盐水介质交叉配血标准操作规程

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交叉配血试验标准操作规程

交叉配血试验标准操作规程

交叉配血试验标准操作规程1目的检测供血者与受血者之间的输血相容性,包括主侧配血与次侧配血,确保输血安全。

2职责血库工作人员负责执行3适用范围适用于盐水介质法、手工凝聚胺法和手工微柱凝胶法交叉配血全过程。

4操作规程4.1原理4.1.1盐水介质法IgM类抗体可以在室温盐水介质中发生凝集反应,使用手工试管法可以判断供、受者间血液的相容性。

4.1.2凝聚胺法凝聚胺交叉配血试验就是利用多聚季胺盐类—凝聚胺携带很多正电荷,中和红细胞表面的负电荷,使红细胞之间距离减少,引起正常红细胞可逆性凝集。

无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集,当加入中和液后,则凝集解散,而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集,则不能解散,以此来判断供、受者间血液的相容性。

4.1.3手工微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂,红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后,在离心力的作用下不断向管底沉降,并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集,凝胶颗粒具有分子筛的作用,可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒,使其悬浮在凝胶上端,未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。

4.2 试剂与器材4.2.1试剂凝聚胺配套试剂、生理盐水、微柱凝胶卡。

4.2.2 器材血清学离心机、卡式专用离心机、光学显微镜、塑料软试管、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、玻片、移液器、一次性移液枪头。

4.3 标本要求4.3.1.患者样本 EDTA抗凝全血或血清,全血量3~5ml,在1760g条件下离心5分钟,离心后无溶血、无凝块、无明显乳糜。

4.3.2.供者标本枸橼酸盐抗凝全血,全血量3~5ml,在1760g条件下离心5分钟,离心后无溶血、无凝块、无明显乳糜。

4.4 操作步骤4.4.1盐水介质法4.4.1.1取两支试管,1支标明“主侧”;另一支标明“次侧”。

4.4.1.2按标记“主侧”管加受血者血浆1滴和供血者2%红细胞悬液1滴;“次侧”管加供血者血浆1滴和受血者2%红细胞悬液1滴。

血库凝聚按法交叉配血操作规程及血库收发标本制度

血库凝聚按法交叉配血操作规程及血库收发标本制度

交叉配血操作规程交叉配血试验(凝聚胺法)[原理]凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清(浆)中的抗体反应,再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集,让已有抗体(IgG)反应的红细胞间的距离缩短。

距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成免疫性的凝集。

而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的复悬液所中和而散开,如有免疫反应,凝集就不会散开,为阳性反应。

如没有免疫反应,凝集就会散开,为阴性反应。

交叉配血试验是在盐水介质的基础上加入凝聚胺,检测供患之间是否相合,患者血清(浆)中是否含有具临床意义的红细胞异体抗体。

[试剂组成]1,洁净试管,离心机,显微镜。

2,0.85% 氯化钠溶液:准确称取氯化钠(AR)8.5 g,用蒸馏水溶解并定容至1000 ml。

试剂启用后,有效期为:二周。

3,凝聚胺试剂*1 低离子介质溶液:含葡萄糖,乙二胺四醋酸-2钠及稳定剂。

*2 凝聚胺溶液:含凝聚胺,氯化钠及稳定剂。

*3 复悬液:含柠檬酸钠,葡萄糖及稳定剂。

*4 阳性对照血清:含抗D血清,氯化钠及稳定剂。

4,抗人IgG 血清。

[试剂保存和稳定性]1.凝聚胺试剂须保存在2-25℃。

2.有效期内可使用。

3.抗人IgG血清低温冰箱保存。

复溶后放2—4℃冰箱保存。

[标本收集和准备]1.抽取受血者静脉血3-4ml(操作中小心防止红细胞破损),放入一已贴标签干燥洁净的试管中为血清管(也可用EDTA-K2抗凝血液),并将注射器中余下的少量血液配成2%红细胞生理盐水悬液,放入另一已贴标签干燥洁净的试管中为红细胞悬液管。

以上标本有效期为三天;若受血者抽取标本后,输用过血液或血液制品,且输用时间超过12 小时的,必须重新采集标本。

2.2% 红细胞悬液:用生理盐水洗涤红细胞3次。

根据下表进行红细胞悬液的配制。

悬液浓度(%)压积红细胞(滴)盐水(滴)----------------------------------------------------------------2 1 2ml(40)5 1 0.8ml(16)----------------------------------------------------------------[操作步骤]1.取出3支试管分别标记主,次及对照测试:主测管:加入病人血清(浆)2滴,再加入供血者3-5%红细胞悬液1滴,次测管:加入供血者血清(浆)2滴,再加入病人3-5%红细胞悬液1滴,对照管:加入2滴*4阳性对照血清,再加入供血者3-5%红细胞悬液1滴。

盐水凝聚胺介质交叉配血试验

盐水凝聚胺介质交叉配血试验

一盐水介质交叉配血试验1. 原理盐水介质配血法是目前最常用的配血方法,可以发现临床上最重要的ABO 不配合性。

本试验主要用以检测受血者(献血者)血清(浆)中有无破坏献血者(受血者)红细胞的抗体。

如存在相应的抗体,则交叉管中将发生凝集或溶血现象,此即为交叉不合,反之则交叉相合。

2. 操作(单位:滴)混匀,1000~2000rpm×1~2分钟离心,观察结果。

3.结果观察3.1主、次、混合管均无凝集,无溶血现象,示无配血禁忌,继续下一步进行聚凝胺法或抗人球蛋白法。

3.2主、次、混合管均有凝集和/或溶血现象,示有配血禁忌,需进一步核查,寻找原因。

3.3主、混合管有凝集和/或溶血现象,示有配血禁忌,需进一步检查,寻找原因。

次、混合管有凝集和/或溶血现象,示有部分配血禁忌,需进一步检查,寻找原因。

4.注意事项4.1结果观察时,除肉眼观察外,均需显微镜观察。

4.2要注意真、假凝集的鉴别。

二凝聚胺试验1.原理:凝聚胺(Polybrene)是一种多价阳离子溴化己二甲胺多聚物,具有中和肝素作用:又称肝素灵,溶解后产生许多正电荷,能中和红细胞表面唾液酸所带的负电荷,使红细胞的Zeta电位降低,诱发红细胞产生可逆的非特异性凝聚。

在此过程中,若有IgG分子已直接与红细胞搭桥,当非特异性的红细胞凝聚消散后,只有由抗原抗体引起的搭桥的特异性凝集仍存在。

反应分三个步骤:1.1.红细胞致敏阶段:红细胞在低离子培育基中与相应抗体致敏。

1.2.凝聚阶段:聚凝胺使红细胞非特异性地紧密接近,诱发凝聚现象,因而允许抗体与相应抗原形成桥连。

1.3.再悬阶段:再悬液具有中和聚凝胺的作用,使聚凝胺诱发的非特异性凝聚散开,留下抗原抗体反应所致的特异性凝集不能散开,凝集的强度与抗体的浓度、抗原的浓度及反应的导热特性有关。

2、操作步骤:2.1、在盐水法通过的基础上,在主、次管均加入低离子介质4滴,混合后置于室温1分钟。

2.2、在主、次管均加入聚凝胺溶液2滴,混合后,室温15秒。

2016医学检验技术本科 盐水介质交叉配血

2016医学检验技术本科  盐水介质交叉配血
盐水介质交叉配血
盐水介质交叉配血
【实验原理】
交叉配血试验亦称血液相容性试验,受 血者与供血者的交叉配血反应体系中,若血清 存在针对红细胞膜上ABO血型或其他血型抗 原的IgM抗体时,可直接在离心力作用和盐水 介质条件下,抗原抗体结合而发生肉眼可见的 凝集,亦可在补体参与下进一步引起溶血效应。
盐水介质交叉配血
【注意事项】 2、应用盐水介质交叉配血试验时,出现两血 不相容,应当首先重新进行、溶血标本不得用于交叉配血试验。
盐水介质交叉配血
【注意事项】 4、冬季实验室温度较低时出现红细胞凝集时, 应当排除受血者存在自身冷凝集素。为排除冷 冷凝集素的干扰,可以把主次侧试管放置在 37℃水浴箱内升温一定时间,轻轻摇动试管, 取出试管后立即吸取试管内红细胞悬液放置显 微镜下观察结果;亦可将反应并离心后的主次 侧试管用预温至37 ℃生理盐水洗涤3次,重 新离心后观察结果。
盐水介质交叉配血
【器材、试剂与标本】 1、器材 记号笔、试管、试管架、滴管、 载玻片、离心机、显微镜、玻片; 2、试剂 生理盐水; 3、标本 2-4ml抗凝或不抗凝供血者及受 血者血液标本。
盐水介质交叉配血
【操作步骤】 1、离心供血者、受血者血液标本,使红细胞与 血清分离。用生理盐水洗涤供血者及受血者红细 胞3次,配成3-5%的生理盐水红细胞悬液。 2、取洁净小试管2支,分别标记为主、次侧 管;
盐水介质交叉配血
【实验原理】 由于人类ABO血型抗体是以IgM型为主, 这种抗体可以结合多个盐水介质中悬浮的红细 胞,导致红细胞凝集;也可以激活补体,导致 红细胞膜损伤,出现溶血。此试验主要检查受 血者或献血者血清中是否存在破坏对方红细胞 的不规则完全性(IgM型)或补体依赖性红细 胞抗体;并可以验证ABO血型鉴定是否正确, 确保受血者和献血者血液相容,防止发生急性 输血性溶血反应。

交叉配血试验标准操作规程(微柱凝集法)

交叉配血试验标准操作规程(微柱凝集法)

交叉配血试验标准操作规程(微柱凝集法)交叉配血试验标准操作规程(微柱凝集法)一、目的为保证临床输血的相容性,确保临床输血安全,对全血、红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机采浓缩白细胞悬液等血液成分进行交叉配血试验。

二、方法采用微柱凝集法;三、原理将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在微柱检测系统中进行。

微柱检测系统的上端为反应室,将葡萄聚糖凝胶作为凝集反应的介质装入检测卡微柱凝集检测管中,微柱凝集检测管中的凝胶的间隙起分子筛作用。

凝集反应阳性的红细胞凝决留在微柱凝集检测管的上面或中间,反应阴性未凝集的红细胞将通过凝胶的间隙,沉积在微柱凝集检测管的底部。

四、适用范围适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。

五、仪器设备普通离心机;血型血清学多用离心机;37℃免疫微柱孵育器;六、试剂1、试剂名称:抗人球蛋白交叉配血卡(微柱凝集法)2、试剂生产厂家:长春博迅生物技术有限责任公司;3、批准文号:国药准字S2*******;4、包装规格:聚丙烯卡12卡×3检测人份/盒;5、贮藏条件;18-25℃避光保存。

6、有效期:自检定合格之日起12个月;七、检测样本要求1、标本类型:静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。

2、标本采集:见输血科标本管理标准化操作规程。

3、标本储存和运输:新鲜血2~8℃贮存时间不超过72小时。

4、标本拒收状态:标识不准确、标本稀释、细菌污染,严重溶血等不能测定。

八、操作步骤1、将受血者与献血者的红细胞血清分离;2、分别配制受血者与献血者0.5%-0.8%红细胞悬液3、将受血者血清50ul与献血者红细胞悬液50ul加入主侧管中;4、将受血者红细胞悬液50ul与献血者血清50ul加入次侧管中;5、将加样后的试剂卡置37℃免疫微柱孵育器中孵育15分钟;6、使用血型血清学多用离心机900rpm离心2分钟,1500rpm 离心3分钟,取出肉眼观察结果。

交叉配血试验标准化操作规程盐水法

交叉配血试验标准化操作规程盐水法

落石出交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)一、目的为保证临床输血的相容性,确保临床输血安全,对全血、红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机采浓缩白细胞悬液等血液成分进行交叉配血试验。

二、方法采用盐水介质试管法; 三、原理交叉配血试验也称配合性试验,只是检查不配合性,使受、供者血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分。

盐水介质交叉配血试验常称立即离心配血试验,将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在盐水介质中进行,只有在任何步骤中不产生溶液血或凝集时方可将供血者的血液或血液成分给受血者输注。

试验通常包括:主侧交叉配血试验:受血者血清对供血者红细胞,是检测受血者血清中是否存在与供血者红细胞发生反应的抗体;次侧交叉配血试验:受血者红细胞对供血者血清,是检测供血者血清中是否存在与受血者红细胞发生反应的抗体;自身对照试验:受血者红细胞对受血者血清,是检测受血者血清中是否存在抗自身红细胞抗体、直接抗球蛋白试验阳性及红细胞缗钱状假阳性的存在。

四、适用范围适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。

五、仪器设备普通离心机;血型专用离心机;六、试剂1、试剂名称:0.9%氯化钠注射液2、试剂生产厂家:湖南科伦制药有限公司;3、批准文号:国药准字H20050061;4、包装规格:500ml/瓶;5、贮藏条件;18-25℃避光保存。

6、有效期:自检定合格之日起二年;七、检测样本要求1、标本类型:静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。

2、标本采集:见输血科标本管理标准化操作规程。

3、标本储存和运输:新鲜血2~8℃贮存时间不超过72小时。

4、标本拒收状态:标识不准确、标本稀释、细菌污染,严重溶血等不能测定。

八、操作步骤1、将受血者与献血者的红细胞血清分离;2、分别配制受血者与献血者红细胞配成2%盐水悬液;3、取洁净小试管(10mmx60mm)2支,1支标明主侧:受血者血清(PS)+供血者细胞(DC);另1支标明次侧:供血者血清(DS)+受血者细胞(PC)。

盐水介质交叉配血标准操作规程

盐水介质交叉配血标准操作规程

盐水介质交叉配血标准操作规程
一、检验项目名称:盐水介质交叉配血
二、检验原理:交叉配血试验系指检查受血者、献血者的看
远及抗体成分是否相容,以及是否含不规则抗体等,以
保证安全输血。

三、试剂:0.9%生理盐水
四、操作步骤:
1.抽取受血者静脉血3-5ml待凝固后分离血清,并制
备2%盐水悬液。

2.将供血者血样以同样方法分离血清,并配制2%红细
胞悬液
3.取洁净小试管(10×60mm)2支,一支标明受血者
血清(PS)+供血者细胞(DC)或‘主侧’;另一支
标明供血者血清(DS)+受血者细胞(PC)或‘次
测’。

4.按标记‘主侧’管加受血者血清1滴和供血者红细
胞悬液1滴。

‘次测’管加供血者血清1滴和受血
者红细胞悬液1滴。

混匀以1000r/min离心1min,
轻轻侧动试管,观察结果。

冬季室温较低,应将试
管保温,以防冷凝集反应影响结果判断。

5.ABO同型配血,‘主侧’和‘次测’均无溶血及凝集
表示无输血禁忌,可以输血。

交叉配血盐水介质法实验方法和步骤

交叉配血盐水介质法实验方法和步骤

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盐水介质交叉配血标准
操作规程
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盐水介质交叉配血标准操作规程
一、检验项目名称:盐水介质交叉配血
二、检验原理:交叉配血试验系指检查受血者、献血者的看远及抗体成
分是否相容,以及是否含不规则抗体等,以保证安全输血。

三、试剂:%生理盐水
四、操作步骤:
1.抽取受血者静脉血3-5ml待凝固后分离血清,并制备2%盐水
悬液。

2.将供血者血样以同样方法分离血清,并配制2%红细胞悬液
3.取洁净小试管(10×60mm)2支,一支标明受血者血清(PS)
+供血者细胞(DC)或‘主侧’;另一支标明供血者血清
(DS)+受血者细胞(PC)或‘次测’。

4.按标记‘主侧’管加受血者血清1滴和供血者红细胞悬液1
滴。

‘次测’管加供血者血清1滴和受血者红细胞悬液1
滴。

混匀以1000r/min离心1min,轻轻侧动试管,观察结
果。

冬季室温较低,应将试管保温,以防冷凝集反应影响结
果判断。

5.ABO同型配血,‘主侧’和‘次测’均无溶血及凝集表示无输
血禁忌,可以输血。

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