浙江省XX年高中生物疑难问题解决专题培训资料a淀粉酶
高中生物浙科版(浙江专版)选修一课件：第二章 实验四 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测
解析：果胶酶可将紫甘薯匀浆中的果胶水解成半乳糖醛 酸和半乳糖醛酸甲酯，以提高紫甘薯的利用率；有些微 生物，如黑曲霉、苹果青霉都可用于生产果胶酶；由于 酶在水溶液中不稳定，所以常将酶固定在某种介质上制 成固定化酶。紫甘薯匀浆流经 α淀粉酶柱后，淀粉会被 水解成糊精，糊精经脱色后加入 KII2 溶液后呈红色。 答案：(1)黑曲霉(或苹果青霉) 固定化酶 (2)D (3)B
3．判断下列叙述的正误 (1)固定化 α淀粉酶可永久使用 (×)
(2)用固定化 α淀粉酶进行淀粉水解实验时不需考虑温度及 pH 的影响 (× )
(3)α淀粉酶固定化实验结束后，将固定化柱放在常温下即可 (× )
核心要点| 酶的固定化方法及实验步骤分析
1．酶的固定化方法
名称 包埋法 化学结 合法 吸附法 原理 将酶或微生物细胞均匀地包埋在不溶于 水的多孔性载体中，分为凝胶包埋法和 微囊化法 利用共价键、离子键将酶分子或细胞相 互结合，或将其结合到载体上，分为交 联法、共价结合法、离子结合法 通过物理吸附作用，把酶或细胞固定在 醋酸纤维素、琼脂糖、多孔玻璃或聚丙 烯酰胺等载体上 图示
“课下综合检测”见“课时跟踪检测(四)” (单击进入电子文档)
糊精
麦芽糖
3．α淀粉酶固定化实验步骤
注射器
淀粉溶液
KII2
4
1．如何证明洗涤固定化酶柱的流出液中没有淀粉酶？
提示：可在试管中加入 1 mL 可溶性淀粉，再加几滴淀粉酶柱流 出液，保温几分钟后用碘液检验。如仍显蓝色，则流出液中没有 淀粉酶。
2．耐高温的淀粉酶有哪些可能的用途？
提示：可以在高温下使淀粉水解快，而且酶不会因高温而失活， 所以可在一些需要高温加热同时又要水解淀粉的反应中使用。
最新精选浙科版高中生物选修1 生物技术概述实验6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测知识点练习四十
最新精选浙科版高中生物选修1 生物技术概述实验6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测知识点练习四十第1题【单选题】下列关于酵母细胞固定化实验的叙述，正确的是( )A、用温水使海藻酸钠迅速溶解，待其冷却到室温后用于包埋细胞B、进行包埋时，用于悬浮细胞的CaCl2溶液浓度要适宜C、注射器(或滴管)出口应尽量贴近液面以保证凝胶珠成为球状D、包埋酵母细胞的凝胶珠为淡黄色半透明状，并具有一定的弹性【答案】：【解析】：第2题【单选题】右图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图，下列叙述不正确的是( )A、刚溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液B、图1中X溶液为CaCl2溶液，其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠C、图2发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接触D、图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中【答案】：【解析】：第3题【单选题】下列关于酶的应用的说法中，合理的是( )A、使用加酶洗衣粉先用热水浸泡洗衣粉和衣物，洗涤效果好B、污渍成分比较复杂时应选用复合加酶洗衣粉，以减少用量C、加酶洗衣粉中的酶制剂需用特定材料包裹，属于固定化酶D、固定化酶可以反复使用，且固定化后不会影响酶的催化活性【答案】：【解析】：第4题【单选题】关于酵母细胞的固定化实验，下列说法不正确的是A、溶解海藻酸钠时用小火间断加热，防止焦糊B、将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入已活化的酵母细胞C、将凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30 min左右D、如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏高【答案】：【解析】：第5题【单选题】下列关于酶工程的叙述正确的是( )A、需依次经过提纯、沉淀、过滤等过程B、酶制剂中的酶通常用化学方法人工合成C、酶的分离、提纯过程中要保持酶的活力D、酶固定化通过改变酶的空间结构提高催化效率【答案】：【解析】：第6题【单选题】下列关于酶和细胞的固定化的叙述不正确的是( )A、酶分子很小，宜采用包埋法固定B、酶分子很小，宜采用化学结合法或物理吸附法固定C、细胞个大，难被吸附或结合D、细胞宜采用包埋法固定【答案】：【解析】：第7题【单选题】下列关于酶制剂的叙述正确的是( )A、需依次经过提纯、沉淀、过滤等过程B、经过固定化的酶才能称为酶制剂C、酶制剂活性的维持需要提供营养物质D、酶制剂中的酶最终来源于活细胞【答案】：【解析】：第8题【单选题】酶在大规模产业化应用的生产中，首先需分离提纯获得酶制剂．下列正确表示分离提纯流程的是( )①破碎细胞②层析提纯③过滤④冷冻干燥结晶．A、①→③→②→④B、①→②→③→④C、①→③→④→②D、①→④→③→②【答案】：【解析】：第9题【单选题】固定化酶和固定化细胞常用的方法不包括( )A、射线刺激法B、包埋法C、化学结合法D、物理吸附法【答案】：【解析】：第10题【单选题】酵母细胞的活化是指( )A、让酵母细胞恢复运动状态B、让处于休眠状态的酵母细胞重新恢复正常的生活状态C、让酵母细胞内酶活性加倍D、让酵母细胞在缺水状态下更容易休眠【答案】：【解析】：第11题【多选题】下列有关固定化酶和固定化细胞的说法，正确的是( )A、固定化酶和固定化细胞都能反复使用但酶的活性迅速下降B、固定化酶技术一次只能固定一种酶C、某种固定化酶的优势在于能催化一系列生化反应D、固定化技术常用的方法有包埋法、化学结合法、吸附法【答案】：【解析】：第12题【多选题】科研人员比较了单独固定云微藻和混合固定云微藻、芽孢杆菌后云微藻的增殖变化，结果如图．相关叙述正确的是( )A、实验中单独固定和混合固定通常采用包埋法B、可采用稀释涂布平板法对云微藻和芽孢杆菌计数C、实验时间内固定后的云微藻数量均呈“J”型增长D、混合固定时云微藻增殖快，与芽孢杆菌提供CO2有关【答案】：【解析】：第13题【实验探究题】下图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图，图3为某同学制备的凝胶珠图片。
2019-2020学年度高中生物选修1 生物技术概述实验6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测浙科版习题精选
2019-2020学年度高中生物选修1 生物技术概述实验6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测浙科版习题精选第二十七篇第1题【单选题】下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，错误的是( )A、从酶的固定方式看，吸附法比化学结合法对酶活性影响小B、作为消化酶使用时，蛋白酶制剂以口服方式给药C、尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用D、将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，目的是洗去CaCl2和杂菌【答案】：【解析】：第2题【单选题】下列关于高中生物学实验的原理、方法或选材的叙述，正确的是( )A、制作果醋时，通氧不足或温度过低会使发酵受影响B、利用稀释涂布平板法对细菌计数时需借助于显微镜C、对提取出的胡萝卜素进行纸层析鉴定，在纸层析过程中，滤纸可放在普通烧杯中D、固定化酶和固定化细胞技术中，反应产物对固定化酶的活性没有影响【答案】：【解析】：第3题【单选题】下列不属于固定化酶在利用时的特点的是( )A、有利于酶与产物分离B、可以被反复利用C、能自由出入依附的载体D、一种固定化酶一般情况下不能催化一系列酶促反应【答案】：【解析】：第4题【单选题】酶制剂、固定化酶、固定化细胞已经广泛地应用于各个领域，下列有关叙述错误的是( )A、90 ℃高温会使Taq酶失去催化活性B、制备固定化酶的方法主要有包埋法、交联法和吸附法C、固定化酶固定时可能会造成酶的损伤而影响活性D、固定化细胞可以催化一系列酶促反应【答案】：【解析】：第5题【单选题】下列选项中不属于酶的固定化技术是( )A、载体结合法B、冷冻干燥法C、交联法D、包埋法【答案】：【解析】：第6题【单选题】下列关于酶和细胞的固定化研究及应用的叙述，正确的是( )A、用海藻酸钠固定酵母细胞的方法属于物理吸附法B、用化学结合法固定化酶不会对其活性产生影响C、固定化酶和固定化细胞催化反应的底物都可以是大分子D、固定化酶和固定化细胞催化反应的速率会受环境影响【答案】：【解析】：第7题【单选题】下列有关“酵母细胞固定化”实验的叙述中，正确的是( )A、将干酵母粉置于蒸馏水中活化的目的是使酵母细胞吸水膨胀B、将刚溶化的海藻酸钠立即与酵母细胞混合可以提高凝胶珠硬度C、控制凝胶珠在CaCl2溶液中的浸泡时间，可以控制凝胶珠的硬度D、导致凝胶珠颜色过浅的原因可能是酵母细胞没有充分活化【答案】：【解析】：第8题【多选题】下列关于生物技术实践的叙述，错误的是( )A、固定化酵母细胞过程中，用注射器滴加溶液时要接近CaCl2液面，防止凝胶珠出现“尾巴”B、用加酶洗衣粉洗涤污渍时，浸泡时间与洗涤效果没有关系C、向DNA溶液中加入二苯胺试剂即可出现蓝色D、腐乳制作过程中，添加料酒、香辛料和盐，均可以抑制杂菌的生长【答案】：【解析】：第9题【多选题】下列有关固定化酶和固定化细胞的说法，正确的是( )A、固定化酶和固定化细胞都能反复使用但酶的活性迅速下降B、固定化酶技术一次只能固定一种酶C、某种固定化酶的优势在于能催化一系列生化反应D、固定化技术常用的方法有包埋法、化学结合法、吸附法【答案】：【解析】：第10题【多选题】下列有关制备固定化酵母细胞叙述正确的是( )A、在向溶化好的海藻酸钠溶液中加入的必须是已活化的酵母细胞B、溶化好的海藻酸钠溶液必须冷却至室温，才能加入细胞C、溶解海藻酸钠，最好采用小火，或者持续加热的方法D、在固定化酵母细胞的过程中，要以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中【答案】：【解析】：第11题【填空题】在20世纪50年代，酶已经大规模地应用于各个生产领域，到了70年代又发明了固定化酶与固定化细胞技术．在实际生产中，固定化酶技术的优点是固定在载体上的酶能______；在制备固定化酵母细胞中，所用的方法是图中[______]______（填写编号及名称）．而固定化酶一般不用该方法，因为______．【答案】：【解析】：第12题【实验探究题】下面是制备固定化酵母细胞的实验步骤，请回答：酵母细胞的活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母菌细胞在______状态下，微生物处于休眠状态．活化就是让处于休眠状态的微生物物新恢复______状态．活化前应选择足够大的容器，因为酵母细胞活化时______．影响实验成败的关键步骤是______ ．如果海藻酸钠浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目______．观察形成的凝胶珠的颜色和形状，如果颜色过浅，说明______；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，说明______．固定化细胞技术一般采用包埋法固定，原因是______．该实验中CaCl2溶液的作用是______ ．【答案】：无【解析】：第13题【综合题】乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值。
高中生物课时跟踪检测四α_淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测含解析浙科版选修1
课时跟踪检测（四）α测1．目前，酶已经被大规模地应用于各个领域，下列属于应用中面临的实际问题是( ) A．酶通常对强酸、强碱、高温非常敏感，但对有机溶剂不敏感B．酶的结构比较稳定，所以催化功能很强C．酶用于生产时可能会混在产物中，影响产品质量D．直接用于生产中的酶可以多次利用解析：选C 酶催化反应结束后，酶和其他产物混合在一起，分离比较麻烦，这不仅影响产品的纯度，而且使酶不能被分离出来重复利用。
2．下列关于α淀粉酶的固定化过程的叙述错误的是( )A．首先要在烧杯中将α淀粉酶溶于4 mL蒸馏水中B．再将5 g石英砂加入上述烧杯中，不时搅拌30 minC．随后将烧杯中的物质装入1支下端接有气门芯但并不封住的注射器中D．最后用10倍体积的蒸馏水洗涤此注射器，除去那些未吸附的游离淀粉酶解析：选C 在α淀粉酶酶固定的步骤中，使用的注射器下端接有气门芯且用夹子封住。
3．回答下列有关固定化酶技术的问题：(1)酶是生物体中生化反应的催化剂，在工业生产和食品加工中的应用日益广泛。
为提高酶的利用率以及提高产品的纯度，一般需要对酶进行固定化处理，即将酶用物理或化学方法固定在________________介质上，具体方法有：吸附法、共价偶联法、________________法和交联法。
(2)如图为装有固定化酶a的实验装置。
其中b是反应柱，c是催化底物。
若装置中的固定化酶为α淀粉酶，则通常是利用吸附法进行固定的，介质一般为____________。
利用该装置进行淀粉水解实验时，在漏斗中加入反应液后的操作是____________________________，以保证反应充分。
对流出的液体用__________________检测，若呈现________色，说明淀粉被水解成糊精。
若a是固定化酵母，要想得到较多的酒精，加入反应液后的操作是____________，装置中的长导管起的作用是__________________________________。
浙科版高二生物选修1_《α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测》巩固提升
实验6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测一、选择题1.如果反应物是大分子物质，采用哪种方法催化会受限制（）A.直接使用酶B.使用化学方法结合的酶C.使用固定化细胞D.使用物理吸附法固定的酶2.试分析下图中，哪一种与用海藻酸钠作载体制备的固定化酵母细胞相似（）3.下列不属于固定化酶在利用时的特点的是（）A.有利于酶与产物分离B.可以被反复利用C.能自由出入依附的载体D.一种固定化酶一般情况下不能催化一系列酶促反应4.研究认为，用固定化酶技术处理污染是很有前途的。
如将从大肠杆菌中得到的磷酸三酯酶固定到尼龙膜上制成制剂，可用于降解残留在土壤中的有机磷农药。
与用微生物降解相比，其作用不需要适宜的（）A.温度B.pHC.水分D.营养5.下列关于配制海藻酸钠溶液的叙述，不准确的是（）A.加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环B.海藻酸钠的浓度关系到固定化细胞的质量C.海藻酸钠的浓度过高，易形成凝胶珠D.海藻酸钠的浓度过低，形成的凝胶珠内包埋的细胞过少6.下列有关固定化酶和固定化细胞的说法中不．正确的是（）A.与普通酶相同，固定化酶活性的发挥需要适宜的温度和pHB.固定化细胞发挥作用除了需要适宜的温度、pH外，还需要有机营养的供应C.固定化酶和固定化细胞的共同点是所固定的酶都在细胞外起作用D.固定化酶和固定化细胞都能反复使用，但酶的活性可能下降7.下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，错误的是（）A.从酶的固定方式看，吸附法比化学结合法对酶活性影响小B.作为消化酶使用时，蛋白酶制剂以口服方式给药C.尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用D.将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，目的是洗去CaCl2和杂菌二、非选择题8.固定化酶是从20世纪60年代迅速发展起来的一种技术。
东北农业大学科研人员利用双重固定法，即采用戊二醛作交联剂（使酶相互连接），海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶，研究固定化酶的性质，并对其最佳固定条件进行了探究。
高中生物第二部分酶的应用实验6α_淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测自我小测浙科版选修精编版
高中生物第二部分酶的应用实验6α_淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测自我小测浙科版选修精编版第二部分酶的应用实验6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测1淀粉在有关酶的作用下依次生成的物质是…()①糊精②葡萄糖③果胶④麦芽糖⑤蔗糖A．①②③④⑤ B．⑤④①②③C．①③⑤② D．①④②2本实验中α-淀粉酶的固定是将其水溶性的酶用物理或化学的方法固定在下列的哪一物质上( )A．有机硅胶 B．活性炭C．石英砂 D．明胶3下列叙述中不属于本实验所使用的α-淀粉酶特性的是( )A．是大肠杆菌的α-淀粉酶B．其作用的最适pH是5.5～7.5C．其作用的最适温度是50～75 ℃D．其化学本质是蛋白质4将固定化酶装柱后，当底物经过该柱时，底物发生的变化是( ) A．底物被稀释了B．底物被浓缩了C．底物的结构变得更加稳定了D．底物被酶水解成产物了5本实验保存在冰箱中取出后再重复实验，将得到下列的哪一结果( )A．由于时间太久，酶已经失去了活性，因此，用淀粉指示剂鉴定后溶液不显色B．由于时间太久，酶已经失去了活性，因此，用淀粉指示剂鉴定后溶液显蓝色C．固定化酶是能够较长时间保持活性的，因此，用淀粉指示剂鉴定后溶液显红色D．固定化酶是能够较长时间保持活性的，因此，用淀粉指示剂鉴定后溶液显无色6(2009江苏高考，3)下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是( )A．固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显B．固定化酶的应用中，要控制好pH、温度和溶解氧C．利用固定化酶降解水体中有机磷农药，需提供适宜的营养条件D．利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用只是作为反应底物7在淀粉水解成葡萄糖的过程中，依次起作用的酶是( )①糖化淀粉酶②β-淀粉酶③α-淀粉酶A．①②③ B．③②①C ．①③② D．③①②8下列关于对固定化酶中用到的反应柱的理解，正确的是( )A ．反应物和酶均可自由通过反应柱B ．反应物和酶均不能通过反应柱C ．反应物能通过，酶不能通过D ．反应物不能通过，酶能通过9关于固定化酶技术说法正确的是( )A ．固定化酶技术就是固定反应物，将酶依附着载体围绕反应物旋转的技术B ．固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反应C ．固定化酶中的酶无法重复利用D ．固定化酶是将酶固定在一定空间的技术10多孔玻璃可使木瓜蛋白酶固定，这一固定化酶的方法属于下列的( )A ．共价偶联法B ．吸附法C ．交联法D ．包埋法11参照教材实验，请简述用多孔玻璃固定木瓜蛋白酶的方法。
2017-2018学年高二生物浙科版选修1课件：实验6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 精品
一
二
(5)几天后取出冰箱中该固定化酶柱,重复实验,观察结果。
知识点
直接使用酶与固定化酶的优缺点比较
类 型 直接使 用酶
优 点 催化效率高,低 耗能,低污染 酶既与产物接
缺
点
对环境非常敏感,容易失活,难回收, 不能再次利用。与产物混合在一起, 可能影响产品质量 一种酶只能催化一种化学反应,在生 产实践中,很多产物的形成是通过一 系列的酶促反应得到的,所以要固定 多种酶
关闭
本题考查本实验步骤中物质的鉴定过程。该过程所依据的原理是淀粉流 经α-淀粉酶固定化酶柱时,淀粉被酶水解成了糊精,而糊精遇到KI-I2溶液时 显红色。 B
解析
关闭
答案
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
3.下列关于固定化酶的叙述,不正确的是 ( A.既能与反应物接触,又能与反应物分离 B.固定在载体上的酶可被反复利用 C.可催化一系列反应 D.酶的活性和稳定性受到限制
一
二
4.实验材料制备 (1)α-淀粉酶的固定化: 在烧杯中将5 mg α-淀粉酶 溶于4 mL蒸馏水中 (由于 酶不纯 ,可能有些不溶物)
加入5 g
石英砂
,不时搅拌
将上述溶液装入1支注射器中 (该注射器的下端接有 气门心 封住)
,并用 夹子
一
二
10 用 倍体积的蒸馏水 洗涤 此注射器,以除 去 未吸附的游离淀粉酶 ,流速为1 mL/min 50 (2)可溶性淀粉溶液:取 mg可溶性淀粉溶于100 mL 热水 中,搅拌均匀。 (3)5 mmol/L KI-I2溶液:称取0.127 g I2和0.83 g KI。加蒸馏水100 mL,完全溶解后装入滴瓶中。
高中生物第二章实验四α_淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测教学案浙科版选修1
实验四 α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测1．固定化酶(1)概念：将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。
(2)方法：吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法等。
2．枯草杆菌的α淀粉酶的固定化(1)枯草杆菌的α淀粉酶作用的条件：最适pH 为5.5～7.5；最适温度为50～75_℃。
(2)方法：吸附法，介质是石英砂。
(3)淀粉水解作用的检测原理：淀粉――→α ――→ ――→糖化葡萄糖 遇碘显蓝色 遇碘显红色 遇碘不显色3．α淀粉酶固定化实验步骤↓↓ 流出5 mL 淀粉溶液后接收0.5 mL ↓滴加KII 2溶液，观察颜色，稀释1倍后再观察颜色↓1．如何证明洗涤固定化酶柱的流出液中没有淀粉酶？提示：可在试管中加入1 mL可溶性淀粉，再加几滴淀粉酶柱流出液，保温几分钟后用碘液检验。
如仍显蓝色，则流出液中没有淀粉酶。
2．耐高温的淀粉酶有哪些可能的用途？提示：可以在高温下使淀粉水解快，而且酶不会因高温而失活，所以可在一些需要高温加热同时又要水解淀粉的反应中使用。
3．判断下列叙述的正误(1)固定化α淀粉酶可永久使用(×)(2)用固定化α淀粉酶进行淀粉水解实验时不需考虑温度及pH的影响(×)(3)α淀粉酶固定化实验结束后，将固定化柱放在常温下即可(×)核心要点| 酶的固定化方法及实验步骤分析1．酶的固定化方法2．直接使用酶和固定化酶比较1．下列关于固定化酶的叙述，错误的是( )A ．既能与反应物接触，又能与产物分离B ．可催化一系列反应C ．固定在载体上的酶可被反复利用D ．酶的活性和稳定性受到限制解析：选B 固化酶能催化一种或一类化学反应，不能催化一系列的化学反应。
2．淀粉在有关酶的作用下依次生成的物质是( )①糊精 ②葡萄糖 ③果胶 ④麦芽糖 ⑤蔗糖A ．①②③④⑤B ．⑤④①②③C ．①③⑤②D ．①④②解析：选D 淀粉水解过程为：淀粉――→α淀粉酶糊精――→β淀粉酶麦芽糖――→糖化淀粉酶葡萄糖，所以依次生成的物质是①糊精、④麦芽糖、②葡萄糖。
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取50mg可溶性淀粉溶于100ml热水中，搅拌均匀。
5mmol/L KI-I2溶液
称取0.127g碘和0.83g碘化钾。加蒸馏水100ml。
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实验步骤
1.将灌注了固定化酶的层析柱放在铁架台 上，用滴管滴加淀粉溶液，使淀粉溶液已 0.3mL /min的流速过柱。在流出5mL后接 收2mL流出液，加入1-2滴KI-I2 溶液，观察 颜色。用水稀释1倍后再观察颜色。
2.试验后，用10倍体积的蒸馏水洗涤此层 析柱，放置在4℃冰箱里，几天后再重复上 述实验，看是否有相同结果。
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淀粉溶液
层析住
吸附有α-淀粉酶的石英砂
HST
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实验 结果
1
2
3
4
1、2mL水+1~2滴KI-I2溶液
物理吸附法
包埋法
化学结合法
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➢酶更适合采用化学结合和物理吸附法 固定化 ➢ 细胞多采用包埋法固定
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反应方式
1.使底物溶液通过装有固相酶的柱，柱留出 液即为酶催化的产物。
2.有时也可将固相酶或固定化细胞悬浮于底 物溶液中，一定时间后溶液即成酶催化的产 物。
2、2mL淀粉液+1~2滴KI-I2溶液 3、2mL淀粉滤液+1~2滴KI-I2溶液 4、2mL淀粉滤液+1~2滴KI-I2溶液+稀释1倍
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实验注意事项
a.控制滴灌流速。0.3mL/min的流速，我们就可以控 制每分钟滴管流出量为每分钟6滴（6=0.3mL/ 50uL）。 这样做的目的是控制流速让淀粉和淀粉酶充分接触， 反应。
不管是固相柱还是固相悬浮体， 回收后，在一定条件下贮存，还可以利用。
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二、α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作 用的检测
实验原理
淀 粉
α-淀粉酶 糊 精
β-淀粉酶
麦 糖化淀粉酶 葡
芽
萄
糖
糖
运用吸附法将α-淀粉酶的固定在石英砂上。一定浓度的 淀粉溶液经过固定化的α-淀粉酶催化后，生成糊精，使流 出液加入KI-I2指示液后呈红色，表明水解产物糊精生产。
b.显色。在流出5mL后接取2mL过滤液，然后向试 管中加入1-2滴KI-I2 溶液。切记，KI-I2 溶液不要加入 太多，以免碘液颜色覆盖糊精淀粉反应后的颜色。
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3rew
演讲完毕，谢谢听讲!
再见，see you again
2020/11/26
浙江省XX年高中生物疑难问题解决 专题培训资料a淀粉酶
浙江省XXX年高中生物 疑难问题解决专题培训
资料a淀粉酶
2020/11/26
浙江省XX年高中生物疑难问题解决 专题培训资料a淀粉酶
知识结构Βιβλιοθήκη 一、固定化技术基础知识二、a-淀粉酶的固定化与淀粉水解 作用的检测
浙江省XX年高中生物疑难问题解决 专题培训资料a淀粉酶
一、固定化技术基础知识
固定化技术：利用物理或化学方法将酶或 细胞固定在一定空间内的技术，包括吸附法、 包埋法、化学结合法（将酶分子或细胞相互 结合，或将其结合到载体上）。
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固定化装置—层析柱
浙江省XX年高中生物疑难问题解决 专题培训资料a淀粉酶
实验材料制备
a-淀粉酶的固定化
在烧杯中将5mg a-淀粉酶溶于4ml蒸馏水中。再加入 5g石英砂，不时搅拌，30分钟后装入层析柱中。 用10倍体积的蒸馏水洗涤此层析柱以除去未吸附的游 离淀粉酶，流速控制为1ml/min。