胃癌细胞株SGC-7901生长抑素2型受体表达和外源性生长抑素类似物的影响
石蒜碱诱导人胃癌SGC-7901细胞G2M期阻滞的机制研究
石蒜碱诱导人胃癌SGC-7901细胞G2M期阻滞的机制探究要：胃癌是全球癌症发病率和死亡率排名前列的一种恶性肿瘤，石蒜碱是一种植物提取物，已被确认具有抗肿瘤活性。
本探究通过细胞试验，探讨石蒜碱对人胃癌SGC-7901细胞生长和细胞周期的影响，结果发现石蒜碱处理后，SGC-7901细胞的增殖受到了明显的抑止，同时表现出G2M期阻滞的现象。
进一步试验发现，石蒜碱处理后激活了ATM/CHK2通路，诱导了G2M期阻滞的发生，并且在此过程中参与了多种细胞周期调控基因的表达变化。
本探究的结果说明了石蒜碱可能作为一种潜在的治疗胃癌的新型药物。
关键词：石蒜碱；胃癌；SGC-7901细胞；细胞周期；ATM/CHK2通路Introduction：胃癌是全球癌症发病率和死亡率排名前列的一种恶性肿瘤，尽管在早期诊断和治疗方面取得了一定的进步，然而由于其症状不明显，屡屡被轻忽或误诊，因此目前胃癌的治疗依旧面临许多困难。
因此，寻找新型的治疗方法和药物具有重要的临床意义。
石蒜碱是一种金虎尾科植物提取物，已经被确认具有抗肿瘤活性，在治疗肝癌、肺癌、乳腺癌、前列腺癌等方面有一定的应用。
然而，石蒜碱对人胃癌的作用机制还不清晰。
Materials and methods：本探究接受MTT法和流式细胞术检测石蒜碱对SGC-7901细胞生长和细胞周期的影响，同时接受Western blot和RT-qPCR等方法检测ATM/CHK2通路和细胞周期调控基因的表达变化。
Results：试验发现石蒜碱处理后，SGC-7901细胞的增殖受到了明显的抑止，同时表现出G2M期阻滞的现象。
进一步试验发现，石蒜碱处理后激活了ATM/CHK2通路，诱导了G2M期阻滞的发生，并且在此过程中参与了多种细胞周期调控基因的表达变化。
Discussion：本探究结果表明，石蒜碱可以抑止人胃癌SGC-7901细胞的增殖并诱导G2M期阻滞，这种抑止可能涉及到ATM/CHK2通路和多种细胞周期调控基因的变化，这为石蒜碱作为一种治疗胃癌的新型药物提供了理论和试验依据。
奥曲肽对胃癌细胞株SGC7901生长调控作用的研究
奥曲肽对胃癌细胞株SGC7901生长调控作用的研究张南征;马晓燕【期刊名称】《东南国防医药》【年(卷),期】2005(7)3【摘要】目的研究奥曲肽(OCT)对人胃中分化腺癌细胞株SGC7901体外生长抑制作用的机制.方法 MTT法测定OCT对SGC7901细胞生长的调控;流式细胞术分析OCT对SGC7901细胞周期的影响;免疫细胞化学染色法检测表皮生长因子受体(EGFR)的表达;放射免疫法测定细胞培养上清液中表皮生长因子(EGF)和胃泌素的含量.结果 OCT对SGC7901细胞生长有抑制作用;OCT可诱导SGC7901细胞G0/G1期阻滞,加药后24小时最显著,同时伴S期细胞比例减少; OCT作用后24、36小时,SGC7901细胞EGFR表达较对照组明显减少.加入OCT24小时,细胞培养上清液中EGF和胃泌素含量明显下降.结论 OCT可通过多种途径抑制体外培养的SGC7901细胞的增殖.【总页数】4页(P166-168,180)【作者】张南征;马晓燕【作者单位】解放军第97医院消化内科,江苏徐州,221004;徐州医学院肿瘤学教研室,江苏徐州,221006【正文语种】中文【中图分类】R735.2【相关文献】1.生长抑素受体亚型2、5在胃癌细胞株中的表达及奥曲肽对胃癌细胞分泌VEGF 的抑制作用 [J], 郭雯珲;王川;洪天姿;傅芳萌;张捷;郑美春2.生长抑素类似物对胃癌细胞株MKN45生长的调控作用 [J], 杜文琪;张南征3.奥曲肽对胃癌细胞株SGC7901细胞生长抑制作用及其机制的探讨 [J], 高山;余保平;董卫国;罗和生4.奥曲肽对人胃癌细胞SGC7901生长及凋亡作用的研究 [J], 雷平光;于东红;王萍5.pshRNA-MDRla联合TRAIL基因对胃癌细胞株SGC7901/VCR作用及其作用机制的实验研究 [J], 袁媛;周洲;周静;姜政;黄爱龙;王丕龙因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
生长抑素受体亚型sstr-2、sstr-5在胃癌中的表达及奥曲肽对sgc-7901胃癌细胞的抑制作用
翻｝ＳＳ灌Ｒ－２在雷癞缝窳中的表达（Ｘ１００）阁２ＳＳＴＲ－２程ＳＣ，Ｃ一７９０１胃痛细胞中的袭达（Ｘ１００）２、ＳＳｌ。
Ｒ－Ｓ：３０铡键癌标本中，１２铡标本袭遮阳健，阳性表达率４０％ＳＧＣ一７９０１胃癌细胞表达阳性。
具体结果见豳３、４。
圈３ＳＳＴＲ一５在胃癌组织中的表达（］（１００）图４ＳＳＴＲ５在ＳＧＣ一７９０１胃癌细胞中的表这（Ｘ１００）１、抽提总ＲＮ＾电泳圈：胃癌组织及胃癌细胞中均可提出总ＲＮＡ，见图５．图５总ＲＮＡ电泳图２、ＲＴ—ＰＣＲ结果：ＳＳＴＲ一２ｍＲＮＡ在３０例胃癌组织中有１５例表达为阳性，阳性率为５０％；１４例ＳＳＴＲ一５ｍＲＮＡ表达阳性，阳性率为４６．６７％。
在ＳＧＣ一７９０１胃癌细胞中ＳＳＴＲ２ｍＲＮＡ及ＳＳＴＲ５ｍＲＮＡ均呈阳性表达。
３０例胃癌中有ｌ例ＲＴ—ＰＣＲ结果阳性，但是免疫组化阴性，可能是ＳＳＴＲ２ｍＲＮＡ、ＳＳＴＲ５ｍＲＮＡ有表达，但未翻译成蛋白质。
图６ＳＳＴＲ２电泳图图７ＳＳＴＲ一５电泳图讨论生长抑素（ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ，ＳＭＳ）是一种对内分泌、外分泌、旁分泌及自分泌均起作用的调节肽，广泛存在于人体各器官。
消化道作为人体内最大一个内分泌器官，是生长抑素主要作用部位之一。
生长抑素及其类似物抑制肿瘤生长的机制之一是通过与肿瘤细胞表面的生长抑素受体（ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＳＳＴＲ）结合，将胞外信号传至胞内直接发挥作用“１。
生长抑素受体属于Ｇ蛋白偶联受体超家族，有７个跨膜区，各弧型的基因序列在跨膜区最为接近，同源序列为５５％一７（）９６，按发现的顺序分别命名为ＳＳＴＲ—Ｉ～ＳＳＴＲ５。
１９９２年首次采用ＲＴ—ＰＣＲ法成功克隆出ＳＳＴＲ一１和ＳＳＴＲ一２的ｃＤＮＡ后，目前已发现并克隆、鉴定出５种亚型“１，按发现的顺序分别命名为ＳＳＴＲ１～ＳＳＴＲ一５，其中ＳＳＴＲ一２又分为ＳＳＴＲ一２Ａ和ＳＳＴＲ２Ｂ，两者仅是胞浆内Ｃ末端长度有所不同。
ＳＳＴＲ各亚型在跨膜区最为接近，同源序列为３９％一５７％，Ｈｏｙｅｒ等认为，基于ＳＳＴＲ各Ⅱ型氨基酸序列及配体结合的相似性，可将ＳＳＴＲ各亚型分为两个亚家族：ＳＳＴＲ一２，ＳＳＴＲ一３，ＳＳＴＲ一５为一个亚家族，ＳＳＴＲ—ｌ，ＳＳＴＲ一４为另一个家族。
胃热消炎合剂对人胃癌细胞sgc-7901增殖影响的机制研究
胃热消炎合剂对人胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１增殖影响的机制研究孙瑛蔚ꎬ赵梓亦ꎬ张㊀敏ꎬ柯㊀洪ꎬ黄㊀宁ꎬ杨玉婷(成都中医药大学附属医院ꎬ四川成都６１００７１)㊀㊀[摘要]㊀目的㊀研究胃热消炎合剂对人胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１增殖的影响ꎮ方法㊀取对数生长期的人胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１进行体外实验ꎬ其中空白血清组加入含１０％正常血清培养ꎬ低剂量含药血清组加入含２.５％药物血清＋７ ５％正常血清培养ꎬ中剂量含药血清组加入含５％药物血清＋５％正常血清培养ꎬ高剂量含药血清组加入含１０％药物血清培养ꎬ胃热消炎合剂含药血清通过给大鼠灌胃的方式获得ꎮ分别采用ＣＣＫ－８法㊁ＥｄＵ染色法和免疫荧光法检测各组细胞增殖情况ꎬ采用ＲＴ－ＰＣＲ法检测各组细胞增殖信号通路ｐ５３－ｐ２１的相关基因ｐ２１㊁ｐ５３㊁ＣｙｃｌｉｎＤ１㊁ＣＤＸ２㊁ＣＤＫ７ｍＲＮＡ的表达情况ꎬ采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测各组细胞中ｐ２１㊁ｐ５３㊁ＣｙｃｌｉｎＤ１㊁ＣＤＸ２蛋白表达水平ꎮ结果㊀各含药血清组ＳＧＣ－７９０１细胞增殖受到明显抑制ꎬ且呈浓度依赖性ꎮ各含药血清组ｐ２１㊁ｐ５３ｍＲＮＡ表达水平均明显高于空白血清组(Ｐ均<０ ０５)ꎬＣｙｃｌｉｎＤ１ｍＲＮＡ表达水平均明显低于空白血清组(Ｐ均<０.０５)ꎬ且呈浓度依赖性ꎻ各组ＣＤＸ２㊁ＣＤＫ７ｍＲＮＡ表达水平比较差异均无统计学意义(Ｐ均>０.０５)ꎮ各含药血清组ｐ２１蛋白表达水平均明显高于空白血清组(Ｐ均<０.０５)ꎬ且呈浓度依赖性ꎻ低剂量含药血清组和中剂量含药血清组ｐ５３蛋白表达水平均明显高于空白血清组(Ｐ均<０.０５)ꎬ而高剂量含药血清组ｐ５３蛋白表达水平明显低于空白血清组(Ｐ<０.０５)ꎻ各组ＣｙｃｌｉｎＤ１㊁ＣＤＸ２蛋白表达水平比较差异均无统计学意义(Ｐ均>０.０５)ꎮ结论㊀胃热消炎合剂可能通过作用于细胞周期来抑制人胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１增殖ꎬ其可能具有预防和治疗早期胃癌的作用ꎮ[关键词]㊀胃热消炎合剂ꎻ人胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１ꎻ细胞增殖ꎻＰ２１ｄｏｉ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.１００８－８８４９.２０２０.０９.００４[中图分类号]㊀Ｒ７３５.２㊀[文献标识码]㊀Ａ㊀[文章编号]㊀１００８－８８４９(２０２０)０９－０９２７－０６[作者简介]㊀孙瑛蔚ꎬ女ꎬ硕士ꎬ主管药师ꎬ研究方向为医院药学ꎮ[通信作者]㊀赵梓亦ꎬＥ－ｍａｉｌ:６４９４０４０４＠ｑｑ.ｃｏｍ[基金项目]㊀成都市科技局资助项目(２０１５－ＨＭ０１－００２９１－ＳＦ)ꎻ成都市卫计委资助项目(２０１５０６９)ＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＷｅｉｒｅＸｉａｏｙａｎｍｉｘｔｕｒｅｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌＳＧＣ￣７９０１ａｎｄｉｔｓｍｅｃｈａｎｉｓｍＳＵＮＹｉｎｇｗｅｉꎬＺＨＡＯＺｉｙｉꎬＺＨＡＮＧＭｉｎꎬＫＥＨｏｎｇꎬＨＵＡＮＧＮｉｎｇꎬＹＡＮＧＹｕｔｉｎｇ(ＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＣｈｅｎｇｄｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＣｈｅｎｇｄｕ６１００７１ꎬＳｉｃｈｕａｎꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＩｔｉｓｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＷｅｉｒｅＸｉａｏｙａｎｍｉｘｔｕｒｅｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅＳＧＣ￣７９０１.ＭｅｔｈｏｄｓＨｕｍａｎｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓＳＧＣ￣７９０１ｉｎｌｏｇａｒｉｔｈｍｉｃｇｒｏｗｔｈｐｈａｓｅｗｅｒｅｕｓｅｄｆｏｒｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｉｎｖｉｔｒｏ.Ｔｈｅｂｌａｎｋｓｅｒｕｍｇｒｏｕｐｗａｓｃｕｌｔｕｒｅｄｗｉｔｈ１０％ｎｏｒｍａｌｓｅｒｕｍꎬｔｈｅｌｏｗ￣ｄｏｓｅｄｒｕｇ￣ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍｇｒｏｕｐｗａｓａｄｄ￣ｅｄｗｉｔｈ２.５％ｄｒｕｇｓｅｒｕｍ＋７.５％ｎｏｒｍａｌｓｅｒｕｍꎬａｎｄｔｈｅｍｅｄｉｕｍ￣ｄｏｓｅｄｒｕｇ￣ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍｇｒｏｕｐｗａｓａｄｄｅｄｗｉｔｈ５％ｄｒｕｇｓｅｒｕｍ＋５％ｎｏｒｍａｌｓｅｒｕｍꎬｔｈｅｈｉｇｈｄｏｓｅ￣ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍｇｒｏｕｐｗａｓｃｕｌｔｕｒｅｄｂｙａｄｄｉｎｇ１０％ｄｒｕｇ￣ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍꎬａｎｄｔｈｅＷｅｉｒｅＸｉａｏｙａｎｍｉｘｔｕｒｅｄｒｕｇ￣ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄｂｙｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｔｏｒａｔｓ.ＣＣＫ￣８ｍｅｔｈｏｄꎬＥｄＵｓｔａｉｎｉｎｇｍｅｔｈｏｄａｎｄｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｍｅｔｈｏｄｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐꎬａｎｄＲＴ￣ＰＣＲｍｅｔｈｏｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｇｅｎｅｓｏｆｐ５３￣ｐ２１ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｓｉｇｎａｌｐａｔｈｗａｙｐ２１ꎬｐ５３ꎬＣｙｃｌｉｎＤ１ꎬＣＤＸ２ａｎｄＣＤＫ７ｍＲＮＡꎬＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆｐ２１ꎬｐ５３ꎬＣｙｃｌｉｎＤ１ａｎｄＣＤＸ２ｐｒｏｔｅｉｎｉｎｔｈｅｃｅｌｌｓｏｆｅａｃｈｇｒｏｕｐ.ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＳＧＣ￣７９０１ｃｅｌｌｓｉｎｅａｃｈｄｒｕｇ￣ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍｇｒｏｕｐｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ￣ｌｙｉｎｈｉｂｉｔｅｄꎬａｎｄｉｔｗａｓｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ￣ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ.Ｔｈｅｌｅｖｅｌｓｏｆｐ２１ａｎｄｐ５３ｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｅａｃｈｄｒｕｇ￣ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒ￣ｕｍｇｒｏｕｐｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｉｎｔｈｅｂｌａｎｋｓｅｒｕｍｇｒｏｕｐ(ａｌｌＰ<０.０５)ꎬａｎｄｔｈｅｌｅｖｅｌｓｏｆＣｙｃｌｉｎＤ１ｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｉｎｔｈｅｂｌａｎｋｓｅｒｕｍｇｒｏｕｐ(ａｌｌＰ<０.０５)ꎬａｎｄｔｈｅｙｗｅｒｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ￣ｄｅ￣ｐｅｎｄｅｎｔꎻＴｈｅｒｅｗｅｒｅｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＣＤＸ２ａｎｄＣＤＫ７ｍＲＮＡｂｅｔｗｅｅｎｅｖｅｒｙｇｒｏｕｐｓ(ａｌｌＰ>０.０５).Ｔｈｅｌｅｖｅｌｓｏｆｐ２１ｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｅａｃｈｄｒｕｇ￣ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍｇｒｏｕｐｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｉｎｔｈｅｂｌａｎｋｓｅｒｕｍｇｒｏｕｐ(ｂｏｔｈＰ<０.０５)ａｎｄｔｈｅｙｗｅｒｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ￣ｄｅｐｅｎｄｅｎｔꎻｔｈｅｌｅｖｅｌｓｏｆｐ５３ｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓ￣ｓｉｏｎｉｎｔｈｅｌｏｗ￣ｄｏｓｅｄｒｕｇ￣ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍｇｒｏｕｐａｎｄｔｈｅｍｅｄｉｕｍ￣ｄｏｓｅｄｒｕｇ￣ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍｇｒｏｕｐｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈ￣ｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｔｈｅｂｌａｎｋｓｅｒｕｍｇｒｏｕｐ(ａｌｌＰ<０.０５)ꎬｂｕｔｔｈｅｐ５３ｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｈｉｇｈ￣ｄｏｓｅｄｒｕｇ￣ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍｇｒｏｕｐｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈｅｂｌａｎｋｓｅｒｕｍｇｒｏｕｐ(Ｐ<０.０５)ꎻｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＣｙｃｌｉｎＤ１ａｎｄＣＤＸ２ｐｒｏｔｅｉｎｂｅｔｗｅｅｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ(Ｐ>０.０５).ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＷｅｉｒｅＸｉａｏｙａｎｍｉｘｔｕｒｅｍａｙｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌＳＧＣ￣７９０１ｂｙａｃｔｉｎｇｏｎｔｈｅｃｅｌｌｃｙｃｌｅꎬｗｈｉｃｈｍａｙｈａｖｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇａｎｄｔｒｅａｔｉｎｇｏｎｅａｒｌｙｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ＷｅｉｒｅＸｉａｏｙａｎｍｉｘｔｕｒｅꎻｈｕｍａｎｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌＳＧＣ￣７９０１ꎻｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎꎻＰ２１㊀㊀胃癌是全世界范围内第三大常见的恶性肿瘤ꎬ对人类的健康造成极大的威胁ꎬ其５年生存率和不带瘤生存时间均不理想[１－４]ꎮ目前我国胃癌的主要治疗方法有手术㊁化疗㊁放疗[１]ꎬ虽然对早中期胃癌疗效明显ꎬ但晚期胃癌的治疗仍然面临巨大的挑战ꎮ中医药作为一种术前及术后辅助治疗药物ꎬ近些年来受到了极大的关注ꎮ目前中医药复方已成为胃癌综合治疗的手段之一ꎬ在改善患者的生活质量㊁延长生存期方面具有显著优势[５－７]ꎮ胃热消炎合剂是成都中医药大学附属医院的院内制剂ꎬ根据本院消化内科名中医王在模老医生处方制成ꎬ有清热和胃㊁行气止痛的功效ꎬ临床用于治疗慢性浅表性胃炎㊁十二指肠溃疡等疗效确切ꎬ且可缓解胃癌患者症状及延长生存期ꎬ应用多年未发现明显毒副作用ꎮ考虑到该中药良好的消炎抗炎作用ꎬ课题组推测其对肿瘤的生理功能具有调节作用ꎮ基于此ꎬ本实验选取人胃癌细胞株ＳＧＣ－７９０１ꎬ研究了胃热消炎合剂含药血清对细胞增殖的影响ꎬ旨在为胃热消炎合剂防治胃癌提供理论基础和科学依据ꎮ１㊀实验资料１ １㊀实验药物㊁细胞和动物㊀胃热消炎合剂(由黄柏㊁粉葛㊁黄芩㊁法半夏㊁紫苏梗㊁木香㊁广藿香㊁香附㊁枳壳㊁陈皮㊁甘草㊁鸡矢藤ꎬ辅料为蜂蜜㊁苯甲酸组成)取自成都中医药大学附属医院ꎬ产品批号:２０１６０７１４ꎬ５ｇ/包ꎬ１ｍＬ胃热消炎合剂相当于１ｇ生药ꎮ人胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１购自无锡菩禾生物医药技术有限公司ꎮＳＰＦ级雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠ꎬ合格证号:ＳＣＸＫ(川)２０１５－０３０ꎬ购自成都达硕实验动物有限公司ꎮ１ ２㊀实验试剂和仪器㊀ＲＰＭＩ－１６４０培养基㊁胎牛血清㊁胰酶(不含ＥＤＴＡ)均购自美国Ｇｉｂｃｏ公司ꎻＣＣＫ－８染液购自碧云天公司ꎻＥｄＵＡｐｏｌｌｏ®５６７ＩｎＶｉｔｒｏＩｍａｇｉｎｇＫｉｔ(１００Ｔ)购自锐博生物公司ꎻＴＲＩｚｏｌ细胞裂解液购自Ａｍｂｉｏｎ公司ꎻＭ－ＭＬＶＦｒｉｓｔＳｔｒａｎｄｃＤＮＡＳｙｎｔｈｅｓｉｓＫｉｔ试剂盒购自ＯＭＥＧＡ公司ꎻＳＹＢＲ®ＧｒｅｅｎＰＣＲＭａｓｔｅｒＭｉｘ购自ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓ￣ｔｅｍｓ公司ꎻＲＩＰＡ裂解液购自碧云天公司ꎻβ－ａｃｔｉｎ抗体㊁Ｋｉ－６７抗体购自成都正能生物公司ꎬ货号分别为２０００６８－８Ｆ１０和５０２０９４ꎻｐ２１抗体㊁ｐ５３抗体㊁ＣｙｃｌｉｎＤ１抗体购自武汉博士德公司ꎬ货号分别为ＢＡ０２７２㊁ＢＭ０１０１㊁ＢＭ０７７１ꎻＣＤＸ２抗体购自Ｃｅｌｌｓｉｇ￣ｎａｌｉｎｇꎬ货号为３９７７ꎮ二抗山羊抗兔Ｇｏａｔａｎｔｉ－Ｒａｂ￣ｂｉｔＩｇＧ(Ｈ＋Ｌ)ＳｅｃｏｎｄａｒｙＡｎｔｉｂｏｄｙ购自Ｌｉｆｅ公司ꎬ货号为６５－６１２０ꎻ山羊抗鼠ＧｏａｔＡｎｔｉ－ＭｏｕｓｅＩｇＧＳｅｃｏｎｄａｒｙＡｎｔｉｂｏｄｙ购自成都正能公司ꎬ货号为５１１１０３ꎻ驴抗兔ＤｏｎｋｅｙＡｎｔｉ－ＲａｂｂｉｔＩｇＧＨ＆Ｌ(绿光)购自Ａｂｃａｍ公司ꎬ货号ａｂ１５００７３ꎮ荧光倒置显微镜购自ＯＬＹＭＰＵＳ公司ꎻ酶标仪购自ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈ￣ｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ公司ꎻＣＯ２细胞恒温培养箱购自ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ公司ꎻ台式离心机购自成都蜀科公司ꎻ实时定量ＰＣＲ仪(７５００ＲｅａｌＴｉｍｅＰＣＲＳｙｓｔｅｍ)购自Ａｐ￣ｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ公司ꎮ１ ３㊀实验方法１ ３ １㊀动物血清的制备㊀将体质量２００~２４０ｇ的雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为对照组和实验组ꎬ每组１０只ꎮ实验组给予胃热消炎合剂３.２ｍＬ/ｋｇ灌胃ꎬ对照组给予等体积的生理盐水灌胃ꎬ每只大鼠灌０.８ｍＬ(０.８ｇ/只)ꎬ早晚各１次ꎬ连续７ｄꎮ在最后一次灌胃２ｈ后(前一夜禁食不禁水)ꎬ腹腔注射１％戊巴比妥钠(５０ｍｇ/ｋｇ)ꎬ无菌条件下解剖开腹腔ꎬ于腹主动脉处取血ꎮ采集的血液低温静置过夜后ꎬ４ħ下２０００ˑｇ离心２０ｍｉｎꎬ取上清ꎬ用０.２２μｍ微孔滤膜过滤除菌ꎬ分装于１ｍＬＥＰ管中ꎬ－８０ħ保存备用ꎮ１ ３ ２㊀人胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１的培养传代及细胞分组㊀人胃癌细胞系ＳＧＣ－７９０１以含１０％胎牛血清㊁１％双抗(青霉素和链霉素)的ＲＰＭＩ－１６４０培养基ꎬ在３７ħ㊁饱和湿度㊁５％ＣＯ２和９５％空气的培养箱中培养ꎬ培养６ｈ贴壁ꎮ每隔１ｄ换液１次ꎬ５ｄ左右传代ꎮ分别在１ｄ㊁３ｄ㊁６ｄ于显微镜下观察细胞形态和生长情况ꎮ取处于对数期的ＳＧＣ－７９０１细胞进行实验:空白血清组加入含１０％正常血清培养ꎬ低剂量含药血清组加入含２.５％药物血清＋７ ５％正常血清培养ꎬ中剂量含药血清组加入含５％药物血清＋５％正常血清培养ꎬ高剂量含药血清组加入含１０％药物血清培养ꎮ１ ３ ３㊀ＳＧＣ－７９０１细胞增殖能力ＣＣＫ－８法检测将处于对数期的ＳＧＣ－７９０１细胞以２ˑ１０３个/孔的密度接种于９６孔板中ꎬ待细胞完全贴壁后继续培养过夜ꎬ即１６ｈ后各组加入配置好的相应培养液ꎬ每组设４个复孔ꎬ分别培养４ｈ㊁８ｈ㊁２４ｈꎮ用不含血清的培养基或ＰＢＳ稀释ＣＣＫ－８原液１０倍ꎬ每孔加入１００μＬＣＣＫ－８工作液ꎬ培养箱中孵育４ｈ后终止培养ꎬ冷却至室温后ꎬ在酶标仪４５０ｎｍ下测定吸光度ＯＤ值ꎮ可选取含细胞培养液㊁药物和ＣＣＫ－８原液但没有加入细胞的孔作为背景值ꎮ计算４个复孔的平均ＯＤ值ꎬ绘制细胞增殖曲线ꎬ并按公式计算生长抑制率ꎮ抑制率(％)＝[１－(ＯＤ药物组－ＯＤ背景值)/(ＯＤ对照组－ＯＤ背景值)]ˑ１００％ꎮ１ ３ ４㊀ＳＧＣ－７９０１细胞增殖能力ＥｄＵ染色法观察将处于对数期的ＳＧＣ－７９０１细胞以４ˑ１０４个/孔的密度接种于２４孔板中ꎬ培养过夜至细胞完全贴壁ꎬ各组加入配置好的相应培养液培养ꎮ处理２４ｈ后ꎬ参照ＥｄＵ染色说明书处理细胞ꎬ染色ꎬ拍照ꎮ所有细胞的细胞核可被Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２染成蓝色荧光ꎬ增殖的细胞可被ＥｄＵ染成红色荧光ꎮ１ ３ ５㊀ＳＧＣ－７９０１细胞增殖能力Ｋｉ－６７免疫荧光染色观察㊀细胞处理方法同１.３.４ꎬ各组培养２４ｈ后ꎬ４％的多聚甲醛溶液固定１ｈꎮ吸弃固定液ꎬ冰ＰＢＳ溶液清洗ꎬ加入含０.５％ＴｒｉｔｏｎＸ－１００的ＰＢＳ溶液覆盖细胞ꎬ通透１０ｍｉｎꎬ冰ＰＢＳ清洗ꎻ加入含１０％驴血清的ＰＢＳ溶液３７ħ下孵育ꎬ１ｈ后倾去封闭液ꎬ勿洗ꎻ加入Ｋｉ－６７抗体工作液ꎬ４ħ孵育过夜ꎬ清洗ꎻ加入驴抗兔ＤｏｎｋｅｙＡｎｔｉ－ＲａｂｂｉｔＩｇＧＨ＆Ｌ工作液ꎬ避光ꎬ室温孵育１ｈꎬ清洗ꎻ加入ＤＡＰＩ染液ꎬ避光ꎬ室温孵育５ｍｉｎꎬ清洗ꎻ用抗荧光猝灭封片液封片ꎬ观察各组细胞染色结果并拍照ꎮ１ ３ ６㊀ＳＧＣ－７９０１细胞中增殖相关基因表达ＲＴ－ＰＣＲ法检测㊀①细胞ＲＮＡ提取:细胞处理方法同１.３.４ꎬ各组培养２４ｈ后ꎬ吸弃培养基ꎬ加入ＴＲＩｚｏｌ细胞裂解液ꎬ反复吹打后收集细胞于１ｍＬＥＰ管中ꎮ将收集的细胞１２０００ˑｇ离心５ｍｉｎꎬ小心取上清液于新的ＥＰ管中ꎬ加入三氯甲烷ꎬ剧烈震荡ꎬ１２０００ˑｇ离心５ｍｉｎꎻ然后去上清液育新的ＥＰ管中ꎬ加入等体积的异丙醇ꎬ混匀后１２０００ˑｇ离心５ｍｉｎꎬ沉淀为ＲＮＡꎻ小心弃上清液ꎬ加入７５％的乙醇ꎬ混匀后７５００ˑｇ离心５ｍｉｎꎻ小心弃上清液ꎬ自然风干残留液体ꎬ加入３０~５０μＬＮｕｃｌｅａｓｅ－ｆｒｅｅ水ꎬ即得到ＲＮＡ溶液ꎮ②总ＲＮＡ逆转录ｃＤＮＡ:按照ＯＭＥＧＡ公司生产的Ｍ－ＭＬＶＦｒｉｓｔＳｔｒａｎｄｃＤＮＡＳｙｎｔｈｅｓｉｓＫｉｔ试剂盒操作说明书完成ꎮ③ＲＴ－ＰＣＲ引物设计与合成:通过检索ＮＣＢＩＧｅｎＢａｎｋ数据库ꎬ以ＧＡＰＤＨ作为内参基因ꎬ设计引物序列ꎬ由成都擎科生物公司合成:ＧＡＰ￣ＤＨ正向引物５ －ＧＴＣＡＧＴＧＧＴＧＧＡＣＣＴＧＡＣＣＴ－３ ꎬ反向引物５ －ＴＧＣＴＧＴＡＧＣＣＡＡＡＴＴＣＧＴＴＧ－３ ꎻｐ２１正向引物５ －ＡＣＡＣＣＡＣＴＧＧＡＧＧＧＴＧＡＣＴＴ－３ ꎬ反向引物５ －ＧＧＣＧＴＴＴＧＧＡＧＴＧＧＴＡＧＡＡＡ－３ ꎻｐ５３正向引物５ －ＣＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＴＣＡＣＡＣＴＧＧ－３ ꎬ反向引物５ －ＣＴＣＴＣＧＧＡＡＣＡＴＣＴＣＧＡＡＧＣ－３ ꎻＣｙｃｌｉｎＤ１正向引物５ －ＴＧＡＡＣＴＡＣＣＴＧＧＡＣＣＧＣＴ￣ＴＣ－３ ꎬ反向引物５ －ＣＣＡＣＴＴＧＡＧＣＴＴＧＴＴＣＡＣ￣ＣＡ－３ ꎻＣＤＸ２正向引物５ －ＣＡＣＡＧＴＧＡＡＡＡＣ￣ＣＡＧＧＡＣＧＡ－３ ꎬ反向引物５ －ＴＣＴＣＡＧＡＧＧＡＣ￣ＣＴＧＧＣＴＧＡＧ－３ ꎻＣＤＫ７正向引物５ －ＴＴＴＧＣ￣ＣＡＧＧＡＧＡＴＴＣＡＧＡＣＣ－３ ꎬ反向引物５ －ＣＡＴＴＴＴＣＡＧＴＧＣＣＴＧＴＧＴＧＧ－３ ꎮ④聚合酶链式反应(ＲＴ－ＰＣＲ):按照ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ公司生产的ＳＹＢＲ®ＧｒｅｅｎＰＣＲＭａｓｔｅｒＭｉｘ试剂盒操作说明书完成ꎮ将ｃＤＮＡ㊁基因前引物㊁基因后引物及ＳＹＢＲ®ＧｒｅｅｎＰＣＲＭａｓｔｅｒＭｉｘ加入９６孔ＰＣＲ板ꎬ上机ꎬ设置反应条件:５０ħ加热２ｍｉｎꎻ９５ħ保持１０ｍｉｎꎻ９５ħ跑１５ｓꎬ６０ħ跑１ｍｉｎꎬ进行４０个循环ꎬ此步为引物扩增过程ꎻ９５ħ加热１５ｓꎬ６０ħ加热１ｍｉｎꎬ９５ħ加热３０ｓꎬ６０ħ加热１５ｓꎬ此步为ｑ－ＰＣＲ产物溶解过程ꎮ⑤结果处理:ＲＴ－ＰＣＲ结束后ꎬ由７５００软件分析结果ꎬ得出Ｃｔ值ꎬ采用相对定量２－әәｃｔ法计算各基因的相对表达量ꎬ其中әＣｔ＝目的基因Ｃｔ－内参基因ＣｔꎬәәＣｔ＝әＣｔ(药物组)－әＣｔ(对照组)ꎬ选取ＧＡＰＤＨ为内参基因ꎮ１ ３ ７㊀ＳＧＣ－７９０１细胞中相关蛋白表达Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测㊀细胞处理方法同１.３.４ꎬ各组培养２４ｈ后ꎬ吸弃培养基ꎬ加入ＲＩＰＡ裂解液提取蛋白ꎬ用ＢＣＡ测定蛋白浓度ꎬ并将４组蛋白浓度用裂解液调成相同的浓度ꎬ然后向蛋白中加入上样缓冲液ꎬ９５ħ加热１０ｍｉｎꎮ变性后的蛋白分装并保存于－２０ħ冰箱中ꎮ常规ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳ꎬ浓缩胶９０Ｖ电泳２０ｍｉｎꎬ分离胶１２０Ｖ电泳５０ｍｉｎꎻ４ħ下转ＰＶＣＦ膜１~１.５ｈꎻ５％的ＢＳＡ溶液常温封闭ＰＶＣＦ膜１ｈꎻ将目的蛋白的一抗按说明书１ʒ５０００稀释ꎬ加入ＰＶＣＦ膜ꎬ４ħ孵育过夜ꎬ然后ＰＢＳ－Ｔ清洗３次ꎬ每次５ｍｉｎꎻ加入与一抗对应的二抗工作液ꎬ常温孵育１ｈꎬ然后ＰＢＳ－Ｔ清洗３次ꎬ每次５ｍｉｎꎮ最后将ＥＣＬ显色液滴在ＰＶＣＦ膜上ꎬ于暗室中压Ｘ胶片ꎬ显影ꎬ定影ꎬ得到含条带的Ｘ胶片ꎬ并用ＩｍａｇｅＪ软件对结果进行半定量分析ꎮ１ ４㊀统计学方法㊀采用ＳＰＳＳ１６.０统计软件处理数据ꎬ定量数据用 ｘʃｓ表示ꎬ组间比较用单因素方差分析ꎬＰ<０.０５为差异有统计学意义ꎮ２㊀结㊀㊀果２ １㊀各组ＳＧＣ－７９０１细胞生长ＣＣＫ－８法检测情况㊀各组细胞处理２４ｈ后ꎬ空白血清组㊁低剂量含药血清组㊁中剂量含药血清组㊁高剂量含药血清组细胞生长抑制率分别为(９８.５ʃ１.２)％ꎬ(７９.３ʃ１ ９)％ꎬ(６８.９ʃ２.４)％ꎬ(５４.６ʃ１.５)％ꎬ各含药血清组细胞生长抑制率均明显低于空白血清组(Ｐ均<０ ０５)ꎬ且呈浓度依赖性ꎮ２ ２㊀各组ＳＧＣ－７９０１细胞增殖能力ＥｄＵ染色情况空白血清组中红色亮点和蓝色亮点最多ꎬ细胞增殖能力强ꎻ低剂量含药血清组㊁中剂量含药血清组㊁高剂量含药血清组依次红色亮点递减ꎬ细胞增殖能力逐渐减弱ꎮ见图１ꎮ２ ３㊀各组免疫荧光技术检测细胞增殖抗原Ｋｉ－６７图１㊀各组血清处理ＳＧＣ－７９０１细胞２４ｈ后ＥｄＵ染色表现(ˑ１００)表达情况㊀各组细胞处理２４ｈ后ꎬ低剂量含药血清组中Ｋｉ－６７的绿色荧光强度明显减弱ꎻ中剂量含药血清组㊁高剂量含药血清组Ｋｉ－６７的荧光强度略弱于低剂量含药血清组ꎬ中㊁高剂量组之间未观察到明显差异ꎮ见图２ꎮ２ ４㊀各组ＳＧＣ－７９０１细胞中增殖相关基因表达情况㊀各含药血清组中ｐ２１㊁ｐ５３ｍＲＮＡ相对表达水平均明显高于空白血清组(Ｐ均<０.０５)ꎬＣｙｃｌｉｎＤ１ｍＲ￣ＮＡ相对表达水平均明显低于空白血清组(Ｐ均<０ ０５)ꎬ且呈现出浓度依赖性ꎻ各组ＣＤＸ２㊁ＣＤＫ７ｍＲＮＡ相对表达水平比较差异均无统计学意义(Ｐ均>０.０５)ꎮ见表１ꎮ图２㊀各组血清处理ＳＧＣ－７９０１细胞２４ｈ后Ｋｉ－６７蛋白荧光染色表现(ˑ１００)表１㊀各组ＳＧＣ－７９０１细胞中增殖相关基因表达情况( ｘʃｓ)组别ｐ２１ｐ５３ＣｙｃｌｉｎＤ１ＣＤＸ２ＣＤＫ７空白血清组１１１１１低剂量含药血清组１.３１ʃ０.０９①１.２２ʃ０.０５①０.８１ʃ０.０３①１.１４ʃ０.０５０.８２ʃ０.０３中剂量含药血清组１.３９ʃ０.１１①②１.２８ʃ０.０４①②０.７７ʃ０.０４①②１.０５ʃ０.０５①②１.１５ʃ０.０６①②高剂量含药血清组２.７６ʃ０.３７①②③１.５７ʃ０.０４①②③０.６２ʃ０.０２①②③１.０７ʃ０.０５０.８５ʃ０.０２㊀㊀注:①与空白血清组比较ꎬＰ<０.０５ꎻ②与低剂量含药血清组比较ꎬＰ<０.０５ꎻ③与中剂量含药血清组比较ꎬＰ<０.０５ꎮ２ ５㊀各组ＳＧＣ－７９０１细胞中增殖相关蛋白表达情况㊀各含药血清组ｐ２１蛋白表达水平均明显高于空白血清组(Ｐ均<０.０５)ꎬ且呈浓度依赖性ꎻ低剂量含药血清组和中剂量含药血清组ｐ５３蛋白表达水平均明显高于空白血清组(Ｐ均<０.０５)ꎬ而高剂量含药血清组ｐ５３蛋白表达水平明显低于空白血清组(Ｐ<０.０５)ꎻ各组ＣｙｃｌｉｎＤ１㊁ＣＤＸ２蛋白表达水平比较差异均无统计学意义(Ｐ均>０.０５)ꎮ见表２ꎮ表２㊀各组ＳＧＣ－７９０１细胞中增殖相关蛋白表达情况( ｘʃｓ)组别ｐ２１ｐ５３ＣｙｃｌｉｎＤ１ＣＤＸ２空白血清组０.０５ʃ０.０１０.０９ʃ０.０１０.３９ʃ０.０２０.１２ʃ０.０１低剂量含药血清组０.０９ʃ０.０２①０.１６ʃ０.０２①０.３６ʃ０.０１０.１３ʃ０.０１中剂量含药血清组０.１１ʃ０.０１①②０.１９ʃ０.０１①②０.４６ʃ０.０２０.１２ʃ０.０２高剂量含药血清组０.１８ʃ０.０２①②③０.０６ʃ０.０２①②③０.４２ʃ０.０２０.１４ʃ０.０１㊀㊀注:①与空白血清组比较ꎬＰ<０.０５ꎻ②与低剂量含药血清组比较ꎬＰ<０.０５ꎻ③与中剂量含药血清组比较ꎬＰ<０.０５ꎮ３㊀讨㊀㊀论胃癌是一种消化系统高发的恶性肿瘤ꎬ近些年来其发病率呈上升趋势ꎮ目前ꎬ胃癌的治疗越来越重视综合治疗ꎬ以期发挥各疗法的优势ꎮ我国中医药在胃癌的综合治疗中占据一席之地ꎬ且有不错的临床效果ꎬ如中医药与手术治疗相结合有助于提高机体抗癌能力ꎬ提高手术效果ꎻ中医药可减轻放疗的不良反应ꎬ同时对放疗有一定的增效作用ꎻ中医药配合全身化疗或介入化疗ꎬ可减轻和改善化疗不良反应ꎬ同时对胃癌有提高缓解率的效果[８－１０]ꎮ虽然中药复方能抑制胃癌发生㊁发展ꎬ改善胃癌患者生活质量ꎬ提高综合治疗疗效ꎬ在防治胃癌工作中发挥重要作用[５－６]ꎬ但中药及复方组成复杂多样ꎬ仅从所含成分数和量的变化角度很难阐明复方与机体的相互关系ꎬ且中药复方的化学组成并不能代表其在体内发挥生物效应的化学形式ꎮ针对中药及其复方复杂多样的成分特点ꎬ用含药血清进行体外细胞实验ꎬ其结果的可信度明显优于中药粗制剂直接用于体外实验ꎬ且可以直接反映中药及其代谢产物的药理作用ꎬ从而相对有效地阐释中医药治病的科学机制ꎬ为中医药现代化研究提供依据[１１]ꎮ在胃癌发生㊁发展过程中ꎬ基因结构㊁编码蛋白的变化是十分复杂的ꎬ在胃癌多阶段发生㊁发展的每一步可能涉及一种或几种基因的变化[１２－１４]ꎮｐ５３是一个重要的抗癌基因ꎬ其过表达可引起胃黏膜上皮细胞增殖成胃癌细胞ꎬ导致胃癌的形成㊁发展和转化ꎮ周烨等[１５]研究发现ｐ５３蛋白与胃癌患者的预后呈负相关ꎬ可作为胃癌预后的重要因素ꎮ作为ｐ５３基因的最重要的下游基因之一ꎬｐ２１基因的表达产物ｐ２１蛋白可以通过依赖或不依赖ｐ５３的途径在细胞周期中发挥抑制细胞增殖而产生抑癌作用ꎮ刘春远等[１６]研究发现ｐ２１基因转染人胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１ꎬ可使细胞周期阻滞在Ｇ１期ꎬ胃癌细胞的失控性增殖受到明显抑制ꎮ在本实验中ꎬ采用ＣＣＫ－８法㊁ＥｄＵ染色法和Ｋｉ－６７蛋白免疫荧光染色法分别从细胞活力㊁ＤＮＡ复制及肿瘤分裂特征蛋白３个方面ꎬ证明了胃热消炎合剂药物血清可以抑制人胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１的增殖ꎬ并具有剂量依赖性ꎮ基因和蛋白表达检测结果显示ꎬ各含药血清组ｐ２１㊁ｐ５３ｍＲＮＡ表达水平和ｐ２１蛋白表达水平均明显高于空白血清组ꎬＣｙｃｌｉｎＤ１ｍＲＮＡ表达水平均明显低于空白血清组ꎬ且呈浓度依赖性ꎬｐ２１基因或蛋白的异常转录或表达可使细胞周期调控失常ꎬ导致细胞无限增殖ꎬ因此推断胃热消炎合剂是通过作用于细胞周期来调控细胞增殖的ꎻ低剂量含药血清组和中剂量含药血清组ｐ５３蛋白表达水平均明显高于空白血清组ꎬ而高剂量含药血清组ｐ５３蛋白表达水平明显低于空白血清组ꎬ可能是由于高剂量药物对细胞产生了毒副作用ꎬ从而影响了ｐ５３ｍＲＮＡ转录水平ꎻ各组ＣｙｃｌｉｎＤ１㊁ＣＤＸ２蛋白表达水平比较差异均无统计学意义ꎬ提示药物血清并没有引起ＣＤＸ２㊁ＣｙｃｌｉｎＤ１蛋白的明显变化ꎮ总之ꎬ本实验证实胃热消炎合剂可能通过作用于细胞周期来抑制人胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１增殖ꎬ其可能具有预防和治疗早期胃癌的作用ꎬ为进一步研究药物与癌细胞间相互作用及开发新的治疗癌症方法提供了实验依据ꎮ[参考文献] [１]㊀ＹａｎｇＬ.ＩｎｃｉｄｅｎｃｅａｎｄｍｏｒｔａｌｉｔｙｏｆｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｉｎＣｈｉ￣ｎａ[Ｊ].ＷｏｒｌｄＪＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌꎬ２００６ꎬ１２(１):１７－２０[２]㊀ＲｕｇｇｅＭꎬＦａｓｓａｎＭꎬＧｒａｈａｍＤＹ.ＥｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙｏｆＧａｓ￣ｔｒｉｃＣａｎｃｅｒ[Ｊ/ＣＤ].ＷｏｒｌｄＪＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ(ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｅ￣ｄｉｔｉｏｎ)ꎬ２０１５ꎬ１２(３):３５４－３６２[３]㊀ＨｏｕｇｈｔｏｎＪＭꎬＳｔｏｉｃｏｖＣꎬＮｏｍｕｒａＳꎬｅｔａｌ.Ｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｏｒｉｇｉｎａｔｉｎｇｆｒｏｍｂｏｎｅｍａｒｒｏｗ￣ｄｅｒｉｖｅｄｃｅｌｌｓ[Ｊ].Ｓｃｉｅｎｃｅꎬ２００４ꎬ３０６(５７０１):１５６８－１５７１[４]㊀ＯｈＪＫꎬＷｅｉｄｅｒｐａｓｓＥ.ＩｎｆｅｃｔｉｏｎａｎｄＣａｎｃｅｒ:ＧｌｏｂａｌＤｉｓ￣ｔｒｉｂｕｔｉｏｎａｎｄＢｕｒｄｅｎｏｆＤｉｓｅａｓｅｓ[Ｊ].ＡｎｎＧｌｏｂＨｅａｌｔｈꎬ２０１４ꎬ８０(５):３８４－３９２[５]㊀鲍文磊.中药复方治疗胃癌的临床研究进展[Ｊ].辽宁中医药大学学报ꎬ２００８ꎬ１０(１):６８－７０[６]㊀黄铭涵ꎬ陈琴ꎬ高玲ꎬ等.中药复方联合化疗治疗胃癌术后疗效分析[Ｊ].中医药导报ꎬ２０１０ꎬ１６(８):２０－２２[７]㊀贡婷洁.中药复方在胃癌治疗中的研究进展[Ｊ].中国中西医结合消化杂志ꎬ２０１２ꎬ２０(５):２３４－２３５[８]㊀陈凛ꎬ李涛.胃癌综合治疗现状与进展[Ｊ].世界华人消化杂志ꎬ２００８ꎬ１６(６):５７１－５７４[９]㊀秦洪真ꎬ郗洪庆ꎬ陈凛.胃癌综合治疗研究进展[Ｊ].人民军医ꎬ２０１５ꎬ５８(９):１０９８－１１００[１０]林明生ꎬ王常松.中医药对胃癌术后化疗患者的辨治思路[Ｊ].长春中医药大学学报ꎬ２０１５ꎬ３１(２):２７８－２８０[１１]王筠ꎬ张军平.中药血清药理学试验方法研究概况[Ｊ].天津中医药ꎬ２００５ꎬ２２(１):８６－８８[１２]孙晓红ꎬ李洪涛ꎬ邵世和ꎬ等.中药防风对胃癌ＳＧＣ－７９０１细胞生长及基因表达的研究[Ｊ].北华大学学报:自然科学版ꎬ２００９ꎬ１０(２):１２７－１３０[１３]张学庸.胃癌相关基因和基因治疗[Ｊ].医学争鸣ꎬ２００１ꎬ２２(９):７６９－７７０[１４]ＯｋｕｙａｍａＴꎬＭａｅｈａｒａＹꎬＫａｂａｓｈｉｍａＡꎬｅｔａｌ.Ｃｏｍｂｉｎｅｄｅ￣ｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆｐ５３ａｎｄｐ２１ｐｒｏｔｅｉｎｓａｓｐｒｏｇ￣ｎｏｓｔｉｃｆａｃｔｏｒｓｆｏｒｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｇａｓｔｒｉｃｃａｒｃｉｎｏｍａ[Ｊ].Ｏｎ￣ｃｏｌｏｇｙꎬ２００２ꎬ６３(４):３５３－３６１[１５]周烨ꎬ朱慰祺ꎬ师英强ꎬ等.血管内皮生长因子和抑癌基因ｐ５３在胃癌中的表达及其临床意义[Ｊ].中国癌症杂志ꎬ２００３ꎬ１３(１):９－１２[１６]刘春远.Ｐ２１－Ｐ２７双基因转染胃癌细胞对细胞周期的影响[Ｄ].青岛:青岛大学ꎬ２００７[收稿日期]㊀２０１９－０５－０５。
尼美舒利、舒林酸对人胃癌SGC-7901细胞增殖及COX-2、iNOS表达的抑制作用
尼美舒利、舒林酸对人胃癌SGC-7901细胞增殖及COX-2、iNOS表达的抑制作用费素娟;朱祖安;刘莹【期刊名称】《南京医科大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2005(025)012【摘要】目的:观察尼美舒利、舒林酸对人胃癌SGC-7901细胞的生长抑制作用及对COX-2、iNOS表达的影响.方法:MTT法检测不同浓度尼美舒利、舒林酸对SGC-7901细胞的生长抑制作用,免疫组织化学Power visionTM两步法、Western b1ot方法检测药物作用前后细胞COX-2、iNOS表达情况:同时生化方法检测细胞内TNOS、iNOS、NO含量的改变.结果:尼美舒利、舒林酸可以抑制人胃癌SGC-7901细胞生长并具有浓度、时间依赖性;与阴性对照组相比,舒林酸、尼美舒作用48 h后,舒林酸0.6、1.2mmol/L组及尼美舒利100、200μmol/L组中COX-2、iNOS蛋白表达率及细胞内iNOS、TNOS、NO含量均明显降低(P＜0.05).结论:尼美舒利、舒林酸可以抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,其机制除了与抑制COX-2有关外还与抑制iNOS的蛋白表达与活性有关.【总页数】4页(P914-917)【作者】费素娟;朱祖安;刘莹【作者单位】徐州医学院附属医院消化内科,江苏,徐州,221002;徐州医学院附属医院消化内科,江苏,徐州,221002;徐州医学院病理学教研室,江苏,徐州,221002【正文语种】中文【中图分类】R735.2;R730.45【相关文献】1.尼美舒利舒林酸对人胃癌细胞NF-κB iNOS表达的抑制作用 [J], 朱祖安;刘莹;费素娟2.姜黄素对人胃癌SGC-7901细胞增殖及COX-2mRNA和COX-2蛋白表达的影响 [J], 司宏;徐艳艳3.尼美舒利和舒林酸对人胃癌SGC-7901细胞COX-2和VEGF表达的影响及意义[J], 朱祖安;刘莹;费素娟4.尼美舒利对人胃癌SGC-7901细胞PGE2合成及COX-2、VEGF表达的影响 [J], 吴克俭;费素娟;陈光侠5.舒林酸、尼美舒利对人胃癌SGC-7901细胞增殖及COX-2、NF-κB表达的抑制作用 [J], 朱祖安;刘莹;费素娟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
阿司匹林对胃癌细胞株SGC-7901增殖及核因子κB表达的影响
癌细胞株 Ｓ Ｃ７ ０ ， Ｇ －９ １ 采用 ＭＩ 法检测 阿司匹林 在不同浓度和不同作用时间下对 胃癌细胞增殖 的影 响 ； Ｎ ｒ ｒ Ｄ Ａ琼脂糖凝 胶 电泳检测细胞凋亡 ； 蛋白质印迹法和免疫荧光法检测 阿司匹林对 胃癌细胞 Ｎ —Ｂｐ ５表 达的影响 。结果 ： Ｙ结 ＦＫ ６ ＭＴ
阿 司 匹林 对 胃癌 细胞 株 Ｓ Ｃ７ ０ 增 殖 Ｇ 一９ １ 及 核 因子 Ｋ Ｂ表 达 的影 响
姚 红波 ，李永金 ，陶 燕 ， 黄晓佳 ，陈永 昌
（ 苏 大 学 基 础 医 学 与 医 学 技 术 学 院 ，江苏 镇 江 ２ ２ １ ） 江 １ ０３
［ 摘
要 ］ 目的 ： 讨阿司匹林对 胃癌细胞 Ｓ Ｃ７ ０ 增 殖及核因子 Ｋ ６ （ ＦＫ ６ ） 探 Ｇ －９ １ Ｂ ｐ５ Ｎ —Ｂ０５ 表达的影响。方法 ： 培养 胃
Ｙ Ｏ Ｈ ｎ ．ｏ Ｌ ｏｇ ｎ， Ａ ａ ＨＵ Ｎ ｉｏ ｉ Ｃ Ｅ ｉ ｆ Ｔ Ｏ Ｙ ｎ， Ａ ＧＸ ａ －ａ， Ｈ Ｎ Ｙ ｎ —ｈ ｎ ｊ
（ ｃｏｌ ｆＭｅｉ ｌ ｃ ｎｅａｄＬ ｂｒｔｒ Ｍ ｄｃ ｅ ＪａｇｕＵ ｉ ｒｉ ，Ｚ ｅｊ ｎ ｉ ｇｕ２ ２ １ Ｓ ｈｏ ｏ ｄｃ ｉ ｃ ｎ ａ ｏａ ｙ ｅ ｉｎ ， ｉｎｓ ｎｖ ｓｙ ｈｎｉ ｇＪ ｎ ｓ １０３，Ｃ ｉａ ａＳｅ ｏ ｉ ｅ ｔ ａ ａ ｈｎ ）
ｐｒｓ ｉ ｎ ｉ ａ ｔ ｃ ｃ ｎ ｅ ｅｌｌｎｅ Ｓ ｅ ｓｏ ｎ ｇ ｓｒ ａ ｃ ｒ ｃ ｌ ｉ ＧＣ－ ９ ． Ｍ ｅｈｏ ｉ ７ ０１ ｔ ｄｓ：Ｇａ ｔ ｃ ｃ ｎ ｅ ｅ ｌｌｎ ＧＣ－ ０１ ｓｒ ａ ｃ ｒ ｃ ｌ ｉ ｅ Ｓ ｉ ７９ ｗａ ｒ ａｅ ｓ ｔｅ ｔ ｄ ｗｉ ｓ ｉ ｎ ｏ ｉ ｅｅ ｔｃ ｎ ｅ ｔａ ｉｎ ｒ ｄ ｆｅｅ ｔｔｍｅ，ｅｆｃ ｆａ ｐｉ ｎ ｏ ｒ ｌｆｒ ｔｏ ｎ ｐ ｐ ｏ ｉ ｎ ｔ ａ ｐｒ ｆｄ ｆ ｒ ｎ ｏ ｃ ｎ ｒ ｔ ｓ ｏ ｉ ｒ ｎ ｉ ｈ ｉ ｆ ｏ ｆ ｆｅ ｔｏ ｓ ｒ ｎ ｐ ｏｉｅ ａｉｎ ａ ｄ ａ ｏ ｔ ｓｓ ｉ ｉ ＳＧＣ－ ９ ｓ ｅ ａｕａｅ ｙ ＭＴＦ ａ ｓ ｙ ａ ｄ ＤＮＡ ｇ ｒ ｓ ｅ ｌｃｒ ｐｈ ｒ ｓｓ；ｅ ｐｒ ｓ ｉｎ ｏ ｕ ｌ ａ ａ ｔｒ ７ ０１ ｗａ ｖ ｌ ｔ ｄ ｂ ｓａ ｎ ａ ａ ｏ ｅ ｇ ｌｅ ｅ ｔｏ ｏ ｅ ｉ ｘ ｅ ｓｏ ｆ ｎ ｃｅ ｒ ｆ ｃｏ ｋａ ｐ ６５ ｗａ ｅｅ ｍｉ ｅ ｅ ｔ ｒ ｌ ｔｉｇ ａ ｄ ｉ ｐ ａ Ｂ ｐ ｓ ｄ ｔ ｒ ｎ ｄ ｂｙ Ｗ ｓｅ ｎ ｂ ｏ ｔ ｎ ｍｍｕ ｆｕ ｒ ｓ ｅ ｃ ｔ ｏ ｎ ｍｏｌ ｏ ｅ ｃ ｎ ｅ ｍｅｈ ｄ．Ｒｅ ｕｌｓ：Ａｓ ｉ ｎ ｃ ｎ ｓ ｔ ｐｒ ａ ｉ
奥曲肽对人胃癌细胞株SGC-7901生长的影响
奥曲肽对人胃癌细胞株SGC-7901生长的影响
唐卓斌;刘为纹
【期刊名称】《癌症（英文版）》
【年(卷),期】2002(021)001
【摘要】@@ 奥曲肽是一种生长抑素的八肽类似物.近年发现,奥曲肽对多种胃肠道肿瘤有抑制作用 [1～ 3]. 为了进一步了解奥曲肽对胃癌细胞生长的影响,探讨其治疗胃癌的可能性,我们选用人中分化胃癌细胞株 SGC-7901,采用噻唑氮蓝(MTT)比色分析法,研究 6种浓度的 17肽促胃液素(G-17) 及奥曲肽对 SGC-7901细胞生长的影响及其作用机制,以期为临床应用提供依据.rn1 材料和方法 rn1.1 主要试剂G-17和 MTT(四甲基偶氮唑蓝 )均购自 Sigma公司,奥曲肽由瑞士 Sandoz药厂惠赠.RPMI-1640购自 Gibco公司,人胃癌细胞株 SGC-7901由第三军医大学附属西南医院消化内科实验室提供.DMSO为上海硫酸厂产品,胰蛋白酶(trypsin) 购自华美公司,胎牛血清购自华西生物制品厂.
【总页数】2页(P103-104)
【作者】唐卓斌;刘为纹
【作者单位】天津二五四医院消化科,天津,300142;第三军医大学附属西南医院消化科,重庆,400038
【正文语种】中文
【中图分类】R735.2
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
奥曲肽对人胃癌SGC_7901裸鼠种植瘤生长的影响
基金项目:受国家教育部高等院校骨干教师基金和福建省自然基金资助(C9910008)作者单位:福建医科大学附属第一医院消化科,福建医科大学消化系病研究室,福州 350005通讯作者:王承党,013178111141,E -mail:wangcdhl@奥曲肽对人胃癌SGC -7901裸鼠种植瘤生长的影响王承党 陈滟珊 刘 霞=摘要> 目的 观察生长抑素类似物奥曲肽在体内对胃癌生长的影响。
方法 人胃癌细胞株SGC -7901细胞接种于48只裸鼠背部皮下制成荷瘤动物模型。
第8天将裸鼠随机分成4组:奥曲肽(Oct 组,100L g/kg;s.c.qd);5-Fu 组(17mg/kg,ip,2次/周);奥曲肽和5-Fu 联合治疗组(联合治疗组);对照组,每组各12只裸鼠。
连续用药6周。
末次用药24小时后处死动物,检测肿瘤体积、重量、坏死体积,比较抑瘤率。
结果 奥曲肽组、5-Fu 组、联合治疗组、对照组的平均瘤体体积(cm 3)分别为2.17?0.78、2.19?0.79、1.36?0.75、3.23?0.74(F =9.317,P =0.0001);平均瘤体重量(g)分别为6.88?2.06、7.22?2.47、4.47?2.28、10.30?2.80(F =5.452,P =0.0001);平均坏死体积(cm 3)分别为0.55?0.38、0.52?0.53、1.14?0.83、0.32?0.27(F =13.987,P =0.0001);奥曲肽组、5-Fu 组、联合治疗组的抑瘤率分别为:33.20%、29.92%、56.60%(V 2=6.461,P =0.04)。
结论 奥曲肽可以抑制裸鼠胃癌移植瘤的生长。
=关键词> 胃肿瘤;奥曲肽;生长抑素中图分类号:R735.2 文献标识码:A 文章编号:1006-5709(2006)01-0010-02Inhibitory effects of octreotide on the growth of gastric cancer line SGC -7901in vivoWANG Chengdang,C HEN Yanshan,LIU XiaDepartment o f Gastroenterology and the Lab o f Digestive Diseases ,The First Affiliated Hos pital o f FujianMedical University ,Fuzhou 350005,China=Abstract > Objective To investigate the effcets of somatostatin analogue oc treotide on the growth of gastric cancer SGC -7910in vivo .Methods The forty -eight nude mice of xenotransplanted human gastric cancer cell line SGC -7901in gym -nomouse body were set up.On the eighth day,all nude mice were randomly divided into four groups and each group had twelve mice.Octreotide at a dose of 100ug/kg was subcutaneously administered once a day in Octreotide group.5-FU was in -traperitoneally administered twice a week in 5-FU bined group receivel all the reagents as Oc treotide group and 5-FU group.Control group received injection of NS.Six weeks later,all mice were executed.The tumor mass volume,weight,necrosis volume were observed and the inhibition rate of tumor growth were also caculated.Results The average tumor vo-lumes(c m 3)in Octreotide group,5-FU group,combined group and control group was 2.17?0.78,2.19?0.79,1.36?0.75and 3.23?0.74respectively (F =9.317,P =0.0001).The avera ge tumor weight (g )was 6.88?2.06,7.22?2.47,4.47?2.28and 10.30?2.80(F =5.452,P =0.0001).The average tumor necrosis volume(c m 3)was 0.55?0.38,0.52?0.53,1.14?0.83and 0.32?0.27(F =13.987,P =0.0001),and the average tumor inhibition rate in Octreotide,5-FU and Combined group was 33.20%、29.92%、56.60%respectively (V 2=6.461,P =0.04).C onclusion Octreotide could inhibit the SGC -7901growth in vivo.=Key words > Gastric cancer;Ooctreotide;Soma tostatin 生长抑素(somatostatin,SS)具有广泛的生物活性,近年来的动物及人体外细胞系的研究表明,SS 对胃肠肿瘤细胞的生长具有抑制作用。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
为 常见 ，Ｓ Ｒ ２是 一 种 和 Ｃ蛋 白藕 联 的受 体 ， ＳＴ 一 和生 长 抑 素结 合 后 可 使 酪 氨 酸 磷 酸 酶 和 磷 脂 酶 Ｃ的 活 性并 促进 Ｉ３的形成 ．其 主要 的生 理 功能 是抑 制 多 Ｐ
下调 ； 而相 对低 浓 度 的 Ｓ Ａ（ｘ ＯＳｍｏ Ｌ 对 肿瘤 细 Ｓ １ｌ￣ ｍ ｌ ） ｌ
胞 的 抑 制 作 用 呈 时 间 依 赖 性 ．并 且 对 肿 瘤 细 胞
Ｓ Ｔ ２ｍＲ Ａ 表 达 没 有 明显 影 响 。 因此 ，Ｓ 对 Ｓ Ｒ一 Ｎ ＳＡ
Ｓ Ｃ ７０ Ｇ 一 ９ １胃癌 细 胞 的抑 制 作 用并 不 总 是 呈 现 时间 或者浓 度 依 赖性 ， 只有 Ｓ Ａ浓度 适 当时它 的作用 才 Ｓ 呈现 时 间依 赖性 。 目前 多认 为生 长抑 素抗 肿瘤作 用 机制 可能 包括 直接作 用 和 间接作 用两 方 面 ．前 者通 过特 异性 受体 发挥作 用 。 研究 发 现 胃肠 激 素受体 均 位于 细胞 膜上 ． 以高度特 异性 、 定亲 和力 与 胃肠 激 素相 结合 ． 一 １ 通过 不 同 的信号 传导 途径 ． 引发 相应 的细 胞反 应 ． 其反应
２３ Ｓ Ｔ 一 Ｎ 表达情 况 ． Ｓ Ｒ ２ｍＲ Ａ 在 没 有 Ｓ Ａ 干 预 时 （ Ｓ Ａ浓 度 为 ０ ｏ Ｌ Ｓ 即 Ｓ ｍｍ ｌ ／ 时 ） 在 ０ ７ ｈ的各 个 时 间点 ，Ｇ ７ ０ ， —２ Ｓ Ｃ ９ １细 胞 Ｓ Ｔ Ｓ Ｒ一
２ Ｎ ｍＲ Ａ表达 的 Ｏ Ｄ值 没有 显著 性差 异 ； Ｓ Ａ浓 度 当 Ｓ
时间 （） ｈ
Ｃ ｎ ｒｌ对 照 组 ， 为 ｌ ｌ ￣ ｍｏ Ｌ Ｓ Ａ组 ， ｏｔ ： ｏ Ａ ｘ０ ｍ ｌ Ｓ ／ Ｂ为 Ｉ １ － ｏ Ｌ Ｓ Ａ 组 ， ｘ ０Ｓ ｍｍ ｌ Ｓ ／ Ｃ为 １ １ ￣ ｘ ０Ｓ ｌ Ｓ ｍｍｏ Ｌ Ｓ Ａ组 ／
６ ｍｏ Ｌ时 ．各 时 间 点 的 Ｏ ｍ ｌ ／ Ｄ值 差 异 没 有 统 计 学 意 义。 因此 ， 源性 Ｓ Ａ对 Ｓ Ｔ ２ｍ Ｎ 的影 响呈剂 外 Ｓ Ｓ Ｒ一 Ｒ Ａ
・ｌ １． ｌ
注 ： 号 内 数 值 为 肿 瘤 生 长 率 （ ） 负 值 表 示 肿 瘤 生 长 受 抑 制 。ａ＜ ．ｏ （ｓ同 组 其 他 时 间 点 ） ｂ＜ ．ｌｖ 括 ％ ， Ｐ Ｏｏ ｉｖ ，ｐ ｏＯ （ｓ同 组 其 他 时 间 点 ） Ｐ ｏ０ １ ， ＜．０
（ ｓｌ ｌ 和 Ｉ １ － ｖ ｘ ０ ｘ ０Ｓ ｍｍｏ， 组 ） ｌＪ Ｉ
维普资讯
・
１・ １ ２
中 国 肿 瘤 临 床
ｂｅ ｂ ｎ ｄ Ⅱ ２ ０ ， ５１： － ５ ｌ － ｉｄｓ ｙ 】 ０ ７ ４ （ ９ １ －ｌ ｔ ｕ ． ）
２８第５第 期 ０年 ３ ２ ０ 卷
种 细 胞 的增 殖 。
ｆ ｒ ｔｅ ｔａ ｎｔ ｏ ｄ ｎｃ ｄ Ｈ ＣＣ ：ａ ｒ ｎｄ ｏ ａ ｎ ｅ ｆ ａ ｖａ ｅ ｒ ａ ｏｍｉｅ ｃ ｎ ｒ ｌ ｄ ｄ ｕ ｚ ｄ ｏ ｔｏ ｌ ｏ — ｅ
Ｓ ｈ ｅｅａ 等 发现 ： 大 多数 可 被 Ｓ Ａ抑 制 的肿 瘤 ｃ ａｒｔ ｌ 绝 Ｓ
细胞 表 面存 在一 种 或 多种 Ｓ Ｔ 并 且 以 Ｓ Ｔ 一 Ｓ Ｒ， Ｓ Ｒ ２最
抑制作用 。 Ｓ Ｓ Ａ浓度较 高时 （ｘ ０４ ｌ ｌ－ ｏ Ｌ ， １ ｌ－和 ｘ ＯＳ ｌ ） ｍｍ ｌ 随着作用 时 间延长 ．对 肿瘤 细胞 的抑 制作 用逐 渐减
ＳＴ Ｓ Ｒ是 一种 膜 蛋 白受 体 ． Ｓ Ｔ — 有 Ｓ Ｒ１ ５五个 亚 型 ， 它
们 氨 基 酸 序 列 的 同 源 性 在 ３ ％ ７ ９ ５ ％范 围 之 内 。
３ 讨 论
Ｓ Ｃ ７０ Ｇ 一 ９ １胃癌 细胞 高表 达 Ｓ Ｔ 浓度 １ ｌ Ｓ Ｒ． ｘ０ 一
１ １ ￣ ｏ Ｌ的 Ｓ Ａ对 Ｓ Ｃ ７ ０ ｘ ０ ｍｍ ｌ ／ Ｓ Ｇ 一 ９ １肿 瘤 细胞 生 长有
为 １ １ － ｏ Ｌ １ ｌ ｏ Ｌ 时 ，Ｓ Ｒ一 Ｒ Ａ × ０４ ｍｍ ｌ 、 ｘ ０ ｍｍ ｌ ／ ／ ＳＴ ２ｍ Ｎ
表 达 下 调 １３ ％一 １ ５ Ｐ Ｏ０ ） ．５ ３ ． ％（ ＜ ． ，其 中 ３ ｈ ４ ｈ ６ ５ ６ 、８ 、
７ ｈ时低 于 Ｏ和 ２ ｈ时 （ ＜ ．１ 。Ｓ Ａ浓度 为 ｌ ｌ— ２ ４ Ｐ ＯＯ ） Ｓ ｘ ０
图 ２ 不 同 浓 度 ＳＡ 对 胃癌 细 胞 株 生 长 的 影 响。 表 ， ）
表 ２ ＳＳＴＲ— ２ ｍＲＮＡ 表达 的 ＯＤ’ 值
注 ： 号 内 数 值 为受 体 表 达 的增 长 率 （ ）负 值 表 示 受 体 表 达 下 调 、 值 表示 受 体表 达 上调 括 ％ ， 正
维普资讯
维普资讯
维普资讯
２０ 年第３ 卷第２ ０８ ５ 期 胃癌 细胞株 Ｓ 一 ９ １生 长抑素 ２型 受体 表达 和 外源性 生 长抑素 类似 物 的影响 ＧＣ ７ ０
Ｃ ｎｒｌ 对 照 组 ， 为 １ １ ＂ ｏ ｔｏ ： Ａ ＸＯ＊ ｍｍｏ／ Ｓ ｌ ＳＡ 组 ， Ｌ
强 度大 体 与被 激素 占据 的受体 数 量成 比例 。研 究 ］
证 实 ＳＴ Ｓ Ｒ存 在 于 正 常组 织 细 胞 及 肿 瘤 细 胞 膜 上 ．
Ｂ为 １ １ － ｍ ｌ Ｓ ｘ ０ｓ ｏ Ｌ Ｓ Ａ组 ． 为 ｌ １ ｍｏ Ｌ Ｓ Ａ组 ｎ ｉ ／ Ｃ ｘ ０ ｍ １ Ｓ ］ 图 ３ 不 同浓 度 Ｓ Ａ对 胃癌 细 胞 株 Ｓ Ｔ 一 Ｓ Ｓ Ｒ ２ｍＲＮ Ａ表 达 的影 响