“创新实验”顺铂和阿霉素的浓度对细胞增殖产生的影响
药物对细胞增殖和信号传导的影响研究
药物对细胞增殖和信号传导的影响研究细胞增殖和信号传导是细胞生物学领域中重要的研究课题，而药物对细胞增殖和信号传导的影响研究则涉及药物对细胞功能的调控和干预。
本文将探讨药物对细胞增殖和信号传导的影响以及研究方法。
一、药物对细胞增殖的影响细胞增殖是细胞在分裂过程中繁殖和增加数量的过程。
药物对细胞增殖的影响可分为促进细胞增殖和抑制细胞增殖两个方面。
1.1 促进细胞增殖的药物某些药物可以通过激活生长因子受体、调节细胞周期等途径来促进细胞增殖。
例如，表皮生长因子（EGF）和纤维母细胞生长因子（FGF）可以通过与受体结合，激活下游信号通路，促进细胞增殖。
此外，维生素D等物质也被发现在细胞增殖中起到促进作用。
1.2 抑制细胞增殖的药物许多抗肿瘤药物可以通过干扰细胞周期、减少DNA合成等途径来抑制细胞增殖。
例如，细胞周期蛋白激酶抑制剂（CDK抑制剂）可影响细胞周期的进程，导致细胞增殖受到抑制。
此外，类抗肿瘤药物如紫杉醇和顺铂等也具有抑制细胞增殖的作用。
二、药物对细胞信号传导的影响细胞信号传导是指细胞内分子之间相互作用、信息传递的过程。
药物对细胞信号传导的影响可以分为激活信号传导和抑制信号传导两个方面。
2.1 激活细胞信号传导的药物某些药物可以模拟内源性信号分子的作用，从而激活细胞信号传导。
例如，β-肾上腺素能受体激动剂可以模拟肾上腺素的作用，激活腺苷酸环化酶，进而促使细胞内二磷酸腺苷酸酸化为环磷酸腺苷酸，从而激活信号传导。
类似地，其他如激素和细胞因子等药物也可以通过激活相应的受体来激活细胞内信号传导通路。
2.2 抑制细胞信号传导的药物一些药物可以通过阻断信号传导通路中的关键分子或抑制下游效应蛋白的活性来抑制细胞信号传导。
例如，丙戊酸可以通过抑制α-氨基-3-羧酸受体的活性，从而阻断谷氨酸能神经元的兴奋性信号传导。
此外，激酶抑制剂等药物也可以通过干扰信号传导通路来抑制细胞信号传导。
三、药物对细胞增殖和信号传导的研究方法为深入研究药物对细胞增殖和信号传导的影响，科学家们采用了多种方法。
细胞增殖实验报告
细胞增殖实验报告细胞增殖实验报告细胞增殖是生物学中一个重要的研究领域，对于了解生命的起源、发展和疾病的发生机制具有重要意义。
本文将介绍一项关于细胞增殖的实验，旨在探究细胞增殖的规律和影响因素。
实验设计：本次实验选择了人类肺癌细胞株作为研究对象，通过培养细胞，观察细胞在不同条件下的增殖情况，并分析影响细胞增殖的因素。
实验步骤：1. 细胞培养：将人类肺癌细胞株接种于含有适宜培养基和培养液的培养皿中，放置于恒温培养箱中，温度为37℃，湿度为95%，二氧化碳浓度为5%。
2. 细胞计数：每隔一定时间，取出一小部分细胞悬液，使用显微镜和细胞计数板对细胞进行计数。
记录细胞数量并计算平均值。
3. 细胞增殖曲线绘制：根据细胞计数结果，绘制细胞增殖曲线，以时间为横轴，细胞数量为纵轴，观察细胞增殖的动态变化。
实验结果：经过一段时间的培养，我们观察到细胞数量逐渐增加，呈现出指数增长的趋势。
细胞增殖曲线显示，细胞数量在初始阶段增长较缓慢，随着时间的推移，增长速度逐渐加快，直至达到饱和状态。
讨论：1. 生长曲线特征：细胞增殖曲线呈现出一定的特征，即初始阶段增长缓慢，然后迅速加速，最后趋于平缓。
这是由于细胞在培养基中适应环境，增殖能力逐渐增强，细胞数量也随之增加。
当细胞数量达到一定程度时，培养基中的营养物质和空间有限，细胞增殖速度减缓，最终停止增殖。
2. 影响因素：细胞增殖受到多种因素的影响，如培养基中的营养物质浓度、pH 值、温度、湿度等。
其中，营养物质的供应是细胞增殖的基础，适宜的pH值和温度可以提供良好的生存环境，湿度对于细胞的生长也有一定的影响。
3. 应用前景：细胞增殖实验可以为药物筛选、疾病治疗和组织工程等领域提供重要参考。
通过观察细胞在不同条件下的增殖情况，可以评估药物对细胞增殖的影响，为新药的开发提供依据。
此外，细胞增殖实验还可以为疾病的治疗方案提供参考，例如癌症治疗中的细胞毒性药物筛选和剂量确定。
结论：通过本次实验，我们成功观察到了人类肺癌细胞在培养基中的增殖情况，并绘制了细胞增殖曲线。
抗癌药物对细胞株增殖的影响及凋亡诱导作用
文章编号:1004-616X(2002)03-0200-02#短篇报道#抗癌药物对细胞株增殖的影响及凋亡诱导作用¹艾 军,何兰欣,梁索源,任金荣(河北医科大学第四医院肿瘤所,河北 石家庄 050011)=摘要>目的:了解抗癌药物对细胞株增长的影响及凋亡诱导作用。
方法:药物与细胞株共同孵育不同时间后,应用四唑盐(M T T )比色法及流式细胞仪(F CM )分别测定细胞增长抑制率(CI)及细胞凋亡指数(APO I)。
结果:抗癌药物组CI 值及A POI 值与对照组相比均有显著差异(P <0.05)。
经相关分析得出,APO I 与CI 呈正相关(r =0.42,P <0.05)。
结论:7种抗癌药物均能明显抑制细胞株增长,并可诱导其发生凋亡。
利用M T T 法及FCM 测定细胞CI 和APO I,有利于化疗方案的设计,指导临床合理用药。
=关键词> 抗肿瘤药;细胞凋亡;流式细胞术;M T T 比色法中图分类号:R735.2,R73-36 文献标识码:A随着分子生物学技术的进展与应用,近年来一些研究表明,多种化疗药物可以诱导肿瘤细胞凋亡[1]。
本研究应用四唑盐(MT T)比色方法及流式细胞术(FCM )分析,探讨临床常用的7种抗癌药物对人胃癌BGC -823细胞增殖抑制和凋亡的诱导作用。
1 材料与方法1.1 抗癌药物 为临床常用的7种抗癌药物,顺铂(DDP,山东齐鲁制药厂)、丝裂霉素(MM C,协和发酵工业株式会社)、5-氟脲嘧啶(5-Fu,上海旭东普药业有限公司)、足叶乙甙(VP -16,中国江苏连云港制药厂)、长春新碱(VCR,广州明兴制药厂)、阿霉素(ADM ,深圳万乐药业有限公司)、阿糖胞苷(Ara -c,北京医科大学实验厂)。
抗癌药物浓度按照参考文献[2]配成所需浓度。
1.2 细胞增殖的检测 人胃癌BGC -823细胞株由北京市肿瘤研究所提供。
参照T ada 测定活细胞的改良MTT [3]法。
不同质量浓度顺铂对宫颈癌+Hela+细胞增殖能力的影响
ＣｈｉｎＪＣｌｉｎＰｈａｒｍａｃｏｌ ６０１ Ｖｏｌ畅３０Ｎｏ畅７Ｊｕｌｙ２０１４（ＳｅｒｉａｌＮｏ畅１７７）不同质量浓度顺铂对宫颈癌Ｈｅｌａ细胞增殖能力的影响ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｃｉｓｐｌａｔｉｎｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｂｉｌｉｔｙｏｆＨｅｌａｃｅｌｌ收稿日期：２０１４－０４－１７修回日期：２０１４－０５－０８基金项目：福建省卫生厅青年基金资助项目（２００８－２－２５）作者简介：陈秀慧（１９７３－），女，主治医师，主要从事妇科肿瘤研究通信作者：陈秀慧ＭＰ：１３７０５９７０８３３Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｉｕｈｕｉ＿ｃｈ＠１２６畅ｃｏｍ陈秀慧，曲军英（福建医科大学附属第一医院妇产科，福州 ３５００００）ＣＨＥＮＸｉｕ－ｈｕｉ，ＱＵＪｕｎ－ｙｉｎｇ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｂｓｔｅｔｒｉｃｓａｎｄＧｙｎｅｃｏｌ－ｏｇｙ，ＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＦｕｊｉａｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｆｕｚｈｏｕ３５００００，Ｃｈｉｎａ）摘要：目的 观察不同质量浓度顺铂对宫颈癌Ｈｅｌａ细胞增殖能力的影响。
方法 选择人宫颈癌Ｈｅｌａ细胞进行体外培养，分别用质量浓度为０，０畅０１，０畅１０，１畅００，１０畅００ｍｇ・Ｌ－１的顺伯对呈现对数生长期的Ｈｅｌａ细胞进行处理，处理后分别于１２，２４，４８，７２ｈ测定细胞增殖能力。
结果 不同质量浓度的顺铂对Ｈｅｌａ细胞增殖能力均有抑制作用，高质量浓度顺铂组对Ｈｅｌａ细胞抑制率明显高于低质量浓度组（Ｐ＜０畅０５）。
不同质量浓度组中，随顺铂作用时间的延迟，细胞增殖抑制率显著增加（Ｐ＜０畅０５）。
结论 顺铂对宫颈癌Ｈｅｌａ增殖能具有抑制作用，且随质量浓度的增高，抑制能力增强。
关键词：宫颈癌；Ｈｅｌａ细胞；顺铂；增殖能力ＤＯＩ：１０畅１３６９９／ｊ畅ｃｎｋｉ畅１００１－６８２１畅２０１４畅０７畅０１３中图分类号：Ｒ９７９畅１；Ｒ９３７畅３３ 文献标志码：Ａ文章编号：１００１－６８２１（２０１４）０７－０６０１－０２Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ ＴｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｃｉｓｐｌａｔｉｎｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｂｉｌｉｔｙｏｆＨｅｌａｃｅｌｌ畅Ｍｅｔｈｏｄｓ ＣｅｒｖｉｃａｌｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅＨｅｌａｗａｓｃｕｌｔｕｒｅｄｉｎｖｉｔｒｏａｎｄｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈ０，０畅０１，０畅１０，１畅００，１０畅００ｍｇ・Ｌ－１ｃｉｓｐｌａｔｉｎｉｎｔｈｅｓｔａｇｅｏｆｌｏｇａｒｉｔｈｍｉｃｐｈａｓｅ畅Ａｆｔｅｒｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆ１２，２４，４８ｈａｎｄｔｈｅｃｅｌｌｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｒａｔｅｗａｓｍｅａｓｕｒｅｄ畅Ｒｅｓｕｌｔｓ ＤｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｃｉｓｐｌａｔｉｎｃａｎｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅＨｅｌａｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ畅ＴｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＨｅｌａｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｉｎｈｉｇｈｃｏｎｃｅｎｔｒａ－ｔｉｏｎｗｅｒｅｍｕｃｈｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｌｏｗｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０畅０５）．Ｔｈｅｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｒａｔｅｗａｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｗｉｔｈｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｐｅｒｉｏｄｏｆｔｉｍｅｆｏｒｃｉｓｐｌａｔｉｏｎｔｒｅａｔｍｅｎｔ畅Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｃｉｓｐｌａｔｉｎｃａｎｉｎｈｉｂｉｔｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｃｅｒｖｉｃａｌｃａｎｃｅｒｃｅｌｌ，ａｎｄｗｉｔｈｉｎｃｒｅａｓｅｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎａｂｉｌｉｔｙｗａｓｉｎｃｒｅａｓｅｄ畅Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｃｅｒｖｉｃａｌｃａｎｃｅｒ；Ｈｅｌａｃｅｌｌ；ｃｉｓｐｌａｔｉｎ；ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ子宫颈癌是临床上妇科常见恶性肿瘤，近年来随着人类乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染率的增加，宫颈癌的发病率呈现上升和年轻化趋势［１－２］。
实验报告药物对细胞生长的影响
实验报告药物对细胞生长的影响一、引言细胞生长是生物学研究中的一个重要主题，而药物对细胞生长的影响则是药物研究与开发的核心内容之一。
本报告旨在通过实验研究，探讨药物对细胞生长的影响，并对实验结果进行分析和解读。
二、实验设计与方法1. 实验目的本实验旨在研究不同药物对细胞生长的影响，以期了解药物的抑制或促进效应。
2. 实验材料和设备- 细胞培养基- 不同类型的药物样本- 细胞培养器具（培养皿、离心管等）- 显微镜- 细胞计数器或细胞增殖试剂盒3. 实验步骤1) 细胞培养准备- 将细胞接种于含有完整培养基的培养皿中，以确保细胞生长状况良好。
- 以适当的温度（一般为37°C）和含有5% CO2的培养箱中培养细胞。
2) 药物处理- 将不同浓度的药物溶液加入含有培养基的培养皿中，并与细胞培养物共同培养一定时间。
- 设立对照组，仅加入培养基而不加入药物。
- 不同浓度的药物样本可根据需要进行稀释，以获得不同浓度的处理组。
3) 细胞观察与计数- 在给定时间点，用显微镜观察并记录细胞的形态变化和数量变化。
- 可通过细胞计数器或细胞增殖试剂盒测定细胞数量，以评估药物对细胞增殖的影响。
三、实验结果与分析根据实验设计和方法，我们成功地进行了药物对细胞生长的影响实验，并获得了以下结果：1. 药物A对细胞生长的影响针对不同浓度的药物A处理组，在培养一定时间后，观察到细胞出现形态改变和数量减少的现象。
随着药物A浓度的增加，细胞数量明显下降，且细胞形态变得不规则。
2. 药物B对细胞生长的影响实验结果表明，药物B对细胞生长具有明显的抑制作用。
在低浓度处理组中，细胞数量略有减少并呈现正常形态；而在高浓度处理组中，细胞数量急剧减少，且细胞形态出现明显变化。
3. 药物C对细胞生长的影响药物C在实验中显示出一定的促进细胞生长的作用。
处理组细胞数量明显多于对照组，并且观察到细胞形态规则、生长活跃的现象。
四、讨论与结论根据实验结果和分析，我们得出以下结论和讨论：1. 药物A、B、C对细胞生长均有明显的影响，表现出不同的生物学效应。
紫杉醇及阿霉素对细胞增殖及凋亡的影响--细胞生物学综合实验报告
紫杉醇及阿霉素对细胞增殖及凋亡的影响课程名称：班级组员：紫杉醇及阿霉素对细胞增殖及凋亡的影响摘要:本实验探究阿霉素和紫杉醇对细胞增殖及细胞凋亡的影响，以人胃癌BGC-823细胞为材料，用MTT法检测BGC-823细胞的增殖水平，根据测得的吸光度值（OD值）来判断细胞活性，得出IC 50，对细胞进行药物处理，荧光染色后利用荧光显微镜观察实验结果。
阿霉素IC50为0.48μg/ml，紫杉醇则未能得出结果。
关键词：细胞增殖；BGC-823细胞；细胞凋亡；MTT检测法；荧光染色；IC 50；OD；阿霉素；紫杉醇；The Effect of the Adriamycin and Paclitaxel on CellProliferation and ApoptosisAbstract:We are aim to study the effect of the drug on cell proliferation and apoptosis. We used BGC-823 cells to do the experiment，and cell proliferation is assessed by the MTT assay. According to the measured absorbance value (OD value), we can determine the cell viability and then conclude the IC 50. Using the drugs to treat with the cells. Finally, we observed the cells under fluorescent microscope after fluorescent staining. The assayed IC 50 of Adriamycin is0.48μg/ml while we couldn’t obtained a meaningful IC 50 of paclitaxel.Key words: cell proliferation；BGC-823 cells；apoptosis；MTT assay；fluorescent staining；IC 50；OD；adriamycin；paclitaxel；1引言（Introduction）恶性肿瘤作为全球较大的公共卫生问题之一，极大地危害人类的健康，并将成为新世纪人类的第一杀手。
“创新实验”顺铂和阿霉素的浓度对细胞增殖产生的影响
创新实验论文探究抗肿瘤药物顺铂和阿霉素的浓度对人宫颈癌细胞HeLa细胞增殖和凋亡产生的影响姓名：胡尔曼那力·艾力胡加学号：201111202924年级：2011级专业：生物科学探究抗肿瘤药物顺铂和阿霉素的浓度对人宫颈癌细胞HeLa细胞增殖和凋亡产生的影响摘要：本实验主要探究抗肿瘤药物顺铂和阿霉素对HeLa细胞增殖及凋亡的影响，HeLa细胞是一种癌细胞，增殖速度快，通过探究其药物的浓度对癌细胞的抑制及其凋亡情况，可以利用药物有效地控制细胞的增殖并使细胞致死。
通过MTT比色法对HeLa细胞进行生长曲线的测定，观察细胞的生长情况。
在生长曲线上找出相应的IC50的值，并且比较不同浓度下的IC50的值，即可知道药物的浓度对细胞增殖所造成的影响。
通过流式细胞术实验方法测出细胞的凋亡比例及各个周期时相的百分比即可知道不同药物对于HeLa细胞凋亡的影响。
前言：细胞增殖是生物体的重要生命特征，细胞以细胞分裂的方式进行增殖。
通过细胞分裂，可以将复制的遗传物质，平均地分配到两个子细胞中去。
可见，细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。
细胞如果增殖异常如无限地增殖，将会导致生物体的正常生命功能受阻，如肿瘤的发生。
细胞死亡也是生物体的重要生命活动之一。
多细胞生物发育过程中，在细胞增殖和分化的同时一些细胞被选择性地消除，以形成组织、器官和四肢，而且在整个生命进程中，细胞的死亡与新细胞的产生之间的动态平衡对于维持组织和器官的正常功能具有重要作用。
因此，细胞死亡调控的异常与帕金森症、自身免疫性疾和癌症等疾病的发生和发展密切相关。
癌症是威胁人类健康的最严重的疾病之一，并呈不断上升趋势。
目前用于癌症治疗的主要手段有手术、放疗、化疗和生物治疗。
肿瘤化学治疗是应用一种或数种化学药物，通过口服或注射达到治疗肿瘤的方法。
不同肿瘤的化疗效果差别很大，手术前后的合理化疗，有助于提高疗效。
目前发现许多天然药物具有抗肿瘤作用。
其中很多抗肿瘤药物可以明显抑制肿瘤细胞的增殖，而对正常细胞的毒副作用较小。
利用MTT法测定抗癌药物顺铂对Hela细胞增殖的抑制效果.doc
利用MTT法测定抗癌药物顺铂对Hela细胞增殖的抑制效果摘要：目的：采用唾哇蓝(MTT)比色法来检测Hela细胞相对数和相对活力，利用已知浓度细胞培养后的吸光度生成细胞成长趋势曲线，从而推测抗癌药物顺铂对Hela细胞增殖的抑制效果。
方法：采用MTT法先测出一组Hela细胞浓度的吸光值的指数方程，同时培养加入不同浓度的顺铂的Hela细胞，最后根据指数方程来计算不同浓度的顺铂抑制后的Hela细胞数量。
结果：抗癌药物顺铂对Hela 细胞增殖有抑制效果，不同浓度的顺铂抑制的效果都不一样，几乎呈线性关系。
结论：采用MTT法检测有助于指导临床选择化疗药物剂量,提高化疗效果；顺铂对癌细胞的增殖有一定的抑制作用。
关键词：MTT比色法顺铂Hela细胞前言检测细胞存活与增殖，过去常用的方法有染料排斥法和掺入同位素的释放法。
前者易受主观因素影响，误差大；后者因放射线同位素污染环境，并需要价格昂贵的仪器设备，整个过程所需时间长，实际应用受到限制。
1983年Mos- manntl〕首创了MTT比色分析法，其基本原理是活细胞线粒体脱氢酶可将淡黄色的MTT还原成蓝紫色甲瓒(Formazan)，从而可用比色法推测活细胞浓度〔1〕。
由于MTT法简单、灵敏、稳定;其检测结果与同位素掺入法有良好的一致性，同时又可避免同位素污染及特殊设备的需要，故可代替同位素掺入法，有效地应用于淋巴细胞转化[2j，IL一2[a]，抗肿瘤药物的筛选等研究中。
我们以检测抗癌药物顺铂对Hela细胞增殖活性的抑制效果为例，对MTT法的操作步骤及条件进行了探讨，还探讨一下不同浓度的顺铂对癌细胞抑制效果。
1材料与方法1.1细胞培养将吹打的单细胞悬液调整细胞浓度约为500000个/ML，再稀释细胞浓度直到每孔的细胞约为10000个、5000个、2500个、1250个L、625个等这五个梯度，将其接种到96孔板内，一般同一浓度的细胞接种4孔作为重复实验，同时分别做一组空白对照和一组未知细胞浓度；与此同时，制造一组药物处理组细胞，有调整细胞浓度为20000～30000/ML，每孔接入200ul，使每孔细胞数为5000个左右，最后同时放到培养箱内培养，24～36h后吸掉药物处理组的培养液加入不同浓度梯度的顺铂（1 ug/ml、5 ug/ml、10 ug/ml、15ug/ml）〔2〕各200ul，继续培养。
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创新实验论文探究抗肿瘤药物顺铂和阿霉素的浓度对人宫颈癌细胞HeLa细胞增殖和凋亡产生的影响姓名：胡尔曼那力·艾力胡加学号：201111202924年级：2011级专业：生物科学探究抗肿瘤药物顺铂和阿霉素的浓度对人宫颈癌细胞HeLa细胞增殖和凋亡产生的影响摘要：本实验主要探究抗肿瘤药物顺铂和阿霉素对HeLa细胞增殖及凋亡的影响，HeLa细胞是一种癌细胞，增殖速度快，通过探究其药物的浓度对癌细胞的抑制及其凋亡情况，可以利用药物有效地控制细胞的增殖并使细胞致死。
通过MTT比色法对HeLa细胞进行生长曲线的测定，观察细胞的生长情况。
在生长曲线上找出相应的IC50的值，并且比较不同浓度下的IC50的值，即可知道药物的浓度对细胞增殖所造成的影响。
通过流式细胞术实验方法测出细胞的凋亡比例及各个周期时相的百分比即可知道不同药物对于HeLa细胞凋亡的影响。
前言：细胞增殖是生物体的重要生命特征，细胞以细胞分裂的方式进行增殖。
通过细胞分裂，可以将复制的遗传物质，平均地分配到两个子细胞中去。
可见，细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。
细胞如果增殖异常如无限地增殖，将会导致生物体的正常生命功能受阻，如肿瘤的发生。
细胞死亡也是生物体的重要生命活动之一。
多细胞生物发育过程中，在细胞增殖和分化的同时一些细胞被选择性地消除，以形成组织、器官和四肢，而且在整个生命进程中，细胞的死亡与新细胞的产生之间的动态平衡对于维持组织和器官的正常功能具有重要作用。
因此，细胞死亡调控的异常与帕金森症、自身免疫性疾和癌症等疾病的发生和发展密切相关。
癌症是威胁人类健康的最严重的疾病之一，并呈不断上升趋势。
目前用于癌症治疗的主要手段有手术、放疗、化疗和生物治疗。
肿瘤化学治疗是应用一种或数种化学药物，通过口服或注射达到治疗肿瘤的方法。
不同肿瘤的化疗效果差别很大，手术前后的合理化疗，有助于提高疗效。
目前发现许多天然药物具有抗肿瘤作用。
其中很多抗肿瘤药物可以明显抑制肿瘤细胞的增殖，而对正常细胞的毒副作用较小。
如顺铂、阿霉素、喜树碱、顺铂、阿糖胞苷、放线菌酮、环磷酰胺。
这些药物均可以抑制肿瘤细胞的增殖，并且目前有不错的效果。
关键词：顺铂阿霉素HeLa细胞细胞增殖细胞凋亡1 实验原理1.1 HeLa细胞HeLa细胞是源自一名美国妇女的子宫颈癌细胞的细胞。
HeLa细胞株是由正常子宫颈细胞被一种人类乳突状瘤病毒（Human Papillomavirus 18 或HPV18）转型成癌细胞的HeLa细胞至今已被视为“不死的”，也就是说此细胞株（不同于其他人类细胞）不会老死，而且可以不限次数的分裂下去，而且已培养出一个不间断的系列。
从1951年至今，HeLa细胞已经培养了50多年，分裂了18000次以上仍然没有停止的迹象。
此细胞株即使和其他癌细胞相比，增殖依然异常迅速。
1.2顺铂和阿霉素顺铂（顺氯氨铂，cisplatin,DDP）将所含之氯解离，然后与DNA上的核碱鸟嘌呤、腺嘌呤和胞嘧啶形成DNA 单链内两点的交叉联结，也可能形成双链间的交叉联结，从而破坏DNA的结构和功能。
对RNA和蛋白质合品属细胞周期非特异性药物，具有细胞毒性，可抑制癌细胞的DNA复制过程，并损伤其细胞膜上结构，有较强的广谱抗癌作用。
临床用于卵巢癌、癌前列腺癌、睾丸癌、肺癌、鼻咽癌、食道癌、恶性淋巴瘤、头颈部鳞癌、甲状腺癌及成骨肉瘤等多种实体肿瘤均能显示疗效。
成的抑制作用较弱。
属周期非特异性药物。
阿霉素是一种抗肿瘤抗生素，通过抑制癌细胞遗传物质核酸的合成来杀灭癌细胞。
盐酸阿霉素对机体产生广泛的生物化学效应。
具有强烈的细胞毒性作用。
其作用机制主要是阿霉分子嵌入DNA而抑制核酸的合成。
1.3 PI和Ho.33342PI（碘化丙啶）：双链核酸标记物，亲水性，不能通过完整细胞膜，激发光谱和发射光谱分别为535nm和617nm，激发光波长范围较宽，从紫光到绿光均可作为激发光。
Ho.33342：特异结合AT区的DNA标记物，亲脂性，激发光谱和发射光谱分别为350nm和461nm细胞类型膜完整性染色质凝集程度凋亡小体的形成PI染色Ho.33342正常细胞完整不凝集无无法透过蓝色凋亡细胞完整高度凝集有无法透过蓝色坏死细胞破损一定程度的凝集无橘红色蓝色（同时染PI被橘红色遮掩）1.4 MTT比色法MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。
其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。
二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。
在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。
1.5 IC50IC50是指细胞被抑制一半时抑制剂的浓度，这里的反应可以是酶催化反应，抗原抗体反应等。
在凋亡方面，可以理解为一定浓度的某种药物诱导肿瘤细胞凋亡50%，该浓度称为50%抑制浓度，即凋亡细胞与全部细胞数之比等于50%时所对应的浓度，IC50值可以用来衡量药物诱导凋亡的能力，即诱导能力越强，该数值越低，当然也可以反向说明某种细胞对药物的耐受程度。
2 .实验步骤2.1 利用MTT法检测细胞增殖1、取对数生长期的细胞,用胰酶消化计数,配制细胞悬液浓度为4x104/mL，取细胞接种到96孔板，每孔200μL，8000细胞/孔。
2 、加药处理:•（1）24小时后，待细胞贴壁后吸取培养基200μL，弃除，调零孔不作处理。
•（2）设置药物浓度分别为1x10-3μg/μL、2x10-3μg/μL、4x10-3μg/μL、6x10-3μg/μL、8x10-3μg/μL,对应按每列分别加入Cc1、C2、C4、C6、C8(顺铂组)，Cd1、D2、D4、D6、D8（阿霉素组）列中。
96孔板上药物分布如表1所示：••（3）配置浓度梯度及加药方法：•药物母液浓度为5mg/mL，即5μg/μL，顺铂溶于DMSO，盐酸阿霉素溶于水。
分别取0.4mL顺铂/阿霉素，加入1.6mLDMSO/水，混合均匀，得到1μg/μL的顺铂及阿霉素溶液。
顺铂与阿霉素的浓度梯度配置方法相同。
•取药物2/4/8/12/16μL,对应加入14/12/8/4/0μLDMSO/水（药物为顺铂即加DMSO，药物为阿霉素即加水），各加入2mL培养基，即配制出浓度分别为为1x10^-3μg/μL、2x10^-3μg/μL、4x10^-3μg/μL、6x10^-3μg/μL、8x10^-3μg/μL的药物。
两种药物不同浓度分别相应加入Cc1、C2、C4、C6、C8(顺铂组)，Cd1、D2、D4、D6、D8（阿霉素组）列中，每孔200μL。
取培养基2mL，分别加入16μLDMSO/水，混合均匀，加入到对照1/对照2列中，每孔200μL。
3 、测定: 取测定孔, 弃去培养基,加100 μL 新鲜的培养基,加12 μL MTT，4小时后加100 μL裂解液。
过夜后，用酶标仪测定OD值。
4 、根据测得OD值，用SPSS软件进行分析，求出以对照组吸光度OD 值减少一半所需的药物浓度IC50，即半数抑制浓度。
2.2细胞的形态学观察• 1 、取生长到80-90%融汇度，对数生长期的细胞，按1：4比例传代。
取1瓶细胞传到4瓶。
•2、按求得的顺铂及阿霉素浓度在传代的第二天，向培养基中加入药物或对照溶液。
弃除细胞培养瓶中原培养液，加入5mL新培养基。
分别取浓度为5mg/mL的顺铂及阿霉素母液，其中顺铂7μL，阿霉素4μL各加入细胞培养瓶中。
对照组分别取DMSO7μL，水μL各加入细胞培养瓶中。
3、48-72小时后，收集培养液，用胰酶适度消化细胞，用收集的培液吹打细胞，将分散成单个的细胞悬液收集至10mL离心管中，1000rpm, 离心15 min去上清，用0.2毫升PBS重悬细胞•4、取200 μl PBS细胞悬液，加入PI 20 μL（终浓度100 μg/ml），Ho.333422μL（终浓度10μg/ml），混匀，37度温箱中避光标记15min。
(带手套操作）•5、1000rpm，离心10min，弃上清，加10-50 μL PBS重悬，取10 μL 滴于载玻片上，盖片（不能有气泡或漂起），保存于暗处。
6、荧光显微镜观察拍照（紫外激发）。
3．实验结果3.1MTT法实验结果顺铂的实验结果：分析：由MTT实验结果可看出，可能会出现波动较大的数据，计算IC50时应将这些数据舍去。
根据所测OD值可算出顺铂对BGC-823细胞的IC50值为5.698左右。
但数值波动较大，实验结果不稳定，综合全班实验可知顺铂的添加浓度约为7。
阿霉素的实验结果分析：由MTT实验结果可看出，可能会出现波动较大的数据，计算IC50时应将这些数据舍去。
根据所测OD值可算出顺铂对BGC-823细胞的IC50值为3.054左右。
但数值波动较大，实验结果不稳定，综合全班实验可知顺铂的添加浓度约为4。
3.2顺铂和阿霉素对人宫颈癌细胞HeLa细胞凋亡的影响的形态学观察图一为Ho.333422和PI染料双染HeLa细胞得到的细胞核形态图。
从图中观察可以看到有呈蓝色的细胞，也有呈红色的细胞。
图一中的A、B代表未加顺铂和阿霉素的空白对照。
C为加入顺铂的HeLa细胞的细胞核形态图，D为加入阿霉素的HeLa细胞的细胞核形态图。
A BC D图一Ho.333422-PI双染观察凋亡细胞的形态从图一中可以看出，对照组A、B的细胞数目要明显多于实验组C、D的细胞数目。
C、D实验组加入了顺铂和阿霉素，由此说明顺铂和阿霉素确实对于细胞的生长具有抑制作用。
当比较A、C两组的时候发现，对照组基本上没有出现凋亡细胞；分别观察两个视野可以发现，加药组出现了部分凋亡细胞。
从细胞凋亡形态观察结果可看到，视野中的坏死细胞较多，可能因为实验操作不够轻柔，从而导致细胞坏死；也可能是在用胰酶消化细胞消化过度而引起的细胞坏死。
因此实验时要注意以上两点。
当BD两组相比较可发现对照组基本上没有出现凋亡细胞；分别观察两个视野可以发现，加药组出现了部分凋亡细胞（一个视野中有4个，另一个视野中有2个）。
从细胞凋亡形态观察结果可看到，视野中有少量坏死细胞，可能因为实验操作不够轻柔，从而导致细胞坏死；也可能是在用胰酶消化细胞消化过度而引起的细胞坏死。
因此实验时要注意以上两点。
有上述的比较还可以知道，顺铂和阿霉素可以促进细胞的凋亡。
4.实验总结综合上面所述的三个结果分析，顺铂和阿霉素都对HeLa细胞的增殖具有一定的抑制作用。
5.实验注意事项1、整个实验期间注意无菌操作，注意细胞保种，发现细胞污染时要及早采取补救措施2、做MTT时，加药顺序和处理时间要标记清楚不能弄混。
3、每天加MTT和裂解液时，要在调零用的孔中进行相同操作。