PEG法检测循环免疫复合物
医学检验“三基”考试题(高级)
医学检验“三基”考试题（高级）一、单选题(每题只有一个正确答案)1、每种荧光染料都有特定的激发波长，激发后产生的荧光波长A、与激发波长相同B、会产生特定波长的荧光和颜色(正确答案)C、会产生相同波长荧光和不同颜色D、都是长寿命荧光E、会产生相同波长荧光2、结核菌素是结核分枝杆菌的何种成分A、蛋白质(正确答案)B、磷脂C、多糖D、脂多糖E、核酸3、下列哪项是免疫荧光标记最常用的荧光探针A、藻红蛋白B、异硫氰酸基罗丹明XC、藻红蛋白花青苷5、藻红蛋白花青苷7(Pecy7)D、得州红E、异硫氰酸荧光素(正确答案)4、某男，17岁，头昏乏力，牙龈出血半年。
体检：贫血貌，皮肤可见散在瘀点，肝、脾、淋巴结不肿大。
疑为再生障碍性贫血。
下列哪项最有助于该病的诊断A、周围全血细胞减少B、网织红细胞计数减低C、正常细胞正常色素性贫血D、骨髓细胞培养集落生长能力降低E、骨髓增生低下，造血细胞减少，非造血细胞增多(正确答案)5、代谢综合征的构成要素不包括A、高胰岛素血症B、高甘油三酯血症C、低高密度脂蛋白胆固醇D、高血压E、酮症(正确答案)6、下列哪一种抗凝剂用于血气分析A、肝素(正确答案)B、草酸钠C、氟化钠D、枸橼酸钠E、EDTA-Na7、尿液1h细胞排泄率检查，留取标本的时间为A、0.5hB、1hC、3h(正确答案)D、5hE、7h8、松弛型质粒A、在宿主细胞中拷贝数较多B、可用氯霉素扩增C、复制时受宿主染色体的控制D、一般没有选择标记E、上述A、B两项正确(正确答案)9、通过甲状腺素促进蛋白质合成的元素是A、锌B、铜C、铁D、钙E、碘(正确答案)10、“咨询服务”不包括A、新检验项目的推荐B、检验项目合理选择C、检验结果的解释D、治疗方案的确定(正确答案)E、提出采集标本的要求11、孕妇黄体分泌孕酮的功能明显降低的时期A、妊娠1个月后B、妊娠2个月后C、妊娠3个月后(正确答案)D、妊娠7个月后E、产后12、“卫星现象”可用于鉴别A、布鲁菌B、金黄色葡萄球菌C、流感嗜血杆菌(正确答案)D、百日咳鲍特菌E、嗜肺军团菌13、PEG法检测非抗原特异性循环免疫复合物，下列不正确的描述是A、4%PEG能沉淀较大分子IC(正确答案)B、试验受温度变化的影响大C、脂血对测定有影响D、是目前最普及简便的方法E、特异性、重复性差14、只作用于T细胞的非特异性刺激物是A、PHA(正确答案)B、PWMC、LPSD、可溶性SPAE、EBV15、在粒细胞研究时，下列哪种试验可了解血液循环中细胞池的大小及滞留时间A、二异丙酯氟磷酸盐标记测定(DF32P)(正确答案)B、泼尼松刺激试验C、氚标记脱氧胸苷测定D、肾上腺素激发试验E、流式细胞仪检测DNA合成及含量16、细胞内钾约占总钾量的98%，血浆中仅占A、1.5%B、0.3%(正确答案)C、0.2%D、2%E、3%17、新生儿溶血症患儿体内引起红细胞溶解的抗体类别是A、IgG(正确答案)B、IgAC、IgMD、IgDE、IgE18、显微镜下分类计数白细胞时，应选择血涂片的A、尾部B、头部C、体尾交界处(正确答案)D、体部E、头体交界处19、A型标准血清与B型血液混合时可引起A、血液凝固B、红细胞凝集(正确答案)C、红细胞叠连D、红细胞收缩E、无反应20、在电镜下能见到实心与空心颗粒的病毒为A、甲型肝炎病毒(正确答案)B、乙型肝炎病毒C、丙型肝炎病毒D、丁型肝炎病毒E、甲型肝炎病毒和乙型肝炎病毒21、下列哪项是非抗原特异性循环免疫复合物的细胞检测技术A、PEG比浊法B、C1q固相法C、mRF凝胶扩散试验D、Raji细胞法(正确答案)E、超速离心法22、下列哪项是T细胞亚群分离时常用的方法A、尼龙毛柱分离法B、E花环分离法C、亲合板结合分离法(正确答案)D、Percoll分层液法E、Ficoll分层液法23、衣原体与病毒的相同点为A、含有RNA和DNAB、有核蛋自体C、严格细胞内寄生(正确答案)D、二分裂方式繁殖E、具有细胞壁24、当测量结果是由若干其他量的值求得时，按其他各量的方差和协方差算得的标准不确定度，称为A、A类标准不确定B、B类标准不确定度C、合成标准不确定度(正确答案)D、扩展不确定度E、范围不确定度25、在不同溯源阶段中测量参考物质或标准品时，测量方法测量结果与用这些测量方法测量实际样品时测量结果的数字关系的一致程度，是指临床检验参考物质或校准品的A、互通性(正确答案)B、一致性C、准确性D、有效性E、特异性26、一般不入血的细菌是A、铜绿假单胞菌B、伤寒沙门菌C、志贺菌(正确答案)D、单核李斯特菌E、鼠疫耶尔森菌27、成人无尿是指24h尿量少于A、100ml(正确答案)B、200mlC、300mlD、400mlE、500ml28、肥达试验所用的所有抗原是A、H、A、B、OB、H、A、B、C、O(正确答案)C、H、OD、H、A、BE、变形杆菌OX29、ICSH建议，血细胞计数时首选抗凝剂是A、EDTA-NaB、EDTAC、EDTA-K(正确答案)D、肝素E、枸橼酸钠30、男性1h细胞排泄率，白细胞的参考值是A、3万/hB、4万/hC、5万/hD、7万/h(正确答案)E、14万/h31、鉴别慢性粒细胞性白血病和类白血病最有价值的细胞染色法是A、特异性酯酶染色B、非特异性酯酶染色C、过氧化物酶染色D、中性粒细胞碱性磷酸酶染色(正确答案)E、糖原染色32、不属于溢出性蛋白尿范畴的是A、游离血红蛋白B、肌红蛋白C、β-微球蛋白(正确答案)D、溶菌酶E、本-周蛋白33、下列哪项不是滤膜结合法的应用A、前提是利用硝酸纤维素膜结合双链DNA(正确答案)B、将与蛋白质结合的DNA片段与游离DNA片段分离C、从多种核酸混合液中筛选出含有特异结合位点的DNA片段D、分离与蛋白质结合及游离的DNA片段E、进行常规的DNA结合作用的动力学研究34、在临床化学室间质量评价全年的两次活动中，对于血钾检测，第一次得分为80%，第二次得分仍为80%，其全年的质评成绩应判断为A、满意的EQA成绩B、不满意的EQA成绩C、成功的EQA成绩(正确答案)D、不成功的EQA成绩E、满足要求35、SDA培养基的pH是A、3.0～5.0B、4.0～5.0C、4.0～6.0(正确答案)D、5.0～6.0E、6.0～7.036、下列哪条代谢途径不能补充血糖A、肝糖原分解B、肌糖原分解(正确答案)C、食物糖类的消化吸收D、糖异生作用E、磷酸戊糖途径37、用免疫荧光技术间接法检测组织中的抗体，应将荧光素标记A、抗原(正确答案)B、相应抗体C、抗免疫球蛋白抗体D、抗原-抗体复合物E、抗C3抗体38、具有粘附作用的细菌结构是A、鞭毛B、芽胞C、普通菌毛(正确答案)D、性菌毛E、荚膜39、人感染卫氏并殖吸虫病主要是由于A、生食或半生食淡水鱼虾B、生食或半生食淡水螺类C、生食或半生食水生植物D、生食或半生食石蟹(正确答案)E、以上均不是40、羊水L/S比值＞2，提示A、胎儿肾成熟B、胎儿肾不成熟C、胎儿肺成熟(正确答案)D、胎儿肺不成熟E、胎儿肝成熟41、温氏法测定血细胞比容，离心后应读取到A、血小板层B、白细胞层C、有核红细胞层D、还原红细胞层(正确答案)E、带氧红细胞层42、有荚膜和芽胞的细菌是A、肺炎克雷伯菌B、炭疽芽胞杆菌(正确答案)C、枯草芽胞杆菌D、破伤风梭菌E、红斑丹毒丝菌43、下列哪种试验用于鉴定细菌对氨基酸的分解能力A、糖发酵试验B、VP试验C、吲哚试验(正确答案)D、甲基红试验E、枸橼酸盐利用试验44、关于生物学检测法哪项不正确A、刺激细胞增殖B、维持细胞生长C、保持细胞活性D、抑制细胞生长E、以上均不对(正确答案)45、成团脱落的黏液柱状上皮细胞可呈A、嵌铺砖状B、融合体样C、蜂窝状(正确答案)D、扁平铺鹅卵石样E、腺腔样46、某人的红细胞与B型血的血清不凝集，其血清与B型血的红细胞也不凝集，此人血型为A、A型B、B型(正确答案)C、O型D、AB型E、亚型47、外周血中网织红细胞升高最明显的是A、珠蛋白生成障碍性疾病B、巨幼细胞性贫血C、再生障碍性贫血D、急性溶血性贫血(正确答案)E、缺铁性贫血48、前向散射光FS信号的强弱与细胞的哪项成正比A、体积大小(正确答案)B、细胞性状C、颗粒多少D、位移速度E、荧光强弱49、在荧光显微镜检查中直接影响检测结果的是A、抗原荧光染色B、抗体荧光染色C、补体荧光染色D、特异性荧光染色E、非特异性荧光染色(正确答案)50、分化差的腺癌细胞可呈A、腺腔样排列B、桑葚样结构(正确答案)C、纤维形癌细胞D、蝌蚪形癌细胞E、癌珠。
补体和循环免疫复合物的检测
补体 溶血—阴性；不溶血—阳性
补体参与的抗原抗体反应
方法评价
①灵敏度高。比沉淀反应和凝集反应的灵敏度 高得多，能测定0.05μg/ml的抗体。 ②特异性强。各种成分都事先滴定，选择最佳 比例，出现交叉反应的机率小。 ③ 易于普及，试验结果显而易见； ④试验条件要求低，不需要特殊仪器或只用分 光光度计。
缓冲液
1.40 1.35 1.30 1.25 1.20 1.15 1.10 1.05 1.00 1.50
2U溶血素
0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
2%SRBE
0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
选择溶血程度与50%溶血标准管最为接近的两管，测定OD值，以OD值 最接近标准管的定为最高有效反应管。
二、ELISA测定循环免疫复合物 ：
C1q固相法 1、 原理； 固相C1q+待测血清（IC）+酶标抗人IgG+底物 ——根据颜色深浅判断IC含量 2、 评价： 敏感度较高 重复性好 结果稳定性易受影响
免疫复合物检测的临床意义
1、 可作为评价疾病的活动情况及其对治 疗的反应性、恶化预兆和疾病分期的指 标。 2、 可帮助诊断某些疾病。 3、 可协助研究疾病的发病机理。
50％溶血标准管
2%绵羊红细胞悬液0.5ml H2O2.0ml 1.8%NaCl溶液2.0ml 2%SRBC悬液0.5ml
CH50测定方法
试管号
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
1：20稀释血清
0.10 0.15 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 0.50 0.00
临床医学检验(临床免疫学)高级职称试题与答案
临床医学检验（临床免疫学）高级职称试题及答案所含题型：单选题.多选题.案例分析题一、单选题1.CH50试验中，一个CH50U是指（）A.引起50%溶血所需要的最小补体量B •引起100%溶血所需要的最小补体量C•引起50%溶血所需补体的最高稀释倍数D •引起100%溶血所需补体的最高稀释倍数E •以上均不对答案：A2•下列关于补体活化的MBL途径的描述，错误的是（）A.激活起始于急性期蛋白产生前B.MASP具有与活化的Clq同样的生物学活性C.C3转化酶是C4b2bD.参与非特异性免疫，在感染的早期发挥作用E.C反应蛋白可激活Clq答案：A3.B细胞膜表面主要览是（）A.IgG 和IgAB.IgA 和IgMC.IgD 和IgMD.IgD 和IgEE.IgG 和IgM答案：c4.下加哪项为非抗原特异性循环免疫复合物的抗球蛋口检测技术（）A.PEG比浊法B.Clq固相法C.mRF凝胶扩散试验D.Raji细胞法E.超速离心法答案：c5.3-6个月婴儿易患呼吸道感染主要是因为哪类Ig不足（）A.IgGB.IgMC.SIgAD.IgDE.IgE答案：C6.识、别抗原抗体复合物的补体是（）A.ClqB.ClrC.ClsD.C2E.CIqrs答案：E7•补衽蛋口约占人体血清总蛋口的（）A.2%B.5%C.10%D.15%E.25%答案：C&具有刺激肥大细胞脱颗粒、释放组胺的补体裂解片段是（）A.C3aB.C3bC.C5bD.C4bE.C2a答案：A9•下列CH50不降低的疾病是（）A.急性炎症B.SLE活动期C.RAD •严重肝病E •亚急性细菌性心内膜炎答案：AlO.Raji细胞是（）A•山淋巴瘤患者分离建立的K细胞株B.山淋巴瘤患者分离建立的B细胞株C•山宫颈癌患者分离建立的B细胞株D•山淋巴瘤患者分离建立的NK细胞株E.山淋巴瘤患者分离建立的T细胞株答案:B11 •能抑制Clr和Cis酶活性的物质是（）A.C8bpB.DAFC.C1INHD.S蛋白E.C4bp答案：C12・IgA、IgD和IgE不能与Clq结合的原因是（）A・分子结构简单B.Fc段无补体结合点C・F“b段结构与补体相差其远D.VH无补体结合点E.VL无补体结合点答案：B13.1g分子的基本结构是（）A.山两条相同的重链和两条相同的轻链组成的四肽链结构B.由两条重链和两条轻链组成的四肽链结构C •山一条重链和一条轻链组成的二肽链结构D •山一条重链和两条轻链组成的三肽链结构E •山一条重链和三条轻链组成的四肽链结构答案：A14.mRF与下列物质的亲和力的程度应是（）A•对IC、聚合IgG很低，对变性IgG很高,B.对IC、变性IgG及聚合IgG均很高C.对IC及变性IgG很低，对聚合IgG很高D.对IC很高，对变性IgG及聚合IgG很低E•对IC、变性IgG及聚合IgG很低答案：B15•下列哪种补体成分在激活效应的放大作用中起重要作用（）A.CIB.C2C.C3D.C4E.C5答案:C16.具有免疫粘附作用的补体的生物活性片段是（）A.C1 〜C9B.C2aC.C3a% C5a% C4aD.C3、C4、CR1E.C3b答案：E17.PEG法检测非抗原特异性循环免疫复合物，下列不正确的描述是（）A.4%PEG能沉淀较大分子ICB.试验受温度变化的影响大C •脂血对测定有影响D•是U前最普及简便的方法E•特异性、重复性差答案：A18.木能刺激机体组织产生自身抗体的抗原是（）A •经化学修饰的组织抗原B.与正常组织成分有交叉反应的外来抗原C.隔绝的体内自身成分D•自身细胞HLA-DR抗原的表达E •高分化的组织抗原答案：E19•补体最主要的活性是（）A •溶细胞作用B•调理作用c •吞噬作用D.免疫调节作用E •清除免疫复合物20•机体缺乏IgM易患（）A •反复呼吸道感染B.化脓性感染C.革兰阴性细菌败血症D.巨球蛋白血症E.重链病答案：C21 •无较链区的仗是（）A.IgG、IgAB.IgA、IgMC.IgM、IgED.IgD、IgGE.IgM、IgD答案：c22.*卜结合试验之前的抗原抗体方阵滴定的LI的是（）A.选择抗原抗体最适比例B.使抗原抗体复合物形成最少C •使抗原抗体复合物结合补体的量最多D •避免抗原抗体复合物太多E.选择前带现象答案：A23•正常血清中，补体含量最高的成分是（）A.C1B.C2C.C3D.C4E.C5答案：C24•下列关于IgG的特性，正确的是（）A •是天然血型抗体B.是胚胎晚期合成的主要抗体C•分为4个亚类D•是未成熟B细胞的抗原识别受体E.C区有4个功能区答案：C25•分离血清CIC的PEG相对分子量是（）A.24000B.12000C.6000D.3000E.1000答案：C26.*卜体活化的经典途径的主要激活物是（）A.细菌脂多糖B.酵母多糖C.免疫复合物D.肽聚糖E.凝聚的IgA27.具有J链结构的临是（）A•单体IgAB.IgA、IgEC.IgG、IgDD.SIgA^ IgME.IgM、IgE答案：D28•说原抗体复合物中的抗体不能参与补体活化的经典途径激活的是（）A.IgMB.IgG4C.IgG3D.IgG2E.IgGl答案:B29.CFT中的溶血素是（）A.SRBCB.抗SRBC抗体C •补体D.ICE・抗原答案:B30.CFT中溶血素滴定时，一个溶血单位是指（）A•能完全溶解RBC的溶血素的最高稀释度B.不能完全洛解RBC的溶血素的最高稀释度C•能完全溶解大部分RBC的溶血素的最高稀释度D•能完全溶解小部分RBC的溶血素的最高稀释度E •以上均不对答案：A31.CFT可适用于检测下列哪类抗体（）A.SIgAB.IgAC.IgM 和IgGD.IgDE.IgE答案：C32.抗骨骼肌抗体（AMSA）最常用的检测方法是（）A.间接免疫荧光法，以Hep-2细胞为细胞基质片来提供抗原的来源B.WesternBlotC•间接免疫荧光法，以骨骼肌切片为基质来提供抗原的来源D.ELISAE •免疫电泳答案：C33•多数补体分子属于（）A3球蛋口B.Y球蛋口C.P球蛋口DJ链E.口蛋口答案:C34•非抗原特异性CIC的检测，只检测（）A.CIC中抗原性质B.CIC中抗体性质C.CIC的总量D.CIC中抗原的总量E.CIC中抗体的总量答案:C35•机体缺乏IgG易患（）A •反复呼吸道感染B.化脓性感染C.革兰阴性细菌败血症D •巨球蛋白血症E.重链病答案：B36•下列CH50不增高的疾病是（）A.急性炎症B.SLE活动期C.组织损伤D •恶性肿瘤等E.皮肌炎答案：B37•补体系统是（）A•正常血清中的单一组分，可被抗原■抗体复合物激活B•存在正常血清中，是一组对热稳定的组分C•正常血清中的单一组分，随抗原刺激而血清含量升高D.lll 30多种蛋白组成的多分子系统，具有酶样活性和自我调节作用E•正常血清中的单一组分，其含量很不稳定答案:D3&遗传性血管性水肿病人可能与下列哪项有关（）A.C3a和C5a合成过量B.C1抑制因子缺乏或功能缺陷C•病人IgE水平过高D.C2、C4水平常在正常范围内E.常因吸入过敏原导致症状突然发生答案：B39.1g可变区的生物学功能是（）A.提呈抗原B.细胞毒作用C •调理作用D •识别并特异性结合抗原E参与T细胞在胸腺内的分化答案:D40•对扩增的ssDNA进行多态性分析的HLA分型方法是（）A.PCR-RFLPB.PCR-SSCPC.PCR-SSOPD.SBTE.PCR-SSO答案：B41.CH50法测定总补体活性，以下列哪项为报告方式（）A.OD 值B.CH50U/mlC •被测血清稀释度D.被测血清用量（ml）E.mg/ml答案：B42•下列关于SIgA的描述，错误的是（）A.是机体粘膜局部免疫的主要抗体B.婴儿可通过母乳获得C.由J链连接的二个单体IgA和分泌片组成D.具有中和毒素的功能E.可与Clq结合激活补体答案：E43.CH50试验中，溶血程度与补体溶血活性的关系曲线是（）A.直线B.双曲线C.抛物线D.S形曲线E •正态分布答案：D44•下列关于IgD的描述，错误的是（）A•是未成熟B淋巴细胞的主要表面标志B •易被蛋白酶水解C.半衰期很短，仅3天D •较链区较长E•记忆B淋巴细胞的mlgD逐渐消失答案:A45•下列免疫细胞相互作用需要抗体参加的是（）A.Th与B细胞相互作用，使B细胞获得活化的第二信号B•特异性杀伤靶细胞C.杀伤细胞通过ADCC杀伤靶细胞D.NK细胞自然杀伤靶细胞E.APC与Th细胞间相互作用答案：C46•下列关于［gE特性的描述，错误的是（）A.H链有4个CH功能区B •有亲细胞性C•引发I型超敬反应D.寄生虫感染时IgE水平降低E.在个体发育中合成最晚答案：D47.矗激活补体经典途经的览是（）A.IgGl、IgG2^ IgG3^ IgMB.IgGl、IgG2、IgG4、IgMC.IgG、IgD、IgE、IgMD・IgG4、IgA、IgE、IgDE・凝聚的IgG4、IgD、IgE答案：A48.TI抗原应答产物的Ig类别是（）A.IgGB.IgAD.IgDE.IgE49. PEG 法检测非抗原特异性CIC,其参考标准品多用哪类人热聚合抗体（）A. IgGB. IgAC. IgMD. IgDE. IgE答案：A50. CFT 的正式试验中洛血素成分的效价是（）A. 4个单位B. 1个单位C. 2个实用单位D. 2个单位E. 3个单位答案：D51.IgG 分子与Clq 的结合位点是（）A. vHB.讯 C.冋 D.叽 E.CH 。
环卵沉淀试验名词解释
环卵沉淀试验名词解释
环卵沉淀试验（Circulating immune complex assay，CIC）是一种检测体内循环免疫复合物（CIC）水平的方法。
循环免疫复合物是指由抗原和抗体结合形成的复合物，它们在血液循环中存在并参与多种疾病的发生和发展。
环卵沉淀试验是通过将血清样品与卵清白蛋白（BSA）结合，形成免疫复合物，然后使用聚乙二醇（PEG）沉淀这些复合物，最后测量剩余的游离BSA浓度，从而确定循环免疫复合物的水平。
环卵沉淀试验可以用于多种疾病的诊断和监测，如风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、肝炎、艾滋病等。
它可以帮助医生评估疾病的严重程度、预测疾病的进展和治疗效果。
但是，环卵沉淀试验也存在一些局限性，如对某些类型的循环免疫复合物不敏感、结果受到抗体和抗原的影响等。
总之，环卵沉淀试验是一种重要的免疫学检测方法，可以帮助医生了解循环免疫复合物的水平，从而更好地诊断和治疗疾病。
循环免疫复合物测定
待测血清浊度值=（测定管吸光度-对照管吸光度）×100
免疫复合物称循环免疫复合物(circulating immune 在pH、离子强度等条件固定时，蛋白质分子量越大，用以沉淀的PEG浓度越小。
在pH、离子强度等条件固定时，蛋白质分子量越大，用以沉淀的PEG浓度越小。 聚乙二醇(polyethyleneglycol，PEG)是非离子型亲水剂，为乙二醇的聚合物。
合物，随血液循环的免疫复合物称循环免疫复合物(circulating immune complex，CIC)。
熟悉循环免疫复合物检测的临床意义
不是疾病诊断的主要指标，但在发病机制研究，了解病情进展，判断治疗效果方面能提供有意义的帮助
聚乙二醇(polyethyleneglycol，PEG)是非离子型亲水剂，为乙二醇的聚合物。
用1％分聚光乙光二度醇计(P测Ec定Go)浊溶m度液，p可le反x映，CIC含C量I。C)。免疫复合物沉积可引起多种疾病。
试分析循环免疫复合物测定实验过程中有何因素将影响实验结果？
聚乙二醇(polyethyleneglycol，PEG)是非离子型亲水剂，为乙二醇的聚合物。
聚乙二醇(polyethyleneglycol，PEG)是非离子型亲水剂，为乙二醇的聚合物。
循环免疫复合物测定
目的
1.掌握循环免疫复合物测定原理 2.熟悉循环免疫复合物检测的临床意义
原理
免疫复合物(immune complex，IC) 抗原抗体复合物，在正常情况下，机体防御系统 作为清除异物抗原的一种方式，清除体内免疫复 合物对机体有利。
免疫复合物沉积可引起多种疾病。
在某些情况下，体内形成的免疫复合物不能被及时清除，沉积在机体某一部位称为局部免疫复合物，游离于体液中称为可溶性免疫复
PEG法检测循环免疫复合物 临床免疫学实验
PEG法检测循环免疫复合物【实验目的】掌握PEG法检测循环免疫复合物的实验步骤，影响因素，结果判断，结果计算方法。
【实验原理】低浓度（3~5%)的聚乙二醇（PEG) 能选择性沉淀免疫复合物。
在受检血清中加入PEG，使最终浓度为3.5%，可将血清中免疫复合物沉淀下来，需用分光光度计测定吸光度值(A)表示其相对量。
【实验材料】1.0.1mol/L硼酸缓冲液：称取硼砂0.4g，硼酸0.51g溶于100ml蒸馏水中，调PH至8.6。
2.4.166%PEG溶液：用硼酸缓冲液配制。
PEG的分子量为6000。
3.受检血清，试管，吸管，721分光光度计。
【实验步骤】1.吸待检血清0.2ml，用硼酸缓冲液0.4ml稀释（血清稀释3倍）。
2.分对照管和测定管：对照管：硼酸缓冲液2ml+稀释血清0.22ml；测定管：4.166％PEG 2ml+稀释血清0.22ml（此时PEG最终浓度为3.75％）3.混匀后两管均放4℃冰箱1h后取出，室温放置10min。
4.用721 0.5×1cm比色杯，检测测定管A450nm值，（对照管调零）。
【实验结果】待测血清浊度值＝（测定管A－对照管A)×10000=540【实验讨论】1.注意在本试验中要求的PEG终浓度为3.75％。
2.受检查血清为何要一定保持新鲜，放冰箱保存不得超过一周（因为即使没有污染，也因血清中聚合IgG的形成而出现假阳性）3优缺点：①该试验不但可检测IC，还可获得IC（收集沉淀），简单，快速；②特异性差，易受血清中大分子物质干扰；③常作为IC检测的粗筛试验4.检测IC的理想方法：①操作简便，敏感；②可检测各种类型IC；③能分析IC的大小和组成成分；④能精确定量，无假阳性。
免疫复合物(Immune Complexes,IC)的检测(1)
免疫复合物(Immune Complexes,IC)的检测（1）免疫复合物在体内存在有两种方式，一是存在于血液中的循环免疫复合物（CIC），一是组织中固定的免疫复合物。
免疫复合物的检测技术可分为抗原特异性方法和非抗原特异性方法。
在大多数情况下，免疫复合物中的抗原性质不太清楚或非常复杂，所以抗原特异性方法并不常用。
一、循环免疫复合物的检测根据免疫复合物的物理学、免疫学和生物学特性，已经设计出很多检测CIC的方法（表1）。
表1 循环免疫复合物的常用检测方法类别原理方法敏感性备注物理法分子大小1、超速离心——适于研究2、分子超滤——适于研究3、凝胶过滤30μg适于研究溶解度1、PEG沉淀20μg粗定量，易推广2、冷沉淀——定性，临床应用补体法固定补体，结合C1q 抗补体试验0.1μg常用，特异性差1、C1q凝胶沉淀试验100μg定性，不易普及2、C1q偏离试验4μg不易普及3、液相法10μg不易普及4、固相法1μg不易普及胶固素胶固素结合试验3μg敏感，稳定抗Ig法结合RF1、RF凝胶沉淀试验100G定性，不敏感2、mRF固相抑制试验1～20μg不易普及3、PRF凝集抑制试验1～10μg不易普及结合Ig抗抗体法2～3μg不易普及细胞法Fc受体1、血小板凝集试验1～4μg需新鲜制备2、ADCC抑制试验5～10μg细胞活性质控难3、Mφ吞噬抑制试验0.03μg细胞活性质控难补体受体1、Raji细胞法6μg需维持细胞株2、花环抑制试验10μg影响因素多（一）物理测定法1、聚乙二醇法聚乙二醇（PEG）是乙二醇聚合而成的无电荷形多糖分子，分子量变化范围较大，常用的分子量是6000。
用3％～4％浓度的P EG可以选择性地将大分子免疫复合物沉淀下来，其作用机制尚不甚清楚。
将PEG溶液与待检血清混合，置4℃冰箱过夜后离心，将沉淀物用P EG溶液充分洗涤，重新溶解于 0.01mol/L的NaOH中，在波长280nm下测量溶液的吸光度；也可利用散射比浊法直接测定PEG沉淀的免疫复合物；以不同浓度的热聚合IgG作为参考标准来计算CIC的含量。
循环免疫复合物(CIC)
循环免疫复合物（CIC)循环免疫复合物（CIC)介绍：抗原和相应抗体结合形成的物质称为免疫复合物，免疫复合物和补体、其他免疫活性物质结合，沉积在血管壁，可导致组织损伤及血管炎，引起一系列的疾病，如红斑狼疮，由于免疫复合物能在循环血液中检测到，故称之为循环免疫复合物。
循环免疫复合物的测定虽无特异性诊断意义，但对病情的活动性判断和指导治疗有一定价值，测定循环免疫复合物的方法很多，这里仅介绍临床常用的聚乙二醇法。
循环免疫复合物与聚乙二醇作用，以浊度变化表现出来，可根据浊度的大小来反映免疫复合物的多少。
如浊度大，则说明血液中循环免疫复合物增多，病情活动，但是对诊断没有特异性价值。
循环免疫复合物（CIC)正常值：抗补体法：阴性。
PEG沉淀法：4.3±2.0。
SPA夹心酶联免疫吸附试验：小于28.4mg／L。
注意：根据不同的实验方法和条件、得出各实验室的正常参考值。
循环免疫复合物（CIC)临床意义：循环免疫复合物是体内抗原和抗体反应形成的，多数情况下对机体有利，只有少数情况下免疫复合物沉淀下来，引起组织损伤，造成疾病。
形成免疫复合物的抗原可分为内源性和外源性，按此类不同，可将CIC疾病分类如下：(1)与内源性抗原有关者：①IgG抗原：类风湿性关节炎、混合性冷球蛋白病、高丙种球蛋白血症性紫癜。
②核抗原：系统性红斑狼疮。
③特发的细胞抗原：肿瘤、自身免疫性疾病。
(2)与外源性抗原有关者：①医源性抗原：血清病、药物变态反应。
②环境中抗原：吸入性抗原(外源性变态反应性肺泡炎)、摄入性抗原(疱疹样皮炎)。
③传染性生物性抗原：A.病毒性抗原：肝炎、登革出血热。
B.细菌性抗原：链球菌感染后肾小球肾炎、麻风。
C.原虫性抗原：疟疾、锥虫病。
D.蠕虫性抗原：血吸虫病、盘尾丝虫病。
(3)抗原性质不明者：慢性免疫复合物性肾小球肾炎，伴有或不伴有嗜酸性白细胞增多症性脉管炎。
循环免疫复合物（CIC)注意事项：一、抽血前的注意事项1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物，避免大量饮酒。
循环免疫复合物
免疫复合物：抗原与其相应抗体结合形成局部免疫复合物：沉积于机体某一局部的免疫复合物可溶性免疫复合物：游离在体液中的免疫复合物循环免疫复合物：血液中的免疫复合物一、循环免疫复合物抗原和相应抗体结合形成的物质称为免疫复合物，免疫复合物和补体、其他免疫活性物质结合，沉积在血管壁，可导致组织损伤及血管炎，引起一系列的疾病，如红斑狼疮，由于免疫复合物能在循环血液中检测到，故称之为循环免疫复合物。
循环免疫复合物的测定虽无特异性诊断意义，但对病情的活动性判断和指导治疗有一定价值，测定循环免疫复合物的方法很多，这里仅介绍临床常用的两种。
1、聚乙二醇法循环免疫复合物与聚乙二醇作用，以浊度变化表现出来，可根据浊度的大小来反映免疫复合物的多少。
如浊度大，则说明血液中循环免疫复合物增多，病情活动，但是对诊断没有特异性价值。
2、冷球蛋白测定亦可称冷免疫球蛋白，是在低温自然沉淀，加热后又能溶解的蛋白复合物。
当血液中出现冷球蛋白时，称冷球蛋白血症，在红斑狼疮病人中较多见。
有时见两小腿部皮下紫癜，而血小板检查正常，这是由于冷球蛋白在皮下沉淀的结果，该方法对判断病情变化和指导治疗有参考价值。
二、相关问题1、问：“红细胞免疫黏附，清除体内CIC”中的“CIC”是什么意思？答：循环免疫复合物（Circulationimmunecomplex，CIC）又称可溶性免疫复合物，分子量为50万～100万，沉降系数8.8～19S，它不易被吞噬细胞吞噬，又不能经肾小球排出，可较长时间在血液中循环，一旦大量循环免疫复合物沉积于组织中，则引起组织损伤及相关的免疫复合物病。
CIC阳性常见于：（1）部分自身免疫性疾病，如SLE，类风湿关节炎等；（2）膜增殖性肾炎，链球菌感染后肾炎；（3）传染病，如慢性乙型肝炎，疟疾，麻风等；（4）恶性肿瘤。
2、问：我想检测血中的CIC，如果溶血了，测的结果还准吗？答：我觉得CIC是用免疫的方法测定的，所以我觉得抗原抗体的反应，受溶血的影响比较小。
循环免疫复合物(CIC)的检测方法
循环免疫复合物（CIC）的检测方法循环免疫复合物（CIC）的检测方法大致可分为两类，即抗原特异性方法和抗原非特异性方法。
前者通过区别游离的抗原和与抗体结合的抗原，选择性测定含有某种特定抗原的IC。
在已知由某种抗原引起的免疫病理反应的疾病中，可应用此类方法。
抗原非特异方法，则不考虑形成IC抗原的性质，根据免疫球蛋白分子在结合抗原以后发生的物理学和生物学特性的改变进行检测。
由于体内形成的CIC可能涉及多种抗原—抗体系统。
所以临床上多采用此法。
其检测方法种类繁多。
大致可归纳为：1、物理方法根据IC分子量大小，表面电荷和溶解度等特性而设计。
例如：PEC测定法、冷沉淀法、选择性超滤、超速离心法等。
2、分子受体法根据某些活性分子上的补体和Pc受体能与IC结合的原理设计。
例如：根据CIq能与免疫球蛋白分子Fc段上的补体结合点结合，设计了CIq结合试验，如简便CIq结合试验、CIq偏离试验、固相CIq结合试验、PEG-CIq免疫扩散试验和CIq溶解性试验以及抗补体试验、胶固素结合试验等。
3、细胞受体法根据某些细胞上具有补体受体和/或Fc受体能与IC结合的原理设计。
例如：Raji细胞技术、巨噬细胞法、血小板凝聚试验等。
这类方法的灵敏度和特异性较好，但需进行活细胞培养或细胞分离，影响因素多，重复性较差。
4、其他方法葡萄球菌A蛋白试验，是利用PEG沉淀血清中IC，并使其吸附于富含A蛋白的金葡菌上，再用125I-A蛋白与之结合，测定125I放射活性。
但本法只能检测IgG1、IgG2和IgG4形成的IC，因葡萄球菌A蛋白分子上无IgG3的Fc受体。
抗球蛋白技术是根据CIC能与类风湿因子(R F)或抗核抗体结合的特性设计，如抗球蛋白试验。
以上方法各有其不同的影响因素，因此，不同的试验方法所得结果并不总是一致，且由于缺乏统一的标准品作为对照，各实验室的检测结果常难以比较。
故在检测CIC时，最好用几种方法同时测定。
本节主要介绍几种应用较广的CIC检测方法。
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【试剂与材料】
1、0.1mol/L硼酸缓冲液： 称取硼砂0.4g，硼酸0.51g， 溶于100ml蒸馏水中，调PH至8.6。
2、4.166%PEG溶液：用硼酸缓冲液配制。 PEG的分子量为6000。 3、受检血清，试管，721分光光度计。
实验方法
1.吸待检血清0.2ml，用硼酸缓冲液0.4ml稀释（血清 稀释3倍）。 2.分对照管和测定管： 对照管：硼酸缓冲液2ml＋稀释血清0.22ml； 测定管：4.166％PEG2ml+稀释血清0.22ml（此时 PEG最终浓度为3.75％） 混匀后两管均放4 °C冰箱1h后取出，室温放置 10~15min。 用0.5×1cm比色杯在分光光度计上测两管A495nm 值，以硼酸缓冲液调零。
PEG法检测循环免疫复合物
免疫研究所 梁亚玲
【实验目的】
掌握PEG法测定循环免疫复合物(CIC)的 实验步骤、影响因素，结果判断标准和 计算方法；了解循环免疫复合物测定的 临床意义。
【实验原理】
低浓度（2 ~5%)的聚乙二醇（PEG) 能选 择性沉淀免疫复合物。在受检血清中加入 PEG，使最终浓度为3.5%，可将血清中免 疫复合物沉淀下来，需用分光光度计测定 沉淀量，用光密度(O·D)表示其相对量。 本法简便易行，国内己广泛应用。
结果判断
待测血清浊度值 ＝（测定管A－对照管A)×100
实验讨论
注意在本试验中要求的PEG终浓度为何为 3.75％。 受检查血清为何要一定保持新鲜，放冰箱 保存不得超过一周（因为即使没有污染， 也因血清中聚合IgG的形成而出现假阳性）。