一种人卵巢癌干细胞富集及流式分选的方法
(19 )中华人民共和国国彖知识产权局
(12 )发明专利申请
(10)申请公布号
CN111254116A
(43)申请公布日2020. 06. 09
(21)申请号 CN202010056543.0
(22 )申请日 2020.01.18
(71)申请人广州医科大学附属第三医院(广州重症孕产妇救治中心、广州柔济医院)
地址510000广东省广州市荔湾区多宝路63号广州医科大学附属第三医院
(72 )发明人陈智毅刘付春;余金穗;李悦汪奕;张辉;屠佳伟
(74)专利代理机构广州凯东知识产权代理有限公司
代理人
(51) Inta
权利要求说明书说明书幅图
(54 )发明名称
—种人卵巢癌干细胞富集及流式分选的方法
(57 )摘要
本发明公开了 -种人卵巢癌干细胞富集及
流式分选的方法，包括使用无血清悬浮细胞培养 法或者顺钳细胞培养法富集人卵巢癌A2780细胞 初步筛选出肿瘤干细胞，再根据卵巢癌干细胞的 标志物ALDH1,使用流式细胞仪进•步分选。本发 明结合了现有悬浮培养法及流式分选方法、药物 筛选富集法及流式分选方法的优点，通过无血清 悬浮培养或者化疗药物筛选，使卵巢癌中的肿瘤 干细胞富集，再通过流式细胞仪分选，从而保证
卵巢癌干细胞的分离 、鉴定及初步生物学功能研究
卵巢癌干细胞的分离 、鉴定及初步生物学功能研究
刘春生;浦春;曹明刚;张鹏
【摘 要】目的 从人卵巢上皮细胞癌建系的SKOV3细胞中分离出CD133CD117表型卵巢癌干细胞 ,探讨其相关生物学特性.方法 利用免疫磁珠技术分选出CD133CD117癌细胞 ,继而进行平皿、软琼脂克隆形成试验 ,无血清培养试验和致瘤试验探讨其初步功能 ;采用反转录聚合酶链反应检测癌细胞Wnt-2基因表达水平.结果 表型CD133CD117癌细胞在平皿、软琼脂和无血清培养基中克隆形成能力明显强于CD133-CD117-癌细胞 ;同时表现出较强致瘤性 ;Wnt-2基因在不同表型癌细胞中存在差异表达.结论 卵巢癌细胞中存在干细胞样癌细胞 ,利用磁珠分选得到的CD133CD117癌细胞具有干细胞的相关特性 ,为卵巢癌干细胞生物学特性的研究及靶向治疗提供依据.%Objective To isolate the CD133CD117
phenotype ovarian cancer stem cells from the SKOV3 cell line of human
ovarian carcinoma ,and to investigate its related biological
function .Methods The CD133CD117 cancer cells were sorted through
MACS technology ,then the plates ,soft agar colony formation
assays ,serum-free culture and tumorigenicity test were carried out to
investigate its preliminary function;RT-PCR was used to detect cancer cell
循环肿瘤细胞的富集方法与临床应用
国际肿瘤学杂志2021年3月第48卷第3期 J Int Oncol，March 2021，Vol. 48，No. 3
• 167 •
•综述•
循环肿瘤细胞的富集方法与临床应用
宁大为1欧洋2崔凯1李胜3高德海3
■山东省肿瘤防治研究院（山东省肿瘤医院）肝胆外科，山东第一医科大学（山东省医学
科学院），济南25〇1丨7; 2济南市第五人民医院普通外科250022; 3山东第一医科大学
(山东省医学科学院）成果转化与产业部（服务地方经济办公室），济南 250021
通信作者：高德海,Email
: sdywyjy
@ 126. com
【摘要】
循环肿瘤细胞（CTC)作为一种新兴的肿瘤标志物，其稀有性和异质性增加了检测的难度。
近年来依据生物物理特性、生物化学特性及微流控的CTC富集技术不断发展，促进了 CTC在恶性肿瘤
辅助诊断、临床治疗和预后评价等方面的研究和应用。CTC的检测目前仍存在一些不足，但随着多学科
交叉融合,CTC在恶性肿瘤的辅助诊断、治疗等方面将发挥更大的作用。
【关键词】
肿瘤细胞，循环；生物标记；细胞学技术；诊断
基金项目：山东第一医科大学学术提升计划（2019QL004);2019年度济南市“高校20条”资助项目
(2019GXRC020);山东省重点研发计戈ij (20丨7CXGC1204)
D01 ： 10. 3760/cma. j. cn371439-20200629-00033
Enrichment methods and clinical application of circulating tumor cells
Ning Dawei' , Ou Yang2, Cui Kai , Li Sheng3, Gao Dehai3
1 Department of Hepatobiliary Surgery, Shandong Cancer Hospital and Institute, Shandong First Medical
一种高效扩增活化自体NK细胞的方法研究及其在治疗卵巢癌中的应用_马佳佳
‐ 112 ‐载一些非肿瘤疾病抗原肽（比如哮喘）所产生的特异性的CTL的体内外活性，这些CTLs都显示专一性地
杀伤各自靶细胞的活性，结果是令人鼓舞的。因此，这种用果蝇人工抗原提呈细胞结合特异的抗原肽刺激CD8 T细胞产生专一性的CTL的技术将是一个很好的技术平台，在疾病的免疫治疗方面发挥重要作用。
关键词: 过继细胞治疗；CD8 T细胞；抗原肽；肿瘤
肿瘤的非特异免疫细胞治疗新技术研究
吴长顺,史习仪,张建强,徐荻
上海宇研生物技术有限公司
非特异性免疫细胞是人体清除肿瘤细胞的第一道防线,也是唯一对肿瘤干细胞有杀伤活性的抗肿瘤治
疗方法。我们公司研发制备的DCCIK细胞具有高比例的NKT细胞，已在临床应用并对部分晚期肿瘤患者
有明显的疗效。但是鉴于NKT细胞对肿瘤细胞的识别机制，仍有部分患者体内突变的癌细胞不能被识别，
或经一段时间的治疗后发生突变而产生免疫逃逸，因此增强扩大DCCIK细胞对肿瘤细胞的识别能力、增
强DCCIK细胞对肿瘤细胞的杀伤活性研究具有重要的意义。
我们用抗CD3单抗与肿瘤抗体药物抗Her2进行偶联,使之成为具有特异性结合T细胞和Her2阳性肿
瘤细胞能力的双特异抗体。将抗CD3-Her2双特异抗体与DCCIK细胞孵育后，检测DCCIK细胞对不同肿
瘤细胞的杀伤活性，发现极低剂量的双特异抗体可以使DCCIK细胞对多株肺癌及肝癌细胞（Her2阳性）
的杀伤活性明显增强。同时我们还偶联了抗CD3单抗与多种抗肿瘤抗体药物的双特异抗体，以期靶向
DCCIK细胞到不同的肿瘤细胞并增强其杀肿瘤活性，从而提高DCCIK细胞的临床应用范围和治疗效果。
我们通过将痘苗病毒破坏其TK酶基因等基因修饰方法,构建成靶向肿瘤细胞的痘苗融瘤病毒，将此病
毒与DCCIK细胞共培养后，发现该病毒能在淋巴细胞中扩增而不影响DCCIK的增殖，但是感染痘苗融瘤
病毒的DCCIK细胞对肺癌A549细胞的杀伤活性增强了150倍以上。鉴于DCCIK细胞以及融瘤病毒对肿
卵巢癌干细胞相关表面分子机制研究进展
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卵巢癌干细胞相关表面分子机制研究进展
２０世纪７０年代．有许多研究发现实体肿瘤细胞之间具有异质性．渐渐提出了肿瘤干细胞（ＣＳＣｓ）这一概念。１９９７年Ｂｏｎｎｅｔ等发现ＣＤ３４＋ＣＤ３８ｑ＇ＨＹ一细胞虽只占细胞总数的２％．但具有很强的成瘤性．这是分离的第一个ＣＳＣｓ的表面标记分子，从此ＣＳＣｓ的研究成为热点．陆续的各种肿瘤ＣＳＣｓ表面分子…被发现．如乳腺癌ＣＳＣｓ表面标记分子为“ｎ－／ＣＤ２９“／ＣＤ２４＋．脑胶质瘤肿瘤起始细胞（ｔｕｍｏｒｉｎｉｔｉａｔｉｎｇｃｅｌｌ）的分子标记为ＣＤｌ３３＋／ｍｕｓａｓｈｉ．１＋／ｎｅｓｔｉｎ＋．前列腺癌、胰腺癌、结肠癌、肝癌等都分离出了相应ＣＳＣｓ表面标记分子。对ＣＳＣｓ的研究不光是更多表面分子的发现．还有其具体作用机制．而这些对于指导治疗都有重要意义。１具有ＣＳＣｓ特性的特殊细胞和通道１．１ＳＰ细胞和ＡＢＣＧ通道ＣＳＣｓ细胞可以主动泵出一些特定的荧光探针（Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２），从而不被染色，通过流式细胞仪可以分选出未着色的干细胞．这样的细胞通常为ＳＰ细胞［２］，可应用这种荧光活化细胞分选系统．将不被染色或低染色的ＣＳＣｓ筛选出来，可供进一步研究。１．２ＡＴＰ结合转运蛋白细胞通常表达一些ＡＴＰ结合转运蛋白，即ＡＢＣ家族，包括ＡＢＣＡ、ＡＢＣＢ、ＡＢＣＧ等，利用ＡＴＰ能量将对细胞有毒的外来物质泵出胞外，以达到保护细胞自身的目的。通过ＲＴ—ＰＣＲ分析。ＳＰ细胞表达ＡＢＣＧ２远比非ＳＰ细胞高．与细胞对化疗药物耐药有一定关系，ＡＢＣＧ２＋细胞能分化为ＡＢＣＧ２一细胞［３１，但后者也能分化为ＡＢＣＧ２＋细胞而相互转化．说明ＡＢＣＧ２’细胞中可能也包含部分ＣＳＣｓ；正常干细胞也有这些特性，Ｓｈａｃｈａｆ等［一］还建立了两者相互转化的模型．而且两者在内部分子机制上有很多的相似之处。２含卵巢癌干细胞肿瘤细胞的分离及研究２．１卵巢癌组织中强致瘤性细胞２００５年Ｂａｐａｔ等［５］从一位６３岁四期卵巢癌患者腹水中取得肿瘤组织，分离得到原代卵
干细胞流式鉴定方法
干细胞流式鉴定方法
干细胞流式鉴定方法是通过流式细胞仪（Flow Cytometry，FCM）对干细胞进行细胞表面标志物检测、细胞活力检测、细胞周期分析、细胞因子检测等方法，对干细胞的性质进行鉴定和评估。以下是干细胞流式鉴定方法的主要步骤：
1. 样品准备：将待鉴定的干细胞悬浊液制备成单细胞悬液，用荧光染料标记特异性抗体或标记的细胞因子，用于干细胞的表面标志物检测或细胞因子检测。
2. 流式细胞仪检测：将标记好的干细胞悬浊液加入流式细胞仪的样品管中，通过流式细胞仪进行检测。流式细胞仪通过激光照射样品，产生散射光和荧光信号，通过光电倍增管和电子门技术对信号进行检测和分析。
3. 数据分析和处理：通过流式细胞仪获取的信号数据进行分析和处理，得到干细胞的表面标志物表达情况、细胞活力、细胞周期、细胞因子分泌量等指标。
4. 鉴定结果：根据分析结果，结合干细胞的形态、增殖能力和分化潜能等指标，综合评估干细胞的性质和状态，判断其是否符合相关标准和要求。
需要注意的是，在进行干细胞流式鉴定时，应选择合适的特异性抗体和荧光染料，避免交叉反应和干扰。此外，为了保证鉴定结果的准确性和可靠性，还需要对样品进行质量控制，包括样品的制备、仪器设备的校准和维护等。
CD26+表型卵巢癌SKOV-3细胞侵袭能力的研究
ＣＤ２６ 表型卵巢癌ＳＫＯＶ一３细胞侵袭能力的研究① 中国妇幼保健２０１３年第２８卷 李楠马艳美张梦真② 郑州大学第一附属医院妇产科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室（河南 郑州）４５００５２ 中国图书分类号Ｒ７３７．３１ 文献标识码Ａ 文章编号１００１－４４１１（２０１３）３２－５３５０－０３；ｄｏｉ：１０．７６２０／ｚｇｆｙｂｊ．ｊ．ｉｓｓｎ．１００１—４４１１．２０１３．２８．３５ 【摘要】 目的：研究ＣＤ２６ 表型卵巢癌ＳＫＯＶ一３细胞体外侵袭能力。方法：利用免疫荧光标记物流式分选法（ＦＡＣＳ） 分选ＳＫＯＶ一３细胞系中ＣＤ２６ 表型细胞，并利用ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室进行体外侵袭实验检测ＣＤ２６ 及ＣＤ２６一表型细胞侵袭能力。结 果：ＳＫＯＶ一３细胞系中存在ＣＤ２６ 表型细胞，占７．３％，ＣＤ２６一细胞占９２．７％；ＣＤ２６ 细胞侵袭过人工基底膜细胞数为１１１．５± ７．２７，ＣＤ２６一细胞侵袭过人工基底膜细胞数为６０．２±５．５３，ＣＤ２６ 亚群细胞穿过人工基底膜细胞数强于ＣＤ２６一细胞亚群，差异 有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。结论：ＳＫＯＶ一３细胞系中存在ＣＤ２６ 表型细胞，且ＣＤ２６ 表型细胞侵袭能力强于ＣＤ２６一细胞，提示 ＣＤ２６可能作为卵巢癌干细胞标志物并成为卵巢癌抗转移的新靶点。 【关键词】 卵巢癌ＣＤ２６肿瘤干细胞 Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｔｈｅ ｉｎｖａｓｉｖｅ ａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ＣＤ２６ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ＳＫＯＶ一３ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ ＬＩ Ｎａｎ，ＭＡ Ｙａｈ—Ｍｅｉ，ｚＨＡＮＧ Ｍｅｎｇ—Ｚｈｅｎ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＧｙｎｅｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｏｂｓｔｅｔｒｉｃｓ，ｔｈｅ Ｆｉｒｓｔ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ．ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ ４５００５２，Ｈｅｂａｎ．Ｃｈｉｎａ ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｔｈｅ ｉｎｖａｓｉｖｅ ａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ＣＤ２６ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ＳＫＯＶ一３ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ ｉｎ ｖｉｔｒｏ．Ｍｅｔｈｏｄｓ： ＦＡＣＳ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｉｓｓｏｃｉａｔｅ ＣＤ２６ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ＳＫＯＶ一３ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ：ｔｈｅ ｉｎｖａｓｉｖｅ ａｂｉｌｉｔｉｅｓ ｏｆ ＣＤ２６ ａｎｄ ＣＤ２６一ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ ｏ— ｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ＳＫＯＶ一３ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｉｎｖａｓｉｖｅ ａｓｓａｙ ｗｉｔｈ ｔｒａｎｓｗｅｌ１．Ｒｅｓｕｌｔｓ：ＣＤ２６ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｃｅｌｌｓ ａｃｃｏｕｎｔｅｄ ｆｏｒ ７．３％ｏｆ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ＳＫＯＶ一３ ｃｅｌｌｓ．ａｎｄ ＣＤ２６一ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｃｅｌｌｓ ａｃｃｏｕｎｔｅｄ ｆｏｒ ９２．７％：ＣＤ２６ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ＳＫＯＶ一３ ｃｅｌｌｓ ｉｎｖａｄｅｄ（１ １】．５±７．２７）ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ ｂａｓｉｌａｒ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｃｅｌｌｓ．ｗｈｉｌｅ ＣＤ２６一ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ＳＫＯＶ一３ ｃｅｌｌｓ ｉｎｖａｄｅｄ（６０．２ ４－ ５．５３）ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ ｂａｓｉｌａｒ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｃｅｌｌｓ；ｔｈｅ ｆｏｒｔｎｅｒ ｗａｓ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｌａｔｔｅｒ（Ｐ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＣＤ２６ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｃｅｌｌｓ ｅｘｉｓｔ ｉｎ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ＳＫＯＶ一３ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ．ａｎｄ ｔｈｅ ｉｎｖａｓｉｖｅ ａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ＣＤ２６ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ＳＫＯＶ一３ ｃｅｌｌｓ ｉｓ ｓｔｒｏｎｇｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ＣＤ２６～ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ＳＫＯＶ一３ ｃｅｌｌｓ，ｗｈｉｃｈ ｉｎｄｉｃａｔｅｓ ｔｈａｔ ＣＤ２６ ｍａｙｂｅ ｏｎｅ ｏｆ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｍａｒｋｅｒｓ ａｎｄ ｎｅｗ ｔａｒｇｅｔｓ ｏｆ ａｎｔｉ—ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｏｆ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ． ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】０ｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ；ＣＤ２６；Ｔｕｍｏｒ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ 卵巢癌是女性生殖细胞肿瘤中死亡率最高、预后 最差的一种，其高转移及复发率是根本原因。肿瘤干 细胞学说的提出为肿瘤的治疗提供了新思路，目前已 经从包括卵巢癌在内的多种实体肿瘤中分离培养出具 有干细胞性质的细胞¨Ｊ，其中利用肿瘤表面标志物 分离出具有干细胞性质的肿瘤细胞是目前分离肿瘤干 细胞的重要方法，也是肿瘤干细胞研究中的关键步 骤。但是，卵巢癌干细胞表面标志物的研究目前尚未 统一，该研究通过对细胞表面表达ＣＤ２６（ｄｉｐｅｐｔｉｄｙｌ ｐｅｐｔｉｄａｓｅ １Ｖ，ＤＰＰ１Ｖ）的卵巢癌ＳＫＯＶ一３细胞探索 其是否具有更强的侵袭能力，从而发现新的与卵巢癌 侵袭能力相关的表面标志物。 １资料与方法 、 １．１材料及仪器有卵巢腺癌细胞系ＳＫＯ￣～３（购 自ＡＴＴＣ）、ＣＤ２６一ＦＩＴＣ及同型对照抗体（购自ｅｂｉｏ— ｓｃｉｅｎｃｅ）、新鲜胎牛血清（购自ｈｙｃｌｏｎｅ）、ＲＰＭＩ一 １６４０培养基（购自ｈｙｃｌｏｎｅ）、青霉素、链霉素混合 液（购自索莱宝）、ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室（购自ｃｏｒｎｉｎｇ）、 ①河南省杰出青年基金资助［１０４１００５１０００７］ ②通讯作者Ｅｍａｉｌ：ｗｓｚｍｚ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｌｌ１．ｃｎ ０．２５％胰酶（购自ｈｙｃｌｏｎｅ）ｒｎａｔｒｉｇｅｌ（购自ＢＤ公 司）、苏木素及ＭｏＦｌｏ ＸＤＰ流式细胞分选仪。 １．２细胞培养将人卵巢腺癌细胞系于含有１０％新 鲜胎牛血清的ＲＰＭＩ一１６４０培养基中，置于３７ 、 ５％ＣＯ 饱和湿度恒温培养箱中培养，待细胞覆盖培 养瓶约８０％时消化传代，取对数生长期的细胞进行 试验。 １．３流式细胞分选取对数期生长的卵巢癌ＳＫＯＶ 一３细胞，胰酶消化制备单细胞悬液，用ＰＢＳ调整细 胞浓度至１０ ／ｍｌ；每１００ Ｉｘｌ细胞悬液中加入ＣＤ２６一 ＦＩＴＣ ５．５ ｌ作为实验组，同时等量细胞加入５．５ ｌ 同型对照抗体作为对照组，４℃避光孵育３０ ｒａｉｎ后离 心弃上清，ＰＢＳ冲洗２遍后使用含２％胎牛血清的 ＰＢＳ重新悬浮细胞，上机分选。 １．４体外基底膜侵袭实验小室置于２４孔板内，将 ｍａｔｒｉｇｅｌ与培养基１：５稀释，在上室中每孔加入４Ｏ ｌ 稀释液，使液体均匀覆盖上室膜，３７℃５ ｈ，使基质 胶凝固，使用前使用无血清培养基水化基底膜 ３０ ｒａｉｎ；用无血清培养基调整细胞浓度为２ ｘ ｉ０ ／ｍｌ， 每上室加入２００ １，下室加入６００ ｔｘｌ含２０％胎牛血 清的ＲＰＭＩ一１６４０培养基，放置培养箱中常规培养 ２４ ｈ，甲醇固定１５ ｒａｉｎ，棉签轻轻擦去上室内细胞，
人胃癌细胞株MGC-803侧群细胞的分选与生物学特征
人胃癌细胞株ＭＧＣ一８０３侧群细胞的
分选与生物学特征
俞薇 ，吴婷 ，司今 ，姜伟 ，李锦毅
（１辽宁医学院武警总医院研究生培养基地，北京１０００３９；２武警总医院） 山东医药２０１２年第５２卷第１期
摘要：目的从人胃癌细胞株ＭＧＣ一８０３中分离侧群（ｓＰ）细胞，研究其生物学特征。方法利用流式细胞分选 术（ＦＡＣＳ）从ＭＧＣ一８０３细胞株中分选出ｓＰ细胞和非ｓＰ细胞亚群进行培养，采用克隆形成实验比较两组亚群细胞 的体外增殖能力，ＮＯＤ／ＳＣＩＤ鼠成瘤实验检测两组亚群细胞体内成瘤能力。结果ＦＡＣＳ结果显示，细胞株ＭＧＣ一 ８０３中ｓＰ细胞亚群占总细胞的０．３％～１．２％；ＳＰ细胞体外克隆形成率为（０．８６２±０．０５０）％，非ｓＰ细胞体外克隆 形成率为（０．３２５±０．２０７）％，两者比较Ｐ＜０．０５；ＳＰ细胞最低成瘤数量是１×１０ ／只，非ｓＰ细胞为５×１０ ／只。结 论人胃癌细胞株ＭＧＣ．８０３中存在ｓＰ细胞，其生物学特性与干细胞基本符合。 关键词：胃肿瘤；干细胞；分离；侧群细胞 中图分类号：Ｒ７３５．２ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２—２６６Ｘ（２０１２）叭－０００４－０３
Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｔｈｅ ｓｉｄｅ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌ
ｌｉｎｅｓ ＭＧＣ－８０３
ＹＵ耽 ，ＷＵ死 ，ＳＩ．ｆｉｎ，ＪＩＡＮＧ Ｗｅｉ，ＬＩ．ｆｉｎ—ｙｉ
（１ Ｇｒａｄｕａｔｅ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｌｉａｏｎｉｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｉｎ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ
Ｐｅｏｐｌｅ’Ｓ Ａｒｍｅｄ Ｐｏｌｉｃｅ Ｆｏｒｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００３９，Ｐ．Ｒ．Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｔｈｅ ｓｉｄｅ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ（ＳＰ）ｉｎ ｈｕｍａｎ ｇａｓ— ｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ ＭＧＣ一８０３．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｆｌｕｏｒｅｓｅｎｃｅ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｃｅｌｌ ｓｏｒｔｉｎｇ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｓｏｒｔ ＳＰ ａｎｄ ＮＳＰ ｃｅｌｌｓ ｆｒｏｍ ＭＧＣ一 ８０３ｓ．Ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｉｃｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｔｗｏ ｓｕｂｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｂｙ ｓｐｈｅｒｅ ｆｏｒｍｉｎｇ ａｓｓａｙ．Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｓｕｂ— ｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｔｕｍｏｒ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｉｎ ＮＯＤ／ＳＣＩＤ ｍｉｃｅ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｐｅｒｃｅｎｔ ｏｆ ＳＰ ｃｅｌｌｓ ｗａｓ ０．３％一１．２％．Ｃｌｏｎｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｅｆｆｉ—
微小RNA在肿瘤干细胞中的作用
微小RNA在肿瘤干细胞中的作用
张婷婷;卢朝辉;陈杰
【摘 要】Cancer stem cells are cells with stem cell characteristics within a
tumor. With increased proliferative capabilities, they are able to self-renew
and develop into various cell types, and thus play important roles in the
formation, development, metastasis, and recurrence of tumors. MicroRNAs
are a class of endogenous , small non-protein coding RNA molecules.
Through regulating the expression of genes depending on the
complementation between the microRNAs and their targets, microRNAs
play important roles in various human cancers. This article summarizes
recent research advances in the roles of microRNAs in cancer stem cells.%肿瘤干细胞是肿瘤中具有干细胞特征的细胞群,其具有自我更新能力、无限增殖能力和形成肿瘤中各种组分的多向分化潜能,在肿瘤的形成、发展、转移和复发中发挥重要作用.微小RNA是一种内源性非编码小分子RNA,通过与靶基因的互补配对调控基因表达,广泛参与多种肿瘤的进程.本文主要综述微小RNA在肿瘤干细胞中的作用.
肿瘤干细胞中的Hippo_信号通路研究进展
生物技术进展 2024 年 第 14 卷 第 2 期 211 ~ 220Current Biotechnology ISSN 2095‑2341
进展评述Reviews
肿瘤干细胞中的Hippo信号通路研究进展
赵维坚 ， 徐弘庭 ， 肖向茜 *， 盛望 *
北京工业大学环境与生命学部，北京 100124
摘 要：如何抑制肿瘤细胞的增殖和干性基因的表达已经成为近年来科学家在癌症治疗领域关注的重点之一。肿瘤干细胞(cancer stem cell，CSC)是肿瘤中一类具有自我更新能力的细胞类群，被认为是肿瘤发生过程中的驱动因素之一。Hippo信号通路在生物进化过程中高度保守，且对细胞增殖、组织发育和器官大小具有重要作用。简述了Hippo信号通路
及其在肿瘤干细胞中的作用机制，并对肿瘤的治疗提出了展望，以期为肿瘤干细胞的发展和未来治疗提供参考。
关键词：Hippo信号通路；肿瘤干细胞；靶向治疗
DOI：10.19586/j.20952341.2023.0149
中图分类号：Q291， R730.2 文献标志码：A
Research Progress on Hippo Signaling Pathway in Cancer Stem Cell
ZHAO Weijian ， XU Hongting ， XIAO Xiangqian *， SHENG Wang *
Faculty of Environment and Life， Beijing University of Technology， Beijing 100124， China
Abstract： In recent years， how to inhibit the proliferation of tumor cells and the expression of stem genes has become one of the focus‐es of scientists in cancer treatment. Cancer stem cell （CSC） is a kind of cell group with self-renewal ability in tumors， and is consid‐ered as one of the driving factors in the process of tumorigenesis. The Hippo signaling pathway is a highly conserved signaling pathway in biological evolution that plays an important role in cell proliferation， tissue development， and organ size. In this article， Hippo sig‐naling pathway and its mechanism in cancer stem cell were briefly reviewed， and the prospect of tumor treatment was proposed， in order to provide reference for the development and future treatment of tumor stem cells.