去颌下腺对大鼠睾丸膜联蛋白5表达的影响

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细胞龄相关分子在不同月龄大鼠睾丸及附睾的表达

华中科技大学硕士学位论文细胞龄相关分子在不同月龄大鼠睾丸和附睾的表达硕士研究生段永刚导师刘子龙副教授华中科技大学同济医学院计划生育研究所/生殖医学中心武汉，湖北430030前言无论是人还是动物，体细胞和生殖细胞的衰老组织/细胞特征性改变和时间虽存在有差异，但作为衰老本身确有其类似规律可循。

就现在研究而言，睾丸和附睾衰老的研究远不及脑衰老研究进展迅速。

前期工作显示，老龄大鼠睾丸间质细胞tau蛋白表达上调，而微管相关蛋白（microtubule associated proteins ，MAPs）表达下调[ 1]。

证明睾丸的老化表现为tau蛋白这种老化物质在微管中发生堆积，由于微管相关蛋白的减少，而影响睾丸间质细胞的生理效应的发挥。

老人前列腺癌去势睾丸组织中雄激素受体（androgen receptor, AR）和热休克蛋白90α（heat shock protein 90α, HSP90α）表达的不一致性[2]，虽然一方面可以部分地解释由于HSP90α表达下降而导致AR表达发生遍在化，进而影响雄激素的生物学功能的发挥。

然而，在衰老睾丸，动脉硬化、组织缺血和间质细胞变性等老龄化征象，何以会引起HSP90α表达上调？附睾在衰老过程中，各段均显示出特异性的形态结构改变[3]；同时，衰老的大鼠附睾组织细胞核中老化相关基因表达上调[4]。

tau蛋白在大鼠丘脑和海马的表达呈明显地增龄性规律，且Gas7的表达水平与tau蛋白表达呈正相关（未发表资料）。

由此看来，机体的衰老机制远不是那么清晰。

故此，有必要藉助能明确反映细胞龄分子在不同月龄大鼠睾丸和附睾组织中特异性表达进行深入研究，力图能部分地解释这两个器官从成熟到衰老某些机制问题，进而欲求为男性衰老的发生机制提供理论依据。

本工作选取c-Kit、HIWI、波形蛋白和生长停滞特异性蛋白7（growth arrest-specific protein 7, Gas7）等细胞龄相关分子，检查它们在不同月龄大鼠睾丸和附睾组织中表达的差异性。

心理应激对大鼠睾丸细胞FSH 及LH 表达的影响研究[J

2005 第 10 卷第 1 期贺新红等 : 心理应激对大鼠睾丸细胞 FSH及 LH表达的影响研究 3
·15·
213 心理应激后睾丸间质 FSH、LH 阳性表达相对光密度的变化
A、B、C 三组睾丸间质 FSH、LH阳性表达产物相对光密度的检测结果见表 2
表 2 心理应激对睾丸间质 FSH、LH表达阳性产物相对光密度的影响 (X ±S)
选用成年雄性健康 SD 大鼠 15只 , 体重 180～ 200g, 随机等分成 A、B、C 3组 , 每组 5只。在同
21 结果
等条件下进行暗盒适应性训练一周后 , 依照 yanjin 等 [ 5 ]创建的心理应激模型方法 , 即使用 SD - 731 光电刺激仪于每天清晨给大鼠进行光电刺激 , 连续 6天。其中 , A 组在给予规律的电刺激 ( 015 mA , 20 m in) 前或后 , 给予无规律的闪光刺激 1 次 ; B 组在给予规律的电刺激 (条件同 A 组 ) 前 10 秒 , 给予规律的闪光刺激 1次 ; C组则给予无规律的闪光刺激 (条件同 A 组 ) 1次作对照。第 7天晨 , 各组动物按先前方式给予闪光刺激后 , 即在腹腔麻醉下开胸 , 用 4%多聚甲醛 ( PBS配制 , 011 mol, pH 712) 经左心室常规灌流固定后 , 取睾丸置于上述固定液中再固定 24小时。
HE Xin2hong , ZHANG De2xing, WU Yan2m ing, ZHANG Yu2ying, L I Zhi2hua
(Dep t. of H istology & Embryology, Guangdong College of Pharmacy, Guangzhou 510224)

膜联蛋白5对雄性SD大鼠睾酮合成相关蛋白和酶表达的影响

ＬＮａ－ｉｇ，ＬＩＨａ— ａＩＣｈｉｙｎＵｉｙｎ，ＴＡＯａ — ｉｎ，Ｓｈｎｓｎ，ＬＵｎＸｉｏｑａＨＩＳａ－ｈａＲｏｇ，ＹＡＯｎＢｉｇ
（ＲｓａｃｓｔｔｏｌｉｌａｏａｏｙＭｅｉｎ，ｎｎｅｅａｏｉｌｆＮｎｎｌａｙＣｍｎ，ＰｅｅｒＩｔｕＣｉｃｂｒｔｄｃｅＮａｊｇＧｎｒｌｓｔａｊｇＭｉｔｒｏｍａｄｈｎｉｅｆｎａＬｒｉｉＨｐａｏｉｉ
００）Ｐ＜．１，．．２，００］７５
ｋ组大鼠睾丸组织Ｐ５ｅ白表达提高了３．％［０３ｇ４０ｅ蛋ｓ４２（．７±００）ｓ（．８± ．４ｙ０２
ｋ组和１ｘ／ｇ组的３ — Ｓ表达也分别增加了１．％［１５ｇ５／ｋｇｐＨＤ４７（．３±０１）／１３．Ｏ３．４±００）Ｐ＜５（．５，
林钗英，海燕，柳陶晓倩，时姗姗，路榕，姚兵
【要】目的研究注射膜联蛋白５后雄性ｓ摘Ｄ大鼠睾丸类固醇急性调节蛋白（ｔｏｏｅｉａｔｒｕｔｙｐｔｎＳｒｄｇｃｃｅｅｌｏｒｅ，ｅｉｎｕｇａｒｏｉ
００］２．％［２６０１）ｕ２３００）Ｐ＜．２；ＳＡ．１和４４（．７４．４ｓ（．４± ．５，００］而ｔＲ的表达无论在转录水平还是在蛋白水平上，－较对照组差
异均无统计学意义。结论膜联蛋白５可通过调节Ｐ５ｓｃ３一Ｓ４０ｃ与８ＨＤ的表达来调节睾酮合成。

苯并(a)芘对大鼠睾丸支持细胞连接蛋白基因表达的影响

ｍＲＮＡ表达。［结果］在ＢａＰ５０ｐｍｏｌ／Ｌ时，支持细胞活力降低（和对照组相比，Ｐ＜０．０１）；在ＢａＰ１０ｐ，ｍｏｌ／Ｌ时ｃａｓｐａｓｅ．３活性升高，连接蛋白ｃｏｎｎｅｘｉｎ４３、ｏｃｃｌｕｄｉｎ、和ｚ０１基因的ｍＲＮＡ表达降低（和对照组相比，Ｐ＜０．０５ｏ在ＢａＰ１００ｌａｎ０ｉ１／Ｌ时连接蛋白Ｎ・ｅａｄｈｅｒｉｎ基因的ｍＲＮＡ表达降低（和对照组相比，尸＜Ｏ．０５ｏ加入ｃａｓｐａｓｅ一３抑制剂后，ＢａＰ所诱导的连接蛋白基因表达下降，且随ｃａｓｐａｓｅ－３活性变化而发生改变。［结论］ＢａＰ能诱导大鼠支持细胞连接蛋白ｍＲＮＡ表达下降，ＢａＰ诱导的ｃａｓｐａｓｅ－３活性上升是调节连接蛋白ｍＲＮＡ表达下降的可能机制。
Ａｂｓｔｒａｃｔ：【Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ］Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｂｅｎｚｏ（ａ）ｐｙｒｅｎｅ（ＢａＰ）ｏｎｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｊｕｎｃｔｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎｇｅｎｅｓ
环境与职业医学２０１３年３月第３０卷第３期文章编号：１００６ — ３６１７（２０１３）０３ — ０１６１．０６

心肌肌浆网Ca2ATP酶研究进展

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｓａｒｃｏ／ＥｎｄｏｐｌａｓｍｉｅＲｅｆｉｃｕｌｕｍ
Ｃａ２＋・ＡＴＰｍ（ＳＥＲＣＡ２ａ）；Ｈｅａｒｔ
ｆａｉｌｕｒｅ；Ｈｙｐｅａｒｏ－
ｐｈｙ；Ｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ
心肌肌浆网Ｃａ２＋一ＡＴＰ酶（ｓａｒｃｏ／ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃ
ｔｉｃｕｌｕｍ
ｒｅ—
物干预如使用甲状腺激素类似物、３－＇肾上腺素受体
ｓｅｒｔｏｈ
ｂｙ
［７］
ＳｏｒｄｏｉｌｌｅｔＣ，ＸｈａｕｖｉｎＭＡ，ｄｅＰｅｒｅｔｔｉＥ，矗ａ／．Ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｄｉｒｅｃｔｌｙｓｔｉｍｕｌａｔｅｓｓｔｅｒｅｉｄｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｐｒｉｍａｒｙｃｕｌｔｕｒｅｓｏｆｐｏｒ－
ｃｉｎｅ
ｔｈｅ
ｅｅｌｈ［Ｊ］．
李晓梅（综述），马依彤‘（审校）
（新疆医科大学第一附属医院心脏中心，乌鲁木齐８３００５４）中图分类号：１１５４１文献标识码：Ａ文章编号：１００６－２０８４（２００８）１７－２５７０－０４
挥重要作用，在心肌舒张期将
摘要：在正常心肌舒张期，心肌肌浆网Ｃａ２＋－Ａ口酶（ＳＥＲＣＡ２ａ）将ｃａ２＋从胞质中摄回肌浆
Ｒｅｓ
［２２］祝辉，沙家豪，周作民．类固醇生成因子在生殖功能中的作用［Ｊ］．生殖医学杂志，１９９７，６（４）：２４６－２４８．
ＢｉｏｃｈｅＢｉｏｐｈｙ
Ｃｏｍｍｕｎ，１９８７。１４６（２）：３８７－３９４．
收稿Ｅｔ期：２００８．０４－２８修回日期：２００８＿０７硝
心肌肌浆网Ｃａ“．ＡＴＰ酶研究进展
ｄｅｒｍａｌ卑砌ｆａｃｔｏｒ（ＥＧＦ）ｅｆｆｅｃｔ
ｍａｌＦａｎｔｏｎｉＧ，ＭｏｒｒｉｓＰＬ，Ｆｏｒｔｉｃｒｉｎｅ／ｐａｒａｃｒｉｎｅｆａｃｔｏｒｉｎｒａｔ

膜联蛋白5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌及3β-羟基类固醇脱氢酶表达的影响

时，睾酮水平分别升高了１％［１．８± ．０ｎｏＬｕ１．２± ．４ｎｏＬ（８（４３０３）ｍｌ／ｓ（２１０７）ｍｌ］Ｐ＜００）２％［１．５± ．７ｎｏＬ郴／．１和６（５２０４）ｍｌ／（２１０７）ｍｌＬ（００）浓度为１ｍＬＬ时，１．２± ．４ｎｏ］Ｐ＜．１；／０ｏ／睾酮水平虽也有升高趋势，无显著性差异；Ｗｅｔｎｂｏｉ但而ｓｒｌｔｎｅｔｇ结
Ｅｅｎｅｉ５ｏｓｓｒｎｓｒｉｎｘｒｓｎｏ３ｈｄｏｙｅｏｅｙｒｅａａｆｃｏａｎｘｎｔｔｔｏｅｅｅｏａｄｅｅｉｆ￣ｙｒｘｓｒｉｄｈｄｏｎｓｉｒｔｔｆｎｅｏｅｃｔｎｐｓｏｔｄｇｅｎ
Ｌｙｉｅｌｅｄｇｃｌｓ
（．ＩｓｔｔｏｌｉｌａｏａｏｙＭｅｉｎ，ａｎｅｅａＨｓｉｌｆＮｎｎｌａｙＣｍａｄ１ＰｎｔｕｉｅｆＣｉｃｂｒｔｄｃｅＮｇＧｎｒｌｏｔｎａＬｒｉｐａｏａｊｇＭｉｔｒｏｍｎ，儿４ｉｉ，Ｎｎｉ１０２ｉｎｓ，Ｃｉａ２ｉｓｎＱＨａｔ，ＤｐｒｅｔｆＪｉｔｏｉｉ，ＮｎｎｌａｙＣｍａｊｇ２００，Ｊｇｕｈｎ；．Ｄｖｉ厂ｅｌｎａｉｏｈｅａｔｎｏｎＬｇｓｃｍｏｔｓａｆｇＭｉｔｏ — ｉｉｒ
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３４２・
医学研究生学报２１００年４月第２３卷第４期ＪＭｅｏｔａｏ．３Ｎ．生Ａｒ，Ｑ０ｄＰｓｒ，Ｖ１２一ｏ，ｐｉ２１ｇｌ

生物工程学

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Ｑ５７
２００２４０８７７２
ｔｓｆｍｏｅｅｕｎｅｆｉｏｏｌｒｔｉｅｅ／ｉｒｃｏｐｏｔｒｓｑｅｃｓｂｓｍａｏｅｎｇｎｓ李ｏｒｐ
荧光定量Ｒ — ＣＲ检测去下颔下腺大鼠睾丸ａｎｘｎＴＰｎｅｉ５ｒｓｉｎｆｘｍＲＴｅｅｐｅｓｏｓｏ
ａｎｘｎ５ｍＲｎｅｉＮＡｎａＮＡｔＱ— — ＣＲｉｅａｄＢｘｍＲｗｉＦ — — ｈＲＴＰｔｎｈ
ｒｔｅｔｉｕｍａｄｂｌｒｌｄｒｍｏｅ／ａｓｓｔｓｂｎｉｕａａｅｖｄ王晨阳（ｔｉｗｈｇｎ南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所．南京江苏，２００）百坤 …／剖学报．０８９１．１６１０１０２，马／解一２０，（）０－３一１观察下颌下腺切除对大鼠睾丸膜联蛋白５ａｎｘ）（ｅｉ５ｎｎ和ＢｘｍＲａＮＡ表达的影响。切除大鼠下颌下腺，别于分术后１ｄ８和４ｄ、２ｄ４２处死大鼠，提取睾丸总ＲＡ反转录，Ｎ，设计特异性引物和Ｔｑｎ探针，ａｍａ荧光定量Ｒ — ＣＴＰＲ检测ａｎｘｎ５ＢｘｍＲＡ的表达。荧光定量ＰＲ结果显ｎｅｉ和ａＮＣ示，与对照组相比，切除下颔下腺１ｄ２ｄ实验组大鼠４和８后，睾丸ａｎｘｍＲＡ分别升高了３．％和５．但无显ｎｅｉ５Ｎｎ８５５％，３著性差异；实验组大鼠睾丸ＢｘＲＡ分别升高了７．ａＮｍ０６％和８．其升高具有显著性差异（ｌ．和Ｐ０；０５％，Ｊ０５Ｄ０＜＜．１切除０）下颔下腺４ｄ实验组大鼠睾丸ａｎｘ和ＢｘＲＡ２时，ｎｅｉ５ｎａＮｍ分别升高５６和２３几乎恢复到与对照组相同的水．％．％，平。下颌下腺切除后１ｄ２ｄ４和８可造成大鼠睾丸ａｎｘｎｅｉｎ５ＢｘＮ的表达升高；除后４ｄｎｅｉ５Ｂｘ和ａｍＲＡ切２，ｎｘ和ａａｎｍＲＮＡ又恢复到正常水平。图４２１表参２

促性腺激素释放激素类似物对大鼠睾丸间质细胞膜联蛋白5和3β-羟类固醇脱氢酶mRNA表达的影响

摘要：目的：观察促性腺激素释放激素（ｎＨ）ＧＲ类似物对大鼠睾丸间质细胞ａｎｘｎｅｉ５和３一ＤｍＮｎ母ＨＳＲＡ表达的
影响。方法：原代培养大鼠睾丸间质细胞４，８ｈ后分别用不同终浓度的ＧＲｎＨ激动剂（ｎＨ— ｏｉ，ＧＲａＧＲａｎｓｎＨ）ｇｔ（０～ｍｌＬ１～ｍＬＬ１ｍｌＬ和ＧＲ拮抗齐（ｎＨａｔｇｎｓ，ＧＲａｔ（０ｍＬＬ１ｍＬＬ１ｏ、０／ｏ／、０ｏ）／ｎＨ０ＧＲ —ｎａｏｉｓｎＨｎ）１～ｏ／、０～ｏ／、ｔ１ｍ￣Ｌ处理细胞，０ｏ）提取细胞总ＲＡ，Ｎ反转录，设计特异性引物和Ｔｇａａｍｎ探针，光定量ＰＲ检测膜联蛋白５荧Ｃ（ｎｅｉ５和３．固醇脱氢酶（３ＨＤａｎｘ）Ｂ羟类ｎ３－Ｓ）ｍＲＡ表达的改变。结果：Ｎ荧光定量ＰＲ结果显示，Ｃ与未￣ＧＲＵｎＨ类似物的对照组相比，ＧＲａ的终浓度为１～ｍＬＬ１～ｍｏ／当ｎＨ００／、０ＬＬ时，实验组大鼠睾丸间质细胞ａｎｘｍＮｎｅｉ５ＲＡｎ分别升高了３．９和３．９，８８％５２％均具有统计学意义（００）当ＧＲａ的浓度为１～ｍｏ／Ｐ＜．５；ｎＨ０ＬＬ时，ＢＨＤｍＮ３ —ＳＲＡ
Ｍｉｔｒｏｍｎ，ａｊｇ２００ＪａｇｕＣｉ）ｌａｙＣｍａｄＮｎｎ１０２，ｉｎｓ，ｈｎｉｉａＡｓａｔＯｊｃｉ：ｏｉｖｓｇｔｔｅｅｅｔｏｅＧＲｎｌｕｎｔｅｅｐｅｓｎｆｎｅｉｂｔｃ：ｂｅｔｅＴｅｔａｅｈｆｃｆｈｎＨａａｏｅｏｘｒｓｉｓｏａｎｘ５ｒｖｎｉｆｓｔｇｈｏｎ

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７００・
第２０卷
第７期
医学研究生学报
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｅｄｉｃａｌＰｏｓｔｇｒａｄｕａｔｅｓ
Ｖｏ１．２０Ｎｏ．７
２００７年７月
Ｊｕ１．２００７
去颌下腺对大鼠睾丸膜联蛋白５表达的影响
王晨阳，侯林，徐会茹，蒋超，黄祝，崔英霞，戈一峰，黄宇烽，恽时锋，姚兵
（１．南京军区南京总医院解放军检验医学研究所，江苏南京２１０００２；２．南京军区南京总医院比较医学科，江苏南京２１０００２；３．南京师范大学生命科学学院，江苏南京２１００９７）
（１．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭｅｄｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙＳｃｉｅｎｃｅｆｏＰ， № ｎｇＧｅｎｅｒａｌＨｏｓｐｉｔａｌｆ№ ｎｏｇＭｉｌｉｔａｒｙＣｏｍ — ｍａｎｄ，Ｐ，Ｎａｎｉｆｎｇ２１０００２，Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉｎａ；２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｆＣｏｏｍｐａｒａｔｉｖｅＭｅｄｃｉｉｎｅ．ＮａｎｊｉｎｇＧｅｃｒｎ－ａｌＨｏｓｐｉｔａｌｆＮｏａｎｊｉｎｇＭｉｌｉｔａｒｙＣｏｍｍａｎｄ，ＰＡＬ， № ｎｇ２１０００２，Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉｎａ；３．ＣｏｌｌｅｇｅｆＬｏｉｆｅＳｃｉ — ｅｃｅｎ，ＮａｎｊｉｎｇＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｉｆｎｇ２１００９７，Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉａ）ｎＡｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆａｎｎｅｘｉｎ５ｉｎｒａｔｔｅｓｔｉｓａｆｔｅｒｒｅｍｏｖｉｎｇｓｕｂｍａｎｄｉｂ —
ＷＡＮＧＣｈｅｎ — ｙａｎｇ ’ ，ＨＯＵＬｉｎ ’ ，ＸＵＨｕｉ — ｒｕ ’ ，ＪＩＡＮＧＣｈａｏ ’ ，ＨＵＡＮＧＺｈｕ，．
ＣＵＩＹｉｎｇ — ｘｉａ，ＧＥＹｉ — ｆｅｎｇ，ＨＵＡＮＧＹｕ — ｆｅｎｇ，ＹＵＮＳｈｉ — ｆｅｎｇ，ＹＡＯＢｉｎｇ
丸内ａｎｎｅｘｉｎ５表达的升高。颌下腺切除后期（４２ｄ），机体内因颌下腺切除而缺乏的某些物质在体内又重新得到
了补偿，对睾丸ａｎｎｅｘｉｎ５的影响消除，睾丸ａｎｎｅｘｉｎ５的表达也恢复到正常水平。其内在具体机制尚待进一步
ａｎｎｅｘｉｎ５免疫组化显色较深，说明ａｎｎｅｘｉｎ５的表达升高，这与Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ的结果基本一致。结论：颌下腺
切除影响大鼠睾丸ａｎｎｅｘｉｎ５的表达，颌下腺切除早期（１４、２８ｄ）颌下腺分泌的某些生物活性物质缺乏，而造成睾
高了２７．５％和３５．２％，具有显著性差异（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）；切除颌下腺４２ｄ后，实验组大鼠睾丸ａｎｎｅｘｉｎ５又恢
复到与对照组几乎相同的水平。免疫组织化学显示，ａｎｎｅｘｉｎ５在大鼠睾丸中的分布未见明显改变，但实验组
阐明。
关键词：颌下腺；睾丸；膜联蛋白５；大鼠
中图分类号：Ｒ６９７．２２文献标识码：Ａ文章编号：１００８－８１９９（２００７）０７－０７００－０４
Ｅｆｅｃｔｏｆｒｅｍｏｖａｌｏｆｓｕｂｍａｎｄｉｂｄａｒｇｌａｎｄｏｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆａｎｎｅｘｉｎ５ｉｎｒａｔｔｅｓｔｉｓ
摘要：目的：观察切除颌下腺对大鼠睾丸膜联蛋白５（ａｎｎｅｘｉｎ５）表达的影响。方法：切除大鼠颌下腺，分别于术后１４、２８和４２ｄ处死大鼠，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ和免疫组织化学分析大鼠睾丸ａｎｎｅｘｉｎ５表达及分布的改变。结果：Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ结果显示，与对照组相比，切除颌下腺１４ｄ和２８ｄ后，实验组大鼠睾丸ａｎｎｅｘｉｎ５的表达分别升