交叉配血试验操作流程图微柱凝集法
交叉配血试验标准操作规程
交叉配血试验标准操作规程1目的检测供血者与受血者之间的输血相容性，包括主侧配血与次侧配血，确保输血安全。
2职责血库工作人员负责执行3适用范围适用于盐水介质法、手工凝聚胺法和手工微柱凝胶法交叉配血全过程。
4操作规程4.1原理4.1.1盐水介质法IgM类抗体可以在室温盐水介质中发生凝集反应，使用手工试管法可以判断供、受者间血液的相容性。
4.1.2凝聚胺法凝聚胺交叉配血试验就是利用多聚季胺盐类—凝聚胺携带很多正电荷，中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆性凝集。
无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝集解散，而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能解散，以此来判断供、受者间血液的相容性。
4.1.3手工微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶上端，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
4.2 试剂与器材4.2.1试剂凝聚胺配套试剂、生理盐水、微柱凝胶卡。
4.2.2 器材血清学离心机、卡式专用离心机、光学显微镜、塑料软试管、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、玻片、移液器、一次性移液枪头。
4.3 标本要求4.3.1.患者样本 EDTA抗凝全血或血清，全血量3～5ml，在1760g条件下离心5分钟，离心后无溶血、无凝块、无明显乳糜。
4.3.2.供者标本枸橼酸盐抗凝全血，全血量3～5ml，在1760g条件下离心5分钟，离心后无溶血、无凝块、无明显乳糜。
4.4 操作步骤4.4.1盐水介质法4.4.1.1取两支试管，1支标明“主侧”；另一支标明“次侧”。
4.4.1.2按标记“主侧”管加受血者血浆1滴和供血者2%红细胞悬液1滴；“次侧”管加供血者血浆1滴和受血者2%红细胞悬液1滴。
交叉配血实验笔记
实验八交叉配血试验交叉配血是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清与红细胞混合，观察有无凝集现象（见图4-3-1-1）。
输血时，一般主要考虑供血者的红细胞不要被受血者的血清所凝集；其次才考虑受血者的红细胞不被供血者的血清所凝集。
前者叫交叉配血试验的主侧（也叫直接配血），后者叫交叉配血的次侧（也叫间接配血）。
只有主侧和次侧均无凝集，称为“配血相合”，才能进行输血；如果主侧凝集，称为“配血不合”或“配血禁忌”，绝对不能输血；如果主侧不凝集，而次侧凝集，可以认为“基本相合”，但输血要特别谨慎，不宜过快过多，密切注视有无输血反应。
【实验目的】学习交叉配血的三种常用方法。
【实验对象】人体（学生自愿者）。
【实验器材和药品】1．仪器显微镜，离心机。
2．器械采血针，消毒注射器，双凹玻片，小试管，竹签，棉球，腊笔。
3．药品标准A 血清，标准B 血清，生理盐水，75％酒精，碘酒。
【实验步骤和观察指标】图4-3-1-1 交叉配血示意图（一）红细胞悬浮液的配制按需要型别，取全血1ml，加等渗盐水2 ～3ml，充分摇匀离心沉淀，弃去上清液，然后再加生理盐水2 ～3ml 按上述方法洗涤，共三次，取压积红细胞5 滴，加新鲜等渗盐水4 ml ，即成5 ％红细胞悬液。
（二）交叉配血基本原理见图4-3-1-1 示。
盐水介质交叉配血试验实验原理天然IGM 类血型抗体与对应的红细胞抗原在室温下盐水介质中发生凝集现象。
可以检查供、受者血清中是否存在破坏对方RBC的IgM 抗体（ABO 血型中抗A 抗B 抗体以IgM 抗体为主）。
实验步骤取二试管，分别注明“主”、“次”字样，主侧滴入供血者红细胞悬液一滴和受血者血清一滴；次则滴入受血者红细胞悬液一滴和供血者血清一滴。
混匀后1000rpm 离心1min，取出观察结果。
如两侧均无凝集现象，可多量输血；如主侧无凝集而次侧有凝集只可考虑少量输血；如主侧凝集则不能输血。
低离子聚凝胺介质交叉配血试验实验原理红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，形成 Zeta 电位，Zeta 电位决定红细胞之间的排斥作用。
交叉配血试验标准化操作规程聚凝胺法
交叉配血试验标准化操作规程聚凝胺法一、目的为保证临床输血的相容性,确保临床输血安全,对全血、红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机采浓缩白细胞悬液等血液成分进行交叉配血试验;二、方法采用聚凝胺介质试管法；三、原理聚凝胺法第一步采用低离子强度溶液降低红细胞和抗体反应介质的离子强度,从而减少了红细胞周围的阳离子云,促进带正电荷的IgG抗体与带负电荷的红细胞发生反应,这样大大加快了抗原和抗体反应的速率;第二步通过加入聚凝胺来促使红细胞产生可逆性的非特异性凝聚;聚凝胺是一种多价阳离子溴化己二甲胺多聚物,可以中和红细胞表面的负电荷,使红细胞的Zeta电位降低,从而产生红细胞可逆性的聚集,缩短红细胞之间的距离,让IgG抗体可直接引起红细胞凝聚;第三步加入重悬液,重悬液可中和聚凝胺的作用;可区分由聚凝胺诱发的红细胞之间的非特异性凝聚与由抗原抗体反应所致的特异性凝聚;四、适用范围适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分;五、仪器设备普通离心机；血型专用离心机；六、试剂1、试剂名称：快速聚凝胺试剂盒2、试剂生产厂家：珠海贝索生物技术有限公司；3、批准文号：国食药监械准字2009第3400076号；4、包装规格盒：低离子强度溶液LIM 49ml×2；聚凝胺溶液Polybrene Solution 15ml×1；重悬液Resuspending Solution 15ml×1；4、贮藏条件；2-8℃避光保存;5、有效期：自检定合格之日起2年；七、检测样本要求1、标本类型：静脉血EDTA抗凝剂:血液=1:10;2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程;3、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时;4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染,严重溶血等不能测定;八、操作步骤1、收集标本,严格进行查对无误后,分离血清浆;2、取10mmx60mm洁净小试管2支,分别标明主次侧管;3、主次侧管加入受供血者血清浆1滴,加供受血者3-5%红细胞悬液1滴;4、向各管加低离子强度溶液,混匀,静置30-60秒；5、向各管加聚凝胺溶液1滴,混匀,3000r/min离心15秒,轻轻摇均,肉眼可见明显的凝集状如无凝集须重做；6、向各管中加重悬液1滴于管底,轻轻摇起观察结果;1分钟内凝集消失呈均匀混悬液,如反应很弱,应镜下观察并与阴性对照比较;镜下无凝集红细胞为阴性, 1分钟内凝集不消失,既为阳性,7、阴性结果表明受血者与献血者血型相合；阳性结果表明受血者与献血者血型不相合九、质量控制1、此检测项目应参加卫生部临床检验中心组织的室间质评,且成绩合格；2、每日做室内质量控制,且要求在控;3、严格执行查对制度,判断结果后应仔细核对、记录,避免笔误等引起的差错;4、交叉配血标本应在2～8℃保存留一周,以备复查;十、生物参考区间相合,不相合;十一、注意事项与干扰因素1、本方法可结合盐水介质交叉配血相合后进行临床发血;2、交叉配血标本必须正确有标识,其血液量、红细胞或血浆的质量符合实验要求和受血者当前的免疫学状态；3、交叉配血试验血样要求是输血前3天内的血样预防受血者在输血前的3个月之内可能有妊娠或输血等免疫史而可能产生不规则抗体;4、标本血液离体后要求尽快送检,至检测完毕最长不能超过3d,每次检测后受血者和供血者的血标本应在2℃～8℃保存7天；5、试剂使用前应仔细检查试剂的贮存条件是否符合要求、是否变质失效；6、患者使用的药物影响的处理：如果使用右旋糖酐、PVP等治疗,应注意将红细胞洗涤；如果受者使用肝素治疗,则应用硫酸鱼精蛋白对抗,使样本凝结；7、交叉配血试验不相合时应注意红细胞缗钱状的假阳性鉴别,可结合盐水介质交叉配血试验镜下观察或离心去上清液后重悬观察;8、抗体筛选试验阴性,而交叉配血结果阳性,提示有未检测明的同种抗体存在;9、交叉配血结果不相合提示有未查明的同种抗体存在;10、注意交叉配血试验过程中离心力、温度、红细胞浓度、抗原抗体的比例；11、血清或血浆中如含有溶血性抗体,则相应红细胞被溶解而不凝集,交叉配血结果阳性,如排除标本中补体干扰因素的影响,可来活后重新试验;12、注意在室温反应中或抗球蛋白试验中显示有自身抗体,应加做自身对照试验或直接抗人球蛋白试验加以鉴别;十二、参考文献1、胡丽华主编,临床输血检验,第1版;中国医药科技出版社,2004；2、叶应妩,等主编,全国临床检验操作规程,第3版;东南大学出版社,2006,11；3、安万新主编,输血技术学,第1版.科学技术文献出版社,2006,9；4、聚凝胺试剂盒说明书;。
输血科交叉配血操作流程
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交叉配血操作流程
交叉配血血标本采集操作流程用物：常规消毒盘一个，采血针头、止血带、试管（浅紫色）、小垫、用血申请单、血型检验报告单、试管标签、医嘱变更单、交叉配血登记表、病历、手套、手消毒液评估着装，洗手。
现在接到医嘱要为30床张丽贫血血色素低至60g/L的病人进行静脉输血。
输血前要先进行交叉配血血标本采集。
双人核对医嘱。
核对内容（用血申请单、血型检验报告单、试管标签、变更单，患者的床号、姓名、年龄、性别、住院号、凝血四项和免疫三项结果均无异常，患者已经签定输血知情同意书）核对完毕。
拿病历到病房评估病人。
进病房后核对床头卡和床号。
护士：阿姨你好，我是你今天的主管护士，我叫XXX，你可以叫我XX。
请问你叫什么名字？病人：张丽。
护士：可以给我看一下你的手腕带吗？病人：可以。
查看病人手腕带.护士：张阿姨你好，请问你现在觉得怎么样了？病人：有点头晕护士：哦，这位是你的家属吧，那我就跟你和你的家属先说一下，头晕是跟你贫血有关，你早上抽血血色素只有60g/L，现在医生开了备血医嘱，准备要给你输血，通过输血可以缓解你的症状，请问你以前输过血吗？病人：没有护士：请问你以前有没有对什么过敏（药物、食物等）病人：没有护士：谢谢。
为了输血安全，每次输血前都要进行交叉配血试验，交叉配血试验就是从你身体抽出2ml的血液和献血者的血液进行配合试验，如果两者无发生凝集反应，就可以输血了。
请问你明白了吗？病人：明白护士：张阿姨，可以先让我检查一下你的肢体及血管吗？病人：可以护士：肘关节这里的皮肤没有破损，无瘀斑。
血管弹性好，血管充盈，待会我就在这个位置给你抽血好吗？病人：好的护士：张阿姨，请问在抽血之前需要我协助你去大小便吗？病人：不用护士：好的。
那请你稍等一下，我先回去准备一下用物。
待会就过来帮你抽血。
病人：嗯。
评估环境，光线充足，清洁安静，适合无菌操作，便于抢救。
回到治疗室，检查用物在有效期内可以使用，洗手，戴口罩。
双人携病人和变更单到病房。
聚凝胺交叉配血技术示意图
聚凝胺交叉配血技术示意图2
1 红细胞上已有不完全 抗体致敏
2 加入聚凝胺后，缩短红 细胞之间的距离，让不完 全抗体可以同时与两个红 细胞结合使其特异性凝集
3 加入枸橼酸钠中和聚凝胺
4 由于不完全抗体的 结合，红细胞的特异 性凝集不消失
聚凝胺 枸橼酸钠 原理：聚凝胺（Polybrene），一种高价阳
离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多正 电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使 红细胞之间距离减少，能引起正常红细胞 可逆性的非特异性凝集。如果使抗体致敏 的红细胞被聚凝胺凝集，则凝集不可逆。
聚凝胺交叉配血技术示意图1
1 红细胞间有一定间距 2 加入聚凝胺后，可以 缩短红细胞之间的距离， 使其非特异性凝集 3 加入枸橼酸钠，可以 中和聚凝胺 4 红细胞的非特异性 凝集消失
交叉配血操作规范(微柱凝胶法)
交叉配血操作规范（微柱凝胶法）【操作人员】经批准人授权的同志【部门主管】【质量控制员】【目的】保证测试结果的准确性。
【适用仪器范围】BYZ型血库血清学多用离心机，2002-2型血库专用离心机,FYQ免疫微柱孵育器。
【该SOP变动程序】该标准操作程序的更改，可由任一使用本程序的操作人员提出并报请专业主管及科主任签字后生效。
【应用范围】交叉配血微柱凝胶法检测的操作。
【原理、方法、用途】本品采用抗人球蛋白微柱凝胶免疫检测技术，用于交叉配血试验。
在微柱凝胶介质中，红细胞抗原与相应的不完全抗体结合后（致敏红细胞），凝胶中抗人球蛋白形成凝集块，离心后仍滞留在胶上或胶中，而未和抗体结合的红细胞则完全沉于凝胶底部。
该方法使试验更简单，更规范，结果更易判定。
本品系由聚丙烯塑料透明卡片的六支微柱型管中充满葡聚糖凝胶和抗人球蛋白，制成抗人球蛋白微柱凝胶试剂卡。
【标本采集和处理】1．由临床科室采用真空负压EDTA K2抗凝管采集3ml-5ml，作好标记，立即送检。
备血使用的受血者标本必须是输血前2天之内的血样。
采血时要防止溶血及多量组织液混入（多发生在静脉穿刺不顺利勉强抽血时），在病人输液时采集标本，必须从未输液的一侧肢体抽取，绝不允许在输液管接头处采集。
2．非急症病人输血前，应事先采取血标本作血型鉴定，填写申请单配血单上，以便核对。
急症抢救输血，未能事先采血检测血型，则要求由专人核对、贴标签、采取血标本送检。
3. 检验人员认真核对患者姓名、性别、床号、检验目的以及标本是否与申请单一致。
确认无误后用专用记号笔在试管与申请单上编写对应数字序号。
并按日期索引进行登记。
4. 将标本置于2002-2型血库专用离心机内，放置保证平衡，以1500转/min 离心10分钟。
保证血浆于血球有效分离。
溶血标本应重采取、乳糜血及标本量不足应加以登记，溶血性疾病应注明。
【试剂】抗人球蛋白微柱凝胶试剂卡。
【操作步骤】1．取出抗人球蛋白微柱凝胶试剂卡，应注明病人姓名、科室和床号。
交叉配血标准操作规程
交叉配血标准操作规程(一)检验目的检测供血者与受血者之间的输血相容性，包括主侧配血与次侧配血，确保输血安全。
(二)检验原理1.凝聚胺法利用多聚季胺盐类——凝聚胺携带很多正电荷，中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆性凝集。
无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝集消散，而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能消散，以此来判断供、受者间血液的相容性。
2.微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶上端，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
3.玻璃珠微柱法微柱卡的每一个微管中装填有直径均一的玻璃微珠和抗人球蛋白试剂(抗-IgG和抗补体C3)，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。
(三)适用范围适用于手工凝聚胺法、全自动微柱凝胶法、全自动玻璃珠微柱法交叉配血试验。
(四)设备性能参数各种交叉配血检测系统性能指标参见相应检测系统说明书。
(五)器材与试剂1.器材KA-2200血清学专用离心机、B600-A型低速离心机、WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro Au-toVuelnnova全自动血型及配血系统、阅片灯箱、光学显微镜、塑料软试管、塑料硬质试管(100m m×l2mm和75m m ×l2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。
血型鉴定、交叉配血操作规程
⾎型鉴定、交叉配⾎操作规程ABO、Rh-D⾎型鉴定操作规程1.⽬的：规范ABO、Rh-D检测的操作过程2. 标本采集：静脉采⾎2ml抗凝⾎,避免溶⾎试剂3. 试剂：长春博讯⽣物技术有限责任公司4.⽅法原理【原理】:标准⾎清中的完全抗体(lgM)抗A、抗B、和抗D能和红细胞表⾯相应的抗原在盐⽔介质中发⽣特异性的凝集反应。
根据红细胞凝聚类型可鉴别出A、B、O、AB四型和RHD阴性或阳性。
5. 操作:⼀、玻⽚法(⼀般只能做正定型)【正定型】:1、取⼀张玻⽚,⽤蜡笔或记号笔将其分为三等份,从左到右每⼀等份左上⾓标明A、B、D,2、对应加⼊抗A和抗B抗D标准⾎清⼀滴;3、分别加PC(患者10—15%红细胞悬液);4、⽤洁净⽵签将试剂和红细胞充分混匀,混合物约2cm2⼤⼩;5、轻轻地连续倾斜转动玻⽚2—5分钟,观察并记录; 【解释】:A端凝集为A型⾎;B端凝集为B型⾎;A、B 端均凝集则为AB型;A、B端均不凝集则为O型;D端凝集则为RH阳性者,⽆凝集则为RH阴性。
备注:玻⽚法可作为ABO⾎型初筛或复检;不适⽤于抗体鉴定和交叉配⾎;不适合检测ABO亚型。
⼆、试管法(盐⽔介质)【原理】:标准的A型和B型红细胞能和受检者⾎清(⾎浆)中相应的抗体发⽣特异性结合,形成⾁眼可见的凝集反应,从⽽可推断出受检者的⾎型。
【材料】:1、标准A型和B型红细胞悬液(浓度4%,商品有售,亦可⾃⾏新鲜配制);2、受试者⾎清或⾎清;3、洁净康⽒试管。
【正定型】:1、取⼆⽀洁净试管分别记上抗A和抗B;2、对应加⼊抗A和抗B⾎清1滴;3、分别加⼊病⼈红细胞悬液1滴(浓度为2%-5%);4、混匀,室温放置5分钟,1000rpm离⼼1分钟,取出观察结果【解释】:轻摇试管,检查是否凝集,抗A、抗B管均凝集,受试者为AB型⾎;抗A、抗B管均不凝集,则为O 型⾎;抗A管凝集则为A型⾎;抗B管凝集则为B型⾎。
【反定型】:1、取⼆⽀试管分别记上AC和BC;2、分别加⼊病⼈⾎清;3、对应加⼊A和B型试剂红细胞;4、混匀室温放置5分钟,1000rpm离⼼1分钟,取出观察结果;【解释】:⾸先检查上清液有⽆溶⾎,然后轻摇试管,检查是否凝集,A、B管均凝集受试者为O型⾎;A、B管均不凝集则为AB型⾎;A管凝集则为B型⾎;B管凝集则为A型⾎。
微柱凝胶卡式法交叉配血试验标准操作规程
微柱凝胶卡式法交叉配血试验标准操作规程1、目的为规范输血科交叉配血试验的技术操作，确保鉴定结果准确及临床输血安全有效，依据《输血实验室管理程序》4.1.7条款的要求制定本规程。
2、适用范围本文件适用于本院输血科进行交叉配血的操作技术的规范化管理。
3、职责：输血科技术人员负责本实验的技术操作。
4、试验方法及原理4.1试验方法：凝胶测试法4.2原理：本微量定型系统凝胶测试法基于生物化学凝胶过滤技术和离心技术及免疫化学抗原抗体特异反应。
当抗原抗体反应，抗人球试验时，血细胞发生凝集。
离心时凝集块不能通过凝胶间隙而留在凝胶上层，呈阳性反应，未凝集细胞离心时可通过凝胶间隙而沉积在凝胶管底部，呈阴性反应。
5、样本采集和处理受血者血样为EDTA-K2抗凝血。
抽取受血者静脉血3~4ml于专用管（紫色头管）内，分离出血浆。
红细胞配成0.8%的悬液，供血者血样以同样方法分离血浆，并配制0.8%红细胞悬液。
配血所用受血者血样必需是输血前3天内的。
6、试剂：6.1 0.9%的生理盐水；6.2戴安娜合血卡；7、仪器：7.1XTL-4.7细胞洗涤离心机；7.2DiaMed-ID Incubator 37 SⅠ温育器；7.3DiaMed-ID Centrifuge 12 SⅡ8、操作程序：8.1工作准备：8.1.1生理盐水室温平衡。
准备样本。
标记合血卡。
8.1.2 0.8%-1%样本红细胞制备：加25μl样本压积红细胞悬浮液于2ml戴安娜2号稀释液中。
8.1.3于1号管中（主侧）加入50μl献血者红细胞（0.8%）。
25μl受血者血浆或血清。
8.1.4 2号管中（次侧）加入50μl受血者红细胞（0.8%）。
25μl献血者血浆或血清。
8.1.5 37℃孵育15分钟。
8.1.6 离心10分钟。
判断结果，并作好记录。
9、结果判断：1+至4+为抗人球配血不相容；—（0）为配血相容，可以输注。
10、医学解释：ABO交叉配血试验是检查供、受血者血液中是否含有不相合的抗原和抗体成分的试验。