免疫抗血清的用途
抗血清制备原理、步骤及应用

抗血清制备原理、步骤及应用抗血清是一种含有高效价特异性抗体的血清,一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。
通过注射抗血清可以传递被动免疫治疗许多疾病。
一、抗血清制备原理:将抗原注射于动物体,将引起免疫应答。
可刺激动物的淋巴细胞转化为浆细胞并产生特异性抗体,待血清中积累大量抗体时,采集动物血液并分离析出血清,此即含抗体的免疫血清(抗血清)。
抗血清包括抗细菌、抗毒素、抗病毒血清。
二、抗血清制备步骤:1、选择免疫动物➢免疫动物一般选择青壮年期、健壮雌性个体。
➢抗原与免疫动物的种属差异越远越好。
➢针对不同性质的免疫原选择相应的动物。
➢制备H血清用马,制备R血清用兔,制备补体用豚鼠血清。
2、抗原制备➢抗原剂量:用灭菌生理盐水将抗原稀释为2mg/mL,与佐剂混合制成乳剂后用于动物免疫。
➢免疫原的注射剂量应考虑其抗原性的强弱、分子量大小、动物的个体状态和免疫时间。
通常小鼠首次抗原剂量为50~100μg/次,大鼠为100~200μg/次,兔为100~1mg/次,合成免疫原为2mg(半抗原约为20~200μg),一般需要与等量的福氏完全佐剂混合。
加强免疫原与福氏不完全佐剂混合或不用免疫佐剂,剂量为首次计量的1/2。
➢抗原乳剂的配制:将等量的佐剂与抗原溶液倒入钵内,经过反复碾磨,形成油包水乳剂。
制成的油包水乳剂直接影响免疫效果,因此使用前需进行质量检查。
检查方法是将制成的乳剂滴一滴在自来水表面,质量合格的乳剂滴入水面保持滴珠完整不分散,不合格的乳剂立即扩散,水面油亦逐渐扩大。
若检查不合格,则须继续操作至质量合格为止。
3、确定免疫方案➢根据免疫目的的要求、抗原性质、佐剂种类来制定免疫方案。
可采用全量免疫法、微量免疫法或混合免疫法。
免疫接种途径通常有静脉、腹腔、肌肉、皮下、淋巴结等接种途径,对抗原的吸收速度为静脉=腹腔=淋巴结>肌肉>皮下>皮内。
若抗原宝贵可采用淋巴结内微量注射法;半抗原宜皮内多点注射。
免疫接种剂量应根据分子量大小、免疫原性强弱、动物个体状态和免疫时间决定。
免疫血清学技术

荧光色素
是能够产生明显荧光,并能作为染料使用 的有机化学物称为荧光色素或荧光染料。
可用于标记的荧光素有异硫氰酸荧光素 (FITC)、四乙基罗丹明(RB 200)和四甲基 异硫氰酸罗丹明(TRITC)
染色原理及方法
FITC含有异硫氰基,能与IgG分子自由基 结合,形成FITC-IgG复合物,且不影响结 合抗原的能力和特异性,因此,当荧光抗 体与抗原结合后形成有荧光性的抗原抗体 复合物
高敏感性的标记分子
荧光素 酶分子 放射性同位素
荧光抗体技术 酶标抗体技术 同位素标记技术
(一)荧光抗体标记技术
fluorescent-labelled antibody technique
是指用荧光素对抗体或抗原进行标记,然 后用荧光显微镜观察所标记的荧光以分析 示踪相应的抗原或抗体的方法。
抗原可以是多糖、蛋白质、类脂等,抗原分 子较小,单位体积内所含的量多,与抗体结 合的总面积大,故在作定量试验时,为了不 使过剩,通常稀释抗原,并以抗原稀释度作 为沉淀试验效价。
参加沉淀试验的抗原称沉淀原,抗体称为沉 淀素。
环状沉淀试验
在小口径试管内先加入已知抗血清,然后小心沿管壁 加入待检抗原于血清表面,使之成为分界清晰的两层
SPA与IgG结合后,其Fab片暴露于外,并保持其抗体 活性。
当此被覆着特异性抗体的葡萄球菌与相应的抗原结合 时,就可互相连结引起协同凝集反应,简称COAG。
(二)沉淀试验
可溶性抗原(如细菌的外毒素、内毒素、菌 体裂解液,病毒的可溶性抗原、血清、组 织浸出液等)与相应抗体结合,在适量电解 质存在下,形成肉眼可见的白色沉淀,称 为沉淀试验(precipitation test)。
用于标记的酶
用于标记的酶有辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase,HRP)、葡萄糖氧化酶、碱性磷酸酶
抗病毒血清

抗病毒血清概述凡用细菌或病毒本身免疫马或其它大动物所取得的免疫血清叫抗菌或抗病毒血清,如炭疽血清、狂犬病血清、腺病毒血清等。
这类血清中含有大量抗体,注入动物体后,动物体不用自身制造抗体,就可以获得免疫力,这种免疫方法叫“人工被动免疫法”,这类制品叫“被动免疫制剂”。
主治功能根据注入细菌或病毒的不同,以及注射到不同种类的动物体内,得到不同免疫性能的抗病毒血清。
根据河南顺鑫动物血液制品有限公司的市场调研,现在市场上动物血清大致分为以下几类血清:1、猪抗病毒血清:猪瘟血清,猪蓝耳血清,猪圆环病毒血清,猪伪狂犬血清,猪细小病毒血清,猪口蹄疫血清,猪流感血清等。
2、禽抗病毒血清:小鹅瘟血清,鸭肝抗体血清,鸭浆膜炎血清,禽流感血清,新城疫血清等3、牛抗病毒血清:牛口蹄疫血清,奶牛乳房炎血清,牛流行热血清,牛病毒性腹泻血清,牛出血性败血症血清等4、羊抗病毒血清:羊痘血清,羊口蹄疫血清,羊小反刍兽疫血清,羊快疫血清,羊肠毒血症血清,羊猝疽血清,羊黑疫血清等5、犬抗病毒血清:犬狂犬病血清、犬瘟热血清、犬副流感血清、犬腺病毒血清与犬细小病毒病高免血清,狐貉水貂的伪狂犬血清、细小病毒血清、乙脑血清等注意事项健康猪禁用,怀孕母猪慎用。
不宜与磺胺类药物同时使用。
如有少量蛋白沉淀,摇匀后使用,不影响效果。
使用前应充分混合,现配现用。
血清与疫苗血清是属于治疗型的。
本身就是抗体。
其作用是增加抗体。
疫苗与血清是俩码事,它是属于预防型的,而且俱有一定的毒性成份。
那是心与心的交汇,是相视的莞尔一笑,是一杯饮了半盏的酒,沉香在喉,甜润在心。
红尘中,我们会相遇一些人,一些事,跌跌撞撞里,逐渐懂得了这世界,懂得如何经营自己的内心,使它柔韧,更适应这风雨征途,而不会在过往的错失里纠结懊悔一生。
时光若水,趟过岁月的河,那些旧日情怀,或温暖或痛楚,总会在心中烙下深深浅浅的痕。
生命是一座时光驿站,人们在那里来来去去。
一些人若长亭古道边的萋萋芳草,沦为泛泛之交;一些人却像深山断崖边的幽兰,只一株,便会馨香满谷。
狂犬病防治和抗血清的应用

○局部伤口处理愈早愈好,即使延迟1-2天甚至3 -4天也不应忽视局部处理,此时如果伤口已结痂, 也应将结痂去掉后按上法处理。 ○伤口不止血、不包扎、不缝合,开放性伤口应尽可能 暴露。 ○如果伤口必须包扎缝合(如侵入大血管),则应保证 伤口已彻底清洗消毒并已使用抗狂犬病血清或免疫球 蛋白对伤口“封闭”后再进行 。
局部浸润注射的具体操作方法
在伤口周围45度角进针,注射时先进针到伤口基底部,边注射药液边退针,并转换注射方向 头面部伤口浸润注射时应避开神经丰富的部位,实在难以注射的部位给予前层皮下注射和伤口表面的喷洒和冲洗,需要麻醉时可用麻醉剂
注射反应的处理
1.过敏休克:可在注射中或注射后数分钟至数十分钟内突 然发生。患者突然表现沉郁或烦躁、脸色苍白或潮红、胸闷或气喘、出冷汗、恶心或腹痛、脉搏细速、血压下降、重者神志昏迷虚脱,如不及时抢救可以迅速死亡。轻者注射肾上腺素后即可缓解;重者需输液输氧,使用升压药维持血压, 并使用抗过敏药物及肾上皮质腺素等进行抢救。 2.血清病:主要症状为荨麻疹、发热、淋巴结肿大、局部浮 肿,偶有蛋白尿、呕吐、关节痛,注射部位可出现红斑、瘙痒及水肿。一般系在注射后7~14天发病,称为延缓型。亦 有在注射后2~4天发病,称为加速型。对血清病应对症疗法,可使用钙剂或抗组织胺药物,一般数日至十数日即可痊愈。
⑤其他因素的影响。有人报告,被狂犬咬伤者如有嗜烟、 酗酒或吸毒等不良嗜好,常发生狂犬疫苗免疫失败。此外, 患有恶性肿瘤、肝硬化以及过度疲劳、情绪过于忧虑或亢 奋 等均可使免疫应答不良。据报道,被狂犬咬伤以后,只 要正常处理伤口,及时使用人狂犬病免疫球蛋白 或抗狂犬 病血清和全程足量注射狂犬疫苗,也就是采取“三管齐下” 的办法,99%以上的被狂犬咬伤者会平安无事。
高免血清八联抗

高免血清八联抗高免血清八联抗:—猪瘟、口蹄疫、蓝耳、圆环病毒病、伪狂犬、细小病毒病、猪传染性胃肠炎、猪流感病八联抗体主要特点:1、本品是复合新型制剂,注射应激小,吸收快、高效长效。
2、高效的浓缩猪瘟血清、蓝耳病血清以及伪狂犬血清的有效结合使抗病毒范围更广、疗效更彻底,是目前高热病的特效药物。
3、本品特有的纯天然干扰素和聚肌胞可以快速抑制病毒繁殖,并能刺激机体迅速产生抗体,无耐药性。
使用安全,不易产生过敏反应,同时,本品可解毒、镇痛,清除氧化物,清除氧自由基对粘膜的损害,刺激细胞表面活性物质的分泌。
4、本品特添加10%替比夫定,替比夫定是全球唯一在专利药和非专利药两大领域均处于领先地位的诺华公司研制的最新抗病毒产品,更强地抑制病毒,并具有更高的e抗原血清转换率,且治愈后不易反弹。
【兽药名称】通用名:猪瘟、口蹄疫、蓝耳、圆环病毒病、伪狂犬、细小病毒病、猪传染性胃肠炎、猪流感病八联抗体商品名:高免血清-六联抗汉语拼音:gaomianxueqing-Baliankang【主要成分】猪瘟、口蹄疫、蓝耳、圆环病毒病、伪狂犬、细小病毒病六联抗体。
【性状】本品为深红棕褐色高浓度液体。
【功能主治】1、本品剂量高,药效强,对各种动物的呼吸道疾病疗效显著。
2、猪:临常出现的反复干咳,食欲不振,生长不良,呛咳加气喘不止,呼吸不畅,有时呈现犬坐姿态,其他表现可见被毛粗乱,反复发作,时好时坏,精神沉郁,食欲不振,腹部疼痛,拒绝触摸,等治疗效果显著。
3、本品对禽的各种支原体感染,敏感细菌感染引起的呼吸道疾病,也有标本兼治的作用。
4、本品对猪、禽具有促进蛋白质同化,可作为促长剂使用。
【适应症】对金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、丹毒杆菌、副嗜血杆菌、巴氏杆菌、螺旋体等病原体引起的畜禽呼吸道、肠道感染有极强的杀灭作用,对猪、鸡支原体感染有特效,如猪喘气病、传染性胸膜肺炎、传染性萎缩性鼻炎、猪肺炎以及仔猪黄白痢、猪痢疾、断奶腹泻为主的消化道疾病,也可用作猪的促生长剂。
抗血清制备

抗血清制备定义:抗血清(antiserum)是一种含有多克隆抗体的血清。
通过注射抗血清可以传递被动免疫(passive immunity)治疗许多疾病。
目前唯一能够治疗埃博拉病毒患者的方法就是通过注射前一个患者的抗血清到体内。
原理:抗血清为含有某一类具有特异免疫功能的抗体分子的血清,一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。
高效价的抗血清用于研究工作以及疾病的诊断和治疗。
一种抗原能否引起抗体生成反应,一方面取决于抗原分子表面有无抗原决定簇(Antigenic determinant),另一方面取决于机体的免疫状态,当具备以上两个条件后,抗体生成将遵循抗体生成的一般规律——初次反应和再次反应。
抗原的种类繁多,包括天然的蛋白质抗原和细胞性抗原、合成性抗原以及基因工程抗原等,不同的抗原免疫动物具有不同的特殊性。
一般完全抗原免疫动物需加用佐剂,尤其在使用可溶性抗原时,以期得到高效价的抗血清;合成性抗原和基因工程抗原等半抗原物质需先通过人工的方法与蛋白质载体连接后再与佐剂混合免疫动物,方可获得理想的免疫效果。
使用佐剂后可增加抗原的免疫原性和延长抗原在机体内存留的时间,从而改变了抗原原有的免疫原性。
材料:1、金属编号牌(对动物作标记录)或染料;2、1毫升,5毫升、20毫升注射器;3、采血针头(9#,12#),卡价苗针头(41/2 # — 51/2 #);4、灭菌平皿,疫苗瓶,青霉素瓶,皮塞以及吸管,脱脂棉;5、卡介苗(75mg/ml);6、抗原(小鼠血清);7、青霉素溶液,链霉素溶液和5%葡萄糖溶液;8、液体石腊(医用),羊毛腊(配制佐剂用);9、灭菌生理盐水,消毒用酒精,2.5%碘酒;10、1.5%琼脂,玻板,饭盒(保湿、保湿作用);11、实验动物(家兔)。
步骤1、动物的选择羊、马、鸡、猴、豚鼠、兔都是常用的免疫动物,在实验中,选择动物时应考虑抗原与动物的种属关系、抗原性质与动物种类、免疫血清的需要量、免疫血清的要求以及动物个体等因素。
抗血清名词解释__概述说明以及解释

抗血清名词解释概述说明以及解释1. 引言1.1 概述抗血清作为一种重要的生物实验和临床诊断工具,已经在医学、农业和生物研究等领域中广泛应用。
它是从动物体内或人工合成,能够特异性地与目标抗原结合的抗体的混合物。
本文将详细介绍抗血清的定义、作用与意义以及其特点和分类。
1.2 文章结构本文主要分为五个部分进行阐述,首先在引言部分给读者提供一个概述,明确论文的目的和结构。
接下来,在第二部分将解释抗血清的定义,并探讨血清的作用与意义。
第三部分将重点介绍抗血清在医学、农业和生物研究等领域中的应用场景,并针对每个领域进行详细说明。
第四部分将揭示抗血清制备方法和过程,包括动物免疫注射方法、血清分离和提取过程以及抗体浓缩与纯化方法。
最后,在结论部分总结抗血清的重要性和应用价值,并展望未来抗血清研究发展方向。
1.3 目的本文的目的是全面介绍抗血清的概念、作用与意义,详细阐述抗血清在医学、农业和生物研究等领域中的应用场景,以及抗血清制备的方法和过程。
通过本文的阐述,读者将对抗血清有一个更加深入的了解,并能够认识到抗血清在各个领域中的重要性和应用前景。
2. 抗血清名词解释:2.1 定义:抗血清是指从动物体内或外源性源提取出的含有特定抗体的血清。
它是通过免疫机制产生的一种免疫球蛋白,具有特异性和多样性,能与特定抗原结合并形成可观察到的免疫反应。
2.2 血清的作用与意义:血清在免疫学和生物医学领域中具有重要作用。
它可以被用作诊断和治疗工具,用于检测某些疾病标志物、确定特定细菌或病毒感染以及评估机体对某些物质的免疫反应。
此外,血清还可以为新药物开发提供重要参考。
2.3 抗血清的特点和分类:抗血清根据其来源和应用领域不同,可分为多种类型。
根据动物源性,主要包括多种动物如小鼠、大鼠、兔子等制备的抗血清。
根据应用领域不同,也可分为医学、农业和生物研究等方面使用的不同类型的抗血清。
此外,抗血清还可以根据特定抗体的种类进行分类,例如抗IgG血清、抗IgE血清等。
免疫学实验抗血清制备及抗体效价检测 华中农业大学免疫学基础及免疫学技术

v 10月14日 2.0ml 耳静脉
v 10月25日 2.5mL 耳静脉
一、采血
(一)心脏抽血
v 家兔固定(仰卧)---准确找到心脏部位---剪毛(心 脏部位)---消毒---进针(50ml注射器接带硅胶管的 12号针头)抽血,抽至50ml,从硅胶管接头处取下注 射器,拔针头,将血液注入100ml无菌空三角瓶,再 重复上述操作继续抽血,直至抽完。
v 将双扩实验结果用铅笔绘图并分析判断: (1)待测Ag中至少有几种组分? (2)待测Ag各组分相对应的Ab的效价?
如:待测抗原组分一相对应的抗体的效价为1:X。
v 注意沉淀线的数量、部位、走向、粗细、 清晰度等。
★结果分析
v 1、本实验采用的是什么Ag、Ab?
v 2、 Ag、Ab为什么要设置一系列的 浓度 (方阵排列) ? “效价”是指Ag的、 还是Ab的?与Ag、Ab的浓度有何关 系?
本次实验目的
1、分析待测抗原的组分数量; 2、测定各组分相应抗血清的效价。
以出现沉淀线抗体的最高稀释倍数为该抗 体效价。
1、融化凝胶、倒胶制备凝胶板(每人1板)。 2、Ag、Ab稀释(见图、4人1套)。 3、打孔、点样(加Ag、Ab,每孔8ul)。 4、37℃保温保湿扩散1d,结果观察。
记号:学号
四、免疫途径
五、免疫时间间隔
v 羊、马、鸡、猴、豚鼠、兔都是常用的免疫动物, 在实验中,选择动物时应考虑抗原与动物的种属 关系、抗原性质与动物种类、免疫血清的需要量、 免疫血清的要求以及动物个体等因素。
v 免疫用动物应选适龄、健壮.最好为雄性。
v 最常用的实验动物是家兔,一般选择选择年龄在 6个月以上当年繁殖的♂性,体重2 ~3公斤,健 康家兔三只,免疫前用金属编号牌固定兔耳,或 用染料涂沫在动物的背部,作出明确的标记。
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免疫抗血清的用途
免疫抗血清是一种含有特定抗体的血清制剂,主要用于治疗和预防一些传染病、中毒和免疫缺陷患者的免疫功能。
首先,免疫抗血清具有治疗感染性疾病的作用。
当我们感染病原体时,免疫系统会产生抗体来中和和清除病原体。
但有些疾病的病原体比较强大,导致人体自身无法产生足够的抗体。
这时,通过给予患者免疫抗血清,可以为其提供外源性抗体,帮助其击败病原体。
例如,在治疗狂犬病和蛇咬伤时,免疫抗血清中的抗体可以中和病毒和毒素,从而防止病情进展,挽救患者生命。
其次,免疫抗血清可以用于预防某些疾病。
有时,在暴露于特定病原体后,我们需要迅速建立免疫保护,来阻止病原体感染。
免疫抗血清中的抗体可以提供短期免疫保护,在患者自身免疫系统建立充分的保护之前,起到防止疾病发生的作用。
例如,当我们暴露于白喉或破伤风病原体时,通过给予相应抗血清,可以帮助建立起即时的免疫保护。
此外,免疫抗血清还有助于治疗免疫缺陷患者。
免疫系统的异常功能或缺陷可能导致患者容易受到感染和其他疾病的困扰。
某些患者可能因先天性免疫缺陷或医源性免疫抑制而无法产生足够的抗体。
在这种情况下,免疫抗血清可以为这些患者提供外源性抗体,增强其免疫防御能力,降低感染和疾病的风险。
特定的免疫抗血清,如人免疫球蛋白(IVIG),可以用于治疗一些免疫缺陷疾病,如原发性免疫缺陷病。
此外,免疫抗血清还可以用于其他疾病的治疗,如自身免疫性疾病。
在一些自身免疫性疾病中,免疫系统错误地攻击人体自身组织和器官,导致炎症和组织损伤。
免疫抗血清中的抗体可以调节异常的免疫反应,减少炎症反应和组织损伤,从而缓解疾病症状。
例如,人抗淋巴细胞球蛋白(ALG)和抗淋巴球抗体(ATG)可以用于治疗一些自身免疫性疾病,如重症肌无力和自身免疫性溶血性贫血。
总之,免疫抗血清在医疗中具有广泛的应用价值。
它可以用于治疗感染性疾病、预防疾病、治疗免疫缺陷患者以及治疗一些自身免疫性疾病。
随着科技的不断进步,对免疫抗血清的研究和应用也将不断提高,为患者提供更好的医疗服务。