免疫组库测序
免疫组化和原位杂交检测结果_概述说明

免疫组化和原位杂交检测结果概述说明1. 引言1.1 概述本文旨在对免疫组化和原位杂交检测结果进行综合概述和解释。
免疫组化和原位杂交是两种常用的生物学实验技术,用于检测细胞或组织中特定蛋白质或核酸的表达情况。
通过对这两种技术的原理、方法、应用领域以及实验步骤和注意事项的介绍,可以使读者更好地理解并合理应用这些检测结果。
1.2 文章结构本文分为五个主要部分:引言、免疫组化检测结果、原位杂交检测结果、免疫组化与原位杂交比较分析以及结论。
在引言部分,我们将简要介绍本文的目的和文章结构,提供一个整体的框架来帮助读者理解后续内容。
1.3 目的本文旨在全面说明和讨论免疫组化和原位杂交检测结果,并对它们之间的异同进行比较分析。
通过了解免疫组化和原位杂交技术的基本原理、应用领域以及实验步骤等方面信息,读者可以更好地理解和解释这些检测结果,从而能够更科学地进行相关研究工作。
此外,我们将通过案例分析和发展趋势的讨论,对免疫组化和原位杂交技术在未来的应用进行展望,并提供一些建议。
2. 免疫组化检测结果:2.1 原理和方法:免疫组化是一种常用的实验技术,通过特异性抗体对目标分子进行检测。
该技术基于免疫学原理,利用抗体与相应的抗原结合来定位和可视化感兴趣的蛋白质或分子。
在免疫组化实验中,首先需要选择合适的抗体,该抗体可以是单克隆或多克隆抗体,并且需要与所需检测的目标分子有高度的特异性和亲和力。
然后,在样本处理过程中,对组织或细胞进行固定、包埋等步骤以保持其形态结构,并消除内源性酶活性。
接下来,将样本切片后进行染色处理,通常采用荧光标记物或酶标记物进行可视化显示。
最后,使用显微镜观察并记录结果。
2.2 应用领域:免疫组化技术广泛应用于生物医学研究领域。
它在肿瘤学、神经科学、器官发育等领域起着重要作用。
例如,在肿瘤学中,通过免疫组化可以检测肿瘤组织中的细胞分子标记,从而对肿瘤类型、分级和预后进行鉴定。
在神经科学领域,免疫组化可以帮助研究人员探索神经元的分布、表达和功能。
基因组学考试答案

基因组学一、名词解释1.gene:基因是有遗传效应的DNA片段,是控制生物性状的基本遗传单位。
Gene一词于1909年由丹麦植物学家Wilhelm Johannsen首次提出,以取代孟德尔的factor等用语。
2.肿瘤标志物:反应肿瘤存在的化学类物质。
它们或不存在于正常成人组织而仅见于胚胎组织,或在肿瘤组织中的含量大大超过在正常组织里的含量,它们的存在或量变可以提示肿瘤的性质,借以了解肿瘤的组织发生、细胞分化、细胞功能,以帮助肿瘤的诊断、分类、预后判断以及治疗指导。
3.基因组编辑:genome editing,一种在基因组水平上对DNA序列进行改造的遗传操作技术。
技术的原理是构建一个人工内切酶,在预定的基因组位置切断DNA,切断的DNA在被细胞内的DNA修复系统修复过程中会产生突变,从而达到定点改造基因组的目的。
4.BLAST:Basic Local Alignment Search Tool,一套在蛋白质数据库或者DNA数据库中进行相似性比较的分析工具。
5.微生物组群:微生物组群是指在多细胞生物体中发现的一组共生的病原微生物菌群,包括细菌、古细菌、原生生物、真菌和病毒等。
微生物组群在免疫、体内激素代谢平衡方面有至关重要的作用。
6.组蛋白修饰:组蛋白修饰是指组蛋白在相关酶作用下发生甲基化、乙酰化、磷酸化、腺苷酸化、泛素化、ADP核糖基化等修饰的过程。
7.L-W曲线:Lander-Waterman模型是1988年美国Eric Lander以及Michael Waterman提出的一个数学模型,广泛用于基因组大小评估,还能够推算出覆盖度和reads的关系,在测序和序列组装中起到关键的指导意义。
对于已知待测基因组大小的G和测序长度L都是常数,使用Lander-Waterman模型绘制L-W曲线,可以得到contig数与基因组大小(G)和测序reads数(N)的关系图。
8.液体活检:Liquid Biopsy,是一种利用高通量测序技术来检测血液中的小DNA碎片的技术。
晚期非小细胞肺癌患者治疗前后TCR免疫组库分析演示课件

TCR免疫组库指导个体化免疫治疗策略制定
01
TCR克隆型分析
通过高通量测序技术,分析患者TCR免疫组库的克隆型组成,揭示肿瘤
特异性T细胞克隆的存在及丰度,为个体化免疫治疗提供依据。
02
TCR功能验证
利用细胞免疫学技术,验证TCR克隆型的抗原识别能力和细胞毒性作用
,筛选具有抗肿瘤活性的TCR克隆型,指导治疗策略的制定。
治疗前后患者TCR免疫组库优势克隆变化
优势克隆的消失
经过治疗,一些原有的优势TCR克隆可能会 消失,这可能与治疗引起的免疫应答有关。
新优势克隆的出现
治疗后,患者体内可能会出现新的优势TCR 克隆,这些克隆可能对肿瘤具有更强的识别 和杀伤能力。
治疗前后患者TCR免疫组库与临床疗效的关系
TCR多样性与疗效正相关
治疗前后晚期非小细胞肺癌患 者TCR免疫组库变化
治疗前后患者TCR免疫组库多样性变化
TCR多样性增加
经过治疗,患者TCR免疫组库的多样性可 能会增加,表明免疫系统对肿瘤的应答 能力增强。
VS
TCR克隆性变化
治疗前患者体内可能存在一些优势TCR克 隆,治疗后这些克隆可能会发生变化,包 括克隆的消失、新克隆的出现以及克隆大 小的改变等。
02
TCR免疫组库概述
TCR结构与功能
TCR结构
T细胞受体(TCR)由α链和β链组成,每条链上都有一个可变区(V区)和一个恒定区(C区)。V区负责识别抗 原,而C区则与CD3分子结合,传递活化信号。
TCR功能
TCR的主要功能是识别并结合抗原提呈细胞(APC)上的MHC-抗原复合物,从而激活T细胞,启动特异性免疫应 答。
较高的TCR多样性可能预示着较好的临床疗效,因为多 样的TCR能够识别更多的肿瘤抗原,从而增强免疫应答 。
TCR项目分享_20180822

根据文献结果可知:免疫磁珠分选纯化CD3 阳性T 细胞和Ficoll-Paque 梯度离心法分离外周血淋 离PBMC即可。
免疫组库测序的模板选择
DNA水平侧重于研究基因重组信息,RNA水平侧重于研究基因的表达状态。使用DNA和RNA做模板各有优 缺点: gDNA的优点: 1)因为每个基因只有两个拷贝,因此可准确地反映免疫细胞受体的克隆数; 2)DNA更稳定,易储存。 缺点: 1)由于copy数不高,模板含量低,因此可能需要更多的样品; 2)由于J区和C区之间有很大的intron区,受测序长度的局限,缺少特异性扩增引物来扩增CDR全长。
2. 多样性形成机制: 2.1 组合多样性:VDJ基因重排时的组合和已重组后轻、重链随机组合产生多样性。 2.2 连接多样性:VDJ基因重排时连接位点P-核苷酸、N-核苷酸的插入或缺失可增加CDR3区多样性。 2.3 体细胞高频突变、基因转换和类别转换。 3. 多样性组合:≈5*10^13
B细胞发育与BCR基因重排
RawData CleanData 结果注释 报告出具
免疫组库案例展示-华大科技
Thank you for your attention Any Questions ?
CDR3区核酸序列和氨基酸序列 鉴定无效序列(包含终止密码子,超出结构范围) 鉴定单碱基突变(替换、删除、插入)(for BCR) 4、单样品克隆群体特征分析 CDR3序列长度分布 V/J基因频率分布 V-J基因组合频率分布(3D, Circos) 克隆群体结构分析(频率分布,D50曲线,甜甜圈图) 5、样品间比较分析 测序饱和度分析 克隆多样性分析(辛普森系数、香农威纳系数等) 样品间共有克隆分析 聚类分析(层次聚类,MDS聚类)
什么是免疫组库测序?
特异性免疫——高中课赛教案

特异性免疫——高中优质课赛教案章节一:引言教学目标:1. 了解免疫的概念和分类;2. 掌握特异性免疫的定义和特点;3. 激发学生对特异性免疫的兴趣和好奇心。
教学重点:特异性免疫的定义和特点教学难点:特异性免疫的机制和应用教学准备:PPT课件、相关图片和视频资料教学过程:1. 导入:通过PPT课件介绍免疫的概念和分类,引导学生回顾已学的非特异性免疫知识;2. 提问:什么是特异性免疫?它有哪些特点?3. 讲解:详细讲解特异性免疫的定义、特点和机制,结合图片和视频资料进行辅助说明;4. 互动:学生提问,教师解答;5. 总结:回顾本节课的主要内容,强调特异性免疫的特点和作用。
章节二:特异性免疫的基本原理教学目标:1. 掌握特异性免疫的基本原理;2. 了解抗原、抗体和淋巴细胞的概念;3. 理解特异性免疫应答的过程。
教学重点:特异性免疫的基本原理和应答过程教学难点:抗原、抗体和淋巴细胞的作用教学准备:PPT课件、相关图片和视频资料教学过程:1. 导入:通过PPT课件回顾上一节课的内容,引导学生进入本节课的学习;2. 讲解:详细讲解特异性免疫的基本原理,包括抗原识别、淋巴细胞激活、抗体产生等过程;3. 互动:学生提问,教师解答;4. 总结:回顾本节课的主要内容,强调特异性免疫应答的过程和关键因素。
章节三:特异性免疫的应用教学目标:1. 了解特异性免疫在实际应用中的重要性;2. 掌握疫苗免疫和免疫治疗的基本原理;3. 培养学生运用特异性免疫知识解决实际问题的能力。
教学重点:特异性免疫在实际应用中的重要性教学难点:疫苗免疫和免疫治疗的基本原理教学准备:PPT课件、相关图片和视频资料教学过程:1. 导入:通过PPT课件介绍特异性免疫在实际应用中的重要性;2. 讲解:详细讲解疫苗免疫和免疫治疗的基本原理,结合实例进行分析;3. 互动:学生提问,教师解答;4. 总结:回顾本节课的主要内容,强调特异性免疫在实际应用中的价值。
特异性免疫——高中课赛教案

特异性免疫——高中优质课赛教案第一章:引言【教学目标】1. 理解免疫的基本概念;2. 掌握非特异性免疫和特异性免疫的区别;3. 引导学生关注特异性免疫在人体健康中的重要性。
【教学内容】1. 免疫的定义;2. 非特异性免疫和特异性免疫的概述;3. 特异性免疫在人体健康中的作用。
【教学过程】1. 导入:通过提问方式引导学生回顾免疫的基本概念,激发学生对特异性免疫的兴趣;2. 讲解:简要介绍非特异性免疫和特异性免疫的区别,重点讲解特异性免疫的原理和作用;3. 互动:学生分组讨论特异性免疫在实际生活中的应用,分享自己的见解;【教学资源】1. 免疫相关图片和图表;2. 特异性免疫实例资料。
【教学评价】1. 学生对免疫基本概念的理解程度;2. 学生对特异性免疫原理和作用的掌握情况;3. 学生对特异性免疫在实际生活中的应用的认知水平。
第二章:特异性免疫的基本原理【教学目标】1. 掌握特异性免疫的基本原理;2. 理解抗原、抗体和免疫应答的概念;3. 了解特异性免疫的分阶段过程。
【教学内容】1. 抗原的概念和特性;2. 抗体的概念和特性;3. 免疫应答的三个阶段;4. 特异性免疫的分阶段过程。
【教学过程】1. 讲解:详细讲解抗原、抗体和免疫应答的概念,阐述特异性免疫的基本原理;2. 互动:学生分组讨论特异性免疫的分阶段过程,分享自己的理解;【教学资源】1. 抗原、抗体和免疫应答的相关图片和图表;2. 特异性免疫分阶段过程的资料。
【教学评价】1. 学生对特异性免疫基本原理的理解程度;2. 学生对抗原、抗体和免疫应答概念的掌握情况;3. 学生对特异性免疫分阶段过程的了解程度。
第三章:特异性免疫的应用【教学目标】1. 掌握特异性免疫在实际应用中的例子;2. 了解疫苗免疫接种的原理和方式;3. 理解特异性免疫在疾病预防和治疗中的作用。
【教学内容】1. 特异性免疫在实际应用中的例子;2. 疫苗免疫接种的原理和方式;3. 特异性免疫在疾病预防和治疗中的作用。
免疫组化技术在病理诊断和研究中的应用
• 免疫组化技术简介 • 免疫组化技术在病理诊断中的应用 • 免疫组化技术在研究中的应用 • 免疫组化技术最新进展与展望
01 免疫组化技术简介
定义与原理
定义
免疫组化技术是一种利用抗原-抗 体反应原理,通过标记抗体来检 测组织或细胞内特定抗原物质的 方法。
鉴别诊断
对于形态相似的肿瘤,免疫组化技术 可以通过检测不同的抗原表达,帮助 医生进行鉴别诊断,提高诊断的准确 性。
肿瘤分型与分级
分型
根据肿瘤细胞抗原的表达情况,可以 将肿瘤分为不同的亚型,有助于制定 更加个性化的治疗方案。
分级
免疫组化技术可以通过检测肿瘤细胞 增殖相关抗原的表达情况,评估肿瘤 的恶性程度和预后,为临床治疗提供 参考。
探索疾病发生机制
确定疾病发生过程中的关键分子
通过免疫组化技术,可以检测和定位疾病发生和发展过程中涉及的关键分子,如生长因子、细胞因子和信号转导 分子等。
揭示疾病发病机制
通过分析特定分子在疾病组织中的表达和定位,有助于深入了解疾病的发病机制,为开发新的治疗策略提供理论 依据。
药物靶点筛选与验证
筛选潜在药物靶点
免疫治疗效果评估
通过分析免疫治疗前后肿瘤组织中相关分子表达的变化,有助于评估免疫治疗的疗效和 机制,为优化治疗方案提供依据。
04 免疫组化技术最新进展与 展望
高灵敏度与特异性抗体研发
01
针对肿瘤标志物、细胞因子等 关键分子,研发更具有高灵敏 度和特异性的抗体,提高免疫 组化检测的准确性。
02
采用单克隆抗体技术,通过筛 选和优化,获得更具有针对性 的抗体,降低交叉反应和假阳 性率。
结果的判断。
免疫组库测序技术流程
免疫组库测序技术流程免疫组库测序技术是一种用于研究免疫系统中抗体多样性的高通量测序方法。
该技术利用高通量测序平台,对免疫组库中的抗体编码区域进行测序,以获得抗体的基因序列信息。
本文将介绍免疫组库测序技术的流程和应用。
一、样品准备在进行免疫组库测序之前,需要准备包含抗体多样性信息的样品。
样品可以来源于人体、动物或其他生物体内的免疫组织或细胞。
样品可以是血液、骨髓、脾脏等,也可以是单个B细胞或其核酸提取物。
样品的获取和处理要符合伦理和规范,确保实验的可靠性和准确性。
二、抗体基因的扩增在免疫组库测序中,需要对抗体基因进行扩增,以获得抗体的编码区域序列。
一般采用PCR方法进行扩增。
PCR反应中使用特异性引物,选择性地扩增目标抗体基因。
PCR反应条件需要精确控制,以保证扩增的特异性和效率。
三、文库构建扩增得到的抗体基因片段需要进行文库构建,以便后续的测序分析。
文库构建包括DNA片段的末端修复、连接适配体、连接产物纯化和文库的扩增等步骤。
文库构建过程中需要注意避免污染和损伤,以保证文库的质量和稳定性。
四、高通量测序文库构建完成后,可以进行高通量测序。
高通量测序技术可以同时测定大量的DNA序列,具有高效、高准确性的特点。
目前常用的高通量测序平台有Illumina MiSeq、Ion Torrent等。
测序数据的质量控制和分析是保证结果可靠性的重要环节。
五、数据分析测序得到的数据需要进行分析和解读。
数据分析包括序列比对、多样性分析、克隆频度计算等。
序列比对可以将测序得到的序列与数据库中已知的抗体序列进行比对,以鉴定和注释抗体基因。
多样性分析可以评估抗体基因的多样性水平和克隆选择压力。
克隆频度计算可以估算不同克隆的相对丰度。
六、应用领域免疫组库测序技术在许多领域都有广泛的应用。
在免疫学研究中,可以利用免疫组库测序来解析免疫应答的动态变化、鉴定新的抗体分子、研究抗体多样性和亲和力等。
在疾病诊断和治疗中,免疫组库测序可以用于鉴定致病微生物、筛选特异性抗体、监测治疗效果等。
bulk免疫组库测序流程
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49个测序附属项目
49个测序附属项目以下是49个常见的测序附属项目:1. 基因组测序(Whole Genome Sequencing,WGS),对一个生物个体的全基因组进行测序,包括所有基因和非编码区域。
2. 转录组测序(RNA-Seq),测序并分析一个生物体内的所有转录本,可以用于研究基因表达水平和转录调控。
3. Exome测序(Whole Exome Sequencing,WES),测序并分析一个生物体内的所有编码区域,即外显子。
4. 甲基化测序(DNA Methylation Sequencing),测序并分析一个生物体内DNA的甲基化模式,可以用于研究表观遗传学。
5. 蛋白质组测序(Proteomics),通过质谱等技术来测定一个生物体内的蛋白质组成和修饰。
6. ChIP-Seq,结合免疫沉淀和测序技术,用于研究染色质上的转录因子结合位点。
7. ATAC-Seq,用于测定开放染色质区域,即易于转录因子结合和基因调控的区域。
8. Hi-C,用于研究染色质的三维结构和染色体间的相互作用。
9. MeDIP-Seq,用于富集并测定DNA甲基化区域。
10. Bisulfite Sequencing,用于测定DNA甲基化区域的高分辨率测序方法。
11. 转座子测序(Transposon Sequencing),用于研究转座子在基因组中的分布和活动。
12. 克隆测序(Clone Sequencing),通过克隆和测序多个DNA片段,用于研究复杂基因组结构和序列重复区域。
13. 全基因组重测序(Whole-genome Re-sequencing),对一个生物体的全基因组进行再次测序,用于研究个体间的遗传变异。
14. 全转录组重测序(Whole-transcriptome Re-sequencing),对一个生物体的全转录组进行再次测序,用于研究转录组的变异。
15. 全外显子重测序(Whole-exome Re-sequencing),对一个生物体的全外显子进行再次测序,用于研究外显子的变异。
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库全貌,我们可以通过增加样本量的方式
来弥补单个人外周血免疫组库不能反映免
3、免疫组库的多重引物并不通用,每个物 种甚至每个种系的引物都可能不尽相同。 这意味着每研究一种新的物种的免疫组库, 我们都要重新设计合成该物种的多重引物 以及PCR条件等。另一反面,有的物种胚系 基因序列不全甚至没有,这也给多重引物 的设计带来一定的麻烦。
2、数据比对分析 比对分析,与数据库(IMGT)V/D/J基因片 段比对
4、免疫组库构建 构建免疫组库表达谱,统计多样性抗体库 克隆表达情况 免疫组库多样性呈现,绘制V/J基因表达的 2D、3D图
5、免疫组库差异分析 样品间多样性差异分析(辛普森系数、香
6、IR-SEQ存在的问题
1、构建免疫组库的过程实际上是基于多重引 物PCR来覆盖BCR或TCR序列多样性的过程, 这就会涉及多重引物之间扩增效率导致的 偏好性的问题,一套好的多重引物总会平 衡各对引物之间的扩增效率以及尽量避免 引物间的非特异性扩增和二(多)聚体, 可以说构建的免疫组库质量的好坏直接取 决于其多重引物质量的高低。
决定B淋巴细胞识别抗原的关键部位是最具 多样性的重链CDR3区,其多样性的产生源 于IGHV(51个功能性基因片段)末端IGHD(23个功能性基因片段)-ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱGHJ前端(6 个功能性基因片段)基因重排及V-D和D-J连
接时非模板依赖性核苷酸插入或剪切和体 细胞高频突变等。
3、TCR
T细胞受(TCR)是由T细胞分泌的膜蛋白分 子,与BCR不同的是TCR只在细胞表面而不 分泌出去。一个T细胞的TCR可以是α链和β 链组成的,或者由γ链和δ链组成的。α链和γ 链由V-J-C基因片段重组而来,β链和δ链由VD-J-C基因片段重组而来,这也类似于BCR的 重链和轻链。参与特异性免疫应答的T淋巴 细胞主要是α/β T淋巴细胞,占外周T淋巴细 胞的90-95%。TCR β 链CDR3在抗原特异性 识别中起关键作用,是直接与抗原肽的结合
4、BCR/TCR多样性产生机制
1. 不同VDJ基因片段组合的多样化; 2. 不同基因片段连接时随机插入删除造成连
接的多样化,V(D)J连接区核苷酸的插入和 删除,体现为互补决定区簇CDR3)序列多 样性; 3. 不同重链和轻链组合的多样化; 4. 以及 B 细胞受体特有的随机高频突变。
5、研究免疫组库的流程
IR-SEQ
目录
一. 免疫组库(IR) 二. 免疫组库测序技术 三. 信息分析
1、免疫组库概念
免疫组库(Immune Repertoire,IR)是指 在任何指定时间,某个个体的循环系统中 所有功能多样性B细胞和T细胞的总和。研 究免疫组库就要测定免疫系统中的BCR和 TCR的基因或RNA分子序列。
二、免疫组库测序
1、免疫组库测序概念
免疫组库测序(Immune Repertoire sequencing(IR-SEQ))是以 T/B 淋巴细胞为 研究目标,用多重PCR技术或5’RACE扩增决 定B细胞受体(BCR)或T细胞受体(TCR) 多样性的互补决定区(CDR3区),再结合 高通量测序技术(HTS),全面评估免疫系 统的多样性,深入挖掘免疫组库与疾病的 关系。
2、两种PCR技术的优缺点
Arm-PCR是最新开创的一种高效扩增子救援多重 PCR,它克服了传统多重PCR的缺限。通过在扩 增的早期使用基因靶点特异性的引物,而在指数 扩增期使用共用的引物,使得所有模板的扩增效 率大大提高,因而具有较高的特异性和灵敏性。
3、模板比较
基因组虽然DNA容易制备,但PCR扩增过程 中易产生非产出性的重组序列,且J-C区之 间存在的大量内含子使其下游引物只能位 于J区,PCR扩增的敏感性一般由细胞的拷 贝量决定;相对而言,RNA需取自新鲜的标 本,其产物多为产出性的CDR3序列,下游 引物可选自C区,具有高度的敏感性。
高效靶向覆盖-运用多重PCR设计实现平均 97%靶向覆盖
读长-可选择200bp或400bp读长
5、信息分析
1、基本数据统计 数据过滤,对原始数据进行去除接头污染序 列及低质量reads的处理 数据搭建,数据拼接,消除测序背景及有效 数据构建
数据统计,数据产出统计及测序数据的成分 和质量评估
以唾液和尿液作为淋巴细胞DNA来源的方式。
2、BCR
B细胞受体(BCR)又称为免疫球蛋白 (IG),它是由B细胞分泌的可以和抗原结 合的蛋白质分子。成熟的B细胞可以将IG分 泌到细胞外面以中和抗原。免疫球蛋白由 两条重链(heavy chain, H),两条轻链 (light chain, L)中间通过二硫键连接而成。 重链(IGH)由 Variable(V),Diversity (D),Joining(J)和Constant(C)基因 片段重组而来;轻链(IGL)只由V-J-C重组 而来。重链(H链)又分为V区、C区、跨膜 区及胞质区;而轻链(L链)则只有V区和C
4、主流测序技术及优缺点
免疫组库分析的精确性依赖于HTS数据的 可靠性。而HTS数据的可靠性又依赖于测序 的准确性和覆盖的深度。
Thermo测序平台
Ion Torrent:革新性的半导体芯片测序技术 平台
原理是:向 DNA 聚合物中加入 dNTP,会 释放出氢离子。我们采用半导体测定这些 氢离子引起的 pH 变化,通过同时测量数百 万起此类变化,可以测定各个片段的序列。
影响免疫组库组成的因素有很多种。比如 年龄、疾病、免疫记忆、免疫缺陷遗传疾 病、疫苗、器官移植、癌症治疗等。
根据淋巴细胞DNA来源的不同,对于免疫组 库的研究分为以下几大类:健康人士一般 采用抽取外周血的方式;特殊人群比如白 血病人或者白血病细胞微小残留病(MRD) 患者,为了深入研究其免疫组库的变化也 将骨髓血作为淋巴细胞DNA的来源;刚出生 的婴儿,其脐带血可以用于研究人在出生 早期与母亲在免疫组库方面的联系与区别; 而对于动物来说尤其是小型动物,脾脏也 是常见淋巴细胞的DNA来源脏器。
2、以人体内BCR为例,保守估计BCR的种 类多样性在1011这一数量级级别上,其中骨 髓方面占17%,全身淋巴结占到28%,脾 脏和粘膜系统占23%,外周血方面仅占2%, 其他约占30%。然而我们对人免疫组库的 研究往往是以来源方便的外周血,显然外 周血对免疫组库多样性的贡献率2%远远不 足,为了能尽量完全地反映人群的免疫组
据推测,胚系VDJC基因片段随机组合、重 排以及TCR α/β链和γ/δ 链V区基因重排产生 的TCR克隆数量高达1015-1018,构成多样性 极其丰富的T淋巴细胞抗原受体库。不同T 淋巴细胞克隆有不同序列或长度的TCRCDR3基因,翻译出不同的CDR3多肽序列, 从而反映T淋巴细胞功能状态。在发生特异