草莓组织培养脱毒快繁与应用技术研究
黄毛草莓组织培养与快繁技术研究
１ 期
王
燕等 ： 黄毛草莓组织培养与快繁技术研究
２３ ５
物 资 源 ， 对这 些 野生 草莓资 源进 行评价 的同时 ， 在 也
培养基上， 接种 ３ ０ｄ后观察其 生长情况 ， 并统计增
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草莓栽培技术(十一)草莓脱毒苗繁育
草莓栽培技术（十一）草莓脱毒苗繁育草莓组培苗在植物学性状、果实性状、丰产性及抗病性等方面均优于自繁苗，可比自繁苗增产30%以上。
目前，草莓茎尖组培脱毒技术已经较为成熟，在草莓生产上应推广采用工序简单、易掌握、生产成本低的组织培养手段进行草莓组培脱毒苗的规模化生产。
现将该技术总结如下。
01、匍匐茎的选择与消毒3－5月从生长健壮、无病虫害、具有品种典型性状的植株上采集处于抽生盛期的草莓匍匐茎，将匍匐茎用纱布包好，用流水冲洗30min以上，然后用70%酒精消毒30s，再用0.1%升汞消毒6～8min，最后用无菌水漂洗干净并用灭菌滤纸吸干水分，包好后放置于超净工作台上待用。
02、茎尖脱毒在超净工作台解剖镜下剥取0.2mm大小的茎尖生长点，切下后立即放置于诱导培养基上（MS培养基＋0.3～0.5mg/L 6-BA＋0.05mg/L GA＋0.01mg/L IBA＋3%蔗糖30g，pH值5.8）。
将接好的苗放置于培养室中进行培养（温度为25±1℃，每天光照14h，光照强度2000lx），经过2～3个月即可长成。
03、病毒检测待组培瓶苗长至2～4cm高时，切取叶片提取RNA或DNA，利用PCR法检测病毒。
去除带病毒的幼苗，将无病毒幼苗继续利用诱导培养基进行培养或扩繁，在定植前15～20d用3/4MS培养基进行生根培养，当幼苗长出3～5条根时进行驯化移栽。
04、定植苗床的准备使用无土育苗基质，要求基质理化性质稳定，具有良好的保水保肥能力，透气性好，pH值5.5～6.5。
多次使用过的基质必须灭菌。
一般将2～3种基质混合后使用，如将草炭、蛭石按体积比2∶1或将草炭、珍珠岩按体积比3∶1混合后使用，并用普力克1000倍液浇透，以杀死基质中残存的病原菌。
在苗床上铺设加温线，然后将基质铺为10cm厚。
用竹竿或钢管做好小拱棚，除用于保温保湿外，还可搭设遮阳网用于遮阳。
在小拱棚外的塑料大棚或温室两边加上防虫网，以防止蚜虫和叶蝉等病毒介体传毒。
植物组织培养中的快繁与脱毒技术及其应用
植物组织培养是一种重要的生物技术，它能够实现植物的快速繁殖、脱毒和基因转化。
在植物学研究和植物育种领域，植物组织培养技术的应用非常广泛。
本文将深入探讨植物组织培养中的快繁与脱毒技术及其应用，以帮助读者更深入地理解这一重要领域。
1. 快繁技术在植物组织培养中，快繁技术是指利用植物体的一小部分组织或细胞，通过体外条件培养，实现植物的快速繁殖。
这种技术可以大大提高繁殖速度，缩短繁殖周期，是进行新种质创制、遗传改良和疫病防治的重要手段。
快繁技术的主要方法包括离体培养、愈伤组织培养和微繁殖等。
1.1 离体培养离体培养是将植物体表层（如幼叶、幼茎）或内部组织（如胚乳、子叶）分离出来，移入含有适当营养盐和植物生长调节物的培养基中培养。
通过控制培养条件和添加合适的植物生长激素，可以诱导组织分化和再生形成新植株。
1.2 愈伤组织培养愈伤组织是植物在受到外界刺激或损伤后，经过细胞分裂和组织再生形成的一种未分化的组织。
愈伤组织培养是利用这种特殊组织进行快速繁殖的一种方法，通过控制培养条件和添加植物生长调节物，可以诱导愈伤组织再生形成新植株。
1.3 微繁殖微繁殖是利用植物的微小芽或胚珠进行快速繁殖的方法。
通过培养条件的控制和植物激素的添加，可以诱导微小芽或胚珠快速生长并形成新植株。
2. 脱毒技术在植物组织培养中，由于植物体内可能携带病毒、细菌等病原体，因此会影响到组织培养的效果。
脱毒技术是为了解决这一问题而出现的一种重要技术。
脱毒技术能够有效地清除植物体内的病原体，提高组织培养的成功率和繁殖效率。
2.1 生物脱毒生物脱毒是利用生物制剂对植物体内的病原体进行清除的方法。
通过培养环境中添加含有特定菌株或真菌的生物剂，可以促进植物体内病原体的清除和组织的健康再生。
2.2 生理脱毒生理脱毒是利用植物自身的生理代谢特性进行脱毒的方法。
通过调节培养条件和添加特定的营养物质，可以激活植物的生理代谢活性，加速病原体的清除和组织的再生。
红颜草莓组培脱毒壮苗快繁技术与应用
条求解 “ 卖难买贵 ”的新路子 。
台苹果 的“ 证 明信 ” ， 不仅可 以佐证烟 台苹 果的“ 三证 ” ，
而且能够见证 烟台苹果的来龙去脉，获得来源可查证、
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殖速 度慢 ，且易 发生基 因变异 ，无法 保持 亲本 的优 良 壮 苗快繁技术的研究 。红颜草莓 （ Ｆ ｒ ａ ｇ ａ ｒ ｉ ａ ×ａ ｎ ａ ｎ ａ ｓ ｓ ａ
性 状，利用 组培 脱毒进 行无 性繁殖 ，可 以大量 生产优 Ｄ ｕ ｃ ｈ‘ Ｂ ｅ ｎ ｉ ｈ ｏ ｐ ｐ ｅ ’） ，生长势强，果个大 ，长 圆锥形 ，
质 的无 毒苗 ，避 免 变异 植 株 的产 生 ｕ 。 因此 组 织培 养 成 为 当今 优 良植物 品种 大 量 繁 殖 的 最 有 效手 段 。
成活率可达 ９ ５ ％以 上 。
关键词 ：红颜草莓 ； 脱毒壮苗 ； 快繁技 术
草莓 （ Ｆ ｒ ａ ｇ ａ ｒ ｉ ａ Ｘａ ｎ ａ ｎ ａ ｓ ｓ ａ Ｄ ｕ ｃ ｈ ． ）是 蔷 薇 科 草 选 择合适 的组 培方式 使其 更接近 自然 条件 ， 有 利 于移 莓属 多年 生草本 植物 ，属于 当今 世 界七大 水果之 一 。
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草莓组织培养研究进展
草莓组织培养[摘要] 从草莓组织培养类型（草莓茎尖组织培养、草莓花药培养、草莓叶片、叶柄组织培养）开始，介绍了近几十年国内外草莓组培的研究现状和进展。
[关键词]草莓;组织培养;草莓是蔷薇科草莓属多年生草本植物，是世界上七大水果之一，素有“水果皇后”的美称。
草莓果实色泽艳丽，芳香多汁，酸甜适度，鲜美可口，营养丰富，每百克果实内含有蛋白质1g，脂肪0.6g，糖4～12g，酸0.8～2g，无机盐0.6g，粗纤维1.5g，Vc45～120mg，比苹果和葡萄高10多倍，并含有丰富的磷、钙、铁、锌等矿物质，其中锌的含量是香蕉的4倍以上，比柑橘高6倍以上，比苹果高40倍以上。
另外食用草莓对肠胃病和贫血病有一定的疗效，对促进智力发育有重要作用。
深受国内外消费者的喜爱。
草莓作为一种栽培周期短、结果早、见效快的经济作物，近15年来在我国发展迅猛，中国园艺学会草莓分会统计2003年底，我国草莓总面积和总产量均跃居世界第一位。
在浆果中，草莓的总产量和总面积仅次于葡萄，成为我国发展农村经济，促进农民增收的重要经济作物。
随着草莓在国内栽培面积的扩大和种植年限的延长，草莓的病毒病严重影响草莓的生产。
作为高级浆果的草莓，在我国目前的生产栽培上多沿用无性繁殖种苗：主要方法是匍匐茎繁殖和分株繁殖，但这两种方法效率低、种苗易退化、易造成病毒蔓延。
王国平（1988）等调查，我国栽培草莓带病毒植株率过80%以上，戴子林（1995）等调查，我国长江流域感染大面积植株感染率在50%以上；感染了病毒病的草莓果子一年比一年小、畸形、品质差、生长缓慢，一般减产30%-80%，并逐年加重；严重影响草莓的长势、品质和产量，对病毒病目前还没有药剂可以防治。
通过草莓组织培养扩繁草莓脱毒苗，可以解决上述问题。
近年来在草莓种苗生产中，有关草莓组培快繁技术的研究备受人们的重视，本文就草莓组织培养研究与应用作一综述。
一、常见草莓组织培养类型目前，国内外在草莓品种快速繁殖上已有不少报道：常用的外植体主要有：茎尖（Adam，1972；庆子孝，1972；谭兰英等，1981）、腋芽（Boxus，1974、1977；杨乃博，1981）、叶片、叶柄、茎段，花药（Quak,1977；大泽，1972）。
‘紫金四季’草莓组培快繁技术研究
2023年第19期现代园艺‘紫金四季’草莓组培快繁技术研究黄雅茹1,2，郭雨亭2,3，牛歆雨3，赵密珍2，王静2*（1南京农业大学园艺学院，江苏南京210095，2江苏省农业科学院果树研究所/江苏省高效园艺作物遗传改良重点试验室，江苏南京2100144，3西藏农牧学院植物科学学院，西藏林芝860000）摘要：以‘紫金四季’草莓为试材，其匍匐茎茎尖为外植体，进行诱导培养、伸长培养、增殖培养、培养条件的筛选研究。
结果表明，组培快繁技术中，先采用暗培养14d 后转入光培养，萌芽率更高，诱导培养基以6-BA 3.4mg/L+IBA 0.3mg/L 为最佳，萌芽率为52.77%；伸长培养基以6-BA 1.7mg/L+IBA 0.15mg/L 为最佳，生长速度中等，生长状态最佳；增殖培养基以6-BA 0.75mg/L 为最佳，综合来说，诱导生芽后经伸长培养再增殖培养效果最优。
关键词：紫金四季草莓；茎尖组培；快繁技术试验。
1.2外植体处理将采集的匍匐茎在碱性洗涤剂中浸泡20~40min 、自来水冲洗5~6次后，用流水继续冲洗30~60min ，再用蒸馏水冲洗2~3次，冲洗干净后转至超净工作台。
在超净工作台上，将匍匐茎用75%乙醇浸泡15s 、无菌水冲洗4~6次，再用0.8%次氯酸钠溶液消毒浸泡15min ，无菌水冲洗4~6次，无菌滤纸吸干；置于无菌培养皿中，在显微镜下用无菌刀片取匍匐茎茎尖生长点0.2~0.8mm 。
1.3试验方法1.3.1培养条件。
培养室内温度为24±2℃。
暗培养，无光照；光培养，培养瓶上部的光照强度为100~200μmol/m 2·s ，每日光照12~16h 。
1.3.2诱导培养。
‘紫金四季’外植体以诱导培养基（MS 固体培养基、6-BA 、IBA 、蔗糖3%、琼脂6~7g/L ）为基础，以6-BA （3.4mg/L 、1.7mg/L 、0.5mg/L ）、IBA （0mg/L 、0.3mg/L ）不同浓度相互组合，对照组为6-BA 0.5mg/L ，光培养下生长；在确定最优诱导培养基后，再确定培养条件，处理1为经14d 暗培养后再转入光培养；处理2为直接光培养；28d 继代1次，第40d 统计生芽数。
草莓组织培养与快速繁殖技术
草莓组织培养与快速繁殖技术作者：杨立群王平梁安兰来源：《现代农业科技》2015年第12期摘要把草莓的茎尖经过灭菌和剥取茎尖后接种到含有生长素（IBA）和细胞分裂素（6-BA）的MS培养基上，在合适的温度（23～28 ℃）与光照条件（2 000 lx）下每天培养13～15 h，经过反复接种可以快速扩繁，再经过生根和炼苗就可移栽成原种苗或无病毒苗。
关键词草莓；匍匐茎尖；组织培养；快速繁殖中图分类号 S668.4 文献标识码 B 文章编号 1007-5739（2015）12-0108-01草莓是人类大量栽培的主要浆果植物之一，分布很广，其总产量在浆果类果树中仅次于葡萄，居世界第2位。
草莓果实柔软多汁，含丰富的糖、酸、维生素、矿物质，其中VC的含量之多超过桃、李、苹果、梨等。
草莓适于鲜食，也是加工果酱、果酒、果露的重要原料，草莓适应性强，南北方都可种植，栽培管理容易，生长周期短，结果快，成熟早，在调节果品市场供应上有重要作用。
随着人们生活水平的提高，对草莓质和量的需求也在不断增长。
为此，草莓栽培面积迅速扩大，同时在栽培技术上也向着一年一茬苗的方式发展，以确保生产出高品质的草莓果实，也因此亟需提供大量的优质草莓种苗。
通过组织培养可以在短期内快速大量繁殖草莓种苗，研究人员在生产中已经做了大量的有关工作，证明组培快繁是切实可行的。
1 组培材料1.1 供试草莓材料选择生长健壮的草莓匍匐茎尖、单株心茎（各品种都可以）。
1.2 培养基茎尖诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L；继代增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L；生根培养基为1/2 MS+IBA 0.1 mg/L。
上述培养基均添加3%蔗糖和0.7%琼脂，pH值5.8～6.3，培养温度为23～28 ℃，光照时间为13～15 h/d，光照强度为2 000 lx左右。
在每次接种时，打开超静态的同时，也要打开紫外线灯灭菌20～30 min，可以减少操作造成的污染。
草莓生物技术研究领域及进展
仅２ ％。所以花 药培养 脱毒 苗有较 大的生 产价值 。但 从培 ０
养时 间和增殖率 来看 ，花药培 养均不 及茎 尖培养 ，若 以增 殖快繁为 目的仍 以茎尖培 养较 好。
何欢 乐等恻 现草莓 茎尖的成 活率与 剥取 的茎尖大 小有 关 ， 发 在 相同的 培养基上 ，剥 取茎尖越 大 ，成 活率越 高 ，通 常茎
对丰 富和 繁荣水 果 市场 、发展 食 品工业 均 有深 远 的意 义 。
近 年来 ，现代生物 技术广 泛应用 在草莓 育种 研究 中。如 已 开展 了茎尖脱毒培 养 、花 药脱毒 培养 、离体 胚培 养 、原 生 质体培 养与融合等 方面 的研究 ，在生物 育种 方面 的研究 及 分 子水平方面研究也取得 了突破性 进展。
中国园艺文摘 ２ 年第１期 ０１ １ ０
草莓生物技术研究领域及进展
韦持 章 王文林 邱文武
（ 广西南亚热 带农业科 学研 究所 ，广西 龙 州 ５２１） ５４５
摘 要 ：综述草莓 茎尖脱毒 培 养、花药脱毒培 养、快速繁殖等 方 面的脱毒快繁培 养研 究，生物 育种 方 面的单倍体
行这方面的研究 。侯喜林 究不 同品种和激素对草莓花药培 研
养的影响，发现不同品种草莓花药培养可经愈伤组织直接形成 不定芽 ，所获得的再 生植株有９ ％脱 除草莓病毒。杨振英等目 ４ 以 ‘ 美香莎 ’ ‘ 、 鬼怒甘 ’ ‘ 、 五丰二号 ’ ‘ 、 幸香 ’ ‘ 、 西班牙 １号 ’ ‘ １ 、 吐德拉 ’６ － ４ 草莓品种采用花药大规模培养无菌病毒
尖 取材在０ ５ ｍｍ以上成 活率可达 ９ ％。覃兰 英［ ． ８ ４ １ 认为 用于 快繁可 取较大茎尖 ，若用于脱毒苗则应 小于０ ５ Ｉｎ 。苟桂 ． ｎ ｌ
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1草莓组织培养脱毒快繁与应用技术研究项目总结报告主持完成单位：商丘市农林科学研究所二0一0年十二月2目录一、项目来源……………………………………………………………………1 二、项目实施的意义和依据 (1)（一）品种来源 (1)1、丰香—草莓 (1)2、特征特性 (1)3、脱毒丰香草莓 (2)（二）项目实施的目的..................................................................3 1、总体目标 (3)2、研究组织培养脱毒快繁，加速示范推广，促进农村经济发展 (3)（三）项目实施的意义 (3)1、提高果品产量和质量，增强市场竞争能力 (4)2、生产无公害果品，促农民致富................................................4 3、发挥增产增收效益潜力，促进产业结构调整 (4)（四）项目实施依据 (4)1、研究与实施的理论依据.........................................................4 2、“丰香草莓”组织培养技术路线................................................5 3、草莓组织培养的优点............................................................5 三、丰香-草莓的组织培养技术研究 (6)（一）草莓-“丰香”脱毒技术研究……………………………………………61、研究目的…………………………………………………………………62、供试材料…………………………………………………………………63、组织培养环境条件……………………………………………………6 4、材料的选择与处理……………………………………………………6 5、生长点的剥取……………………………………………………………7 6、诱导方法…………………………………………………………………7 7、病毒的检测……………………………………………………………8 8、无病毒原种的保存和繁殖………………………………………………8 （二）“草莓-丰香”脱毒与快繁培养基筛选研究………………………………8 1、研究目的 (8)2、试验材料...........................................................................8 3、试验方法...........................................................................9 4、验结果分析........................................................................9 5、结论与讨论 (13)（三）组培草莓驯苗基质的研究 (14)1、材料与方法........................................................................14 2、试验结果分析.....................................................................15 3、综合评述...........................................................................16 4、结论 (17)（四）抗菌素减少组培草莓苗污染的研究 (17)31、污染来源与防治措施…………………………………………………172、草莓组织培养过程中造成污染的原因……………………………173、试验方法…………………………………………………………………204、结果分析…………………………………………………………………21 （五）草莓高产栽培试验研究……………………………………………………21 1、温棚种植试验目的………………………………………………………21 2、参试品种…………………………………………………………………21 3、试验时间与地点…………………………………………………………21 4、试验概况及田间管理……………………………………………………215、试验结果与分析…………………………………………………………23 6、综合评定…………………………………………………………………25 7、结论 (25)四、脱毒草莓高产技术规程与规范……………………………………………26 （一）组织培养基本设施技术规程 (26)1、实验室建立 (26)2、仪器与器材配备 (26)3、化学药品、试剂购置…………………………………………………284、其他物品的配制………………………………………………………28 （二）草莓组织培养技术操作规程与规范 (28)1、培养条件…………………………………………………………………282、培养基配制……………………………………………………………293、无菌材料的获得………………………………………………………31 4、接种………………………………………………………………………31 5、室内组织培养…………………………………………………………32 6、瓶苗驯化与移栽…………………………………………………………33 （三）脱毒草莓栽培技术规程与规范 (34)1、组织培养瓶苗的栽培技术规程…………………………………………342、脱毒丰香草莓苗圃繁殖栽培技术规程………………………………353、脱毒“丰香-草莓”的特征特性与栽培技术规程……………………36 4、脱毒草莓大棚无公害高产栽培技术规程 (39)5、脱毒草莓“丰香”大田高产栽培技术规程 (42)五、脱毒草莓无公害高产技术的推广应用 (44)（一）发展脱毒丰香草莓的意义 (44)1、发挥品种优势，保持种质资源.............................................44 2、生产绿色果品，提高农民就业率..........................................44 3、促进农民增收农业增效，利国利民.......................................44 （二）推广方法与措施 (44)1、建立组织，联合攻关............................................................44 2、建立基地，示范带动............................................................45 3、宣传培训，普及推广............................................................45 （三）组培红香椿一号示范推广概况 (46)1、推广应用情况..................................................................46 2、示范种植情况.....................................................................46 六、科学技术创新 (48)4（一）、脱毒、快繁技术体系研究的创新 (48)1、组织培养条件 (48)2、选材与处理 (48)3、接种与诱导培养………………………………………………………494、检测与继代增值培养…………………………………………………495、生根培养........................................................................49 6、炼苗与移栽 (49)（二）、运用抗菌素降低污染研究的创新………………………………………50 （三）、扦插基质的研究创新……………………………………………………51 （四）、脱毒草莓高产机制研究创新……………………………………………52 （五）、栽培技术体系研究创新………………………………………………53 （六）、品种示范、推广体系研究创新………………………………………54 七、经济效益和社会效益分析 (56)（一）经济效益分析 (56)1、脱毒草莓温棚..................................................................56 2、脱毒草莓大田..................................................................57 3、脱毒草莓每亩新增效益......................................................57 （二）社会效益 (58)1、生态效益...........................................................................58 2、社会效益...........................................................................58 八、脱毒草莓的推广前景 (60)5草莓组织培养脱毒快繁与应用技术研究一、项目来源“草莓脱毒快繁与应用技术研究”是2004—2008年商丘市农林科学研究所自选项目，2007年申报商丘市科技攻关计划项目，项目编号为NO:2008 。
由商丘市农林科学研究所、商丘市农业局技术推广站等单位协作联合实施，建立了科技攻关协作组（项目组），下设两个课题组，一是技术开发研究执行组，负责科研攻关，制定了丰香草莓脱毒快繁技术与操作规程；二是技术推广应用执行组，负责无公害草莓的推广应用。
经过几年的实施，完成了项目计划任务。
最近两年着力进行了脱毒草莓无公害高产栽培技术的推广。
本项目的研究以商丘市梁园区双八镇代庄草莓基地为基础，以商丘市农科所组培室为依托，并联合有关部门和单位，进行联合攻关，实施产业化生产，初步形成了当地的特色产业。
二、项目实施的意义和依据（一）品种来源1. 丰香-草莓丰香-草莓原产于日本，由绯美×纯香杂交选育而成。
1985年引进我国。
目前在我国种植面积很广，已成为我国设施主栽品种之一。
“丰香-草莓”它味美色艳，品质优、营养用价值高，食用口感好。
特别是通过现代科学技术进行植物脱毒培养后，它生长整齐一致，汁多，香味浓郁纯正，味甜可口，为餐桌上的美味佳肴。