HPLC测定罗汉果中罗汉果甜苷V的含量
超高压提取罗汉果中罗汉果甜苷V的工艺优化
超高压提取罗汉果中罗汉果甜苷V的工艺优化作者：王迪来源：《食品界》2017年第07期罗汉果为葫芦科植物罗汉果Siraitia grosvenorii C. Jeffrey ex A. M. Lu et Z. Y. Zhang的干燥果实，性凉、味甘，清热润肺，滑肠通便，用于肺火燥咳，咽痛失音，肠燥便秘。
罗汉果苷V 作为罗汉果中的主要成分，是评价其质量的指标性成分[2]。
本实验以罗汉果甜苷V的提取率为评价依据。
超高压技术应用于中药有效成分提取时，是利用100MPa以上的流体静压力作用于溶剂和中药的混合液，保压一段时间（几分钟）后卸压，然后进行分离纯化。
超高压提取是在一个密闭的环境中进行的，没有溶剂的挥发，因此该技术更加符合绿色环保的要求。
本文采用超高压技术，通过单因素实验结合正交试验优化了罗汉果甜苷V的提取工艺，以期为开发罗汉果皂苷类活性成分提供理论依据。
材料与方法材料与试剂。
罗汉果；罗汉果甜苷标准品；甲醇、乙醇（分析纯）；乙腈为（色谱纯）；水为蒸馏水。
主要仪器与设备。
SB25-12D型超声波提取仪；HPP.L3型超高压生物提取设备；岛津高效液相色谱仪LC-15C。
实验方法。
（1）样品的预处理将罗汉果干燥后粉碎，过40目筛得到样品。
（2）提取罗汉果甜苷V的方法精确称量用同一批次的样品0.5g，分别按照1：15的料液比加入纯净水，用不同的方法提取罗汉果甜苷。
所有实验重复三次，取平均值。
提取方法：①超高压提取（UPE）：提取条件的确定见第二部分[4]；②超声提取（UAE）：30KHz下，分别提取10min和30min；③加热回流提取（HRE）：100℃下分别水浴提取10min、30min和60min。
（3）色谱条件提取液用0.45m微滤膜过滤，再用乙醇定容到50ml。
检测条件为：Hypersil ODS C18色谱柱（4.0 mm×150 mm， 5m）；柱温30℃；检测波长203nm；进样量10μL；流动相A为乙腈，B为水；流速1mL·min-1；梯度洗脱程序为：0-15min，23%乙腈；15-16min，23%-100%乙腈；16-25min，100%-100%乙腈。
固相萃取-高效液相色谱法快速测定罗汉果甜甙V的含量
摘
要： 建立一个快速 、 简单、 准确的 固相 萃取预处理高效液相 色谱 法测定 罗汉果甜 甙 ｖ含量 的方 法。样品经 ｃ。 。固
相 萃取 管（０ ａｇ ３ｍＥ纯化后 以高效液相 色谱检测。色谱柱 为 Ｎ Ｐ ５ ， ２０ｒ ／ ） Ｈ２一 ０ 流动相 为 ｖ（ 乙腈 ） 水 ） ８ ：５ 流速 为 ： ｖ（ ＝ ５１ ， ｌ ｉ ｉ， ｄｍｎ 检测波长为 ２ ０ ｉ 标准曲线 自００５ｇ ～ ． ０ｇ ｍ １ ｍ。 ｒ ． ／ １ ０ Ｌ呈线形关 系（ ０ ９ ９３。 ２ Ｌ ０ ／ ．９ ） 研究表 明 ： 固相萃取 法能很 好的纯化罗汉果甜甙 Ｖ， 回收率高达 ９ ． ８８ ０％， Ｓ Ｒ Ｄ为 ０５ ． ２％。此 法样品处理 简单 ， 剂消耗 少， 溶 费用减少 ， 分析 结果
ｔｎｃｎ ｅ ｒｙ ｏｒｓ ｅ ，ｈ ｅａｅ ｅｏｅｙ ａ ｇｏｉｅ ａ ｐ ｏ ８ ０ Ｒ Ｄ Ｏ ２％） ｏ ｉ ｌｐ ｉ ｇｏｉ ｔ ａ ｒｇ ｃｖｒ ｔ ｏｍｏｒｓ ｗ ｓ ． ％（Ｓ ＝ ． ｏ ａ ｗ ｌｕ ｆ ｍ ｄ Ｖ ｅｖ ｒ ｒｅｆ ｄＶ ｕ ｔ９ ８ ５ ． ｍ－ Ｃ
ｐ ｒ ｄｔ ｕ ｆ ａｉｎｂ ｃ ｏ ｏ ｏ ｅ ｉ ， ｉ ｔ ｏ ｓｓｍｐ ｅ ｃ ｅ ｐ ｒｌａ ｌ ．ｔ ａ ｅａ ｐ ｉｄｂ ｏ ｄ ｙ ａｅ ｐ ｒｉ ｔｏ ｙｍａ ｒｐ ｒｕｓｒｓｎｔ ｓｍｅ ｄｗａ ｉ ｌ， ｈ ａ ， ｅｉｂ ｅ Ｉ ｎｂ ｐ ｌｅ ｒ ａ ｌ ． ｏ ｉ ｃ ｈ ｈ ｃ Ｋｅ ｒ ｓ ｍ ｏ ｒ ｓｄ ｈｇ ｅ ｏ ａ ｃ ｉｕ ｄｃ ｒ ｍ ａｏ ｒｐ ｙ ｓ ｌ ｈ ｓ ｘｒ ｃｉｎ ｙｗｏ ｄ ： ｇ ｏ ｉ ｅＶ： ｉｈｐ ｒ ｒ ｎ ｅｌ ｉ ｈ ｏ ｔｇ ａ ｈ ； ｏ ｉ ｐ ａ ｅｅ ｔａ ｔｏ ｆ ｍ ｑ ｄ
富硒罗汉果中罗汉果皂苷Ｖ的ＨＰＬＣ测定
富硒罗汉果中罗汉果皂苷Ｖ的ＨＰＬＣ测定-农学论文富硒罗汉果中罗汉果皂苷Ｖ的ＨＰＬＣ测定陈薇１，刘庚贵２，段小群１，吴卫１〔１．桂林医学院，广西桂林５４１００４；２．桂林甙元生物科技，广西桂林５４１００１〕摘要：成立富硒罗汉果〔Ｓｉｒａｉｔｉａｇｒｏｓｖｅｎｏｒｉｉ〕果实中罗汉果皂苷Ｖ的ＨＰＬＣ测定方式，以ＤｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８〔２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ〕为固定相，乙腈－水〔２４∶７６，Ｖ／Ｖ〕为流动相，检测波长２０３ｎｍ，流速１．０ｍＬ／ｍｉｎ，柱温３０℃。
结果说明，罗汉果皂苷Ｖ在０．２１～２．１０μｇ范围内线性关系良好〔ｒ＝０．９９９３〕，平均回收率为９７．６４％，ＲＳＤ为１．６６％。
该方式可用于富硒罗汉果果实中罗汉果皂苷Ｖ含量的测定。
关键词：罗汉果〔Ｓｉｒａｉｔｉａｇｒｏｓｖｅｎｏｒｉｉ〕；罗汉果皂苷Ｖ；高效液相色谱法中图分类号：Ｒ２８４．１文献标识码：A 文章编号：0439－８114〔２０15〕02－0444-02DOI:10.14088/罗汉果〔Ｓｉｒａｉｔｉａｇｒｏｓｖｅｎｏｒｉｉ〕属葫芦科〔Ｄｕｃｕｒｂｉｔａｃｅａｅ〕，主产于广西，为中国特色植物，在东南亚及欧美地域享有良好声誉，备受人们青睐，被誉为“东方神果〞。
罗汉果味甘、性凉，具有清热润肺，利咽开音，滑肠通便等成效，常常利用于医治肺火咳嗽、咽痛失音、便秘等，药用价值高［１］。
富硒罗汉果是最近几年研制出的罗汉果新品种，除上述成效外，富含硒元素，具有去除体内过量羟基自由基的成效［２］，可抗氧化、增强免疫力、抗疲劳等［３，４］。
葫芦烷型三萜皂苷类成份罗汉果皂苷Ｖ是富硒罗汉果中的主要有效成份［５－８］，通过成立富硒罗汉果中罗汉果皂苷Ｖ的ＨＰＬＣ分析方式，将有助于控制富硒罗汉果制剂的质量，为开发相关产品提供参考。
１材料与方法１．１材料与试剂富硒罗汉果〔产地：广西桂林，桂林亦元生现代生物技术提供，经桂林医学院生药学教研室品种鉴定为富硒罗汉果〕；罗汉果皂苷Ｖ〔批号：２０１２０６１９，纯度≥９８％，上海源叶生物科技〕。
高效液相色谱法制备罗汉果甜甙Ⅴ标准品
收稿日期：!""!#$"#"%作者简介：余丽娟，女，$&’(年生，高级工程师，)*+：（",,-）.%$!’-,，/01：（",,-）.%$,!%’，2#304+：+567!304+891:;1<7:*=7:><:基金项目：西部地区高等学校高级访问学者基金、美国西太平洋癌症基金会资助项目:高效液相色谱法制备罗汉果甜甙!标准品余丽娟$，!，陈全斌$，义祥辉$，杨瑞云$，张义正!（$:广西师范大学资源与环境学系，广西桂林.($""(；!:四川大学分子生物学与生物技术重点实验室，四川成都’$""’(）摘要：为深入研究罗汉果中功能成分的药理药效，进一步开发罗汉果中的有效成分，将罗汉果鲜果的水提物以?@#%吸附树脂分离、A #!%"离子交换树脂脱色后，利用半制备高效液相色谱法得到三萜皂甙类化合物罗汉果甜甙"标准品，纯度达&%B .C 。
色谱柱为?++D *>E2>9<9F G E *H *I J !柱；流动相为乙腈#水（体积比为’%K -!）溶液，流速.3L ／34<；检测波长!"-<3；柱温("M 。
此方法具有操作简便、重现性好、产品纯度高等优点。
关键词：半制备高效液相色谱法；三萜皂甙类；罗汉果甜甙"；鲜罗汉果中图分类号：N ’.%文献标识码：?文章编号：$"""#%,$-（!""-）"(#"-&,#"-!"#$%"%&’()(*+(,"(-’.#!*"(/0"#-10"2’&-(*32(1%),2(456’,1!#"*("/%)7#3’82’.91"(/%&(,"%$15O PL 4570<$，!，Q J 2IR 70<84<$，O ST 40<;E 74$，O ?I UV 7467<$，W J ?I UO 4X E *<;!（!"#$%&’()$*(+,-$.+/’0$.&*12*34’+*)$*(，5/&*6748+’)&9:*43$’.4(;，5/494*<=!>>=，?@4*&；A "B 40@/&*C ’+34*0$D $;E &F +’&(+’;+,G +9$0/9&’H 4+9+6;&*1H 4+($0@*+9+6;，B 40@/&*:*43$’.4(;，?@$*61/I !>>I =，?@4*&）:4-&"%7&：Y 9;H 9F 4=*"，0Z 4<=9[F \**D D H 4D *H G *<*;+6>9F 4=*>9<F D 4D 7*<D ，\0F 4F 9+0D *=[H 93[H *F E [H 74D F 9[L 79E 0<;79［B 4’&4(4&6’+.3$*+’44（B J 4*69$）?"K $,,’$;］\4D E0F *H 4*F 9[F D *G F ，4<>+7=4<;*1D H 0>D 49<\4D E\0D *H ，F *G 0H 0D 49<9<0<?@#%G 9+63*H 0=F 9H G D 49<>9+73<，=*>9+9H 0D 49<9<0A #!%"49<*1>E 0<;*>9+73<，G H *G 0H 0D 49<86F *34#G H *G 0H 0D 4]*E 4;E G *H [9H 30<>*+4^74=>E H 930D 9;H 0G E 60<==*D *>#D 49<\4D E F 4+4>0;*+U D E 4<#+06*H >E H 930D 9;H 0G E 6:?++D *>E2>9<9F G E *H *I J !>9+73<\0F 7F *=0D ("M \4D E 0>*D 9<4D H 4+*#\0D *H （’%K -!，]／]）0F 3984+*G E 0F *0D 0[+9\H 0D *9[.3L ／34<:P _=*D *>D 49<\0]*#+*<;D E\0F F *D 0D !"-<3:)E *G 7H 4D 69[D E *GH 9=7>D \0F &%B .C ，0<=4D >0<8*7F *=0F F D 0<=0H =F 03#G +*:)E *>E *34>0+F D H 7>D 7H *9[39;H 9F 4=*"\0F 4=*<D 4[4*=86$J#I Y V0<=$-Q #I Y V :;#5<(".-：F *34#G H *G 0H 0D 4]*E 4;E G *H [9H 30<>*+4^74=>E H 930D 9;H 0G E 6；D H 4D *H G *<*;+6>9F 4=*F ；39;H 9#F 4=*"；[H *F E #[H 74D F 9[L 79E 0<;79［B 4’&4(4&6’+.3$*+’44（B J 4*69$）?"K $,,’$;］广西著名特产罗汉果是葫芦科（?/0/’F 4(&0$&$）罗汉果属植物［B 4’&4(4&6’+.3$*+’44（B J 4*69$）?"K $,,’$;］的成熟果实，是我国传统的出口商品，在港澳地区、东南亚和欧美国家久负盛名，颇受欢迎。
罗汉果甜甙V含量分布及与果实密度和水溶物含量关系
罗汉果是葫芦科（ ｕ ｕｂｔ ｅｅ罗汉果属植物［ ｒ Ｃ ｃ ｒｉ ｃａ ） ａ Ｓ— ｉ ａ ｉｇ ｖ ｎｒ（ｗｎ ｌ） ． ｆｅ】 ｉａ ｍｓｅｏｉ Ｓ ｉｇ Ｃ Ｊ ｆ ｙ的成熟果实［原产于 ｔ ｉ ｅ ｅｒ １ １ ， 广西 、 广东 、 湖南 、 江西等省（ ） 区 的热带 、 亚热带 山区。 目 前对罗汉果 的研究与开发主要集 中在甜甙上， 中罗汉 其 果甜甙 Ｖ Ｍ ｇｏｉｅ 是甜甙 中主要甜味成分， （ ｏｒｓ Ｖ） ｄ 占总甜甙
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科研 学究
震
第０ 第月 ２８ ７ ０年 ７ ２ 期 ９ 卷
１ ３
・
罗汉果甜甙 Ｖ含量分布及与果实密度 和水溶物含量关 系
苏小建 ， 黄丽婕 ， 梁琼丹 ， 星存 何
（ 广西 师范大学 环境 与资源学院 ， 广西 桂林 ５ １０ ） ４ ０ ４
Ｓ０ＬＵＢＬＥ ＡＴｒ Ｍ ＥＲ
Ｓ ｉ －ｉ ， Ｕ Ｎ ｉ ｉ ， Ｉ Ｎ ｉ ｇ ｄｎ， ｉｇ ｃｎ ＵＸａ ｊ ｎ Ｈ Ａ ＧＬ－ ｅ ＬＡ Ｇ Ｑｏ — ａ ＨＥＸ ｎ— ｕ ｏ ａ ｊ ｎ
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含量也越大。
关键词 ： 高效 液 相 色谱 法 ； 甙 Ｖ； 甜 密度 ； 溶 性 物 质 可
’ Ｅ Ｉ Ｈ ｌ ＣＵ ’Ｅ ’ Ｄｌ ’Ｒｌ ’ Ｇ ’ ＵＧＲＵＳ ＤＥＶ Ａ Ｄ ’ ＲＥＬＡ’ｌ ｌ ｌ ’ ’ ＳＩ Ｂ Ｌ ｌ ’ ｌ Ｕ Ｍ ｌ ｌ ｌ ｌ Ｕ Ｓ Ｗ ｌ ’ 。 Ｌｌ ’ Ｓ ’ Ａ Ｊ Ｗ ＡＴ ｌ ｎｄｃ ｔｄ ｔ ａ ｈ ｅａ ｉｎ ｆｄ ｉｄ ｆ ｉ ｄ ｎ ｉｙａ ｄ ｔ ｅｗａ ｅ —ｓ ｌ ｂｅ ｍａ ｅｉ ｌ ｏ ｔ ｎ ． ｅｅ — ｆｄ ｉｄ ｆｕｔ ，ｉ ｉ ａｅ ｈ ｔｔ ｅ ｒ ｌｔ ｓｏ ｒｅ ｒ ｔ ｅ ｓｔ ｎ ｈ ｔｒ ｏ ｕ ｌ ｔｒａ ｎｅ ｔ Ｔｈ ｘ ｏ ｕ ｃ
超高效液相色谱法测定罗汉果中7种成分含量
超高效液相色谱法测定罗汉果中7种成分含量彭可垄;彭晴菲;刘林慧;尹春萍【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2022(41)10【摘要】目的建立超高效液相色谱法(UPLC)测定罗汉果中11-O-罗汉果苷Ⅴ、罗汉果皂苷Ⅴ、赛门苷Ⅰ、罗汉果苷Ⅳ、罗汉果苷Ⅲ、罗汉果苷Ⅲe、罗汉果苷Ⅱe 的含量。
方法采用Waters BEH C_(18)色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为水-乙腈溶液,梯度洗脱;柱温35℃;流速为0.3 mL·min^(-1);进样量为1μL;采用紫外检测器进行定量测定,检测波长203 nm;采用质谱检测器进行定性鉴别,检测模式为选择离子监测,监测离子的质荷比为1307.8,1309.8,1147.8,1147.8,985.7,985.7和823.7。
结果11-O-罗汉果苷Ⅴ、罗汉果皂苷Ⅴ、赛门苷Ⅰ、罗汉果苷Ⅳ、罗汉果苷Ⅲ、罗汉果苷Ⅲe、罗汉果苷Ⅱe分别在0.50~20.10,5.03~201.20,0.51~20.24,0.52~20.63,0.51~20.22,0.51~20.56,0.50 ~19.92μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r≥0.999);平均回收率分别为100.7%,98.4%,100.4%,99.0%,100.4%,99.2%和99.2%,RSD分别为1.9%,1.0%,2.0%,1.9%,1.3%,0.8%和2.1%;质谱鉴别结果与紫外检出情况一致。
结论该方法操作便捷、结果准确,重复性好,可用于同时测定罗汉果中的11-O-罗汉果苷Ⅴ、罗汉果皂苷Ⅴ、赛门苷Ⅰ、罗汉果苷Ⅳ、罗汉果苷Ⅲ、罗汉果苷Ⅲe、罗汉果苷Ⅱe的含量。
【总页数】6页(P1491-1496)【作者】彭可垄;彭晴菲;刘林慧;尹春萍【作者单位】重庆药友制药有限责任公司;华中科技大学同济医学院药学院【正文语种】中文【中图分类】R828.5【相关文献】1.固相萃取-高效液相色谱法快速测定罗汉果甜甙V的含量2.高效液相色谱法测定罗汉果饮料中甜苷V的含量3.快速溶剂萃取-超高效液相色谱法测定罗汉果中罗汉果皂苷V含量4.高效液相色谱法同时测定独活中七种有效成分含量及在质量评价中应用(英文)因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
反相高效液相法分析罗汉果皂苷V
分析 检测 李飞妍 黄玲 万红丽 汤臣倍健股份有限公司反相高效液相法分析罗汉果皂苷V范围内，故提取不完全；超声法（３．５９％）和加热回流法（３．５５％）对罗汉果甜苷的提取率差不大，而加热回流法对罗汉果甜苷的最佳提取所用的时间是超声法的４倍，且繁琐复杂。
从而确定超声法为本实验的提取方法。
（３）对照品溶液的配制精密称取皂苷Ｖ标准品１０．３４ｍｇ，用２３％的乙睛定容于５０ｍｌ容量瓶中，配制成０．２０６８ｍｇ／ｍｌ的对照品储备液。
（４）样品溶液的制备（５）波长的选择将制好的皂苷Ｖ对照品溶液和样品溶液于分光光度计下进行波长测定，发现２者在２０３ｎｍ处吸收峰均为最大，故令检测波长为２０３ｎｍ。
（６）色谱体系的确立①色谱柱的选择罗汉果中含有多种三萜皂苷类化合物，具相同苷元，结构类似，极性极相近，其区别仅在于所连接的葡萄糖基不同；而－ＮＨ２为碱性，具强氢键结合能力，对某些多官能团化合物具好分离。
故选氨基柱为检测的色谱柱，通过氨基键合相上的－ＮＨ２与糖类分子中的－ＯＨ间选择性相互作用，从而使皂苷达到很好分离效果。
故采用ＮＨ２柱作为实验的色谱柱，使罗汉果皂苷被有效洗脱②流动相的确定由于高效液相色谱中所用的流动相为液体，组分在流动相中受到亲和力的作用。
故对组分的分离度，流动相起很大影响；经由查阅相关资料，乙睛－水溶液对罗汉果皂甙分离效果较好：本文研究了２０％￣２５％的乙腈水溶液对罗汉果甜苷分离效果。
发现各色谱峰能较好分离所用乙腈水溶液为２３％。
低于２３％的乙腈水溶液为流动相时，洗脱能力低，主峰与杂质峰重叠现象严重；随着乙腈－水溶液的浓度增加（由２３％→２５％）时，分析时间↓，洗脱能力↑，但分离时间延长，甚至主峰不出现。
基本知识（１）皂苷Ｖ的基本知识皂苷是罗汉果中的一种非糖甜味成分，为极性较强的大分子化合物，不易结晶，易溶于水和醇，难溶于有机溶剂，具多种生物活性。
皂苷Ｖ（又称甜苷Ｖ）易溶于水、甲醇、乙醇等极性溶剂，不溶于石油醚、氯仿等低极性有机溶剂。
HPLC测定特殊医学用途电解质配方食品中罗汉果甜苷Ⅴ含量
t/min 图2 供试品色谱图
260
食品与药品 Food and Drug 2021年第 23卷第3期
件测定，测得峰面积积分值RSD为1.10 %，表明供
试品溶液在24 h内稳定。
2.7 加样回收率试验
精密称取已知含量的供试品约1 g，共9份，分
别精密加入一定量的罗汉果甜苷V对照品（1~3号
样品按样品中罗汉果甜苷含量的80 %添加，4~6号
腈、甲醇为色谱纯，磷酸为优级纯，蒸馏水为双蒸 基本无色谱峰，说明阴性制剂对所测组分无干扰。
水；特殊医学用途电解质配方食品（广州纽健生物 HPLC色谱图见图1~图3。
科技有限公司）。
2.3 线性试验
1.2 主要仪器
分别精密吸取不同浓度罗汉果甜苷V对照品
UltiMate3000系列高效液相色谱仪（Thermo 溶液（每1 ml中含罗汉果甜苷V分别为0.005，0.01，
Determination of Mogroside V in Electrolyte Formula Foods for Special Medical Purpose by HPLC
LIU Jun, LI Han-xi, HUANG Qi-ping, ZENG De-you, LU Yun-jun (Guangzhou Enternutr Biotechnology Co., Ltd., Guangzhou 510663, China) Abstract: Objective To establish a method for determination of mogroside V in electrolyte formula foods for special medical purpose by HPLC. Methods The content of mogroside V was determined by an HPLC system with Hypersil C18 (250 mm×4.6 mm, 5 μm) column, the mobile phase was 0.1 %H3PO4-CH3CN (76:24). The flow rate was 1 ml/min. The detection wavelength was set at 203 nm. Results The linear range of mogroside V was 0.05-1.0 μg (r=0.9997). The average recovery (n=9) was 101.23 %, with RSD of 1.59 %. Conclusion The HPLC method is simple, accurate, highly selective and reproducible, thus suitable for the quality control of electrolyte formula foods for special medical purpose. Key Words: electrolyte formula food for special medical purpose; mogroside V; content; HPLC
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罗汉果甜苷 ｖ标 准品
罗汉果样品
图 ｌ ＨＰ Ｃ色谱 图 Ｌ 收稿 日期 ：０７—１ —１ ２０ ０ ６ 作者简介 ： 欧莹 （９ Ｉ ）女 ， １Ｐ 卜 ， 广西南 宁市人 ， 中药 师 ， 在职研究生 ， 从事中药调配和质量标 准研究
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２０ ０７年 第 ｌ Ｏ卷 第
ＨＰ Ｃ测 定 罗 汉 果 中罗 汉 果 甜 苷 Ｖ 的含 量 Ｌ
欧 莹 陈金月 ， 荣灵 ， 覃
（． １ 广西中医学院第一附属 医院 ， 广西 南宁 ５０２ ； ． ３０ ３２ 南宁中科药业有限责任公 司， 广西 南宁 ５００ ） ３０ ３
１ 仪 器 与试 药
Ａ ｉｎ １０ 型 高 效 液相 色 谱 仪 （ 国安 捷 伦公 司产 ｇｅｔ １０ ｌ 美
品）真空脱气机 ， ： 自动进样 器 ， 柱温 箱 ， ＶＷＤ检测器 ， ｇｌ ｔ Ａ ｉｎ ｅ １０ １０型化学工作站 。罗汉果 甜苷 Ｖ对 照品 （ 经用 高效 液相 色谱法测定 含量 ９ ％以上 ） ８ 由广西 中医学 院中药化学教研室
（ ｗｉｇｅ Ｓ ｎ ｌ）Ｃ．ｅｆｅ ｘ Ａ． Ｌ ｔＺ Ｙ．ｈｎ Ｊｆｒｙｅ Ｍ． ｕｅ ． Ｚ ａｇ的干 燥 果 实。
２ 方法 与结果
２１ 色谱条 件 ． 色 谱柱 ： ｕｌ ｌ ０— Ｎ ２５ ｎ４６ ｍ Ｎ ｃ￣ｉ１０５ Ｈ （／ ，． ｅ ａ ｍ
Ｘ２０ ｍ） ； 动相 ： ５ｍ 柱 流 乙腈一 ２ ５ 水一 ．％四氢呋喃（７ ２ ：）流 ７ ：２ １ ； 速 ：ｍｌ ｎ 柱温 ：Ｏ ； ｌ ／ ； ｍｉ ３ ℃ 检测 波长为 ２ ３ ｍ； ０ ｎ 进样量 ： ； ５ 理
２ ２ 对照品溶液的制备 ． 精密称取经真空干燥器 ６ ℃减压 Ｏ
干燥 ４ ｈ的罗汉果甜 苷 Ｖ 对照 品 ５ ．ｍ ， ２ ｍ１ ８ ３４ ｇ 置 ５ 量瓶 中 ，
以甲醇溶解并定容 至刻度 ， ， 摇匀 即得浓度为 ２１６ ｇｒ 的 ． ｍ／ｌ ３ ｎ
罗汉果甜 苷 ｖ对照 品溶液 。
本 方 法 简便 、 速 、 确 ， 作 为 罗汉 果 药材 的 质 量 控 制 方 法 。 快 准 可
关键词 ： 罗汉果 ； 罗汉果甜 苷 Ｖ； 高效液相 色谱法
中图分类号 ： ４ １ 文献标识码 ： 文章编号 ：０ ８ ４ ６２ ０ ）４ ０ ５ ２ Ｉ ． ８ Ａ １０ —７８ （０ ７０ —０ ８ —０ 罗汉果为葫芦科植物罗汉 果的干燥果实 ， 性凉 、 味甘 ， 清 热润肺 ， 滑肠 通便 ， 于肺 火燥 咳 ， 痛失 音 ， 燥便 秘…。 用 咽 肠 在广西 民间的 药用 历史 已有 ３０多 年＿－ 主产 于广 西永 ０ ２４， Ｊ 福、 临桂 ， 已作 为广西部分地 区重要 的经济作物栽培 ， 现在 远 寿养 副教 授 签定 为葫 芦 科植 物 罗汉 果 Ｓｒ ｉａｇｏｖｎ￣ｉ ｉ ｔ ｒｓｅｏ ａｉ
销东南亚 、 日本、 拿 大、 国等 地 ， 受 国际 市场 欢迎 ＿。 加 美 深 ５ Ｊ
罗汉果中主要化学成分为非糖甜味物质 ， 葫芦 素烷型三萜皂
苷类罗汉果甜苷 （ ｃ ＇ｉ ） ， 有甜度 高 ， 量低 ， ｍ ￣ｏ ｄ ｖ６ 具 ｓｅ Ｊ 热 色泽
浅， 水溶性及 稳定性好 ， 用安 全等优 点 ， 国于 １９ 食 我 ９ ６年批
莫善列老师提供 ； 乙腈 、 四氢呋喃 为色谱纯 ， 为分析纯 。 甲醇 １ 批 罗汉果药材均采购于南 宁药材市场 ， ０ 经广西 中医学 院刘
ｗ ＾． 州 ＿ 忡 啪呻 哪 Ｌ瑚 ０ ｜ 研 ． Ｄ） 。
５ｌ ， 进样测定 ， 汉果 甜苷 Ｖ峰 的保 留时 间为 ２ ｒｎ 右 ， 罗 ４ ｉ左 ａ 主成分与相邻杂质峰分离 良好 ， 图见 图 ｌ 色谱 。
准该产品为食品 添加剂 ， 可作 为甜 味剂 ， 部分 或全部代 替蔗
糖而广泛用于各类食 品， 尤其是 作为肥胖病及糖 尿病患者的 代用糖ｌｌ 。因此 ， ７ 测定罗汉果甜苷 ｖ的含量是评 价罗汉果药 材及罗汉果甜苷产品质量的指标之一 。
论塔板数按罗汉果甜苷 Ｖ计算 应不低于 ３５０ ０。
２３ 供试品溶液的制备 ．
取本品粗粉约 １Ｏ ， ．ｇ精密称定 ， 置
索氏提取 器中 ， 甲醇适量 ， 加 加热 回流提取 ３ ， ｈ将提取液减压 浓缩并转移至 １ｍｌ ０ 量瓶中 ， 甲醇至刻度 ， 加 摇匀 ， ０ ４ 岬 用 ．５ 的微孔滤膜滤过 ， 即得供试品溶液。 按色谱条 件 分别 精密 吸 取对 照 品溶液 、 供试 品溶 液各
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２ ０ ， １１ ． ０ ７ Ｖｏ．０ Ｎｏ ４
摘 要 ： 目 建立 Ｈ Ｌ ［ 的］ Ｐ Ｃ法测 定 罗汉果 药材 中罗汉果甜 苷 Ｖ 的含 量。［ 法］ Ｎ ｃ ｓ ０— Ｎ ２５ ｎ４６ ｍＸ 方 用 ｕｌ ｉ１０５ Ｈ （ｔ ，．ｍ ｍ ｌ ａ
２０ ｍ） 谱柱 ， 乙腈一 ２５ ５ｍ 色 以 水一．％四氢呋喃 （７２ ：） ７ ： １为流动相 ， ２ 流速为 ｌ ｌ ｔ， 测波长 为 ２３ｍ， ｒ／ ｎ检 ｎｍ ０ｎ 柱温 ３℃。［ Ｏ 结果］ 罗汉 果甜苷 ｖ进样量在 ０２３ －２ ． ０ｕ 线性关 系良好（ ＝ ． ９３ ， ．１６ １３ ０ｇ ６ ， ０９ ９ ）平均回收率为 ９ ． ％，Ｓ ． ９ ６９ Ｒ Ｄ为 ０７ ％（ ６ ．２ ＝５。［ ］ ） 结论