中药血清药理学实验方法研究进展

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（７）：９１－９８．
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Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ，１９８８，２３
（收稿日期：２００８－１０－２２）
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Ｂｕｌｌ，１９９２，钧（５）：１３３５—
给药前禁食饮食可能影响中药复方体内动力学和临
床疗效。如食物对口服小柴胡汤者体内甘草甜索、甘草次酸 和黄芩素等的吸收影响明显…。因此应根据中药复方的功 效特点、实验要求，决定给药前禁食与否，并拟订给药后采血 时间。目前，给药前实验动物多禁食６—１２ ｈ，不禁水旧ｏ。 ２．２给药剂量以临床等效剂量为基准，注意适当控制药 物剂量。计算方法包括临床等效剂量、临床常用量×动物等 效面积系数×培养基内血清稀释度，或临床Ｅｔ用量的５、１０、 ３０倍¨３等。对过高剂量（如临床等效剂量５倍或１０倍等） 所得阳性结果，下结论时应慎重或留有余地¨１。 ２．３给药次数包括１次给药Ｂ ｏ；２次给药（间隔２ ｈ或４ ｈ）；１—２次／ｄ，连续３ ｄ¨ｏ；１次／ｄ，连续７～１０ ｄ等。中药复 方制剂的有效化合物含量较低，作用广泛而缓和，可调节机 体多系统功能，起效相对较慢，故ｌ临床用药时间相对较长。 单次给药较多次给药药理活性明显低，或单次给药制备的含 药血清产生作用的给药剂量极大（临床等效剂量５倍以 上）。如单次予桂枝汤水煎剂后１、２、３ ｈ采集的含药血清及 正常血清均有显著抑制副流感病毒Ｉ型致病变作用，且两者 无显著差异，说明血清产生的药效不全是药物作用的结果， 主要是正常血清本身含有的抗病毒成分所致。因此单次给 药后ｌ、２、３ ｈ采血方式不能反映药物本身在体内的作用规 律。每日１次连续３ ｄ给药后采血的方式可反映药效产生 的时间点，突出含药血清本身的作用，基本排除正常血清对
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物口饲给药后采血，观察其对正常或病理状态下离体器官、
万方数据
缀织、缨簸或露处壤养缨憨戆佟震强“Ｊ。僵撬体在不麓状态 下肠道内菌群簇存在差别，而中药复方制剂临床服药对象主 癸是痣嚣装态懿患者；溺ｌ受磊药物经动物豹笺瑾嚣奁器饔病瑾 脏器，如消化道吸收和代谢，尤其是病变肝脏代谢后，由于个 俸差吴或状态不溺，药物鑫身翻视俸产生懿变纯可锈有新差 别，由此爵致作用部位有效成分血药浓度差异。因此，研究瘸 璞状态下含药愈清效应，其结栗可能曼真实择ｌ，病理状态动物 制备的含药血清对体外培养细胞的影响有待进一步探索忙Ｊ。 ２．９含药盔清供体鬻想的体外实骏模銎应最大隈度建模 拟体内环境。迄今为止绝大多数研究均以小鼠、大鼠、豚鼠 或家兔捧为含药血清供体，裰少采用健康志憨者作为含药血 清供体。在血清药理学中，可将血清供体投药后的搬清（血 液）看作含中药有效话健成分的。韫撵物”，由于血清供体的 种属、性别、个体、年龄不同，可导致血清中含中药有效活性 成分的质量差异。 血清药理学作为一釉额兴实验方法，尚荐在诸多问题。 含药血清制备技术的规范化是研究的基础，识血清制备（给 药藏禁食禁水、绘药方案、采蛊时闻秘方式、会药血清的处鬟
１
实验结果的干扰，优于单次给药¨ｊ。中药复方药动力学研究 亦提示多次反复给药，其血药浓度具有持续性。也有研究认 为Ｂ’４ Ｊ，２次给药后采血即可满足实验需要，较７～１０ ｄ连续 用药简便。 ２．４血清标本采集时间不同功效的中药复方，甚至同一 复方的不同剂型口服后吸收速率不同，不同机体同一药物的 吸收程度各异。所以不同采血时间的含药血清，其有效成分 及含量不一致。因此应考虑复方制剂的功效、剂型和机体状 态，如有可能须结合药效动力学或中药复方化学成分的药动 力学参数加以确定。 ２．５含药血清添加方式 目前多选择采用同一种属动物。
中药血清药理学实验方法研究进展
郭功玲，李吉华 （山东中医药大学附属医院，山东济南２５００１１）
［关键词］
中药复方；药理学，血清；实验方法
Ｒ２８５
［中图分类号】
［文献标识码】
Ａ
［文章编号］
１００２．２６６Ｘ（２００８）４８－０１１６－－０２
中药复方成分复杂，其细胞分子水平的药理研究受限。 既往通常将粗提物直接添加于体外细胞培养体系中进行药 理学观察，但某些非药理干扰难以解决，导致体内、外实验结 果和临床疗效不符。以整体动物口饲灌胃给药后采集的含 药血清作用于培养细胞的血清药理学方法，客观模拟了药物 与机体的相互作用，不但能反映中药（母体药物）及其可能 代谢产物的药理作用，还能反映由药物诱导机体内源性成分 所产生的作用，结果更具科学性和可信性，现将该法研究进 展综述如下。
１３３７．
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【４】Ｕｍｅｃｄａ
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穰浓度测定等）乃至添黧方式等其钵掇作方法尚未统一。尽 管如此，中药复方血清药理学研究已引起广泛重视，若能与 芬动力攀轻盎溥蓊纯学协同，并不局限于验诞雅床有效复方 的作用或探讨其机理，而是深入研究复方的西己伍、缀方、剂 量，有哥麓迸一疹指导耩凑治疗，产生燕大彩晌。 ［参考文献］ 【１】Ｎｉｓｈｉｏｋａ Ｙ，Ｋｙｏｔｓｎｉ
表１两鳃治疗前后ＭＭＳＥ、ＡＤＬ评分｛ｉ±ｓ）
注：与治疗前比较，‘Ｐ＜０．０５；墨对照缎比较，。Ｐ＜０．０５
综舍征，为一懂饿进行饿疾病，以认翔、记忆、言语、情感、性 格等精神减退或消失为主要表现。中医学认为该瘸腿本虚 标实，本虚为气瓶阴精匮乏，髓海空虚，脑窍失于濡养，病位 在脑，与心、肝、腺、肾关系密切；标实为风痰瘀血上扰，阻滞脑 络，而气壤血瘀贯穿始终。痰瘀蒙蔽为致病主要因素，补肾、 活血、化痰、开窍安神为主要治法。据此笔者自拟补肾逐瘀 汤，方中枸杞、出菜萸、熟她补臀，黄芪、茯苓健脾，石蓠蒲、远 志歼窍安神，丹参、川芎、桃仁、地龙可加强补肾活血之力，腮 南星、半爱化痰，佃灵脾、何首乌补血盎精，滋翮壮阳并举，溺 中求阳，牧阳填髓。综观全方攻率ｂ兼施，标本兼治，先履天并 溺。本研究观察缀ＶＤ艇表评分改善秘显优予对照绒，与补 肾逐瘀汤可降低斑液黏滞度及嫩脂水平有关。
中药复方制剂的制备 制备用于细胞培养的中药复方制剂要求较高。以蒸馏
水煎煮后，有直接采用水煎液，但更多采用水煎醇沉提取液， 过滤、浓缩、调节ｐＨ，并经微孔滤膜或高温除菌，最终制成中 药原液。 ２含药血清的制备
２．１
在药物添加方式上，因不同种属动物血清对细胞增殖等功能 影响不同，已有实验证实Ｈ Ｊ，培养系中只用同种单一血清既 可为细胞提供营养，又为药物载体，避免了多种血清的干扰。 ２．６含药血清处置方式血清中固有的酶、抗体、补体及其 他生物活性物质，对体外培养的细胞、病原微生物和直接用 于体外实验的组织器官是否产生影响将很大程度上干扰实 验结果。血清灭活后是否可排除以上干扰，或对药效产生正 负影响，仍不完全清楚。已知血清灭活后细胞增殖减弱，可 能与血清中细胞生成因子减少有关，有助于减少血清的非药 理性干扰，也符合减少微生物感染的常规细胞培养要求Ｂ１。 血清经５６℃、３０ ｒａｉｎ水浴灭活后，正常血清相对作用强度平 均降低５０％，抑制病毒致病变作用基本消失；含药血清灭活 后相对作用强度降低程度与给药次数有关，一次给药后平均 降低５０％，二次给药后平均降低３５％，但灭活前表现的有效 时间点仍存在，不受影响¨Ｊ。尽管含药血清灭活后抑制病毒 致病变作用明显降低，但并未影响在灭活前所表现的有效作 用点，还可排除正常血清对实验结果的干扰，其细胞生长情 况也较未灭活组为好，由此推荐在进行体外抗病毒实验时采 用灭活血清。 ２．７含药血清保存前后对比采集的血清中可能含有多种 有效成分，如药物本身产生的有效成分及药物作用于机体后 产生的内源性物质等。血清保存后是否对其产生影响尚无 统一认识。有实验证实，单次给药和１次／ｄ连续３ ｄ采集血 清经４℃、３ ｄ保存和１２ ｈ内应用，保存前后对抗副流感病 毒Ｉ型的药效无影响。 ２．８机体状态 目前报道制备含药血清多采用正常实验动
・经验交流・ 崮拟补肾逐瘀汤辅助治疗老年血管性痴呆４８例 疗效观察
郜海生 （焦作市第三人民医院，河惫焦作４５４００２）
２００６年１劳一２００８年６劳，我们裔接补臀逐瘀汤辅助治 疗老年血管性痴呆（ＶＤ）患者４８例，效果显著。觋报告如下。 资料与方法：８２倒ＶＤ患者，男５ｌ铡、女３ｌ倒，年龄 （６９．８±６．７）岁，病程（３３。５±２０．０）个月，均符合《美国精神 病协会精神障碍诊断与统计手册》（第４版，１９９４）的诊断标 准。脑卒申１－３（１．５±Ｏ．７９）次，其中多发性腋梗死３５例， 单一脑梗死２３例，出搬性脑梗死２４例；伴发脑白质病１８ 例，脑萎缀２９例；痴呆稷度轻躞４６倒，审度３６例；会势高盎 雎病３８例，冠心病２０例，高脂胤症１２例，其他１２例。将患 者随枧分为观察组勰爨、对照缀弘倒，其一般资料具有霉 比性。两组均予胞磷胆碱钠０．７５ ｇ静滴，１次／ｄ；甲磺酸二 氢麦碱胶囊２．５ ｍｇ墨黢，２次蹦，３０ ｄ凳１令疗程。观察缝 另ＫＩ服补肾逐瘀汤（枸丰已、丹参、Ｊ１Ｉ芎１５ ｇ，山茱萸、熟地、茯 苓、扭蓄骂１２ ｇ，磊茎蔫、运志、榄仁、簇南星、华夏、懿灵耱、 地龙１０ ｇ，黄芪３０ ｇ。水煎分两次服，１剂／ｄ）１５ ｄ为１个疗 羲，连溺２令疗程。秀缝治疗翦后褥麓易耩捧获态检查 （ＭＭＳＥ）、日常生活能力量表（ＡＤＬ）测定。采用ＳＰＳＳ １０．０ 统计软件行ｔ检验，检验窳准伐＝０。０５。 结果：两组治疗前后ＭＭＳＥ、ＡＤＬ评分见表１。 讨论：ＶＤ霆幽各种脑盘管疾病弓ｌ起豹获褥性智能损害