生物化学学习指导(下)
微生物学类实验指导书(下)蛋白酶产生菌活力测定及果酒酵母分离纯化
实验一产酶微生物的分离、纯化与选育酶是生物体内进行生物化学反应的催化剂，在生物体中已发现的酶有2500多种。
由于酶促反应的特异性强，反应条件温和，安全无毒,环境污染少，在洗涤剂、皮革、纺织、造纸、诊断、制药等领域具有广泛的应用价值。
目前,能由工业生产的50多种酶制剂包括蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、果胶酶、纤维素酶、葡萄糖氧化酶,葡萄糖异构酶等，这些酶大部分是由霉菌、细菌、链霉菌和酵母菌产生的.通过本实验项目，使学生学会从自然界中分离产酶微生物的方法，菌种的纯化技术及其高产菌的选育技术。
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蛋白酶产生菌的分离与纯化2。
1 实验目的学习从自然界中分离蛋白酶产生菌并纯化.2。
2 实验原理许多细菌和霉菌产生蛋白酶,细菌中的芽孢杆菌是常见的蛋白酶产生菌.本实验将土壤样品（或其他样品)悬液加热处理，杀死非芽孢细菌及其他微生物后进行划线分离得到芽孢杆菌，将其接种到酪蛋白平板进行培养，根据酪蛋白平板的水解圈作初筛.也可直接将细菌或霉菌接种到酪蛋白平板进行培养,分离筛选其他蛋白酶产生菌。
2.3 实验仪器与材料土壤样品或其他富含蛋白质的样品、牛肉膏蛋白胨培养基平板、酪蛋白平板、无菌水（带玻璃珠）、芽孢染色液;显微镜、恒温水浴锅、酒精灯、接种针、游标卡尺、无菌移液管、无菌试管、量筒等。
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4 实验方法与步骤2。
4.1 分离1)采集土壤样品，用无菌水制备1:10土壤悬液；2）取1:10土壤悬液5ml,注入已灭过菌的试管中，将此试管放入75—80 ℃水浴中热处理10 min，以杀死非芽孢细菌；3）取加热处理过的土壤悬液100-200 μL，涂布接种到牛肉膏蛋白胨培养基平板，将平板倒置,于30-32 ℃培养24-48 h；4)对长出的单菌落进行编号，选择表面干燥、粗糙、不透明的菌落，挑取少许菌苔涂片,做芽孢染色，判断是否为芽孢杆菌。
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2 筛选1）从判定为芽孢杆菌的菌落处，分别挑取少许菌苔，先接种含酪蛋白的斜面培养基,再点接于含酪蛋白的平板，30-32 ℃培养24—48 h，测定平板上菌苔直径和水解圈直径.2）水解圈直径与菌落直径比值大的那个菌株对应的斜面培养物，可作为进行诱变选育或酶发酵、酶活力测定菌株。
生物化学与分子生物学学习指导与习题集
生物化学与分子生物学学习指导与习题集11第一篇生物大分子的结构与功能第一章蛋白质的结构与功能氨基酸的结构与性质1．氨基酸的概念：氨基酸(amino acid)是蛋白质分子的基本结构单位。
构成蛋白质分子的氨基酸共有20种，这些氨基酸都是L-构型的α-氨基酸。
2．氨基酸分子的结构通式：5、氨基酸的等电点氨基酸不带电荷时，溶液的pH值称为该氨基酸的等电点，以pI表示。
氨基酸不同，其等电点也不同。
也就是说，等电点是氨基酸的一个特征值。
6、氨基酸的茚三酮反应如果把氨基酸和茚三酮一起煮沸，除脯氨酸和羟脯氨酸显黄色外，其它氨基酸都显深浅不同的紫色。
氨基酸与茚三酮的反应，在生化中是特别重要的，因为它能用来定量测定氨基酸。
肽键：1、肽键: 一个氨基酸的α-羧基与另一个氨基酸的α-氨基以共价键偶联形成肽，其间的化学键称为肽键(peptide bond)，也叫酰胺键(-CO-NH-)。
4、肽（peptide）是氨基酸通过肽键相连的化合物。
肽按其组成的氨基酸数目为2个、3个和4个等不同而分别称为二肽、三肽和四肽等，多肽和蛋白质的区别是多肽中氨基酸残基数较蛋白质少，一般少于50个，而蛋白质大多由100个以上氨基酸残基组成，但它们之间在数量上也没有严格的分界线。
蛋白质的分离和纯化2、盐析：在蛋白质溶液中加入大量中性盐，以破坏蛋白质的胶体性质，使蛋白质从溶液中沉淀析出，称为盐析。
常用的中性盐有：硫酸铵、氯化钠、硫酸钠等。
√蛋白质的等电点概念：蛋白质分子所带正、负电荷相等时溶液的pH值称为蛋白质的等电点。
pH 值在等电点以上，蛋白质带负电，在等电点以下，则带正电。
溶液的pH在蛋白质的等电点处蛋白质的溶解度最小。
（Tertiary structure）。
对于一些较小的蛋白质分子，三级结构就是它的完整三维立体结构；而对于大的蛋白质分子，则需要通过三级结构单位的进一步组织才能形成完整分子。
其维系键主要是非共价键（次级键）：氢键、疏水键、范德华力、离子键等，也可涉及二硫键。
生物化学学习指南
生物化学-学习指南一、选择题1.可与谷丙转氨酶共同催化丙氨酸和α-酮戊二酸反应产生游离氨的酶是：A．谷氨酸脱氢酶 B．谷草转氨酶 C．谷氨酰胺酶D．谷氨酰胺合成酶 E．α-酮戊二酸脱氢酶2.能直接转变为α-酮戊二酸的氨基酸为：A．天冬氨酸 B．谷氨酰胺 C．丙氨酸 D．丝氨酸 E．谷氨酸3.下列哪一组氨基酸完全是支链氨基酸A．亮氨酸、异亮氨酸、苏氨酸B．亮氨酸、缬氨酸、谷氨酸C．异亮氨酸、缬氨酸、天冬氨酸D．亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸E．缬氨酸、天冬氨酸、赖氨酸4.参与生成SAM提供甲基的是：A．丙氨酸 B．谷氨酸 C．γ-酮戊二酸 D．草酰乙酸 E．甘氨酸5.关于酮体叙述错误的是：A．酮体是脂酸在肝分解氧化时特有的中间产物B．乙酰乙酸、β-羟丁酸及丙酮三者统称酮体C．生成酮体是肝特有的功能D．酮体是肝脏输出能量的一种方式E．肝脏本身可以氧化利用酮体6.体内合成非必需氨基酸的主要途径是：A．转氨基 B．联合脱氨基作用 C．非氧化脱氧 D．嘌呤核苷酸循环E．脱水脱氨7.体内重要的转氨酶均涉及：A．天冬氨酸与草酰乙酸的互变 B．丙氨酸与丙酮酸的互变C．谷氨酸与α-酮戊二酸的互变 D．甘氨酸与其α-酮酸的互变E．精氨酸与延胡索酸的互变8.合成腺苷酸代琥珀酸的底物之一是：A．AMP B．ADP C．IMP D．XMP E．GDP9.用亮氨酸喂养实验性糖尿病犬时,下列哪种物质从尿中排出增加A．葡萄糖 B．酮体 C．脂肪 D．乳酸 E．非必需氨基酸10.丙氨酸－葡萄糖循环中产生的葡萄糖分子来自于：A．肌肉内的谷氨酸 B．肌肉内的α-酮戊二酸C．丙氨酸 D．肝细胞内的α-酮戊二酸 E．肝细胞内的谷氨酸11.组成转氨酶的辅酶成分有：A．泛酸 B．尼克酸 C．吡哆醛 D．核黄素 E．生物素12.在尿素合成中,能穿出线粒体进入胞质继续进行反应的代谢物是：A．精氨酸 B．瓜氨酸 C．鸟氨酸 D．氨基甲酰磷酸E．精氨酸代琥珀酸13.鸟氨酸循环的限速酶是：A．氨基甲酰磷酸合成酶I B．鸟氨酸氨基甲酰转移酶C．精氨酸代琥珀酸合成酶 D．精氨酸代琥珀酸裂解酶E．精氨酸酶14.尿素合成调节中哪项不正确A．受食物蛋白质的影响B．氨基甲酰磷酸合成酶－I活性增强,尿素合成加速C．精氨酸代琥珀酸合成酶是尿素合成的限速酶D．精氨酸浓度增高时,尿素生成降低E．尿素合成是与三羧酸循环密切联系的15.真核细胞降解外来蛋白质的场所是：A．高尔基体 B．溶酶体 C．线粒体 D．内质网 E．细胞核16.下列各组酶中,能联合完全消化蛋白质为氨基酸的是：A．胰蛋白酶、糜蛋白酶、羧基肽酶、胃蛋白酶、二肽酶B．胰蛋白酶、糜蛋白酶、氨基肽酶、肠激酶、胃蛋白酶C．胰蛋白酶、糜蛋白酶、羧基肽酶、、二肽酶、氨基肽酶D．胰蛋白酶、氨基肽酶、羧基肽酶、肠激酶、二肽酶E．糜蛋白酶、胃蛋白酶、羧基肽酶、二肽酶、氨基肽酶17.关于γ-谷氨酰基循环,以下哪项是错误的A．氨基酸的吸收及向细胞内转运的机制B．通过谷胱甘肽的分解和再合成起作用C．此循环在小肠黏膜细胞、肾小管细胞和脑组织中广泛存在D．关键酶是γ-谷氨酰基转移酶位于细胞液中E．γ-谷氨酰基循环是耗能的转运过程18.肠道中氨基酸的主要腐败产物是：A．吲哆 B．色胺 C．组胺 D．氨 E．腐胺19.丙氨酸－葡萄糖循环的作用是：A．使肌肉中有毒的氨以无毒形式运输,并为糖异生提供原料B．促进非必需氨基酸的合成C．促进鸟氨酸循环D．促进氨基酸转变为脂肪E．促进氨基酸氧化供能20.血氨的最主要来源是：A．氨基酸脱氨基作用生成的氨 B．蛋白质腐败产生的氨C．尿素在肠中细菌脲酶作用下产生的氨 D．体内胺类物质分解释出的氨E．肾小管远端谷氨酰胺水解产生的氨21.出现于蛋白质中的氨基酸是：A．半胱氨酸 B．胱氨酸 C．瓜氨酸 D．精氨酸 E．赖氨酸22.人体营养非必需氨基酸是：A．苯丙氨酸 B．甲硫氨酸 C．谷氨酸 D．色氨酸 E．苏氨酸23.蛋白质的互补作用是指：A．糖和蛋白质混合食用,以提高食物的生理价值作用B．脂肪和蛋白质混合食用,以提高食物的生理价值作用C．几种生理价值低的蛋白质混合食用,以提高食物的营养作用E．糖、脂、蛋白质及维生素混合食用,以提高食物的营养作用D．用糖和脂肪代谢蛋白质的作用24.有关氮平衡的正确叙述是：A．每日摄入的氮量少与排出的氮量,为负氮平衡B．氮平衡是反映体内物质代谢情况的一种表示方法C．氮平衡实质上是表示每日氨基酸进出人体的量D．总氮平衡常见于儿童E．氮正平衡、氮负平衡均见于正常成人25.关于胃蛋白酶的错误叙述是：A．由胃黏膜主细胞生成B．H＋是酶的激活剂C．刚分泌时是无活性的D．对蛋白质肽键有绝对特异性E．使大分子的蛋白质逐个水解成氨基酸26.胰蛋白酶原激活成胰蛋白酶的过程是：A．在肠激酶或胰蛋白酶作用下,水解成两个氨基酸B．在H＋作用下破坏二硫键,使肽链分离C．在胰蛋白酶作用下水解下五个肽D．在肠激酶作用下,水解下六个肽,形成酶活性中心E．在胰蛋白酶作用下,水解下一个六肽,形成有活性的四级结构27.下列关于脂类的叙述不正确的是；A．各种脂肪和类脂都含有C、H、O、N、P五种元素B．脂肪过多会使人体肥胖C．脂肪和类脂具有相似的理化性质D．不溶于水而溶于有机溶剂E．脂肪具有储能和供能作用28.下列关于必需脂肪酸叙述错误的是：A．动物机体自身不能合成,需从植物油摄取B．动物机体自身可以合成,无需从外源摄取C．是动物机体不可缺乏的营养素D．指亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸三种不饱和脂肪酸E．是前列腺素、血栓素、白三烯等生理活性物质的前体29.关于脂类的生理作用叙述错误的是：A．是机体内氧化供能的最主要物质B．是机体储存能量的物质C．是生物膜的重要组分D．参与细胞识别E．与信息传递有关30.下列哪种物质与脂类的消化吸收无关A．胆汁酸盐 B．胰脂酶 C．辅脂酶 D．磷脂酶 E．脂蛋白脂肪酶31.脂肪分解过程中所产生的脂肪酸在血中的运输方式是：A．溶于水,直接由血液运输 B．与清蛋白结合运输C．与α-球蛋白结合运输 D．与载脂蛋白结合运输E．与β-球蛋白结合运输32.脂肪酸的氧化分解不需要经过的步骤是：A．脂肪酸的活化 B．脂酰CoA进入线粒体C．乙酰乙酰CoA的生成 D．脂酸的β-氧化 E．三羧酸循环33.脂肪酸进入线粒体进行氧化分解的限速酶是：A．脂酰CoA合成酶 B．脂酰CoA脱氢酶 C．肉碱脂酰转移酶ⅠD．肉碱脂酰转移酶Ⅱ E．肉碱-脂酰肉碱转位酶34.尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸是指A. FADB. FMNC. NADD. NADP35.磷酸戊糖途径为合成核苷酸提供：A．NADPH + H+ B．4－磷酸赤藓糖C．5－磷酸核酮糖D．5－磷酸木酮糖; E．5－磷酸核糖36.下列哪一步反应不在线粒体内进行：A．脂肪酸的活化B．肉碱转运活化的脂肪酸C．脂酰CoA脱氢 D．烯脂酰CoA水化E．酮脂酰CoA硫解37.肉碱具有下列功能：A．转运活化的脂肪酸进入小肠粘膜细胞B．在脂肪酸的生物合成中起作用C．参与脂酰CoA的脱氢反应D．转运脂酰基进入线粒体内膜E．参与脂肪酸的活化38.脂酰CoA的β氧化的循环反复进行需要哪种酶的参与：A．HMG CoA合成酶 B．脂酰CoA转移酶C．脂酰CoA脱氢酶 D．脂酰CoA合成酶E．硫激酶39.尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸是指A. FADB. FMNC. NADD. NADP40.磷酸戊糖途径为合成核苷酸提供：A．NADPH + H+ B．4－磷酸赤藓糖C．5－磷酸核酮糖D．5－磷酸木酮糖;E．5－磷酸核糖41.关于L－谷氨酸脱氢酶的叙述,下列哪项是错误的A．辅酶是尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸 B．催化可逆反应C．在骨骼肌中活性很高 D．在心肌中活性很低E．是一种别构酶,调节氨基酸的氧化功能42.下列哪种物质不是脂肪酸的β氧化中的辅助因子：A．辅酶A B．FAD C．NADP+ D．NAD+ E．肉碱43.脂肪酸β氧化酶系存在于以下亚细胞部位：A．细胞质 B．细胞核 C．线粒体 D．内质网 E．高尔基体44.软脂酰CoA经彻底β氧化的产物通过三羧酸循环和氧化磷酸化生成ATP的摩尔数为：A．12 B．131 C．129 D．36 E．3845.嘌呤核苷酸从头合成时首先生成的是：A．GMP B．AMP C．IMP D．ATP E．GTP46.肝脏用以合成酮体的原料是：A．脂酸在线粒体中经β氧化生成的乙酰CoAB．葡萄糖分解代谢产生的乙酰CoAC．丙二酰CoA D．脂酰CoAE．花生四烯酸47.参与腺嘌呤核苷酸补救合成途径的酶有：A．磷酸核糖二磷酸转移酶B．磷酸核糖氨基转移酶C．腺嘌呤磷酸核糖转移酶D．鸟嘌呤脱氨酶E．腺苷酸脱氨酶48.人体内嘌呤核苷酸分解的终产物是：A．尿素B．肌酸C．肌酸酐D．尿酸E．丙氨酸49.氮杂丝氨酸能干扰或阻断核苷酸合成,是因为它在结构上与：A．丝氨酸类似B．甘氨酸类似C．天冬氨酸类似D．谷氨酰胺类似E．天冬酰胺类似50.治疗痛风有效的别嘌呤醇：A．可抑制鸟嘌呤脱氨酶B．可抑制腺苷脱氨酶C．可抑制尿酸氧化酶D．可抑制黄嘌呤氧化酶E．对以上酶都无抑制作用51.在嘧啶核苷酸合成中催化氨基甲酰磷酸合成的酶是：A．氨基甲酰磷酸合成酶I B．氨基甲酰磷酸合成酶IIC．天冬氨酸转氨基甲酰酶D．乳清酸核苷酸脱羧酶E．氨基甲酰磷酸合成酶52.DNA连接酶的作用是：A.使DNA形成超螺旋结构B.合成RNA引物C.使双螺旋DNA链缺口的两个末端连接D.不用消耗能量E.连接DNA单链53.复制中RNA引物的作用是：A.使DNA-pol活化B.提供3ˊ-OH合成DNA链C.提供5ˊ-P合成DNA链D.提供5ˊ-P合成RNA链E.提供3ˊ-OH合成RNA链54.关于在转录延长中,RNA聚合酶与DNA模板的结合的叙述正确的是：A.以全酶与模板结合B.以核心酶与模板的特定位点结合C.酶与蛋白的结合具有高度的特异性D.结合状态松驰而有利于RNA聚合酶向前移动E.和转录起始时的状态相同55.原核生物的ρ因子的功能是：A.在操纵区域激活阻遏蛋白B.释放结合在启动子上的RNA聚合酶C.抑制RNA聚合酶活性D.参加转录的终止过程E.允许特定转录的启动过程56.以整个分子参入嘌呤环的氨基酸是：A．天冬氨酸B．甘氨酸C．丙氨酸D．丝氨酸E．谷氨酰胺57.IMP转变成GMP的过程中,经历了：A．氧化反应B．还原反应C．脱水反应D．硫化反应E．生物转化58.一种丙氨酸tRNA ,其反密码子为GCU可识别mRNA上的密码子为A. UGAB. AGCC. AGID. CGU59.mRNA分子上密码子为ACG,其相对应的反密码子是A. UCGB. IGCC. GCAD. CGU60.决定tRNA携带氨基酸特异性的关键部位是：A. –XCCA3`末端B. TψC环C. DHU环D. 额外环E. 反密码子环61.体内进行嘌呤核苷酸从头合成途径的最主要组织是：A．胸腺组织B．小肠黏膜细胞C．肝细胞D．脾脏E．骨髓62.可与二酰基甘油结合为合成磷脂提供活性中间体的核苷酸是：A．ADP B．UDP C．AMP D．GDP E．CDP63.嘌呤核苷酸的从头合成是：A．首先合成嘌呤碱然后5－磷酸核糖化B．嘌呤环的氮原子均来自氨基酸的α-氨基C．嘌呤环的碳原子均由氨基酸参入D．在PRPP的基础上利用各种原料合成嘌呤环E．氨基甲酰磷酸为嘌呤环提供氨甲酰基64.原核细胞DNA分子上能被DNA指导的RNA聚合酶特异识别的部位是A．操纵子 B 启动子 C 衰减子 D 终止子65.原核生物基因转录起始的正确性取决于A. RNA聚合酶核心酶B. RNA聚合酶σ因子C. DNA聚合酶D. DNA解旋酶66.体内进行嘌呤核苷酸从头合成途径的最主要组织是：A．胸腺组织B．小肠黏膜细胞C．肝细胞D．脾脏E．骨髓67.在原核生物DNA的复制过程中,由催化RNA引物的合成A．DNA聚合酶I B. DNA聚合酶II C. DNA聚合酶IIID. RNA 酶E. 引物合成酶68.转录过程中遗传信息的传递方向是A. DNA→RNAB. RNA→DNAC. RNA → RNAD. RNA →蛋白质69.下列关于RNA聚合酶的陈述中,正确的是A．合成多聚核苷酸链时RNA聚合酶作用于核苷二磷酸B．R NA 聚合酶作用是,需要RNA引物C．R NA聚合酶在多聚核苷酸的3’端加上核苷酸D．R NA聚合酶可以在DNA的两条链上同时合成RNA70.真核生物mRNA poly A尾巴的加接信号A．在转录终止后 B. 在转录终止前 C．在转录终止点上 D.在mRNA的5’端71.抑制脂肪动员的激素是:A．肾上腺素 B．胰岛素 C．ACTH D．胰高血糖素 E．TSH72.核苷酸从头合成中,嘧啶环上第1位N来源于下列A. GlnB. GlyC. AspD. His73.嘌呤环上第1位N和第7位N来源于下列A. AspB. MetC. GluD. Gly74.参与嘌呤核苷酸循环的化合物A. GMPB. CMPC. AMPD. IMP75.核苷酸从头合成中, 嘌呤环上第3位和第9位N是由提供的;A. Gly B. Asp C. Gln D. Ala二、解答题1.比较原核生物和真核生物的RNA聚合酶有何不同2.脂肪在机体的能量代谢中有何作用并叙述脂类消化吸收的特点;3.比较氨基甲酰磷酸合成酶I和氨基甲酰磷酸合成酶II在合成代谢的异同4.5.为什么说真核生物的基因是断裂基因并接体如何进行mRNA的剪接过程6.DNA的复制分为哪几个阶段其主要特点是什么复制的起点时如何控制的7.新合成多肽链的翻译后加工包括哪些主要内容8.转录可生成哪几种RNA分别说明它们是如何进行转录后修饰的9.10.请比较脂肪酸的β氧化与脂肪酸的生物合成的主要不同点;11.简述丙氨酸－葡萄糖循环及其生理意义;12.试述核苷酸在体内的重要生理功能;参考答案：一、选择题1-25 AEDEE BCCBC CBCDB CDDAA CCCAE26-50 DABAA BCCCE ADCCE CCCCC ACADD51-75 BCBDD BABDE CDDBB CEACA BCDDC二、解答题13.比较原核生物和真核生物的RNA聚合酶有何不同答：真核生物的RNA聚合酶目前已发现有三种;RNA聚合酶Ⅰ存在于核仁中,转录rRNA顺序;RNA聚合酶Ⅱ存在于核质中,转录大多数基因严格说是催化各种前体mRNA的合成,需要“TATA”框;RNA聚合酶Ⅲ存在于核质中,转录很少几种基因如tRNA基因如5SrRNA基因;原核生物：细菌中只发现一种RNA聚合酶,能催化mRNA,tRNA和rRNA等的合成,研究得比较清楚的是大肠杆菌的RNA聚合酶".14.脂肪在机体的能量代谢中有何作用并叙述脂类消化吸收的特点;答：作用：1.在大多数生物中脂肪是能量储存的主要形式 2.类脂,特别是磷脂和胆固醇是细胞膜的主要组成成分,起着维持细胞的完整,区隔细胞内部的不同结构作用;3.有些特殊的脂质还起着某些特殊的作用;特点：①主要部位在小肠;②需胆汁酸盐的参与;③有两条吸收途径,中短链脂肪酸通过门静脉系统吸收,长链脂肪酸、胆固醇、磷脂等通过淋巴系统吸收;④甘油三酯在小肠粘膜细胞中需进行再合成;⑤需载脂蛋白参与;15.比较氨基甲酰磷酸合成酶I和氨基甲酰磷酸合成酶II在合成代谢的异同16.答：这两个酶是同工酶,氨基甲酰磷酸合成酶1主要存在于线粒体中,将氨、二氧化碳合成为氨基甲酰磷酸参与鸟氨酸循环;氨基甲酰磷酸合成酶2存在于胞浆中,氨基甲酰磷酸合成酶2的氨来源于谷氨酰胺,将谷氨酰胺的氨基与二氧化碳结合形成氨基甲酰磷酸参与嘧啶合成;17.为什么说真核生物的基因是断裂基因并接体如何进行mRNA的剪接过程答：基因是指为生物大分子主要是蛋白质,还有tRNA、rRNA等核酸编码的核酸片段;在真核生物基因中,编码序列只占少数例如5％左右,可称为外显子;非编码序列可称为内含子,它是阻断基因线性表达的DNA片段;这种在同一基因外显子被内含子分隔的现象就是断裂基因;mRNAR剪接实际上是切除内含子,把外显子互相连接起来,并接体由snRNA和核内蛋白质组成,可结合内含子3＇和5＇端的边界序列,从而使两个外显子互相靠近;靠含鸟苷的辅酶的亲电子攻击使第一外显子切离,再由第一外显子3＇-OH亲电子攻击内含子与第二外显子的磷酸二酯键,使内含子去除而两外显子相接;这种反应称二次转酯反应;18.DNA的复制分为哪几个阶段其主要特点是什么复制的起点时如何控制的答：就大肠杆菌复制过程来说：包括复制起始,延伸,终止起始：有DnaA,Hu蛋白,DnaC,DnaB ,SSB蛋白参与,引物合成E催化合成RNA引物延伸：RNA引物上DNA链的合成及延伸终止：复制叉在终止区相遇,复制结束,通过修补方式填补终止区;无论是原核生物还是真核生物,ＤＮＡ的复制主要是从固定的起始点以双向等速的复制方式进行的;复制叉以ＤＮＡ分子上某一特定顺序为起点,向两个方向等速前进;19.新合成多肽链的翻译后加工包括哪些主要内容答：1.氨基端和羧基端的修饰：在原核生物中几乎所有蛋白质都是从N-甲酰蛋氨酸开始,真核生物从蛋氨酸开始;甲酰基经酶水介而除去,蛋氨酸或者氨基端的一些氨基酸残基常由氨肽酶催化而水介除去;包括除去信号肽序列;因此,成熟的蛋白质分子N-端没有甲酰基,或没有蛋氨酸;同时,某些蛋白质分子氨基端要进行乙酰化在羧基端也要进行修饰;2.共价修饰：许多的蛋白质可以进行不同的类型化学基团的共价修饰,修饰后可以表现为激活状态,也可以表现为失活状态;主要有磷酸化,糖基化,羟基化,二硫键的形成和亚基的聚合等等1.转录可生成哪几种RNA分别说明它们是如何进行转录后修饰的2.答：转录后生成的RNA链还需经过一系列的变化才能变成成熟的rRNA、tRNA、mRNA,这称为转录后的修饰;真核生物转录后的修饰比较复杂,包括3类RNA的加工,并且各有特点;mRNA的转录后加工包括对其5’端和3’端的修饰以及对mRNA链进行剪接等过程;5’的修饰是在核内一些酶的催化下,先把pppG水解成pG,再与GTP聚合成GpppG,然后接受甲基,生成Gppp”G的帽子结构;该结构能够与翻译起始的一种蛋白质因子相结合,促使翻译的起始;3’—端的修饰是与转录终止同时进行的,在核酸外切酶的作用下切除3’端多余的核苷酸,然后加上由,100～200个ATP聚合而成的多聚APolA尾巴;该尾巴有利于增加mRNA作为翻译模板的活性,也有利于增强自身的稳定性;真核生物的基因是由外显子 exon；即编码氨基酸的核苷酸序列和内含子intron,即非编码氨基酸的核苷酸序列构成的断裂基因;因此转录出的hnRNA必须由特异的,RNA酶把非编码部分切除,再把编码部分连接起来,才能生成成熟的mRNA,作为蛋白质生物合成的模板;由真核生物RNA聚合酶直催化形成的tRNA初级产物,也要经过加工修饰,才能变成成熟的tRNA;该修饰过程也包括剪接,但最常见的是进行甲基化反应,脱氨基反应,还原反应及转位反应等;形成一些稀有碱基;另外,还要在3-末端加上共同的-CCA-OH的柄部结构,在翻译中结合氨基酸;rRNA的加工修饰,主要是把45S的rRNA剪接成18SrRNA、以及28S rRNA;但这种剪接不需要蛋白质酶类参与,而是靠核酶ribozyme催化;核酶是指由RNA发挥催化作用的酶,其结构与蛋白酶相似,呈槌头结构,也有底物部分和催化部分,对某些特定的化学反应起催化作用;核酶的发现扩展了酶的概念,表明酶这类生物催化剂不仅仅局限于蛋白质,这对生命科学的研究具有重大的意义;3.请比较脂肪酸的β氧化与脂肪酸的生物合成的主要不同点;答：1进行的部位不同,脂肪酸β-氧化在线粒体内进行,脂肪酸的合成在胞液中进行;2主要中间代谢物不同,脂肪酸β-氧化的主要中间产物是乙酰CoA,脂肪酸合成的主要中间产物是丙二酸单酚 CoA;3脂肪酰基的转运载体不同,脂肪酸β-氧化的脂肪酰基转运载体是CoA,脂肪酸合成的脂肪酰基转运载体是ACP ;4参与的辅酶不同,参与脂肪酸β-氧化的辅酶是FAD和NAD,参与脂肪酸合成的辅酶是NADPH;5脂肪酸β-氧化不需要co2,而脂肪酸的合成需要co2;6反应发生时ADP/ATP比值不同,脂肪酸β-氧化在 ADP/ATP 比值高时发生,而脂肪酸合成在ADP/ATP比值低时进行;7柠檬酸发挥的作用不同,柠檬酸对脂肪酸β-氧化没有激活作用,但能激活脂肪酸的生物合成;8脂酰CoA的作用不同,脂酰辅酶a对脂肪酸β-氧化没有抑制作用,但能抑制脂肪酸的生物合成;4.简述丙氨酸－葡萄糖循环及其生理意义;答：肌肉中的氨基酸将氨基转给丙酮酸生成丙氨酸,后者经血液循环转运至肝脏经过联合脱氨基作用再脱氨基,放出的氨用于合成尿素；生成的丙酮酸经糖异生转变为葡萄糖后再经血液循环转运至肌肉重新分解产生丙酮酸,丙酮酸再接受氨基生成丙氨酸;丙氨酸和葡萄糖反复地在肌肉和肝之间进行氨的转运,故将这一循环过程称为丙氨酸-葡萄糖循环;生理意义：是肌肉与肝之间氨的转运形式;使肌肉中的氨以无毒的丙氨酸形式运送至肝,同时肝也为肌肉提供了生成丙酮酸的葡萄糖;5.试述核苷酸在体内的重要生理功能;答：核苷酸具有多种生物学功用,表现在1作为核酸DNA和RNA合成的基本原料；2体内的主要能源物质,如ATP、GTP等；3参与代谢和生理性调节作用,如cAMP是细胞内第二信号分子,参与细胞内信息传递；4作为许多辅酶的组成部分,如腺苷酸是构成辅酶Ⅰ、辅酶Ⅱ、FAD.辅酶A等的重要部分；5活化中间代谢物的载体,如UDP-葡萄糖是合成糖原等的活性原料,GDP-二酰基甘油是合成磷脂的活性原料,PAPS是活性硫酸的形式,SAM是活性甲基的载体等;。
生物化学-学习指南 一.填空 1.当溶液中pH值小于蛋白质的pI时,该
生物化学-学习指南一．填空1．当溶液中pH值小于蛋白质的pI时，该蛋白质带电荷，在电场中向极移动。
2．胞质中催化丙酮酸生成乳酸的酶是。
3. 体内ATP生成的最主要的方式是。
4. 核酸对紫外线吸收的最大值在波长 nm。
5.胸腺嘧啶的代谢终产物是；胞嘧啶的代谢终产物是。
6.蛋白质合成过程中，催化氨基酸活化反应的酶是。
7．碱性氨基酸包括有、、。
8．结合酶由和构成。
9. VLDL的功能是转运。
10．真核细胞hnRNA的生成由催化。
11．终止密码的特点有_______、_______、________。
12. RNA合成时与DNA模板中碱基A对应的是_________,与G对应的是。
13．血浆脂蛋白2种分类方法分别是和。
14．氨基酸分解代谢的最主要反应是作用。
15．竞争性抑制时km 、Vmax 。
16．是酶的无活性前体，它没有活性是因为没有形成或暴露酶的。
17．当溶液中pH值大于蛋白质的pI时，该蛋白质带电荷，在电场中向极移动。
18．糖原合成的限速酶是，脂肪动员的限速酶是。
19．糖无氧分解的终产物是。
20．酶的化学修饰调节最常见的方式是。
21．三羧酸循环的亚细胞部位是在。
22．氨的主要来源是，氨的主要去路是合成。
23．翻译的产物是，其合成的模板是。
24.核酸杂交的原理是它可发生和。
25．检测ALT可协助诊断，检测AST可协助诊断。
26．组成蛋白质的基本单位是，主要有种。
27．竞争性抑制剂与结构相似，可与其竞争酶的。
28．是糖、脂和蛋白质最后分解的共同代谢途径，释出的能量主要以形式储存。
29．催化丙酮酸羧化支路的两个酶是、。
30．糖酵解的亚细胞部位在。
31．1分子葡萄糖分解为CO2和H2O净生成ATP分子数为。
32．氰化物阻断呼吸链的机理是其与结合。
33．脂肪酸β－氧化的亚细胞部位是。
34．糖的主要去路是，糖异生的主要脏器是在。
35．DNA转录产物延长方向是。
36．分子在蛋白质合成过程中主要的功能是作为各种氨基酸的载体。
《生物化学原理》张洪渊主编 课后习题及答案(三)
w w w .k h d 课第十一章 DNA 的生物合成一、课后习题1.怎样确定DNA 复制的主要方式是双向复制，以及一些生物的DNA 采取单向复制？2.假定在D 环式的复制叉上，螺旋的解开会引起未复制部分的缠绕，当缠绕继续到不可能再进一步缠绕时，主链的增长便停止，然后随从链的延长才会被引发。
那么，在什么条件下更可能观察到大小与前体片段相似的D 环？3.试述滚动机制有哪些主要特征？怎样鉴别环状与线状DNA？4.已知大肠杆菌DNA 的长度为1100μm，其复制叉式在一个世代大约40min 内通过一个复制叉完成的，试求其复制体的链增长速度、正在复制的DNA 分子的转速。
参考答案：1.原核生物的染色体和质粒，真核生物的细胞器DNA 都是环状双链分子。
实验表明，它们都在一个固定的起点开始复制，复制方向大多是双向的，即形成两个复制叉或生长点，分别向两侧进行复制；也有一个是单向的，只形成一个复制叉或生长点。
2. 叶绿体和线粒体DNA（除纤毛虫的线粒体线性DNA 分子外）的复制方式。
双链环在固定点解开进行复制，但两条链的合成是高度不对称的，一条链先复制，另一条链保持单链而被取代，在电镜下看到呈（取代环，D 环）形状。
待一条链复制到一定程度，露出另一链的复制起点并开始复制。
两条多核苷酸链的起点不在同一点上，当两条链的起点分开一定距离时就产生D 环（如线粒体DNA 的复制）。
双链环两条链的起点不在同一位置，但同时在起点处解开双链，进行D 环复制，称为2D 环复制（如叶绿体DNA 的复制）。
这时，更可能观察到大小与前体片段相似的D 环。
3. Walter Gilbert（1968）提出滚环模型来解释φX174DNA 的复制：首先由特异核酸内切酶在环状双链DNA（称为RF 型、增值型，即单链DNA 已复制一次成双链）的一条链上切开切口产生5′—P 末端和3′—OH 末端。
5′—P 末端与细胞质膜连接，被固定在膜上，然后环形的双链通过滚动而进行复制。
生物化学学习指导
一、名词解释１．Ｎ端与Ｃ端: ２．蛋白质一级结构: ３．氨基酸残基: ４．Ｓn=3.613: ５．肽单位、肽平面: ６．寡聚蛋白:７．蛋白质变性:8．超二级结构与结构域:二、是非题判断下列各句话意思的正确与否，正确的在题后括号内画“√”，错误的画“×”，如果是错误的，请说明其理由1.组成蛋白质的20种氨基酸，它们至少含有一个不对称碳原子。
2.氨基酸立体异构体虽有Ｄ-型和Ｌ-型之分，但在蛋白质中所发现的氨基酸均为Ｌ－型。
3.等摩尔的Ｄ-Ａla和Ｌ-Ａla混合液，不能引起偏振光平面的偏转。
4.从蛋白质酸水解液中可以得到所有20种天然氨基酸。
5.氨基酸在水溶液或固体状态是以两性离子形式存在的。
6.内部氢键的形成的是驱使蛋白质折叠的主要力量。
7.在外界环境一定的条件下，蛋白质的空间结构主要是由它的一级结构所决定的。
8.原来溶于水的蛋白质，经加热后从水中析出主要是因为蛋白质的空间结构破坏，原来位于分子内部的疏水氨基酸外露的结果。
9.天然蛋白质中多肽链的螺旋构象都是右旋的。
10.SDS－聚丙烯酰胺电泳测定白质分子量的方法是根椐蛋白质所带电荷的不同。
11.某一蛋白质样品，当其酸性氨基酸数目等于碱性氨基酸数目时，此蛋白质样品的等电点pH是７。
12.在胶原蛋白质中，由于组分中主要是甘氨酸、脯氨酸和羟脯氨酸，它们在参于肽键形成后，不再含有可供形成氢键的氢原子，故不能形成α－螺旋，胶原蛋白中多肽链构象主要是β－折叠结构。
13.血红蛋白和细胞色素Ｃ都是含铁卟啉的色蛋白，两者的功能虽然不同，但它们的作用机制相同，都是通过铁离子化合价的变化来实现的。
14．用层析技术分离氨基酸是根据各种氨基酸的极性不同。
15．用凝胶电泳技术分离蛋白质是根据各种蛋白质的分子大小和电荷不同。
16．从细胞内提取出某种物质，用羧肽酶A不能使其水解，与茚三酮反应呈阴性，因此可以肯定地判断它是非肽物质。
17．蛋白质构象的变化伴随自由能的变化，最稳定的构象自由能最低。
生物化学实验指导
生物化学实验指导李峰李荣张建平编湖南文理学院生命科学系前言生物化学实验是以生物为研究对象，利用生物化学的原理和方法，阐明生物体内化学分子的结构与化学反应的机理，从分子水平探讨生命现象的本质，并为人类服务的一门实验科学，是生物科学、农学、动物科学专业、生命学科相关专业本科生及与湖南省中学生物学教师及科技人员重要的专业基础技术。
它是在植物生物学、动物生物学、微生物学等普通生物学实验有比较全面了解及一定基础训练基础上开设的实验技术。
旨在培养具有现代生物学知识，掌握现代生物化学技术的创新人才培养具有现代生物学知识前沿、掌握现代生物学基本技术，具有综合设计、创新实验能力的创新人才。
《生物化学实验指导》是熊大胜教授主持的“生物学基础实验‘531’课程体系研究”的实验教材之一。
生物化学实验模块按生物化学及生化大实验的实验功能构建，承担《生物化学实验》及《生物化学与分子生物学大实验》。
生物化学实验模块以提高学生应用生物化学原理和方法，解决生产实践中的实际问题为目标，改革以往生物化学实验教学大纲，从加强基础的观点出发，侧重于学生基本技能，综合能力，创新能力三个层次的培养，同时也注意增加一些新近发展起来的重要的生物化学研究方法和技术。
生物化学实验模块共包括15个实验。
实验注重加强学生基本技能的培养，使学生掌握蛋白质和核酸的基本结构及组分鉴定方法；掌握蛋白质性质的综合测定，了解蛋白质沉淀和变性等重要概念；掌握最常用的蛋白质制备、分离和纯化过程和方法；通过淀粉酶的提取，活性测定以及淀粉酶动力学分析实验，加深对酶的特性认识；进一步熟悉掌握微量滴定法的基本操作技术；注重培养学生综合能力，通过氨基酸的分离，学习纸层析法的基本原理及操作，掌握氨基酸含量的测定方法；掌握核酸的提取过程以及核酸含量和纯度的测定技术；熟悉掌握电泳技术的基本原理和操作技术；血糖的定量测定和脂肪酸的β－氧化实验，掌握有关物质代谢中生理生化指标的测定方法；在生化大实验中开设了《总RNA的提取及鉴定》和《半定量RT-PCR检测基因的表达差异》两个综合性大实验；本实验模块还开设了为期6周的选修开放项目《基因的克隆、鉴定及生物信息学分析》（创新实验），使学生更好的将基础知识与专业技术衔接。
生化与分子生物学实验指导
⽣化与分⼦⽣物学实验指导⽣化与分⼦⽣物学实验指导-（)————————————————————————————————作者:————————————————————————————————⽇期:实验⼀氨基酸纸层析法⼀、实验⽬的通过氨基酸的分离，了解层析法的基本原理和操作⽅法。
⼆、实验原理纸层析法(ｐａp ｅｒ c ｈro ｍａt ｏgr ａphy ）是⽣物化学上分离、鉴定氨基酸混合物的常⽤技术,可⽤于蛋⽩质的氨基酸成分的定性鉴定和定量测定。
纸层析法⼜称纸⾊谱法,是⽤滤纸为⽀持物,所⽤展层溶剂⼤多由⽔和有机溶剂组成,滤纸纤维与⽔的亲和⼒强,与有机溶剂的亲和⼒弱,因此在展层时，纸纤维上吸附的⽔分是固定相,有机溶剂是流动相。
溶剂由下向上移动的,称上⾏法；由上向下移动的,称下⾏法。
将样品点在滤纸上(此点称为原点),进⾏展层，样品中的各种氨基酸在两相溶剂中不断进⾏分配。
由于它们的分配系数不同,不同氨基酸随流动相移动的速率就不同,于是就将这些氨基酸分离开来，形成距原点距离不等的层析点。
溶质在滤纸上的移动速率⽤Rf 值表⽰：在⼀定条件下某种物质的Ｒf 值是常数。
Ｒf 值的⼤⼩与物质的结构、性质、溶剂系统、温度、湿度、层析滤纸的型号和质量等因素有关。
只要条件(如温度、展层溶剂的组成）不变,Rf 值是常数,故可根据Ｒf 值作定性判断。
样品中如有多种氨基酸，其中某些氨基酸的R ｆ值相同或相近,此时如只⽤⼀种溶剂展层,就不能将它们分开。
为此，当⽤⼀种溶剂展层后，将滤纸转动90度,再⽤另⼀溶剂展层,从⽽达到分离⽬的,这种⽅法称为双向纸层析法。
氨基酸⽆⾊,可利⽤茚三酮显⾊反应,将氨基酸层析点显⾊作定性、定量⽤。
所有氨基酸及具有游离α-氨基的肽与茚三酮反应都产⽣蓝紫⾊物质,只有脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产⽣(亮)黄⾊物质。
三、药品器材1器材层析滤纸（新华1号)、喷雾器、剪⼑、层析缸、⽑细管、电吹风、刻度尺、铅笔。
R ｆ=原点到层析斑点中⼼的距离原点到溶剂前沿的距离2试剂(1)氨基酸溶液:赖氨酸、脯氨酸、缬氨酸溶液以及他们的混合溶液(各组分浓度0．5％)。
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糖类代谢要点解答1．糖代谢各途径发生的场所、限速酶或关键酶、能量转换和生理意义2．三羧酸循环的生物学意义有哪些？三羧酸循环是糖有氧分解的重要途径，有着重要的生物学意义。
(1)三羧酸循环是有机体获得生命活动所需能量的最重要途径。
在糖的有氧分解中，每个葡萄糖分子通过糖酵解途径只产生6个或8个ATP，而通过三羧酸循环就可产生24个ATP，远远超过糖酵解阶段或葡萄糖无氧降解(生成2个ATP)所产生的ATP的数目。
此外，脂肪、氨基酸等其他有机物作为呼吸底物彻底氧化时所产生的能量也主要是通过三羧酸循环。
因此，三羧酸循环是生物体能量的主要来源。
(2)三羧酸循环是物质代谢的枢纽。
三羧酸循环具有双重作用，一方面，三羧酸循环是糖、脂肪和氨基酸等有机物彻底氧化的共同途径；另一方面，许多合成代谢都利用三羧酸循环的中间产物作为生物合成的前体，循环中的草酰乙酸、α－酮戊二酸、柠檬酸、琥珀酰CoA和延胡索酸等又是生物体合成糖(糖异生)、氨基酸、脂肪酸和卟啉等的原料。
因此，三羧酸循环可以看成新陈代谢的中心环节，起到物质代谢枢纽的作用。
3．在葡萄糖的有氧氧化过程中，哪些步骤进行脱氢反应?哪些步骤进行脱羧反应?1分子葡萄糖有氧氧化净产生多少分子ATP?葡萄糖的有氧氧化过程包括糖酵解的反应、丙酮酸氧化脱羧和乙酰CoA进入三羧酸循环的反应，脱氢、脱羧及ATP的变化总结如下：4．磷酸戊糖途径有何特点?该途径有何生理意义?磷酸戊糖途径的特点是：第一，该途径不经过EMP-TCA反应，直接在六碳糖的基础上脱羧，脱氢；第二，该途径以NADP＋为氢的受体，产生还原力NADPH+H＋。
该途径的生理意义：(1)提供生物体重要的还原剂NADPH。
无论动物还是植物，NADPH不能直接被呼吸链氧化。
NADPH的重要功能是在很多合成反应中作为还原剂。
例如，在脂肪酸和胆固醇合成中，在二氢叶酸还原为四氢叶酸等反应中，都是NADPH作为还原剂。
NADPH还可使还原型谷胱甘肽再生．从而保证细胞的抗氧化能力。
(2)提供其他合成中间产物。
核糖-5-磷酸可进一步转变为核糖-1-磷酸和脱氧核糖-1-磷酸，这些都是核酸合成所必需的。
甘油醛-3-磷酸可转变为磷酸烯醇式丙酮酸，后者可与赤藓糖-4-磷酸合成莽草酸，进而转化为酚类、芳香族氨基酸乃至木质素。
(3)与光合作用关系密切，并为各种单糖的互变提供条件。
磷酸戊糖途径产生的一些三碳糖、四碳糖、五碳糖、七碳糖等都是光合作用的中间产物，有的反应是光合作用中卡尔文循环中某些反应的逆反应，而且它与卡尔文循环还有一些相同的酶。
因此磷酸戊糖途径可与光合作用联系起来，并实现某些单糖间的互变。
5．概述葡萄糖代谢各种途径之间的相互关系。
葡萄糖在体内的主要代谢途径有：糖酵解作用；糖的有氧氧化(EMP-TCA)；磷酸戊糖途径和葡萄糖的异生作用等。
其中有消耗能量(ATP)的合成代谢，也有释放能量(产生ATP)的分解代谢。
这些代谢途径的生理作用不同，但又通过共同的代谢中间产物互相联系和互相影响，构成一个整体。
糖代谢途径的第一个交汇点是葡萄糖-6-磷酸，由非糖物质生成糖时(糖异生作用)都要经过它再转变为葡萄糖。
在糖的分解代谢中，葡萄糖也是先转变为葡萄糖-6-磷酸．然后或经酵解途径及有氧氧化途径进行分解，或经磷酸戊糖途径进行分解。
第二个交汇点是甘油醛-3-磷酸，它是糖酵解或有氧氧化的中间产物，也是磷酸戊糖途径的中间产物。
第三个交汇点是丙酮酸，当葡萄糖分解至丙酮酸时，在无氧的情况下，它接受由甘油醛-3-磷酸脱下的2H还原为乳酸(无氧酵解)。
在有氧的情况下，甘油醛-3-磷酸脱下的氢经穿梭作用进入线粒体与氧结合成水，而丙酮酸则进一步氧化分解，最后通过三羧酸循环彻底氧化为CO2和H20(有氧氧化)。
另外，丙酮酸还可经草酰乙酸生成糖(糖异生作用)，它是许多非糖物质生成糖时的必经途径。
此外，通过磷酸戊糖途径使戊糖与已糖的代谢联系起来，而各种己糖与葡萄糖的互变，又沟通了各种已糖的代谢。
6．为什么三羧酸循环是糖、脂肪和蛋白质三大代谢物质的共同通路?三羧酸循环是乙酰CoA最终氧化生成CO2和H20的途径。
(1)糖代谢产生的碳骨架最终进入三羧酸循环氧化。
(2)脂肪分解产生的甘油可通过糖有氧氧化进入三羧酸循环氧化，脂肪酸经β-氧化产生乙酰CoA可进入三羧酸循环氧化。
(3)蛋白质分解产生的氨基酸经脱氨的碳骨架可进入三羧酸循环，同时，三羧酸循环的中间产物可作为氨基酸的碳骨架来源。
所以，三羧酸循环是三大物质代谢的共同通路。
7．糖异生作用是如何绕过糖分解代谢中的三个不可逆反应过程的?糖异生作用基本上可以看成是糖分解代谢的逆转。
但是，在糖氧化分解途径中有三步反应是不可逆的，即由己糖激酶、磷酸果糖激酶，丙酮酸激酶催化的反应是不可逆的。
然而这三步反应仍可以通过不同酶催化“逆转”。
但反应过程并非原反应过程的逆向进行。
下面以反应式来表示这种“逆转”，实线为糖分解过程，虚线为糖异生过程。
从上面反应看出，丙酮酸绕过不可逆的丙酮酸激酶经丙酮酸羧化酶催化形成草酰乙酸，再经PEP羧激酶生成PEP（磷酸烯醇式丙酮酸），从而实现糖酵解最后一个不可逆酶的绕过。
第二步是1，6-二磷酸果糖酯酶催化，1，6-二磷酸果糖水解为果糖-6-磷酸。
糖酵解的第一个不可逆反应由6-磷酸葡萄糖酶催化G-6-P的“逆转”，这样最终实现了糖的异生。
练习题一、选择题1．在葡萄糖的有氧分解中，在下列哪些中间产物上既脱氢又脱羧( )a．丙酮酸b．柠檬酸c．琥珀酸d．草酰乙酸c．苹果酸2．关于三羧酸循环，下列的叙述哪条不正确( )a．产生NADH＋H＋和FADH2b．有GTP生成c．氧化乙酰CoA d．提供草酰乙酸净合成3．下列何种酶是糖酵解过程中的限速酶( )a．醛缩酶b．烯醇化酶c．乳酸脱氢酶d．磷酸果糖激酶e．3-磷酸甘油醛脱氢酶4．下列哪种途径在线粒体中进行( )a．糖的无氧酵解b．糖原的分解 c. 糖原的合成d．糖的磷酸戊糖途径e．三羧酸循环5．磷酸戊糖途径是在细胞的哪个部位进行的( )a．细胞核b．线粒体c．细胞质d．微粒体e．内质网6．合成淀粉时，葡萄糖的供体是( )a．G-1-P b．G-6-P c．ADPGd．CDPG e．GDPG7. 糖酵解中利用甘油醛-3-磷酸的氧化所产生的能量而合成ATP时，其中间物为( )a．甘油酸—3—磷酸b．甘油酸—1—磷酸c．1，3-二磷酸甘油酸d．磷酸二羟丙酮 e. ADP8．葡萄糖异生作用能使非糖前体在细胞中合成“新”的葡萄糖，下列化合物中哪一种除外( )a．生糖氨基酸b．乳酸c．琥珀酸d．乙酰CoA e．PEP9．下列三羧酸循环几步反应中，反应脱氢进而发生氧化磷酸化的是( ) a．草酰乙酸+乙酰CoA→柠檬酸b．α-酮戊二酸→琥珀酰CoAc．草酰琥珀酸→α-酮戊二酸d．琥珀酰CoA→琥珀酸e. 3—磷酸甘油醛→1，3—二磷酸甘油酸10．在糖的有氧分解过程中，氧化脱羧反应的是( )a．3-磷酸甘油酸→1,3－二磷酸甘油酸b．苹果酸→草酰乙酸c．α-酮戊二酸→琥珀酰CoAd．琥珀酸→延胡索酸e．琥珀酰CoA→琥珀酸11．肌肉、神经组织中，在有氧条件下每lmol葡萄糖彻底氧化，能净产生ATP的摩尔数为( )a．39 b．38 c．37 d．35 e．3612．1mol葡萄糖经糖的有氧氧化过程可生成的乙酰CoA( )a．1mol b．2mol c．3mol d. 4mol e．5mol13．一分子葡萄糖经糖酵解途径产生二分子丙酮酸，同时净产生( )a．4ATP+2NADH+2H+b．2ATP+NADH+H+c．2ATPd．2ATP+2(NADH+H+) e．3ATP14．三羧酸循环被认为是一个需氧代谢途径，是因为( )a．循环中的某些反应是以氧为底物b．CO2是该循环的一个产物c．产生了H2O d．还原型的辅因子需通过电子传递链被氧化e. 以上都不对15．氨基酸和单糖都有D和L不同构型，组成大多数多肽和蛋白质的氨基酸以及组成多糖的大多数单糖其构型分别是( )a．D型和D型b．L型和D型c．D型和L型d．L型和L型16．以NADP+作辅助因子的酶是( )a．3－磷酸甘油醛脱氢酶b．果糖二磷酸酶c．6－磷酸葡萄糖酸脱氢酶d．醛缩酶e．转酮醇酶17．下列哪个酶既在糖酵解又在葡萄糖异生中起作用( )a．3-磷酸甘油醛脱氢酶b．磷酸果糖激酶c．己糖激酶d．果糖二磷酸酶e．丙酮酸羧化酶18．葡萄糖有氧分解中，从哪种中间产物上第一次脱羧( )a．异柠檬酸b．琥珀酸c．丙酮酸d．α－酮戊二酸e．草酰乙酸19．在反应式NTP+葡萄糖→葡萄糖-6-磷酸+NDP中，NTP代表何物( ) a．ATP b．CTP c．GTP d．TTP e．UTP20. 在反应式NTP+草酰乙酸→磷酸烯醇式丙酮酸+NDP+CO2中，NTP代表何物?( ) a．ATP b．CTP c．GTP d．TTP e．UTP21．丙酮酸脱氢酶复合休中最终接受底物脱下的2H的辅助因子是( ) a．FAD b．硫辛酸c．辅酶A d．NAD+e．TPP22．丙酮酸激酶是何种途径的关键酶( )a．糖异生b．三羧酸循环 c. 磷酸戊糖途径d．糖酵解e．糖原合成分解23．下列中间产物中，哪一个不是磷酸戊糖途径的中间产物( )a．6-磷酸葡萄糖酸b．赤藓糖-4-磷酸c．景天庚酮糖-7-磷酸d．葡萄糖e．核糖-5-磷酸二、是非题1．糖酵解只能在无氧的条件下进行。
2．HMP途径是以分解磷酸葡萄糖为底物产生ATP和还原力。
3．由于酶催化可逆的生化反应，所以淀粉酶既能催化淀粉的水解，也能有效地催化淀粉的合成。
4．三羧酸循环是糖、脂肪和氨基酸氧化生能的最终共同通路。
5．α-淀粉酶、β-淀粉酶不能水解淀粉中α-1,4-糖苷键，而作用于α-1,6-糖苷键。
6．糖酵解途径的终产物是乳酸，乳酸可以在肝脏中经糖原异生作用转变成糖原。
7．磷酸戊糖途径的主要特点是葡萄糖直接脱氢和脱羧，不必经过糖酵解途径和三羧酸循环。
8．哺乳动物无氧条件下不能存活，固为葡萄糖酵解不能合成ATP。
9．乳酸是糖酵解途径和糖代谢有氧途径之间的连接性物质。
10．就葡萄糖降解为丙酮酸所净得的ATP数目来说．淀粉的水解比淀粉的磷酸解更有效。
11．剧烈运动后，肌肉酸痛是由于丙酮酸被氧化成乳酸的结果。
12．磷酸丙糖异构酶催化的反应不是糖酵解途径的限速反应。
13．三羧酸循环能产生NADH和FADH2，但不产生高能磷酸化合物。
三、名词解释1．葡萄糖异生2．糖酵解途径3．激酶4．三羧酸循环5．限速反应 6. 回补反应7．磷酸戊糖途径四、计算题1．计算1mol乳酸通过TCA循环完全氧化成CO2和H20生成ATP的摩尔数(写出计算过程)。
2．将足量的酵母提取液和200mM葡萄糖，400mM ADP，20mM Pi及少量的ATP和NAD＋一起培养。