盐水法配血
微柱凝胶法、凝聚胺法及盐水法在交叉配血中的应用探讨
Ｉ ＭＨＧ Ｎ，Ｆ ｅ ｂ ｒ ｕ ａ ｒ ｙ ２ ０ １ ４ ，Ｖ ｏ １ ． ２ ０ Ｎ ｏ ． ４
微柱凝胶 法 、凝 聚胺法及盐水法 在交叉 配血 中的应用探讨
容 文 潮 马碧 蓝 苏明茂 黄 秀华 徐 涛
【 摘要 】 目的 探讨微柱凝胶法 （ Ｍ Ｇ Ｔ）、 凝聚胺法 （ Ｍ Ｐ Ｔ ） 及盐水法交叉配血的灵敏性及
血液 科 。输 血 ４ ０ ０ ７例 次 ， 自体 输 血 １ １ ０例 次 ，异 查 ，而 次侧 阳性标 本 则行 抗人 球蛋 白试 验 。
１ ． １ 临床资料
１ ． ４ 统计学分 析
Ｄ Ｏ Ｉ ：１ ０ ． ３ ７ ６ ０ ／ ｃ ｍａ ． ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ７ － １ ２ ４ ５ ． ２ ０ １ ４ ． ０ ４ ． ０ ３ ３
验配血 中阳性检测率较低 ，可对结果做出及时 、 正确分析及处理 ，从 而可确保 临床输 血安全 【 ２ ］ 。 盐水法配血 ４ １ ０例。所有患者均符合卫生部 ２ ０ ０ ０
年颁布的 《 临床输血技术规范 》中临床输血指征
仪器包括美国强生提供 的微柱
但临床输血 时不规则抗体及假凝集 的存在可导致 要求 。 ＭＧ Ｔ配血 困难 口 】 。因此 ，２ ０ １ ２年 ６月 至 ２ ０ １ ３ 年６ １ ． ２ 仪器与试剂
采用 Ｓ Ｐ Ｓ Ｓ １ ７ ． ０ 统计学软件对
数据进行分析 ，计量 资料 以 （ ± ｓ ） 表示 ，组 间 计量资料采用 ｆ 检验， 组间计数资料采用 检验 ，
作者单位 ：５ ２ ９ ２ ０ ０ 台 山市人 民医院
通信 作者 ：容文潮 ，Ｅ － ｍ ａ ｉ ｌ ：１ ５ ４ ２ ９ １ ２ ６ ６ ＠ ｑ ｑ ． ｃ ｏ ｎ ｒ
2016医学检验技术本科 盐水介质交叉配血
盐水介质交叉配血
【实验原理】
交叉配血试验亦称血液相容性试验，受 血者与供血者的交叉配血反应体系中，若血清 存在针对红细胞膜上ABO血型或其他血型抗 原的IgM抗体时，可直接在离心力作用和盐水 介质条件下，抗原抗体结合而发生肉眼可见的 凝集，亦可在补体参与下进一步引起溶血效应。
盐水介质交叉配血
【注意事项】 2、应用盐水介质交叉配血试验时，出现两血 不相容，应当首先重新进行、溶血标本不得用于交叉配血试验。
盐水介质交叉配血
【注意事项】 4、冬季实验室温度较低时出现红细胞凝集时， 应当排除受血者存在自身冷凝集素。为排除冷 冷凝集素的干扰，可以把主次侧试管放置在 37℃水浴箱内升温一定时间，轻轻摇动试管， 取出试管后立即吸取试管内红细胞悬液放置显 微镜下观察结果；亦可将反应并离心后的主次 侧试管用预温至37 ℃生理盐水洗涤3次，重 新离心后观察结果。
盐水介质交叉配血
【器材、试剂与标本】 1、器材 记号笔、试管、试管架、滴管、 载玻片、离心机、显微镜、玻片； 2、试剂 生理盐水； 3、标本 2-4ml抗凝或不抗凝供血者及受 血者血液标本。
盐水介质交叉配血
【操作步骤】 1、离心供血者、受血者血液标本，使红细胞与 血清分离。用生理盐水洗涤供血者及受血者红细 胞3次，配成3-5%的生理盐水红细胞悬液。 2、取洁净小试管2支，分别标记为主、次侧 管；
盐水介质交叉配血
【实验原理】 由于人类ABO血型抗体是以IgM型为主， 这种抗体可以结合多个盐水介质中悬浮的红细 胞，导致红细胞凝集；也可以激活补体，导致 红细胞膜损伤，出现溶血。此试验主要检查受 血者或献血者血清中是否存在破坏对方红细胞 的不规则完全性（IgM型）或补体依赖性红细 胞抗体；并可以验证ABO血型鉴定是否正确， 确保受血者和献血者血液相容，防止发生急性 输血性溶血反应。
盐水法交叉配血和凝聚胺法交叉配血的效果比较
盐水法交叉配血和凝聚胺法交叉配血的效果比较[摘要]目的：比较盐水法交叉配血和凝聚胺法交叉配血的效果。
方法：从2019年3月至2020年6月，在我院进行输血治疗的患者中选取65例。
规范采集静脉血液5ml，将每份血液标本分为A、B两份，其中标本A采用盐水法交叉配血，标本B采用凝聚胺法交叉配血。
观察主侧和次侧的阳性检出结果，比较凝聚胺法中特异性凝集和非特异性凝集的消失时间。
结果：两种方法在主侧阳性检出率上相近（P＞0.05）；凝聚胺法在次侧的阳性检出率（16.92%）高于盐水法（4.62%），有显著性差异（P＜0.05）。
凝聚胺法交叉配血时，非特异性凝集的消失时间明显短于特异性凝集的消失时间，有显著性差异（P＜0.05）。
结论：交叉配血时采用凝聚胺法能提高次侧阳性检出率，非特异性凝集的消失时间短，可保证输血安全。
关键词：交叉配血；盐水法；凝聚胺法；检出率；特异性凝集输血是临床治疗时的一种常用方法，能维持正常的血液循环，稳定生命体征，降低死亡风险。
输血检验是输血前的必要环节，交叉配血就是一项重要内容，是受血者的血清加供血者的红细胞悬液，以及供血者的血清加受血者的红细胞悬液，同时进行凝集试验。
交叉配血的目的，是验证供血者和受血者的ABO血型鉴定是否正确，防止出现溶血等输血反应，从而提高输血安全性[1]。
目前用于交叉配血的方法较多，如何选择成为检验人员的关注重点。
本研究选取我院于2019年3月至2020年6月接诊的65例患者作为对象，对比了盐水法交叉配血和凝聚胺法交叉配血的效果，资料报告如下。
1资料与方法1.1 临床资料从2019年3月至2020年6月，在我院进行输血治疗的患者中选取65例。
其中有34例是男性，有31例是女性，构成比为52.31%、47.69%；最小的患者有19岁、最大的患者有70岁，计算平均值为（43.15±12.09）岁；输血原因：车祸伤27例、手术失血18例、产后出血9例、贫血6例、其他5例。
医院输血科交叉配血(盐水法)标准操作程序
输血科交叉配血（盐水法）标准操作程序
（原理）交叉配血主要是检查受血者血清中有无破坏供血者红细胞的抗体，故受血者血清加供血者红细胞相配的一管称为“主侧”，供血者血清加受血者红细胞相配的一管称为“次侧”，两者合称交叉配血。
交叉配血试验又称不配合性试验，是确保患者安全输血必不可少的试验，完整的操作规程应包括：①查阅受血者以前的血型检查记录，如与这次检查结果有所不同，应及时分析原因；②对收到的受血者血样应作ABO正反定型，RH(1)定型及血型抗体检测和鉴定；③选择预先进行血型检查的合格供血者作交叉配血试验。
交叉配血方法：
（一）盐水介质配血法
本法是目前最常用的配血方法，可以发现临床上最重要的ABO不配合性，当受血者和供血者细胞经混合并离心后，如有ABO不配合问题，就会很快显示出来，所以常称为“立即离心”配血试验。
[操作]
1、抽取受血者静脉血3-4ml，待凝固后分离血清，并配制2%-5%台红细胞盐水悬液。
2、将供血者血样以同样方法分离血清，并配制2%-5%红细胞悬液。
3、取洁净水试管2支，1支标明受血者血清（PS）+供血者细胞（DC）作“主侧”，另1支标明供血者血清（DS）+受血者细胞（PC）作“次侧”。
4、按标记“主侧”管如受血者血清2滴和供血者红细胞悬液1滴。
“次侧”管如供血者血清2滴和受血者红细胞悬液1滴混匀，以1000r/min离心1min，轻轻侧动试管，观察结果，冬季气温较低，应将试管保温，以防
冷凝集素引起的凝集反应影响结果判断。
ABO同型配血，“主侧”和“次侧”均无溶血及凝集表示无输血禁忌可以输血。
交叉配血试验标准化操作规程盐水法
落石出交叉配血试验标准化操作规程（盐水法）一、目的为保证临床输血的相容性，确保临床输血安全，对全血、红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机采浓缩白细胞悬液等血液成分进行交叉配血试验。
二、方法采用盐水介质试管法； 三、原理交叉配血试验也称配合性试验,只是检查不配合性,使受、供者血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分。
盐水介质交叉配血试验常称立即离心配血试验，将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在盐水介质中进行，只有在任何步骤中不产生溶液血或凝集时方可将供血者的血液或血液成分给受血者输注。
试验通常包括：主侧交叉配血试验：受血者血清对供血者红细胞，是检测受血者血清中是否存在与供血者红细胞发生反应的抗体；次侧交叉配血试验：受血者红细胞对供血者血清，是检测供血者血清中是否存在与受血者红细胞发生反应的抗体；自身对照试验：受血者红细胞对受血者血清，是检测受血者血清中是否存在抗自身红细胞抗体、直接抗球蛋白试验阳性及红细胞缗钱状假阳性的存在。
四、适用范围适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。
五、仪器设备普通离心机；血型专用离心机；六、试剂1、试剂名称：0.9%氯化钠注射液2、试剂生产厂家：湖南科伦制药有限公司；3、批准文号：国药准字H20050061；4、包装规格：500ml/瓶；5、贮藏条件；18-25℃避光保存。
6、有效期：自检定合格之日起二年；七、检测样本要求1、标本类型：静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。
2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程。
3、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。
4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。
八、操作步骤1、将受血者与献血者的红细胞血清分离；2、分别配制受血者与献血者红细胞配成2%盐水悬液；3、取洁净小试管（10mmx60mm）2支，1支标明主侧：受血者血清（PS）+供血者细胞（DC）；另1支标明次侧：供血者血清（DS）+受血者细胞（PC）。
血型鉴定及交叉配血
一、盐水介质法
原理：ABO血型天然IgM类抗体与对应的RBC
抗原特异性结合时，在盐水介质中出现肉 眼可见的凝集。通过判断是否凝集，判断 是否有血型不合的情况
（一）盐水介质法
操作： 1、取两只小试管，标明主和次侧 2、主侧：受血者血浆2滴，献血者红细胞1滴
次侧：献血者血浆2滴，受血者红细胞1滴 3、混匀，离心，1000r/min,离心1min 4、观察结果：轻轻摇动（或捻动）试管，使沉于管底的RBC
中可产生负电荷，中和红细胞表面的负电荷，减 轻细胞间排斥力，缩短红细胞距离，在离心力作 用下，可使红细胞发生发生可逆性、非特异性凝
集。低离子液可降低可增强抗原、抗体间的吸引
力，促进血型抗体与红细胞膜上相应抗原结合。
离心后加入再悬液（枸橼酸钠），可中和聚凝胺
的正电荷，正常红细胞表面恢复表面的负电荷， 使非特异性凝集散开，而特异性的抗原抗体结合 引起的凝集仍然存在。
Rh（D）血型鉴定
原理：IgM型抗D标准血清与被检者RBC表面D抗原在
室温条件下盐水介质中产生特异性反应，根据是否 出现凝集判断是否有D抗原的存在。
Rh（D）血型鉴定
加抗D血清1滴
加红细胞悬 液1滴（5%）
轻轻摇动玻片混匀， 2min内判断结果， 有凝集（＋），无凝 集需按照说明书进一 步实验确认是否为阴 性
浮起，观察有无凝集或溶血，
如上层清亮，管底有RBC凝块，轻弹管底，凝块无散开，为 凝集（＋）；
如上层清亮，管底有RBC沉积，边缘整齐，轻弹管底，RBC浮 起或成为均匀的RBC悬液，则为不凝集（一）；
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
（二）聚凝胺介质法
原理：聚凝胺是一种高价阳离子多聚物，在液体
血型鉴定、交叉配血操作规程
⾎型鉴定、交叉配⾎操作规程ABO、Rh-D⾎型鉴定操作规程1.⽬的：规范ABO、Rh-D检测的操作过程2. 标本采集：静脉采⾎2ml抗凝⾎,避免溶⾎试剂3. 试剂：长春博讯⽣物技术有限责任公司4.⽅法原理【原理】:标准⾎清中的完全抗体(lgM)抗A、抗B、和抗D能和红细胞表⾯相应的抗原在盐⽔介质中发⽣特异性的凝集反应。
根据红细胞凝聚类型可鉴别出A、B、O、AB四型和RHD阴性或阳性。
5. 操作:⼀、玻⽚法(⼀般只能做正定型)【正定型】:1、取⼀张玻⽚,⽤蜡笔或记号笔将其分为三等份,从左到右每⼀等份左上⾓标明A、B、D,2、对应加⼊抗A和抗B抗D标准⾎清⼀滴;3、分别加PC(患者10—15%红细胞悬液);4、⽤洁净⽵签将试剂和红细胞充分混匀,混合物约2cm2⼤⼩;5、轻轻地连续倾斜转动玻⽚2—5分钟,观察并记录; 【解释】:A端凝集为A型⾎;B端凝集为B型⾎;A、B 端均凝集则为AB型;A、B端均不凝集则为O型;D端凝集则为RH阳性者,⽆凝集则为RH阴性。
备注:玻⽚法可作为ABO⾎型初筛或复检;不适⽤于抗体鉴定和交叉配⾎;不适合检测ABO亚型。
⼆、试管法(盐⽔介质)【原理】:标准的A型和B型红细胞能和受检者⾎清(⾎浆)中相应的抗体发⽣特异性结合,形成⾁眼可见的凝集反应,从⽽可推断出受检者的⾎型。
【材料】:1、标准A型和B型红细胞悬液(浓度4%,商品有售,亦可⾃⾏新鲜配制);2、受试者⾎清或⾎清;3、洁净康⽒试管。
【正定型】:1、取⼆⽀洁净试管分别记上抗A和抗B;2、对应加⼊抗A和抗B⾎清1滴;3、分别加⼊病⼈红细胞悬液1滴(浓度为2%-5%);4、混匀,室温放置5分钟,1000rpm离⼼1分钟,取出观察结果【解释】:轻摇试管,检查是否凝集,抗A、抗B管均凝集,受试者为AB型⾎;抗A、抗B管均不凝集,则为O 型⾎;抗A管凝集则为A型⾎;抗B管凝集则为B型⾎。
【反定型】:1、取⼆⽀试管分别记上AC和BC;2、分别加⼊病⼈⾎清;3、对应加⼊A和B型试剂红细胞;4、混匀室温放置5分钟,1000rpm离⼼1分钟,取出观察结果;【解释】:⾸先检查上清液有⽆溶⾎,然后轻摇试管,检查是否凝集,A、B管均凝集受试者为O型⾎;A、B管均不凝集则为AB型⾎;A管凝集则为B型⾎;B管凝集则为A型⾎。
交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)作业指导书
交叉配血试验标准化操作规程（盐水法）一、目的为保证临床输血的相容性，确保临床输血安全，对红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞等进行交叉配血试验。
二、方法采用盐水介质试管法；三、原理交叉配血试验也称配合性试验,只是检查不配合性,使受、供者血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分。
盐水介质交叉配血试验常称立即离心配血试验，将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在盐水介质中进行，只有在任何步骤中不产生溶液血或凝集时方可将供血者的血液或血液成分给受血者输注。
试验通常包括：（一、）主侧交叉配血试验：受血者血清对供血者红细胞，是检测受血者血清中是否存在与供血者红细胞发生反应的抗体；（二、）次侧交叉配血试验：受血者红细胞对供血者血清，是检测供血者血清中是否存在与受血者红细胞发生反应的抗体；四、适用范围适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。
五、仪器设备普通离心机；血型专用离心机；六、0.9%氯化钠注射液（四川科伦药业股份有限公司）批准文号：国药准字H51021158；有效期：自生产日期之日起三年；七、检测样本要求1、标本类型：静脉血(EDTA－K2真空紫头采血管1支+ 普通红头真空采血管1支)。
2、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。
3、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。
八、操作步骤1、将受血者与献血者的红细胞血清分离；2、分别配制受血者与献血者红细胞配成3 % RBC悬液3% RBC悬液配制：1滴压积RBC + 1.6 ml（40滴）生理盐水3、取一次性试管2支，1支标明主侧：受血者血清（PS）+供血者细胞（DC）；另1支标明次侧：供血者血清（DS）+受血者细胞（PC）。
4、主侧管加受血者血清5滴和供血者红细胞悬液5滴。
次侧管加供血者血清5滴和受血者红细胞悬液5滴。
混匀，以1000r/min离心2min，轻轻侧动试管，观察结果。
冬季室温较低，应将试管保温，以防冷凝集素引起凝集反应影响结果判断。
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1）试管法
①取受血者和供血者血液各2ml，注入一清洁干燥试管内，按常规方法分离血清。
同时留数滴滴加于含少量生理盐水的小试管内，制成5 ％的红细胞生理盐水悬液。
注意要分别标明供血者与受血者的血液管、血清管、红细胞悬液管的姓名。
②另取清洁试管2 支，标明主测和次测。
主测：受血者血清1 滴加供血者红细胞悬液1 滴。
次测：供血者血清1 滴加受血者红细胞悬液1 滴。
③分别混匀，低速沉淀约2 分钟，轻轻摇匀，观察结果。
④结果判定：同型配血，主测、次测均不凝集，表示无配血禁忌，可以输血；异型配血时，主测无凝集，次测凝集，无溶血，可以输给少量。
输异型血时，如次测不凝集，不可以输血，应重新复查血型或追查其原因。
（2）玻片或瓷板法：取玻片或瓷板1 张，注明主测和次测。
主测：受血者血清2 滴加供血者红细胞悬液1 滴。
次测：供血者血清2 滴加受血者红细胞悬液1 滴。
混匀15 分钟后观察结果，结果观察同试管法。
（3）报告方式：交叉配血试验（××法）
①同型配血：受血者姓名×××，血型×型。
供血者姓名×××，血型×型。
受血者血清＋给血者红细胞——无凝集、无溶血。
供血者血清＋受血者红细胞——无凝集、无溶血。
②异型配血：受血者姓名×××，血型×型。
供血者姓名×××，血型×型。
受血者血清十给血者红细胞——无凝集、无溶血。
交叉配血中红细胞悬液和血清的制备方法：
静脉采血3ml，取下针头，将其中的0.4ml注入已加入106mmol/L枸橼酸钠抗凝剂0.1ml的试管中（血液与抗凝剂的比例为4:1），混匀，待用。
剩余血液加入另一支试管中，使其自然凝固。
分离血清备用。
洗涤红细胞：取抗凝血一份，加8－10倍量的生理盐水，颠倒混匀后，1000r/min离心5分钟，弃去上清液，再加入8－10倍量的生理盐水，颠倒混匀后，1000r/min离心5分钟，如此反复三次。
最后弃去上清液后即得压积红细胞。
配制5%红细胞悬液：取压积红细胞1滴，加2ml生理盐水，颠倒混匀即可。
洗涤红细胞的目的：洗脱红细胞表面上残留的血浆蛋白，以免造成血型不符的假象。