分子生物学实验常用试剂、缓冲液的配制方法
分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法

分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法1.常见试剂配制方法:(1)磷酸盐缓冲液(PBS)的配制方法:-配制PBS需要使用NaCl、KCl、Na2HPO4和KH2PO4等化学品。
-以10倍浓度配制PBS的浓缩溶液,然后稀释为需要的浓度。
-例如,1倍浓度的PBS可以通过将1升的10倍浓度PBS溶液加入9升蒸馏水来制备。
(2) 神经元无血清培养基(Neurobasal Medium)的配制方法:- 配制Neurobasal Medium需要使用神经元培养基基本成分及其他补充物质。
-根据制造商提供的配方,按照相应比例将各种化学品溶解在无菌蒸馏水中。
-配制好的培养基可以用于维持和培养神经元体外培养。
(3) 洗涤缓冲液(Washing Buffer)的配制方法:-配制洗涤缓冲液需要使用磷酸盐缓冲液(PBS)及其他添加剂。
- 将PBS溶液中加入适当浓度的Tween-20或者Tris-HCl来制备洗涤缓冲液。
-根据实验需求,可以调整洗涤缓冲液的成分和浓度。
(4) 乙醇(Ethanol)溶液的配制方法:-配制乙醇溶液常用的浓度有70%和100%。
- 70%的乙醇溶液可以通过将70ml无菌蒸馏水加入30ml无水乙醇中配制得到。
-100%的乙醇溶液可以直接使用无水乙醇。
2.常见缓冲液配制方法:(1) Tris/Tricine缓冲液的配制方法:- 配制Tris/Tricine缓冲液需要使用Tris(三羟甲基氨基甲烷)和Tricine(三甘胺酸)等化学品。
- 根据实验要求,在一定PH范围内,按照不同比例混合Tris和Tricine,溶解于适量的蒸馏水中。
(2) 氯化钾缓冲液(KCl Buffer)的配制方法:- 配制KCl Buffer需要使用KCl和其他添加剂。
-将适量的KCl和其他缓冲液成分溶解在蒸馏水中。
-根据实验要求,调整KCl的浓度和缓冲液的PH值。
(3) Tris/Acetate缓冲液的配制方法:- 配制Tris/Acetate缓冲液需要使用Tris和乙酸等化学品。
实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表

实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1MTri-HCl□组份浓度1MTri-HCl(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1.称量121.1gTri置于1L烧杯中。
2.加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4约70mL7.6约60mL8.0约42mL4.将溶解定容至1L。
5.高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tri溶液的pH值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5MTri-HCl□组份浓度1.5MTri-HCl(pH8.8)□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTri置于1L烧杯中。
2.加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3.用浓盐酸调pH值至8.8。
4.将溶液定容至1L。
5.高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tri溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10某TEBuffer□组份浓度100mMTri-HCl,10mMEDTA(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。
1MTri-HClBuffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500mMEDTA(pH8.0)20mL2.向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。
3.将溶液定至1L 后,高温高压灭菌。
4.室温保存。
4、3M醋酸钠□组份浓度3M醋酸钠(pH5.2)□配制量100mL□配置方法1.称取40.8gNaOAc3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2.加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3.加入去离子水将溶液定容至100mL。
4.高温高压灭菌后,室温保存。
5、PBSBuffer□组份浓度137mMNaCl,2.7mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4□配制量1L□配置方法1.称量下列试剂,置于1L烧杯中。
实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液配方有很多种,下面将介绍一些常用的试剂和缓冲液的配方:一、试剂的配方1. Tris缓冲液:- 3 M Tris-Cl,pH 7.4(准备方法:将121.1 g Tris粉末溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2.NaCl溶液:-5MNaCl(准备方法:将287.7gNaCl溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)3.验血试剂:-4%NaOH溶液(准备方法:将40gNaOH溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-5%CuSO4溶液(准备方法:将50gCuSO4溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-2%K4[Fe(CN)6]溶液(准备方法:将20gK4[Fe(CN)6]溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)4.PBS缓冲液(磷酸盐缓冲液):-10×PBS缓冲液(准备方法:将80gNaCl,2gKCl,11.5gNa2HPO4,2gKH2PO4溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L。
pH值可以调节至7.4左右)5. Tris-EDTA缓冲液(TE缓冲液):- 10 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,pH 8.0(准备方法:将12.1 gTris溶解在800 mL去离子水中,然后加入0.37 g EDTA,使用HCl调节pH值至8.0,并将溶液体积加至1 L)二、缓冲液的配方1. Tris-HCl缓冲液:- 50 mM Tris-HCl,100 mM NaCl,1% Triton X-100,pH 7.4(准备方法:将6.05 g Tris,5.8 g NaCl,0.1 g Triton X-100溶解在800mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2. Tris-Borate缓冲液(TBE缓冲液):- 89 mM Tris,89 mM boric acid,2 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将10.81 g Tris,5.49 g boric acid,3.72 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)3. Tris-Glycine缓冲液:- 25 mM Tris,192 mM glycine,0.1% SDS,pH 8.3(准备方法:将3.03 g Tris,14.35 g glycine溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)4. Tris-Acetate缓冲液(TAE缓冲液):- 40 mM Tris,20 mM acetic acid,1 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将4.84 g Tris,1.86 g acetic acid,0.37 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)5. Phosphate缓冲液:- 100 mM sodium phosphate,pH 7.0(准备方法:根据目标pH值使用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调节溶液pH至7.0,并将溶液体积加至1 L)以上只是一些常用的试剂和缓冲液的配方,并不是全部。
实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液种类繁多,根据实验需求,可以根据不同的试剂和缓冲液配方来满足实验要求。
以下是一些常见的试剂和缓冲液配方,以及其用途和制备方法。
1. 磷酸缓冲液(Phosphate buffer)磷酸缓冲液常用于生化和分子生物学实验中,用于控制溶液的pH值,适用于酸性和碱性条件下。
常见的配方包括0.1M磷酸盐缓冲液(pH7.2-7.4),需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。
2. 氯化钠溶液(Sodium chloride solution)氯化钠溶液是实验室中常见的缓冲液配方之一,通常用于调节生物样品的渗透压和离子浓度。
可以制备不同浓度的氯化钠溶液,常见的配方为0.9%氯化钠溶液(生理盐水)。
3. 碳酸氢盐缓冲液(Bicarbonate buffer)碳酸氢盐缓冲液常用于细胞培养和生理实验中,用于维持细胞培养基或实验液的pH稳定。
一种常见的配方为10mM碳酸氢盐缓冲液(pH7.2-7.4),需要用碳酸氢钠和盐酸来制备。
4. Tris缓冲液(Tris buffer)Tris缓冲液是一种常见的生化实验缓冲液,可以调节到不同的pH值。
常见的配方为50 mM Tris缓冲液(pH 7.4),需要用Tris(三氯甲烷磺酸,Tris-HCl)和盐酸来制备。
5. PBS缓冲液(Phosphate-buffered saline)PBS缓冲液是一种用于细胞和组织处理的常见缓冲液,具有稳定pH值和离子浓度的特点。
常见的配方为10mMPBS缓冲液(pH7.4),需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。
6. 甘氨酸缓冲液(Glycine buffer)甘氨酸缓冲液常用于蛋白质电泳实验中,用作电泳缓冲液和传递缓冲液。
常见的配方为25mM甘氨酸缓冲液(pH8.3),需要用甘氨酸和盐酸来制备。
7. BSA溶液(Bovine serum albumin solution)BSA溶液是实验室中常见的蛋白质标准物质,用于测定蛋白质浓度和酶活性等实验。
实验常用试剂,缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法Ampicillin(氨卡青霉素)100mg/ml□组份浓度100mg/ml Ampicillin□配制量50mL□配置方法 1.称量5g Ampicillin置于50mL离心管中。
2.加入40mL灭菌水,充分混合溶解后,定容至50mL。
3.用0.22μm滤膜过滤除菌。
4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。
Kan(卡那霉素)50mg/ml□组分浓度50mg/ml卡那霉素□配制量50mL□配制方法 1.称取2.5g卡那霉素置于50ml塑料离心管中。
2.加入40ml灭菌水,充分混合溶解之后定容至50mL。
3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。
4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。
IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷) 24 mg/ml□组份浓度24mg/L IPTG□配制量50mL□配置方法 1.称量1.2gIPTG置于50mL离心管中。
2.加入40mL 灭菌水,充分混合溶解后,定容至50mL。
3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。
4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。
X- Gal 20mg/m□组份浓度20mg/L X-Gal□配制量50mL□配置方法 1.称取1gX-Gal置于50mL离心管中。
2.加入40mL DMF(二甲基甲酰胺),充分混合溶解,定容至50mL。
3.小份分装(1mL/份)后,-20℃避光保存。
LB培养基□组份浓度1%(W/V)Tryptone,0.5%(W/V)Yeast Extract,1%(W/V)NaCl□配制量1L□配置方法 1.称量下列试剂,置于1L烧杯中Tryptone(胰化蛋白胨)10gYeast Extract(酵母提取物)5gNaCl(氯化钠)10g2.加入约800mL 的去离子水,充分搅拌溶解。
3.滴加5N NaOH(约0.2mL),调节pH值至7.2-7.3。
4.加去离子水定容至1L。
5.高温高压灭菌后,4℃保存。
实验常用试剂、缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl(pH8.8)□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500 mM EDTA(pH8.0)20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。
3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。
4. 室温保存。
4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠(pH5.2)□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。
分子生物学实验常用试剂、缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl(pH8.8)□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500 mM EDTA(pH8.0)20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。
3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。
4. 室温保存。
4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠(pH5.2)□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。
分子生物学实验常用试剂配制

分子生物学实验常用试剂配制分子生物学实验常用试剂配制(1) 0.01M PBS缓冲液:一袋粉制PBS缓冲液(中杉有售)加1000ml蒸馏水。
0.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
(2) 0.01M枸橼酸盐缓冲液:一袋粉制枸橼酸盐缓冲液(中杉有售)加1000ml蒸馏水。
0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液(CB,pH6.0,1000ml):柠檬酸三钠3g,柠檬酸0.4g。
(3)1mol/L的TBS缓冲液(pH8.0):在800ml水中溶解121gTris碱,用1N的HCl 调至pH8.0,加水至1000ml。
(4) 1‰DEPC水:1mlDEPC加入1000ml新鲜三蒸水中,剧烈震荡20分钟使充分混匀,37o C至少放置2h或过夜,HIRAYAMA HV-50高压灭菌器高温高压30分钟降解DEPC,4℃保存。
(5) 1%琼脂糖凝胶:取琼脂糖0.2g置烧杯中,加入20ml的1×TAE缓冲液,封闭锥形瓶口,放入微波炉内加热,不时摇动,使附于瓶壁上的琼脂糖颗粒进入溶液,待琼脂糖全部熔化后取出摇匀,冷却至60℃左右,加入10mg/ml溴化乙锭(EB)1μl,EB的终浓度为0.5μg/ ml,充分混匀。
将温热的凝胶倒入已经放好梳子的凝胶槽中,厚度约为3-5mm,注意不要有气泡,将凝胶放置室温待其自然凝固。
凝固后从胶槽中轻轻取出梳子。
(6)0.5mol/L EDTA缓冲液(pH8.0):700ml水中溶解186.1gEDTA·2H2O,用10 mmol/L NaOH调至pH8.0,加水至1000ml。
(7) 50×TAE缓冲液:Tris碱242g,17.4mol/L冰乙酸57.1ml,0.5mol/L EDTA (PH8.0)100ml加蒸馏水至1000ml。
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(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配制方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl(pH8.8)□配制量1L□配制方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA(pH 7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配制方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500 mM EDTA(pH8.0)20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。
3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。
4. 室温保存。
(pH5.2)□配制量100mL□配制方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。
4. 高温高压灭菌后,室温保存。
5、PBS Buffer□组份浓度137 mM NaCl,2.7mM KCl,10 mM Na2HPO4,2 mM KH2PO4□配制量1L□配制方法1. 称量下列试剂,置于1L烧杯中。
NaCl 8 gKCl 0.2gNa2HPO4 1.42 gKH2PO4 0.27g2. 向烧杯中加入约800 mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 滴加HCl将pH值调节至7.4,然后加入去离子水将溶液定容至1L。
4. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:上述PBS Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。
6、10 M醋酸铵□组份浓度10 M醋酸铵□配制量100mL□配制方法1. 称量77.1g醋酸铵置于100~200 mL烧杯中,加入约30 mL的去离子水搅拌溶解。
2.加去离子水将溶液定容至100mL。
3.使用0.22μm滤膜过滤除菌。
4.密封瓶口于室温保存。
注意:醋酸铵受热易分解,所以不能高温高压灭菌。
7、Tris- HCl平衡苯酚□配制方法1. 使用原料:大多数市售液化苯酚是清亮无色的,无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。
但有些液化苯酚呈粉红色或黄色,应避免使用。
同时也应避免使用结晶苯酚,结晶苯酚必须在160℃对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物,这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。
因此,苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要,我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。
2. 操作注意:苯酚腐蚀性极强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜等。
所有操作均应在通风橱中进行,与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗,并用肥皂和水洗涤,忌用乙醇。
3. 苯酚平衡:因为在酸性pH条件下DNA分配于有机相,因此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡使其pH值达到7.8以上,苯酚平衡操作方法如下:①液化苯酚应贮存于-20℃,此时的苯酚呈现结晶状态。
从冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温,然后在68℃水浴中使苯酚充分溶解。
②加入羟基喹啉(8-Quinolinol)至终浓度0.1%。
该化合物是一种还原剂、RNA酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂,同时因其呈黄色。
有助于方便识别有机相。
③加入等体积的1M Tris-HCl(pH8.0),使用磁力搅拌器搅拌15分钟,静置使其充分分层后,除去上层水相。
④重复操作步骤③。
⑤加入等体积的0.1M Tris-HCl(pH8.0),使用磁力搅拌器搅拌15分钟,静置使其充分分层后,除去上层水相。
⑥重复操作步骤⑤,稍微残留部分上层水相。
⑦使用pH试纸确认有机相的pH值大于7.8。
⑧将苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。
8、苯酚/氯仿/异戊醇□配制方法1. 说明:从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯/酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)。
氯仿可使蛋白(25 :24 :1)质变性并有助于液相与有机相的分离,而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。
2. 配制方法:将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇(24:1)均匀混合后,移入棕色玻璃瓶中4℃保存。
9、10%(W/V)SDS□组份浓度10%(W/V)SDS□配制量100mL□配制方法1.称量10g高纯度的SDS置于100~200mL烧杯中,加入约80mL的去离子水,68℃加热溶解。
2. 滴加数滴浓盐酸调节pH值至7.2。
3. 将溶液定容至100mL后,室温保存。
10、2 N NaOH□组份浓度2N NaOH□配制量100mL□配制方法1.量取80mL去离子水置于100~200mL塑料烧杯中(NaOH溶解过程中大量放热,有可能使玻璃烧杯炸裂)。
2. 称取8g NaOH小心地逐渐加入到烧杯中,边加边搅拌。
3. 待NaOH完全溶解后,用去离子水将溶液体积定容至100mL。
4. 将溶液转移至塑料容器中后,室温保存。
11、2.5 N HCl□组份浓度2.5 N HCl□配制量100mL□配制方法1. 在78.4mL的去离子水中加入21.6mL的浓盐酸(11.6N),均匀混合。
2. 室温保存。
12、5 M NaCl □组份浓度5 M NaCl□配制量1L□配制方法1. 称取292.2g NaCl置于1L烧杯中,加入约800mL的去离子水后搅拌溶解。
2. 加去离子水将溶液定容至1L后,适量分成小份。
3. 高温高压灭菌后,4℃保存。
13、20%(W/V)Glucose □组份浓度20%(W/V)Glucose□配制量100mL□配制方法1. 称取20g Glucose置于100~200mL烧杯中,加入约80mL的去离子水后,搅拌溶解。
2. 加去离子水将溶液定容至100mL。
3. 高温高压灭菌后,4℃保存。
LB培养基:NaCl l%Yeast Extract 0.5%Tryptone l%琼脂1.5%(固体培养基)STET缓冲液:蔗糖8%(W/V)Tritonx-100 0.5%EDTA 50nmol/lTrisCL(pH8.0)50nmol/lTAE(50×)缓冲液:Tris-HAc 2 mol/LCTAB 50mmol/LEDTA(pH8.0)20mmol/LTE缓冲液:Tris-HCI 10mmol/LEDTA 50mmol/L蔗糖40%氨苄青霉素溶液:将1g粉末状的氨苄青霉素溶于100mL超纯水中,配成10mg/mL,分装1.5mL的管内,-20℃保存备用。
X-gal贮液:将X-gal溶解于二甲基酰氨(DMS)或DMSO中,配成20 mg/mL的贮液分装后避光保存于-20℃,无须过滤或灭菌。
IPTG贮液:将IPTG溶解于DDW中,配成20%贮液,用0.22μm的滤膜过滤除菌分装后保存于-20℃。
Phosphate Buffered Saline (PBS)10X PBS (0.1M PBS, pH 7.2):Na2HPO4 (anhydrous) -------------------------- 10.9 gNaH2PO4 (anhydrous) -------------------------- 3.2 gNaCl ------------------------------------------- 90 gDistilled water --------------------------------- 1000 mlMix to dissolve and adjust pH to 7.2Store this solution at room temperature. Dilute 1:10 with distilled water before use and adjust pH if necessary.20X PBS (0.2M PBS, pH 7.2):Na2HPO4 (anhydrous) --------------------------- 21.8 gNaH2PO4 (anhydrous) --------------------------- 6.4 gNaCl ------------------------------------------- 180 gDistilled water ---------------------------------- 1000 mlMix to dissolve and adjust pH to 7.2Store this solution at room temperature. Dilute 1:20 with distilled water before use and adjust pH if necessary.10X PBS-Tween 20 (0.1M PBS, 0.5% Tween 20, pH 7.2):Na2HPO4 (anhydrous) -------------------------- 10.9 gNaH2PO4 (anhydrous) --------------------------- 3.2 gNaCl ------------------------------------------- 90 gDistilled water ---------------------------------- 1000 mlMix to dissolve and adjust pH to 7.2 and then add 5 ml of Tween 20Store this solution at room temperature. Dilute 1:10 with distilled water before use and adjust pH if necessary.20X PBS-Tween 20 (0.2M PBS, 1% Tween 20, pH 7.2):Na2HPO4 (anhydrous) -------------------------- 21.8 gNaH2PO4 (anhydrous) -------------------------- 6.4 gNaCl ------------------------------------------ 180 gDistilled water --------------------------------- 1000 mlMix to dissolve and adjust pH to 7.2 and then add 5 ml of Tween 20Store this solution at room temperature. Dilute 1:20 with distilled water before use and adjust pH if necessary.。