大孔树脂处理方法步骤(精)
大孔吸附树脂方法
大孔吸附树脂方法
大孔吸附树脂方法是一种将大分子物质从溶液中吸附和分离的方法。
它利用大孔吸附树脂的特性，通过吸附作用将目标分子从溶液中富集，然后通过洗脱将目标分子从吸附树脂上解吸出来。
大孔吸附树脂通常具有高表面积和大孔隙体积，可以容纳较大的目标分子。
其工作原理是基于吸附剂和目标分子之间的相互作用力，如静电吸附、范德华力、离子交换等。
吸附树脂可以选择性地吸附目标物质，而不吸附其他成分，从而实现目标分子的分离纯化。
大孔吸附树脂方法的步骤一般包括：
1. 树脂预处理：将吸附树脂浸泡或冲洗以去除杂质和残余物质。
2. 样品预处理：对待测样品进行预处理，如去除颗粒、蛋白质沉淀等。
3. 吸附：将样品与吸附树脂接触，使目标分子与吸附树脂发生吸附作用，并将其富集在树脂上。
4. 洗脱：通过改变洗脱液的条件，如改变温度、pH、离子浓度等，使目标分子从吸附树脂上解吸出来。
5. 纯化收集：将洗脱液中的目标分子收集下来，以获得纯净的目标物。
大孔吸附树脂方法在生物制药、食品、环境等领域中具有广泛的应用。
它可以用于分离和纯化蛋白质、抗体、病毒颗粒、多肽、核酸等大分子物质。
大孔吸附树脂操作步骤
大孔吸附树脂操作步骤1树脂的预处理用树脂体积0.4-0.5倍的甲醇（或乙醇，下同）浸泡树脂24小时，使液面高于树脂层约1cm.（初次使用需预处理）取一定量树脂湿法装柱，加入甲醇在柱上以2BV的流速清洗，洗至流出液与等量水混合后不呈白色浑浊位置，然后改用大量水洗至无醇味，且水溶液澄清即可使用。
（树脂连续运行不必再进行预处理，停运时间过长，应考虑重新预处理。
停运前要充分解吸，洗净，并以大于10%食盐溶液浸泡，以避免细菌在树脂中繁殖）预处理方法：用2BV的5%HCL溶液，以4~6BV/h的流速通过树脂层，并浸泡2~4小时，而后用水以同样流速洗至出水pH中性。
用2BV的2%NaOH溶液，以4~6BV/h 的流速通过树脂层，并浸泡2~4小时，而后用水以同样流速洗至出水pH中性。
2药液的上柱吸附样品应为澄清溶液（有颗粒可过滤），将树脂中的水尽量排尽，即可加入样品溶液。
一边放出原来的溶剂，一边加入样品溶液，流速应适当。
3树脂的解吸待样品慢慢滴加完毕后，即可开始洗脱。
先用2BV的水洗，然后用30%的甲醇洗脱，最后用90%的甲醇洗脱，收集90%的甲醇洗脱液，用HPLC检测。
4树脂的再生先用95%甲醇将其吸至无色，再用大量水洗去乙醇，即可再次使用。
树脂强化再生方法：当树脂使用一定周期后，吸附能力降低或受污染严重时需强化再生，其方法是在容器内加入高于树脂层10cm的3-5%盐酸溶液浸泡2-4小时，然后进行淋洗过柱。
继用3-4BV同浓度的盐酸溶液过柱，然后用纯水洗至接近中性；再用3-5%的氢氧化钠溶液浸泡4小时。
最后淋洗过柱，用同浓度的3-4BV氢氧化钠溶液过柱，最后用纯水清洗至pH值为中性，备用。
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大孔吸附树脂洗脱操作方法
大孔吸附树脂洗脱操作方法
大孔吸附树脂是一种具有高孔隙体积和表面积的吸附材料，常用于固体相和液相的分离和纯化过程中。
以下是大孔吸附树脂的洗脱操作方法的一般步骤：
1. 准备工作：将需要用到的仪器设备进行消毒和清洁，并确认所需洗脱溶液的配制。
2. 树脂固定：将干燥的大孔吸附树脂加入洗脱器中，并通过调节进样阀控制树脂床层的高度。
3. 预洗：使用一定体积的洗脱溶液进行预洗，去除树脂中的杂质和预先吸附的化合物。
预洗过程可以使用连续洗脱或者批量洗脱的方式进行。
4. 洗脱：将洗脱溶液通过吸附树脂床层，使其中的目标化合物逐渐从树脂中洗脱出来。
洗脱溶液的特性和组成应根据所需的纯化目标和树脂的吸附性质进行选择。
5. 收集洗脱液：将洗脱液收集在合适的容器中，用于后续的分析或者处理。
如果洗脱液中还有其他成分需要分离，可以使用进一步的纯化方法进行处理。
6. 冲洗：在洗脱过程中，树脂可能会吸附一些洗脱溶液中的杂质或者有机化合物。
为了彻底去除这些吸附物，可以使用冲洗液对树脂进行冲洗，从而达到尽量
高的纯度。
7. 再生：当树脂吸附能力下降时，需要进行再生操作。
具体方法根据树脂性质和实际情况而定，可以使用酸、碱、有机溶剂等进行再生。
根据具体应用的不同，大孔吸附树脂的洗脱操作方法可能会有所差异，上述步骤仅供参考。
在操作过程中应根据实际情况进行调整和优化，确保达到所需的分离和纯化效果。
大孔树脂使用方法
大孔树脂使用方法一、大孔吸附树脂的预处理：大孔树脂在试验中使用时间较长，必须保证不受霉菌污染。
新购树脂一般用氯化钠及硫酸钠处理过，但树脂内部存在未聚合的单体残存的致孔剂、引发剂、分散剂等用前必须除掉。
预处理的流程简述如下：（1）以0.5BV的乙醇浸泡树脂24h （1BV为1个树脂床体积）（2）用2BV 的乙醇以2BV/h流速通过树脂柱，并浸泡4-5 h（3）再用水以同样流速洗净（4）用乙醇洗至流出液加水不呈白色混浊为止。
（5）用2BV的5%HCL 溶液以4-6 BV/h 的流速通过树脂层。
并浸泡树脂2-4h 。
而后用水以同样流速洗至出水pH 中性（6）用2BV 的2%NaOH 溶液以4-6 BV/h的流速通过树脂层并浸泡树脂2-4h 而后用水以同样流速洗至出水pH 中性。
也可采用下列程序：在洁净的分离柱内，放入已去除外来杂质，体积恒定的大孔吸附树脂加入相当于树脂体积0.4-0.5倍的乙醇（或甲醇）浸泡24 h ，然后用树脂体积的2-3倍的乙醇（或甲醇）与水交替反复洗脱交替洗脱2-3次，至最终以水洗脱后，保持分离使用前的状态。
醇洗脱液加水不显混浊。
也可用电导率、荧光和紫外吸收等作为前处理的标准。
二、大孔树脂的使用大孔树脂是大孔径的高分子分离材料，中草药有效成分在大孔树脂上的吸附是大孔树脂与有效成分形成以范德华力和氢键为主的一分子间作用力的结果。
大孔树脂依据其聚合物的单体组成不同，可以分成非极性和极性两大类。
非极性吸附树脂适合从极性溶液中（如水溶液）中吸附非极性物质。
中等极性树脂可从极性溶液中吸附非极性物质，还能从非极性溶液中吸附极性物质。
大孔树脂的孔径和比表面积是影响大孔树脂对物质的吸附的主要因素。
大孔树脂比表面积越大，单位质量大孔树脂吸附的作用面积越大，单位质量大孔树脂吸附有效成分就越大。
而大孔树脂的比表面积还包括内孔网的面积。
树脂孔径过小有效成分分子不能进入树脂内部，只能在树脂外表面吸附，相应的比表面积就比较小。
大孔树脂处理方法步骤
大孔树脂处理方法步骤：1、新树脂用95%乙醇冲至无浑浊（树脂流出液与水混合后，不浑浊）2、蒸馏水冲至无醇味（大概5倍柱体积）3、5-10 %HCL2-3倍柱体积浸泡4、蒸馏水冲至流出液pH=75、5-10 %NaOH2-3倍柱体积浸泡6、蒸馏水冲至流出液pH=7 备用而长时间不用保存，待活化后，再用95%乙醇浸泡，即可。
作者：塔矢亮预处理：水淘洗后上柱----95%乙醇洗脱----洗脱直至一倍醇加四倍水不产生浑浊------水洗脱（醇水之间梯度过渡，否则产生大量气泡）-------洗脱到无醇味------2%-5%盐酸洗脱------浸泡3-4小时-------水洗至中性-------2%-5%氢氧化钠溶液洗脱------浸泡3-4小时------水洗至中性-------2%-5%盐酸洗脱------浸泡3-4小时-------水洗至中性------2%-5%氢氧化钠溶液洗脱------浸泡3-4小时------水洗至中性-------2%-5%盐酸洗脱------浸泡3-4小时-------水洗至中性------2%-5%氢氧化钠溶液洗脱------浸泡3-4小时------水洗至中性-------过渡到95%乙醇洗脱------过渡到水------水洗至无醇味。
作者：塔矢亮大孔吸附树脂使用注意事项①运输及贮藏过程中应保持5～40℃环境中，避免过热过冷。
注意不使树脂变干，以免孔结构发生变化。
②树脂装填在吸附柱中使用，装填前应对设备管道进行清洗，以防有害物质对树脂产生污染。
③料液通过树脂床前应除杂、澄清、滤过，以免污染树脂。
④树脂停运时间过长，停运前要充分解析，洗净，并以大于10%食盐溶液浸泡，以避免细菌在树脂中繁殖。
大孔吸附树脂异常现象及处理方法①树脂被微生物污染后，可重新进行预处理或用小于0.5%次氯酸钠溶液浸泡，并用水洗净。
②失水变干时，可用乙醇浸泡并水洗。
③树脂遭铁污染时，可用4～10%HCl溶液浸泡处理④树脂受到有机物污染时，可用1%NaOH、10%NaCl混合盐碱溶液浸泡处理。
大孔树脂分离纯化法
大孔树脂分离纯化法1 大孔树脂分离纯化法的概述大孔树脂分离纯化法是一种常用的生物制品纯化方法，通常用于分离纯化较大的分子，如蛋白质的亚单位。
大孔树脂是指孔隙直径较大的树脂，具有较高的吸附能力和高速流动的性能。
它们的优点在于可以降低蛋白质在溶液中的浓度，通过淡化，从而使蛋白质更容易被分离纯化。
2 大孔树脂的种类大孔树脂分为两类：亲水性大孔树脂和疏水性大孔树脂。
分选的大孔树脂使用亲水性或疏水性，以达到分离纯化蛋白质的目的。
亲水性大孔树脂的凝胶通常由不同程度的交联聚乙烯醇或甲基纤维素制成。
3 大孔树脂的原理大孔树脂分离纯化的原理是分子分离剂析出的原理。
进入大孔中的分子的体积把凝胶分子打开，那么分子就不可能穿过凝胶分子的孔隙，它仅可以附着在孔壁上相应的树脂颗粒越大，其吸附位置越靠近液面上减小，从而减小了溶液中蛋白质的浓度。
通过这种方式，蛋白质就可以被准确地分离出来，并得到纯化。
4 大孔树脂分离技术的应用和限制大孔树脂分离技术具有许多应用程序，例如血液制品的分离，酶和蛋白质的纯化，病毒素的制备等。
然而，该技术也有一些局限性，分子分离种类必须是与凝胶相兼容的。
大孔树脂可能对分子的生理活性造成影响，因此应该在小规模试验中确定其可接受的影响。
不能直接使用悬浮负载大孔树脂进行层析，因为这会影响凝胶颗粒的物理状态和生理活性。
5 大孔树脂层析的步骤大孔树脂纯化的标准程序是由几个步骤组成的，每个步骤都要严格控制。
5.1 前处理和加载原料在介质中使用已准备好的样品，真正的前处理是通过对样品进行离心来去除大颗粒物，过滤残留物等。
5.2 细胞破碎和淀粉样品的制备涉及到高浓度样品的制备，通常在样品中加入盐并界定pH，然后通过超声处理或疏液机进行细胞压碎。
5.3 层析操作将大孔树脂充满柱子，在其上通过加载样品进行净化。
5.4 层析后的处理在层析完成后，确定分离的分母，并分离需要的组分。
6 大孔树脂分离纯化法的未来发展大孔树脂分离纯化法目前已成为生物制剂纯化的一种基础方法，其纯化效果和稳定性已得到广泛认可。
大孔树脂处理方法
1）树脂预处理方法：如果树脂出厂时已经过深度处理，一般可直接使用，但树脂在储存、运输过程中有可能可能造成污染，为慎重起见，最好再行预处理。
预处理方法：树脂装柱时先水洗去细小树脂及破碎树脂。
然后在柱内加入高于树脂层10CM的乙醇浸泡4小时，放出浸液，至洗涤液在试管中加水稀释不浑浊并且洗脱液用紫外光谱扫描不得检出吸收峰为止。
再用水洗涤至乙醇含量小于1%，即可使用。
树脂前处理合格评价标准：（A）用三倍量乙醇洗脱树脂柱，洗脱液加等量水不应显浑浊。
（B）洗脱液用紫外光谱扫描不得检出吸收峰。
（2）树脂装柱后要采用逆流灌注法排气，将树脂中气体排出，否则在使用中由于气阻影响吸附。
同时在使用中保持液位，以免空气进入。
（3）建议操作条件步骤流速流量备注填充装柱湿法装柱，树脂装填高度3米。
逆流洗柱水洗除去小粒子有破碎树脂。
前处理1-5BV/h 3BV 用乙醇等进行予处理。
水洗脱1-5BV/h 3BV 必要时根据吸附剂的PH值使用缓冲溶液吸附1-4BV/h 根据吸附量应在吸附容量以下。
PH=5-8，温度<50度。
上柱药液加入NaCl有利于提高吸附容量水洗2-3BV/h 0.5-1BV 将粘附在树脂上的杂质洗出。
解吸0.5-3BV/h 2-3BV 乙醇、丙酮等的（含水）溶液溶液。
温度升高有利于解吸再生0.5-3BV/h 3-4BV 多次应用乙醇、丙酮、碱+乙醇等溶剂水洗2-3BV/h 3-4BV 碱再生后加入酸中和备注：具体操作应根据工艺条件调整，BV：柱床体积（4）树脂的强化再生方法：树脂使用几个周期后，吸附能力下降，可用适量5%的NaCl溶液处理一次。
当树脂受污染严重吸附能力降低较大时需强化再生。
其方法是在容器内加入高于树脂层10cm的2%-3%盐酸溶液浸泡2-4小时，然后用3倍于树脂体积的盐酸溶液通柱，并用净水洗至接近中性；继用5%的氢氧化钠溶液浸洗2-4小时，并同上法用3倍于树脂体积的同浓度的氢氧化钠溶液通柱，最后再用净水清洗至PH值为中性，再用2-3倍树脂体积的乙醇洗柱，然后用纯水洗去乙醇，即可投入使用。
大孔吸附树脂的预处理
大孔吸附树脂的预处理
大孔吸附树脂是一种常用于生物制药和食品工业中的材料，用于分离
和纯化目标分子。
在使用大孔吸附树脂之前，需要进行预处理，以确
保其良好的性能和稳定性。
预处理的第一步是将大孔吸附树脂放入缓冲液中进行洗涤。
这个步骤
旨在去除树脂表面的杂质和未反应的试剂。
缓冲液通常是一种pH值
为7.0-8.5的缓冲溶液，例如Tris-HCl或Phosphate Buffered Saline（PBS）。
在洗涤过程中，可以使用搅拌器或振荡器来帮助混合。
接下来，需要对大孔吸附树脂进行消毒。
消毒可以通过浸泡在70％乙醇中或使用紫外线灯等方法来实现。
消毒有助于去除可能存在的微生物，并确保树脂不会被污染。
最后，在进行实验之前，需要对大孔吸附树脂进行平衡操作。
这个步
骤旨在将树脂与实验所需的缓冲液达到平衡状态。
平衡操作通常需要
将树脂放入缓冲液中，并在恒温下搅拌一段时间。
平衡时间的长短取
决于树脂的类型和实验要求。
总之，大孔吸附树脂的预处理包括洗涤、消毒和平衡三个步骤。
这些
步骤可以确保树脂表面没有杂质和微生物，并且与实验所需的缓冲液达到平衡状态，从而保证实验的准确性和稳定性。
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大孔树脂处理方法步骤：
1、新树脂用95%乙醇冲至无浑浊（树脂流出液与水混合后，不浑浊）
2、蒸馏水冲至无醇味（大概5倍柱体积）
3、5-10 %HCL2-3倍柱体积浸泡
4、蒸馏水冲至流出液pH=7
5、5-10 %NaOH2-3倍柱体积浸泡
6、蒸馏水冲至流出液pH=7 备用
而长时间不用保存，待活化后，再用95%乙醇浸泡，即可。
预处理：水淘洗后上柱----95%乙醇洗脱----洗脱直至一倍醇加四倍水不产生浑浊------水洗脱（醇水之间梯度过渡，否则产生大量气泡）-------洗脱到无醇味------2%-5%盐酸洗脱------浸泡3-4小时-------水洗至中性-------2%-5%氢氧化钠溶液洗脱------浸泡3-4小时------水洗至中性-------2%-5%盐酸洗脱------浸泡3-4小时-------水洗至中性------2%-5%氢氧化钠溶液洗脱
------浸泡3-4小时------水洗至中性-------2%-5%盐酸洗脱------浸泡3-4
小时-------水洗至中性------2%-5%氢氧化钠溶液洗脱------浸泡3-4小时
------水洗至中性-------过渡到95%乙醇洗脱------过渡到水------水洗至无醇味。
大孔吸附树脂使用注意事项
①运输及贮藏过程中应保持5～40℃环境中，避免过热过冷。
注意不使树脂变干，以免孔结构发生变化。
②树脂装填在吸附柱中使用，装填前应对设备管道进行清洗，以防有害物质对树脂产生污染。
③料液通过树脂床前应除杂、澄清、滤过，以免污染树脂。
④树脂停运时间过长，停运前要充分解析，洗净，并以大于10%食盐溶液浸泡，以避免细菌在树脂中繁殖。
大孔吸附树脂异常现象及处理方法
①树脂被微生物污染后，可重新进行预处理或用小于0.5%次氯酸钠溶液浸泡，并用水洗净。
②失水变干时，可用乙醇浸泡并水洗。
③树脂遭铁污染时，可用4～10%HCl溶液浸泡处理
④树脂受到有机物污染时，可用1%NaOH、10%NaCl混合盐碱溶液浸泡处理。
大孔吸附树脂的再生
每次使用过的大孔吸附树脂均需进行再生处理。
其再生的方法为：将需要再生的大孔吸附树脂以10倍量95%乙醇洗脱，以纯水冲洗至无醇味，再以10倍量2%NaOH 水溶液洗脱，用纯水冲洗至流出液呈中性，最后用10倍量95%乙醇洗脱并浸泡，备用。
大孔树脂的分离
举个例子：
4kg药材提取液，平行分成4份，每份溶液相当于1kg药材，分别在相同的条件下浓缩至0.5g生药材/ml、1.0g生药材/ml、1.5g生药材/ml、2.0g生药材/ml，再取4份相同的处理好的树脂（树脂的量要先饱和吸附量的实验，确定树脂与药材的比例关系），将上述溶液分别倒入其中，吸附相同的时间，过滤，测定滤液中的指标成分的含量，含量高则表明吸附效果差。
作者：caidzh
应该具体问题具体分析，但总的原则是，让大孔吸附树脂能够将要纯化的物质完全吸附而不过载。
除无机矿物质外，其它中药有效部位均可不同程度的被树脂吸附纯化。
不同结构的大孔吸附树脂对亲水性酚类衍生物的吸附作用研究表明不同类型大孔吸附树脂均能从极稀水溶液中富集微量亲水性酚类衍生物，且易洗脱，吸附作用随吸附物质的结构不同而有所不同，同类吸附物质在各种树脂上的吸附容量均与其极性水溶性有关。
用D型非极性树脂提取了绞股蓝皂甙，总皂甙收率在2.15%左右。
用D1300大孔树脂精制“右归煎液”，其干浸膏得率在4～5%之间，所得干浸膏不易吸潮，贮藏方便，其吸附回收率以5-羟甲基糖醛计，为83.3%。
用D-101
型非极性树脂提取了甜菊总甙，粗品收率8%左右，精品收率在3%左右。
用大孔吸附树脂提取精制三七总皂甙，所得产品纯度高，质量稳定，成本低。
将大孔吸附树脂用于银杏叶的提取，提取物中银杏黄酮含量稳定在26%以上。
江苏色可赛思树脂有限公司整理用大孔吸附树脂分离出的川芎总提物中川芎嗪和阿魏酸的含量约为25%～29%，收率为0.6%。
另外大孔吸附树脂还可用于含量测定前样品的预分离。
作者：hailaguai
黄酮类的粗提物是水溶上柱好，还是醇溶后上柱好？
作者：a83875785
接楼上的问题：
由于黄酮类物质的溶解性质千差万别，有的极性很大，有的极性却很小。
但是一般情况下，黄酮类物质的粗提物是水溶上柱好，因为大孔树脂的上柱顺序是从极性由大到小，洗脱溶剂一般依次为水、10%乙醇、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇、90乙醇等。
然后再依照实际情况上其他柱进行继续分离过程。