卵巢癌细胞系来源外来体的获得及形态特征观察
人卵巢癌干细胞的分离、鉴定及其特异性microRNA的筛选共3篇
人卵巢癌干细胞的分离、鉴定及其特异性microRNA的筛选共3篇人卵巢癌干细胞的分离、鉴定及其特异性microRNA的筛选1人卵巢癌干细胞的分离、鉴定及其特异性microRNA的筛选卵巢癌是妇女常见的恶性肿瘤之一，也是最具侵袭性和死亡率的妇科恶性肿瘤之一。
近年来，研究表明卵巢癌干细胞（OCSCs）在卵巢癌的发生、发展和复发中起着非常重要的作用。
OCSCs具有高度的增殖、分化和肿瘤形成能力，容易逃避传统治疗手段的检测和清除。
因此，深入研究OCSCs的分离、鉴定和治疗靶点，对于提高卵巢癌的治疗效果和预后具有非常重要的意义。
OCSCs的分离主要依赖于某些细胞表面分子的识别和分离技术。
研究表明，CD133，CD44和CD117等基因标记物是OCSCs表面的主要特征，可以作为OCSCs的识别和定位标志。
因此，这些表面分子的选择性抗体可以用于OCSCs的分离和富集。
通过流式细胞术（FACS）和磁珠分离技术等先进的细胞分离技术，可以从卵巢癌患者的肿瘤组织样本中纯化出高含量的OCSCs种群。
随着单细胞测序技术的发展，进一步可以研究OCSCs的基因、蛋白、代谢和功能特性等。
OCSCs的鉴定是指对其肿瘤形成、侵袭战略和治疗抵抗性的研究，具有非常重要的临床意义。
研究表明，OCSCs在细胞凋亡、DNA修复、肿瘤增殖和脱靶治疗等方面具有突出的特性。
因此，通过对OCSCs的微观和宏观观察，可以识别OCSCs的不同亚群，并进一步探究其分化程度、增殖模式、治疗耐受性等特征。
同时，通过体内和体外肿瘤模型的建立和治疗实验，可以验证OCSCs的肿瘤形成能力和抗药性。
最近的研究还表明，OCSCs还具有干细胞外泌体通路调控的特性，通过这种方式影响癌细胞的行为和治疗反应。
microRNA（miRNA）是非编码小RNA分子，在细胞代谢、增殖、分化、凋亡和信号转导等方面具有重要的调节作用。
研究表明，miRNA在OCSCs的增殖、分化、转移和耐受性等方面起着非常关键的作用。
临床病理——卵巢肿瘤病理.描述
好发于瘤蒂长、中等大 活动度良好、重心偏于 一侧的肿瘤 蒂由骨盆漏斗韧带、卵 巢固有韧带和输卵管 组成 静脉回流受阻，瘤体急 剧增大；动脉血流受阻 发生坏死，易破裂和继 发感染
典型症状是突然发生一侧下腹剧痛，常伴恶心、呕吐甚至休克，系腹膜牵引绞窄引起。 妇科检查扪及肿物张力较大，有压痛，以瘤蒂部最明显，并有肌紧张 一经确诊，应尽快剖腹探查 术时应在蒂根下方钳夹，将肿瘤和扭转的瘤蒂一并切除，钳夹前不可回复扭转，以防栓塞脱落
放射冠
透明带
卵泡生长过程
次级卵泡（囊状卵泡） 卵泡细胞达6～12层——颗粒层 卵丘：卵母细胞+透明带+放射冠+部分卵泡细胞 卵泡腔形成 卵泡膜：内层细胞多、富含毛细血管，后期细胞增大，胞质内含类脂质并分泌性激素；外层血管少，与周围结缔组织无明显界限。
*
卵泡膜外层
卵泡膜内层
透明带
畸胎瘤（双侧）
畸胎瘤
成熟性畸胎瘤
未成熟型畸胎瘤
无性细胞瘤 dysgeminoma
好发于青春期及生 育期妇女 圆形或椭圆形,实 性 ,触之如橡皮样 实质呈浅褐色外观 对放疗特别敏感
内胚窦瘤（卵黄囊瘤） endodermal sinus tumor (yolk sac tumor)
性 索
胚胎第6周生发上皮芽状增生并垂直伸入间叶组织形成性索 男性性索发生于胚胎第6-7周，性索细胞衍变为曲细精管的支持细胞（Sertoli’s cell)；间胚叶组织演变为睾丸间质细胞(Leydig’s cell) 女性性索发生于胚胎第8周，性索细胞演变为颗粒细胞及卵泡膜细胞
卵 巢 肿 瘤 ovarian tumor
概述
卵巢肿瘤是女性生殖系统常见肿瘤。卵巢恶性肿 瘤是女性生殖系统三大恶性肿瘤之一，占32%，具有几 大特点： 1.早期诊断困难：卵巢位于盆腔深部，不易扪 及或查得，且缺乏有效的早期诊断方法。 2.卵巢癌预后不良：就诊时70%的病例已属晚期，缺乏 有效的诊治方法，五年生存率徘徊在25%-30% 3.卵巢组织复杂，各种肿瘤均可发生，是全身各脏器 肿瘤类型最多的部位。卵巢肿瘤不仅组织学类型 多，而且有良性、恶性、交界性之分。
整体可视化卵巢癌原位及转移动物模型的建立
理 学方 法验证 了可视 化模 型的可靠性 。结论
的 可 靠 有 效 的观 察 模 型 。
整 体可视 化 卵巢癌动物 原位及转 移模 型是研 究 卵巢癌发展及 转移
【 关键词 】 卵巢癌 ；动物模型 ， 整体可视化 图像
Ｅｓａｂｌｓ ｔ ｉｈｍ ｅ ｎｔｏｆｗｈｏｌ — ｂｏ ｖｓ ｌｚ ｉ ｎ ｏ ｌ Ｖ ｉ ｃ ｃ ｒ ｏｒ ｈｏ ｏ ｃ ｎ ｄ ｅ ａ ｔ ｉ ｏ ｅ ｎ ｅ ｄｙ ｉｕａｉａｔｏ ｍ ｄｅｓ ｏｆ ０ ａｒａｎ ａ ｅ ｔ ｔ ｐｉ ａ ｎ ｍ ｔ ｓａｔｃ ｍ ｄ ｌｉ ｎｕ ｄｅ
表 达 质 粒 ０ ８ ｇ Ｌｐｆ ｔ ｉｅ ２ ０ ０ｔ ， 温 孵 ． 和 ｉｏ ｃ ｍ ｎ ０ ０２ Ｌ 室 ｅａ ｘ
１ １ 材料 ．
人 卵巢 癌细 胞 株 Ｈ Ｏ一８ １ ９０为本研 究 所
自存 。Ｌｐｆ ｔ ｉ ０ ０试剂 和 Ｏ ｔ—ＭＥ 培养 基 ｉ ｅａ ｎ ｏ ｃ ｍ ２０ ｐｉ Ｍ 购 自 Ｉｖ ｒ ｅ ｎｉｏ ｎ生 物公 司 ； Ｅ Ｆ ｔｇ ｐ Ｇ Ｐ—Ｎ １由周军博 士 赠
卵巢 癌是 一种常见 的严重威胁人类 生命健康 的妇
送 ； ４ ８购 自Ｓｇ ａ公司 ；Ｐ Ｇ１ ｉ ｍ Ｓ Ｆ级 ３～ ４周龄及 ７～ ８只 裸 鼠购 自南 方医科 大学动 物实验 中心 ， 总研 究时 间为
２０ ０ ９年 ９月 至 ２ １ ０ ０年 ４月 。
１ ２ 方 法 ．
科恶性肿 瘤 ， 近年 来 虽然 手 术 、 化疗 等 技 术 的不 断 改 善， 但卵巢癌 的病 死率仍没 有得 到很好控 制 ， ５年生 存 率仍保 持在 ３ ％左 右… 。建立 一种 易于观 察 、 物学 ０ 生
Ｍｅ ｉａ ｉｅｓｔ ｄ ｃ ｌＵｎｖ ｒｉ ｙ，Ｇｕ ｎ ｚ ｏ ０ ５，Ｃ ｉ ａ ａ ｇ ｈ ｕ ５１ ５１ ｈｎ
卵巢癌(专业知识值得参考借鉴)
卵巢癌(专业知识值得参考借鉴)卵巢癌（专业知识值得参考借鉴）引言卵巢癌是女性生殖系统恶性肿瘤中较为常见的一种。
它在早期往往没有明显症状，难以被及时发现和诊断，导致治疗成功率较低。
因此，了解卵巢癌的专业知识对于早期发现、诊断和治疗具有重要意义。
卵巢癌的发病机制卵巢癌的发病机制尚未完全明确，但一般认为与遗传、激素、生活方式和环境等因素相关。
遗传因素中，BRCA1和BRCA2基因突变是最常见的高风险遗传因素。
激素因素中，长期使用雌激素替代治疗、未生育或晚育、晚绝经等与卵巢癌的发生有关。
卵巢癌的分类和病理特点根据组织类型、病理特点和临床表现，卵巢癌可分为上皮性卵巢癌、生殖细胞肿瘤和性索间质肿瘤等多种类型。
上皮性卵巢癌是最常见的一种类型，分为浆液性、黏液性、内型和透明细胞型等亚型。
了解不同类型的卵巢癌的病理特点有助于精确诊断和制定治疗方案。
卵巢癌的临床特征和诊断卵巢癌的临床特征包括腹部肿块、腹部不适、腹痛、腹胀、消化不良等症状。
早期症状不典型，易被忽视，因此常常在晚期才被发现。
目前诊断卵巢癌的主要方法包括体格检查、妇科超声、CT、MRI、PET-CT、经B超等。
综合应用多种方法可提高卵巢癌的早期诊断率。
卵巢癌的治疗原则和方法卵巢癌的治疗主要包括手术、放疗和化疗等综合治疗方法。
手术是首选治疗方法，旨在实施根治性切除。
手术范围会根据病理分期和患者情况的不同而有所变化。
放疗和化疗是辅助性治疗，目的是消灭残留的病变组织和预防复发。
个体化治疗方案的制定需要综合考虑患者的年龄、病理类型、分期、分级和遗传因素等因素。
结论卵巢癌是一种常见的女性恶性肿瘤，它的早期发现、早期诊断和综合治疗对于提高患者的生存率具有重要意义。
通过深入了解和研究卵巢癌的专业知识，我们可以更好地预防和应对卵巢癌的发生，为患者提供更好的治疗和护理。
卵巢癌的二元论诊断标准
卵巢癌的二元论诊断标准
一、生物学特征
卵巢癌的生物学特征主要表现为细胞增殖失控和凋亡受阻。
在细胞形态、生长速度和组织浸润等方面，卵巢癌细胞与正常卵巢组织存在明显的差异。
通过观察肿瘤细胞的生物学行为，可以初步判断是否为卵巢癌。
二、组织病理学
组织病理学是诊断卵巢癌的金标准。
通过手术获取的卵巢组织样本，经过病理学检查，可以观察到肿瘤细胞的形态、排列和分化程度，从而确定肿瘤的性质和类型。
病理学诊断对于卵巢癌的治疗和预后评估具有重要意义。
三、生化指标
生化指标是卵巢癌诊断的重要辅助手段。
常用的生化指标包括CA125、HE4、CA724等肿瘤标志物。
这些标志物在卵巢癌患者血清中的表达水平显著升高，有助于早期发现肿瘤，监测病情进展和评估治疗效果。
四、影像学检查
影像学检查是卵巢癌诊断的重要手段之一。
常用的影像学检查方法包括超声检查、CT、MRI和PET-CT等。
通过影像学检查可以观察卵巢形态、大小、病灶范围以及是否有转移等，有助于确定肿瘤的性质和分期，为治疗提供依据。
五、临床症状与体征
卵巢癌的早期症状通常不明显，随着病情发展，可能出现腹部胀痛、食欲不振、消瘦等症状。
妇科检查可发现盆腔肿块、子宫直肠陷凹结节或固定的肿块等体征。
临床症状与体征的出现频率和严重程度与肿瘤的分期和类型有关。
综上所述，卵巢癌的诊断需要综合考虑生物学特征、组织病理学、生化指标、影像学检查和临床症状与体征等方面的信息。
通过综合分析这些数据，可以准确诊断卵巢癌，为后续的治疗和预后评估提供依据。
外泌体在卵巢癌中的研究进展
实用妇产科 杂志 ２０１８年 ３月第 ３４卷第 ３期 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｏｂｓｔｅｔｒｉｃｓ ａｎｄ Ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｙ ２０１８ Ｍａｒ．Ｖｏ１．３４，Ｎｏ．３
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文 章 编 号 ：１００３—６９４６（２０１８）０３—０１８３—０４
外泌 体 在 卵巢 癌 中 的研 究进 展
１ 外泌 体 的生物 学特 性 １．１ 外 泌体 的 生 物 合 成 电 子 显 微 镜 下 观 察 发 现 ， 外 泌体持 续 不 断 地 在 核 内体 网状 结 构 中形 成 一 种 小 囊泡 ，即核 内体 ，随着 早期 核 内体 成熟 ，逐 渐 变 成 具有 管腔 结构 的 晚期核 内体 ，晚期 核 内体 局部 膜 内陷 芽生 状态 后 ，随机 吞 噬 部 分 细 胞 质 中的 成 分 ，形 成 多囊 泡 体 ，通过 与 浆 膜 融 合 ，局 部 内 陷 以 胞 外 分 泌 途 径 释
卵巢癌的病理特点
卵巢癌的病理特点前言卵巢癌是女性生殖系统中最常见的恶性肿瘤之一，其病理特点对于诊断和治疗至关重要。
本文将详细介绍卵巢癌的病理特点，包括发病机制、组织学特征、分期和分级等方面。
1. 发病机制卵巢癌的发病机制尚不完全清楚，但已有一些重要的认识。
首先，遗传因素在卵巢癌的发生发展中起到了重要作用。
BRCA1和BRCA2基因突变与卵巢癌的发病率明显增加相关。
其次，激素因素也是卵巢癌的重要发病因素之一。
长期使用口服避孕药可以降低患卵巢癌的风险。
此外，不孕、不育、晚育以及未生育等因素也与卵巢癌的发病有关。
2. 组织学特征卵巢癌根据组织学类型可分为上皮性和非上皮性两大类。
其中上皮性卵巢癌又分为浆液性、粘液性、内皮性、透明细胞和黏液性。
非上皮性卵巢癌则包括性索间质肿瘤和生殖细胞肿瘤等。
2.1 上皮性卵巢癌上皮性卵巢癌是最常见的卵巢癌类型，占全部卵巢癌的90%以上。
其特点是癌细胞来源于卵巢表面上皮细胞，通常以囊性肿块的形式出现。
不同亚型的上皮性卵巢癌具有不同的病理特点。
•浆液性卵巢癌：浆液性卵巢癌的特征是囊腔内含有黏稠的浆液性物质，囊壁上常有乳头状突起。
细胞学特点是腺管样结构，细胞表面有纤毛。
•粘液性卵巢癌：粘液性卵巢癌的特征是囊腔内充满黏液性物质，囊壁上无乳头状突起。
细胞学特点是腺管结构，细胞呈列状排列。
•内皮性卵巢癌：内皮性卵巢癌的特点是囊腔内有明显出血倾向，细胞形态多样，可见各种异型细胞，呈柱状、立方状或多层鳞状排列。
•透明细胞卵巢癌：透明细胞卵巢癌的特征是细胞胞质呈透明状，形成囊性和实性混合病灶，细胞学特点是不规则的腺体、囊腔和实性区域。
•黏液性卵巢癌：黏液性卵巢癌的特征是分泌大量黏液，癌细胞呈一排一排的外观，细胞间存在大量黏液。
2.2 非上皮性卵巢癌非上皮性卵巢癌相对较少见，但其预后较上皮性卵巢癌较差。
两种常见的非上皮性卵巢癌类型包括性索间质肿瘤和生殖细胞肿瘤。
•性索间质肿瘤：性索间质肿瘤起源于卵巢的性索间质组织。
卵巢癌细胞系ID8中肿瘤干细胞的分离及生物学特性鉴定
《中国组织工程研究》 Chinese Journal of Tissue Engineering Research文章编号:2095-4344(2018)29-04687-05 4687www.CRTER .org·研究原著·俞晓毓，女，1992年生，江苏省盱眙县人，汉族，东南大学在读硕士，主要从事肿瘤干细胞研究。
并列第一作者：吴迪，女，1987年生，江苏省淮安市人，汉族，东南大学在读博士，主要从事肿瘤干细胞疫苗研究。
通讯作者：窦骏，教授，博士生导师，东南大学医学院病原微生物学与免疫学系，江苏省南京市 210009中图分类号:R394.2 文献标识码:A稿件接受：2018-05-15Yu Xiao-yu, Master candidate, Department of Pathogenic Biology and Immunology, Medical College of Southeast University, Nanjing 210009, Jiangsu Province, ChinaWu Di, Doctorate candidate, Department of Pathogenic Biology and Immunology, Medical College of Southeast University, Nanjing 210009, Jiangsu Province, China; Department of Gynecology & Obstetrics, Zhongda Hospital, Southeast University, Nanjing 210009, Jiangsu Province, ChinaYu Xiao-yu and Wu Di contributed equally to this work.Corresponding author: Dou Jun, Professor, Doctoral supervisor, Department of Pathogenic Biology and Immunology, Medical College of Southeast University, Nanjing 210009, Jiangsu Province, China卵巢癌细胞系ID8中肿瘤干细胞的分离及生物学特性鉴定俞晓毓1，吴 迪1，2，王 净2，李 菲1，白绪乐1，2，赵枫姝1，窦 骏1 (1东南大学医学院病原生物学与免疫学系，江苏省南京市 210009；2东南大学附属中大医院妇产科，江苏省南京市 210009)DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.0968 ORCID: 0000-0003-4459-1618(俞晓毓)文章快速阅读：文题释义：肿瘤干细胞或癌干细胞(cancer stem cell ，CSC)：是指肿瘤组织中极小部分能够自我更新、无限分化并具有耐受放化疗等特点的肿瘤细胞，与干细胞的基本特性十分相似，被认为是肿瘤形成、进展、复发和耐药的根源。
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卵巢癌细胞系来源外来体的获得及形态特征
观察
作者：李奇灵，辛晓燕，卜宁，李亚玲，于月成，方静
【关键词】卵巢癌
摘要：目的从8910、TC1、SKOV3、CAOV和3AO卵巢癌细胞系培养上清液中获得外来体。
方法分别培养8910、TC1、SKOV3、CAOV和3AO卵巢癌细胞系，收集上清液，通过多步离心和超滤等方法分离出外来体。
电镜下进行形态学观察。
结果 8910和3AO细胞系培养上清液中分离出外来体，置于透射电子显微镜下观察，可见具有明显异质性的圆形或椭圆形小囊泡，直径约30-90nm，有完整的包膜。
TC1、SKOV3和CAOV细胞系培养上清液中未分离出外来体。
结论 8910和3AO卵巢癌细胞系可分泌外来体，两种细胞系来源的外来体在形态和大小上无明显差别，有可能作为卵巢癌免疫治疗的潜在抗原。
关键词：卵巢癌；免疫治疗；外来体；细胞系
Obtainment and morphologic characteristics of exosomes acquired from ovarian cancer lines
ABSTRACT: Objective To obtain exosomes from the cell culture supernatants of 8910, TC1, SKOV3, CAOV and 3AO ovarian cancer cell lines. Methods 8910, TC1, SKOV3, CAOV and 3AO ovarian cancer cell lines were cultured separately and the cell culture supernatants were collected to seperate exosomes with multiple centrifugation and ultrafiltration. Morphology of exosomes were
observed with electron microscopy. Results Exosomes were purified in 8910 and 3AO cell culture supernatants. Exosoems exhibited heterogenous round or elliptic microvesicles ranging from 30 to 90 nm in diameter with intact membrane. Exosomes were not purified in TC1, SKOV3, and CAOV cell culture supernatants. Conclusion 8910 and 3AO cell lines may secrete exosomes, which are potential specific antigens for immunotherapy against ovarian cancer cells.
KEY WORDS: ovarian cancer; immunotherapy; exosomes; cell line
现代西医治疗卵巢癌的原则是以手术为主，辅以化疗和(或)放疗，对暂时不能手术切除者，直接采用化疗和(或)放疗，尽量多的杀灭肿瘤细胞，减轻其对机体的损害。
此外，在切除肿瘤和化疗放疗的同时，还需要积极应用免疫治疗在内的生物治疗。
树突状细胞(dendritic cell, DC)是目前最有效的抗原递呈细胞，将其作为肿瘤主动免疫治疗手段，已成为肿瘤疫苗研究的热点之一[1]。
目前DC介导的肿瘤疫苗主要有抗原肽刺激的DC，肿瘤提取物刺激的DC，肿瘤细胞与DC融合产物及基因转染的DC[23]。
而外来体作为特异性抗原致敏DC，近年来被许多学者所关注。
本研究从8910、TC1、SKOV3、CAOV 和3AO卵巢癌细胞系培养上清液中分离外来体，有望为卵巢癌的免疫治疗提供理论基础。
1 材料与方法
1.1 材料 RPMI1640培养液购自Gibco公司；胎牛血清购自杭州四季青生物制品公司；99.93%重水购自四川火炬化工集团有限责任公司；Centriplus离心超滤管(100KDa)、Amicon Ultra高回收率高流速切向流超滤离心管(100KDa)购自美国Millipore公司；超速低温离心机(美国Beckman公司)。
1.2 方法
1.2.1 肿瘤细胞的复苏将装有肿瘤细胞混悬液的冻存管从液氮罐中取出后直接投入设置温度为37℃的快速恒温数显水箱中，不时摇动使其融化。
在超净工作台中，用750mL/L乙醇消毒冷冻管外周；打开冷冻管，用吸管吸出细胞悬液至离心管，加15mL含100mL/L胎牛血清RPMI1640完全培养基混匀，水平离心100g×10min，洗涤2次，吸弃上清；加入新鲜培养液，细胞计数板计数，使细胞最终浓度为5×105/mL，接种于培养瓶中，放至37℃含50mL/L CO2饱和湿度细胞培养箱中常规培养。
第2天换液，水平离心100g×10min，继续原条件下培养，及时传代。
1.2.2 细胞培养 SKOV3、8910、TC1、CAOV和3AO 5种细胞系均置于含2mmol/L L谷氨酰胺和青、链霉素各100U/mL，100mL/L 胎牛血清的RPMI 1640完全培养液中，于37℃含50mL/L CO2细胞培养箱中常规培养，隔日传代，待细胞生长至对数期，用2.5g/L胰蛋白酶消化收集细胞，用PBS洗涤重悬，调整细胞浓度为1×107/mL。
所有实验均用对数生长期的细胞。
1.2.3 外来体的获得以300×g离心5min，取上清液；以800。