分光光度计使用
分光光度计的使用方法

分光光度计的使用方法分光光度计的使用方法1、使用方法1.接通电源,打开仪器开关,掀开样品室暗箱盖,预热10分钟。
2.将灵敏度开关调至“1”档(若零点调节器调不到“0”时,需选用较高档)3.根据所需波长转动波长选择钮。
4.将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处,用擦镜纸擦清外壁,放入样品室内,使空白管对准光路。
5.在暗箱盖开启状态下调节零点调节器,使读数盘指针指向t=0处。
6.盖上暗箱盖,调节“100”调节器,使空白管的t=100,指针稳定后逐步拉出样品滑竿,分别读出测定管的光密度值,并记录。
7.比色完毕,关上电源,取出比色皿洗净,样品室用软布或软纸擦净。
2、注意事项①空白溶液与供试品溶液必须澄清,不得有浑浊。
如有浑浊,应预先过滤,并弃去初滤液。
②在规定的吸收峰波长±2nm以内测试几个点的吸收度,以核对供试品的吸收峰波长位置是否正确,除另有规定外,吸收峰波长应在该品种项下规定的波长±2nm以内;否则应考虑该试样的真伪、纯度以及仪器波长的准确度,并以吸收度最大的波长作为测定波长。
③一般供试品溶液的吸收度读数,以在0.3~0.7之间的误差较小。
④由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收,因此测定供试品的吸收度后应减去空白读数,再计算含量。
⑤在测定时或改测其它检品时,应用待测溶液冲洗吸收池3~4次,用干净绸布或擦镜纸擦净吸收池的透光面至不留斑痕(切忌把透光面磨损)。
⑥取吸收池时,应拿毛玻璃两面,切忌用手拿捏透光面,以免粘上油污。
使用完后及时用测定溶剂冲净,再用纯化水冲净,用干净绸布或擦镜纸擦干,晾干后,放入吸收池盒中,防尘保存。
3、日常维护与保养①温度和湿度是影响仪器性能的重要因素。
他们可以引起机械部件的锈蚀,使金属镜面的光洁度下降,引起仪器机械部分的误差或性能下降;造成光学部件如光栅、反射镜、聚焦镜等的铝膜锈蚀,产生光能不足、杂散光、噪声等,甚至仪器停止工作,从而影响仪器寿命。
维护保养时应定期加以校正。
分光光度计使用步骤方法

分光光度计使用步骤方法
1. 打开分光光度计前,先检查仪器部件是否齐全并处于良好状态,确保仪器正常运行。
2. 校准分光光度计,将一定浓度的标准溶液放入比色皿中,按照仪器使用说明进行调整,直至光谱分布符合理论曲线,光度值稳定。
3. 准备样品溶液:将待测的溶液加入比色皿中,液面不能超过比色皿的两侧刻度线。
4. 选择适当的波长:根据测量所需的吸收波长,调节分光光度计的波长选择器。
5. 调整路径长度:使用样品比色皿和纯水比色皿,先针对纯水比色皿记录一个基准值,然后换成样品比色皿,调节路径长度,直至读数稳定。
6. 测量样品吸光度:将已校准并调整好的分光光度计设置在待测波长上,置入待测样品比色皿,即可测量吸光度,并记录数据。
7. 完成测量后,关闭仪器并彻底清洗,确保干净整洁,以便下次使用。
根据实际应用需要,如果需要进行更加精细的测量,可以再进行一些控制步骤。
分光光度计的使用方法

分光光度计的使用方法一、准备工作1.检查仪器:确保分光光度计处于正常工作状态,检查是否有损坏或故障。
2.准备试剂:根据实验需要,准备好所需的试剂溶液或样品。
二、进样1.打开仪器:打开分光光度计电源,并按照仪器说明书进行启动和预热。
2.选择光程:根据样品的吸收强度选择适当的光程,一般来说,如果样品浓度较高,可选择较短的光程,反之则选择较长的光程。
3.选择波长:根据实验需要选择适当的波长。
一般情况下,可根据物质的吸收峰选择最大吸收光的波长。
4.进样:将试剂溶液或待测样品倒入透明的样品池中,注意不要溢出或弄脏边缘。
三、调零1.调节零位:根据仪器说明书调节零位,通常为调整样品池为空极或将样品池填满纯溶剂。
确保读数为零或接近零。
2.稳定仪器:根据仪器要求等待一段时间,使仪器系统稳定。
四、测量样品1.设置参比:根据需要选择一个参考物质,可以是纯溶剂或者与待测样品相似的物质,通过与参考物质的比较,可以减少溶液浑浊、杂质等因素对测量结果的影响。
2.读取数据:进行光度值的测量。
读取数据的方法有两种:直接读取和保存数据。
直接读取:先置于比色池中参比物,调节至零位,再将样液置入比色池中,测量吸收度,读取显示屏上的数值。
保存数据:通过设置保存模式,将测量数据保存到仪器的内存中,后期可以通过导出功能将数据导出到计算机或者其他设备中进行分析和处理。
五、数据处理1.曲线绘制:若需要进一步分析和比较各组数据,可以根据测得的吸光度数据绘制吸光度-浓度曲线。
2.数据分析:根据实验需要进行吸光度数据的定量或定性分析,例如计算样品的浓度、比较各组数据等。
3.定量测定:根据标准曲线或者已知吸光度和浓度的关系,计算样品的浓度。
六、使用注意事项1.操作规范:按照仪器操作说明进行操作,避免操作失误。
2.避免污染:保持样品池的清洁,避免样品残留对后续测量的影响。
3.避免干扰:仪器放置在稳定的平台上,避免机械振动对测量结果的影响。
4.选择适当的波长:根据样品的物理、化学性质选择适当的波长进行测量。
分光光度计使用方法

分光光度计使用方法一、仪器准备1.打开分光光度计电源,并等待仪器进行自检和初始化。
2.根据需要选择合适的波长范围,并设置好光源的强度。
二、校准1.使用空白试剂(比如去离子水)进行校准。
2.将空白试剂放入样品池中,关闭池盖,通过界面上的按钮选择“空白”模式。
3.调节光源的强度,使得光学通道中没有样品的情况下,检测到的光强度为基准值。
三、样品处理1.准备好带有试剂的样品,将样品移至样品池或比色皿中。
2.确保所有试剂和样品都处于相同的温度和搅拌状态下。
3.注意避免样品与池壁或污染物接触,以免影响测量结果。
四、测量1.将样品池或比色皿插入光度计的样品槽中,并关闭池盖。
2.通过界面上的按钮选择所需测量的波长。
3.选择测量模式,通常有吸光度测量和浓度测量两种模式。
根据实际需求选择。
-吸光度测量模式:用于直接测量样品的光吸收情况,通常用于检测样品的纯度或含量检测。
-浓度测量模式:通过预先建立吸光度与浓度的标准曲线,来计算样品的浓度。
五、数据处理1.根据测量所得的吸光度值和浓度标准曲线,计算出样品的浓度。
2.将结果记录并保存,可以在计算机上进行进一步的数据分析和绘图。
六、维护和保养1.定期清洁光度计的样品槽,以确保准确测量。
2.注意定期校准仪器,校准周期可根据实验室标准进行调整。
总结:分光光度计是一种非常常用的实验仪器,可以用于各种领域的分析检测。
使用分光光度计时,需要准备好试剂和样品,并正确设置仪器的波长范围和光源强度。
在进行测量前需要进行校准,并注意样品的处理和池壁的清洁。
通过选择合适的测量模式和数据处理方法,可以得到准确的浓度或吸光度值。
使用完成后,需要定期进行维护和保养,以保证仪器的正常工作和准确性。
分光光度计的使用

分光光度计的使用一、分光光度计的基本原理分光光度计是利用物质对特定波长的光吸收的原理来测量其浓度的仪器。
其基本原理是,通过可见光或紫外光源将特定波长的光线通过样品,然后检测经过样品后的光强度变化。
当物质吸收一定波长的光线时,吸收光线的强度与物质的浓度呈线性关系。
通过测量吸收光强的变化,可以推算出物质的浓度。
二、分光光度计的使用步骤1.打开仪器:首先打开分光光度计的电源开关,并等待一段时间,让仪器进行预热。
2.调节波长:选择合适的波长以适应被测物质的光吸收范围。
调节波长的方式因仪器不同而有所不同,通常通过旋钮、数字显示屏或软件界面等方式完成。
3.校准空白样本:将待测样品取出,放入容器中,并注入合适的溶剂制成空白样本。
将空白样本置于仪器上,按下校准按钮,以设定空白样本的吸光度为零基准。
4.加入待测样品:将待测样品加入容器中,注意保证样品的溶解度或稀释浓度适宜。
然后将样品置于仪器上,以便后续测量。
5.测量吸光度:按下测量按钮,仪器将自动扫描并记录样品的吸光度变化。
测量时间的长短与样品的吸光度变化速率有关。
6.计算浓度:利用仪器自带的软件或计算公式,根据测得的吸光度数据计算出样品的浓度。
三、分光光度计的注意事项1.玻璃容器:分光光度计通常使用玻璃容器来容纳样品,由于玻璃对紫外光的吸收较大,因此在紫外区域测量时需要使用石英或镀膜的玻璃容器。
2.样品制备:为保证测量结果的准确性,样品的制备应严格按照实验要求进行,避免样品中存在杂质或干扰物质。
3.清洗容器:在进行样品测量之前,应确保容器干净,无灰尘或杂质。
同时,使用纯净水或适当的溶剂来清洗容器,避免杂质对测量结果的影响。
4.光程:光程是指光线在样品容器中的传播距离,光程的选择应根据待测物质的吸光度范围进行,并尽量保持一致。
光程过长会降低灵敏度,而光程过短则易产生误差。
5.波长选择:根据实验需要选择合适的波长。
不同物质的最大吸收波长不同,选择错误的波长可能导致测量结果的不准确。
分光光度计的使用

分光光度计的使用光源:分光光度计通常使用可见光或紫外线光源。
应根据分析物的吸收波长选择光源。
常见的光源有钨灯、氘灯和氙灯。
样品室:样品室是放置溶液的地方。
它通常是一个透明的玻璃或石英室,以便光可以通过。
为了消除干扰,样品室还应具有高反射能力。
光栅:光栅是用于分散光束的装置。
它将光束分成不同的波长,并将它们投射到检测器上。
光栅的分散能力决定了分光光度计的分辨率。
检测器:检测器负责测量通过样品室的光束的强度。
常见的检测器包括光电二极管(PD)、光电倍增管(PMT)和光敏三极管(PDT)。
计算机界面:分光光度计通常与计算机连接,将数据传送到计算机进行分析和处理。
计算机界面可以是USB、RS232等。
使用分光光度计的步骤如下:1.准备好样品:将待测样品准备好,确保它的状态符合测试要求。
如果需要进行稀释,请选取适当的稀释倍数。
2.设置光源:根据实验需要选择恰当的光源。
对于可见光吸收测量常用白光光源,对于紫外可见光吸收测量常用氘灯。
3.设置检测器:选择合适的检测器,并进行初始化和校准。
根据吸光度的量级,选择恰当的光电流放大倍数。
4.设置光栅:根据需要选择合适的光栅衍射光栅,使其分散光束。
5.设置参考样:根据需要选择一个参考样品。
通常选择一个具有已知浓度或零浓度的样品作为参比。
6.打开分光光度计并进行预热:打开电源并进行预热,通常需要几分钟的时间。
7.校准仪器:使用参考样进行仪器校准。
将参考样放入样品室中,并调整光强到合适强度。
然后将吸光度设定为零。
8.测量样品:将准备好的待测样品放入样品室中,测量其吸光度。
确保样品室干净,并避免空气泡影响测量结果。
9.记录数据:将测得的吸光度数据记录下来。
可以将数据保存在计算机中以备后续分析和处理。
10.结果分析:根据吸光度数据,使用相应的方法和公式,计算出样品中所含物质的浓度。
分光光度计的使用

100.0 BLA
100% T
(5)重复(验证)( )、(4)两步,直至透 )重复(验证)(3)、( )两步, )( )、( 射比为 0.000 和 100% 不变。 不变。 按“MODE”键至“ABSORBANCE”灯亮(此 键至“ 灯亮( 键至 灯亮 时转换到测吸光度功能上)。 时转换到测吸光度功能上)。
将手柄向操作者方向再拉出一档(听到“咔嚓” 将手柄向操作者方向再拉出一档(听到“咔嚓” 一声),此时被测( ),此时被测 溶液进入光路。 一声),此时被测(1 号)溶液进入光路。 此时仪器所显示的数值即为 1 号被测溶液的吸光 度值(记录下来)。 度值(记录下来)。
0.186 - 0.000
再拉出一档, 再拉出一档,仪器所显示的数值为 2 号溶液的吸 光度值。 光度值。 将 1、2 号吸收池换装入 3 、4 号溶液(黑体 、 号溶液( 号参比溶液不动), ),然后同法测定各溶液的 和 0 号参比溶液不动),然后同法测定各溶液的 吸光度、并一一记录下来,记录格式如下表。 吸光度、并一一记录下来,记录格式如下表。
×.××× ×××
4
4.00
×.××× ×××
5
5.00
×.××× ×××
6
未知
×.××× ×××
五、标准曲线(图) 标准曲线( 六、从标准曲线上查得的 ρ(F =××× m ⋅ L e) g
−1
50 −1 e) g 七、原试液的 ρ(F = ρ查得× = ××× m ⋅ L 5
八、思考题
2号 透 光 窗 1号 0号 遮光 黑体 通过手柄将池架推到头, 通过手柄将池架推到头, 此时黑体对着入射光。 此时黑体对着入射光。
然后盖上盖子。 然后盖上盖子。
(3)调节投射比为 0.000 )
分光光度计的使用方法

分光光度计的使用方法
分光光度计是一种实验室常用的仪器,用于测量溶液或气体的吸光度或透光度。
下面是分光光度计的使用方法。
1. 准备工作:
(1) 确保分光光度计已接通电源并预热至稳定状态。
(2) 校准光度计,使用已知浓度的标准溶液进行校准,确保
仪器准确度。
2. 准备样品:
(1) 准备待测样品,通常以溶液的形式存在。
如果需要测量
气体,需要将气体溶解或将光通过气体进行测量。
(2) 如果样品浓度较高,可以将其稀释至合适的浓度范围内,以避免出现过高的吸光度。
3. 调整仪器:
(1) 打开光程腔盖,确保光程腔内没有灰尘或杂质。
(2) 将光程腔盖关闭,并调整光程腔宽度,通常为1厘米。
(3) 根据实验需要选择合适的波长,并将仪器调整至该波长。
4. 设置基线:
(1) 选择空白试剂,如去离子水或溶剂,将其放入光程腔中。
(2) 将仪器调零,即设置光度计读数为零。
5. 测量样品:
(1) 将样品放入光程腔中,确保光通过样品。
(2) 记录光度计读数。
(3) 如果需要测量多个波长,则重复以上步骤。
6. 清洗仪器:
(1) 测量结束后,将样品取出并清洗光程腔。
(2) 关闭仪器并关闭电源。
以上就是分光光度计的使用方法。
使用时注意根据实际情况进行操作,并严格遵守操作规程,以确保实验结果的准确性。
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分光光度计的使用
1,开机: 安装好仪器后,检查样池位置,使其处在光路中(拉动拉手应感应到每档的定位),关好样品室门,打开仪器电源开关,预热10分钟,即可进行测量。
2, 样品浓度的测定(1)建工作曲线建曲线有三种方法:一点法;二点法;三点法。
现以三点法为例:
a. 先将空白溶液及三个不同浓度的标准溶液依次放入样品池架;
三个Cu(NH3)42+的标准溶液其浓度分别为:
6.40×10-4(64×10-5)mol·L-1
1.92×10-3(192×10-5)mol·L-1
3.84×10-3(384×10-5)mol·L-1
b. 旋转波长调节旋钮,选择λ= 620 nm;
c. 将空白液拉入光路,关闭样品室门,将方式选择键按到%T。
再按100%T键,调节至显示器显示100.0;
d. 打开样品室门,按0%T键,调零至0.0,调零后需检查100.0,若有变化应重调节100%T至100.0
e. 按方式选择键至建曲线挡C0,按选标样点(STD)键至第一点,显示器应显示500
f. 将第一个标样拉入光路,关闭样品室门,按(置数加)或(置数减)键,使显示器显示标样浓度(如标样浓度为64×10-5mol·L-1,将500置数减至64)。
按(确认)键,确认此组数据;
g. 将第二个标样拉入光路,按选标样点(STD)键至第二点,显示器应显示500,按(置数加)或(置数减)键,使显示器置于第二个标样浓度值,按(确认)键,确认此组数据
h. 将第三个标样拉入光路,按选标样点(STD)键至第三点,显示器应显示500,按(置数加)或(置数减)键,使显示器置于第三个标样浓度值,按(确认)键,确认此组数据,并将STD键固定在第三点上;
i. 按方式选择键至CONC档,将三个标准溶液依次拉入光路中进行浓度测量,以检验所建立工作曲线是否正确,如相对误差≤5%即正常,否则需查找原因,重新建曲线。
(2)样品浓度测量
a. 将样品放入样品室内,关闭样品室门;
b. 方式选择键按至CONC档(浓度测量);
c. 将样品拉入光路中,显示器显示该样品在三点曲线下的浓度值。
若显示的数值为221,则该试样的浓度为2.21×10-3mol·L-1.
d. 测量完毕后,取出样品室中的比色皿,将溶液倒入废液桶中,将比色皿清洗干净后,放入比色皿盒中,关闭电源,盖好仪器罩。
分光光度计的使用方法
1)预热仪器。
为使测定稳定,将电源开关打开,使仪器预热20min,为了防止光电管疲劳,不要连续光照。
预热仪器时和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开,使光路切断。
2)选定波长。
根据实验要求,转动波长调节器,使指针指示所需要的单色光波长。
3)固定灵敏度档。
根据有色溶液对光的吸收情况,为使吸光度读数为0.2-0.7,选择合适的灵敏度。
为此,旋动灵敏度档,使其固定于某一档,在实验过程中不再变动。
一般测量固定在“1”档。
4)调节“0”点。
轻轻旋动调“0”电位器,使读数表头指针恰好位于透光度为“0”处(此时,比色皿暗箱盖是打开的,光路被切断,光电管不受光照)。
5)调节T=100%。
将盛蒸馏水(或空白溶液或纯溶剂)的比色皿放入比色皿座架中的第一格内,有色溶液放在其它格内,把比色皿暗箱盖子轻轻盖上,转动光量调节器,使透光度T=100%,即表头指针恰好指在T=100%处。
6)测定。
轻轻拉动比色皿座架拉杆,使有色溶液进入光路,此时表头指针所示为该有色溶液的吸光度A。
读数后,打开比色皿暗箱盖。
7)关机。
实验完毕,切断电源,将比色皿取出洗净,并将比色皿座架及暗箱用软纸擦净。
注意事项:
1)为了防止光电管疲劳。
不测定时必须将比色皿暗箱盖打开,使光路切断,以延长光电管使用寿命。
2)比色皿的使用方法:
①拿比色皿时,手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。
②清洗比色皿时,一般先用水冲洗,再用蒸馏水洗净。
如比色皿被有机物沾污,可用盐酸-乙醇混合洗涤液(1∶2)浸泡片刻,再用水冲洗。
不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗比色皿,以免损坏。
也不能用毛刷清洗比色皿,以免损伤它的透光面。
每次做完实验时,应立即洗净比色皿。
③比色皿外壁的水用擦镜纸或细软的吸水纸吸干,以保护透光面。
④测定有色溶液吸光度时,一定要用有色溶液洗比色皿内壁几次,以免改变有色溶液的浓度。
另外,在测定一系列溶液的吸光度时,通常都按由稀到浓的顺序测定,以减小测量误差。
⑤在实际分析工作中,通常根据溶液浓度的不同,选用液槽厚度不同的比色皿,使溶液的吸光度控制在0.2~0.7。