溶液各种配制
常用溶液的配制方法
分析化学常用溶液的配制方法乙醇制氢氧化钾试液可取用乙醇制氢氧化钾滴定液0.5mol/L。
乙醇制氨试液取无水乙醇加浓氨溶液使每100ml中含NH3 911g即得。
本液应置橡皮塞瓶中保存。
乙醇制硝酸银试液取硝酸银4g加水10ml溶解后加乙醇使成100ml即得。
乙醇制溴化汞试液取溴化汞2.5g加乙醇50ml微热使溶解即得。
本液应置玻璃塞瓶内在暗处保存。
一氯化碘试液取碘化钾0.14g与碘酸钾90mg加水125ml使溶解再加盐酸125ml即得。
本液应置玻璃瓶内密闭在凉处保存。
N乙酰L酪氨酸乙酯试液取N乙酰L酪氨酸乙酯24.0mg加乙醇0.2ml使溶解加磷酸盐缓冲液取0.067mol/L磷酸二氢钾溶液38.9ml与0.067mol/L磷酸氢二钠溶液61.6ml混合pH值为7.02ml加指示液取等量的0.1甲基红的乙醇溶液与0.05亚甲蓝的乙醇溶液混匀1ml用水稀释至10ml即得。
乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液取对二甲氨基苯甲醛1g加乙醇9.0ml与盐酸2.3ml使溶解再加乙醇至100ml即得。
二乙基二硫代氨基甲酸钠试液取二乙基二硫代氨基甲酸钠0.1g加水100ml溶解后滤过即得。
二硝基苯试液取间二硝基苯2g加乙醇使溶解成100ml即得。
二硝基苯甲酸试液取35二硝基苯甲酸1g加乙醇使溶解成100ml即得。
二硝基苯肼试液取24二硝基苯肼1.5g加硫酸溶液1→220ml溶解后加水使成100ml滤过即得。
二乙基二硫代氨基甲酸银试液取二乙基二硫代氨基甲酸银0.25g加氯仿适量与三乙胺1.8ml加氯仿至100ml搅拌使溶解放置过夜用脱脂棉滤过即得。
本液应置棕色玻璃瓶中密塞置阴凉处保存。
二苯胺试液取二苯胺1g加硫酸100ml使溶解即得。
二氨基萘试液取23二氨基萘0.1g与盐酸羟胺0.5g加0.1mol/L盐酸溶液100ml必要时加热使溶解放冷滤过即得。
本液应临用新配避光保存。
稀二硝基苯肼试液取24二硝基苯肼0.15g加含硫酸0.15ml的无醛乙醇100ml使溶解即得。
实验室溶液配制
实验室所需溶液配制1.费休氏试液,购买；2.氢氧化钠溶液,C=0.01mol/l;氢氧化钠分子量40.0,准确称取氢氧化钠固体0.4g溶于200ml蒸馏水中,并在1L容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液；3.中性红溶液,C=1%;准确称取中性红固体1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液；4.溴百里香酚蓝溶液,C=1%;准确称取溴百里香酚蓝固体1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液；5.碘化钾溶液,C=10%;准确称取KI固体50g溶于50ml蒸馏水中,并在500ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液；6.硫代硫酸钠溶液,C=0.1mol/l;硫代硫酸钠分子量158.11,准确称取硫代硫酸钠固体15.811g溶于200ml蒸馏水中,并在1000ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液；7.硫酸溶液,C=2mol/l,硫酸分子量98.08,浓度98%时密度约1.84g/ml,准确量取硫酸液体108.78ml稀释与500ml蒸馏水中,向水中加入硫酸而非向硫酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液；8.淀粉溶液,C=0.5%;准确称取可溶性淀粉0.5g,溶于50ml水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液；9.铬酸钾溶液,C=50g/L;准确称取铬酸钾固体50g,溶于500ml水中,并在1000ml容量瓶中定容,搅拌下逐滴加入10%的硝酸银溶液,直至溶液出现棕红的悬浮物为止.静置1昼夜,用干净的滤纸漏斗过滤即可,不一定用饱和硝酸银溶液,用10%硝酸银溶液即可.配制方法:1克硝酸银+10毫升纯水溶解,置于棕色瓶中；10.氯化钠基准试剂,C=0.1mol/l,氯化钠分子量58.5,准确称取氯化钠固,5.85g溶于500ml蒸馏水中,并在1000ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液；11.硝酸银溶液,C=0.1mol/l,硝酸银分子量169.87,准确称取硝酸银固体8.49g溶于200ml蒸馏水中,并在500ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液,用前采用基准氯化钠试剂10标定,需保存于棕色试剂瓶中；12.酚酞指示剂,C=0.1%,准确称取酚酞固体0.1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液；13.氯化钡溶液,C=10%,准确称取氯化钡固体10g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液；14.乙醇溶液,C=1%,准确移取乙醇AR1ml与100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液；15.盐酸标准溶液,C=1mol/l,分子量36.46,D154=1.2039.11%,1.1529.57%、1.1020%、1.0510.17%;准确量取39.11%盐酸77.68ml或称取93.216g,稀释与500ml蒸馏水中,向水中加入盐酸而非向盐酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液；16.甲基橙指示剂,C=0.1%,准确称取甲基橙固体0.1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液；17.邻苯二甲基二辛酯DOP标准液C=100ppm配制：用1ml移液管移取1mlDOPAR加入250ml容量瓶中,并用二氯甲烷稀释至250ml定容,摇匀即可得DOP浓度为4000ppm溶液;用5ml移液管移取浓度为4000ppmDOP溶液2.5ml,加入100ml 容量瓶中,用二氯甲烷稀释至100ml,摇匀即可得浓度为100ppmDOP溶液；18.钼酸铵溶液的配制,C=5%,准确称取钼酸铵固体5g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液；19.硫酸溶液,C=10mol/l,硫酸分子量98.08,浓度98%时密度约1.84g/ml,准确量取硫酸液体543.9ml稀释与300ml蒸馏水中,向水中加入硫酸而非向硫酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液；20.氢氧化钠溶液,C=5%,准确称取氢氧化钠固体5g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液；21.氯化亚锡溶液,C=10%,准确称取氯化亚锡固体5g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液,溶液配置完成后向其中投入锡粒一颗并保存于大口瓶中；22.二氧化硅贮备液,1ml相当于1.0mg二氧化硅：准确称取分析纯硅酸钠4.730g分子式Na2SiO3·9H2O,分子量284.22溶于200ml蒸馏水中,并与1L容量瓶中定容,保存于塑料瓶中;23.二氧化硅工作液,C=20ppm,用移液管移取二氧化硅贮备液20ml与1L容量瓶中定容,即可得上述浓度溶液,保存于塑料瓶中;24.硫酸溶液,C=1mol/l,硫酸分子量98.08,浓度98%时密度约1.84g/ml,准确量取硫酸液体54.4ml或称取100.096g稀释与500ml蒸馏水中,向水中加入硫酸而非向硫酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液；25.硫代硫酸钠溶液,C=0.05mol/l,硫代硫酸钠分子量158.11,准确称取硫代硫酸钠固体7.9055g溶于200ml蒸馏水中,并在1000ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液；26.硼酸溶液,C=2%,准确称取硼酸固体2g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液,保存于塑料大口瓶中；27.氢氧化钠溶液,C=40%,准确称取硼酸固体40g,溶于50ml蒸馏水中,冷却后在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液,保存于塑料大口瓶中或胶塞玻璃瓶中；=1.2039.11%,1.1529.57%、28.盐酸溶液,C=0.05mol/l,分子量36.46,D1541.1020%、1.0510.17%;准确量取39.11%盐酸3.884ml或称取4.661g,稀释与500ml蒸馏水中,向水中加入盐酸而非向盐酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液；29.甲基红乙醇溶液,C=1%,准确称取甲基红固体1g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液；30.溴甲酚绿乙醇溶液,C=1%,准确称取溴甲酚绿固体1g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液；31.甘油水溶液,C=2%,准确移取甘油AR2ml与100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液；32.盐酸溶液,C=6mol/l,分子量36.46,D15=1.2039.11%,1.1529.57%、1.1020%、41.0510.17%;准确量取39.11%盐酸466.08ml或称取559.296g,稀释与300ml蒸馏水中,向水中加入盐酸而非向盐酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液；33.氢氧化钠溶液,C=6mol/l,氢氧化钠分子量40.0,准确称取氢氧化钠固体240g溶于500ml蒸馏水中,并在1L容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液；34.氢氧化钠溶液,C=1mol/l,氢氧化钠分子量40.0,准确称取氢氧化钠固体40g溶于500ml蒸馏水中,并在1L容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液；。
溶液配置
实验常用试剂配置1.铜标准贮备溶液：称取1.000±0.005g金属铜(纯度99.9%)置于150ml烧杯中，加入20ml1+1硝酸，加溶解后，加入10ml1-1硫酸并加热至冒白烟，冷却后，加水溶解并转入1L容量瓶中，用水稀释至标缓。
此溶液每毫升含1.00mg铜。
2.铜标准溶液：吸取5.00ml铜标准贮备溶液于1L容量瓶中，用水稀至标线。
此溶液每毫升含5.0μg铜。
3.二乙基二硫代氨基甲酸钠0.2%(m/v)溶液：称取0.2克二乙基二硫代氨基甲酸钠三水合物(C5H10NS2Na •3H2O，或称铜试剂cupral)溶于水中并稀释至100ml，用棕色玻璃瓶贮存，放于暗处可用两星期。
4.EDTA-柠檬酸铵-氨性溶液：取12g乙二胺四乙酸二钠二水合物(Na-EDTA•2H2O)、2.5g柠檬酸铵[(NH4)3•C6H5O7]，加入100ml水和200ml浓氨水中溶解，用水稀释至1L，加入少量0.2%二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液，用四氯化碳萃取提纯。
4.1EDTA-柠檬酸铵溶液：将5g乙二胺四乙酸二钠二水合物(Na2-EDTA•2H2O)20g柠檬酸铵[(NH4)3•C6H5O7]溶于水中并稀释至100ml，加入4滴甲酚红指示液，用1+1氨水调至PH=8～8.5(由黄色变为浅紫色)，加入少量0.2%二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液，用四氯化碳萃取提纯。
5.氯化铵-氢氧化铵缓冲溶液将70g氯化铵(NH4Cl)溶于适量水中，加入570ml浓氨水，用水稀释至1L。
6.甲酚红指示液0.4g/L：称取0.02克甲酚红(C21H18O5S)溶于50ml195%(v/v)乙醇中。
7.碘溶液C=0.05mol／L：称12.7g碘片，加到含有25g碘化钾+少量水中，研磨溶解后用水稀释至1000mL。
8.丁二酮肟[(CH3)2C2(NOH)2]溶液5g／L：称取0.5g丁二酮肟溶解于50mL浓氨水中，用水稀释至100mL9.丁二酮肟乙醇溶液，10g／L：称取1g丁二酮肟，溶解于100mL乙醇(3.4)中。
实验室常用溶液配制
实验室常用溶液配制实验室常用溶液的配置Amp+/Kan+:贮存液浓度为50mg/mL称取500mg于10mL超纯水中溶解，抽滤后1mL分装到离心管中，于-30℃冻存X-gal：贮存浓度为20mg/mL称取20mg X-gal溶于1mL二甲基甲酰胺中，-30℃中用锡箔纸包裹后避光保存，不需要过滤除菌IPTG：贮存浓度为0.84mol/L称取2g IPTG溶于8mL超纯水中，用水定容到10mL，用0.22um 的一次性滤过器过滤除菌，1mL分装到离心管中并于-30℃保存CaCl2：贮存浓度为1mol/L称取1.11g CaCl （或者CaCl:2H2O 1.4698g）溶于8mL超纯水中，定容到10mL，用0,22um的一次性滤过器过滤除菌，1mL分装到离心管中，并于-30℃保存LB培养基：胰蛋白胨（Tyrtone）10g/L酵母提取物（Yeast Extraction）5g/L氯化钠10/L根据经验用NaOH调节PH为7.2-7.6，然后高压蒸汽灭菌，注意及时从灭菌锅中取出无DNA酶的RNA酶：将胰RNA酶（RNA酶A）溶于10mmol/L Tris-Cl（PH7.5）、15mmol/L NaCl 中，配成10mg/mL 的浓度，于100℃加热15min，缓慢冷却至室温，分装成小份保存于-20℃Bradford 贮存液95%乙醇100mL88%磷酸200mLG 250 0.35g室温下可储存，一般4℃Bradford 工作液Bradford贮存液30mL双蒸水425mL95%乙醇15mL88%磷酸30mL储存于4℃超声破碎缓冲液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO450 mM 6.81 gEDTA 1 mM 0.292 g (EDTA-2Na-2H2O) 0.372 g定容至1 L，调pH至8.0包涵体洗涤液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO4 50 mM 6.81 gEDTA 5 mM 1.46 g (EDTA-2Na-2H2O) 1.86 g尿素 2 M 120 gTriton X-100 0.5% 5 ml脱氧胆酸钠盐0.1% 1 g定容到1 L 调pH至8.0匀浆缓冲液（pH=7.5）成分：20mM HEPES 0.002mol=0.476g 加入0.952g1.5mM MgCl20.00015mol=0.0036g 加入0.0072g 0.2mM EDTA 0.00002mol=0.00584g 加入0.01168g 0.1M NaCl 0.01mol=0. 58g 加入1.16g0.5mM 钒酸钠0.00005mol=0.0092g 加入0.0184g 加100mL水进行溶解，NaOH调pH至7.50.2mM DTT 总体积500μL加入0.1μL0.4mM PMSF 总体积500μL加入20μL1%SDS 加入50μL 10% SDS其中DTT和PMSF匀浆之前加入，SDS匀浆之后离心之前加入DTT配成1M母液，溶于0.01M乙酸钠（pH=5.2）中，过滤除菌PMSF配成10mM母液，溶于异丙醇10*PBSNaCl 80.0669 gKCl 2.0129 gNa2HPO414.1960 gKH2PO4 2.4496 g水定容至1L，使用时稀释10倍，用NaOH调pH至7.4Start with 800 mL of distilled water to dissolve all salts. Adjust the pH to 7.4 with HCl. Add distilled water to a total volume of 1 liter. The resultant 1x PBS should have a final concentration of 10 mM PO43?, 137 mM NaCl, and 2.7 mM KClIf used in cell culturing, the solution can be dispensed into aliquots and sterilized by autoclaving (20 min, 121°C, liquid cycle). Sterilization may not be necessary depending on its use. PBS can be stored at room temperature or in the fridge. However, concentrated stock solutions may precipitate when cooled and should bekept at room temperature until precipitate has completely dissolved before use.转膜缓冲液（含有SDS）1L剂量甘氨酸 2.9gTris 5.8gSDS 0.37g甲醇200mL水800mL10×蛋白电泳缓冲液1L剂量Tris 碱(Mr 121.14) 30.2g甘氨酸(Mr 75.07) 188gSDS (Mr 288.38) 10 g加水至1L用时稀释10倍即可30％丙稀酰胺1L 剂量丙烯酰胺290gN,N’-亚甲基双丙稀酰胺10g溶于600ml蒸馏水中，加热至37℃溶解，补足体积至1L，过滤，且pH不大于7.01 M Tris-Cl（pH6.8）60.55 g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水，溶解后调pH值，总体积为500ml1.5 M Tris-Cl（pH8.8）90.83g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水，溶解后调pH值，总体积为500ml。
溶液配制方法
溶液配制方法一、指示剂配制1.0.3%二甲酚橙指示剂：称取0.15g二甲酚橙，加5ml无水乙醇，用水稀释至50ml。
2.5g/L液体铬黑T：称取0.5g铬黑T和2.0g氯化羟胺，溶于乙醇，用乙醇稀释至100ml，此使用前配备。
贮存于100ml棕色试剂瓶中。
3.固体铬黑T：称取1.0g铬黑T和100g氯化钠研磨混合均匀，贮存于100ml棕色广口瓶中备用。
4.1%紫脲酸胺：1g紫脲酸胺与100g固体氯化钠混合，研磨，烘干。
5.1g/L酚酞指示剂：称取0.1g酚酞指示剂，加乙醇100ml溶解混合。
6.10 g/L酚酞指示剂：称取1.0 g酚酞指示剂，加乙醇100ml溶解混合。
7.甲基红—溴甲酚绿指示剂：1份2g/L甲基红乙醇溶液与三份1g/L溴甲酚绿乙醇溶液混合。
8.甲基红-亚甲基蓝指示剂：一份甲基红乙醇溶液（1g/L）与两份亚甲基蓝乙醇溶液（1g/L）混合。
9.品红试剂（0.15%）：称取0.15g酸性品红，加75ml水，加热到品红溶解，冷却到室温，加4ml盐酸搅拌。
再加15ml10%亚硫酸钠溶液搅匀，放置过夜，加活性炭过滤于100ml容量瓶中。
二、标准溶液的配制1．钴标准溶液：称取3.000g金属钴（99.98%）置于250ml烧杯中，加少量蒸馏水润湿，盖上表面皿，缓慢加入20ml硝酸，加热溶解完全后，洗表面皿及烧杯壁于烧杯中，移入1000ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
此溶液1ml含钴3.000mg。
2．铁氰化钾标准溶液：C﹝K3Fe(CN)6﹞=0.03mol/L,称取9.9g铁氰化钾溶于水中，并稀释至1000ml，摇匀，贮存于棕色瓶中。
3．硫酸钴标准溶液：C（CoSO4）=0.15mol/L，称取4.2g硫酸钴（CoSO4·7H2O）溶于水中，并稀释至1000ml，摇匀，此溶液1ml含钴大约0.9mg。
4．锂标准贮存溶液：称取 5.3228g光谱纯级碳酸锂（预先于110℃、烘2个小时置于干燥器中冷却）置于250ml烧杯中，加少量水润湿，盖上表面皿，沿杯壁缓慢加入15ml盐酸，待溶解后转入1000ml容量瓶中，用蒸馏水定容。
65种溶液与指示剂的配制
65种溶液、指示剂配制方法1、淀粉指示液1.1称1g淀粉加入100mL H2O中煮沸完全溶解，冷却后加入几滴氯仿。
1.2称可溶性淀粉0.5g，加5mL H2O搅拌后，缓缓倾入100mL沸水中，边加边搅拌，继续煮沸2分钟，放冷，倾取上层清液。
此指示液应临用新配。
2、酚酞指示液：1g酚酞溶于80mL酒精，以酒精稀释到100mL，变色范围PH8.3-10.0，无色变红色3、靛红指示液：0.5g靛红+50%的酒精，以H2O稀释至100mL。
4、石蕊指示液：称10g石蕊粉末，加40mL乙醇，回流煮沸1小时，静置，倾去上层清液，再用同以方法处理2次，每次用乙醇30mL，残渣用水10mL洗涤，倾去洗液，再加H2O50mL 煮沸，放冷，滤过，即得。
变色范围：PH4.5-8.0，红色变蓝色。
5、间苯二酚指示液：0.2间苯二酚溶于20mL丙酮，以H2O稀释至100mL，摇匀。
6、甲基红指示液5.1称0.1g甲基红溶解于60mL酒精，以H2O稀释至100mL。
5.2称0.1g甲基红，加7.4mL 0.05mol/L氢氧化钠溶液，使溶解，再加H2O稀释至200mL，变色范围：PH4.2-6.3，红色变黄色。
7、甲基橙指示液：称0.1g甲基橙溶解于100mL热H2O中，若有不溶物应过滤，变色范围：PH3.2-4.4，红色变黄色。
8、二甲酚橙指示剂：称0.2g干燥的二甲酚橙，加入100g无碘氯化钠，研匀，可长期保存。
9、二甲酚橙指示液：称0.2g二甲酚橙，以H2O稀释至100mL，摇匀，变色范围：PH3.2-4.4，红色变黄色。
10、溴酚蓝指示液：称0.1g溴酚蓝溶解于3.0mL0.05N氢氧化钠溶液中，使溶解，以H2O稀释至200mL，摇匀，变色范围：PH2.8-4.6，黄色变蓝绿色。
11、铬黑T（简称EBT）10.1 称10g干燥的分析纯氯化钠研细，加入0.1g铬黑T，再研匀，可长期保存。
10.2 称0.5g铬黑T，加入盐酸羟胺4.5g，加酒精100mL溶解。
标准溶液配制
标准液配制资料指示剂配制1、PP指示剂的配制:准确称取AR级PP指示剂1g,溶于60ml无水乙醇,加纯水稀释至100ml。
2、0.1%溴甲酚蓝指示剂:称取0.1g溴甲酚蓝于2.88ml, 0.05N NaOH 溶液中,用水稀释至100ml。
3、0.1%甲酚红的配制:准确称取AR级甲酚红指示剂0.1g,溶于50ml无水乙醇中,加纯水稀释至100ml。
4、甲基橙指示剂:称取0.1克甲基橙溶于100ml热水中.如有不溶物应过滤.5、酚酞指示剂:称取1克酚酞溶于80ml乙醇中,溶解加水稀释至100ml.6、淀粉指示剂:称取5克可溶性淀粉,以少量水调成浆,倾入100ml沸水中,搅拌均匀冷却.7、PAN指示剂:称取0.1克PAN用酒精溶解后,加水稀释至100ml.8、MX指示剂:称取0.1克紫尿酸铵和100克氯化钠混合均匀.9、溴酚蓝指示剂:称取1克溴酚蓝,加酒精稀释至100ml.10、铬酸钾指示剂:称取5克铬酸钾,溶于100ml纯水中.11、醋酸铵缓冲液:称取100克醋酸钠,加入50ml醋酸溶解,加水稀释至1L。
12、甲基红指示剂：称取0.1克溶于18.6ml, 0.02L/L氢氧化钠中,用水稀释至250ml.标准溶液配制与标定标准一、1、 0.1N Na2S2O3的配制:a.准确称取分析纯Na2S2O3、5H2O 24.8g,溶于200ml纯水中。
b.将此溶液煮沸10min冷却,用纯水稀释并溶至1L。
2、0.1N Na2S2O3的标定:a.移取标准0.1N I220ml,加50ml纯水b.用配好的0.1N Na2S2O3溶液滴定至淡黄色,再加5ml淀粉,继续用Na2S2O3溶液滴至无色为V。
c.Na2S2O3(N)＝(0.1×20)/V二、1、0.1N HCL的配制 :a.移取分析纯HCL 8.6ml于溶量瓶b.加纯水并定溶至1L2、0.1N HCL的标定:a.移取标准0.1N NaOH 20ml,加水200ml,加3～5滴PP指示剂,用配好的HCL溶液滴至无色为V。
常用溶液的配制
常用溶液的配制一、常规溶液(一)1/15mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution，PBS)甲液：1/15mol/L Na2HPO4溶液Na2HPO49.465g蒸馏水加至1000ml乙液：l/15mol/L KH2PO4溶液KH2P049.07g蒸馏水加至1000m1分装在棕色瓶内，于4℃冰箱中保存，用时甲、乙两液各按不同比例混合，即可得所需pH的缓冲液,见下表:pH 甲液ml 乙液mI pH 甲液ml 乙液mI5.29 5.595.916.24 6.47 6.64 2.55.010.020.030.040.097.595.090.080.070.060.06.816.987.177.387.738.0450.060.070.080.090.095.050.040.030.020.010.05.0(二)0.3％台盼兰染液称取台盼兰(Trypan blue)粉0.3克，溶于100ml生理盐水中，加热使之完全溶解，用滤纸过滤除渣，装入瓶内室温保存。
(三)0.5％酚红指示剂酚红0.5g0.1N(0.4％)NaOH 15ml双蒸水85ml将0.5克酚红置研钵中，缓漫滴加0.1NNaOH溶液边加边磨，并不断吸出已溶解的酚红液，直至全部溶解，然后加入85ml双蒸水，颜色为深红，经粗滤纸过滤后使用，室温保存。
(四)5.6％NaHCO3溶液称NaHCO35.6克，溶于100ml蒸馏水中，室温保存即可(如需要也可10磅15分钟高压灭菌，4℃冰箱保存)(五)10μg／ml秋水仙素秋水仙素lOmg生理盐水100ml装入茶色瓶中，为贮备液，4℃冰箱中保存。
甩时取贮备液1ml加生理盐水9ml即可。
(六)0.4％KCl-0.4％柠檬酸钠低渗液将0.4％KCl和0.4％柠檬酸钠两液等量混合即可，室温保存。
(七)2％柠檬酸钠称取柠檬酸钠2克，加100ml双蒸水即可，室温保存。
（八）0.2％次甲基兰染液称次甲基兰(Methylene blue)0.2克，加蒸馏水100ml，室温保存。
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附录：常用试剂配制及应用一、常用缓冲液、试剂的配制碳酸盐缓冲液(Carbonate-Bicarbonate Buffer)由于碳酸盐pH值偏碱，因此，常用于pH>9的缓冲液配制（附表1）。
附表1. 0.2 mol/L碳酸盐缓冲液（pH9.2～10.7）磷酸缓冲液(Phosphate Buffers，PB)磷酸盐是使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，PO4：pKa1＝2.12，pKa2＝7.21；所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽。
NaH2HPO4：pKa1＝7.21，pKa2＝12.32。
Na2另外，磷酸盐还有钾盐分子形式，一般来说，低温时钠盐难溶，钾盐易溶，因此，配制细胞培养用试剂时常常添加钾盐试剂，但若配制十二烷基硫酸钠（SDS）-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用钠盐而不能用钾盐，因为SDS会与磷酸钾生成难溶的十二烷基硫酸钾。
磷酸缓冲液的优点为：①可配制成不同离子强度的缓冲液；②适用pH缓冲范围较宽；③受温度影响缓冲液pH值变化较小；④离子强度对缓冲液pH影响较小，如0.1mol/L缓冲液稀释10倍其pH变化小于0.1。
磷酸缓冲液的缺点是：①磷酸盐易与钙离子（Ca2+）、镁离子（Mg2+）及重金属离子结合生成不溶的沉淀物；②可能干扰某些化学反应过程，如对某些酶的催化活性具有一定程度的抑制作用。
NaH2PO4的pH值偏酸性，可用作pH<4的缓冲液。
Na2HPO4的pH值偏碱性，可用作pH>10的缓冲液。
而pH＝6～8的中性缓冲液是更常用的缓冲液，需要NaH2PO4与Na2HPO4两种磷酸盐混合配制（附表2）。
附表2. 0.2 mol/L磷酸盐缓冲液（pH5.7～8.2）磷酸盐缓冲溶液（Phosphate-buffered saline, PBS)磷酸盐缓冲液是在磷酸缓冲液基础上添加NaCl以维持溶液的渗透压，因此，PBS适用于做细胞缓冲液，常用PBS配制如下。
NaCl 8gKCl 0.2gNa2HPO41.44gKH2PO40.24g在800ml蒸馏水中溶解，用HCl调节溶液的pH值至7.2～7.4加水定容至1L，15psi（1.05kg/cm2）高压灭菌20min，室温保存备用。
Tris缓冲液（Tris-HCl Buffer, TB）Tris的pH值偏于碱性，因此，通过添加HCl调节pH至所需值，Tris-HCl 缓冲液的离子强度（mol/L）是专指Tris的浓度，如某一特定pH的0.05 mol/L Tris缓冲液的配制是将50ml 0.1 mol/L Tris碱溶液与附表3所示相应体积（ml）的0.1 mol/L HCl混合，加水至将体积100ml，即为0.05 mol/L Tris缓冲液。
另外，按附表3制备的缓冲液，由于试剂来源的不同，缓冲液pH可能与所需略有差异，此时可通过稍许减少或增加HCl用量，精细调节pH至所需值。
附表4. 0.05 mol/L Tris缓冲液Tris盐缓冲液（TBS）：Tris盐缓冲液是在Tris缓冲液基础上添加NaCl以维持溶液的渗透压，因此，TBS也适用于做细胞缓冲液，常用TBS配制如下。
8g NaCl、0.2g KCl以及3g Tris溶解于800ml蒸馏水中，加入0.015g酚红并用HCl调pH至7.4用蒸馏水定容至1L，分装后在15psi（1.05kg/cm2）高压灭菌20min，室温保存。
现在常用Tris盐缓冲液通常不加pH指示剂，而且该溶液如果不用于细胞培养，通常不加KCl及酚红。
Hank’s液 (Hank’s Balanced Salt Solution)Hank’s液是一种平衡盐溶液，主要用于细胞培养取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗等。
贮存液A液：(I)NaCl 80gKCl 4gMgSO4·7H2O 1gMgCl2·6H2O 1g用双蒸馏水定容至450ml。
(II)CaCl2 1.4g (或CaCl2·2H2O 1.85g)用双蒸馏水定容至50ml。
将I和II液混合，即成A液。
贮存液B液：Na2HPO4·12H2O 1.52g，KH2PO40.6g,酚红 0.2g,葡萄糖 10.0g,酚红应先置研钵内磨细，然后按配方顺序一一溶解，用双蒸馏水定容至500ml。
(3)应用液：A、B储存液分别经112.6℃湿热灭菌20min，取A和B液各25ml，加无菌双蒸馏水至450ml，使用前用无菌的3.5%或5.6% NaHCO3调至所需pH。
注意：药品必须全部用A.R试剂，并按配方顺序加入，用适量双蒸水溶解，待前一种药品完全溶解后再加入后一种药品，最后补足水到总量。
无Ca2+、Mg2+ Hank’s液（Hank’s Solution without calcium, magnesium sulfate）NaCl 80g,KCl 4g,Na2HPO4·12H2O 1.52g，KH2PO40.6g,葡萄糖 10g,用双蒸馏水溶解后，加入0.4％酚红溶液50ml，再加入双蒸水至1000ml，112.6℃湿热灭菌20min，4℃ 冰箱保存。
临用前将原液用无菌双蒸水作1：10倍稀释，用无菌的3.5%或5.6% NaHCO3调至所需pH。
pH7.2柠檬酸盐缓冲液(Citrate Buffer)柠檬酸 0.327g柠檬酸钠 2.63g磷酸氢钠 0.222葡萄糖 0.00255mg蒸馏水加至100ml。
pH3.3枸橼酸-磷酸盐缓冲液（Citric acid- Phosphate Buffer)0.131mol/L citrate acid，0.066mol/L Na2HPO4，等量混合，调节pH至3.3。
0.5 mol/L EDTA, pH 8.0EDTA·2H2O 186.1 gNaOH ～20 g将EDTA·2H2O加入800ml水中，在磁力搅拌器上剧烈搅拌。
用NaOH调节pH 至8.0，EDTA直到接近pH 8.0才完全溶解，定容至1L。
分装后高压蒸汽灭菌。
0.4%酚红溶液取酚红0.4g置于研钵中逐滴加入1mol/L NaOH溶液11.28ml，边研磨边使酚红转变为钠盐溶于水中，加双蒸水至100ml，过滤后，4℃ 冰箱保存。
醋酸钾（Potassium Acetate）在60ml 5mol/L醋酸钾溶液中，加入11.5ml冰醋酸和28.5ml水。
该溶液用于碱性裂解。
3mol/L 醋酸钠（Sodium Acetate），pH5.2和pH7.0在800ml水中溶解408.1g三水醋酸钠，用冰乙酸调pH至5.2或用稀释乙酸调pH至7.0，加双蒸水至1L。
分装后高压灭菌。
柠檬酸钠缓冲液(Sodium Citrate Buffer)柠檬酸钠 1.8gHCl(1mol) 4ml无水乙醇 95ml先用100ml去离子水溶解柠檬酸钠，然后加入HCl和无水乙醇，再补充去离子水至总量200ml。
饱合硫酸铵溶液(Saturated Ammonium Sulfate Solution)取500ml双蒸馏水，加入约400克硫酸铵，水浴加热至70℃，磁力搅拌器充分搅拌，直到加入的硫酸铵不再溶解，以氨水（也可用NaOH）调pH7.2，室温保存。
二、酶免疫检测常用试剂配制包被液(Coating Buffer)（pH9.5碳酸盐缓冲液）Na2CO3·10H2O 8.58gNaHCO35.8g溶于双蒸水至1000ml。
封闭液(Confining liquid)（5%脱脂乳-PBS溶液，pH7.4）脱脂乳 50g加0.02mol/L pH7.4磷酸盐缓冲液（PBS）至1000ml溶解。
洗液(washing liquid)氯化钠 8.0g磷酸二氢钾 0.2g磷酸氢二钠（12H2O） 2.9g吐温-20 0.5ml加去离子水至1000ml溶解即可。
终止液(stop buffer)（2mol/L H2SO4）：21.7ml H2SO4加去离子水至200ml。
缓冲甘油(glycerine buffer)甘油 9份PB（pH8.0） 1份将9份甘油与1份PB合并，充分混匀。
0.5%H2O2-甲醇液(Hydrogen Peroxide-Methanol Solution)（总体积120ml）3%H2O220ml甲醇 100mlDAB-H2O2底物缓冲液(DAB- H2O2Substrate Buffer)取6mg二氨基联苯胺(3,3’-Diaminobenzidine Tetrahydrochloride DAB)溶解于10ml 0.05mol Tris-HCl pH7.6。
使用前取0.3%H2O20.1ml加入到DAB溶液中(H2O2的终浓度为0.003%)。
如有沉淀生成，则用滤纸过滤。
5-溴-4-氯-3吲哚磷酸/四唑氮蓝底物显色液（BCIP/NBT Substrate Solution）贮存液配制：NBT：在10ml 70%的乙醇中溶解0.5g NBT。
BCIP：在10ml 100%二甲基甲酰胺中溶解0.5g BCIP。
贮存液4℃保存，可稳定一年。
底物显色液：取66μl NBT贮液与33μl BCIP加入到10ml碱性磷酸酶缓冲液中，充分混匀，底物显色液应在用前1小时内配制。
三、细胞相关试剂配制L-谷氨酰胺（L-G）溶液（L-glutamin Solution）（0.2 mol/L）称2.9 g L-谷氨酰胺（分子量为146.15）用去离子水溶解至100 ml，过滤除菌，分装小瓶，4～5 ml/瓶，-20℃冻存。
100x青-链霉素（双抗）溶液（P/S Penicillin/Streptomycin Solution）取青霉素G（钠盐）100万单位和链霉素（硫酸盐）1 g，溶于100 ml去离子水中，分装小瓶，4～5 ml/瓶，-20℃冻存。
7.5% NaHCO3溶液（NaHCO3Solution）称分析纯NaHCO37.5 g，用去离子水溶解至l00ml，过滤除菌，分装小瓶，4～5 m1/瓶，盖紧瓶塞，4℃保存。
HEPES溶液（HEPES Solution）（1mol/L）称23.83 g HEPES（N-2-Hydroxyethylpiperazine-N'-2-ethanesulfonic acid，N-2-羟乙基呱嗪-N'-2-乙基磺酸，分子量为238.3），用去离子水溶解至100 ml，过滤除菌，分装小瓶，4～5 m1/瓶，4℃保存。
氨基喋呤（A）贮存液（Aminopterin Stocking Solution）（100×, 4×10-5mol/L）称1.76 mg氨基喋呤（Aminopterin, 分子量440.4），溶于90 m1去离子水中，滴加l mol/L NaOH 0.5 m1，并不断搅动，待氨基喋呤完全溶解后，加1 mol/L 的HCl 0.5m1中和，再补加去离子水至100 m1。