高盐浓度下高效、专一结合溶液中的DNA，提取率达85%–90%。
本试剂盒提取的质粒纯度高，质量稳定，最大限度的去除杂质蛋白和细菌中其它有机化合物的污染，一次可处理5-15ml菌液。
所得质粒可用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、连接、转化、文库筛选、体外翻译、转染一些常规的传代细胞等。
IV 注意事项1.Buffer P1 在使用前先加入RNase A（将试剂盒中提供的RNase A 全部加入），混匀，置于2–8℃保存。
2.第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer PW中加入无水乙醇。
3.使用前请先检查Buffer P2 和Buffer N3 是否出现浑浊，如有混浊现象，可在37℃水浴中加热几分钟，即可恢复澄清。
动植物总蛋白微量提取试剂盒说明书
动植物总蛋白微量提取试剂盒说明书产品编号：BTN90707规格：50T产品及特点：本产品用于快速提取动植物总蛋白，用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析以及蛋白活性测定等。
本产品的其主要特点是：1.提取过程十分简便，匀浆离心即可，整个过程只需要十几分钟。
2.采用独特的温和裂解成分，蛋白保持天然活性。
3.适用于各种动植物组织材料，包括新鲜或冰冻的材料。
4.得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D电泳、Western印迹分析以及蛋白活性测定等下游实验。
5.一次可以处理100mg左右的样品，足够进行几十次SDS-PAGE mini胶电泳检测。
规格及成分：成分规格溶液A50ml5×SDS-PAGE上样液1ml说明书1份保存条件：常温运输，4℃保存，5×SDS-PAGE上样液短期4℃保存，长期可放-20℃保存，有效期一年。
使用方法：使用前，最好请在溶液A中加入自备的1M DTT溶液50μL。
一：匀浆法注意：对致密的实体组织（如肌肉），最好用Polytron式匀浆机匀浆处理。
1.称取动物或植物组织样品100mg，剪刀剪成黄豆大小，转移到10-15mL的塑料离心管中。
2.加入1ml溶液A，在冰上用Polytron式匀浆机匀浆，直到没有肉眼可见的组织块。
为了避免产热，可以分多次匀浆，其间放冰上让匀浆液冷却。
3.将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
4.4℃12,000g离心10分钟，组织残渣碎片将形成沉淀。
5.将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。
如果要测定蛋白浓度，请使用BCA方法，不要使用Bradford方法（如果要使用，也需要把样品稀释10倍后再测定，否则溶液A中的成分会影响浓度侧定）。
如果要进行SDS-PAGE电泳，可取部分到离心管中，加入5×SDS-PAGE上样缓冲液（终浓度为1×），在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。
植物叶片蛋白提取试剂盒
版本：A2 修改日期：2023.12.26 植物叶片蛋白提取试剂盒产品简介： 蛋白质是构成植物细胞的基本组成物质之一，在植物细胞生长发育的过程中起着重要的作用，植物的根茎叶都有大量蛋白质的合成，尤其在新生的组织和细胞中蛋白质尤其丰富，植物体内的蛋白质是在细胞内的核糖体上合成，合成的蛋白质可以作为细胞结构的组成物质，还可以参与细胞中的酶促反应。
而在茎叶细胞中不断供构建新的细胞组织和器官的蛋白质，被称之为植物叶蛋白(LeavesProteinConcentrates 简称LPC)，它们属于功能性蛋白质类。
由于是存在植物茎、叶中，所以是一种最大的可再生的蛋白质资源。
植物叶蛋白含有17～18种氨基酸，包含了人体所必需的8种氨基酸，还含有维生素，与动物肌肉蛋白不同的是植物叶蛋白不含饱和脂肪酸和胆固醇。
随着食品工业的发展和人民生活水平的提高，绿色食品越来越受到人们的喜爱，从植物中提取叶蛋白，具有可观的应用前景。
Leagene 植物叶片蛋白提取试剂盒可从植物样本中提取植物叶片蛋白，操作简单快捷，含有蛋白酶抑制剂，可以有效抑制蛋白的降解，并维持原有的蛋白间相互作用，该试剂盒主要用于从植物样本中提取植物叶片蛋白，提取的蛋白可用于Western Blot 、免疫组化、酶活性测定等下游实验。
该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
产品组成：自备材料：1、 液氮、植物叶片、研钵或匀浆器、离心管、离心机操作步骤(仅供参考)：1、称取100mg 植物组织，液氮研磨成粉，放入1.5mlEP 管。
2、加入1ml 蛋白提取试剂。
100℃，金属浴。
（必需用金属浴，EP 管上压放表面水平的重铁块，如果用沸水浴，EP 管受热曝开，叶片蛋白提取液飞溅丢失，实验失败。
）3、关闭电源，冷却到常温，再拿出EP 管。
4、13000rpm, 离心。
5、取上清1ul 测定蛋白浓度；取上清10ul 或者20ul,上样做SDS-PAGE 电泳，胶做考马斯亮蓝或者银染，或者胶转膜做western-blot 。
蛋白免疫印迹杂交(WesternBlot)技术手册
蛋白免疫印迹杂交〔Western Blot〕技术手册A蛋白样本提取制备蛋白样品制备是Western Blotting 的第一步，更是打算WB 成败的关键步骤，总体原则和留意事项：1：尽可能提取完全或降低样本简洁度只集中于提取目的蛋白〔通过承受不同提取方法或选择不同的试剂盒产品〕2：保持蛋白的处于溶解状态〔通过裂解液的PH 盐浓度外表活性剂、复原剂等的选择〕3：提取过程防止蛋白降解、聚拢、沉淀、修饰等，〔低温操作，参与适宜的蛋白酶和磷酸酶抑制剂〕4：尽量去除核酸，多糖，脂类等干扰分子〔通过参与核酸酶或实行不同提取策略〕5：样品分装，长期于-80℃中保存，避开反复冻融。
A-1细胞或组织裂解A-1-1细胞裂解裂解液Lysis buffer 或商品化蛋白抽提试剂盒的选择*目的蛋白分布定位推举裂解液Lysis buffe 推举试剂盒全细胞NP-40 or RIPA〔附录1〕全蛋白抽提试剂盒细胞质〔可溶蛋白〕Tris-HCl〔附录1〕胞浆蛋白和核蛋白抽提试剂盒线粒体蛋白提取试剂盒细胞质〔细胞骨架等不溶蛋白〕Tris-Triton〔附录1〕蛋白分级抽提试剂盒细胞质〔磷酸化蛋白〕磷酸化蛋白抽提试剂盒细胞膜NP-40 or RIPA〔附录1〕膜蛋白抽提试剂盒蛋白分级抽提试剂盒细胞核RIPA〔附录1〕核蛋白抽提试剂盒线粒体RIPA〔附录1〕线粒体蛋白抽提试剂盒亚细胞定位蛋白抽提试剂盒细胞裂解操作方法：1培育的细胞经预冷的PBS 漂洗2 次，裂解液中参与蛋白酶和磷酸酶抑制剂〔种类与量见本节2〕2吸净PBS，参与预冷的裂解液，〔(1 ml per 107cells/100mm dish/150cm2flask; 0.5ml per 5x106cells/60mm dish/75cm2flask).3用细胞刮子刮取贴壁细胞，将细胞及裂解液温存地转移至预冷的微量离心管中，44℃摇动30 min54℃离心12,000 rpm，20 min〔根椐细胞种类不同调整离心力〕6轻轻吸取上清，转移至预冷的微量离心管中置于冰上，即为蛋白样本，弃沉淀.A-1-2组织裂解1 用灭菌的预冷的工具分别目的组织，尽量置于冰上以防蛋白酶水解，2 将组织块放在圆底的微量离心管或Eppendorf 管中，参与液氮冻结组织于冰上均质研磨，长期可保存于-80°C，3每约5 mg 参与约300 μl 预冷的裂解液lysis buffer，冰浴匀浆后置于4℃摇动2 小时，裂解液体积与组织样本量有适当比例，〔最终的蛋白浓度至少到达0.1 mg/ml, 抱负的蛋白浓度应为1-5 mg/ml).44℃离心12,000 rpm，20 min，轻轻吸取上清，转移至预冷的微量离心管中置于冰上，即为蛋白样本，弃沉淀,A-2蛋白酶和磷酸酶抑制剂推举购商品化蛋白酶和磷酸酶抑制剂复合试剂盒或COOKTAIL。
蛋白提取制备相关产品_百替生物
蛋白提取制备相关产品蛋白抽提试剂盒-I (实体组织和细胞蛋白抽提, 100 extractions)S1250 100 次提取 700 元概述：实体组织如大脑富含磷脂、神经纤维或血管壁含大量结缔组织、而脂肪则有大量油脂，常规方法难以有效从这些组织提取蛋白。
蛋白抽提试剂盒-I用于从各种实体软组织或细胞快速提取总蛋白。
用裂解-结合缓冲液匀浆裂解实体组织，或用裂解结合缓冲液振荡重悬培养细胞，然后加入抽提试剂去除非蛋白成分，离心分离即可得到总蛋白；简便高效，30-60分钟内完成提取。
试剂盒可进行100次提取，可在1.5ml离心管微量提取也可大规模制备。
每次可提取1～100 mg实体组织或1 x 107细胞。
一次从10-100mg实体组织提取的总蛋白的量通常足以进行数十次Western Blot或免疫沉淀。
适用：(1) 各种实体软组织。
如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等。
(2) 各种原代和传代细胞。
组成：(1) 裂解-结合缓冲液100 ml；(2) 抽提试剂100 ml。
每毫升裂解缓冲液和抽提试剂可提取100 mg组织或1 x 107细胞。
储存：室温2年。
蛋白抽提试剂盒-II (液体样品蛋白抽提和回收，100 extraction)S1255 100 次提取 480 元200 次提取 780 元概述：蛋白抽提试剂盒-II 用于液体样品中蛋白浓缩、提取、或脱盐、脱去垢剂、脱还原剂等。
适用于各种液体样品(10 µl～1000 ml)，如蛋白溶液、胞浆胞核蛋白提取液、细胞或微生物培养基上清液、血液、尿液、脑脊液等各种体液。
蛋白回收率95%，远高于经典的丙酮或三氯醋酸沉淀法，且可有效去除样品中的脂质，不影响后续SDS-PAGE和Western Blot实验。
可用1.5ml离心管微量提取也可大规模制备，15分钟完成提取，简便高效。
该试剂盒也适于从细胞悬液提取总蛋白。
PAX8蛋白在脑胶质瘤患者组织中表达水平及其与临床病理特征分析
PAX8蛋白在脑胶质瘤患者组织中表达水平及其与临床病理特征分析孙飞;倪世慧;马艳娇;高言国【摘要】PAX8蛋白在脑胶质瘤患者组织中表达水平及其与临床病理特征分析.选取大连大学附属新华医院确诊的脑胶质瘤患者98例,根据2016年世界卫生组织(WHO)神经系统肿瘤分级标准,分为Ⅰ级12例,Ⅱ级18例,Ⅲ级21例,Ⅳ级47例,使用酶联免疫吸附法、蛋白印迹法及免疫组化等方法测定所有脑胶质瘤患者PAX8蛋白表达.Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级患者PAX8蛋白表达水平高于Ⅰ级,且Ⅲ级患者PAX8蛋白表达水平高于Ⅱ级,Ⅳ级患者PAX8蛋白表达水平高于Ⅱ级、Ⅲ级,差异均有统计学意义;PAX8蛋白表达与年龄、病理学类型相关性不明显,差异无统计学意义;与病理学分级、瘤周水肿、浸润深度相关性明显,且病理学分期越高、瘤周水肿程度越高、浸润深度越深,PAX8蛋白阳性表达率越高,差异有统计学意义;PAX8阴性组总生存率及生存期均明显高于PAX8阳性组,差异有统计学意义.PAX8的表达水平与脑胶质瘤病理分级正相关,PAX8在脑胶质瘤的发生发展过程中起促进作用;PAX8低表达的脑胶质瘤患者能获得较好的预存率及生存期均明显高于PAX8阳性组.%To investigate the expression of PAX8 protein in glioma tissues and its correlation with clinical features and postoperative survival time of patients with glioma.98 patients with glioma diagnosed in Xinhua Hospital Affiliated to Dalian University were selected,and according to the 2016 WHO nervous system tumor classification standard the cases were divided into grade Ⅰ of 12 cases,grade Ⅱ of 18 cases,grade Ⅲ of 21 cases,grade Ⅳ of 47 cases.The expression of PAX8 protein in all patients with brain glioma was measured by enzyme-linked immunosorbent assay,Western Blot andImmunohistochemical method.The expression level of PAX8protein in patients with glioma of grade Ⅱ,Ⅲ and Ⅳ were higher than those in patients with glioma of grade Ⅰ,and the expression level of PAX8 protein in patients with glioma of grade Ⅲ was hi gher than that of patients with glioma of grade Ⅱ,and the expression level of PAX8 protein in patients with glioma of grade Ⅳ were higher than that of patients with glioma of grade Ⅱ and Ⅲ,and the differences were statistically significant.The correlation between the expression of PAX8 and age and pathological type was not obvious,and the difference was not statisticallysignificant.Theexpression of PAX8 was correlated with the pathological grading,peritumoral edema and infiltration depth.The higher pathological stages,the higher the degree of peritumoral edema and the higher infiltration depth,the higher positive expression of PAX8 protein,and the difference were statistically significant.The total survival rate and survival period of patients with PAX8-were significantly higher than that in patients with PAX8+,and the difference was statistically significant.The expression level of PAX8 protein is positively correlated with the pathological grade of glioma,and PAX8 plays an important role in the occurrence and development of glioma,and the glioma patients with low expression of PAX8 can get better prognosis.【期刊名称】《医学与哲学》【年(卷),期】2018(039)006【总页数】5页(P46-50)【关键词】PAX8;脑胶质瘤;临床特征;生存期【作者】孙飞;倪世慧;马艳娇;高言国【作者单位】大连大学附属新华医院神经外科辽宁大连 116021;大连大学附属新华医院神经外科辽宁大连 116021;大连大学附属新华医院神经外科辽宁大连116021;大连大学附属新华医院ICU 辽宁大连 116021【正文语种】中文【中图分类】R739.41脑胶质瘤是中国成人较为多见的恶性程度较高的中枢神经系统肿瘤，中国脑胶质瘤发病率逐年递增，从1992年～2005年，脑胶质瘤发病率的增长率为5.3%。
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全蛋白提取试剂盒（中）
货号：BC3711
规格：50T/100T
有效期：至少1年。
产品组成：
名称50T100T Storage
裂解液（中）50ml100ml2-8℃
磷酸酶抑制剂（100×）0.5ml1ml
-20℃
蛋白酶抑制剂（100×）0.5ml1ml
PMSF（100×）0.5ml1ml
产品说明：
本试剂盒用于哺乳动物组织和细胞中提取总蛋白，试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂，作用较为温和，可快速获得总蛋白，可用于免疫印迹实验等基础研究实验，由于含有上述的酶抑制剂，不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。
本品仅用于科研。
操作方法：
1、组织总蛋白的提取
1)在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和PMSF；混匀，放置在冰上备用；
2)称取0.1g的新鲜组织，放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处，用眼科剪将组织块尽可能的剪碎，然后加入
0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直至没有明显的组织块，这个过程注意冰上操作；
3)将组织匀浆液移入1.5ml的EP管中，4℃12000g离心30min；
4)吸取上清至新的管中；
5)进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
（提取好的蛋白建议保存于-80℃，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存。
）
2、细胞总蛋白的提取
1)裂解液的用量：107个细胞需要裂解液1ml；
2)贴壁细胞：弃去培养基，用冷的PBS洗两次，弃去PBS，然后加入计算好的细胞裂解液；在冰上用细胞
刮刀进行刮离细胞，将刮离的细胞裂解液移入EP管中，颠倒裂解20-30min。
3)悬浮细胞：4℃400g离心收集细胞，用冷的PBS洗两次细胞，同样按细胞数加入裂解液，涡旋10s，
放置冰上裂解10min，重复3-4次；
4)裂解完毕之后，将细胞裂解液4℃12000g离心30min；
5)将上清移入新的EP管中；进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
（提取好的蛋白建议保存于-80℃，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存。
）
注意事项：
1.实验过程，所有试剂都要需要预冷或者即融，保证操作过程中的低温环境。
2.PSMF（有毒）现用现加，因为PMSF在水溶液中会快速降解。