气相色谱与液相色谱 的比较(总结)

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高效液相色谱法与气相色谱法的异同点

高效液相色谱法与气相色谱法的异同点

高效液相色谱法与气相色谱法的异同点
高效液相色谱法(HPLC)和气相色谱法(GC)是两种常用的色谱分析技术,它们在很多方面有着相似之处,但也存在一些重要的异同点。

相同点:
1. 原理基础:HPLC和GC都是基于色谱技术原理进行分析的方法,通过样品在固定相上的分离和柱后检测,以实现对样品组分的定性和定量分析。

2. 色谱柱:两种方法都需要使用色谱柱,根据分析需要选择合适的柱材、柱长、柱内填料等参数。

异同点:
1. 原理差异:HPLC使用液相作为流动相,样品在固定相上通过向下流动的方式进行分离;GC使用气相作为流动相,样品在固定相上通过向上升华/蒸发的方式进行分离。

2. 适用性差异:HPLC适用于溶解性较好的化合物,包括有机化合物、药物、天然产物等;GC主要适用于易挥发性和热稳定性较好的样品,如气体、揮發性有机物等。

3. 检测器差异:HPLC常用的检测器包括紫外可见光谱检测器、荧光检测器、电化学检测器等;GC常用的检测器包括火焰离子检测器(FID)、氮磷检测器(NPD)、质谱检测器等。

4. 分离效果差异:由于液体的性质更容易充分覆盖样品分子的各种结构,使得HPLC的分离效果更好;而气相色谱的分离效果较差,相对于HPLC而言,GC
更加适合分离在液相色谱中无法分离的化学物质。

5. 分析速度差异:HPLC分析速度相对较慢,通常需要几分钟到几十分钟不等;GC分析速度较快,通常只需要几秒到几分钟不等。

综上所述,HPLC和GC方法在原理、适用性、检测器、分离效果和分析速度等方面存在一定的异同点,根据不同的分析需求和样品特性选择合适的方法进行分析。

简述气相色谱和液相色谱的异同点

简述气相色谱和液相色谱的异同点

简述气相色谱和液相色谱的异同点简述气相色谱和液相色谱的异同点气相色谱(Gas Chromatography,简称GC)和液相色谱(Liquid Chromatography,简称LC)是两种常见的色谱分离技术,它们在分析化学和生化领域扮演着重要的角色。

虽然它们都属于色谱技术的范畴,但在操作原理、应用范围和分离过程中有着一些明显的异同点。

1. 操作原理气相色谱是一种基于气相的分离技术。

样品在气相色谱柱中被蒸发,然后通过液体定量器输送到柱上,样品在进样器中被加热至挥发,进入柱子。

样品在与柱内流动相的相互作用下,通过柱子的分离介质几次来回分离、吸附和解吸各个组分,并最终从柱子中分离出来。

分离后的物质可以通过检测器进行定性和定量分析。

液相色谱是一种基于液相的分离技术。

样品被溶解于流动相中,通过液体定量器输送到柱上,样品与固定相在柱内进行吸附、解吸和再分配的循环过程,不同组分的相互作用力不同,导致分离效果。

液相色谱分为常压液相色谱和高效液相色谱。

常压液相色谱采用压力,将溶剂从固相柱中流过,带着待分离的物质分离。

而高效液相色谱则利用高压力将溶剂通过柱子进行分离。

2. 应用范围气相色谱主要应用于分析无水和揮发性物质,如气体、蒸馏物、挥发油、环境样品中的有机物等。

气相色谱广泛应用于食品、药品、石油等领域。

液相色谱更适用于分析一些疏水性化合物以及带有极性基团的化合物,如有机酸、酮、醇、氨基酸、药物等。

液相色谱可用于食品、医药、环境、生物等多个领域。

3. 分离过程气相色谱的分离过程是物质在柱子上吸附、解吸和再分配的循环过程。

理想的气相色谱柱应该具有高的站相、固定相的稳定性和高的分离效率。

流量和温度是影响分离效果的重要因素,需要根据样品的性质进行选择和调节。

液相色谱是通过溶液内溶质与固液界面接触,扩散、分配、吸附、解吸和再分配过程的循环。

分离性能主要取决于固液界面的特性和条件,选择适当的溶剂、固相柱和流速等是获得良好分离效果的关键参数。

最新气相色谱与液相色谱-的比较(总结)

最新气相色谱与液相色谱-的比较(总结)

液相色谱和气相色谱相比较,在以下几个方面具有优越性:(1)气相色谱不适用于不挥发物质和对热不稳定物质,而液相色谱却不受样品的挥发性和热稳定性的限制。

有些样品因为难以汽化而不能通过柱子,热不稳定的物质受热会发生分解,也不适用于气相色谱法。

这使气相色谱法的使用范围受到了限制。

据统计,目前气相色谱法所能分析的有机物,只占全部有机物的15%~20%。

另一方面,液相色谱却不受样品的挥发性和热稳定性的限制。

所以液相色谱非常适合于分离生物、医药有关的大分子和离子型化合物,不稳定的天然产物,种类繁多的其它高分子及不稳定的化合物。

(2)对于很难分离的样品,用液相色谱常比用气相色谱容易完成分离,主要有以下三个方面的原因:①液相色谱中,由于流动相也影响分离过程,这就对分离的控制和改善提供了额外的因素。

而气相色谱中的载气一般不影响分配,也就是说,在液相色谱中,有两个相与样品分子发生选择性的相互作用。

②液相色谱中具有独特效能的柱填料(固定相)的种类较多,这样就使固定相的选择余地更大,从而增加了分离的可能性。

③液相色谱使用较低的分离温度,分子间的相互作用在低温时更为有效,因此降低温度一般会提高色谱分离效率。

(3)和气相色谱相比,液相色谱对样品的回收比较容易,而且是定量的,样品的各个组分很容易被分离出来。

因此,在很多场合,液相色谱不仅作为一种分析方法,而且可以作为一种分离手段,用以提纯和制备具有中等纯度的单一物质。

在气相色谱中所分离出的各样品组分虽也可以回收,但一般都不太方便,而且定量性差。

液相色谱法由于具有这些气相色谱法不具备的优点,因此在许多领域得到广泛的应用。

气相色谱和液相色谱相比各有什么特点呢?让我们从以下几个方面进行考察:一、流动相GC用气体作流动相,又叫载气。

常用的载气有氦气、氮气和氢气。

与HPLC相比,GC流动相的种类少,可选择范围小,载气的主要作用是将样品带入GC系统进行分离,其本身对分离结果的影响很有限。

而在HPLC中,流动相种类多,且对分离结果的贡献很大。

气相色谱法与液相色谱法的异同点

气相色谱法与液相色谱法的异同点

气相色谱法与液相色谱法的异同点气相色谱法(Gas Chromatography,简称GC)和液相色谱法(Liquid Chromatography,简称LC)是两种常用的色谱技术,它们在分离、检测和定量分析化合物方面有一些异同点。

以下是它们的主要异同点:相同点:1. 色谱原理:两者都基于色谱原理,通过样品在移动相和固定相之间的差异分离化合物。

移动相是流动的,它携带样品通过固定相,而固定相则是固定在柱中的物质。

2. 分离原理:它们的分离原理都依赖于化合物在移动相和固定相之间的相互作用。

化合物在两相中的分配系数不同,导致它们以不同速率通过柱,从而实现分离。

3. 检测器:无论是GC还是LC,都有多种检测器可用于检测通过柱的化合物。

常见的检测器包括紫外-可见光谱检测器(UV-Vis)、荧光检测器、质谱检测器等。

异同点:1. 工作状态:最明显的区别在于工作状态。

GC使用气体作为移动相,因此分离挥发性和气体化合物效果较好,适用于研究揮发性物质。

而LC使用液体作为移动相,适用于分离不挥发或不易挥发的化合物。

2. 分离效率:由于液相色谱法使用的移动相是液体,相对来说分离效果较好,分离的峰较尖锐,分离度较高。

而气相色谱法由于移动相为气体,峰可能较宽,分离度相对较低。

3. 样品适用性:由于GC适用于挥发性样品,因此在分析揮发性有机物、某些无机气体以及气体混合物时非常有效。

而液相色谱法则更适用于分析非挥发性有机物、生物大分子(如蛋白质、多肽)等。

4. 柱类型:由于液相色谱法柱中需要通过流动液体,柱材料和填充剂更加多样化,例如常见的反相柱、离子交换柱、凝胶柱等。

而气相色谱法柱通常使用较为坚固的填充物,如硅胶或聚酰胺。

综上所述,GC和LC在不同类型的化合物分析和应用中有各自的优势,研究人员和分析师可以根据具体的实验要求和待测化合物的性质选择合适的色谱技术。

气相与液相的区别

气相与液相的区别

气相与液相的区别(总3页) -CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1-CAL-本页仅作为文档封面,使用请直接删除气相色谱仪主要用来分析气相样品和易挥发的热稳定样品,如弱极性小分子有机物;而液相色谱主要用来分析高沸点或若不稳定样品,如核酸等。

两种色谱方法,液相色谱仪用液体作流动相,气相色谱仪用气体作为流动相。

进样的话,液相色谱仪的液体样品直接进入色谱柱,气相色谱仪的液体样品必须气化才能进入。

气相色谱仪现在所用色谱柱一般是空心的毛细管色谱柱,检测器也是破坏型的。

液相色谱仪的色谱柱一般是填充柱,检测器非破坏型。

一、分离原理:1.气相:气相色谱是一种物理的分离方法。

利用被测物质各组分在不同两相间分配系数(溶解度)的微小差异,当两相作相对运动时,这些物质在两相间进行反复多次的分配,使原来只有微小的性质差异产生很大的效果,而使不同组分得到分离。

2.液相:高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达´107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测。

二、应用范围:1.气相:气相色谱法具有分离能力好,灵敏度高,分析速度快,操作方便等优点,但是受技术条件的限制,沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。

一般对500℃以下不易挥发或受热易分解的物质部分可采用衍生化法或裂解法。

2.液相:高效液相色谱法,只要求试样能制成溶液,而不需要气化,因此不受试样挥发性的限制。

对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大(大于 400 以上)的有机物(些物质几乎占有机物总数的 75% ~ 80% )原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。

据统计,在已知化合物中,能用气相色谱分析的约占20%,而能用液相色谱分析的约占70~80%。

气相色谱与液相色谱 的比较(总结)

气相色谱与液相色谱 的比较(总结)

液相色谱和气相色谱相比较,在以下几个方面具有优越性:(1)气相色谱不适用于不挥发物质和对热不稳定物质,而液相色谱却不受样品的挥发性和热稳定性的限制。

有些样品因为难以汽化而不能通过柱子,热不稳定的物质受热会发生分解,也不适用于气相色谱法。

这使气相色谱法的使用范围受到了限制。

据统计,目前气相色谱法所能分析的有机物,只占全部有机物的15%~20%。

另一方面,液相色谱却不受样品的挥发性和热稳定性的限制。

所以液相色谱非常适合于分离生物、医药有关的大分子和离子型化合物,不稳定的天然产物,种类繁多的其它高分子及不稳定的化合物。

(2)对于很难分离的样品,用液相色谱常比用气相色谱容易完成分离,主要有以下三个方面的原因:①液相色谱中,由于流动相也影响分离过程,这就对分离的控制和改善提供了额外的因素。

而气相色谱中的载气一般不影响分配,也就是说,在液相色谱中,有两个相与样品分子发生选择性的相互作用。

②液相色谱中具有独特效能的柱填料(固定相)的种类较多,这样就使固定相的选择余地更大,从而增加了分离的可能性。

③液相色谱使用较低的分离温度,分子间的相互作用在低温时更为有效,因此降低温度一般会提高色谱分离效率。

(3)和气相色谱相比,液相色谱对样品的回收比较容易,而且是定量的,样品的各个组分很容易被分离出来。

因此,在很多场合,液相色谱不仅作为一种分析方法,而且可以作为一种分离手段,用以提纯和制备具有中等纯度的单一物质。

在气相色谱中所分离出的各样品组分虽也可以回收,但一般都不太方便,而且定量性差。

液相色谱法由于具有这些气相色谱法不具备的优点,因此在许多领域得到广泛的应用。

气相色谱和液相色谱相比各有什么特点呢?让我们从以下几个方面进行考察:一、流动相GC用气体作流动相,又叫载气。

常用的载气有氦气、氮气和氢气。

与HPLC相比,GC流动相的种类少,可选择范围小,载气的主要作用是将样品带入GC系统进行分离,其本身对分离结果的影响很有限。

而在HPLC中,流动相种类多,且对分离结果的贡献很大。

气相与液相色谱的异同点

气相与液相色谱的异同点

气相色谱法与高效液相色谱法的异同点气相色谱法和高效液相色谱法是色谱法中的一种,因流动相物态不同,才有此分类。

一、气相色谱法与高效液相色谱法的不同点1、流动相气相色谱法的流动相是气体(又称载气),液相色谱法的流动相为液相(又称淋洗液)。

2、分类(按固定相不同)气相色谱法中,按固定相不同可分为:气---固色谱法;气---液色谱法。

高效液相色谱法中,按固定相不同可分为:液---固色谱法;液---液色谱法。

3、固定相气固(液固)色谱的固定相:多孔性的固体吸附剂颗粒,如活性炭,活性氧化铝,硅胶等。

气液(液液)色谱的固定相:化学惰性的固体微粒(担体),固定液+担体。

4、特点气相色谱法的特点:高效能、选择性好、灵敏度高、操作简单、应用广泛。

高效液相色谱法的特点:高压、高速、高效、高灵敏度。

5、应用范围气相色谱法的应用范围:对于难挥发和热不稳定的物质是不适用的。

高效液相色谱法的应用范围:从原则上说,高沸点难挥发且相对分子质量大的有机物都适用。

6、分离机理(1)气相色谱法:气相色谱是一种物理的分离方法。

利用被测物质各组分在不同两相间分配系数(溶解度)的微小差异,当两相作相对运动时,这些物质在两相间进行反复多次的分配,使原来只有微小的性质差异产生很大的效果,而使不同组分得到分离。

(2)液相色谱法:高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测。

概括为:气固色谱的分离机理: 吸附与脱附的不断重复过程;气液色谱的分离机理:气液(液液)两相间的反复多次分配过程。

液固色谱的分离机理:溶质分子和溶剂分子对吸附剂活性表面的竞争吸附。

7、仪器构造(1)气相色谱法:由载气系统、进样系统、色谱柱、检测系统和数据处理系统组成。

进样系统、色谱柱和检测器的温度均在控制状态。

(2)液相色谱法:高效液相色谱仪主要由进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统组成。

气相色谱与液相色谱

气相色谱与液相色谱

.一、分别原理:1.气相:气相色谱是一种物理的分别方法。

利用被测物质各组分在不一样两相间分派系数(溶解度)的渺小差异,当两相作相对运动时,这些物质在两相间进行频频多次的分派,使本来只有渺小的性质差异产生很大的成效,而使不一样组分获取分别。

2.液相:高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达′107Pa);色谱柱是以特别的方法用小粒径的填料填补而成,进而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时柱后连有高敏捷度的检测器,可对流出物进行连续检测。

二、应用范围:1.气相:气相色谱法拥有分别能力好,敏捷度高,剖析速度快,操作方便等优点,可是受技术条件的限制,沸点太高的物质或热稳固性差的物质都难于应用气相色谱法进行剖析。

一般对500℃以下不易挥发或受热易分解的物质部分可采纳衍生化法或裂解法。

2.液相:高效液相色谱法,只需求试样能制成溶液,而不需要气化,所以不受试样挥发性的限制。

关于高沸点、热稳固性差、相对分子量大(大于400以上)的有机物(些物质几乎据有机物总数的75%~80%)原则上都可应用高效液相色谱法来进行分别、剖析。

据统计,在已知化合物中,能用气相色谱剖析的约占20%,而能用液相色谱剖析的约占70~80%。

三、仪器结构:1.气相:由载气源、进样部分、色谱柱、柱温箱、检测器和数据办理系统构成。

进样部分、色谱柱和检测器的温度均在控制状态。

柱箱:色谱柱是气相色谱仪的心脏,样品中的各个组份在色谱柱中经过频频多次分派后获取分别,进而达到剖析的目的,柱箱的作用就是安装色谱柱。

因为色谱柱的两头分别连结进样器和检测器,所以进样器和检测器的下端(接头)均插入柱箱。

柱箱能够安装各样填补柱和毛细管柱,并且操作方便。

色谱柱(样品)需要在必定的温度条件下工作,所以采纳微机对柱箱进行温度控制。

并且因为设计合理,柱箱内的梯度很小。

关于一些成份复杂、沸程较宽的样品,柱箱还可进行三阶程序升温控制。

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液相色谱和气相色谱相比较,在以下几个方面具有优越性:(1)气相色谱不适用于不挥发物质和对热不稳定物质,而液相色谱却不受样品的挥发性和热稳定性的限制。

有些样品因为难以汽化而不能通过柱子,热不稳定的物质受热会发生分解,也不适用于气相色谱法。

这使气相色谱法的使用范围受到了限制。

据统计,目前气相色谱法所能分析的有机物,只占全部有机物的15%~20%。

另一方面,液相色谱却不受样品的挥发性和热稳定性的限制。

所以液相色谱非常适合于分离生物、医药有关的大分子和离子型化合物,不稳定的天然产物,种类繁多的其它高分子及不稳定的化合物。

(2)对于很难分离的样品,用液相色谱常比用气相色谱容易完成分离,主要有以下三个方面的原因:①液相色谱中,由于流动相也影响分离过程,这就对分离的控制和改善提供了额外的因素。

而气相色谱中的载气一般不影响分配,也就是说,在液相色谱中,有两个相与样品分子发生选择性的相互作用。

②液相色谱中具有独特效能的柱填料(固定相)的种类较多,这样就使固定相的选择余地更大,从而增加了分离的可能性。

③液相色谱使用较低的分离温度,分子间的相互作用在低温时更为有效,因此降低温度一般会提高色谱分离效率。

(3)和气相色谱相比,液相色谱对样品的回收比较容易,而且是定量的,样品的各个组分很容易被分离出来。

因此,在很多场合,液相色谱不仅作为一种分析方法,而且可以作为一种分离手段,用以提纯和制备具有中等纯度的单一物质。

在气相色谱中所分离出的各样品组分虽也可以回收,但一般都不太方便,而且定量性差。

液相色谱法由于具有这些气相色谱法不具备的优点,因此在许多领域得到广泛的应用。

气相色谱和液相色谱相比各有什么特点呢?让我们从以下几个方面进行考察:一、流动相GC用气体作流动相,又叫载气。

常用的载气有氦气、氮气和氢气。

与HPLC相比,GC流动相的种类少,可选择范围小,载气的主要作用是将样品带入GC系统进行分离,其本身对分离结果的影响很有限。

而在HPLC中,流动相种类多,且对分离结果的贡献很大。

换一个角度看,GC的操作参数优化相对HPLC要简单一些。

此外,GC载气的成本要低于HPLC流动相的成本。

二、固定相因为GC的载气种类相对少,故其分离选择性主要通过不同的固定相来改变,尤其在填充柱GC中,固定相常由载体和涂敷在其表面的固定液组成,这对分离有决定性的影响,所以,导致了种类繁多的GC 固定相的开发研究。

迄今已有数百种GC固定相可供我们选择使用,但常用的HPLC固定相也就十几种。

故LC在很大程度上要靠选用不同的流动相来改变分离选择性。

当然,毛细管GC常用的固定相也不过十几种。

在实际分析中,GC一般是选用一种载气,然后通过改变色谱柱(即固定相)以及操作参数(柱温和载气流速等)来优化分离,而LC则往往是选定色谱柱后,通过改变流动相的种类和组成以及操作参数(柱温和流动相流速等)来优化分离。

三、分析对象GC所能直接分离的样品是可挥发、且热稳定的,沸点一般不超过500℃。

据有关资料统计,在目前已知的化合物中,有20%~25%可用GC直接分析,其余原则上均可用LC分析。

也就是说GC的分析对象远没有LC多。

需要指出的是,有些虽然不能用GC直接分析的样品,通过特殊的进样技术,如顶空进样和裂解进样,也可用GC间接分析。

比如高分子材料的裂解色谱就是如此。

这在一定程度上扩大了GC分析对象的范围。

此外,GC比LC更适合于永久气体的分析。

四、检测技术GC常用的检测技术有多种,比如热导检测器(TCD)、火焰离子化检测器(FID)、电子俘获检测器(ECD)、氮磷检测器(NPD)等,其中FID对大部分有机化合物均有响应,且灵敏度相当高,最小检测限可达纳克级。

而在LC中尚无通用性这么好的高灵敏度检测器。

商品LC 仪器常配的也就是紫外-可见光吸收检测器(UV-Vis)和示差折光检测器(RI)。

前者的通用性远不及GC中的FID,后者的灵敏度又较低,且不适于梯度洗脱。

当然,不论GC还是LC,都有一些高灵敏度的选择性检测器,GC有ECD和NPD等,LC有荧光和电化学检测器。

较为理想的检测器应该首推MS,但在这一点上,GC目前要优于LC。

因为GC流动相的特点,它与MS的在线联用已不存在任何问题,特别是毛细管GC与MS的联用已成为常规分析方法。

而LC与MS的联用就受到了流动相的限制。

虽然目前已有多种接口,如离子束、热喷雾、电喷雾等,但流动相的选择还是受到明显的限制。

五、制备分离在新产品的研究开发过程中,或在未知物的定性鉴定工作中,常需要收集色谱分离后的组分作进一步分析,而某些高纯度的生化试剂则是直接用色谱分离来制备的。

就这一点而言,GC在原理上应该是有优势的,因为收集馏分后载气很容易除去。

然而,由于GC的柱容量远不及LC,如果用GC作制备,那是相当费时的。

因此,制备GC的实用价值很有限。

制备LC则有很广泛的应用。

比较气相色谱法与高效液相色谱法怎样区别比较气相色谱法与高效液相色谱法怎样区别一、分离原理: 1.气相:气相色谱是一种物理的分离方法。

利用被测物质各组分在不同两相间分配系数(溶解度)的微小差异,当两相作相对运动时,这些物质在两相间进行反复多次的分配,使原来只有微小的性质差异产生很大的效果,而使不同组分得到分离。

2.液相:高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达4.9´107P a);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测。

二、应用范围: 1.气相:气相色谱法具有分离能力好,灵敏度高,分析速度快,操作方便等优点,但是受技术条件的限制,沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。

一般对5 00℃以下不易挥发或受热易分解的物质部分可采用衍生化法或裂解法。

2.液相:高效液相色谱法,只要求试样能制成溶液,而不需要气化,因此不受试样挥发性的限制。

对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大(大于 400 以上)的有机物( 些物质几乎占有机物总数的 7 5% ~ 80% )原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。

据统计,在已知化合物中,能用气相色谱分析的约占20%,而能用液相色谱分析的约占70~80%。

三、仪器构造:1.气相:由载气源、进样部分、色谱柱、柱温箱、检测器和数据处理系统组成。

进样部分、色谱柱和检测器的温度均在控制状态。

1.1 柱箱:色谱柱是气相色谱仪的心脏,样品中的各个组份在色谱柱中经过反复多次分配后得到分离,从而达到分析的目的,柱箱的作用就是安装色谱柱。

由于色谱柱的两端分别连接进样器和检测器,因此进样器和检测器的下端( 接头) 均插入柱箱。

柱箱能够安装各种填充柱和毛细管柱,并且操作方便。

色谱柱( 样品)需要在一定的温度条件下工作,因此采用微机对柱箱进行温度控制。

并且由于设计合理,柱箱内的梯度很小。

对于一些成份复杂、沸程较宽的样品,柱箱还可进行三阶程序升温控制。

且程序设定后自动运行无需人工干预,降温时还能自动后开门排热。

1.2 进样器:进样器的作用是将样品送入色谱柱。

如果是液体样品,进样器还必须将其汽化,因此采用微机对进样器进行温度控制。

根据不同种类的色谱柱及不同的进样方式,共有五种进样器可供选择: 1.填充柱进样器2.毛细管不分流进样器附件3.毛细管分流进样器附件4.毛细管分流/不分流进样器5.六通阀气体进样器1.3检测器: 检测器的作用是将样品的化学信号转化为物理信号( 电信号) 。

检测器也需要在一定的温度条件下才能正常工作,因此采用微机对检测器进行温度控制。

根据各种样品的化学物理特性,共有五种检测器可供选择: 1.氢火焰离子化检测器(FID) 2.热导检测器(TCD) 3.电子捕获检测器(ECD) 4.氮磷检测器(NPD) 5.火焰光度检测器(FPD) 1.4 数据处理系统该系统可对测试数据进行采集、贮存、显示、打印和处理等操作,使样品的分离、制备或鉴定工作能正确开展。

2.液相:高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统组成。

2.1 进样系统一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作,进样量是恒定的。

这对提高分析样品的重复性是有益的。

2.2 输液系统该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。

高压泵的一般压强为l.47~4.4X107Pa,流速可调且稳定,当高压流动相通过层析柱时,可降低样品在柱中的扩散效应,可加快其在柱中的移动速度,这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。

流动相贮存错和梯度仪,可使流动相随固定相和样品的性质而改变,包括改变洗脱液的极性、离子强度、PH值,或改用竞争性抑制剂或变性剂等。

这就可使各种物质(即使仅有一个基团的差别或是同分异构体)都能获得有效分离。

2.3 分离系统该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。

色谱柱一般长度为10~50cm(需要两根连用时,可在二者之间加一连接管),内径为2~5mm,由"优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成,住内装有直径为5~10μm粒度的固定相(由基质和固定液构成).固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成,它们都有惰性(如硅胶表面的硅酸基因基本已除去)、多孔性(孔径可达1000?)和比表面积大的特点,加之其表面经过机械涂渍(与气相色谱中固定相的制备一样),或者用化学法偶联各种基因(如磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或各种长度碳链的烷基等)或配体的有机化合物。

因此,这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性。

例如,在多孔性硅胶表面偶联豌豆凝集素(PSA)后,就可以把成纤维细胞中的一种糖蛋白分离出来。

另外,固定相基质粒小,柱床极易达到均匀、致密状态,极易降低涡流扩散效应。

基质粒度小,微孔浅,样品在微孔区内传质短。

这些对缩小谱带宽度、提高分辨率是有益的。

根据柱效理论分析,基质粒度小,塔板理论数N就越大。

这也进一步证明基质粒度小,会提高分辨率的道理。

再者,高效液相色谱的恒温器可使温度从室温调到60C,通过改善传质速度,缩短分析时间,就可增加层析柱的效率。

2.4 检测系统高效液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种。

(1)紫外检测器该检测器适用于对紫外光(或可见光)有吸收性能样品的检测。

其特点:使用面广(如蛋白质、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等均可使用);灵敏度高(检测下限为10-10g/ml);线性范围宽;对温度和流速变化不敏感;可检测梯度溶液洗脱的样品。

(2)示差折光检测器凡具有与流动相折光率不同的样品组分,均可使用示差折光检测器检测。

,糖类化合物的检测使用此检测系统。

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