交叉配血(凝集)试验PPT课件
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交叉配血知识(ppt)
2020/12/22
9
2. 离心力的标准
不同规格离心机，力矩不同，统一离心转速，但
没有统一离心力。
离心转速换算公式：
RCF = 1.118 × 10-5 × (rpm) 2× R (cm)
3. 离心后结果观察注意事项
将试管成30-45℃角拿在手上，细胞扣朝上，手腕
轻轻用力，用液体去冲细胞扣。
- 细胞成细沙状沿试管壁流下 + 细胞成块状或成齿状沿试管壁流下
解决的方法： A:血清与红细胞混合后立即离心。 B:用血浆或灭活的血清做试验 C:用EDTA盐水配制红细胞悬液, D:稀释血清
2020/12/22
12
加样时先加血清再加红细胞，以避免漏加； 抗体和抗原的比例一般为2：1。 必须要做正反定型实验才能确定血型。 正定型试验有条件可加做抗AB（检测弱A、弱B ） 反定型一定要加做O细胞,（发现不规则抗体）
2020/12/22
14
（2）标准血清效价太低、亲和力不强。如抗A血清效价不高， 可将A亚型误定为O型，AB型误定为B型。
（3）红细胞悬液过浓或过淡，抗原抗体比例不适当，使反应 不明显，误判为阴性反应。
（4）血清异常 华通胶或血清蛋白异常引起串钱状形成，影响
反定性结果
（5）红细胞致敏 在含高蛋白介质试剂中可发生凝集，产生假 阳性
（10）异常血浆蛋白 病人血浆中异常的白蛋白、球蛋白比例异 常和高浓度的FIB等能导致缗钱状形成，造成假凝集现象
（11）近期内进行大量的血浆置换治疗，影响抗体效价，造成反 定型困难。
（12）不规则抗体的产生 受检者血浆中，含有ABO血型抗体以 外的不规则抗体，如自身抗I，与试剂A、B细胞上的相应抗原起 反应。
血量约为5ml 。
交叉配血知识ppt课件
3
三 四 四
2018/11/23
标本的采集与要求
2018/11/23
4
1.标本要新鲜:
标本要具有代表性， 能代表患者目前状况
前三个月内输血或妊娠:配血试验标本抽取<48h,
避免因回忆反应产生的抗体漏检。 新近的输血或妊娠：可引起意外抗体迅速出现,如 果对病人的输血史或人身史不明,使用的标本必须是 输血前48h内抽取的。 血量约为5ml 。
1)重新抽样，纠正因污染或搞错标本造成的不符。 2)将红细胞洗涤数次，配成5%盐水细胞悬液，用抗A、抗B、抗A+B做实验， 可得到其他有用信息。有条件加做抗H试验 3)对受检者作直接抗人球蛋白试验，看RBC有没有被致敏 4)如疑为A抗原或B抗原减弱，可将受检红细胞与抗A或抗B血清作吸收放散 试验。 5)如试验结果红细胞成缗钱状排列，加等渗盐水1滴混匀，往往可使缗钱现 象消失。 6)做反定型试验时需要加做O细胞。
被检血清 + 抗体筛选细胞 → 盐水介质或非盐水介质（凝聚胺、抗球蛋白、酶）
对Kell系统抗体不理想，阴性结果 需做抗球。中国人群几乎100%为 筛选III 病人红细胞 kk型，具有K抗原的几乎为0，至今 未发现Kell系统抗体
1.
筛选细胞I
筛选II
病人血清
凝聚胺含多价阳 离子，中和RBC 表面负电荷，减 少RBC间距离
要是经输血或妊娠等免疫刺激产生。
血型抗体是体内免疫系统所产生的针对血型抗原发生特
异性反应的一类免疫球蛋白类物质。人类血清中有5种类 型：G、M、A、D、E，其中IgM、G是最重要的2种抗体 。
RBC血型抗体分为：
完全抗体：能在盐水中凝集相应RBC，
又称盐水抗体。 主要是分子量较大的IgM
三 四 四
2018/11/23
标本的采集与要求
2018/11/23
4
1.标本要新鲜:
标本要具有代表性， 能代表患者目前状况
前三个月内输血或妊娠:配血试验标本抽取<48h,
避免因回忆反应产生的抗体漏检。 新近的输血或妊娠：可引起意外抗体迅速出现,如 果对病人的输血史或人身史不明,使用的标本必须是 输血前48h内抽取的。 血量约为5ml 。
1)重新抽样，纠正因污染或搞错标本造成的不符。 2)将红细胞洗涤数次，配成5%盐水细胞悬液，用抗A、抗B、抗A+B做实验， 可得到其他有用信息。有条件加做抗H试验 3)对受检者作直接抗人球蛋白试验，看RBC有没有被致敏 4)如疑为A抗原或B抗原减弱，可将受检红细胞与抗A或抗B血清作吸收放散 试验。 5)如试验结果红细胞成缗钱状排列，加等渗盐水1滴混匀，往往可使缗钱现 象消失。 6)做反定型试验时需要加做O细胞。
被检血清 + 抗体筛选细胞 → 盐水介质或非盐水介质（凝聚胺、抗球蛋白、酶）
对Kell系统抗体不理想，阴性结果 需做抗球。中国人群几乎100%为 筛选III 病人红细胞 kk型，具有K抗原的几乎为0，至今 未发现Kell系统抗体
1.
筛选细胞I
筛选II
病人血清
凝聚胺含多价阳 离子，中和RBC 表面负电荷，减 少RBC间距离
要是经输血或妊娠等免疫刺激产生。
血型抗体是体内免疫系统所产生的针对血型抗原发生特
异性反应的一类免疫球蛋白类物质。人类血清中有5种类 型：G、M、A、D、E，其中IgM、G是最重要的2种抗体 。
RBC血型抗体分为：
完全抗体：能在盐水中凝集相应RBC，
又称盐水抗体。 主要是分子量较大的IgM
交叉配血知识PPT讲稿
血量约为5ml 。
2.使用右旋糖酐、pvp等：
治疗前抽取标本备用,防止RBC缗钱状凝集的干扰
2020/8/12
5
3.24小时内输了12u血后：
可输注未经交叉配血的ABO、RH同型的血液,因为
原始交叉配血用的血清已不能代表患者血清的情况。
4.防止血样的稀释和溶血的产生：
溶血标本一般不使用,因为血清中游离血红蛋白可掩
2020/8/12
13
（2）标准血清效价太低、亲和力不强。如抗A血清效价不高， 可将A亚型误定为O型，AB型误定为B型。
（3）红细胞悬液过浓或过淡，抗原抗体比例不适当，使反应 不明显，误判为阴性反应。
（4）血清异常 华通胶或血清蛋白异常引起串钱状形成，影响
反定性结果
（5）红细胞致敏 在含高蛋白介质试剂中可发生凝集，产生假 阳性
切不可用力使劲摇试管，那样凝集颗粒会被摇散，
弱凝集则会误判为阴性。
2020/8/12
9
常用的记录符号及所示的凝集强度
4 一个大的凝集块,背景透明,无游离细胞 +
3 数个大凝集块,背景透明,无游离细胞 +
2 许多小凝集块,肉眼可见,大小均匀,背景基本透明,有游离 + 细胞
1 很小的凝集块,肉眼可见,背景不透明,游离细胞较多,需要 +W 微用小显凝微集镜块观,察肉眼很难看清,背景混浊,要用显微镜观察 +
2020/8/12
7
1.红细胞悬液的配制
洗涤
洗涤目的: 去除RBC表面物质 ①少量的血浆蛋白 ②已溶解红细胞的基质（有竞争抗体的作用） ③抗凝剂（有抗补体的作用）
至少要用大量生理盐水洗一次
浓度
➢2%：一般用于抗体效价的测定
2.使用右旋糖酐、pvp等：
治疗前抽取标本备用,防止RBC缗钱状凝集的干扰
2020/8/12
5
3.24小时内输了12u血后：
可输注未经交叉配血的ABO、RH同型的血液,因为
原始交叉配血用的血清已不能代表患者血清的情况。
4.防止血样的稀释和溶血的产生：
溶血标本一般不使用,因为血清中游离血红蛋白可掩
2020/8/12
13
（2）标准血清效价太低、亲和力不强。如抗A血清效价不高， 可将A亚型误定为O型，AB型误定为B型。
（3）红细胞悬液过浓或过淡，抗原抗体比例不适当，使反应 不明显，误判为阴性反应。
（4）血清异常 华通胶或血清蛋白异常引起串钱状形成，影响
反定性结果
（5）红细胞致敏 在含高蛋白介质试剂中可发生凝集，产生假 阳性
切不可用力使劲摇试管，那样凝集颗粒会被摇散，
弱凝集则会误判为阴性。
2020/8/12
9
常用的记录符号及所示的凝集强度
4 一个大的凝集块,背景透明,无游离细胞 +
3 数个大凝集块,背景透明,无游离细胞 +
2 许多小凝集块,肉眼可见,大小均匀,背景基本透明,有游离 + 细胞
1 很小的凝集块,肉眼可见,背景不透明,游离细胞较多,需要 +W 微用小显凝微集镜块观,察肉眼很难看清,背景混浊,要用显微镜观察 +
2020/8/12
7
1.红细胞悬液的配制
洗涤
洗涤目的: 去除RBC表面物质 ①少量的血浆蛋白 ②已溶解红细胞的基质（有竞争抗体的作用） ③抗凝剂（有抗补体的作用）
至少要用大量生理盐水洗一次
浓度
➢2%：一般用于抗体效价的测定
交叉配血试验临床应用PPT课件
交叉配血试验临床应用
4
实验原理
红细胞表面带有大量的负电荷，悬浮在电解 质溶液中，会吸引大量阳离子，红细胞则被扩散 的双层离子云所围绕，形成zeta电位。
交叉配血试验临床应用
5
实验原理
凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM）降低 介质的离子强度，减少红细胞周围的电子云， 如有红细胞抗原相应的血清抗体存在，则可促 进红细胞抗原与血清抗体的特异结合。
交叉配血试验临床应用
21
临床新进展
流式细胞术 基因分ຫໍສະໝຸດ 技术 卡式微柱凝胶法交叉配血试验临床应用
22
卡式微柱凝胶法
交叉配血试验临床应用
23
卡式微柱凝胶法
交叉配血试验临床应用
24
戴安娜全自动配血系统
卡式微柱凝胶法可实现自动检测
交叉配血试验临床应用
25
二 实验原理
谢谢！ 血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在
11
实验步骤
四、剪下供血者血袋上的血辫，将供血者红 细胞1滴加入主侧管，血浆2滴加入次侧管
交叉配血试验临床应用
12
实验步骤
五、在主次侧各加入低离子溶液各0.65毫 升，混合均匀。
交叉配血试验临床应用
13
实验步骤
六、在主、次侧管分别加入2滴凝聚胺溶液， 混匀后3400r/min离心10秒，弃去上清， 观察红细胞的非特异凝集现象。
交叉配血试验临床应用
26
弃 上 清
交叉配血试验临床应用
14
实验步骤
七、最后各加入悬浮液2滴，轻轻转动试管 混匀并观察结果。
交叉配血试验临床应用
15
实验步骤
八、如果在60秒内，主、侧管凝集均散开， 说明是由凝聚胺溶液引起的非特异性凝集， 配血相合。
凝集试验(四项)PPT课件
注意事项
❖ 玻片应洁净、干燥、中性，以防止和减少非 特异性凝集。
❖ 室温低于10℃时，易出现冷凝集而造成假阳 性结果。
间接凝集试验
❖ 将可溶性抗原（或抗体）吸附于一种与免疫无关的、适当的 大小的载体微粒表面，再与相应抗体（或可溶性抗原）在适 宜条件下相互作用，经一定时间出现肉眼可见的凝集现象， 这种方法称为间接凝集试验，又称被动凝集试验。
❖ 如将抗原包被于载体微粒表面以检测抗体，称为（正向）间 接凝集试验；
❖ 如将抗体吸附于载体微粒表面以检测抗原，则称为反向间接 凝集试验。
❖ 实验室常用的载体有红细胞、胶乳颗粒、活性碳、SPA菌体 等，其中以红细胞为载体的间接凝集试验称为间接血凝试验， 以胶乳为载体的间接凝集试验称为间接胶乳凝集试验。
❖ 间接凝集反应 正向间接凝集试验－－测RF 反向间接凝集试验－－测HBsAg 间接凝集抑制试验－－测HCG 协同凝集反应
直接凝集试验--测ABO血型
原理（玻片法）
❖ 天然的颗粒性抗原（如红细胞，白细胞，细 菌等）与相应抗体在适宜条件下反应，出现 肉眼可见的凝集物，称为直接凝集反应。玻 片法属于定性试验。
间接凝集抑制试验—测HCG
步骤
❖ 将阳性尿、阴性尿（用生理盐水代替）、待检尿液 分别滴一滴在玻片上
❖ 然后分别滴一滴诊断血清（用HCG免疫动物得到的 抗血清），分别用牙签搅匀，手持玻片，前后旋转 摇动1min
❖ 在上述三滴上各加一滴胶乳抗原，用牙签混匀，在 轻摇2～3min，观察结果。
写在最后
经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量 Study Constantly, And You Will Know Everything. The More
交叉配血知识ppt课件
（13）低丙种球蛋白血症 可能会因免疫球蛋白水平全面下降使 血清定型时不见凝集或仅见弱凝集反应。
（14）药物等因素 药物、右旋糖酐等静脉注射某些造影剂可引 起红细胞聚集而类似凝集。
（15）年龄因素 如新生儿、老年人等。
2019/5/20
15
正反定型不一致的处理方法
- 细胞成细沙状沿试管壁流下 + 细胞成块状或成齿状沿试管壁流下
切不可用力使劲摇试管，那样凝集颗粒会被摇散，
弱凝集的记录符号及所示的凝集强度
4 一个大的凝集块,背景透明,无游离细胞 +
3 数个大凝集块,背景透明,无游离细胞 +
2 许多小凝集块,肉眼可见,大小均匀,背景基本透明,有游离 + 细胞
盖在输血前实验中抗体反映引起的溶血
5.标本标识：唯一性标识无误、与输血申请单一致
6.使用血浆标本：应排除纤维蛋白原的干扰
7.输血后标本保存：2-8℃,至少一周。
2019/5/20
6
血型
1. 红细胞悬液的配制 2. 离心力的标准 3. 离心后结果观察 4. 盐水试验 5. 正反定型结果不一致原因及处理
血量约为5ml 。
2.使用右旋糖酐、pvp等：
治疗前抽取标本备用,防止RBC缗钱状凝集的干扰
2019/5/20
5
3.24小时内输了12u血后：
可输注未经交叉配血的ABO、RH同型的血液,因为
原始交叉配血用的血清已不能代表患者血清的情况。
4.防止血样的稀释和溶血的产生：
溶血标本一般不使用,因为血清中游离血红蛋白可掩
（6）近期曾异型输血，病人血液标本成为不同型别的红细胞 混合物，定型时显示“混合外观凝集”现象。
交叉配血知识ppt课件
2020/8/17
ppt课件.
12
5.正反定型结果不一致
原因：技术、受检红细胞或血清本身
（1）技术和管理错误
器材不洁
—— 假阳
试剂污染或不足 —— 假阳
标本和试剂搞错 —— 假阳 、假阴
离心过度或不足 —— 假阳 、假阴
结果记录或判断错误 —— 假阳 、假阴
漏加试剂
——
假阴
阳性反应产生溶血现象未能识别——假阴
- 细胞成细沙状沿试管壁流下 + 细胞成块状或成齿状沿试管壁流下
切不可用力使劲摇试管，那样凝集颗粒会被摇散，
弱凝集则会误判为阴性。
2020/8/17
ppt课件.
9
常用的记录符号及所示的凝集强度
4 一个大的凝集块,背景透明,无游离细胞 +
3 数个大凝集块,背景透明,无游离细胞 +
2 许多小凝集块,肉眼可见,大小均匀,背景基本 +W 微透小明凝,有集块游,肉离眼细很胞难看清,背景混浊,要用显微镜观察 1+ 很小的凝集块,肉眼可见,背景不透明,游离细 +O 无胞凝较集多,无,需溶血要,全用部显是微游镜离细观胞察,要用显微镜观察
2020/8/17
ppt课件.
8
2. 离心力的标准
不同规格离心机，力矩不同，统一离心转速，但
没有统一离心力。
离心转速换算公式：
RCF = 1.118 × 10-5 × (rpm) 2× R (cm)
3. 离心后结果观察注意事项
将试管成30-45℃角拿在手上，细胞扣朝上，手腕
轻轻用力，用液体去冲细胞扣。
2020/8/17
ppt课件.
7
1.红细胞悬液的配制
交叉配血试验临床应用ppt课件
红细胞膜上有无A或/和B抗原。在ABO血型系
统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、
B、AB、O四型。 见下表
精选
26
精选
12
实验步骤
五、在主次侧各加入低离子溶液各0.65毫 升，混合均匀。
精选
13
实验步骤
六、在主、次侧管分别加入2滴凝聚胺溶液， 混匀后3400r/min离心10秒，弃去上清， 观察红细胞的非特异凝集现象。
弃 上 清
精选
14
实验步骤
七、最后各加入悬浮液2滴，轻轻转动试管 混匀并观察结果。
精选
15
精选
6
实验原理
再加入凝聚胺溶液，
溶解后产生很多正电
荷，中和红细胞表面
带有的负电荷，红细
胞zeta电位降低，缩
短红细胞距离，无论
是否有红细胞抗原相
应的血清抗体存在，
主、次侧管均可产生
非特异性聚集。
精选
7
实验原理
最后加入悬浮液，具有中和凝聚胺阳离子的作 用，使正常红细胞的非特异性凝集散开，红细 胞抗原与相应血清抗体的特异性凝集仍然存在。
卡式微柱凝胶法可实现自动检测
精选
25
二 实验原理
谢谢！ 血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在
ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种
抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。血型
鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清
（含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗
体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者
实验步骤
八、如果在60秒内，主、侧管凝集均散开， 说明是由凝聚胺溶液引起的非特异性凝集， 配血相合。
精选
16
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.
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➢ 2.另取加抗凝剂的试管2支并标记，分别采取供血动物和 受血动物血液各1～2 ml，震摇，离心沉淀(或自然沉降)， 弃掉上层血浆；
.
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➢ 取其压积红细胞2滴，各加生理盐水适量，用吸管混合，离 心并弃去上清液后，再加生理盐水2 ml混悬，即成红细胞悬 液。
不 凝 集
.
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Ø2.肉眼观察载玻片上主、次侧或主侧红细胞凝集呈沙粒 状团块，液体透明；显微镜下观察红细胞堆积一起，分 不清界限，表示配血不相合，不能输血。
凝 集
.
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Ø3.如果主侧不凝集而次侧凝集时，除非在紧 急情况下，最好还是不要输血。
即使输血，输血速度也不能太快，且要密切 观察动物反应，如发生输血反应，应立即停止 输血。
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交叉配血（凝集）试验
.
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操作步骤
➢ 1.取试管2支作好标记，分别由受血动物和供血动物的颈 静脉各采血5～10 ml，于室温下静置或离心析出血清备 用。
浆代替血清。即先在试 管内加入4％枸橼酸钠溶液0.5ml或1.0 ml， 再采血4.5ml或9.0 ml，离心取上层血浆备 用。
.
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➢ 3.取清洁、干燥载玻片2张，于一载玻片上加受血动物血清( 或血浆)2滴，再加供血动物红细胞悬液2滴(主侧)； 于另一载玻片上加供血动物血清(或血浆)2滴，再加受血 动物红细胞悬液2滴(次侧)。 分别用火柴梗轻轻混匀，置室温下经1 5～30 min观察 结果。
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➢ 4.注意事项 ✓ 试验时室温以15～18℃最为适宜； ✓ 温度过低(8℃以下)可出现假凝集； ✓ 温度过高( 24℃以上)也会使凝集受到影响以致不
出现凝集现象。 ✓ 观察结果的时间不要超过30 min，否则由于血清蒸
发而发生假凝集现象。
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结果判定
Ø1.肉眼观察载玻片上主、次侧的液体均匀红染，无细胞 凝集现象；显微镜下观察红细胞呈单个存在。表示配血 相合，可以输血。
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➢ 2.另取加抗凝剂的试管2支并标记，分别采取供血动物和 受血动物血液各1～2 ml，震摇，离心沉淀(或自然沉降)， 弃掉上层血浆；
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➢ 取其压积红细胞2滴，各加生理盐水适量，用吸管混合，离 心并弃去上清液后，再加生理盐水2 ml混悬，即成红细胞悬 液。
不 凝 集
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Ø2.肉眼观察载玻片上主、次侧或主侧红细胞凝集呈沙粒 状团块，液体透明；显微镜下观察红细胞堆积一起，分 不清界限，表示配血不相合，不能输血。
凝 集
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Ø3.如果主侧不凝集而次侧凝集时，除非在紧 急情况下，最好还是不要输血。
即使输血，输血速度也不能太快，且要密切 观察动物反应，如发生输血反应，应立即停止 输血。
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交叉配血（凝集）试验
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操作步骤
➢ 1.取试管2支作好标记，分别由受血动物和供血动物的颈 静脉各采血5～10 ml，于室温下静置或离心析出血清备 用。
浆代替血清。即先在试 管内加入4％枸橼酸钠溶液0.5ml或1.0 ml， 再采血4.5ml或9.0 ml，离心取上层血浆备 用。
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➢ 3.取清洁、干燥载玻片2张，于一载玻片上加受血动物血清( 或血浆)2滴，再加供血动物红细胞悬液2滴(主侧)； 于另一载玻片上加供血动物血清(或血浆)2滴，再加受血 动物红细胞悬液2滴(次侧)。 分别用火柴梗轻轻混匀，置室温下经1 5～30 min观察 结果。
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➢ 4.注意事项 ✓ 试验时室温以15～18℃最为适宜； ✓ 温度过低(8℃以下)可出现假凝集； ✓ 温度过高( 24℃以上)也会使凝集受到影响以致不
出现凝集现象。 ✓ 观察结果的时间不要超过30 min，否则由于血清蒸
发而发生假凝集现象。
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结果判定
Ø1.肉眼观察载玻片上主、次侧的液体均匀红染，无细胞 凝集现象；显微镜下观察红细胞呈单个存在。表示配血 相合，可以输血。
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