邻、间和对羟基苯甲酸的荧光性质研究及定量分析(2014.4)
食品中对羟基苯甲酸酯类的检测
食品中对羟基苯甲酸酯类的检测摘要：文章采用超声提取-高效液相色谱法同时测定食品中3种对羟基苯甲酸酯（对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯）含量的方法。
对羟基苯甲酸酯类属于防腐剂，按gb/t5009.31-2003国家推荐方法检测[1]，样品提取比较繁琐、费时，且回收效果欠佳。
本文利用较为常见的紫外检测器通过优化条件，摸索出一个简捷、快速、经济、灵敏，又能保证一定精度的测定方法。
本方法加标回收率在86.08%～112.71%之间，线性系数r>0.9998，检出限可达0.10ug/ml，分析时间短，完全能够满足分析要求，可广泛应用于食品中对羟基苯甲酸酯类检测分析。
关键词：对羟基苯甲酸酯类；高效液相色谱法中图分类号：o657.7+2 文献标识码：a 文章编号：1674-0432（2012）-10-0064-21 实验部分1.1 仪器和试剂1.1.1 仪器 shimadzu lc 10vp plus高效液相色谱系统（日本shimadzu公司），配紫外检测器及lc solution色谱工作站；分析天平：感量0.1mg；氮吹仪：美国organomation n-evap112型；均质机：ikar werke t25型均质机；溶剂过滤装置；0.45μm和0.22μm过滤膜和过滤头；milli-q超纯水机。
1.1.2 试剂甲醇、乙腈为hplc级；乙醇为分析纯；水为超纯水。
标准品：对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯，纯度为99.0%，美国进口，购于上海安谱。
1.2 标准溶液的配制[2]标准贮备液：精密称取三种标准物质0.05g，用无水乙醇溶解并定容于50ml容量瓶中，配制成浓度为1mg/ml的标准贮备液，贮于4℃冰箱中备用。
标准使用液：用刻度吸管准确吸取三种标准贮备液，根据需要用无水乙醇配制成不同浓度的标准溶液系列，待用。
1.3 色谱条件色谱柱：diamonsil c18，粒度5μm，4.6mm×250mm（id×l）；检测波长：254nm；流速：1.0ml/min；进样量：20 μl；流动相：水-乙腈（体积比为45：55）；柱温：室温。
荧光分析法测定邻—羟基苯甲酸和间—羟基苯甲酸
内 蒙古 石 油化 工
２ １ 年第 １ 期 ０１ ３
荧 光 分 析 法 测 定邻 一 羟基 苯 甲酸和 间一 羟基 苯 甲酸
刘 丽 静
（ 包头师范学院化学学院 ， 内蒙古 包头 ０ ４３ ） １ ０ ０
摘 要 ： 用荧光 光度计 测定邻 一羟 基苯 甲酸 （ 称水杨 酸） 使 亦 和二 组分 混合 物的 荧光 强度 ， 邻一 羟基 苯 甲酸 （ 亦称 水杨 酸） 间一 羟基 苯 甲酸分 子组 成相 同 ， 和 均含一个 能发 射 荧光的 苯环 ， 因其取 代基 的位 但 置 不 同而具 不 同的 荧光性质 。 Ｈ一１ 在ｐ ２的碱 性溶 液 中， 者在 ４ ０ ｍ 附近 紫外光 的激 发 下均会发 射 荧 二 １ｎ 光； ｐ 在 Ｈ＝５ ５的近 中性 溶液 中 ， ． 问一 羟 基 苯甲酸 不发 荧光 ， 邻一 羟基 苯 甲酸 因分 子 内形成 氢键 增 加分
～
新 技 术 的引 入 ， 各式 各 样 新型 荧光 分 析仪 器 不 断 问 世， 荧光 分析 法 发 展迅 速 ， 用面 不 断 拓宽 ， 应 尤其 是 在生物 试样 的分 析及 生命科 学研 究方面 展现 出广 阔
的前 景 。 １ 基 本原 理 １ １ 分 子 荧光的 产生 ． 当具 有 一 定 能量 的光 子 作 用于 物 质 时 ， 质 可 物 能部 分或 全部 地 吸入射 光的能 量 。在物质 吸收入 射 光 的过程 中 ， 光子 的能量 传递给 物质分 子 ， 导致分 子 中的 电子 从 能 量 较 低 的 能级 跃 迁 至 能 量 较 高 的 能 级 。 吸收 的光子 能量 ， 所 等于 跃迁 所涉及 的两个 能级 间的能 量差 。 这种 吸收 了光子 能量 ， 电子 处于较高 能 级 的分 子 ， 为 电子激 发态 分子 。 称 处于激 发态 的分子 是 不 稳 定 的 ， 可 能通 过辐 射 跃迁 或 非 辐射 跃迁 等 它 分 子 内或分子 间 的去 活化 过 程 ， 失 多 余 的能量 而 丧
基础医学-----邻间对苯甲酸的酸性比较
邻间对苯甲酸的酸性比较
诱导效应
• 在有机化合物分子中，由于电负性不同的取代基（原子 或原子团）的影响，使整个分子中的成键电子云密度向 某一方向偏移，使分子发生极化的效应，叫诱导效应。 由极性键所表现出的诱导效应称做静态诱导效应，而在 化学反应过程中由于外电场（如试剂、溶剂）的影响所 产生的极化键所表现出的诱导效应称做动态诱导效应。 诱导效应只改变键内电子云密度分布，而不改变键的本 性。且与共轭效应相比，无极性交替现象。
共轭效应
• 共轭效应 (conjugated effect) ，又称离域效应，是指共 轭体系中由于原子间的相互影响而使体系内的π电 子 （或p电子）分布发生变化的一种电子效应。
• 凡共轭体系上的取代基能降低体系的π电子云密度，则 这些基团有吸电子共轭效应，用-C表示，如-COOH，CHO，-COR；
只有诱导效应无共轭的取代基团
• Eg：F、Cl、Br、I • 诱导效应特点： • 它的传播影响方向，电子云是沿着原子链传递
的。 • 它的影响力，它随着距离的增长，作用迅速下
降，一般只会考虑三根键的影响
只有共轭效应无诱导效应的基团
• Eg:对给电子基团来说，仅有共轭效应而无诱导效 应．这就是超共轭效应，其大小排列顺序为：（CH3） 3C->（CH3）2CH->CH3CH2-。
第二类定位基：即间位定位基，特征：使新进入的取代基主要进入它的间位，钝化苯环 吸电子能力
实验十一 对羟基苯甲酸酯类物质的测定--HPLC法、GC---白酒中酒精度的测定
实验报告课程名称：环境监测实验实验类型：综合实验实验项目名称：对羟基苯甲酸酯类物质的测定--HPLC法、GC---白酒中酒精度的测定实验地点：环资B座实验日期：2018年12月06日一、实验目的和要求1.掌握HPLC的保留值定性方法与归一法定量2.熟悉液相色谱仪的操作过程二、实验内容和原理<对羟基苯甲酸酯类物质的测定--HPLC法>1.高效液相色谱HPLC：高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。
高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。
该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用。
高效液相色谱法有“四高一广”的特点：高压、高速、高效、高灵敏度、应用范围广。
其组成包含“高压输液泵”、“色谱柱”、“进样器”、“检测器”、“馏分收集器”以及“数据获取与处理系统”等部分。
2.测定原理：在一定的实验条件下，组分的保留值保持恒定，测得的来知物的各纽分保留时间，与已知纯物质各组分的保留时间进行对照，即可确定未知物中各纽分存在与否。
这种利用纯物质对照进行定性的方法，适用于来源已知。
且组分简单的混合物。
3.归一法定量：要求试样中的各个组分都能得到完全分离。
并且在色谱图上应都能出峰，计算公式:c1=fiAi/ΣfiAi*100。
因为对羟基苯甲酸酯类属于同系物，它们在紫外光度检测器上具有相同的校正因子，故上式可简化为: c1=Ai/ΣAi*100< GC---白酒中酒精度的测定 >1. 气相色谱：气相色谱（gas chromatography 简称GC）是指用气体作为流动相的色谱法。
荧光分析法测定邻-羟基苯甲酸和间-羟基苯甲酸实验
实验五 荧光分析法测定邻-羟基苯甲酸和间-羟基苯甲酸学号36010712 姓名 张中豪 实验日期 2009 年 3 月 16 日 第 一 组同组姓名 张雪、张琳琳、傅磊、洪延 1. 学习荧光分析法的基本原理和操作；教师评定 .【实验目的】2. 用荧光分析法进行多组分含量的测定。
【实验原理】1、荧光分析法原理：当被测物质受到光照后，被测物分子吸收了具有特征频率的辐射能，分子从基态上升到激发态，分子在较高能级的激发态时，它可能处于激发态中各种振动状态的一种。
然而由于分子通过与溶剂分子、同类分子或其他分子的碰撞，而失去振动能级，降低至激发态时的最低振动能级，在此过程中并不发光。
但当分子从激发态的最低振动能级，即第一电子激发态的最低振动能级跃迁至基态的各个不同的振动能级时，则以光的形式辐射出能量，所辐射出的光既是荧光。
荧光物质的荧光强度与其浓度、分子结构和化学环境（如体系的pH 、温度）有关。
而且与体系所吸收的激发光强度成正比，则：0()F I I =Φ−式中，F 为荧光强度；0I 为入射光的强度；I 为通过厚度为b 的介质后的光强度；Φ为量子效率，为发射的光子与吸收的光子之比。
又比尔定律可得：0(110)bc F I ε−=Φ−式中，ε为荧光分子的摩尔吸光系数；b 为液槽的厚度；c 为荧光物质的浓度。
对于很稀的溶液，投射到样品溶液上被吸收的激发光不到2%时，即bc ε<0.05时，则上式可近似写为：02.303F I bc ε=Φ当入射光强度一定时，实验条件一定时，则 ： F Kc =即在低浓度时，荧光强度与荧光物质的浓度呈线性关系，这就是荧光定量分析的基础。
荧光强度和溶液浓度呈线性关系只限于极稀的溶液，对于较浓的溶液，其吸光度超过0.05时荧光强度与浓度的线性关系将发生偏离。
2、激发光谱和发射光谱： （1）激发光谱：荧光是光致发光，因此必须选择合适的激发光波长，这可以从它们的激发光谱曲线来确定。
《分子间作用力与物质性质第二课时》教案3
《分子间作用力与物质性质》教案课前预习区1. ______________________________________________ H Cl HBr HI 分子熔沸点由低到高的排列顺序为 _____________________________________________2•决定以上分子熔沸点高低的因素是什么？ 3•决定范德华力大小的因素是什么？4•写出氧族元素氢化物的熔、沸点变化趋势。
5•—定量的水变冰时体积如何变化？课堂互动区【问题探究1】请结合下列图像和数据分析下列问题:⑴为何NH 3、出0、HF 的熔沸点比同主族相邻元素的氢化物的熔沸点高呢? ⑵为什么 出0分子间能形成氢键，而 CH 4分子间难形成氢键？⑶为什么NH 3分子间能形成氢键，而 HCI 分子间难形成氢键?(4)元糸 电负性 原子半径/pm元糸 电负性 原子半径/pm F 4.0 71 CI 3.0 99 0 3.5 73 S 2.5 102 N 3.0 75 P2.1106C2.577一、氢键和物质的性质1、 氢键的特点：比化学键 _____________ ，比范德华力 __________________2、 形成氢键必备的条件⑴ ____________________________ T _____________________ ； ⑵ ------------------------------------------------- T ------------------------------------- 。
一些氢化物的沸点-150345 周期符合上述条件的X、Y原子主要是【比一比，想一想】在下列物质中分子之间能否形成氢键？若不能形成氢键，是因为不具备哪一条件？①乙醇②甲醛【问题探究2】令邻羟基苯甲酸和对羟基苯甲酸是同分异构体。
其中，邻羟基苯甲酸的熔点为159 C,对羟基苯甲酸的熔点为213C。
荧光分析法在环境有机污染物分析中的运用
荧光分析法在环境有机污染物分析中的运用随着包括有机化工、医药工业以及石油等诸多化工产业的不断发展，加上各类化学药剂的广泛使用，使得有机污染物已经成为环境污染中不容忽视的重要问题。
因此，采取有效措施对有机污染物进行科学分析的意义也就日益加大。
有机污染物的分析对象包括有机氯、胺类化合物、表面活性剂、砷、汞、多环芳烃等，相应的分析检测手段也繁复多样，这其中荧光分析法因其高灵敏度，以及仪器投入资金较少等优势，逐步得到环境科研者的广泛关注。
以下文章就对包括常规荧光分析法、导数荧光光谱法、固体表面荧光光谱法等多种荧光分析法在有机污染物分析中的应用展开分析，具体如下。
1 直接荧光分析法及其在有机物污染分析中的应用此种方法是目前最为常用的荧光分析手段之一，其操作方法是通过对有机物荧光强度进行分析，从而确定出有机物浓度。
目前国内已成功应用直接荧光分析法，针对苯酚、邻羟基苯甲酸的不同荧光性质，测定出检测水样的苯酚与邻羟基苯甲酸混合物总含量。
要注意的是，因苯酚及邻羟基苯甲酸的特性所致，要在PH值分别为6和11的情况下进行测定。
此外，国内还通过常规分析法测定出了苯并（a）芘在空气飘尘中的总含量。
总体来看，直接荧光分析法的操作简单，但应用并不是十分普遍，这其中的一大要因是很多有机化合物并无荧光，或是其荧光率低，难以直接测定。
因此，其应用存在一定局限性。
2 间接荧光分析法及其在有机物污染分析中的应用2.1 荧光增强法间接荧光分析法可细分成两种分析方法。
一是对本身无荧光的有机化合物通过化学反应、讲解反应、偶联反应、酶降解反应以及氧化还原等多种途径使其转化为可进行荧光测定的标准。
例如有机磷对硫磷本身不存在荧光，但其通过水解反应后对氨基酚则有荧光，之后就可通过荧光法进行测定。
这种方式就是通过增强有机化合物的荧光性质从而实现荧光分析的。
因此，此种方式又称为荧光增强法。
2.2 荧光猝灭法除以上分析法外，荧光猝灭法也是间接荧光分析的一个重要技术手段，具体的应用方法是：如果某种不具有荧光的分析物存在使某些荧光化合物发生荧猝灭的化学反应能力，利用这种能力实现间接的荧光分析。
荧光分析法测定水杨酸...
荧光分析法测定药品中的羟基苯甲酸异构体含量一．实验目的1.学习荧光分析法的基本原理和操作；2.熟悉荧光分析法进行多组分含量的测定方法。
二．实验原理1、荧光分析法原理：当被测物质受到光照后，被测物分子吸收了具有特征频率的辐射能，分子从基态上升到激发态，分子在较高能级的激发态时，它可能处于激发态中各种振动状态的一种。
然而由于分子通过与溶剂分子、同类分子或其他分子的碰撞，而失去振动能级，降低至激发态时的最低振动能级，在此过程中并不发光。
但当分子从激发态的最低振动能级，即第一电子激发态的最低振动能级跃迁至基态的各个不同的振动能级时，则以光的形式辐射出能量，所辐射出的光既是荧光。
2、激发光谱和发射光谱：激发光谱：荧光是光致发光，因此必须选择合适的激发光波长，这可以从它们的激发光谱曲线来确定。
绘制激发光谱曲线时，选择荧光的最大发射波长为测量波长，改变激发光的波长，测量荧光强度的变化。
以激发波长为横坐标、荧光强度为纵坐标作图，即得到荧光化合物的激发光谱。
激发光谱的形状与吸收光谱的形状极为相似，经校正后的真实激发光谱与吸收关顾不仅形状相同，而且波长位置也一样。
这是因为物质分子吸收能量的过程就是激发过程。
发射光谱：发射光谱简称荧光光谱。
如果将激发光波长固定在最大激发波长处，然后扫描发射波长，测定不同发射波长处的荧光强度，即得到荧光光谱。
3、试验方法机理：邻- 羟基苯甲酸（亦称水杨酸）和间- 羟基苯甲酸分子组成相同，均含一个能发射荧光的苯环，但因其取代基的位置不同而具有不同的荧光性质。
在pH=12 的碱性溶液中，二者在310nm附近紫外光的激发下均会发射荧光；在pH=5.5的近中性溶液中，间-羟基苯甲酸不发荧光，邻-羟基苯甲酸因分子内形成氢键增加分子刚性而有较强荧光，且其荧光强度与pH=12时相同。
利用此性质，可在pH=5.5 时测定二者混合物中邻-羟基苯甲酸含量时，间-羟基苯甲酸不干扰。
另取同样量混合物溶液，测定pH=12 时的荧光强度，减去 pH=5.5时测得的邻-羟基苯甲酸的荧光强度，即可求出间-羟基苯甲酸的含量。
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邻、间和对－羟基苯甲酸的荧光性质和定量分析
实验目的
1．学习荧光分析法的基本原理和操作
2．了解化合物的荧光性质及其与结构的关系
3．掌握荧光定量分析的方法
实验原理
邻-羟基苯甲酸(亦称水杨酸)、间-羟基苯甲酸和对-羟基苯甲酸分子组成相同，均含一个能发射荧光的苯环，但因其取代基的位置不同而具不同的荧光性质。
在pH 12的碱性溶液中，二者在310nm附近紫外光的激发下均会发射荧光；在pH5.5的近中性溶液中，间-和对羟基苯甲酸荧光较弱，邻-羟基苯甲酸因分子内形成氢键增加分子刚性而有较强荧光，且其荧光强度与pH 12时相同。
利用此性质，可在pH 5.5时测定二者混合物中邻-羟基苯甲酸含量，间-羟基苯甲酸不干扰。
乙酰基水杨酸（阿司匹林）可以在碱性溶液中迅速水解，呈现水杨酸的荧光性质，因此可用荧光法进行定量分析。
仪器与试剂
仪器：日立F4500型荧光分光光度计，其基本操作参见附录。
需设定的主要仪器参数有：
带通(Bandpass)（或称狭缝）5 nm
扫描速度(Scan speed) 适中
灵敏度（纵坐标）
10mL比色管、吸量管。
试剂：邻-羟基、间-羟基和对-羟基苯甲酸储备液：1 10-3mol/L (水溶液); HAc—NaAc缓冲溶液：47gNaAc和6g冰醋酸溶于水并稀释至1L，得pH 5.5的
缓冲液；
NaOH水溶液：0.01mol/L。
HCl水溶液：0.1mol/L
硫酸奎宁溶液：5⨯10-5mol/L（0.1mol/L硫酸溶液）
实验内容与步骤
1．pH对荧光光谱的影响
配制三种化合物的标准溶液浓度约为1⨯10-6mol/L，pH分别为1.0，5.5和12的溶液，扫描荧光光谱。
测定荧光激发光谱和发射光谱：先固定发射波长为400nm，在250～350nm 区间进行激发波长扫描，获得溶液的激发光谱和荧光最大激发波长；再固定激发波长，在350～500nm区间进行发射波长扫描，获得溶液的发射光谱和荧光最大发射波长。
此时，在激发光谱最大激发波长处和发射光谱最大发射波长处的荧光强度应基本相同。
2. 水杨酸的分析特性（分析专业学生选做）
根据上述激发光谱和发射光谱扫描结果，确定一组波长(最大激发和发射波长)，最佳酸度条件，测定水杨酸的线性范围和检出限（S/N=3）
(1)线性范围：配制浓度在1⨯10-7mol/L-5⨯10-5mol/L水杨酸标准系列（5个点）于已编号的10mL比色管中，各加入1.0mL pH 5.5 HAc-NaAc缓冲液（或选择的其它缓冲溶液），用去离子水稀释至刻度，测定荧光强度，绘制标准曲线。
(2) LOD测定：配制相应的空白溶液，测定荧光强度，平行5份，根据空白值计算标准偏差和相应的LOD。
配制浓度为2倍于计算出的检出限的标准溶液，扫描光谱，进行验证。
数据处理
(1) 根据不同pH下，三种化合物的荧光光谱总结其荧光性质，pH影响规律并分析原因
(2) 制作标准曲线，线性方程和线性相关系数
(3) 计算LOD，报告中应附上低浓度荧光光谱
3. 相对法测定水杨酸的量子产率（物化和无机专业学生选做）
在水杨酸发射荧光最佳条件下，以硫酸奎宁（量子产率查表）为参比物质，测定
水杨酸的荧光量子产率，本法只适用于液体样品。
荧光量子产率：abs
em nr f f
photons photons k k k Q =+=∑ 式中Q 为量子产率，k f 荧光发射速率常数，k nr 为非辐射跃迁速率常数 相对法测定荧光量子产率：22R
s R s R s n n m m Q Q = 式中R 表示参比物质，m 为荧光发射光谱面积对相应的吸光度所做直线的斜率，n 为溶液的折射率（如果参比物质和样品用同样的溶剂则为1）。
量子产率也可以用单点法测定，但是测量误差会比较大。
参比物质的荧光激发波长应与待测物质相同或接近，本实验中先扫描硫酸奎宁的荧光激发和发射光谱，找出其最大激发波长，激发波长应与水杨酸接近。
测定方法：
（1）校正荧光仪的激发和发射波长强度：激发波长校正用罗丹明B 溶液（5g/L ），校正发射波长用散射光池；
（2）配制3-5种不同浓度的硫酸奎宁溶液和水杨酸溶液（最佳条件）使其吸光度（最佳激发波长下）在0.01, 0.03,0.05左右（浓度最大溶液的吸光度必须在0.1以下），本实验配制3个不同浓度；
（3）测定硫酸奎宁和水杨酸溶液的吸光度（波长设置为二者的激发波长）；测定溶剂空白的吸光度，
（4）扫描硫酸奎宁和水杨酸溶液的荧光光谱，测定荧光发射光谱的面积，测定溶剂空白的荧光光谱，测定相应波长范围的面积；
（5）以吸光度为横坐标，荧光面积为纵坐标，绘制分别两种化合物的吸光度与荧光发射面积（必须扣除空白）的相关关系，得到线性方程和线性相关系数，如下图,线性相关系数应至少为0.99；
示例：吸光度和荧光光谱面积的线性相关关系
（6）将所得斜率带入计算方程，查出溶剂的折光率，计算荧光量子产率思考题
1. pH 5.5时，邻-羟基苯甲酸(pK a1=3.00, pK a2=1
2.38)和间-羟基苯甲酸(pK a1=4.05, pK a2 =9.85), 水溶液中的主要存在的酸、碱型体是什么? 为什么二者的荧光性质不同?
2.从本实验可总结出几条影响物质荧光强度的因素?
3.如果要考查激发态的pKa值是否与基态不同，应如何设计实验？
4. 本实验测定的荧光量子产率可能不成功，试分析原因
荧光分光光度计的使用说明
一、开机前准备
1.实验室温度应保持在15℃～30℃之间，湿度应保持在45％～70％之间。
2.确认样品室内无样品后，关上样品室盖。
二、开机
1. 打开电源开关（POWER→ON）待风扇正常运转
2. 按（XeLAMP START）钮，黄色指示灯亮（按钮时间不能超过5秒）。
3. 在氙灯点亮后，打开（MAIN→ON）。
4. 开计算机及外设，点击桌面上的Flsolution软件，等待光谱仪自检，绿色指示灯亮。
三、编辑分析方法和测量
1. 点击右边菜单的Method按钮。
2. 出现一个Analysis method对话框。
3. 点击General按钮。
4. 在Measurement中可选择（波长扫描Wavelength scan；时间扫描Time scan；光度测量
Photometry；三维扫描3－D scan）。
扫描荧光光谱选择波长扫描，进行定量分析选择光度测量。
5. 点击（instrument），测量模式可选择荧光Fluorescence, 发光Luminescence 磷光
Phosphorescence，本实验选荧光。
可设定荧光激发Excitation荧光发射Emission，同步Synchronous等参数。
6. 分析方法建立后，点击OK，方法生成。
7. 点击measure，仪器开始测量。
测量完成后出现图谱处理图标，可选择相应的功能，如荧
光光谱面积积分等。
四、生成报告，保存文件
1.用Excel格式保存数据，点击Report,自动生成的文件选择文件——副本另存为——重命名
保存在指定文件夹。
2.关掉图谱窗口，系统提示保存图谱文件，设置文件名，保存。
五、关机
1. 拿出样品池中样品，退出软件所显示的所有窗口，关掉电脑。
2. 关闭（Main→OFF）。
注：不关氙灯。
3. 关闭电源。
4. 打开电源开关（POWER→ON）风扇正常运转，排氙灯热量，直至排风处吹冷风为止（约
15分钟左右）。
5. 在记录本上记录使用情况。
注意事项: 开机，关机顺序千万不能搞错。