小鼠精子畸形实验

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用小鼠精子畸形试验评价生物羊膜遗传毒性的研究

用小鼠精子畸形试验评价生物羊膜遗传毒性的研究

批号 000 ,规 格型 4 81 羊 膜 是人类 两 层胎膜 的 f , I常 羊膜薄 而透 明 . 状 胬 内、角膜 溃疡穿 孔的修 复 ( 向层 I 无 【管 。 在光镜下可 分 为 5晨 上 皮层、基底膜 、 密层 号 Z 5× ) 血 致 K一 5 。 剂 :09 氯化 钠注射 液 (C) 0 甲醇 ,2 伊 2试 . % S ,1% % 纤维 母细 胞层和海绵 层 。羊膜主要 利用的 是基底膜 。基 1 底幞是 无细 胞结构 的胶原组 织层 .羊膜移 植是将羊 膜植 红染色液 ,环磷酰 胺 ( P 。 c ) 片根 据创 面大 小的 要求 ,平 贴 于眼表 ,再 行缝合 ,受体 1 . 器 :Olmp s双 日屁微镜 (o e-1) 3仪 y u c vr 8,手提 式压 0 周遍 的健 康结膜 组织 的新 生上皮 细胞 向羊膜移 行 ,两 3 力蒸汽 消毒 器,生 化培养箱 L 一5B,分析 天平 ,镊 RH 10 周后 ,新生 上皮长 好 ,羊幞 自动 脱落。生 物羊膜 是取 用 子 剪 7 。 ] 健 康剖富 产产女I 胎盘组 织 ,产 前 l清 学检查按 照国家 I = 的 f Ⅱ . 4动物 :雄 性 昆 明种 小 鼠 ( - 吉,体 重 2—5 ,山 68』】 53g 相关标 准进行 .排 除乙肝 、丙肝 、梅毒 及艾滋 痫 ,从 而 东 鲁抗医 药集团 有限公 司 ) 。 确 保原料 的腱康安 垒性 。生物 羊膜属植 入 3 医疗器械 1 类 . 5动物管理 :动物 饲养 条件符 合 “ 实验 动物管 理条例 ” 应 从生物 、物理 .化学等 方面 作必 要的质量控 { ,以 保 要求 。 I j l J {产品 的安全性 因此 对羊膜 产品的 质量要 求是 :无致 l E 敏 、 刺激、无细 胞毒性 无遗传 毒性 . 无 具合 适的 P 值 H 厚薄均 匀,具有 ・ 定的 韧性 。本研究就 是从 生物学 方面 评价 其是 舀J 遗传毒性 。具 体操 怍如下 : 生

小鼠精子畸形实验报告

小鼠精子畸形实验报告

小鼠精子畸形实验报告
本实验旨在研究小鼠精子畸形对后代的影响,以期为人类生育健康提供参考依据。

实验选取了30只健康小鼠作为实验对象,分为实验组和对照组,实验组小鼠
在受孕前接受了精子畸形诱导剂处理,而对照组小鼠则未受任何处理。

经过一系列观察和分析,我们得出了以下实验结果。

首先,实验组小鼠在受孕后产下的幼崽数量明显减少,平均每只小鼠产仔数量
为4只,而对照组小鼠的平均产仔数量为7只。

这表明精子畸形对小鼠生育能力产生了明显的负面影响。

其次,在实验组幼崽中,出现了较高比例的畸形幼崽,包括畸形四肢、畸形头部等。

而对照组幼崽中几乎没有出现畸形情况。

这进一步证实了精子畸形对后代健康的不良影响。

此外,我们还对实验组和对照组幼崽的生长发育情况进行了观察。

结果显示,
实验组幼崽的生长发育明显滞后于对照组幼崽,体重增长速度较慢,行动能力较弱。

这说明精子畸形不仅影响了幼崽的出生情况,还对其后续的生长发育产生了长期影响。

综上所述,本实验结果表明,小鼠精子畸形对后代的影响是显著的,不仅影响
了生育能力和出生情况,还对幼崽的生长发育产生了长期的不良影响。

这一结论对于人类生育健康具有一定的借鉴意义,也提醒我们在日常生活中要注意维护精子健康,减少畸形对后代的影响。

在今后的研究中,我们将进一步探究精子畸形的形成机制,寻找可能的干预手段,以期能够更好地保障后代的健康。

希望本实验结果能够为相关领域的研究提供一定的参考价值,也为人类生育健康贡献我们的一份力量。

实验四 小鼠精子畸形试验

实验四   小鼠精子畸形试验

注意事项
· 判断双头 、双尾畸形时 ,要注意与两条精 子的部分重叠相鉴别 ,判断无定形时要与 人为剪碎及折叠相鉴别。
· 使用的小鼠要健康 , 以免感染 、体温增高 等可能导致精子畸形率增高 ,造成假阳性 结果。
结果分析与评价
· 计算精子畸形发生率 , 与阴性对照组 比较 , 畸形率至少为阴性对照组的2倍 或2倍以上; 或经统计有显著性差异 (P<0.01) ,并有剂量反应关系。
· 待玻片晾干后用甲醇固定5分钟 ,干燥。
镜检
· 先用低倍镜粗检 , 找到背景清晰 、精子重叠 较少的部位 , 用高倍镜检查精子形态 。每只 小鼠检查精子1000条。
· 精子畸形: 主要在头部 , 其次为尾部 。畸形 类型可分为无钩 、香蕉形 、双头 、胖头 、无 定形 、尾折叠 、双尾等。
· 分别记录异常类型和数量 , 以便统计精子畸 形率及精子畸形类型的构成比。
实验四 小鼠精子畸形试验
目的
精子畸形试验是检测受试化学毒物能 否破坏哺乳动物精子正常形态的实验方 法 。通过该实验 , 学习和掌握小鼠精子 畸形试验的原理和步骤。

· 小鼠精子畸形受基因控制 , 具有高度遗传性, 许多常染色体及X 、Y性染色体基因直接或间 接地决定精子形态。
· 精子的畸形主要是指形态的异常 , 是决定精 子形成的基因发生突变的结果 。因此形态的 改变提示有关基因及其蛋白质产物的改变。
制片
· 在第1次染毒后第4~5周 ,小鼠脱颈椎 处死 ,剪开腹腔 ,分离并摘取双侧附 睾 ,将附睾放入有约1mL生理盐水的 小平皿中。
制片
· 用眼科剪将附睾纵向剪1~2刀 , 用吸管将悬 浮液轻轻吹打5-6次 ,静置3-5min;
· 用4层擦镜纸过滤除组织碎片 , 用胶头滴管 吸取精子悬液 , 滴一滴于清洁载玻片上, 均匀推片;

小鼠畸形实验实验报告

小鼠畸形实验实验报告

一、实验背景近年来,随着环境污染、食品安全等因素的影响,动物畸形现象日益严重。

为研究环境因素对动物畸形的影响,本实验以小鼠为实验动物,通过观察小鼠的畸形情况,探讨环境因素对动物畸形的影响。

二、实验目的1. 了解小鼠畸形的特征及其影响因素;2. 分析环境因素对小鼠畸形的影响;3. 为预防和控制动物畸形提供理论依据。

三、实验材料与方法1. 实验动物:昆明小鼠,雌雄各50只,体重20-25g。

2. 实验分组:将小鼠随机分为5组,每组10只,分别为对照组、A组、B组、C组和D组。

3. 实验处理:对照组不做任何处理;A组给予高浓度农药;B组给予高浓度重金属;C组给予高浓度有机溶剂;D组给予高浓度染料。

4. 实验观察指标:观察小鼠的畸形情况,包括外观畸形、内脏畸形等。

5. 数据分析:采用SPSS 20.0软件进行统计分析,比较各组小鼠畸形率的差异。

四、实验结果1. 小鼠畸形特征实验结果显示,各组小鼠均存在不同程度的畸形现象。

对照组小鼠畸形率为10%,A组为20%,B组为25%,C组为30%,D组为35%。

其中,外观畸形以耳部、眼部、尾部、四肢等部位畸形为主;内脏畸形以心脏、肝脏、肾脏等器官畸形为主。

2. 环境因素对小鼠畸形的影响经统计分析,与对照组相比,A组、B组、C组和D组小鼠畸形率均显著升高(P<0.05)。

表明农药、重金属、有机溶剂和染料等环境因素对小鼠畸形具有显著影响。

五、实验讨论1. 本实验结果表明,农药、重金属、有机溶剂和染料等环境因素对小鼠畸形具有显著影响。

这与相关研究结果一致,表明环境污染是导致动物畸形的重要原因。

2. 实验中,各组小鼠畸形率随环境因素浓度的增加而升高,说明环境因素对小鼠畸形的影响程度与其浓度密切相关。

3. 本实验中,小鼠畸形以外观畸形和内脏畸形为主。

这与相关研究结果一致,表明环境污染对动物的影响不仅表现在外观上,还可能对动物的器官功能造成损害。

六、结论1. 环境污染是导致动物畸形的重要原因;2. 农药、重金属、有机溶剂和染料等环境因素对小鼠畸形具有显著影响;3. 为预防和控制动物畸形,应加强环境保护,降低环境污染。

小鼠精子畸形实验报告

小鼠精子畸形实验报告

一、实验目的本实验旨在探究不同因素对小鼠精子形态的影响,分析精子畸形率的变化,评估其对小鼠生殖健康的影响。

二、实验材料1. 实验动物:昆明种雄性小鼠,体重25~30g。

2. 实验药品:白头翁水提取物、硫酸镉、丝裂霉素C。

3. 实验器材:显微镜、染色液、培养皿、注射器、剪刀、眼科剪等。

三、实验方法1. 将实验动物随机分为五组,每组10只:阴性对照组、阳性对照组、硫酸镉诱变实验组、白头翁诱变实验组、白头翁+硫酸镉复合诱变实验组。

2. 阴性对照组:正常饲养,不予任何处理。

3. 阳性对照组:腹腔注射丝裂霉素C(1.0mg/kg)一次,模拟化学物质对精子的影响。

4. 硫酸镉诱变实验组:腹腔注射硫酸镉(44、22和11mg/kg,相当于1/2、1/4和1/8 LD50)一次,模拟重金属对精子的影响。

5. 白头翁诱变实验组:灌胃白头翁水提取物(1.0、2.0、4.0和8.0g/kg,相当于人5、10、20和40临床剂量)一次,模拟中药对精子的影响。

6. 白头翁+硫酸镉复合诱变实验组:同时给予硫酸镉和白头翁水提取物处理。

7. 实验后35天,处死动物,取出两侧副睾,放入盛有2mL生理盐水的平皿中。

8. 用眼科剪将副睾纵向剪1~2刀,静止3~5min,轻轻摇动。

9. 用四层擦镜纸过滤,吸滤液涂片。

10. 空气干燥后,用甲醇固定5min以上干燥。

11. 用1%~2%伊红染色1min,用水冲洗。

12. 镜检精子形态,记录精子畸形率。

四、实验结果1. 阴性对照组:精子畸形率为5%。

2. 阳性对照组:精子畸形率为30%。

3. 硫酸镉诱变实验组:精子畸形率为20%。

4. 白头翁诱变实验组:精子畸形率为10%。

5. 白头翁+硫酸镉复合诱变实验组:精子畸形率为35%。

五、讨论1. 实验结果表明,硫酸镉和丝裂霉素C对小鼠精子形态有显著的畸形作用,导致精子畸形率升高。

2. 白头翁水提取物对硫酸镉诱变有明显的抑制作用,降低精子畸形率。

厦门大学-实验六.小鼠精子畸形试验(讲义)

厦门大学-实验六.小鼠精子畸形试验(讲义)
固定:涂片干燥后,放入甲醇中固定10 min。取出晾干。 染色:将涂片于1%伊红染液中染色1 h,然后用蒸馏水轻
轻冲洗,晾干。
标本制备
颈椎脱臼处死小鼠
取双侧附睾, 纵向剪开被膜
+ NS 1ml,静置5min 轻摇,剔除大的组织, 收集悬液于1.5ml EP 管,加300 µl NS清洗
1000 rpm离心5 min 弃上清, 余0.15 ml液体
将受试物各剂量组精子畸形发生率分别与阴性对照组进行 比较。 阳性的判断标准是畸形发生率至少为阴性对照组 的倍量或经统计学处理有显著性差异,并存在剂量-反应 关系者。
一般正常小鼠的精子畸形率为0.8%~3.4%
结果分析
分别计算各剂量组的精子畸形发生率。各剂量组的精子畸 形率与阴性对照组之间的差异分析采用秩和检验。
精子畸形发生率和畸形类型分析
试验报告
(1)受试物名称、理化性状、配制方法、所用溶剂; (2)动物种属和品系、体重、数量、来源(注明合格证号
和动物级别); (3)实验动物饲养环境,包括饲料来源、室温、相对湿度
、实验动物室合格证号; (4)剂量分组,染毒途径和方式; (5)试验方法:简述操作步骤,所用统计学方法; (6)结果:以列表方式报告受试物对动物精子畸形发生率
有条件时,可于给受试物后第1、4和10周处死动物,检查 精子形态 (各种致突变物作用于精子的不同发育阶段,可在接触某种 致突变物后不同时间出现精子畸形)
动物染毒情况记录
操作步骤
标本制备
制片:用颈椎脱臼法处死小鼠,剖开腹腔,暴露睾丸,分 离两侧附睾,放入盛有1 mL 生理盐水(37℃预热)的平皿中 。用眼科剪剖开附睾组织,室温下静置5 min ,轻轻摇动 ,用镊子将大的组织块挑出;收集悬液于1.5 mL 离心管 中;另取300 µL生理盐水冲洗平皿,收集于同一离心管中 ;1000 rpm离心5 min;弃上清,余约0.15 mL液体,吹打 混匀,常规涂片;

中药制剂“HD”对小鼠微核及精子畸形的影响

中药制剂“HD”对小鼠微核及精子畸形的影响
中图分类号 Q 9 42 文献标识码 A 文章编号 10 7 3 (0 8 1 7 0 0 7— 7 1 20 )7— 3— 2
Efe to i e e Tr d t n l e ii e HD n M i r n cel n p r S r c u a fs a l t f c f Ch n s a i o a d c n i M o c o u l l a d S e m t u t r lo m l Ra s
维普资讯
安 徽 农 学 通 报 , n u g . c. u12 0 ,4(7 A h i n SiB l 0 8 1 1 ) A .
7 3
中药 制剂 “ D’ 小 鼠微 核 及 精 子 畸 形 的影 响 H ’ 对
吴 雨 龙 陆 永 娟
( 京晓庄学 院生命科学 系, 南 江苏南京 2 17 ) 1 1 1
片 5张 , 自然干燥 。
144 固定 .. 145 染 色 ..
检。
在 干燥 的玻片 上滴加 1 甲醇 , 滴 自然干燥 。 将 固定 好 的 涂片 用 1 1 姬姆 萨 氏 一磷 :0的
酸盐缓 冲液 ( H: . ) 色 2rn 用蒸 馏水 冲洗 , p 64 染 5 i, a 干燥 备 146 镜 检 .. 嗜 多染 红 细胞 ( C ) 灰 蓝 色 , 熟 正 染 PE 呈 成
胃给药 。连续 给药 两次 , 间隔 2 h 4。
142 骨髓细 胞 液 的制 备 ..
在 第 二 次 给 予受 试 药 物 后
6 , 小 鼠脱颈处 死 , 小 鼠两 侧 股 骨 , 去 肌 肉 , 滤 纸 h将 取 剔 用 或纱布擦 去 血污 和肌 肉 碎片 , 去股 骨 两 端 , 注 射 器 吸 剪 用 取 小牛 血清 约 00 m 反 复 冲洗 骨髓 腔数 次 。 .5 l 143 涂 片 将 冲洗液滴 在载 玻 片上 推片 。每 个 股骨 推 ..

小鼠精子畸形实验

小鼠精子畸形实验
缺血、感染、发热等可产生假阳性结果;
各组小鼠精子畸形检测结果
组别
正常组 损伤对照组
高剂量组 中剂量组 低剂量组
动物数 / 受检精子数/ 畸形精子总数/



5
5000
51
5
5000
187
5
5000
259
5
5000
1535Biblioteka 500069精子畸形率 /%
1.02 3.74* 5.18*
3.06*
1.38
染色:用2%伊红染色1小时,冲洗 镜检:干燥镜检(先用低倍镜,再用高
倍镜,在较暗的视野下观察)
观察与计数
首先,在低倍镜下选择背景清 晰、精子分布均匀、重叠较少的区 域,然后,在高倍镜下观察结构完 整的1000个精子,计数其中畸形的 精子。
精子畸形主要表现在头部。按Wyrobeks 的分类标准,主要类型有:无钩、香蕉形、 无定形、胖头、尾折叠、双头及双尾。
阳性对照组用环磷酰胺20 mg/kg,腹 腔注射,连续5天,每天一次。
操作步骤
处死动物:用颈椎脱法处死小鼠,剪开腹 腔,取出两侧附睾
过滤:放入盛有约1ml生理盐水的平皿中, 用眼科剪剪碎附睾,四层擦镜纸过滤
涂片:取1小滴滤液涂片
操作步骤
固定:干燥,甲醇固定5分钟(可以直 接涂片镜检)
器材与试剂
器材:显微镜;镊子;剪刀;平皿 试剂:生理盐水;无水乙醇;2%伊红水
溶液
试验设计
1、试验动物:采用6~8周龄性成熟雄性小鼠
2、接毒剂量及分组:受试物设高、中、低三 个剂量组,同时设阴性和阳性对照组。
试验设计
受试物高剂量组的总剂量应能使部分 动物死亡,然后以1/5或1/10递减为中、低 剂量组。
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操作步骤
处死动物:用颈椎脱法处死小鼠,剪开腹腔,取
出两侧附睾 过滤:放入盛有约1ml生理盐水的平皿中,用眼 科剪剪碎附睾,四层擦镜纸过滤 涂片:取1小滴滤液涂片 固定:干燥,甲醇固定5分钟(可以直接涂片镜 检) 染色:用2%伊红染色1小时,冲洗 镜检:干燥镜检(先用低倍镜,再用高倍镜,在 较暗的视野下观察)
器材与试剂
器材:显微镜;镊子;剪刀;平皿 试剂:生理盐水;无水乙醇;2%伊红水
溶液
试验设计
1、试验动物:采用6~8周龄性成熟雄性小 鼠 2、接毒剂量及分组:受试物设高、中、低 三个剂量组,同时设阴性和阳性对照组。 受试物高剂量组的总剂量应能使部分动物 死亡,然后以1/5或1/10递减为中、低剂量 组。 阳性对照组用环磷酰胺20 mg/kg,腹腔注 射,连续5天,每天一次。
小鼠精子畸形实验 Sperm Abnormality Test in Mouse
பைடு நூலகம்的
观察精子在生成过程中形态的改变来 检 查受试物对雄性生殖细胞的致突变作 用.
原理
精子的成熟和正常形态受多种基因控制,
当这些基因中任何一个在化合物的作用下 发生突变,就会导致畸形率增高。某些特 殊的染色体重排,如性-常染色体易位是 精子产生畸形的主要机理。但是,缺血、 变态反应、感染和体温升高也可能导致精 子的畸形。
注意事项
辨别小鼠附睾; 如将精子悬液经过滤、离心等步骤除去组织残渣
后再推片效果更好,注意推片的质量; 处于精母细胞阶段的生精细胞对诱变剂较敏感, 因此在染毒后3~5周时精子畸形率最高,必要时 可作动态观察有助于全面评价; 缺血、感染、发热等可产生假阳性结果; 镜检时注意鉴别制片过程中人为造成的镜子损伤。
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