番红O染色 - 360文档中心

常用染色液配方

实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液：美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液：氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液，然后混合即成。

2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液：碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液：石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中，配成A液。

将石炭酸溶于蒸馏水中，配成B液。

将两者混合即成。

3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液：结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液：草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后，加入95%酒精，使之溶解，配成A液。

将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。

两液混合即成。

4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。

5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细，加少许95%酒精溶解，再加蒸馏水。

7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟，加入福尔马林作为防腐剂，用玻璃棉过滤。

8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液（真菌制片，短期保存）石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，溶解即成。

番红染色原理

番红染色原理番红染色是一种常见的染色技术，它可以用于细胞和组织的染色，帮助科研人员观察细胞的结构和功能。

番红染色原理是指利用番红染料对细胞或组织进行染色的基本原理，下面将详细介绍番红染色的原理及其应用。

首先，番红染色原理的关键是利用番红染料与细胞或组织中的特定结构或成分发生特异性的化学反应。

番红染料是一种碱性染料，它可以与细胞或组织中的酸性成分结合，形成稳定的染色产物。

这种染色产物在显微镜下呈现出特定的颜色，帮助科研人员观察细胞或组织的结构和形态。

其次，番红染色原理还涉及到染色前的样本处理和染色过程中的控制。

在进行番红染色前，需要对样本进行固定、脱水和透明化处理，以保证染色的准确性和稳定性。

在染色过程中，还需要控制染色时间、温度和染色液的浓度，以确保染色效果的良好。

番红染色原理在生物学和医学研究中有着广泛的应用。

在细胞生物学研究中，番红染色可以帮助科研人员观察细胞的核、细胞器和细胞骨架等结构，从而揭示细胞的功能和代谢过程。

在组织学研究中，番红染色可以用于观察组织的形态结构、细胞分布和组织类型，为疾病诊断和治疗提供重要依据。

此外，番红染色原理还可以与其他染色技术相结合，如免疫组织化学染色、原位杂交染色等，扩大其在科研和临床中的应用范围。

通过将番红染色与其他染色技术结合，可以实现对细胞和组织的多重标记，从而更全面地了解其结构和功能。

总之，番红染色原理是一种重要的染色技术，它通过特异性的化学反应，帮助科研人员观察细胞和组织的结构和功能。

在生物学和医学研究中有着广泛的应用，为科研人员提供了重要的实验手段。

随着科学技术的不断进步，相信番红染色原理将在更多领域发挥重要作用，为人类健康和生命科学研究做出更大的贡献。

实验室常用染色液配方

实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液：美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液：氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液，然后混合即成。

2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液：碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液：石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中，配成A液。

将石炭酸溶于蒸馏水中，配成B液。

将两者混合即成。

3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液：结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液：草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后，加入95%酒精，使之溶解，配成A液。

将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。

两液混合即成。

4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾 2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。

5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细，加少许95%酒精溶解，再加蒸馏水。

7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟，加入福尔马林作为防腐剂，用玻璃棉过滤。

8、刚果红染色液刚果红(Congo red)2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液（真菌制片，短期保存）石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，溶解即成。

改良番红O-固绿软骨染色液

改良番红O-固绿软骨染色液简介：软骨组织由软骨细胞和软骨基质组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。

软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。

改良番红O-固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色，嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而呈绿色或蓝色，与呈现红色的软骨对比鲜明，从而将软骨组织与骨组织区分开。

组成：编号名称DB00825×50mlDB00825×100mlStorage试剂(A) A1: Weigert A液25ml 50ml RT 避光A2: Weigert B液25ml 50ml RT试剂(B): 酸性乙醇分化液50ml 100ml RT试剂(C): 固绿染色液50ml 100ml RT 避光试剂(D): Safranin O stain 50ml 100ml RT 避光试剂(E): 乙酸溶液50ml 100ml RT使用说明书1份操作步骤(仅供参考)：1、标本的处理：10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。

2、常规脱蜡至水。

3、入新鲜配制的Weigert染液染色。

4、酸性乙醇分化液分化。

5、蒸馏水洗1min。

6、在固绿染色液内浸染，蒸馏水洗1min。

7、入Safranin O stain内浸染色，蒸馏水洗1min。

8、用乙酸溶液洗涤切片，以便去除残留的固绿，蒸馏水洗1min。

9、分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。

10、二甲苯透明，光学树脂封固。

染色结果：软骨基质深红色软骨细胞核蓝色细胞浆、肌肉、胶原纤维及骨组织呈灰绿色注意事项：1、需要显示细胞核时，尽量采用铁苏木素染色，其着色力强色调浓，一般的苏木素着色力不强。

2、Weigert染液不可预先配制后放置，配制好后一般24h后失去染色力。

3、切片在Safranin O stain中染色不宜过长，否则易导致背景的深红色不易分化掉。

有效期：6个月有效。

实验室常用染色液配方

实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液：美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液：氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液，然后混合即成。

2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液：碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液：石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中，配成A液。

将石炭酸溶于蒸馏水中，配成B液。

将两者混合即成。

3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液：结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液：草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后，加入95%酒精，使之溶解，配成A液。

将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。

两液混合即成。

4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。

5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细，加少许95%酒精溶解，再加蒸馏水。

7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟，加入福尔马林作为防腐剂，用玻璃棉过滤。

8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液（真菌制片，短期保存）石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，溶解即成。

番红O-固绿染色在关节组织学应用的改进

９９９９５６．
本研究采用了一种改良的免疫细胞化学方法，在树脂包即埋的切片上进行增殖和凋亡相关蛋白的定位表达，通过原位并末端标记法检测凋亡细胞。此免疫细胞化学方法的采用最初是
现这些蛋白的阳性表达。因此，着切片的厚度和抗原种类的随
ｔｅａｉｉ—ｉｔｅｈｉｕ［］Ｈｉｏｈｍ，１９，７（）ｈｖｎｂｏｉｔｃｎｑｅＪ．ｓｅｅＪ９５２３：ｄｎｔ
２４２９００．
ｐｒｘｄｒａｃｈｏｉｏｉｍｙｒｘｄｎｔｍｍｕｏｙｏｈｍｉｌｅｏｉｅｏｌｏｌｓｄｕｈｄｏｅＯｈｅｉｃｉｎｃｔｃｅｃａ
ｄｔｃｏｆｒｗｈｈｒｎｎｒｌｔｆｒｓｕｆａｉ］ｅｔｎｏｏｔｏｍｏｅｄｐｏａｉａｅｍｉｍｘｔｎＥ．ＪｅｉｇａｃｎｔｏｉｏＪ
结构。
３讨论
方法的优点是明显的，是对某些抗原的表达还有一定的局限但
性，要进一步的研究。需
参考文献
ＫｅｌｎｂｒｅＥ，ＤｉｒｎｅｇｅＭ，ＶｉｉｒｌｅｅｇｒｉｅｂｒｒｒｌｇｅＷ，ｅａ．Ｔｈｌｔ１ｅ
ＨｉｔｃｅＣｙｏｈｍ，１７，７９：２０１９．ｓｏｈｍｔｃｅ９９２（）１９ —２２ＶｉａｄｌＳ，Ｌｏｂｒｒ，ＳｎｈｅｍａｄｅｏＭａｃｚＰ，ｅ１Ａｎｅｓｅｈｄｆｒｔａ．ａｙｍｔｏｏｔｅｒｍｏａｏｆＥｐｎｒｓｎｆｏｓｍｉｈｎｓｃｉｎ．Ａｐｌａｉｆｈｅｖｏｅｉｒｍｅ — ｉｅｔｓｔｏｐｉｔｃｏｎｏ

番红O-快绿染色

1、0.02%固绿溶液：固绿0.02g，蒸馏水100ml2、0.1%番红O溶液：番红0.1g，蒸馏水100ml3、1%盐酸酒精分化液：弄HCI1份，95%乙醇99份染色1、石蜡切片脱蜡至水2、苏木精染细胞核1-3min，显微镜观察染色情况决定染色时间长短3、自来水充分洗涤，去除残留苏木精。

4、1%盐酸酒精分化15-30s，分化时间视颜色深浅而定。

5、自来水充分洗涤，去除残留染液。

6、0.02%固绿水溶液染色3min，固绿为一种酸性染料，呈碱性细胞质或细胞外基质呈绿色7、1%冰醋酸洗涤切片，去除残留固绿8、0.1%番红O染色3min，番红是一种碱性染料，呈酸性细胞质或细胞外基质呈橙黄/红色。

9、95%乙醇侵洗，洗去残留番红10、95%乙醇、无水乙醇脱水、二甲苯透明，中性树胶封片。

1、石蜡切片脱蜡至水2、Weigert氏苏木素染色3分钟3、1%盐酸酒精分化4、水洗5、0.2%固绿水溶液内染色5分钟6、水洗7、0.1%番红O水溶液内染色1-2分钟8、水洗9、0.1%醋酸水溶液分化10、水洗11、95%乙醇、无水乙醇脱水、二甲苯透明，中性树胶封片。

Solutions and Reagents:Weigert's Iron Hematoxylin Solution:Stock Solution A:Hematoxylin ----------------------------- 1 g95% Alcohol ----------------------------- 100 mlStock Solution B:29% Ferric chloride in water ----------- 4 mlDistilled water -------------------------- 95 mlHydrochloric acid, concentrated ---- 1mlWeigert's Iron Hematoxylin Working Solution:Mix equal parts of stock solution A and B. This working solution is stable for about 4 weeks.0.05% Fast Green (FCF) Solution:Fast green, FCF, C.I. 42053 ------------- 0.5 gDistilled water ---------------------------- 1000 ml1% Acetic Acid Solution:Acetic acid, glacial ------------------------- 1 mlDistilled water ------------------------------ 99 ml0.1% Safranin O Solution:Safranin O, C.I. 50240 -------------------- 0.1 gDistilled water ----------------------------- 100 mlProcedure:1. Deparaffinize and hydrate slides to distilled water.2. Stain with Weigert’s iron hematoxylin working solution for 10minutes.3. Wash in running tap water for 10 minutes.4. Stain with fast green (FCF) solution for 5 minutes.5. Rinse quickly with 1% acetic acid solution for no more than 10 –15seconds.6. Stain in 0.1% safranin O solution for 5 minutes.7. Dehydrate and clear with 95% ethyl alcohol, absolute ethyl alcohol,and xylene, using 2 changes each, 2 minutes each.8. Mount using resinous medium.。

大鼠膝关节软骨不同染色方法的差异

大鼠膝关节软骨不同染色方法的差异高改霞;卫小春;李凯;卫建平【摘要】背景:国内外学者对关节软骨对软骨进行了大量研究,需要用不同的染色方法对研究结果进行分析,但将多种染色方法同时应用于软骨研究及探讨染色机制的较少.目的:探讨不同染色方法对大鼠膝关节软骨染色的优缺点.方法:取正常大鼠膝关节软骨,行苏木精-伊红、番红O、阿尔辛蓝、甲苯胺蓝、番红-阿尔辛蓝、番红-固绿染色,观察软骨结构. 结果与结论:苏木精-伊红、番红O、甲苯胺蓝染色均可观察到潮线,分别为蓝色、红色和蓝色,番红O和甲苯胺蓝染色强度朝潮线方向增强,番红O染色对潮线的观察优于其他染色方法.苏木精-伊红染色关节软骨4层结构清晰,软骨细胞呈柱状排列,基质呈均匀呈嗜碱性染色.番红O染色显示4层结构层次清楚,基质深层染色最红.阿尔辛蓝染色显示,pH 1.0时软骨细胞周边部分被阿尔辛蓝强烈染色,pH 2.5时阿尔辛蓝染色较深.甲苯胺蓝染色显示组织结构层欠清,胞核染色清晰,胞浆几乎不着色,基质呈淡蓝紫色.番红-阿尔辛蓝染色显示软骨表面及基质呈不均一的红色,深层颜色较深,软骨细胞周围蓝染;番红-固绿染色显示软骨基质呈均匀的红色,软骨下骨呈绿色,软骨组织与骨组织分对比鲜明.提示上述各种方法均可观察到软骨的四层结构,但以番红O染色显示软骨各层和潮线结构最佳;苏木精-伊红染色观察软骨细胞形态变化较其他方法清楚.【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2010(014)024【总页数】5页(P4385-4389)【关键词】关节软骨;染色方法;优缺点;大鼠;膝关节;软骨组织工程【作者】高改霞;卫小春;李凯;卫建平【作者单位】山西医科大学第二医院病理科,山西省太原市,030001;山西医科大学第二医院骨科,山西省太原市,030001;山西医科大学第二医院骨科,山西省太原市,030001;山西医科大学第二医院病理科,山西省太原市,030001【正文语种】中文【中图分类】R3180 引言关节软骨位于活动关节的表面，是一种高度特异的连接组织，仅有少量的细胞分布[1]。