罗氏全自动免疫组化染色仪特点之欧阳家百创编
目前罗氏独有的SISH技术和北京金菩嘉的FISH技术两者区
别如下：
欧阳家百（2021.03.07）
由于FISH方法中的荧光容易淬灭，保存时间短，不利于病理科存档。
没有相应的仪器完成全自动检测，对操作人员技术要求高，荧光显微镜价格昂贵；但技术开展较早，有较好的市场声誉。
SISH与目前应用的FISH方法对比其结果符合率大于98％；可用仪器全自动完成检测；操作相对简单；不需特殊显微镜；结果可长期保存；将是未来分子病理发展的重点，目前罗氏可提供Her2和EGFR探针，可同时和17号染色体在同一张片子上显色，未来会有TOP2，MIT等各种新的探针提供给临床。
FISH：荧光原位杂交，需用荧光显微镜观察。
SISH：银染原位杂交，可用光学显微镜观察。
●Benchmark XT 仪器介绍
Benchmark XT病理检测系统是罗氏于2008年推出的最新型全自动多功能的组织病理检测系统，具有以下优势：➢运用于免疫组化和原位杂交技术
免疫组织化学技术与原位杂交技术是近年来病理诊断发展先进的检测技术；为临床实现个体化及分子靶向治疗提供有力的支持。
➢具备最佳检测性能，包括以下指标：1.高灵敏度2.高特异性检测3.高稳定性4.全液体试剂5.条形码技术6.专利的喷射清洗7.多喷头分配器8.专利液体封盖膜技术（LCS）9专利空气涡流混匀技术10.专利Themopad温控技术11.检测方案多样化及个性化（为各厂家最齐全的）12.专利的脱蜡液
1.仪器可以开展哪些新项目？会对学科发展和临床诊断有哪些指导作用？
仪器除了解决常规IHC的工作，还可以进行基因检测ISH，如鼻咽癌和Bukitt’s淋巴瘤的EBER，宫颈HPV 6和16型检测, 乳腺癌her2/new基因检测等。
这些基因检测目前对临床的靶向治疗有指导作用，同时在病人癌前预测方面有价值，值得推广。
2.新的广东省免疫组化收费是多少钱、银染原位杂交收费是多
少钱？
新的广东省免疫组化收费，大概是200元左右/项；银染原位杂交收费大概是2200元左右/项。
3.该设备可给医院和科室解决哪些问题？
减少免疫组化染色工作中手工操作带来的误差，使操作程序标准化，缩短实验时间，提高科室工作效率，可满足科室免疫组化质量控制。
满足免疫组化需求及分子病理项目的开展，为临床实现个体化及分子靶向药物治疗提供有力的支持。
环保
的试剂有益于病理技术人员身体健康，降低医院处理废液的成本。
Roche Benchmark XT与Leica Bond-Max对比表。
免疫组化染色操作步骤之欧阳德创编
免疫组织化学染色原理和操作步骤一、免疫组织化学原理免疫组织化学（IHC）又称免疫细胞化学，是根据抗原—抗体特异性结合的原理，应用带有可见标记的特异性抗体作为探针，检测组织和细胞中抗原性物质的一种技术。
免疫组化技术主要有直接法和间接法：直接法是以标记的一抗孵育标本以检测其中的抗原成分；间接法则先后加入一抗和二抗，形成抗原—一抗—二抗复合体以达到检测该抗原的目的，该法因二抗的放大作用而具有较高的敏感性。
间接法常用的有过氧化物酶—抗过氧化物酶（PAP）法、亲和素—生物素—过氧化物酶（ABC）法和链霉亲和素—过氧化物酶（SP）法。
PAP法一抗和二抗均不标记，避免了标记过程对抗体活性的影响，但需要制备过氧化物酶的抗体，与适量过氧化物酶混合形成PAP复合物（含3个酶分子和2个抗体分子），染色时依次加入一抗、二抗、PAP复合物孵育标本，最后用H2O2和二氨基联苯（DAB）为底物显示过氧化物酶，即可检测标本中的抗原成分。
生物素为含硫的杂环单羧酸，可通过其羧基与蛋白质中的氨基结合，从而标记抗体和酶。
亲合素又称抗生物素蛋白，与生物素有很高的亲合力，1分子亲合素可结合4分子生物素，ABC法即在此基础上建立。
ABC法与PAP法相似，一抗不标记，二抗用生物素标记，染色前按一定比例将亲和素与生物素标记的过氧化物酶混合，制成ABC复合物，并使亲合素分子上至少空出一个生物素结合位点。
在标本孵育过一抗和二抗后，再加入ABC复合物使其结合到二抗的生物素上，最后加入DAB进行显色。
ABC法的敏感性较PAP法更高。
图1. 免疫组织化学基本原理示意图（引自八年制《组织学与胚胎学》）SP法与ABC法相似，其不同于ABC法之处在于用生物学特性与亲和素相似的链亲和素标记过氧化物酶。
在标本孵育过一抗和二抗后，加入链亲和素标记的过氧化物酶使其结合到二抗的生物素上，最后加入DAB图2. SP法原理示意图进行显色。
与亲和素相比，链酶亲和素的结合力与亲和素相似而非特异性结合较亲和素低。
抗体和抗体的结构详解之欧阳家百创编
抗体和抗体的结构详解欧阳家百（2021.03.07）2014-10-21 00:00 来源：丁香园点击次数： 3476 关键词：抗体结构抗体,也叫免疫球蛋白 (Ig),是一种能特异性结合抗原的糖蛋白,而抗原是在易感染动物体内引发抗体产生的物质。
在体内,抗体是由于外源性分子的侵袭而产生的。
抗体以一个或者多个 Y 字形单体存在,每个 Y 字形单体由 4 条多肽链组成,包含两条相同的重链和两条相同的轻链。
轻链和重链是根据它们的分子量大小来命名的。
Y 字形结构的顶端是可变区,为抗原结合部位。
任何一个抗体的轻链都可以分为κ或λ型(基于小分子多肽结构上的差异),每一个抗体的重链则决定了它的类或型。
抗体结构重链哺乳动物Ig的重链一共有五种,分别用希腊字母α、δ、ε、γ和μ 来命名,相对应组成的抗体就称为 IgA、IgD、IgE、IgG和IgM五种抗体。
不同的重链在大小和组成上有所区别,α和γ包含大约 450 个氨基酸,而μ 和ε则有大约 550 个氨基酸。
每个重链有两个区:恒定区和可变区。
所有同一型的抗体其恒定区都是相同的,不同型的抗体之间则存在差异。
重链γ、α和δ的恒定区的组成为 3 个前后串联的Ig结构域,并有一个铰链区增加它的灵活性;重链μ 和ε的恒定区则由 4 个Ig结构域组成。
不同 B 细胞产生的抗体其重链的可变区不同,但同一种 B 细胞或细胞克隆产生的抗体其可变区则是相同的,每一个重链的可变区都是大约 110 个氨基酸长度,并组成一个单独的Ig结构域。
轻链哺乳动物只有两种轻链:λ型和κ型,每条轻链有两个前后相连的结构域:一个恒定区和一个可变区。
轻链的长度大约为 211~217 个氨基酸, 每个抗体包含的两条轻链总是相同的,对哺乳动物来说每一个抗体中的轻链只有一个型:κ或λ型。
在一些低等的脊椎动物中,像软骨鱼类 (软骨鱼)和硬骨鱼类体内也会发现其他型的轻链如ι(iota) 型。
Fab和Fc段Fc 段可以直接结合酶或荧光染料来标记抗体,是在 ELISA 过程中抗体铆钉在板上的部位,也是在免疫沉淀、免疫印迹和免疫组化中识别并结合二抗的部位。
【优选】罗氏系统特点及应用方向(1)PPT资料
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温控的均一性保证了各个反应样品扩增的均一性，极大降低了检测误差率！
快速循环模式
• 更快地升降温，提高反应速度，缩短反应进行的时间 单位时间内检测的工作量增大，实现更加快速的结果检测！
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微量样品的定量检测性能 •全能 •可配机械臂，自动化分液装置 •LightCycler® 2. •可配机械臂，自动化分液装置 •Peltier 半导体加热单位 •LightCycler® 480 Instruments (I, II) •90%以上。 •Therma-Base
有Therma-Base
10 - 100 / 5 - 20
LightCycler® 480荧光定量PCR系统：系统构成
仪器
可更换温控模块
模块化软件
试剂盒
多孔板
预制探针
LightCycler® 480荧光定量PCR系统
创新的技术改良以获得业内最好的性能
• 独有的Therma-BaseTM技术提升导热效率，提高孔间温度均一性 • 银质散热块加快降温速度 • 加长光路系统改进光学检测的边缘效应
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不同仪器比较
LightCycler® 480
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LightCycler® 480荧光定量PCR仪温控系统
热均一性对实验结果的影响
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•LightCycler® 480荧光定量PCR仪
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罗氏全自动免疫组化染色仪特点
罗氏全自动免疫组化染色仪特点1.高度自动化：罗氏全自动免疫组化染色仪具有高度自动化的特点，可以实现全自动的样本处理和染色过程。
仪器内置有全自动开盖、载玻片、烘干、染色和封盖装置，减少了人工操作环节，降低了错误和污染的风险。
2.多功能：该仪器可应用于不同类型的免疫染色实验，包括IHC、ISH、FISH等多种实验方法。
不同的染色方法和反应试剂可以预先设定，根据实验需要进行选择，灵活性强。
3.高效节省：罗氏全自动免疫组化染色仪能够同时处理多个样本，大大提高了实验的效率。
仪器内设置了多个样本位，可以一次性装载多个样本，减少了样本处理的时间。
同时，该仪器还具有节约试剂的特点，只需少量的试剂就可以完成染色实验，降低了实验成本。
4.精确可靠：罗氏全自动免疫组化染色仪能够精确控制染色过程的温度、时间和试剂浓度等参数，保证了实验的准确性和可靠性。
仪器内置的温度控制系统能够精确控制染色温度的稳定性，保证了染色的一致性。
同时，仪器还具有自动报警和故障检测功能，能够及时发现和解决问题，确保实验的顺利进行。
5.操作简便：罗氏全自动免疫组化染色仪采用人机界面操作，操作界面友好、直观，操作简单方便。
仪器内置有预设的染色程序和实验参数，只需选择相应的程序，输入相关参数，按下开始按钮即可开始实验。
同时，仪器还能够记录实验过程的详细信息，包括温度、时间和试剂使用量等，方便用户进行结果验证和数据分析。
6.安全可靠：罗氏全自动免疫组化染色仪在设计上重视用户的安全和实验的可靠性。
仪器内置有安全装置，如电子锁和自动切断电源等，确保仪器在实验过程中稳定运行。
同时，仪器还能够自动监测和记录实验室环境条件，如温度和湿度等，避免因环境变化对实验结果产生影响。
总结起来，罗氏全自动免疫组化染色仪具有高度自动化、多功能、高效节省、精确可靠、操作简便和安全可靠等特点。
这些特点使得该仪器成为免疫组化染色实验的理想选择，能够提高实验效率、准确性和可靠性。
常用的单克隆抗体检测方法之欧阳家百创编
常用的单克隆抗体检测方法欧阳家百（2021.03.07）通过杂交瘤技术制备单克隆抗体，在杂交瘤制备完成后，需要对抗体进行一个检测，本文介绍了几种常用的抗体检测的方法（1）免疫酶技术免疫酶技术是将抗原抗体反应的特异性和酶对底物显色反应的高效催化作用有机结合而成的免疫学技术。
由于它特异性强，灵敏度高，现已广泛用于筛选和鉴定单抗。
①器材和试剂a、包被缓冲液：碳酸盐缓冲液：取0.2mol/L Na2CO3 8ml，0.2mol/L NaHCO3 17ml混合，再加75ml蒸馏水，调PH至9.6。
Tris-HCl缓冲液（PH8.0，0.02mol/L）：取0.1mol/L Tris 100ml，0.1mol/L HCl 58.4ml混合，加蒸馏水至1000ml。
b、洗涤缓冲液（PH7.2的PBS）：KH2PO4 0.2g，KCl 0.2g，Na2HPO4·12H2O 2.9g，NaCl 8.0g，Tween-20 0.5ml，加蒸馏水至1000ml。
c、稀释液和封闭液：牛血清白蛋白（BSA）0.1g，加洗涤液至100ml；或用洗涤液将小牛血清配成5-10%使用。
d、酶反应终止液（2mol/L H2SO4）：取蒸馏水178.3ml，滴加浓硫酸（98%）21.7ml。
e、底物缓冲液（PH5.0，磷酸盐-柠檬酸缓冲液）：取0.2mol/LNa2HPO4 25.7ml，0.1ml/L柠檬酸24.3ml，再加50ml蒸馏水。
柠檬酸溶液及配成的底物缓冲液不稳定，易形成沉淀，因此一次不宜配制过多。
f、底物使用液：OPD底物使用液（测490nm的OD 值）：OPD 5mg，底物缓冲液10ml，3% H2O2 0.15ml。
TMBS或TMB底物使用液（测450nm的OD值）：TMBS或TMB（1mg/ml）1.0ml，底物缓冲液10ml，1% H2O2 25ul。
ABTS底物使用液（测410nm的OD值）：ABTS 0.5mg，底物缓冲液1ml，3% H2O2 2ul。
罗氏电化学发光仪器ESO
罗氏电化学发光仪器E170 SOP仪器简介：E170 是罗氏诊断公司出品的全自动电化学发光免疫分析仪，是全自动，随机进样的免疫分析系统，可以对许多种检测项目进行体外的定量或者定性的分析。
该分析仪应用的是电化学发光技术(ECL)。
每个E 模块系统每小时的标本处理量为170个试验(最多可以将4个E模块连接)。
只有在试验室条件下，经过培训的操作者方可操作E模块系统。
系统特色可以24小时待机使用标本条码扫描功能试剂条码扫描功能单个E模块的每小时处理能力为170个试验自动保养功能自动复查功能自动发出定标信息自动标本稀释功能系统辅助的操作流程一个E模块具有25个温控的试剂通道1个模块可以安放672个反应杯1个模块可以安放672个加样头双向数据传输接口运行条件：水质要求无菌 (< 10 cfu/ml)，去离子水M?电阻值 (最大 Ms/cm)15-25 磅/英寸2 ~ kg/cm2 或 49~343 kpa)耗水量：每E170模块消耗 18升/小时环境条件无灰尘的、良好通风的环境无直接日照地面水平(角度：<1/200?o)地面足够坚硬能够承受仪器的重量(详细情况请见本章中的系统特点)温度：18~32摄氏度当系统启动时，温度的改变应该小于2度/小时屋内湿度：45%~85%电源电压没有明显的波动在附近没有会产生电磁波的仪器有接地的三相电源E170由三个类型的硬件单元组成：控制单元、核心单元以及检测单元。
控制单元介绍包括：触摸屏幕的电脑键盘打印机仪器管理电脑终端核心单元介绍核心单元将所有的标本从入口端经过E170仪器到出口端或者复查缓冲区。
下面所列位核心单元的组成部分。
加样端标本架转运通道复查缓冲带出口端中心控制区电源开关(在进样端的左侧面上)检测单元介绍分立式、随机进样的每小时170试验的免疫检测系统。
下面所列为E170模块的组成部分：试剂区位于分析模块的左边部分,它包含以下部分:1.一个试剂盘,温度控制在20?3℃; 有25个试剂通道2.一个用来将试剂以及磁珠从试剂盘中加入的试剂针,将之加到孵育器的反应杯中3.一个条码扫描器,用来阅读试剂盒上的二维条码4.一个用于试剂盒盖的开关的机械装置,以避免试剂的挥发5.一个用于混匀磁珠的搅拌器.当磁珠被加入之前或额外的混匀步骤中,搅拌棒用来搅拌磁珠6.两个用来清洗探针以及搅拌器的冲洗站7.一个探针清洗站,它含有两瓶探针洗液用来清洗探针的内部测量区位于分析模块的中部,它含有以下几个部分：1.一个孵育器,含有54个孵育位,用来进行免疫反应孵育池有54个孵育位置,位于仪器的中心部分,当标本和试剂加入到反应杯中后,该孵育池的温度维持在37℃±℃.当一个反应在准备测定时,该孵育盘需旋转,将反应杯转至需要的位置,在此处,适宜的单位将执行相应的功能.2.一个用来将标本从标本容器中加入到反应杯中的标本探针标本探针位于仪器的后面,邻近核心系统.标本探针用来转运标本,定标液,指控液然后加入到孵育器的标本中,探针使用一次性的加样头以控制标本间的交叉污染,并且探针有探测液面,凝块的功能.液面探测通过电容的变化感知,凝块探测通过压力的改变来探测.每一个新的加样步骤都使用;一个新的加样头不要用裸露的手接触探针的表面,否则会留下痕迹在探针的表面上,这样会影响探针的功.如果碰触到了探针,应该立即使用蘸有酒精的纱布进行擦拭,然后使用去离子水再擦拭干净.1.两个反应液的吸样针,用来将反应好的抗原-抗体复合物从反应杯中加入到测量池中,以进行检测2.两个吸样针的冲洗站,在两个不同的吸样步骤间用来对吸样针进行清洗3.2个测量池消耗品区位于分析模块的右边,它含有以下几个部分:1.一个机械手,将标本杯和反应头从物品架上加到孵育器上和放标本反应吸样头处2.搅拌站,在此处反应杯中的反应液被混匀成乳浊液3.含有一个处置口的吸样头站,在这里反应过的吸样头备扔弃进入相应的固体废物箱中;还有一个吸样头的缓冲区,在此处机械手将一个待用的吸样头放置于标本加样探针处4.一个物品架的升降器,用来将放入模块中的消耗品盒转运至模块的表面以便于机械手的抓取5.固体废物箱,盛装使用过的反应杯和吸样头6.指示灯,提示物品架升降器的状态7.系统试剂以及清洗液被放置在模块的内部,在仪器前门的后边,有CleanCell,8.Procell,PreClean M.Procell 和Cleancell 瓶两瓶Procell和两瓶Cleancell位于前门后的特定位置.Procell是一种缓冲液,成分是TPA(三丙胺).瓶盖的颜色为白色.Cleancell为KOH 溶液,用来清洗测量池.瓶盖的颜色为黑色.Procell和Cleancell的位置非常重要以确保加入正确的试剂,每瓶系统试剂含有2升液体,除了最初的灌注外,每套试剂可以进行1000个测试,两瓶系统试剂在不影响仪器操作的情况下,允许更换.当更换完新的系统试剂之后,不要忘记按下相应的绿色键,登记系统试剂的更换情况.前清洗区1.该区位于仪器的后边的中部,包括:2.对于试验要求进行前清洗的项目,探针吸入清洗液3.分配探针用来分配PreClean M 溶液4.反应杯的控制装置有四个极向不同磁场,以便在清洗过程中保护磁珠5.混匀站用来混匀反应液6.冲洗站用来清洗探针以及分配探针试剂包装概念每个试剂盒在两端均有一个2D条码,尽管E170指示阅读其中一个.试剂的管理信息可以全自动进行登陆.不必要手工输入额外的信息.即用型试剂可以放置于试剂盘的25个试剂通道上.当扫描过后,试剂即可以应用.罗氏的定标液和指控液的处理同于试剂.多数定标液是即用型的,干粉状的定标液和指控品必须复溶后装入特定的小瓶中.对于定量的分析,定标液和指控液的耙值储存于条码中.对于定性的检测,所有的定标信息储存于试剂的条码中.试剂盒图A-56 电化学发光的试剂盒该图片显示了应用于E170上的试剂的模型.每个试剂均为即用型的.试剂盒含有3个部分:白色的透明瓶中装的是磁珠黑色的瓶,灰色的盖的瓶中装的是试剂R1黑色的瓶,黑色的盖的瓶中装的是试剂R2试剂盒在盘中的放置是有方向的,所以不会造成放置的错误.试剂盒的标记大标记中包含有试剂的储存温度,内容物,货号;小标记中包含批号,效期,以及2D条码的号码.这个条码用来登陆,仪器不能自动使用.试剂条码试剂的条码中包含运行所需的信息,信息包括下面的内容,但不仅限于此:试验号码批号母定标曲线仪器设置定标液的批号以及耙值效期定标频率还包括以下内容:货号试剂盒号试剂条码号码批号效期试剂盒上的条码采取的是独一无二的格式 .只有条码被损伤时,条码才不会阅读,可以通过手工输入的方式确认试剂的批号.定标液和质控液1.多数的电化学发光检测项目的试剂和定标液是分开的.每个定标液和质控品的盒中含有一个可以直接使用的条码.多数的定标液是液体的即用型的,不需要任何特殊处理,当定标时,将其放于仪器上即可.2.多数的质控品和少数定标液是干粉的,使用前需要溶解然后转入特定的小瓶中.复溶后的定标液和质控瓶可以储存于特定的塑料小瓶中.3.定标液和质控品有彩色的盖子,以帮助用户的识别.白色/亮棕色的瓶盖分别为定标液/质控品的1浓度;黑色/暗棕色的瓶盖分别代表定标液电化学发光反应原理：电化学发光（electro－chemiluminescence，ECL)是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，实际上包括了电化学和化学发光两个过程。
罗氏电化学发光仪器ESOP
罗氏电化学发光仪器ESOP罗氏电化学发光仪器E170S O P 仪器简介：E170 是罗氏诊断公司出品的全自动电化学发光免疫分析仪，是全自动，随机进样的免疫分析系统，可以对许多种检测项目进行体外的定量或者定性的分析。
该分析仪应用的是电化学发光技术(ECL)。
每个E模块系统每小时的标本处理量为170个试验(最多可以将4个E模块连接)。
只有在试验室条件下，经过培训的操作者方可操作E模块系统。
系统特色可以24小时待机使用标本条码扫描功能试剂条码扫描功能单个E模块的每小时处理能力为170个试验自动保养功能自动复查功能自动发出定标信息自动标本稀释功能系统辅助的操作流程一个E模块具有25个温控的试剂通道1个模块可以安放672个反应杯1个模块可以安放672个加样头双向数据传输接口运行条件：水质要求◆无菌(< 10 cfu/ml)，去离子水◆ 1.5 M?电阻值(最大1.0 Ms/cm)◆15-25 磅/英寸2 (0.5~3.5 kg/cm2 或49~343 kpa)◆耗水量：每E170模块消耗18升/小时环境条件◆无灰尘的、良好通风的环境◆无直接日照◆地面水平(角度：<1/200?o)◆地面足够坚硬能够承受仪器的重量(详细情况请见本章中的系统特点)◆温度：18~32摄氏度◆当系统启动时，温度的改变应该小于2度/小时◆屋内湿度：45%~85%◆电源电压没有明显的波动◆在附近没有会产生电磁波的仪器◆有接地的三相电源E170由三个类型的硬件单元组成：控制单元、核心单元以及检测单元。
控制单元介绍包括：触摸屏幕的电脑键盘打印机仪器管理电脑终端核心单元介绍核心单元将所有的标本从入口端经过E170仪器到出口端或者复查缓冲区。
下面所列位核心单元的组成部分。
加样端标本架转运通道复查缓冲带出口端中心控制区电源开关(在进样端的左侧面上)检测单元介绍分立式、随机进样的每小时170试验的免疫检测系统。
下面所列为E170模块的组成部分：◆试剂区位于分析模块的左边部分,它包含以下部分:1.一个试剂盘,温度控制在20?3℃; 有25个试剂通道2.一个用来将试剂以及磁珠从试剂盘中加入的试剂针,将之加到孵育器的反应杯中3.一个条码扫描器,用来阅读试剂盒上的二维条码4.一个用于试剂盒盖的开关的机械装置,以避免试剂的挥发5.一个用于混匀磁珠的搅拌器.当磁珠被加入之前或额外的混匀步骤中,搅拌棒用来搅拌磁珠6.两个用来清洗探针以及搅拌器的冲洗站7.一个探针清洗站,它含有两瓶探针洗液用来清洗探针的内部◆测量区位于分析模块的中部,它含有以下几个部分：1.一个孵育器,含有54个孵育位,用来进行免疫反应孵育池有54个孵育位置,位于仪器的中心部分,当标本和试剂加入到反应杯中后,该孵育池的温度维持在37℃±0.3℃.当一个反应在准备测定时,该孵育盘需旋转,将反应杯转至需要的位置,在此处,适宜的单位将执行相应的功能.2.一个用来将标本从标本容器中加入到反应杯中的标本探针标本探针位于仪器的后面,邻近核心系统.标本探针用来转运标本,定标液,指控液然后加入到孵育器的标本中,探针使用一次性的加样头以控制标本间的交叉污染,并且探针有探测液面,凝块的功能.液面探测通过电容的变化感知,凝块探测通过压力的改变来探测.每一个新的加样步骤都使用;一个新的加样头不要用裸露的手接触探针的表面,否则会留下痕迹在探针的表面上,这样会影响探针的功.如果碰触到了探针,应该立即使用蘸有酒精的纱布进行擦拭,然后使用去离子水再擦拭干净.1.两个反应液的吸样针,用来将反应好的抗原-抗体复合物从反应杯中加入到测量池中,以进行检测2.两个吸样针的冲洗站,在两个不同的吸样步骤间用来对吸样针进行清洗3.2个测量池消耗品区位于分析模块的右边,它含有以下几个部分:1.一个机械手,将标本杯和反应头从物品架上加到孵育器上和放标本反应吸样头处2.搅拌站,在此处反应杯中的反应液被混匀成乳浊液3.含有一个处置口的吸样头站,在这里反应过的吸样头备扔弃进入相应的固体废物箱中;还有一个吸样头的缓冲区,在此处机械手将一个待用的吸样头放置于标本加样探针处4.一个物品架的升降器,用来将放入模块中的消耗品盒转运至模块的表面以便于机械手的抓取5.固体废物箱,盛装使用过的反应杯和吸样头6.指示灯,提示物品架升降器的状态7.系统试剂以及清洗液被放置在模块的内部,在仪器前门的后边,有CleanCell,8.Procell,PreClean M.Procell 和Cleancell 瓶两瓶Procell和两瓶Cleancell位于前门后的特定位置.Procell是一种缓冲液,成分是TPA(三丙胺).瓶盖的颜色为白色.Cleancell为KOH 溶液,用来清洗测量池.瓶盖的颜色为黑色.Procell和Cleancell的位置非常重要以确保加入正确的试剂,每瓶系统试剂含有2升液体,除了最初的灌注外,每套试剂可以进行1000个测试,两瓶系统试剂在不影响仪器操作的情况下,允许更换.当更换完新的系统试剂之后,不要忘记按下相应的绿色键,登记系统试剂的更换情况.◆前清洗区1.该区位于仪器的后边的中部,包括:2.对于试验要求进行前清洗的项目,探针吸入清洗液3.分配探针用来分配PreClean M 溶液4.反应杯的控制装置有四个极向不同磁场,以便在清洗过程中保护磁珠5.混匀站用来混匀反应液6.冲洗站用来清洗探针以及分配探针◆试剂包装概念每个试剂盒在两端均有一个2D条码,尽管E170指示阅读其中一个.试剂的管理信息可以全自动进行登陆.不必要手工输入额外的信息.即用型试剂可以放置于试剂盘的25个试剂通道上.当扫描过后,试剂即可以应用.罗氏的定标液和指控液的处理同于试剂.多数定标液是即用型的,干粉状的定标液和指控品必须复溶后装入特定的小瓶中.对于定量的分析,定标液和指控液的耙值储存于条码中.对于定性的检测,所有的定标信息储存于试剂的条码中.试剂盒图A-56 电化学发光的试剂盒该图片显示了应用于E170上的试剂的模型.每个试剂均为即用型的.试剂盒含有3个部分:白色的透明瓶中装的是磁珠黑色的瓶,灰色的盖的瓶中装的是试剂R1黑色的瓶,黑色的盖的瓶中装的是试剂R2试剂盒在盘中的放置是有方向的,所以不会造成放置的错误.试剂盒的标记大标记中包含有试剂的储存温度,内容物,货号;小标记中包含批号,效期,以及2D条码的号码.这个条码用来登陆,仪器不能自动使用.试剂条码试剂的条码中包含运行所需的信息,信息包括下面的内容,但不仅限于此:试验号码批号母定标曲线仪器设置定标液的批号以及耙值效期定标频率还包括以下内容:◆货号◆试剂盒号◆试剂条码号码◆批号◆效期试剂盒上的条码采取的是独一无二的格式.只有条码被损伤时,条码才不会阅读,可以通过手工输入的方式确认试剂的批号.◆定标液和质控液1.多数的电化学发光检测项目的试剂和定标液是分开的.每个定标液和质控品的盒中含有一个可以直接使用的条码.多数的定标液是液体的即用型的,不需要任何特殊处理,当定标时,将其放于仪器上即可.2.多数的质控品和少数定标液是干粉的,使用前需要溶解然后转入特定的小瓶中.复溶后的定标液和质控瓶可以储存于特定的塑料小瓶中.3.定标液和质控品有彩色的盖子,以帮助用户的识别.白色/亮棕色的瓶盖分别为定标液/质控品的1浓度;黑色/暗棕色的瓶盖分别代表定标液电化学发光反应原理：电化学发光（electro－chemiluminescence，ECL)是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，实际上包括了电化学和化学发光两个过程。
罗氏E170电化学发光自动免疫分析仪使用体会论文
罗氏E170电化学发光自动免疫分析仪使用体会论文目的与罗氏E170电化学发光自动免疫分析仪操作用户提供操作过程中的一些经验和体会。
方法总结我们操作该仪器2年来积累的操作体会和经验。
结果积累了10条操作经验与同行提供和探讨。
结论在仪器使用中需要不断总结、积累经验才能操作好仪器以保证准确的检验结果应用于临床。
罗氏E170仪器操作使用体会电化学发光免疫分析仪具有灵敏度高、精密度好、检测速度快、检测工程多、试剂无核素污染等特点，是各临床实验室优先选择的免疫分析仪。
罗氏公司电化学发光自动免疫分析仪包括三个型号：1010、xx及E170，其中E170试剂位最多（25个）、检测速度最快（可达170个测试/小时），适合样本量大、开展工程多的大型医疗机构使用。
我们使用该仪器已有两年多，现把使用体会报道如下，供同行提供和探讨。
临床医生对检测工程要求有较高的准确性和稳定性，以利于疾病诊断和疗效观察。
该仪器所用试剂为全封闭试剂，试剂及耗材全部依赖进口，路途遥远，运输和保存条件均会影响试剂的质量，操作者除定期进行工程校准和仪器维护外，还应坚持室内质控制度，以观察检测工程的稳定性，同时也可监测仪器的工作状态。
室内质控品可选择仪器配套质控品，或进口的免疫室内质控品，也可用自制质控品。
该仪器共有两个流动测量池，虽为同一检测系统，但检测结果也有差异。
我们刚开始使用该仪器时，为了追求最快检测速度，设置每个流动测量池均可检测所有工程，结果发现同一工程室内质控累积靶值有较大差异，后来根据本实验室各检测工程的使用频度分配检测工程在固定的流动测量池，进行室内质控时，靶值就容易确定，同时校准时减少了校准品及试剂的消耗、室内质控时质控品和试剂的消耗，保证了检测结果的稳定性，实验室进行认可时也不必进行结果的比对。
罗氏xx进行试剂扫描后，试剂是否校准通过，是否可用一目了然，但对于E170，装载试剂后，在试剂（Reagent）界面无法知道试剂的校准情况，必须到校准（Calibration）界面才可知道检测工程的校准状态（工程为红色为未校准或校准未通过），这一点要引起重视，因为E170当您进行检测时，仪器不管该工程是否可用，均消耗试剂，造成试剂不必要的浪费；罗氏xx在样品盘装载标准品后，仪器优先校准该工程未校准批号，但E170必须要选择所需校准工程的位置号，具体方法为：CalibrationStatus→全选所有工程→Full→Save→按住Ctrl选择所需工程→Full→Save，所需工程后的FULL变为兰色即可进行校准；E170为样本架进样，按顺序好样本后，一定要注意起始号正确后才能开始进行检测，否那么导致样本张冠李戴。
罗氏电化学发光仪器ESOP
罗氏电化学发光仪器E170 SOP仪器简介：E170 是罗氏诊断公司出品的全自动电化学发光免疫分析仪，是全自动，随机进样的免疫分析系统，可以对许多种检测项目进行体外的定量或者定性的分析。
该分析仪应用的是电化学发光技术(ECL)。
每个E模块系统每小时的标本处理量为170个试验(最多可以将4个E模块连接)。
只有在试验室条件下，经过培训的操作者方可操作E模块系统。
系统特色∙可以24小时待机使用∙标本条码扫描功能∙试剂条码扫描功能∙单个E模块的每小时处理能力为170个试验∙自动保养功能∙自动复查功能∙自动发出定标信息∙自动标本稀释功能∙系统辅助的操作流程∙一个E模块具有25个温控的试剂通道∙1个模块可以安放672个反应杯∙1个模块可以安放672个加样头∙双向数据传输接口运行条件：水质要求◆无菌(< 10 cfu/ml)，去离子水◆ 1.5 M?电阻值(最大1.0 Ms/cm)◆15-25 磅/英寸2 (0.5~3.5 kg/cm2 或49~343 kpa)◆耗水量：每E170模块消耗18升/小时环境条件◆无灰尘的、良好通风的环境◆无直接日照◆地面水平(角度：<1/200?o)◆地面足够坚硬能够承受仪器的重量(详细情况请见本章中的系统特点)◆温度：18~32摄氏度◆当系统启动时，温度的改变应该小于2度/小时◆屋内湿度：45%~85%◆电源电压没有明显的波动◆在附近没有会产生电磁波的仪器◆有接地的三相电源E170由三个类型的硬件单元组成：控制单元、核心单元以及检测单元。
控制单元介绍包括：∙触摸屏幕的电脑∙键盘∙打印机∙仪器管理电脑终端核心单元介绍核心单元将所有的标本从入口端经过E170仪器到出口端或者复查缓冲区。
下面所列位核心单元的组成部分。
∙加样端∙标本架转运通道∙复查缓冲带∙出口端∙中心控制区∙电源开关(在进样端的左侧面上)检测单元介绍分立式、随机进样的每小时170试验的免疫检测系统。
下面所列为E170模块的组成部分：◆试剂区位于分析模块的左边部分,它包含以下部分:1.一个试剂盘,温度控制在20?3℃; 有25个试剂通道2.一个用来将试剂以及磁珠从试剂盘中加入的试剂针,将之加到孵育器的反应杯中3.一个条码扫描器,用来阅读试剂盒上的二维条码4.一个用于试剂盒盖的开关的机械装置,以避免试剂的挥发5.一个用于混匀磁珠的搅拌器.当磁珠被加入之前或额外的混匀步骤中,搅拌棒用来搅拌磁珠6.两个用来清洗探针以及搅拌器的冲洗站7.一个探针清洗站,它含有两瓶探针洗液用来清洗探针的内部◆测量区位于分析模块的中部,它含有以下几个部分：1.一个孵育器,含有54个孵育位,用来进行免疫反应孵育池有54个孵育位置,位于仪器的中心部分,当标本和试剂加入到反应杯中后,该孵育池的温度维持在37℃±0.3℃.当一个反应在准备测定时,该孵育盘需旋转,将反应杯转至需要的位置,在此处,适宜的单位将执行相应的功能.2.一个用来将标本从标本容器中加入到反应杯中的标本探针标本探针位于仪器的后面,邻近核心系统.标本探针用来转运标本,定标液,指控液然后加入到孵育器的标本中,探针使用一次性的加样头以控制标本间的交叉污染,并且探针有探测液面,凝块的功能.液面探测通过电容的变化感知,凝块探测通过压力的改变来探测.每一个新的加样步骤都使用;一个新的加样头不要用裸露的手接触探针的表面,否则会留下痕迹在探针的表面上,这样会影响探针的功.如果碰触到了探针,应该立即使用蘸有酒精的纱布进行擦拭,然后使用去离子水再擦拭干净.1.两个反应液的吸样针,用来将反应好的抗原-抗体复合物从反应杯中加入到测量池中,以进行检测2.两个吸样针的冲洗站,在两个不同的吸样步骤间用来对吸样针进行清洗3.2个测量池消耗品区位于分析模块的右边,它含有以下几个部分:1.一个机械手,将标本杯和反应头从物品架上加到孵育器上和放标本反应吸样头处2.搅拌站,在此处反应杯中的反应液被混匀成乳浊液3.含有一个处置口的吸样头站,在这里反应过的吸样头备扔弃进入相应的固体废物箱中;还有一个吸样头的缓冲区,在此处机械手将一个待用的吸样头放置于标本加样探针处4.一个物品架的升降器,用来将放入模块中的消耗品盒转运至模块的表面以便于机械手的抓取5.固体废物箱,盛装使用过的反应杯和吸样头6.指示灯,提示物品架升降器的状态7.系统试剂以及清洗液被放置在模块的内部,在仪器前门的后边,有CleanCell,8.Procell,PreClean M.Procell 和Cleancell 瓶两瓶Procell和两瓶Cleancell位于前门后的特定位置.Procell是一种缓冲液,成分是TPA(三丙胺).瓶盖的颜色为白色.Cleancell为KOH溶液,用来清洗测量池.瓶盖的颜色为黑色.Procell和Cleancell的位置非常重要以确保加入正确的试剂,每瓶系统试剂含有2升液体,除了最初的灌注外,每套试剂可以进行1000个测试,两瓶系统试剂在不影响仪器操作的情况下,允许更换.当更换完新的系统试剂之后,不要忘记按下相应的绿色键,登记系统试剂的更换情况.◆前清洗区1.该区位于仪器的后边的中部,包括:2.对于试验要求进行前清洗的项目,探针吸入清洗液3.分配探针用来分配PreClean M 溶液4.反应杯的控制装置有四个极向不同磁场,以便在清洗过程中保护磁珠5.混匀站用来混匀反应液6.冲洗站用来清洗探针以及分配探针◆试剂包装概念每个试剂盒在两端均有一个2D条码,尽管E170指示阅读其中一个.试剂的管理信息可以全自动进行登陆.不必要手工输入额外的信息.即用型试剂可以放置于试剂盘的25个试剂通道上.当扫描过后,试剂即可以应用.罗氏的定标液和指控液的处理同于试剂.多数定标液是即用型的,干粉状的定标液和指控品必须复溶后装入特定的小瓶中.对于定量的分析,定标液和指控液的耙值储存于条码中.对于定性的检测,所有的定标信息储存于试剂的条码中.试剂盒图A-56 电化学发光的试剂盒该图片显示了应用于E170上的试剂的模型.每个试剂均为即用型的.试剂盒含有3个部分:▪白色的透明瓶中装的是磁珠▪黑色的瓶,灰色的盖的瓶中装的是试剂R1▪黑色的瓶,黑色的盖的瓶中装的是试剂R2试剂盒在盘中的放置是有方向的,所以不会造成放置的错误.试剂盒的标记大标记中包含有试剂的储存温度,内容物,货号;小标记中包含批号,效期,以及2D 条码的号码.这个条码用来登陆,仪器不能自动使用.试剂条码试剂的条码中包含运行所需的信息,信息包括下面的内容,但不仅限于此:▪试验号码▪批号▪母定标曲线▪仪器设置▪定标液的批号以及耙值▪效期▪定标频率还包括以下内容:◆货号◆试剂盒号◆试剂条码号码◆批号◆效期试剂盒上的条码采取的是独一无二的格式 .只有条码被损伤时,条码才不会阅读,可以通过手工输入的方式确认试剂的批号.◆定标液和质控液1.多数的电化学发光检测项目的试剂和定标液是分开的.每个定标液和质控品的盒中含有一个可以直接使用的条码.多数的定标液是液体的即用型的,不需要任何特殊处理,当定标时,将其放于仪器上即可.2.多数的质控品和少数定标液是干粉的,使用前需要溶解然后转入特定的小瓶中.复溶后的定标液和质控瓶可以储存于特定的塑料小瓶中.3.定标液和质控品有彩色的盖子,以帮助用户的识别.白色/亮棕色的瓶盖分别为定标液/质控品的1浓度;黑色/暗棕色的瓶盖分别代表定标液◆电化学发光反应原理：电化学发光（electro－chemiluminescence，ECL)是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，实际上包括了电化学和化学发光两个过程。
使用全自动免疫组化机的体会
使用全自动免疫组化机的体会免疫组化在病理诊断中起着非常重要的作用。
免疫组化技术在肿瘤分类、诊断、预后判断方面广泛应用。
随着全自动免疫组化机广泛应用，作者把使用了一段时间全自动免疫组化仪后的体会与大家探讨。
本文通过对免疫组化技术的原理的探讨，分析了全自动免疫组化机在应用中注意事项及优点，从而探讨其应对措施。
标签：免疫组化技术；全自动免疫组化染色机免疫组织化学染色技术是病理技术中的一项重要染色方法，固免疫组织化学染色技术在目前病理诊断中起着非常重要的辅助作用，病理医师在很多情况下需要借助免疫组化来明确病变的性质、类型以及累及范围等。
免疫组化技术的应用，为相关肿瘤组织抗原的治疗以及预后供了重要的依据。
可是，在当前全自动免疫组化仪广泛应用的同时，也伴随着一些注意事项及优点。
下面从免疫组化染色原理来探讨以下几点注意事项及优点。
1 免疫组化染色技术的原理免疫组化染色技术是通过抗体结合特殊抗原用DAB显色及苏木素复染的染色技术。
这些抗体抗原的相互结合往往是以与这抗体相结合的酶元素来进行显示。
主要是因为没有着色物质的特性，抗原与抗体的结合使得一些有色物质在抗体-抗原相结合的位置进行沉淀。
酶沉淀的物质主要包括蛋白质、多肽、激素、病原体等，用光学显微镜才能看到。
目前使用甲醛固定促使了蛋白的交和凝固，使蛋白质的结构发生了变化，但对抗原决定镞的结构（苯环）不会产生影响。
在使用蛋白酶进行消化后，将抗原决定镞中的一些杂蛋白行清除，从而使其打开交联，在通过使用微波和高压锅等热抗原的修复工，使抗原决定镞发生最大程度的暴露。
从而提升免疫组化染色的敏感性[1]。
2 全自动免疫组化仪染色中注意以下几个问题2.1抗体的浓度，在滴加一抗时的量，一般在100ul（2～3滴）。
2.2组织的前期处理组织固定时间以4～6h为宜，最长不超过24h，过长过短都会对染色结果产生不良影响。
因组织固定时间过长会封闭或破坏组织的抗原活性，而固定时间过短则抗原弥散和组织结构不清晰。