血清学试验
梅毒螺旋体血清学试验常用方法
梅毒螺旋体血清学试验常用方法标题：深度解析梅毒螺旋体血清学试验常用方法梅毒螺旋体血清学试验是检测梅毒感染的常用方法之一，其结果对于梅毒的诊断有重要意义。
本文将深度解析梅毒螺旋体血清学试验的常用方法，包括其原理、操作流程、结果解读以及临床应用，并对梅毒螺旋体血清学试验的意义进行探讨。
1.梅毒螺旋体血清学试验的原理梅毒螺旋体血清学试验是通过检测患者血清中的抗梅毒螺旋体抗体来判断是否感染了梅毒。
常用的方法包括不同类型的血清学试验，如血浆凝集试验（RPR）、螺旋体血清凝集素试验（TPPA）和梅毒血清酶免疫吸附试验（EIA）。
这些方法可以检测患者的血清中是否含有特异性的抗梅毒螺旋体抗体，从而进行梅毒的诊断。
2.操作流程及常用方法梅毒螺旋体血清学试验的操作流程包括标本采集、标本处理、试剂配置、反应操作等步骤。
常用的方法包括RPR、TPPA和EIA。
RPR是一种快速筛查试验，可以在诊断初期进行使用，但其结果需要进一步确认。
TPPA是一种高度特异性的确认试验，可以用来确认疑似梅毒感染的患者。
EIA是一种定量检测方法，可以检测血清中特异性的抗体水平，有助于判断患者的感染程度。
3.结果解读及临床意义梅毒螺旋体血清学试验的结果需要进行准确解读。
阴性结果可以排除梅毒感染的可能，但也有假阴性的风险；阳性结果需要结合临床症状、病史及其他检测结果进行综合分析。
对于梅毒感染的患者，早期诊断和治疗至关重要，可以避免并发症的发生，同时也有助于阻断梅毒的传播。
4.个人观点和理解在进行梅毒螺旋体血清学试验时，我们需要充分理解不同方法的原理和操作流程，以确保结果的准确性。
梅毒螺旋体血清学试验的结果需要综合分析，结合临床情况进行判断，避免假阳性或假阴性结果的影响。
对于梅毒患者，及时的诊断和治疗对于控制疾病的传播和预防并发症的发生至关重要。
总结梅毒螺旋体血清学试验是诊断梅毒的重要方法之一，其结果对于患者的治疗和预后有重要意义。
通过深度解析梅毒螺旋体血清学试验的常用方法，我们可以更加全面地理解梅毒的诊断和治疗，为临床工作提供重要参考。
血清学试验
•
用已知免疫血清与细菌的可溶性抗原
接触，在有适量电解质存在时，于两液交
界面形成肉眼可见的白色沉淀环，来指示 抗原的存在。
抗原、抗体必须澄清
Ag
抗体比重大，可形成清晰的界面
Ab
• （三）荚膜肿胀试验
•
1.原理
•
用荚膜免疫血清（含抗体）与检材中细菌的荚膜抗原特异性
结合形成复合物，使荚膜呈肿胀现象。
•
2.方法
• （四）制动试验 • 原理 将特异性抗血清与相应运动活泼的细菌
悬液混合，则抗鞭毛抗体与鞭毛抗原结合，使 鞭毛强直、相互粘着而失去动力，细菌运动停 止，从而证明相应细菌的存在。 • 方法 将待检标本或增菌培养液1滴置于玻片 上，用显微镜观察细菌运动情况。再于待检标 本上加1滴适当稀释的抗血清，混匀，作悬滴 镜检。 • 结果 若滴加抗血清3～5分钟内，细菌运动停 止，菌体凝集成块为制动试验阳性；反之，滴 加抗血清后，细菌运动无改变为制动试验阴性。
•
（1）处理标本
•
标本用蒸馏水洗涤，接种于小鼠皮下，次日抽取皮下渗出液
（2）取洁净玻片一张，两侧各加待测 菌1～2接种环，于一侧加抗血清，另一 侧加正常兔血清，混匀；再于两侧各加 1％美蓝水溶液，加盖玻片，湿盒内室 温5～10分钟。
标本
（3）结果 阳性：试验侧为蓝色菌体周围可见界限清晰、厚薄不等的无 色环状物。对照侧无此现象。 阴性：试验侧与对照侧均不产生无色环状物为阴性。
• 原理
• （二）固相酶联免疫试验（ELISA）
• 1.基本原理 • ⑴使抗原和抗体结合到某种固相载体表面，并保持其
免疫活性。 • ⑵使抗原或抗体与某种酶联结成酶标抗原或抗体，这
种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活 性。 • ⑶在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原） 和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗 原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的 抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载 体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加 如酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产 物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜 色反应的深浅进行定性或定量分析。
实验七 血清学试验
④结果判定 判定结果时用“+”表示反应的强度。 判定结果时用“+”表示反应的强度 表示反应的强度。 液体完全透明， ﹟：液体完全透明，菌体完全被凝集呈伞状沉于 管底，振荡时，沉淀物呈片状、 管底，振荡时，沉淀物呈片状、块状或颗粒状 100％的菌体被凝集）。 （即100％的菌体被凝集）。 +++：液体略呈混浊， +++：液体略呈混浊，菌体大部分被凝集沉于管 振荡时情况如上（75％菌体被凝集）。 底，振荡时情况如上（75％菌体被凝集）。 ++：液体不甚透明，管底有明显的凝集沉淀，振 ++：液体不甚透明，管底有明显的凝集沉淀， 荡时有块状或小片絮状物（50％菌体被凝集）。 荡时有块状或小片絮状物（50％菌体被凝集）。 +：液体透明度不明显或不透明，有不甚显著的 液体透明度不明显或不透明， 沉淀或仅有沉淀的痕迹（25％菌体被凝集）。 沉淀或仅有沉淀的痕迹（25％菌体被凝集）。 液体不透明，管底无凝集， －：液体不透明，管底无凝集，有时管底可见有 一部分沉淀，但振荡后立即散开呈均匀混匀。 一部分沉淀，但振荡后立即散开呈均匀混匀。
2、琼脂扩散试验 称取1g琼脂粉 加至100ml 琼脂粉， ①琼脂板制备 称取1g琼脂粉，加至100ml 0.5% 石炭酸生理盐水中，煮沸使之溶解。 石炭酸生理盐水中，煮沸使之溶解。待温度降 55℃左右时浇玻板，厚约2 3mm左右 左右。 至55℃左右时浇玻板，厚约2～3mm左右。 在琼脂凝胶上打梅花孔，孔径为2mm， ②打孔 在琼脂凝胶上打梅花孔，孔径为2mm， 中间孔和周围孔间的距离大约为3mm。 中间孔和周围孔间的距离大约为3mm。 中间孔加炭疽沉淀血清， ③加样 中间孔加炭疽沉淀血清，周围孔中分别 加，炭疽沉淀抗原、待检抗原及盐水。 炭疽沉淀抗原、待检抗原及盐水。 将琼脂凝胶板放置湿盒中， 37℃ ④作用 将琼脂凝胶板放置湿盒中，于37℃扩散 24～72h，每天观察结果，观察三天。 24～72h，每天观察结果，观察三天。 抗原抗体扩散时， ⑤结果观察 抗原抗体扩散时，在两孔间比例最合 适的位置出现白色沉淀线， 适的位置出现白色沉淀线，出现白色沉淀线即 为反应阳性，不出现白色沉淀线为反应阴性。 为反应阳性，不出现白色沉淀线为反应阴性。
免疫检验考试辅导：血清学试验的特点
抗原抗体的特异性结合是指抗原分子上的抗原决定簇和抗体分子可变区结合的特异性，是由两者之间空间结构互补决定的。
抗原与相应抗体的结合具有高度的特异性，主要依靠抗原分子上的抗原决定簇和抗体末端可变区的氨基酸排列和立体构型，只有抗原决定簇的立体构型和抗体分子的立体构型完全吻合，才能发生反应。
如抗新城疫病毒的抗体只能与新城疫病毒结合，而不能与其他病毒结合。
但较大分子的蛋白质常含有多种抗原决定簇，如果两种不同的抗原之间含有部分共同的抗原决定簇，则发生交叉反应。
如肠炎沙门氏菌的抗血清能凝集鼠伤寒沙门氏菌。
一般来说亲缘关系越近，交叉反应的程度越高。
根据抗原抗体反应高度特异性的特点，在疾病诊断中可用抗原、抗体任何一方作为已知条件来检测另一未知方。
（二）敏感性
抗原抗体的结合还具有高度敏感性的特点，不仅可检测定性，还可以定量检测微量、极微量的抗原或抗体，其敏感度大大超过当前所应用的化学分析方法。
血清学试验的敏感性视其种类而异（表11－1）。
表11－1 血清学试验敏感性比较
测定方法
敏感性（每升）
双向免疫扩散试验
＜1mg
火箭电泳
＜0.5mg
对流电泳
＜0.1mg
免疫电泳
＜5～10mg
凝集试验
1μg
血凝抑制试验
0.1μg
补体结合试验
0.1μg
放射免疫分析法
＜1pg
酶联免疫吸附试验＜1ng
定量免疫荧光分析＜1pg
1 2 下页。
第九章血清学试验
第九章血清学试验§9-1血清学试验概述一、血清学试验的概念概念：抗原抗体反应是指抗原与相应的抗体之间发生的特异性结合反应。
因抗体主要存在于血清中，所以将体外发生的抗原抗体结合反应称为血清学反应或血清学试验。
在体内发生的抗原抗体反应是体液免疫应答的效应作用。
二、血清学试验的特点（一）特异性和交叉性（二）敏感性（三）可逆性（四）反应的二阶段性（五）最适比例与带现象（六）用已知测未知三、影响血清学试验的因素（一）电解质常用0.85%～0.9%（人、畜）或8%～10%（禽）的氯化钠或各种缓冲液（免疫标记技术）作为抗原和抗体的稀释液或反应液。
（二）温度在一定温度范围内，温度越高，加速抗原抗体结合和反应现象的出现。
（三）酸碱度血清学试验要求在一定的pH下进行，常用的pH值为6～8，（四）振荡适当的机械振荡能加速抗原抗体的结合反应（五）杂质和异物每批血清学试验都应设阳性对照和阴性对照试验。
四、血清学试验的应用及发展趋向（一）血清学试验的应用传染病、寄生虫病、肿瘤、自身免疫病、变态反应性疾病的确诊。
在动物疫病的群体检疫、疫苗免疫效果监测和流行病学调查。
生物活性物质的超微定量、物种及微生物鉴定和分型等方面。
基因分离，克隆筛选，表达产物的定性、定量分析和纯化等，已经成为现代分子生物学研究的重要手段。
（二）血清学试验的发展趋向反应的微量化和自动化方法的标准化和试剂的商品化技术的敏感特异和精密化检测技术的系列化方法简便快速。
§9-2凝集试验一、凝集试验的概念凝集试验：细菌、红细胞等颗粒性抗原，或吸附在红细胞、乳胶等颗粒性载体表面的可溶性抗原，与相应抗体结合后，在有适量电解质存在下，经过一定时间，复合物互相凝聚形成肉眼可见的凝集团块，称为凝集试验（Agglutination test）。
参与凝集试验的抗原称凝集原，抗体称凝集素。
二、凝集试验的类型（一）直接凝集试验(Direct agglutination test)颗粒性抗原与相应抗体直接结合并出现凝集现象的试验称直接凝集试验。
血清学试验
2、胶乳凝集试验
3、协同凝集反应
抗体致敏载体，载体为金黄色葡萄球 菌A蛋白（SPA） SPA具有与IgG的Fc段结合的特性。
第三节 沉淀反应 （precipitation reaction)
可溶性抗原（如细菌的外毒素、内毒素、菌体 裂解液、病毒的可溶性抗原、血清、组织浸出 液等）与相应的抗体结合，在适量电介质存在 下，形成肉眼可见的细微的白色沉淀。
第一节 血清学试验概述
二、特点
特异性与交叉性 敏感性 反应的可逆性 反应的二阶段性 最适比与带现象 用已知测未知
第一节 血清学试验概述
三、影响血清学试验的因素 电解质 温度 酸碱度 震荡 杂质和异物
第一节 血清学试验概述
四、应用及发展趋向
血清学试验在医学和兽医学领域已广泛应用，可 直接或间接从传染病、寄生虫病检出相应的抗原 或抗体。 血清学试验还广泛应用于生物活性物质的超微定 量、物种及微生物鉴定和分型等方面。 血清学试验也用于基因分离，克隆筛选，表达产 物的定性、定量分析和纯化等，已经成为现代分 子生物学研究的重要手段。
酶联免疫吸附试验（简称ELISA ）
将抗原或抗体吸附于固相载体的表面，酶标 记物与相应的抗体或抗原反应后，形成酶标 记抗原抗体复合物，在遇到相应底物时，结 合物上的酶催化底物产生水解、氧化或还原 等反应，从而生成可溶性或不溶性的有色物 质，可用肉眼或酶标测定仪判定结果。颜色 的深浅与相应的抗体或抗原量成正比，因此， 可根据颜色的深浅来定量抗体或抗原。
第三节 沉淀反应 （precipitation reaction)
可溶性抗原+相应抗体 肉眼可见的沉淀
第三节 沉淀反应 沉淀反应 （precipitation reaction)
血清学试验流程
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实验室血清学常用检测方法
常用血清学检测方法介绍一、酶联免疫吸附试验诊断技术目前，该项技术已在兽医学上得到广泛的应用，大多数动物传染病都已经研制成ELISA检测方法。
1、酶联免疫吸附试验的原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。
在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。
用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。
再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。
此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。
2、ELISA的类型根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件，可设计出各种不同类型的检测方法。
用于动物疫病检测的ELISA主要有以下几种类型：①.双抗体夹心法测抗原双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法。
在临床检验中，此法适用于检验各种蛋白质、微生物病原体第二价或二价以上的大分子抗原，但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。
例如猪瘟病毒检测ELISA、禽流感病毒抗原捕获ELISA，就是根据这种原理设计的。
②.双抗原夹心法测抗体反应模式与双抗体夹心法类似。
用特异性抗原进行包被和制备酶结合物，以检测相应的抗体。
与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体。
乙肝HBs的检测常采用本法。
本法关键在于酶标抗原的制备，需要根据抗原结构的不同，寻找合适的标记方法。
此法中受检标本不需稀释，可直接用于测定，因此其敏感度相对高于于间接法。
此外，该方法不受被检动物种属差异的限制。
③.间接法测抗体间接法是检测抗体常用的方法。
其原理为利用酶标记的抗体（抗免疫球蛋白抗体），检测与固相抗原结合的受检抗体（见图1）。
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血清学试验第七章血清学试验微生物以及其他一些抗原性物质进入机体后，能在机体的血清中产生特异性抗体，。
这种抗体与相应的抗原在体外相遇，可以表现出凝聚、沉淀、溶解、补体结合等多种反应，这些反应的试验都是采用免疫血清来进行的，所以称为血清学试验。
现将其原理及其应用作简要介绍。
一、抗原与抗体（一）抗原凡能刺激机体产生特异性抗体，并能与所产生的抗体进行结合发生反应的物质，称为抗原。
1. 抗原的性质（ 1）抗原一般为大分子胶体，相应分子质量在 10万以上。
相对分子质量越大，抗原性越高。
由于大分子胶体物质在机体内停留时间较长，因此能刺激机体产生抗体。
（2）大多数天然抗原都为蛋白质，如细菌、病毒、细菌外毒素、动物血清等，这些蛋白质物质就是具有抗原性的物质。
并非物品有蛋白质物质都具有抗原性，如明胶虽是蛋白质，但不具抗原性。
（3）抗原均具有特异性。
所谓特异性，即一种抗原所产生的抗体，只能与这种抗原结合发生反应。
例如立即杆菌刺激机体所产生的抗体只能与痢疾杆菌发生反应，而不一其他细菌起反应。
这种特异性与抗原的化学结构有关。
（4）异种物质才具有抗原性，即机体对它本身的物质，一般不产生抗体。
异种动物间，种族的亲缘关系越远则抗原性就越强。
2. 抗原的种类（1）完全抗原即具有抗原性的物质，能刺激机体产生抗体，又能在机体外或机体内与相应的抗体结合发生反应。
例如：病毒、细菌、细菌外毒素、蛋白质多糖复合物、动物血清等均为完全抗原。
（2）不完全抗原不能单独刺激机体产生抗体，若与蛋白质结合后，即成为完全抗原。
例如多糖体与类脂体即为不完全抗原或称半抗原。
不完全抗原可与完全抗原所产生的抗体发生特异性结合。
（二）抗体抗体是由于抗原刺激后，在机体内所产生的免疫球蛋白、这种球蛋白在机体的血清或其他体液中出现，它能与相应的抗原结合，发生各种反应。
血清内因受抗原刺激后而产生抗体，这种含有抗体的血清，就叫做免疫血清。
1. 抗体的性质抗体是球蛋白，它与正常球蛋白的理化性质基本相同，但它能与相应抗原发生特异性反应，这是与正常球蛋白惟一的区别。
抗体的分子质量一般较抗原为大，约在15× 10 ～10× 10 之间。
同一种抗原刺激不同的动物所产生的抗体，由于不同动物的球蛋白的分子质量不同，因此所产生抗体的分子质量也不相同。
2. 抗体的种类根据抗体和抗原结合后，是否出现可见反应，可以分为完全抗体和不完全抗体。
（1）完全抗体能够和相应的抗原结合，结合后的反应是可的。
（2）不完全抗体能够和相应的抗原结合，结合后的反应是不可见的。
若将不完全抗体先与抗原结合后，这抗原就不能再与其相应的完全抗体结合。
二、抗原抗体反应及其应用微生物的实验室中，常用已知的病原微生物，以检查病原微生物感染者的血清中有无相应的抗体，或用含有已知抗体的特异免疫血清来鉴定未知的微生物。
抗原抗体反应的试验方法很多，现将常用的分述如下。
（一）凝聚反应将微生物细胞或动物红血球的悬浊液与含有相应特异抗体的血清混合，可以在电解质（ 0.85%NaCL）溶液中发生反应，并出现肉眼可见的凝聚块，这种现象，就叫凝聚反应。
参与反应的微生物细胞或血球等，称为凝集原，免疫血清中的特异抗体，称为凝集素。
1. 试验方法（ 1）玻片法吸取一滴经生理盐水（ 0.85%NaCL）稀释的免疫血清置于玻片上，另加一小滴细菌悬液（用生理盐水制成的菌液）。
使之充分混合，在几分钟内，即可出现凝集现象。
同时以生理盐水代替免疫血清作对照。
（2）试管法在一系列的小试管中，加入等量的、不同稀释度的被检血清，最后一管以生理盐水代替血清，作为对照。
在各试管中，再滴加等量细菌悬液，使均匀混合，置于水浴（52～55℃）保温约4h后，观察结果，而后再置于4℃冰箱中过夜，再观察结果。
以最高稀释度血清管发生凝集者，为免疫血清的凝集效价。
凝集效价越高，则说明抗体含量越多。
2. 试验种类（1）直接凝集反应利用抗原与抗体两者直接结合，使它们产生凝集反应。
例如细菌、红血球等与其相应的抗体血清结合后嗣素出现的反应即凝集反应。
（2）间接凝集反应并不是抗原与抗体两者直接发生反应，而是先将抗原物质吸附于一种颗粒状物体表面，然后再与相应的抗体发生凝集反应。
例如可溶性抗原和病毒等一些极为微小的抗原物质，先使之吸附于一种颗粒状物体的表面，这些颗粒物体有：人的O型红血球，绵羊、家兔等顶物的红血球，或某些惰性颗粒如聚苯乙烯乳胶（ 0.6～0.7nm）、矽酸铝、活性碳颗粒等。
如果血球吸附抗原物质后，这种血球即称为致敏血球与相应的抗体结合后密集棵出现凝集现象。
也可以用抗体先使血球致敏，而后再与相应的抗原发生凝集反应。
用抗原致敏血球以测定待检样品中的抗体，这种试验可称为正向间接血凝试验；如果以抗体致敏血球来测定相应的抗原，这种试验称为反向间接血凝试验。
如果先将游离的抗原与相应的抗体结合，隔一定时间后，再加入致敏的红血球，则不出现凝集现象，这就称为间接血凝抑制试验。
本试验可用以检出和滴定样品中的未知抗原，亦可用来检查间接血凝试验是否为特异性的，如为特异性反应，则可因加入相应的抗原而被抑制。
（二）沉淀反应抗原物质为可溶性时，例如细菌外毒素、菌体裂解液、病毒、动物组织浸出液、动物血清等，与相应的免疫血清混合，在电解质的参与下，即产生可见的沉淀物，这种反应叫做沉淀反应。
参与沉淀反应中的抗原，称为沉淀原，而相应的抗体称为沉淀素。
1. 试验方法（1）沉淀试验将相同稀释度的血清（免疫特异抗体）置于一系列的小试管中，各管中再加入等量不同稀释度的抗原，经混合后，置于37℃或 42～45℃水浴中保温一定时间后，即可出现絮状沉淀现象。
（2）环状试验在直径狭小的沉淀试管中，先加入少量免疫沉淀血清，热闹后沿试管壁滴入一定稀释度的抗原，防止摇动，在室温或在37℃的保温箱中静置片刻后，在抗原与抗体的接触面即有一白色沉淀环出现。
（3）琼脂扩散试验先用生理盐水配置的半固体琼脂倒入培养皿中或玻片上，待凝固后，即在凝固琼脂中央及四周挖孔，在中央孔内滴入沉淀素，四周孔内滴入沉淀原，间隔一定时间后，抗原与抗体在琼脂内扩散相遇即出现沉淀线。
琼脂扩散试验也可在试管内进行。
（4）免疫电泳试验因较大的胶体颗粒和蛋白质分子都带有电菏，在电场里会向一极移动，这种现象称为电泳。
不同的蛋白质，因其颗粒的大小不同以及所带的电荷不同，在同一电场下，它们向一极移动的速度不同，据此，在电泳中就可以把不同的蛋白质分离出来。
例如各种动物血清通过电泳方法分析，就可区分出蛋白质、α球蛋白、β球蛋白、γ球蛋白四种不同的成分。
用电泳方法与免疫学方法结合起来应用，称为免疫电泳。
例如：先将血清或其他蛋白质抗原在琼脂内经过电泳后，再与其抗血清进行扩散沉淀反应。
试验结果可发现在每一电泳区带可能出现一个以上的沉淀线条。
免疫电泳试验可分析出不同的抗原成分，从而借此来鉴定微生物和应用于某些疾病的诊断方面。
（5）对流免疫电泳试验蛋白质在琼脂中电泳时，IgG（是机体血清中的主要球蛋白，一般的病毒抗体和球菌体和球菌抗体属于这一类）带有微弱的电荷，不能抵消电渗作用，故在电泳时向负极移动。
而一般抗原通常带较强的负电荷，因此在抵消电渗作用后，仍向正极移动。
如将抗体置于正极方面，抗原置于负极方面，则电泳时两种成分就会相遇并产生沉淀带。
由于抗原抗体在电场中定向移动，这样就限制了抗原抗体自由扩散的倾向，因而提高了灵敏度并加快了沉淀带出现的时间。
采用本试验方法可比琼脂扩散法的灵敏度提高 10～ 16倍。
有关免疫电泳的应用，由于具体操作上的不同，还有其他多种方法，例如“火箭”免疫电泳、交叉免疫电泳等等。
2. 沉淀反应与凝聚反应的区分沉淀反应与凝集反应相似，因为两者都是抗原微粒在电解质的环境中与抗体结合而产生的反应，区别在于：（1）两者抗原特性的不同，凝集反应的抗原微粒是显微镜下可见的细胞；沉淀反应的抗原则呈胶体状态，并且其微粒的大小在普通显微的可见范围以外。
（2）凝集反应中的抗原的颗粒大，与抗体结合的总面积小，为了不宜太多的抗体参与，因此必须稀释血清中的抗体。
沉淀反应中的抗原颗粒小，结合抗体的总面积大，为防止太多的抗原，因此必须稀释抗原。
（三）溶解作用红菌或红血球与其相应的抗体结合，在电解质的环境中，就可产生凝集现象。
如果抗原和抗体结合后，再加入正常动物的新鲜血清，就出现细菌或红血球被溶解，这种反应就是溶解反应。
在正常动物的血清中起着参与溶解反应的非特异性物质，称为补体。
补体能与任何一对抗原抗体复合物结合，因此，补体是非特异性的物质，它不能单独地与抗体或抗原结合。
（四）补体结合反应有些抗原虽然能与其相应的抗体结合成复合物，并进而同补体结合，但并不出现任何可见现象。
为了判断补体是否与抗原抗体复合物结合，就用红血球（抗原）与其夏管应的溶血素（抗体）作为指示剂以供鉴别。
因此，补体结合反应的试验就有五个成分参与，即抗原、抗体、补体、红血球、溶血素。
试验过程进行中，在试管中先后加入抗原和抗体，随后再加入补体，最后加入溶血素和红血球的混合液（即溶血系统）。
如果出现不溶血现象，即说明补体已与前两种抗原抗体复合物结合，溶血系统就得不到补体，也就不发生溶血作用。
如果出现溶血现象，即说明补体不能与单独的抗体或抗原结合，而只能与溶血系统结合，因而发生溶血，见图5-6。
补体结合反应具有高度的特异性与灵感性，可测定微量的抗原或抗体，但方法比较复杂，可应用于诊断疾病与鉴定微生物等。
（六）免疫荧光抗体法免疫荧光抗体，就是血清学方法结合显微示踪的技术。
用已知抗体去鉴定未知抗原，或已知抗原去鉴定未知抗体，这是血清学方法的基本内容。
在前面已述及关于抗原与抗体结合时可发生可见作为判断抗原与抗体已方式反应的根据。
而在有些情况下，抗原与抗体虽然方式了结合，但是不可见的，例如抗原与抗体是在固定的微生物涂片上或组织内，即使相应的抗原和抗体已方式结合而它们的反应就是不可见的。
如果使抗原或抗体能带上一种颜色，而这种颜色又不影响抗原和抗体结合的特异活性，那么，人么年就可借染色的可见与否来判断抗原与抗体是否发生结合放映。
用什么燃料来标记，经过许多科学家的研究，认为荧光染料只需要极微量，就可以在显微镜下将它们显示出来。
因为人的视觉，对荧光在黑暗的背景衬托下，具有较高的灵感性，并在实践中证明荧光染料不会影响抗原抗体结合反应的特异活性。
因此，近年来在微生物学及免疫学范围内，以广泛地应用了荧光抗体技术。
荧光抗体的方法有直接法、间接法、补体法和特殊染色法等。
1. 直接法将抗原固定在载玻片上，然后用荧光抗体（标记抗体）染色一定时间后，用水冲洗。
如果抗体被相应的抗原结合，则抗体被固定在抗原上，够则即被水冲洗掉。
在荧光显微镜下观察，在抗原部位有荧光激发者，即为阳性；无荧光者，即为阴性。
这是荧光抗体技术中最简单的基本方法，其优、缺点如下：优点：方法较简便，所需时间短。